含有聚(乙二醇)和聚(L-氨基酸衍生物)的共聚物、其微粒及其在医药组合物中的使用

含有聚(乙二醇)和聚(l-氨基酸衍生物)的共聚物、其微粒及其在医药组合物中的使用
技术领域
1.本发明涉及一种含有聚(乙二醇)和聚(l-氨基酸衍生物)的共聚物，尤其涉及一种作为上述l-氨基酸衍生物含有聚(鸟氨酸)链段或者含有聚(天冬氨酸酯)、聚(酰基化精氨酸)或聚(鸟氨酸)-co-聚(天冬氨酸)链段的共聚物及它们的微粒及其在医药组合物中的使用。


背景技术：

2.在肝硬化等肝损伤患者中，有时因尿素回路异常而会产生高氨血症等病症。若对这样的患者给药l-鸟氨酸，则作为尿素生成的底物发挥功能，而且不仅如此，报道有：包括氨基甲酰磷酸合成酶(cps)、鸟氨酸氨甲酰基转移酶(otc)的尿素循环的酶被激活，其结果，尿素循环得到改善，氨水平降低(非专利文献1)。
3.如此地，报道有l-鸟氨酸以及l-鸟氨酸和l-天冬氨酸的混合物(lola)具有有利于降低氨浓度的效果。
4.另一方面，在非专利文献2中，通过双盲随机化安慰剂对照研究确认上述氨基酸混合物的注入效果极为弱。可以认为这是由于水溶性的低分子氨基酸向生物体内的摄取量低且代谢极快之故。
5.为了解决这种问题，发明人等迄今为止设计了聚(乙二醇)和聚(精氨酸)的共聚物(聚阳离子性聚合物)，并提出了将其与硫酸软骨素等聚阴离子组合而得到的聚离子复合物(pic)(专利文献1)。另外，关于由加入了鸟氨酸的pic组成的组织化(组装)药(简写为nano
orn
)，示出了其血液中滞留性和肝脏聚集性大幅度提高，进而，若将nano
orn
给药于由对乙酰氨基苯酚(apap)引起的急性肝损伤小鼠，则由于apap肝损伤而显著上升的血中氨不仅降低到正常水平，而且作为肝功能标志物的ast、alt水平也有意义地降低，且肝功能得到改善(非专利文献3)。另外，确认了通过nano
orn
在nash模型小鼠中也能够带来功能改善效果。
6.这样，通过将l-鸟氨酸加入到组装药中并将其皮下给药，能够提高l-鸟氨酸的生物利用度并得到肝功能改善效果。
7.另一方面，以pic为驱动力的nano
orn
有时对离子强度和ph的变化不稳定，且使聚阳离子游离并产生毒性等，因而不利于口服给药。
8.在先技术文献
9.专利文献
10.专利文献1：国际公开2016-167333号小册子
11.非专利文献
12.非专利文献1：nutr.res.28(11)738(2008)
13.非专利文献2：gastroenterology 136(7)2159(2009)
14.非专利文献3：poly(ornithine)-based self-assembling drug for recovery of hyperammonemia and damage in acute liver injury,long b.vong,yota ibayashi,
yaroslav lee,dai-nghiep ngo,yuji nishikawa,yukio nagasaki,journal of controlled release,310,74-81(2019)


技术实现要素：

15.发明所要解决的问题
16.为了解决上述问题，本发明的目的在于提供一种毒性低、即使口服给药也具有效果且生物利用度高的鸟氨酸的组织化体(assembly：组装体)。另外，目的在于提供一种对肝损伤的预防或治疗有效的鸟氨酸组装体。
17.解决问题所采用的措施
18.发明人等发现，通过在聚(乙二醇)-b-聚(鸟氨酸)的鸟氨酸侧链氨基中新地引入酰基等，可以提供能够形成不需要形成pic的新的组装体的共聚物。另外还发现，将如此提供的共聚物制成与含有其它聚(乙二醇)链段(segment)和聚(侧链保护l-氨基酸)链段的共聚物的组合物，则有时能够增强前者的共聚物的性质、功能或作用。
19.因此，本发明提供以下的各实施方式。
20.(1)一种共聚物，其由式(ⅰ)表示，
[0021][0022]
式中，
[0023]
a表示(
ⅰ
)或者表示(
ⅱ
)式，其中，
[0024]
(
ⅰ
)为氢原子、未取代或取代c
1-c
12
烷基、未取代或取代c
1-c
12
烷氧基、未取代或取代芳基，被取代的情况下的取代基为c
1-c4烷基、c
1-c4烷氧基、芳基、甲酰基、式r1r2ch-(其中，r1和r2独立地为c
1-c4烷氧基或者r1和r2合为一体表示-och2ch2o-、-o(ch2)3o-或-o(ch2)4o-)的基团，
[0025]
(
ⅱ
)式
[0026]
[0027]
其中，
[0028]
l’独立地表示连接基团，
[0029]
y和y’独立地表示氢原子、c
1-21
烷基羰基、取代c
1-4
烷基羰基、未取代或取代c
3-7
环烷基羰基、未取代或取代芳基羰基、或未取代或取代5或6元杂芳基羰基，其中，取代c
1-4
烷基羰基的取代基选自由卤素原子、羟基、羧基、未取代或取代c
3-7
环烷基、未取代或取代芳基及未取代或取代5或6元杂芳基、未取代或取代金刚烷基、未取代或取代胆固醇残基组成的组中，这些取代基被取代的情况下的取代基可以是c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、羟基、羧基、氰基、硝基、卤素原子、或单或双c
1-4
烷基氨基，
[0030]r10
和r
10’为氢原子或r
11-(c＝o)-，r
11
各自独立地为取代或未取代的c
1-c
21
烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的c
1-c
21
烷氧基，这些取代基被取代的情况下的取代基为c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、芳基，
[0031]
m和m’独立地为2～300的整数，
[0032]
n为2～1,000的整数，
[0033]
式中的m或m’个r
10
和r
10’的20％以上为r
11-(c＝o)-。
[0034]
(2)根据实施方式(1)所述的共聚物，其中，式(i)的r
10
为r
11-(c＝o)-，m个r
10
的100％为r
11-(c＝o)-。
[0035]
(3)根据实施方式(1)所述的共聚物，其中，由(i)定义a。
[0036]
(4)根据实施方式(1)所述的共聚物，其中，由(i)定义a，r
10
为r
11-(c＝o)-，m个r
10
的100％为r
11-(c＝o)-。
[0037]
(5)根据实施方式(1)所述的共聚物，其中，由(
ⅱ
)定义a。
[0038]
(6)根据实施方式1所述的共聚物，其中，由(
ⅱ
)定义a，r
10
和r
10’为r
11-(c＝o)-，m和m’个r
10
和r
10’的100％为r
11-(c＝o)-。
[0039]
(7)一种鸟氨酸微粒，其由实施方式(1)至(6)中任一项所述的共聚物组成，且平均粒径为1纳米至100微米。
[0040]
(8)一种医药组合物，其包含作为有效成分的实施方式(1)至(6)中任一项所包含的共聚物以及添加剂。
[0041]
(9)根据实施方式(8)所述的医药组合物，其中，上述医药组合物是口服给药剂。
[0042]
(10)一种用于预防或治疗肝功能障碍的组合物，其作为有效成分包含实施方式1至6中任一项所述的共聚物或实施方式(7)所述的鸟氨酸微粒。
[0043]
(11)一种医药组合物，其包含作为有效成分的实施方式(1)至(6)中任一项所包含的共聚物或实施方式7所述的鸟氨酸微粒和由式(ⅳ)表示的共聚物，
[0044][0045]
式中，
[0046]aasp
表示氢原子、未取代或取代c
1-c
12
烷基、未取代或取代c
1-c
12
烷氧基、未取代或取代芳基，被取代的情况下的取代基表示c
1-c4烷基、c
1-c4烷氧基、芳基、甲酰基、式r1r2ch-(其中，r1和r2独立地为c
1-c4烷氧基或者r1和r2合为一体表示-och2ch2o-、-o(ch2)3o-或-o(ch2)4o-)的基团，
[0047]
l
asp
表示连接基团，
[0048]rasp
是氢原子、取代或未取代的c
1-c
21
烷基、取代或未取代的芳基，这些取代基被取代的情况下的取代基是c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、芳基，
[0049]yasp
表示氢原子、c
1-21
烷基羰基、取代c
1-4
烷基羰基、未取代或取代c
3-7
环烷基羰基、未取代或取代芳基羰基、或者未取代或取代5或6元杂芳基羰基，其中，取代c
1-4
烷基羰基的取代基选自由卤素原子、羟基、羧基、未取代或取代c
3-7
环烷基、未取代或取代芳基及未取代或取代5或6元杂芳基、未取代或取代金刚烷基、未取代或取代胆固醇残基组成的组中，这些取代基被取代的情况下的取代基可以是c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、羟基、羧基、氰基、硝基、卤素原子、或者单或双c
1-4
烷基氨基，
[0050]
ma是2～300的整数，
[0051]
na是2～1,000的整数。
[0052]
(12)一种医药组合物，其包含作为有效成分的实施方式(1)至(6)中任一项所包含的共聚物或实施方式7所述的鸟氨酸微粒和由式(
ⅴ
)表示的共聚物，
[0053][0054]
式中，
[0055]aco
表示氢原子、未取代或取代c
1-c
12
烷基、未取代或取代c
1-c
12
烷氧基、未取代或取代芳基，被取代的情况下的取代基表示c
1-c4烷基、c
1-c4烷氧基、芳基、甲酰基、式r1r2ch-(其中，r1和r2独立地为c
1-c4烷氧基或者r1和r2合为一体表示-och2ch2o-、-o(ch2)3o-或-o(ch2)4o-)的基团，
[0056]nco
是2～1,000的整数，
[0057]
l
co
表示连接基团，
[0058]rasp
是氢原子、取代或未取代的c
1-c
21
烷基、取代或未取代的芳基，这些取代基被取代的情况下的取代基是c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、芳基，
[0059]
ma是2～300的整数，
[0060]rorn
是氢原子或r
11-(c＝o)-，r
11
各自独立地为取代或未取代的c
1-c
21
烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的c
1-c
21
烷氧基，这些取代基被取代的情况下的取代基是c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、芳基，
[0061]mo
是2～300的整数，
[0062]yco
表示氢原子、c
1-21
烷基羰基、取代c
1-4
烷基羰基、未取代或取代c
3-7
环烷基羰基、未取代或取代芳基羰基、或者未取代或取代5或6元杂芳基羰基，其中，取代c
1-4
烷基羰基的取代基选自由卤素原子、羟基、羧基、未取代或取代c
3-7
环烷基、未取代或取代芳基及未取代或取代5或6元杂芳基、未取代或取代金刚烷基、未取代或取代胆固醇残基组成的组中，这些取代基被取代的情况下的取代基可以是c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、羟基、羧基、氰基、硝基、卤素原子、或者单或双c
1-4
烷基氨基，
[0063]
其中，ma个重复单元和mo个重复单元中的各氨基酸各自随机存在而形成另一个嵌段(block)。
[0064]
(13)一种医药组合物，其包含作为有效成分的实施方式(1)至(6)中任一项所包含的共聚物或实施方式7所述的鸟氨酸微粒和由式(ⅵ)表示的共聚物，
[0065][0066]
式中，
[0067]aarg
是氢原子、取代或未取代的c
1-c
21
烷基羰基、取代或未取代的芳基羰基、取代或未取代的c
1-c
21
烷氧基羰基，这些取代基被取代的情况下的取代基是c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、芳基，
[0068]
ng是2～1,000的整数，
[0069]
l
arg
表示连接基团，
[0070]rarg
和r
arg’独立地为氢原子或r
11-(c＝o)-，r
11
各自独立地为取代或未取代的c
1-c
21
烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的c
1-c
21
烷氧基，这些取代基被取代的情况下的取代基是c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、芳基，
[0071]
mg是2～300的整数，
[0072]yarg
表示氢原子、c
1-21
烷基羰基、取代c
1-4
烷基羰基、未取代或取代c
3-7
环烷基羰基、未取代或取代芳基羰基、或者未取代或取代5或6元杂芳基羰基，其中，取代c
1-4
烷基羰基的取代基选自由卤素原子、羟基、羧基、未取代或取代c
3-7
环烷基、未取代或取代芳基及未取代或取代5或6元杂芳基、未取代或取代金刚烷基、未取代或取代胆固醇残基组成的组中，这些取代基被取代的情况下的取代基可以是c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、羟基、羧基、氰基、硝基、卤素原子、或者单或双c
1-4
烷基氨基。
[0073]
(14)一种共聚物，其由式(
ⅳ‑
a)表示，
[0074][0075]aasp
表示氢原子、未取代或取代c
1-c
12
烷基、未取代或取代c
1-c
12
烷氧基、未取代或取代芳基，被取代的情况下的取代基表示c
1-c4烷基、c
1-c4烷氧基、芳基、甲酰基、式r1r2ch-(其中，r1和r2独立地为c
1-c4烷氧基或者r1和r2合为一体表示-och2ch2o-、-o(ch2)3o-或-o(ch2)4o-)的基团，
[0076]
l
asp
表示连接基团，
[0077]yasp
表示c
1-21
烷基羰基、取代c
1-4
烷基羰基、未取代或取代c
3-7
环烷基羰基、未取代或取代芳基羰基、或者未取代或取代5或6元杂芳基羰基，其中，取代c
1-4
烷基羰基的取代基选自由卤素原子、羟基、羧基、未取代或取代c
3-7
环烷基、未取代或取代芳基及未取代或取代5或6元杂芳基、未取代或取代金刚烷基、未取代或取代胆固醇残基组成的组中，这些取代基被取代的情况下的取代基可以是c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、羟基、羧基、氰基、硝基、卤素原子、或者单或双c
1-4
烷基氨基，
[0078]rasp
是取代或未取代的c
1-c
21
烷基、取代或未取代的芳基，这些取代基被取代的情况下的取代基是c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、芳基，但苄基除外，
[0079]
ma是2～300的整数，
[0080]
na是2～1,000的整数。
[0081]
(15)一种共聚物，其由式(
ⅴ
)表示，
[0082][0083]
式中，
[0084]aco
表示氢原子、未取代或取代c
1-c
12
烷基、未取代或取代c
1-c
12
烷氧基、未取代或取代芳基，被取代的情况下的取代基表示c
1-c4烷基、c
1-c4烷氧基、芳基、甲酰基、式r1r2ch-(其中，r1和r2独立地为c
1-c4烷氧基或者r1和r2合为一体表示-och2ch2o-、-o(ch2)3o-或-o(ch2)4o-)的基团，
[0085]nco
是2～1,000的整数，
[0086]
l
co
表示连接基团，
[0087]rasp
是氢原子、取代或未取代的c
1-c
21
烷基、取代或未取代的芳基，这些取代基被取
代的情况下的取代基是c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、芳基，
[0088]
ma是2～300的整数，
[0089]rorn
是氢原子或r
11-(c＝o)-，r
11
各自独立地为取代或未取代的c
1-c
21
烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的c
1-c
21
烷氧基，这些取代基被取代的情况下的取代基是c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、芳基，
[0090]mo
是2～300的整数，
[0091]yco
表示氢原子、c
1-21
烷基羰基、取代c
1-4
烷基羰基、未取代或取代c
3-7
环烷基羰基、未取代或取代芳基羰基、或者未取代或取代5或6元杂芳基羰基，其中，取代c
1-4
烷基羰基的取代基选自由卤素原子、羟基、羧基、未取代或取代c
3-7
环烷基、未取代或取代芳基及未取代或取代5或6元杂芳基、未取代或取代金刚烷基、未取代或取代胆固醇残基组成的组中，这些取代基被取代的情况下的取代基可以是c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、羟基、羧基、氰基、硝基、卤素原子、或者单或双c
1-4
烷基氨基，
[0092]
其中，ma个重复单元和mo个重复单元中的各氨基酸各自随机存在而形成另一个嵌段。
[0093]
(16)一种共聚物，其由式(
ⅵ‑
a)表示，
[0094][0095]
式中，
[0096]aarg
是氢原子、取代或未取代的c
1-c
21
烷基羰基、取代或未取代的芳基羰基、取代或未取代的c
1-c
21
烷氧基羰基，这些取代基被取代的情况下的取代基是c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、芳基，
[0097]
ng是2～1,000的整数，
[0098]
l
arg
表示连接基团，
[0099]rarg
和r
arg’独立地为r
11-(c＝o)-，r
11
各自独立地为取代或未取代的c
1-c
21
烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的c
1-c
21
烷氧基，这些取代基被取代的情况下的取代基是c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、芳基，但苄基氧基羰基和叔丁基氧基羰基除外，
[0100]
mg是2～300的整数，
[0101]yarg
表示氢原子、c
1-21
烷基羰基、取代c
1-4
烷基羰基、未取代或取代c
3-7
环烷基羰基、未取代或取代芳基羰基、或者未取代或取代5或6元杂芳基羰基，其中，取代c
1-4
烷基羰基的取代基选自由卤素原子、羟基、羧基、未取代或取代c
3-7
环烷基、未取代或取代芳基及未取代或取代5或6元杂芳基、未取代或取代金刚烷基、未取代或取代胆固醇残基组成的组中，这些取代基被取代的情况下的取代基可以是c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、羟基、羧基、氰基、硝基、卤素
原子、或者单或双c
1-4
烷基氨基。
[0102]
发明的效果
[0103]
包含本发明的共聚物作为有效成分的组装药可以口服给药并作为新的肝损伤治疗药使用。尤其是，通过口服给药而聚集在肠内粘膜上，且由分解酶水解，并使鸟氨酸逐渐游离，因此鸟氨酸在体内的生物利用度高，而且效果持续。另外，另一方面，本发明的组装药的毒性低。
附图说明
[0104]
图1是在制备例4中合成的化合物的1h-nmr图谱。
[0105]
图2是在制备例5中合成的化合物的1h-nmr图谱。
[0106]
图3是在制备例6中合成的化合物的1h-nmr图谱。
[0107]
图4是在制备例7中合成的化合物的1h-nmr图谱。
[0108]
图5是nano
orn(ibu)
的动态光散射计测结果。
[0109]
图6是nano
orn(z)
、nano
orn(me)
、nano
orn(ibu)
的动态光散射计测的粒径(左)及散射强度(右)的ph依赖性测定的结果。
[0110]
图7是鸟氨酸纳米组织体对于对乙酰氨基苯酚(apap)急性肝损伤小鼠的血中氨浓度(a)、alt(b)、ast评价结果。
[0111]
图8是对于apap急性肝损伤小鼠的、鸟氨酸纳米组装体给药后的肝脏组织的苏木精-伊红(h&e)染色图。
[0112]
图9是对于正常小鼠的、纳米组装体的给药后的体重变化。
[0113]
图10是对于正常小鼠的、纳米组装体的给药后的白细胞数及血小板数的变化。
[0114]
图11是对于apap急性肝损伤小鼠的、纳米组装体的给药后的存活率图表。
[0115]
图12是
125
i-标签化纳米组装体(nano
orn(ibu)
)的口服给药后的动态解析结果。
[0116]
图13是各聚鸟氨酸纳米组装体(nano
orn
)的细胞毒性评价的结果。
[0117]
图14是在制备例16中合成的化合物的1h-nmr图谱。
[0118]
图15是在制备例17中合成的化合物的1h-nmr图谱。
[0119]
图16是nano
asp(bz)
、nano
asp(me)
、nano
asp/orn
的动态光散射计测的粒径的ph依赖性测定的结果。
[0120]
图17是nano
asp(bz)
、nano
asp(me)
、nano
asp/orn
等组织体对于对乙酰氨基苯酚(apap)急性肝损伤小鼠的血中氨浓度(a)、alt(b)、ast评价结果。
[0121]
图18是在制备例21中合成的化合物的1h-nmr图谱。
[0122]
图19是在制备例22中合成的化合物的1h-nmr图谱。
[0123]
图20是nano
arg(ac)
、nano
arg(ibu)
的动态光散射计测结果。
[0124]
图21是乙酰化精氨酸组装体对于apap诱发的急性肝损伤小鼠的口服所带来的效果。
[0125]
图22是对于非酒精性脂肪性肝炎(nash)模型小鼠的乙酰化精氨酸组装体的效果。
具体实施方式
[0126]
本说明书中使用的技术用语，除非另有定义，否则作为表示本技术领域中常用的
含义内容的用语使用。
[0127]
《共聚物》
[0128]
本发明的共聚物如实施方式(1)的式(i)所示。
[0129]
式(ⅰ)中的a表示(
ⅰ
)或者是由(
ⅱ
)式表示的基团，
[0130]
其中，(
ⅰ
)为氢原子、未取代或取代c
1-c
12
烷基、未取代或取代c
1-c
12
烷氧基、未取代或取代芳基，被取代的情况下的取代基为c
1-c4烷基、c
1-c4烷氧基、芳基、甲酰基、式r1r2ch-(其中，r1和r2独立地为c
1-c4烷氧基或者r1和r2合为一体表示-och2ch2o-、-o(ch2)3o-或-o(ch2)4o-)的基团。进而，作为取代基列举的c
1-c4烷基、c
1-c4烷氧基、芳基还可以被c
1-c4烷基、c
1-c4烷氧基、芳基取代。芳基包括苯基、联苯基、萘基。
[0131]
式(ⅰ)中的连接基团l和/或l’只要对鸟氨酸微粒的形成不带来坏影响则可以是不受限定的有机二价基团，一般表示-o-(ch2)
a-nh-、-o-(ch2)
a-o-、-(ch2)
a-nh-、或-(ch2)
a-o-，优选表示-o-(ch2)
a-nh-、-(ch2)
a-nh-(其中，a为1～6，优选为1～3的整数)，对于l而言，这些连接基团的键合的方向性具有各式的结构式中的各部分的顺向性(orthodromic)。例如，以-o-(ch2)
a-nh-为例，则-o-(ch2)部侧的键合原子与式(ⅰ)的亚甲基形成共价键，且nh-部与羰基形成共价键。对此，l’的方向性具有与l相反的方向性。
[0132]
式(ⅰ)中的y和y’各自独立地表示氢原子、未取代c
1-21
烷基羰基、取代c
1-4
烷基羰基、未取代或取代c
3-7
环烷基羰基、未取代或取代芳基羰基、或者未取代或取代5或6元杂芳基羰基。
[0133]
作为上述各基团或各基团的一部分的烷基可以是直链或支链，虽然不受限定，但可以举出甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、己基、庚基、壬基、十一烷基、十三烷基、十七烷基、十九烷基等中的相应的烷基。优选地，选自c
1-6
烷基。c
3-7
环烷基可以是环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基。芳基可以是苯基、联苯基、萘基。5或6元杂芳基是含有1个或2个选自氧、氮以及硫原子的相同或不同的杂原子的不饱和杂环基，其可以是噻吩基、呋喃基、吡喃基、吡咯基、异恶唑、吡唑基、咪唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基，另外，这些杂环环还可以是进行了苯并稠合的环。作为这样的稠环，例如，可以举出异吲哚基、吲哚基、喹啉基、异喹啉基、喹喔啉基、喹唑啉基、菲啶基。
[0134]
取代c
1-4
烷基羰基的取代基选自由卤素原子(cl、f、br、i)、羟基、羧基、未取代或取代c
3-7
环烷基、未取代或取代芳基及未取代或取代5或6元杂芳基、未取代或取代金刚烷基、未取代或取代胆固醇残基组成的组中，这些取代基被取代的情况下的取代基可以是c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、羟基、羧基、氰基、硝基、卤素原子、或者单或双c
1-4
烷基氨基。最后的取代基也适用于取代c
3-7
环烷基羰基、取代芳基羰基、或者取代5或6元杂芳基羰基。
[0135]
在以上的定义中，所谓胆固醇残基可以是胆固醇分子中的22～27位碳上的任一个h脱离或含有22～27位碳中的任一个碳的烃链脱离的残基。作为这样的残基取代的烷基羰基，例如，可以举出胆酸、鹅脱氧胆酸。作为y优选的是c
1-6
烷基羰基。
[0136]
式(ⅰ)、(
ⅱ
)中的r
10
和r
10’独立地为氢原子或r
11-(c＝o)。虽然不受理论约束，但在r
10
和r
10’包含r
11-(c＝o)的情况下，由其和聚鸟氨酸链段的δ-氨基形成的酰胺键和聚鸟氨酸主链的酰胺(或肽)键各自成为酶解的对象，可以认为释放游离的鸟氨酸，例如，可以认为在消化道内被消化酶分解并逐渐释放鸟氨酸。
[0137]r11
是取代或未取代的c
1-c
21
烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的c
1-c
21
烷
氧基，这些取代基被取代的情况下的取代基是c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、芳基，更优选地，r
11
可以是甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、(也可以是分支的)戊基、(也可以是分支的)己基、(也可以是分支的)庚基、(也可以是分支的)辛基、环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、苯基、萘基、苄基氧基、叔丁基氧基。从将共聚物组装并形成鸟氨酸微粒时的效率等观点出发，这些基团是优选的。另一方面，从容易合成的观点出发，r
11
优选为甲基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、(可以有取代基的)苯基、(可以有取代基的)苄基。
[0138]
例如，在r
11
为甲基的情况下，可以通过使用例如乙酸酐作为下述的共聚物的制备中说明的式(ⅱ)的缩合反应时的羧酸酯来得到。同样地，在r
11
为乙基的情况下使用例如丙酸酐，在r
11
为丙基的情况下使用例如丁酸酐，在r
11
为异丙基的情况下使用例如异丁酸酐，在r
11
为丁基的情况下使用例如戊酸酐，在r
11
为异丁基的情况下使用例如异戊酸酐，在r
11
为苯基的情况下使用例如苯甲酸酐，在r
11
为苄基的情况下使用例如双苯基乙酸酐，如此地，通过改变羧酸的种类，就能够制成所期望的r
11
。通过分别使用具有取代基的羧酸酯或衍生物作为羧酸酯，r
11
也能够具有取代基。
[0139]
从该共聚物形成的粒子的稳定性的观点出发，m和m’可以独立地优选为2～300的整数，更优选为15～150的整数，最优选为15～100的整数。
[0140]
同样地，n可以优选为2～1000的整数，更优选为10～500的整数，最优选为30～400的整数。
[0141]
就式(ⅰ)中的m和m’个r
10
和r
10’为氢原子的百分比而言，独立地，通常为80％，可以优选为至60％，更优选为至30％，最优选为至10％，尤其是，最优选地，m和m’个全部(100％)为-r
11-(c＝o)。
[0142]
《共聚物的制备》
[0143]
以下，示出共聚物的合成的方案的例子。以下只是例示而已，本发明并不被本例示受任何限定。
[0144]
只要符合本发明的目的，则共聚物可以包含通过任何方法制备的相应的peg链段和聚鸟氨酸链段。但是，该共聚物优选为分子量分布窄且在水性介质中自组装(self-assembly)而形成的鸟氨酸微粒的平均直径能够是适当的尺寸。
[0145]
预先准备由以下的式(ⅱ)表示的共聚物，接着，为了在该式中的来自于l-鸟氨酸的链段中的δ-氨基中引入酰基，可以通过添加羧酸酯等化合物来提供。
[0146][0147]
[式中，
[0148]
a表示(
ⅰ
)’或者表示(
ⅱ
)’式，其中，
[0149]
(
ⅰ
)’为氢原子、未取代或取代c
1-c
12
烷基、未取代或取代c
1-c
12
烷氧基、未取代或取代芳基，被取代的情况下的取代基为c
1-c4烷基、c
1-c4烷氧基、芳基、甲酰基、式r1r2ch-(其
中，r1和r2独立地为c
1-c4烷氧基或者r1和r2合为一体表示-och2ch2o-、-o(ch2)3o-或-o(ch2)4o-)的基团，
[0150]
(
ⅱ
)’式
[0151][0152]
l和l’独立地表示连接基团，
[0153]
y和y’独立地表示氢原子、c
1-21
烷基羰基、取代c
1-4
烷基羰基、未取代或取代c
3-7
环烷基羰基、未取代或取代芳基羰基、或者未取代或取代5或6元杂芳基羰基，其中，取代c
1-4
烷基羰基的取代基选自由卤素原子、羟基、羧基、未取代或取代c
3-7
环烷基、未取代或取代芳基及未取代或取代5或6元杂芳基、未取代或取代金刚烷基、未取代或取代胆固醇残基组成的组中，这些取代基被取代的情况下的取代基可以是c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、羟基、羧基、氰基、硝基、卤素原子、或者单或双c
1-4
烷基氨基，
[0154]
m和m’独立地为2～300的整数，n为2～1,000的整数]。
[0155]
这样的制备的典型的例子可以举出由下述的方案表示的、由式(ⅱ)表示的共聚物与羧酸酯的缩合反应。
[0156][0157]
作为羧酸酯的例子，可以举出羧酸卤化物、羧酸酐、羧酸叠氮化物、活性酯等，具体而言，可以使用乙酸酐、丙酸酐、异丁酸酐、丁酸酐、草酸酐、琥珀酸酐、戊二酸酐、己二酸酐、马来酸酐、邻苯二甲酸酐、苯甲酸酐、双苯基乙酸酐等。
[0158]
这里，在上述反应方案中的(ⅱ)式中的a相当于由上述(
ⅱ
)’定义的a时，以相当于其中记载的式中的m’的重复单元的鸟氨酸为来源的链段中的δ-氨基与上述m的重复单元的δ-氨基同样地经历缩合反应。
[0159]
进而，为了提供分子量分布窄的本发明的共聚物，由式(ⅱ)表示的前体共聚物(以式(ⅱ)的a由(
ⅰ
)’表示的情形为例)优选按照下述的合成方案制备。
[0160][0161]
这里，化合物1使用了市场销售的或用遵从了其提供法的方法准备的分子量分布尽可能窄的化合物，并对于该化合物，使δ位的氨基被保护的鸟氨酸的n-羧酸酐活性开环聚合，接着，执行使用乙酸酐等活性末端改性剂来停止反应这一自身公知的方法，由此制备化合物2，进而使聚(l-鸟氨酸)链段中的氨基保护基脱离。
[0162]
根据这样的以化合物1为原料的反应处理，则可以提供为聚(l-鸟氨酸)链段也分子量分布极窄的前体共聚物。
[0163]
因此，最终得到的根据本发明的由式(ⅰ)表示的嵌段共聚物能够提供分子量分布为1.01～1.20、优选为1.01～1.06的嵌段共聚物。
[0164]
对此，在式(ⅱ)的a由(
ⅱ
)’定义的情况下，作为上述反应方案中的起始原料即化合物1，使用nh2ch2ch
2-(och2ch2)
n-nh2，以下，化合物2～4的a部分各自可以是相当于m个重复单元的重复单元。这样得到的式(ⅱ)的a由(
ⅱ
)’定义的三嵌段共聚物，由下式(ⅲ)表示。
[0165][0166]
式中，l、l’、y、y’、m、m’、n与对上述式(ⅱ)的定义中的内容相同。
[0167]
另外，作为另一个例子，该共聚物也能够从上述的化合物1开始并通过由下述的方案表示的合成方法合成。
[0168][0169]
《鸟氨酸微粒》
[0170]
通过使由式(ⅰ)表示的共聚物在水或水性介质(也可以含有水溶性有机溶剂、缓冲剂)中进行组装，来能够制备鸟氨酸微粒。由于含有r
10
和r
10’的聚鸟氨酸链段显示疏水性，因此可认为该共聚物凝聚而自组装，形成以聚鸟氨酸链段为核(core)并以peg链段为壳(shell)的鸟氨酸微粒。例如，通过将由式(ⅰ)表示的共聚物溶解在如二甲基甲酰胺(dmf)、二甲基亚砜(dmso)那样的极性有机溶剂中并在水、水溶液或缓冲液中透析，即可得到鸟氨酸微粒。
[0171]
鸟氨酸微粒(或组装体)没有特别限定，但从给药的容易度或制备的观点出发，平均粒径优选为1毫米以下，优选为1纳米至1毫米，平均粒径更优选为1纳米至100微米。另外，进而为10纳米至200纳米，最优选为20纳米至70纳米。粒径可以通过在水或水性介质中的动态光散射(dls)等测定。
[0172]
此外，例如，通过在化合物3或式(ⅱ)中添加软骨素等聚阴离子性化合物聚合物的溶液并形成它们的复合物，即可得到聚离子复合物粒子(pic)。另一方面，本发明的鸟氨酸微粒通过聚(乙二醇)-b-聚(鸟氨酸)共聚物或其衍生物独自在水性介质中进行自组装来得到，其特征在于不与其它聚阴离子性化合物聚合物形成复合物。因此，本发明的鸟氨酸微粒有别于pic。
[0173]
这样，优选地，本发明的鸟氨酸粒子的特征在于，包含聚(乙二醇)-b-聚(鸟氨酸)聚合物或其衍生物作为主要成分，而不包含聚阴离子性聚合物等。作为聚阴离子性聚合物的例子，可以举出聚丙烯酸、聚甲基丙烯酸、聚磺酸、聚阴离子性多糖类、阴离子性蛋白质等，更具体而言，可以举出硫酸软骨素、角叉菜胶、肝素、羧甲基葡聚糖、黄原胶、透明质酸、聚天冬氨酸、聚谷氨酸、聚丙烯酸、聚甲基丙烯酸、聚乙烯硫酸、聚苯乙烯磺酸等。但是，本发明的鸟氨酸微粒只要对该粒子的稳定性不带来坏影响就可以包含水性介质、溶剂等。
[0174]
得到的鸟氨酸微粒可以通过离心等分离手段分离，另外，通过冷冻干燥，可以作为干燥组合物保存，根据需要，可以在水性介质中重构。根据需要，这样的干燥组合物可以作为含有生理学上可容许的稀释剂或赋形剂的鸟氨酸微粒的水溶液提供。这种稀释剂可以是含有灭菌水、生理盐水、生理学上容许的缓冲剂的溶液等，进而作为添加剂，例如可以是山梨糖醇、糊精、葡萄糖、甘露醇、氨基酸(例如，甘氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、谷氨酸等)等。
[0175]
另外，换言之，如上所述，作为一个实施方式，本发明提供以下的鸟氨酸微粒的制备方法。即，本发明提供一种鸟氨酸微粒的制备方法，其特征在于，使羧酸酯化合物与由上述式(ⅱ)表示的共聚物反应而在来自鸟氨酸的链段中的δ-氨基引入由r
10
构成的取代基(但r10
为r
11-(c＝o)-，r
11
为取代或未取代的c
1-c
21
烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的c
1-c
21
烷氧基，这些取代基被取代的情况下的取代基是c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、芳基)，并使得到的共聚物在水中进行组装。
[0176]
《还可以与上述或下述的添加剂一起或独立地作为其它添加剂使用的进一步的共聚物(存在包括新化合物的情形)》
[0177]
由式(i)表示的共聚物或来自该共聚物的鸟氨酸微粒可以作为添加剂与上述的添加剂一起或独立地，作为包含下面的共聚物的医药组合物提供，例如，可以作为用于预防或治疗肝功能障碍的医药组合物提供。
[0178]
·
由式(ⅳ)表示的共聚物：
[0179]
式中，a
asp
和l
asp
与式(ⅰ)中的a(
ⅰ
)和l的定义同义，具体而言，可以适用对于式(ⅰ)中的l的说明。y
asp
与式(i)中y的定义同义。进而，r
asp
是氢原子、取代或未取代的c
1-c
21
烷基、取代或未取代的芳基，这些取代基被取代的情况下的取代基是c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、芳基，对于上述c
1-c
21
烷基和芳基可以适用对于式(ⅰ)中的r
11
的说明。进而，作为具体的l
asp
的连接基团，与对于l的具体说明同义。
[0180]
ma是2～300的整数，优选为15～150的整数，更优选为15～100的整数，
[0181]
na是2～1,000的整数，优选为10～500的整数，更优选为30～400的整数。
[0182]
·
由式(ⅳ)表示的共聚物通过如下方法得到：在上述的化合物1至化合物4的反应方案中，代替δ-氨基被保护的鸟氨酸的n-羧酸酐而使用例如天冬氨酸的β-羧基的苄基或烷基化物的n-羧酸酐，并使其活性开环聚合于化合物1的欧米伽(ω)末端氨基，由此就能够提供化合物2中的m个被保护的鸟氨酸单元置换为被保护的天冬氨酸单元的化合物，这样提供的化合物，如果需要，可以经自身公知的保护基的脱离、酯化、烷基的交换反应等而得到产物。另外，在r
asp
为氢原子或苄基的情况下，有时也包含自身公知的化合物，但据本发明人等所知，由式(
ⅳ‑
a)表示的其它化合物被认为是现有技术文献中未记载的共聚物。另外，这样的共聚物也能够在水性介质中自动组装，形成具有与由式(ⅰ)表示的共聚物相同的尺寸的微粒。
[0183]
由于低分子l-天冬氨酸也具有类似于低分子l-鸟氨酸的向体外排出有害的氨的作用等，因此由式(ⅳ)表示的共聚物也能够增加式(ⅰ)的共聚物的作用或效果，或者，能够提高含有式(ⅰ)的共聚物或其微粒(组装体)的医药组合物的稳定性等。
[0184]
·
由式(
ⅴ
)表示的共聚物：
[0185]
式中，a
co
、l
co
、n
co
、r
asp
、ma各自与对上述式(ⅳ)定义的a
asp
、l
asp
、na、r
asp
、ma同义，a
orn
、r
orn
、mo以及y
co
各自与对式(ⅰ)定义的a(
ⅰ
)、r、m，n以及y同义。在该共聚物中的m
asp
个中的各单元和m
orn
个中的各单元可以各自随机存在。
[0186]
由式(
ⅴ
)表示的共聚物通过如下方法得到：在上述的化合物1至化合物4的反应方案中，代替δ-氨基被保护的鸟氨酸的n-羧酸酐而使用例如天冬氨酸的β-羧基的苄基化物的n-羧酸酐和δ-氨基被保护的鸟氨酸的n-羧酸酐的混合物，并在化合物1的欧米伽(ω)末端氨基进而在新产生的氨基使那些n-羧酸酐活性开环聚合，由此即可作为化合物2中的m个被保护的鸟氨酸单元随机置换为被保护的天冬氨酸单元和被保护的鸟氨酸单元的聚合物提供，可以经自身公知的保护基的脱离、酯化和/或酰基化等而得到产物。另外，这样提供的共聚物也能够与式(ⅰ)的共聚物相同地进行组装。
[0187]
另外，由式(
ⅴ
)表示的共聚物也可以具有与由式(ⅰ)或(ⅳ)表示的共聚物及其组装物相同的作用和效果。
[0188]
·
由式(ⅵ)表示的共聚物：
[0189]
式中，a
arg
、l
arg
、ng、mg、y
arg
各自与对上述式(ⅳ)定义的a
asp
、l
asp
、na、ma、y
arg
同义，r
arg
和r
arg’独立地与对上述式(ⅳ)定义的r
asp
同义。由式(ⅳ)表示的共聚物正好可以通过将wo2016/167333a1中记载的r
arg
和r
arg’各自为h且y
arg
可以与式(iv)中定义的y
asp
同义的共聚物与能够形成r
arg
和r
arg’的酸酐或羧酸进行反应来制备。这样制备的共聚物无需使用聚阴离子性聚合物即可组装。确认出这些共聚物或其组装物除了wo2016/167333a1中记载的作用效果(抗肿瘤效果)之外，通过口服给药还对肺癌转移模型小鼠和皮下移植癌模型小鼠示出抗肿瘤效果，且大为减少黑色素瘤细胞对肺的粘附(数据未公布)，除此之外，可以具有与式(ⅰ)的共聚物及其组装物相同的作用和效果。
[0190]
《用于预防或治疗肝功能障碍的组合物》
[0191]
本发明的由式(ⅰ)的共聚物形成的鸟氨酸微粒(或组装物)作为用于预防、治疗肝损伤的组合物使用。即，本发明作为一个实施方式提供一种将本发明的鸟氨酸微粒作为有效成分且用于预防或治疗肝功能障碍的医药组合物。
[0192]
鸟氨酸在生物体中发挥作为尿素生成的底物的功能，或者激活含有氨基甲酰磷酸合成酶(cps)或鸟氨酸氨甲酰基转移酶(otc)的尿素循环的酶。通过这些作用，可期待预防、治疗肝损伤的效果。
[0193]
本发明的鸟氨酸微粒一旦口服给药则聚集在肠内粘膜上，聚合物内部的酰胺键通过逐渐酶解来被水解并释放鸟氨酸，因此在生物体内有效地发挥作用，且生物利用度高，如实施例的模型动物实验所示，在肝功能障碍的预防或治疗中非常有效地使用。
[0194]
此外，所谓肝功能障碍包括病毒肝病、与药物和酒精相关的肝病、免疫介导性肝病、代谢性肝病、非酒精性脂肪性肝病(nafld)、非酒精性脂肪性肝炎(nash)、肝衰竭、剧症肝衰竭、肝细胞癌以及肝移植的并发症等。
[0195]
本发明的医药组合物中鸟氨酸微粒或其水溶液可以通过口服给药向需要给药的哺乳动物给药，尤其可以向人给药。本发明的医药组合物毒性低且通过注射等容易聚集于肝脏，因而具有水解而释放鸟氨酸的特性，因此也可以直接向静脉、动脉、皮下、腹腔等给药，尤其在肠内更有效地发挥效果，因此作为口服给药剂更有利地使用。
[0196]
作为医药组合物的剂型的例子，可以举出液体制剂(包括内用水剂、悬浮剂、乳剂、糖浆剂)、固体制剂(包括片剂、丸剂、舌下剂、胶囊剂、滴剂、含片)、颗粒剂、粉剂、散剂等。进而，固体制剂还可以根据需要制成实施了本领域公知的剂皮的剂型，例如，糖衣片、明胶封片、肠溶片、薄膜包衣片、双重片、多层片。就各剂型的形状、大小而言，均包括在本领域公知的剂型的范围内即可，且可以含有溶解剂、ph调节剂、载体、赋形剂、稀释剂、结合剂、崩解剂、润滑剂、乳化剂、增量剂、着色剂、香味剂、甜味剂、稳定剂、防腐剂等添加剂。
[0197]
另外，其给药量、给药次数根据患者的年龄、性别、状态、疾病的程度等而在最佳浓度范围内适用，但每天给药的鸟氨酸换算量对于每1kg体重为10μmg至1g左右，更优选为0.1mg至100mg的量，可以将其分为1～3次左右给药，但本医药组合剂由于利用度高，因此即使1天给药1次也可以期待效果。
[0198]
给药量、给药方法、给药次数参考各种文献等，本领域技术人员通过动物实验或对
人的实验性给药即可决定最佳方法。
[0199]
实施例
[0200]
以下，举出具体例子来更详细地说明本发明，但并不意味着将本发明限定于这些例子。
[0201]
制备例1：ch3o-(ch2ch2o)
n-ch2ch2oso2ch3的合成(n813)
[0202]
在市场销售的ch3o-(ch2ch2o)
n-h(mw＝5,000，60g，12mmol)中添加thf(200ml)和丁基锂14.4ml(23mmol，1.6m-己烷)之后，加入甲基磺酰氯(ch3so2cl)(1.5ml，2.3g，20mmol)并在40℃下反应1天。使其在2-丙醇(ipa)中沉淀之后，在甲醇中溶解并使其沉淀。在重复两次进行该操作之后，使沉淀物减压干燥，得到了目标物(收获量60g)。
[0203]
制备例2：ch3o-(ch2ch2o)
n-ch2ch2nh2的合成(n819)
[0204]
在制备例1得到的ch3o-(ch2ch2o)
n-ch2ch2oso2ch3(60g)中加入28％氨水600ml，并在50℃下反应1天之后，用50ml的氯仿提取，并将氯仿相用nahso4进行脱水、过滤之后，使其在2-丙醇(ipa)中沉淀，将得到的沉淀物在甲醇中溶解并使其沉淀。在重复两次进行该操作之后，使沉淀物减压干燥，得到了目标物(收获量54g)。
[0205]
制备例3：l-鸟氨酸(z)-n-羧酸酐(l-orn(z)-nca)的合成(n831)
[0206]
将boc-鸟氨酸(z)-oh(boc-orn(z)-oh，15g)在100ml的thf中溶解并冰冷却至0℃之后，加入亚硫酰二氯(socl2，10ml，16g)的thf(50ml)溶液，并在0℃下反应1小时接着在室温下反应3小时。将反应溶液加入1l的己烷中，过滤沉淀，溶解在100ml的乙酸乙酯中，之后在1l的己烷中进行了沉淀、过滤。将其重复进行两次，并将得到的沉淀减压干燥而得到了目标物(收获量10g)。
[0207]
制备例4：ch3o-(ch2ch2o)
n-ch2ch2nh-(coch(ch2ch2ch2nh(z))nh)
m-h的合成(n857)
[0208]
将在制备例2得到的n819(5g)溶解在dmf30ml中，加入制备例3中得到的n831(5g)的dmf(20ml)溶液，并在室温下搅拌了两天。将该溶液加入到己烷:2-丙醇(8:2，500ml)中，通过离心分离得到聚合物，并进行减压干燥得到了目标物(收获量6.3g)。
[0209]
得到的n857的nmr测定结果示于图1中。
[0210]
制备例5：ch3o-(ch2ch2o)
n-ch2ch2nh-(coch(ch2ch2ch2nh2)nh)
m-h的合成(peg-b-porn)；n967)
[0211]
将在制备例4得到的n833(4.3g)溶解在三氟乙酸45ml中并冰冷却至0℃，之后，加入3％的hbr(乙酸溶液，15ml)反应4小时。将其加入到800ml冷却的2-丙醇中，得到沉淀，进行真空干燥得到了目标物(收获量3.3g)。
[0212]
得到的n967的nmr的测定结果示于图2中。
[0213]
制备例6：ch3o-(ch2ch2o)
n-ch2ch2nh-(coch(ch2ch2ch2nhc(＝o)ch3)nh)
m-c(＝o)ch3的合成(peg-b-porn(coch3)；n977)
[0214]
将在制备例5得到的n967(1g)溶解在1ml的dmf中，加入三乙胺5ml、乙酸酐10ml，并在室温下反应1小时。将其加入到己烷:2-丙醇(8:2，500ml)中，通过离心分离得到聚合物，进行减压干燥得到了目标物(1.0g)。
[0215]
得到的n977的nmr的测定结果示于图3中。
[0216]
制备例7：ch3o-(ch2ch2o)
n-ch2ch2nh-(coch(ch2ch2ch2nhc(＝o)ch(ch3)2)nh)
m-c(＝o)ch(ch3)2的合成(peg-b-porn(coch(ch3)2)；n841)
[0217]
除了使用异丁酸酐代替乙酸酐以外，以与制备例6完全相同的方法得到了目标聚合物(1.4g)。
[0218]
得到的n841的nmr的测定结果示于图4中。
[0219]
制备例8：ch3o-(ch2ch2o)
n-ch2h2nh-(coch(ch2ch2ch2nh2)nh)
m-h与硫酸软骨素的聚离子复合物粒子(nano
orn
)的制备
[0220]
将与制备例5同样地制备的peg-b-porn(n836，1g)溶解在20ml的dmf中，加入20ml的水后放入透析膜(截留分子量(mwco)＝3.5kda)中，并对于0.01m的hcl(2l)进行了24小时透析。之后，对2l的蒸馏
·
离子交换水(di水)进行48小时透析(每12小时更换透析水)而得到了水溶液(85ml)。算出该水溶液中的阳离子总电荷量，并加入硫酸软骨素溶液(2.7mg/ml，115ml)而使得与阴离子总电荷量之比为1:1。而且，通过将该混合溶液搅拌30分钟，得到了聚离子复合物(pic)粒子(nano
orn
)。
[0221]
制备例9：peg-b-porn(z)组装体(nano
orn(z)
)的调制
[0222]
将在制备例4合成的n833(1g)溶解在20ml的dmf中，加入di水20ml之后，放入透析膜(截留分子量(mwco)＝12kda-14kda)中，对2l的di水进行72小时透析(每12小时更换透析水)而得到了水溶液。
[0223]
制备例10：peg-b-porn(coch3)组装体(nano
orn(me)
)的调制
[0224]
除了使用在制备例6合成的n977(1g)以外，以与制备例9完全相同的方法进行了制备。
[0225]
制备例11：peg-b-porn(coch(ch3)2)组装体(nano
orn(ibu)
)的调制(n978)
[0226]
除了使用在制备例7合成的n841(1g)以外，以与制备例9完全相同的方法进行了制备。组装体(nano
orn(ibu)
)的动态光散射计测结果示于图5中。
[0227]
试验例1：纳米组装体的稳定性
[0228]
在制备例9～11调制的纳米组装体的尺寸的随ph的变化示于图6中。直到ph12左右为止，任何粒子的尺寸和散射强度也稳定而没有变化。此外，在图6、图7及其它记载中，存在将nano
xx
的xx部分如nanoxx那样记载而不记载为上标的情形，但与上标时同义。
[0229]
试验例2：鸟氨酸组装体对于对乙酰氨基苯酚(apap)-诱发的急性肝损伤小鼠的口服给药所带来的效果
[0230]
使1组6只c57bl/6n小鼠(雄性)自由摄取下述样品(对组3至组7调节为鸟氨酸含量大致为200mg/kg)。给药开始3天后，腹腔给药了apap水溶液(15mg/ml，0.5ml，300mg/kg-bw)。24小时后，采集血液及肝脏，将全血使用于血中氨浓度的测定，并将血浆使用于肝损伤标志物ast和alt的测定，对肝脏实施了苏木精-伊红染色，并进行了组织学的诊断。
[0231]
组1：健康组
[0232]
组2：apap给药组
[0233]
组3：apap给药组/2mg/ml的l-鸟氨酸口服自由摄取
[0234]
组4：apap给药组/5mg/ml的nano
orn
口服自由摄取
[0235]
组5：apap给药组/5mg/ml的peg-b-porn(z)组装体(nano
orn(z)
)口服自由摄取
[0236]
组6：apap给药组/5mg/ml的peg-b-porn(coch3)组装体(nano
orn(me)
)口服自由摄取
[0237]
组7：apap给药组/5mg/ml的peg-b-porn(coch(ch3)2)组装体(nano
orn(ibu)
)口服自由摄取
[0238]
如图7的a)所示，与健康组相比，在apap给药组血中氨浓度大幅上升，而低分子鸟氨酸不能使血中氨浓度降低。虽然nano
orn
有一些效果，但确认出，与nano
orn
相比，peg-b-porn(coch(ch3)2)组装体(nano
orn(ibu)
)优越地降低血中氨浓度。
[0239]
图7的b)、c)示出了血液中天冬氨酸氨基转移酶(ast)和丙氨酸氨基转移酶(alt)水平。通过apap给药，两者的数值均有意义地上升。这示出发生了肝损伤。在nano
orn
(pic：离子复合物)、peg-b-porn(coch3)组装体(nano
orn(me)
)以及peg-b-porn(coch(ch3)2)组装体(nano
orn(ibu)
)中，ast水平、alt水平对于apap给药均有降低。
[0240]
这些试验的肝脏组织切片的苏木精-伊红(h&e)染色图示于图8中。在apap给药组中看得出肝脏组织坏死。虽然在nano
orn
、nano
orn(z)
中示出同样的倾向，但在nano
orn(me)
和nano
orn(ibu)
中其坏死得到了相当大的抑制。
[0241]
试验例3：鸟氨酸组装体对于c57/bl健康小鼠的口服给药所带来的效果(毒性评价)
[0242]
对于1组6只c57bl/6n小鼠(雄性)用探针强制口服给药了0.5ml的下述样品(对组2至组7调节为鸟氨酸含量大致为200mg/kg)。每天测定体重，给药开始4天后，将全血使用于血球数的测定，并将血浆使用于肝损伤标志物ast和alt的测定。
[0243]
n＝6
[0244]
组1：健康组
[0245]
组2：10mg/ml的l-鸟氨酸强制口服给药(探针)
[0246]
组3：20mg/ml的peg-b-orn强制口服给药(探针)
[0247]
组4：20mg/ml的nano
orn
强制口服给药(探针)
[0248]
组5：20mg/ml的peg-b-porn(z)组装体(nano
orn(z)
)强制口服给药(探针)
[0249]
组6：20mg/ml的peg-b-porn(coch3)组装体(nano
orn(me)
)强制口服给药(探针)
[0250]
组7：20mg/ml的peg-b-porn(coch(ch3)2)组装体(nano
orn(ibu)
)强制口服给药(探针)
[0251]
图9示出小鼠体重变化。确认出peg-b-porn强制口服给药的有意义的体重减少、示出毒性。另外，如图10所示，看得出在给药了peg-b-orn和nano
orn
的组中白细胞数上升且红细胞数下降，但在纳米组装体、尤其在nano
orn(ibu)
中几乎没有变化，不示出毒性。
[0252]
试验例4：鸟氨酸组装体对于对乙酰氨基苯酚(apap)-诱发的急性肝损伤小鼠的口服给药所带来的效果(2)
[0253]
对于1组6只c57bl/6n小鼠(雄性)用探针强制口服给药了0.5ml的下述样品(对组3至组5调节为鸟氨酸含量大致为200mg/kg)。给药开始3天后，腹腔给药了apap水溶液(15mg/ml，0.5ml，300mg/kg-bw)。之后，小鼠的存活确认至14天。
[0254]
组1：健康组
[0255]
组2：apap给药组
[0256]
组3：apap给药组/10mg/ml的l-鸟氨酸+10mg/ml的l-天冬氨酸强制口服给药(探针)
[0257]
组4：apap给药组/20mg/ml的nano
orn
强制口服给药(探针)
[0258]
组5：apap给药组/20mg/ml的peg-b-porn(coch(ch3)2)组装体(nano
orn(ibu)
)强制口服给药(探针)
[0259]
如图11所示，在apap给药组中14天后的存活率为33％，相对于此，在给药了nano
orn
的组中存活率为50％，在给药了nano
orn(ibu)
的组中存活率为83％，证实了存活率极高且效率高。
[0260]
参考制备例1：ch3o-c6h
5-ch2o-(ch2ch2o)
n-ch2ch2oso2ch3的合成(n953(2))
[0261]
在100ml烧瓶中的50ml的超脱水thf中，向市场销售的ch3och2ch2oh(1mmol)加入萘钾(1mml)和环氧乙烷(115mmol)并在水冷下反应1天之后，加入了甲基磺酰氯(5mmol)。20分钟后将其投入到500ml的2-丙醇中，并使其沉淀之后，在甲醇中溶解并沉淀。在重复两次进行该操作之后，使沉淀物减压干燥，得到了目标物。
[0262]
参考制备例2：ch3o-c6h
5-ch2o-(ch2ch2o)
n-ch2ch2nh2的合成(n956)
[0263]
在实验例1得到的ch3o-c6h
5-ch2o-(ch2ch2o)
n-ch2ch2oso2ch3中加入28％氨水600ml，并在50℃下反应1天之后，用50ml的氯仿提取，并将氯仿相用nahso4进行脱水、过滤之后，使其在2-丙醇(ipa)中沉淀，使得到的沉淀物在甲醇中溶解并使其沉淀。在重复两次进行该操作之后，使沉淀物减压干燥，得到了目标物。
[0264]
参考制备例3：ch3o-c6h
5-ch2o-(ch2ch2o)
n-ch2ch2nh-(co(ch2ch2ch2nh(z))nh)
m-h的合成(n962)
[0265]
将在参考制备例2得到的n956溶解在dmf中，并将市场销售的n-苄基-天冬氨酸nca加入到dmf溶液中，且在室温下搅拌了两天。将该溶液加入到己烷:2-丙醇(8:2，500ml)中，通过离心分离得到聚合物，并进行减压干燥得到了目标物。
[0266]
参考制备例4：ch3o-c6h
5-ch2o-(ch2ch2o)
n-ch2ch2nh-(co(ch2ch2ch2nh2)nh)
m-h的合成(peg-b-porn)；n973)
[0267]
将在参考制备例3得到的n962溶解在三氟乙酸中并冰冷却至0℃，之后加入3％hbr(乙酸溶液)反应4小时。将其加入到800ml冷却的2-丙醇中，得到沉淀，并进行真空干燥得到了目标物。
[0268]
制备例12：ch3o-c6h
5-ch2o-(ch2ch2o)
n-ch2ch2nh-(co(ch2ch2ch2nhc(＝o)ch(ch3)2)nh)
m-h的合成(peg-b-porn(coch(ch3)2)；n978)
[0269]
除了使用在参考制备例4合成的n973而代替n841以外，以与制备例7完全相同的方法得到了目标聚合物(1.4g)。
[0270]
试验例5：根据
125
i-标签化peg-b-porn(coch(ch3)2)的动态解析
[0271]
将在制备例125合成的n978溶解在dmso中，对2l的di水进行72小时透析(每12小时更换透析水)而得到了组装体的水溶液。其后，通过混合氯胺t和碘的放射性同位素
125
i，对引入到peg链的末端的苯基用
125
i进行标签化。
[0272]
另外，为了调查药代动力学，对于0.5h、1h、2h、4h、24h的各自的端点各准备了3只icr小鼠，一共准备了15只icr小鼠。将标签化的组装体通过探针强制口服给药后，结合各端点杀死后，提取心脏、肺、消化道、肝脏、脾脏、肾脏、血液，并利用伽马计数仪计测了各自的内脏器官的放射能。如图12所示，
125
i-标签化nano
orn(ibu)
定位于消化道，在血液和内脏器官中几乎完全看不到。
[0273]
制备例13：peg-b-orn(ibu)-tamra或peg-b-orn(ibu)-cy5的合成
[0274]
在加入制备例7的异丁酸酐之前，加入1mg市场销售的tamra-n＝c＝s，除了使其反应10分钟以外，以完全相同的方法合成了目标物的前者。
[0275]
在加入制备例7的异丁酸酐之前，加入1mg市场销售的cy5-nhs，除了使其反应10分钟以外，以完全相同的方法合成了目标物的后者。
[0276]
试验例6：nano
porn
在体外的毒性评价
[0277]
准备了baec(牛主动脉内皮细胞)、l-929(小鼠成纤维细胞)以及raw264.7(小鼠巨噬细胞)，并在各自中将5-10
×
103个播种到96孔板上。将不同浓度的nano
orn(z)
、nano
orn(me)
、nano
orn(ibu)
以及nano
orn
加入到各孔中。培养24小时或48小时，其后加入了mtt试剂。再过4小时后，加入dmso以增溶甲瓒(formazan)结晶。测定了其在波长为575nm时的吸收。
[0278]
结果示于图13中。nano
orn(z)
、nano
orn(me)
对l-929细胞示出了较高的毒性，nano
orn
对raw264.7巨噬细胞示出了较高的毒性，相对于此，nano
orn(ibu)
几乎没有示出细胞毒性，示出安全性极高。
[0279]
制备例14：ch3o-(ch2ch2o)
n-ch2h2nh-(coch(ch2cooch2ph)nh)
m-h的合成(n865)(peg-b-pbla)
[0280][0281]
将按照制备例2合成的n819(10g)溶解在dmf60ml中。将市场销售的l-天冬氨酸(ch2ph)-n-羧酸酐(l-asp(z)-nca)10g溶解在40ml的dmf中。将两者混合，并在室温下反应两天。使得到的聚合物在2-丙醇(ipa)中沉淀之后，使其在丙酮中溶解并在己烷中沉淀。在重复两次进行该操作之后，使沉淀物减压干燥，得到了目标物(收获量16g；n＝114；m＝15.5)。
[0282]
制备例15：l-天冬氨酸(me)-n-羧酸酐(l-asp(me)-nca)的合成(n871)
[0283]
使市场销售的l-天冬氨酸4？甲基
·
盐酸盐(15g；81.6mmol)在90ml的thf中溶解，加入α-蒎烯(33g；252mmol)和三光气12.2g(40.8mmol)，并在50℃下反应2小时。将反应溶液加入到1l的己烷中，过滤沉淀，并溶解在100ml的2-丙醇中，之后在1l的己烷中进行了沉淀、过滤。将其重复两次，并将得到的沉淀进行减压干燥而得到了目标物(收获量10.2g)。
[0284]
制备例16：ch3o-(ch2ch2o)
n-ch2h2nh-(coch(ch2cooch3)nh)
m-h的合成(n869)(peg-b-pasp(me))
[0285][0286]
将按照制备例2合成的n819(5g)溶解在30ml的dmf中。将在制备例15合成的l-天冬氨酸(ch3)-n-羧酸酐(l-asp(me)-nca)5g溶解在20ml的dmf中。将两者混合，并在室温下反应两天。使得到的聚合物在2-丙醇(ipa)中沉淀之后，使其在甲醇中溶解并在乙醚(ether)中沉淀。在重复两次进行该操作之后，使沉淀物减压干燥，得到了目标物(收获量6.4g；n＝114；m＝10)。
[0287]
制备例17：peg-b-p(orn(z)-co-asp(ch2ph))的合成(n877)
[0288][0289]
将按照制备例2合成的peg-nh2(n866)(5g；1mmol)溶解在30ml的dmf中。
[0290]
将按照制备例合成的l-orn(z)-nca(n854)(6g；20mmol)和市场销售的l-天冬氨酸(ch2ph)-n-羧酸酐(l-asp(z)-nca)(2.5g；10mmol)溶解在20ml的dmf中。将两者混合，并在室温下反应两天。使得到的聚合物在2-丙醇(ipa)/己烷(1：9v)中沉淀之后，使其在丙酮中溶解，在己烷中沉淀。在重复两次进行该操作之后，使沉淀物减压干燥，得到了目标物(收获量8.8g；n＝114；天冬酰胺单元数＝15；鸟氨酸单元数＝20)。
[0291]
制备例18：peg-b-pbla组装体(nano
asp(bz)
)的调制
[0292]
将按照制备例14合成的n865(1g)溶解在20ml的dmf中，加入di水20ml之后放入透析膜(截留分子量(mwco)＝12kda-14kda)中，对2l的di水进行72小时透析(每12小时更换透析水)而得到了含有目标组装体的水溶液。
[0293]
制备例19：peg-b-pasp(me)组装体(nano
asp(me)
)的调制
[0294]
除了使用按照制备例16合成的n869(1g)以外，重复进行与制备例18相同的操作而得到了含有目标组装体的水溶液。
[0295]
制备例20：peg-b-p(orn(z)-co-asp(ch2ph))组装体(nano
asp/orn
)的调制(n978)
[0296]
除了使用按照制备例17合成的n877(1g)以外，重复进行与制备例18相同的操作而得到了含有目标组装体的水溶液。
[0297]
试验例7：nano
asp(bz)
、nano
asp(me)
、nano
asp/orn
的稳定性评价
[0298]
对于在制备例16～18制备的粒子，通过动态光散射法测定了各自的粒径。
[0299]
nano
asp(bz)
至ph12为止在24小时内形成了120-140nm左右的稳定的纳米粒子。
[0300]
nano
asp(me)
在测定的所有ph，至6小时为止形成了10nm左右的组装体。24小时后，在ph1和5观察到100nm左右的缔合物。
[0301]
nano
asp/orn
在测定的所有ph，至24小时为止形成了100nm左右的组装体。
[0302]
另外，根据各自口服给药(探针)的急性肝损伤小鼠的体重变化的结果，nano
asp(bz)
、nano
asp(me)
、nano
asp/orn
与peg-b-porn(z)组装体(nano
orn(z)
)和peg-b-porn(me)组装体(nano
orn(me)
)相同地对小鼠没有示出实质性的毒性。
[0303]
试验例7对于对乙酰氨基苯酚(apap)-诱发的急性肝损伤小鼠的下述组的试样的口服给药所带来的效果
[0304]
作为试样，使用了下述组所示的试样，除此之外，重复执行了试验例2的方法。
[0305]
组1：健康组
[0306]
组2：apap给药组
[0307]
组3：apap给药组/200mg/kg的l-天冬氨酸口服给药(探针)
[0308]
组4：apap给药组/200mg/kg的peg-b-porn(z)组装体(nano
orn(z)
)口服给药(探针)
[0309]
组5：apap给药组/200mg/kg的peg-b-porn(me)组装体(nano
orn(me)
)口服给药(探针)
[0310]
组6：apap给药组/200mg/kg的peg-b-pbla组装体(nano
asp(me)
)口服给药(探针)
[0311]
组7：apap给药组/200mg/kg的peg-b-pasp(me)组装体(nano
orn(bz)
)口服给药(探针)
[0312]
组8：apap给药组/200mg/kg的peg-b-pasp(me)组装体(nano
asp/orn
)口服给药(探针)
[0313]
上述试验的结果，这些组装体示出与健康组同等的体重变化，几乎没有示出毒性，另外，示出如图17所示的急性肝损伤小鼠的血中氨水平、ast、alt水平。
[0314]
制备例21：peg-b-parg(ac)2的合成(n1047)
[0315][0316]
将与pct/jp2016/62062a1的实施例5同样地合成的peg-b-parg(n1046；2.4g)溶解在50ml的dmf中。向其中加入乙酸酐30ml，在50℃下反应5小时后在室温下反应1天。使得到的聚合物在叔丁基甲基醚中沉淀之后用己烷清洗。在重复两次进行该操作之后，使沉淀物减压干燥，得到了目标物(收获量2.4g；n＝114；m＝28)。将作为目标物的共聚物的1h-nmr图谱示于图18中。
[0317]
制备例22：peg-b-parg(ibu)2的合成(n1063)
[0318][0319]
除了用异丁酸酐代替乙酸酐以外，以与制备例21完全相同的方法得到了目标物(收获量2.4g；n＝114；m＝28)。作为目标物的共聚物的1h-nmr图谱示于图19中。
[0320]
制备例23：peg-b-parg(ac)2的组装体(nano
arg(ac)
)的调制
[0321]
将按照制备例21合成的n1047(1g)溶解在20ml的dmf中，加入di水20ml之后，放入透析膜(截留分子量(mwco)＝12kda-14kda)中，对2l的di水进行72小时透析(每12小时更换透析水)而得到了含有nano
arg(ac)
的水溶液(平均粒径为132nm，ζ电位为+4.9mv)。
[0322]
制备例24：peg-b-parg(ibu)2的组装体(nano
arg(ibu)
)的调制
[0323]
除了使用在制备例22合成的n1063(1g)以外，以与制备例23完全相同的方法制备了组装体(平均粒径为44nm，ζ电位为-2.2mv)。
[0324]
nano
arg(ac)
和nano
arg(ibu)
在水溶液中的光散射粒径的测定结果示于图20中。
[0325]
试验例8：乙酰化精氨酸组装体对于对乙酰氨基苯酚(apap)-诱发的急性肝损伤小鼠的口服给药和静脉注射所带来的效果
[0326]
除了使用乙酰化精氨酸组装体代替试验例2的鸟氨酸组装体以外，重复执行了试验例2的方法。结果示于图21中。根据图21，乙酰化聚精氨酸粒子(nano
arg(ac)
)虽然在口服给药未看到效果，但在静脉注射优越地降低了血中氨浓度。
[0327]
试验例9：乙酰化精氨酸组装体对于非酒精性脂肪性肝炎(nash)模型小鼠的口服给药所带来的效果
[0328]
对1组6只c57bl/6j小鼠(雄性)通过自由饮水口服给药(0天-8天)了乙酰化聚精氨酸粒子(nano
arg(ac)
)的水溶液([nano
arg(ac)
]＝5mg/ml)。口服给药开始1天后，投喂了胆碱缺乏甲硫氨酸减量高脂肪饮食饲料(cadhfd)(1天-8天)。在开始投喂cadhfd后的第8天采集了血液和肝脏。血浆使用于甘油三酯(tg)的测定。
[0329]
gp1：健康组
[0330]
gp2：cadhfd喂食组
[0331]
gp3：cadhfd喂食组/将5mg/ml的乙酰化聚精氨酸粒子(nano
arg(ac)
)水溶液口服给药(自由饮水)
[0332]
gp4：cadhfd喂食组/将1.5mg/ml的l-精氨酸水溶液口服给药(自由饮水)
[0333]
结果示于图22中。从图中可知，通过口服给药，甘油三酯优越地降低。
[0334]
工业上的可利用性
[0335]
本发明的共聚物、鸟氨酸微粒虽然不受限定，但可以作为例如用于预防、治疗肝功能障碍的药剂使用，至少可以在制药工业上利用。

技术特征：
1.一种共聚物，其特征在于，由式(ⅰ)表示，式中，a表示：(
ⅰ
)氢原子、未取代或取代c
1-c
12
烷基、未取代或取代c
1-c
12
烷氧基、未取代或取代芳基，其中，被取代的情况下的取代基为c
1-c4烷基、c
1-c4烷氧基、芳基、甲酰基、式r1r2ch-的基团，其中，r1和r2独立地为c
1-c4烷氧基或者r1和r2合为一体表示-och2ch2o-、-o(ch2)3o-或-o(ch2)4o-；或者(
ⅱ
)式l和l’独立地表示连接基团，y和y’独立地表示氢原子、c
1-21
烷基羰基、取代c
1-4
烷基羰基、未取代或取代c
3-7
环烷基羰基、未取代或取代芳基羰基、或者未取代或取代5或6元杂芳基羰基，其中，取代c
1-4
烷基羰基的取代基选自由卤素原子、羟基、羧基、未取代或取代c
3-7
环烷基、未取代或取代芳基及未取代或取代5或6元杂芳基、未取代或取代金刚烷基、未取代或取代胆固醇残基组成的组中，这些取代基被取代的情况下的取代基可以是c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、羟基、羧基、氰基、硝基、卤素原子、或者单或双c
1-4
烷基氨基，r
10
和r
10’为氢原子或r
11-(c＝o)-，r
11
各自独立地为取代或未取代的c
1-c
21
烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的c
1-c
21
烷氧基，这些取代基被取代的情况下的取代基为c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、芳基，m和m’独立地为2～300的整数，n为2～1,000的整数，式中的m或m’个r
10
和r
10’的20％以上为r
11-(c＝o)-。2.根据权利要求1所述的共聚物，其中，
式(i)的r
10
为r
11-(c＝o)-，m个r
10
的100％为r
11-(c＝o)-。3.根据权利要求1所述的共聚物，其中，由(i)定义a。4.根据权利要求1所述的共聚物，其中，由(i)定义a，r
10
为r
11-(c＝o)-，m个r
10
的100％为r
11-(c＝o)-。5.根据权利要求1所述的共聚物，其中，由(
ⅱ
)定义a。6.根据权利要求1所述的共聚物，其中，由(
ⅱ
)定义a，r
10
和r
10’为r
11-(c＝o)-，m和m’个r
10
和r
10’的100％为r
11-(c＝o)-。7.一种鸟氨酸微粒，其特征在于，由权利要求1至6中任一项所包含的共聚物组成，且平均粒径为1纳米至100微米。8.一种医药组合物，其特征在于，包含作为有效成分的权利要求1至6中任一项所包含的共聚物以及添加剂。9.根据权利要求8所述的医药组合物，其中，上述医药组合物是口服给药剂。10.一种用于预防或治疗肝功能障碍的组合物，其特征在于，作为有效成分包含权利要求1至6中任一项所述的共聚物或权利要求7所述的鸟氨酸微粒。11.一种医药组合物，其特征在于，包含：作为有效成分的权利要求1至6中任一项所包含的共聚物或权利要求7所述的鸟氨酸微粒；和由式(ⅳ)表示的共聚物，式中，a
asp
表示氢原子、未取代或取代c
1-c
12
烷基、未取代或取代c
1-c
12
烷氧基、未取代或取代芳基，被取代的情况下的取代基表示c
1-c4烷基、c
1-c4烷氧基、芳基、甲酰基、式r1r2ch-的基团，其中，r1和r2独立地为c
1-c4烷氧基或者r1和r2合为一体表示-och2ch2o-、-o(ch2)3o-或-o(ch2)4o-，l
asp
表示连接基团，r
asp
是氢原子、取代或未取代的c
1-c
21
烷基、取代或未取代的芳基，这些取代基被取代的情况下的取代基是c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、芳基，y
asp
表示氢原子、c
1-21
烷基羰基、取代c
1-4
烷基羰基、未取代或取代c
3-7
环烷基羰基、未取代或取代芳基羰基、或者未取代或取代5或6元杂芳基羰基，其中，取代c
1-4
烷基羰基的取代基选自由卤素原子、羟基、羧基、未取代或取代c
3-7
环烷基、未取代或取代芳基及未取代或取
代5或6元杂芳基、未取代或取代金刚烷基、未取代或取代胆固醇残基组成的组中，这些取代基被取代的情况下的取代基可以是c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、羟基、羧基、氰基、硝基、卤素原子、或者单或双c
1-4
烷基氨基，m
a
是2～300的整数，n
a
是2～1,000的整数。12.一种医药组合物，其特征在于，包含：作为有效成分的权利要求1至6中任一项所包含的共聚物或权利要求7所述的鸟氨酸微粒；和由式(
ⅴ
)表示的共聚物，式中，a
co
表示氢原子、未取代或取代c
1-c
12
烷基、未取代或取代c
1-c
12
烷氧基、未取代或取代芳基，被取代的情况下的取代基表示c
1-c4烷基、c
1-c4烷氧基、芳基、甲酰基、式r1r2ch-的基团，其中，r1和r2独立地为c
1-c4烷氧基或者r1和r2合为一体表示-och2ch2o-、-o(ch2)3o-或-o(ch2)4o-，n
co
是2～1,000的整数，l
co
表示连接基团，r
asp
是氢原子、取代或未取代的c
1-c
21
烷基、取代或未取代的芳基，这些取代基被取代的情况下的取代基是c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、芳基，m
a
是2～300的整数，r
orn
是氢原子或r
11-(c＝o)-，r
11
各自独立地为取代或未取代的c
1-c
21
烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的c
1-c
21
烷氧基，这些取代基被取代的情况下的取代基是c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、芳基，m
o
是2～300的整数，y
co
表示氢原子、c
1-21
烷基羰基、取代c
1-4
烷基羰基、未取代或取代c
3-7
环烷基羰基、未取代或取代芳基羰基、或者未取代或取代5或6元杂芳基羰基，其中，取代c
1-4
烷基羰基的取代基选自由卤素原子、羟基、羧基、未取代或取代c
3-7
环烷基、未取代或取代芳基及未取代或取代5或6元杂芳基、未取代或取代金刚烷基、未取代或取代胆固醇残基组成的组中，这些取代基被取代的情况下的取代基可以是c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、羟基、羧基、氰基、硝基、卤素原子、或者单或双c
1-4
烷基氨基，其中，m
a
个重复单元和m
o
个重复单元中的各氨基酸各自随机存在而形成另一个嵌段。13.一种医药组合物，其特征在于，包含：作为有效成分的权利要求1至6中任一项所包含的共聚物或权利要求7所述的鸟
氨酸微粒；和由式(ⅵ)表示的共聚物，式中，a
arg
是氢原子、取代或未取代的c
1-c
21
烷基羰基、取代或未取代的芳基羰基、取代或未取代的c
1-c
21
烷氧基羰基，这些取代基被取代的情况下的取代基是c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、芳基，n
g
是2～1,000的整数，l
arg
表示连接基团，r
arg
和r
arg’独立地为氢原子或r
11-(c＝o)-，r
11
各自独立地为取代或未取代的c
1-c
21
烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的c
1-c
21
烷氧基，这些取代基被取代的情况下的取代基是c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、芳基，m
g
是2～300的整数，y
arg
表示氢原子、c
1-21
烷基羰基、取代c
1-4
烷基羰基、未取代或取代c
3-7
环烷基羰基、未取代或取代芳基羰基、或者未取代或取代5或6元杂芳基羰基，其中，取代c
1-4
烷基羰基的取代基选自由卤素原子、羟基、羧基、未取代或取代c
3-7
环烷基、未取代或取代芳基及未取代或取代5或6元杂芳基、未取代或取代金刚烷基、未取代或取代胆固醇残基组成的组中，这些取代基被取代的情况下的取代基可以是c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、羟基、羧基、氰基、硝基、卤素原子、或者单或双c
1-4
烷基氨基。14.一种共聚物，其特征在于，由式(
ⅳ‑
a)表示，a
asp
表示氢原子、未取代或取代c
1-c
12
烷基、未取代或取代c
1-c
12
烷氧基、未取代或取代芳基，被取代的情况下的取代基表示c
1-c4烷基、c
1-c4烷氧基、芳基、甲酰基、式r1r2ch-的基团，其中，r1和r2独立地为c
1-c4烷氧基或r1和r2合为一体表示-och2ch2o-、-o(ch2)3o-或-o(ch2)4o-，l
asp
表示连接基团，
y
asp
表示c
1-21
烷基羰基、取代c
1-4
烷基羰基、未取代或取代c
3-7
环烷基羰基、未取代或取代芳基羰基、或者未取代或取代5或6元杂芳基羰基，其中，取代c
1-4
烷基羰基的取代基选自由卤素原子、羟基、羧基、未取代或取代c
3-7
环烷基、未取代或取代芳基及未取代或取代5或6元杂芳基、未取代或取代金刚烷基、未取代或取代胆固醇残基组成的组中，这些取代基被取代的情况下的取代基可以是c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、羟基、羧基、氰基、硝基、卤素原子、或者单或双c
1-4
烷基氨基，r
asp
是取代或未取代的c
1-c
21
烷基、取代或未取代的芳基，这些取代基被取代的情况下的取代基是c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、芳基，但苄基除外，m
a
是2～300的整数，n
a
是2～1,000的整数。15.一种共聚物，其特征在于，由式(
ⅴ
)表示，式中，a
co
表示氢原子、未取代或取代c
1-c
12
烷基、未取代或取代c
1-c
12
烷氧基、未取代或取代芳基，被取代的情况下的取代基表示c
1-c4烷基、c
1-c4烷氧基、芳基、甲酰基、式r1r2ch-的基团，其中，r1和r2独立地为c
1-c4烷氧基或者r1和r2合为一体表示-och2ch2o-、-o(ch2)3o-或-o(ch2)4o-，n
co
是2～1,000的整数，l
co
表示连接基团，r
asp
是氢原子、取代或未取代的c
1-c
21
烷基、取代或未取代的芳基，这些取代基被取代的情况下的取代基是c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、芳基，m
a
是2～300的整数，r
orn
是氢原子或r
11-(c＝o)-，r
11
各自独立地为取代或未取代的c
1-c
21
烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的c
1-c
21
烷氧基，这些取代基被取代的情况下的取代基是c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、芳基，m
o
是2～300的整数，y
co
表示氢原子、c
1-21
烷基羰基、取代c
1-4
烷基羰基、未取代或取代c
3-7
环烷基羰基、未取代或取代芳基羰基、或者未取代或取代5或6元杂芳基羰基，其中，取代c
1-4
烷基羰基的取代基选自由卤素原子、羟基、羧基、未取代或取代c
3-7
环烷基、未取代或取代芳基及未取代或取代5或6元杂芳基、未取代或取代金刚烷基、未取代或取代胆固醇残基组成的组中，这些取代基被取代的情况下的取代基可以是c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、羟基、羧基、氰基、硝基、卤素原子、或者单或双c
1-4
烷基氨基，
其中，m
a
个重复单元和m
o
个重复单元中的各氨基酸各自随机存在而形成另一个嵌段。16.一种共聚物，其特征在于，由式(
ⅵ‑
a)表示，式中，a
arg
是氢原子、取代或未取代的c
1-c
21
烷基羰基、取代或未取代的芳基羰基、取代或未取代的c
1-c
21
烷氧基羰基，这些取代基被取代的情况下的取代基是c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、芳基，n
g
是2～1,000的整数，l
arg
表示连接基团，r
arg
和r
arg’独立地为r
11-(c＝o)-，r
11
各自独立地为取代或未取代的c
1-c
21
烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的c
1-c
21
烷氧基，这些取代基被取代的情况下的取代基是c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、芳基，但苄基氧基羰基和叔丁基氧基羰基除外，m
g
是2～300的整数，y
arg
表示氢原子、c
1-21
烷基羰基、取代c
1-4
烷基羰基、未取代或取代c
3-7
环烷基羰基、未取代或取代芳基羰基、或者未取代或取代5或6元杂芳基羰基，其中，取代c
1-4
烷基羰基的取代基选自由卤素原子、羟基、羧基、未取代或取代c
3-7
环烷基、未取代或取代芳基及未取代或取代5或6元杂芳基、未取代或取代金刚烷基、未取代或取代胆固醇残基组成的组中，这些取代基被取代的情况下的取代基可以是c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基、羟基、羧基、氰基、硝基、卤素原子、或者单或双c
1-4
烷基氨基。

技术总结
【目的】本发明的目的在于提供一种毒性低、即使口服给药也具有效果且生物利用度高的鸟氨酸的组装体。另外，目的在于提供一种对肝损伤的预防或治疗有效的鸟氨酸组装体。【解决方案】提供一种在聚乙二醇-b-聚鸟氨酸的鸟氨酸侧链氨基中引入了酰基等的缩合物，进而提供一种不依赖于PIC的新的组装体。种不依赖于PIC的新的组装体。


技术研发人员：长崎幸夫 雅罗斯拉夫.李 黄炳龙 甲田优太 丁媛媛
受保护的技术使用者：国立大学法人筑波大学
技术研发日：2021.11.09
技术公布日：2023/8/24