一种组合物及其制备方法和在促进胶原蛋白合成的用途与流程

1.本发明涉及日化用品技术领域，尤其涉及一种组合物及其制备方法和在促进胶原蛋白合成的用途。


背景技术：

2.受到身体内源性老化和紫外线、环境污染等外源性因素的影响，皮肤会随时间逐渐的衰老。衰老的皮肤会出现外观上的变化，如皮肤皱纹、下垂、眼袋、色素沉着等，带来众多皮肤问题，严重影响人们的生活质量。皮肤的衰老本质就是胶原蛋白的流失，胶原蛋白作为细胞外基质的主要成分，能够为细胞提供支架作用，固定支持细胞并为细胞提供适宜的生长环境。胶原蛋白能够参与调控细胞的粘附、增殖、分化、迁移等基本的细胞行为。
3.现有研究表明，人体皮肤至少含有9种不同型胶原蛋白，包括i型、iii型、v型、iv型、vi型、xii型、vii型、xvii型和xviii型胶原蛋白。i型胶原蛋白约占皮肤真皮层80％的比重，使得皮肤饱满充盈。ⅲ型胶原，属于原纤维形成型胶原，占真皮胶原的10％，与i型胶原及v型胶原相结合形成胶原纤维束，主要分布于真皮层的乳头状区和网状区。v型是原纤维形成型胶原的一种，主要分布于网状区和乳头状区，在正常皮肤中，v型胶原存在于整个真皮层，在真皮层乳头、毛囊和汗腺周围表达较高。iv型胶原蛋白是真表皮连接处的关键蛋白。vi型胶原蛋白是微纤维胶原的一种，在调节胶原纤维组装过程中起到重要作用，vi型胶原蛋白的缺乏会导致胶原纤维走向排布不规则。xii型胶原蛋白主要分布于网状区和乳头状区域，是原纤维相关型胶原的一种，xii型胶原蛋白的缺乏会导致乳头状结构的损伤。vii型胶原是分布于真表皮连接处的一种锚定纤维胶原，起到将表皮固定到真皮层的作用。xvii型胶原，是一种同源三聚体，属于跨膜胶原蛋白，是半粒体的重要组成部分。这些胶原蛋白在维持皮肤的紧致和抗皱方面都有着重要的作用。尽管市面上有很多主打促进皮肤胶原再生的化妆品活性成分/产品，但是却没有能够同时促进多种皮肤胶原再生的化妆品活性成分/产品的报道。
4.现有技术，如专利申请cn115417843a、cn114191349a、cn113197808a、cn111671667a和cn109529115a，各自公开了其产品具有促进胶原蛋白合成的作用，但是促进胶原蛋白的合成种类有限，对皮肤的修复效果不佳。
5.鉴于此，提供一种同时促进多种皮肤胶原蛋白合成再生的组合物，有十分重要的意义。


技术实现要素：

6.为解决上述技术问题，本发明提供了一种组合物及其制备方法和在促进胶原蛋白合成的用途。本发明的组合物可以促进皮肤细胞的i型、iii型、v型、iv型、vi型、xii型、vii型和xvii型胶原蛋白的合成再生，从根源上解决对内源性老化、紫外线、环境污染等因素导致的皮肤衰老的问题，显著的改善皮肤衰老，使用后皮肤的水分含量、弹性、鱼尾纹的指标均得到了改善，无毒副作用，应用安全。
7.本发明的针对现有技术中传统的方法不能同时促进多种皮肤胶原蛋白合成再生的技术问题，根据具体实施方式提供了一种组合物，由以下质量份数的原料组成：
8.酵母菌溶胞物提取物10-30份、胶原蛋白1-10份和胶原蛋白肽0.01-1份。
9.根据本发明具体实施方式提供的组合物，所述胶原蛋白为可溶性胶原蛋白。
10.根据本发明具体实施方式提供的组合物，所述胶原蛋白肽为六肽-9。
11.根据本发明具体实施方式提供的组合物，所述酵母菌溶胞物提取物中含有6.6-7.4g/l的γ-氨基丁酸和3.0-3.5g/l的β-葡萄糖。
12.本发明中，酵母菌溶胞物提取物由公开号cn114292763a公开了的酿酒酵母(保藏编号为cctcc no:m 20211406)的溶胞物提取物，其富含β-葡萄糖和γ-氨基丁酸，具有保湿、抗氧化、抗衰老和修复紫外线损伤的作用，另据证实，该酵母菌溶胞物提取物能够提高糖化终末产物的清楚力，还具有抑制黑色素细胞的络氨酸酶活力和黑色素合成的能力；六肽-9是一种海洋胶原蛋白寡肽，能够有效提升i型、iii型、iv型和xvii型胶原蛋白的合成；可溶性胶原蛋白作为人体内源性物质，生物相容性良好，能够促进细胞的粘附与增值，还能促进i型、iii型、iv型和vii型胶原蛋白合成；酵母菌溶胞物提取物、可溶性胶原蛋白和六肽-9制成的组合物，协同配合促进皮肤细胞的i型、iii型、v型、iv型、vi型、xii型、vii型和xvii型胶原蛋白的合成再生。
13.根据本发明具体实施方式，本发明同时提供了一种前述组合物的制备方法，包括以下步骤：
14.分别取选定质量份的酵母菌溶胞物提取物、胶原蛋白和胶原蛋白肽，混合均匀，即得。
15.根据本发明具体实施方式，本发明同时提供了一种包括上述组合物的制剂。
16.根据本发明具体实施方式提供的制剂，所述组合物的用量为5-20wt％。
17.根据本发明具体实施方式提供的制剂，所述组合物中加入辅料，制成水剂、乳液、膏霜、精华液或面膜。
18.根据本发明具体实施方式，本发明同时提供了一种上述的组合物在制备化妆品或护肤品中的应用。
19.根据本发明具体实施方式，本发明同时提供了一种上述的组合物在制备促进皮肤胶原蛋白合成药物中的用途。
20.与现有技术相比，本发明的有益效果是：
21.本发明的组合物可以促进皮肤细胞的i型、iii型、v型、iv型、vi型、xii型、vii型和xvii型胶原蛋白的合成再生，从根源上解决对内源性老化、紫外线、环境污染等因素导致的皮肤衰老的问题，显著的改善皮肤衰老，使用后皮肤的水分含量、弹性、鱼尾纹的指标均得到了改善，无毒副作用，应用安全。
具体实施方式
22.为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明的技术方案进行详细的描述。显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所得到的所有其它实施方式，都属于本发明所保护的范围。
23.实施例
24.本实施例提供一种组合物，由以下质量份数的原料组成：
25.酵母菌溶胞物提取物10-30份、胶原蛋白1-10份和胶原蛋白肽0.01-1份。
26.在一些实例中，所述胶原蛋白为可溶性胶原蛋白。
27.在一些实例中，所述胶原蛋白肽为六肽-9。
28.在一些实例中，所述酵母菌溶胞物提取物中含有不少于7.4g/l的γ-氨基丁酸和不少于3.5g/l的β-葡萄糖。
29.本实施例提供了一种上述组合物的制备方法，包括以下步骤：
30.分别取选定质量份的酵母菌溶胞物提取物、胶原蛋白和胶原蛋白肽，混合均匀，即得。
31.在一些实例中，制备上述组合物在常温(25-30℃)下混合制成。
32.本实施例还提供一种包括上述的组合物的制剂。
33.在一些实例中，所述组合物的用量为5-20wt％。
34.在一些实例中，所述组合物中加入辅料，制成水剂、乳液、膏霜、精华液或面膜。
35.在一些实例中，该组合物可以与其他改善/修复皮肤的功能性组合物复配混合后使用，例如由氢化卵磷脂、红没药醇、甘草酸二钾、神经酰胺、双丙甘醇、1,3～丙二醇、油脂和水制备的具有抗炎舒缓效果的微乳液。
36.本实施例还提供了一种上述组合物在制备化妆品或护肤品中的应用。
37.本实施例还提供了一种上述组合物在制备促进皮肤多种胶原蛋白合成药物中的用途；多种胶原蛋白是指：i型胶原蛋白、iii型胶原蛋白、v型胶原蛋白、iv型胶原蛋白、vi型胶原蛋白、xii型胶原蛋白、vii型胶原蛋白和xvii型胶原蛋白。
38.为进一步证明本发明的组合物及其制剂在促进多种皮肤胶原蛋白合成的作用、以及该组合物制作为化妆品制剂在改善皮肤衰老的效果，提供了如下实验例和性能测试：
39.实验例1
40.本实验例提供一种具有促进多种皮肤胶原蛋白合成的组合物，由以下质量的原料在常温下混合而成：
41.酵母菌溶胞物提取物20g、可溶性胶原蛋白5g和六肽-90.05g。
42.其中，酵母菌溶胞物提取物中γ-氨基丁酸的含量为6.9g/l，β-葡萄糖的含量为3.3g/l。
43.实验例2
44.本实验例提供一种具有促进多种皮肤胶原蛋白合成的组合物，由以下质量的原料在常温下混合而成：
45.酵母菌溶胞物提取物30g、可溶性胶原蛋白2g和六肽-9 0.01g。
46.其中，酵母菌溶胞物提取物中γ-氨基丁酸的含量为6.9g/l，β-葡萄糖的含量为3.3g/l。
47.实验例3
48.本实验例提供一种具有促进多种皮肤胶原蛋白合成的组合物，由以下质量的原料在常温下混合而成：
49.酵母菌溶胞物提取物12g、可溶性胶原蛋白28g和六肽-9 1g。
50.其中，酵母菌溶胞物提取物中γ-氨基丁酸的含量为6.9g/l，β-葡萄糖的含量为3.3g/l。
51.实验例4
52.本实验例提供一种包含实验例1组合物的精华液，该精华液中该组合物的含量为9.85wt％，其他辅料包括：水3312g、edta二钠1g、海藻糖50g、尿囊素5g、甘草酸二钾5g、聚乙二醇-75 50g、鲸蜡硬脂醇橄榄油酸酯25g、甘油250g、乙酰壳糖胺95g、对羟基苯乙酮25g、己二醇25g、双-peg-18甲基醚二甲基硅烷25g、丁二醇250g、精氨酸8.5g、丙烯酸羟乙酯/丙烯酰二甲基牛磺酸钠20g、霍霍巴籽油190g、环五聚二甲基硅氧烷150g、生育酚5g和聚丙烯酸酯/c10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物8.5g。
53.制备该精华液的步骤包括：
54.1)称取2462g的水、1g的edta二钠、50g的海藻糖、5g的尿囊素、5g的甘草酸二钾、50g的聚乙二醇-75、25g的鲸蜡硬脂醇橄榄油酸酯、250g的甘油、95g的乙酰壳糖胺、25g的对羟基苯乙酮、25g的己二醇、25g的双-peg-18甲基醚二甲基硅烷、250g的丁二醇、8.5g的精氨酸和20g的丙烯酸羟乙酯/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物，主锅中，70℃下搅拌溶解混合均匀；
55.2)称取190g的霍霍巴籽油、150g的环五聚二甲基硅氧烷和5g的生育酚混合均匀后，投入主锅，1500-3000rpm下均质搅拌10min，溶解完全后，开始降温；
56.3)待主锅降温至45℃，加入850g的水和8.5g的聚丙烯酸酯/c10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物，1500-3000rpm下均质搅拌3min，搅拌混合均匀；
57.4)称取500g实验例1的组合物，加入主锅，1500-3000rpm下均质搅拌3min，搅拌均匀后，降温至37-40℃出料，即得含有组合物的精华液。
58.性能测试
59.一、实验例1-3组合物处境多种皮肤胶原蛋白合成的效果
60.分组说明：阴性对照组、模型对照组、阳性对照组和实验组(实验例1-3组合物)，每组设置3个重复。
61.试验方法：收集对出对数生长期的成纤维细胞(由广东博溪生物科技有限公司提供，生产批号：fb19052002)按照细胞密度为2
×
105个/孔接种至6孔板，在37℃、5％二氧化碳培养箱中孵育过夜；待6孔板中细胞铺板率达到30％～50％时，进行分组给药；其中，阳性对照组加入100ng/ml的tgf-β1，实验组分别加入0.625％的实施例1-3制备的组合物，模型对照组和阴性对照组不做任何处理，每孔给药量为2ml；在37℃、5％二氧化碳培养箱中孵育24h后，模型对照组、阳性对照组和实验组采用30j/cm2的uva辐照，阴性对照组不做任何处理；在培养箱培养24h后，吸弃旧液，pbs清洗2次，每孔加入1ml的rnaisoplus，吹打裂解细胞后，提取rna，反转录至cdna后，进行荧光定量pcr检测，采用2-△△
ct
方法进行结果计算。
62.荧光定量pcr检测的引物序列如表1所示。
63.表1
[0064][0065][0066]
前述胶原蛋白的荧光定量pcr检测结果如表2所示。
[0067]
表2
[0068][0069]
由表2可见，与阴性对照组相比，经uva辐射后，模型对照组的i型、iii型、v型、iv型、vi型、xii型、vii型和xvii型胶原蛋白的基因表达量均显著下调，表明uva辐射后，合成前述8种胶原蛋白收到抑制；与模型对照组相比，实施例1-3组合物在0.625％浓度下，i型、iii型、v型、iv型、vi型、xii型、vii型和xvii型胶原蛋白的基因表达量均显著上调，表明能够促进上述8种胶原蛋白的合成，可以克服uva辐射对胶原蛋白合成的抑制作用。
[0070]
二、实验例4精华液的安全性试验
[0071]
试验方法：1、基于iso11930：2019《化妆品-微生物学-化妆品产品抗菌防护评定》检测实验例4精华液的防腐效力；
[0072]
2、基于gb/t 31470-2015《化妆品安全技术规范》检测实验例4精华液中重金属(汞、铅、砷、镉)浓度、风险物质(二噁烷)浓度及微生物安全性；基于gb/t 21842-2008《牙膏中二甘醇的测定》检测实验例4精华液中二甘醇的浓度。
[0073]
实验结果：实验例4精华液防腐效力测试的检测结果如表3所示；实验例4精华液重金属及风险物质的检测结果如表4所示；实验例4精华液微生物检测结果如表5所示。
[0074]
表3实验例4精华液防腐功效测试结果
[0075][0076][0077]
表4实验例4精华液重金属及风险物质检测结果
[0078]
检验项目方法检出浓度限值检验结果汞(mg/kg)0.0050≤1mg/kg未检出铅(mg/kg)0.50≤10mg/kg未检出砷(mg/kg)0.050≤2mg/kg未检出镉(mg/kg)0.59≤5mg/kg未检出二噁烷(mg/kg)3＜30mg/kg未检出二甘醇(mg/kg)30＜200mg/kg未检出
[0079]
表5实验例4精华液微生物检测结果
[0080]
检验项目限值检验结果
菌落总数(cfu/ml)≤1000＜10霉菌和酵母菌总数(cfu/ml)≤100＜10耐热大肠菌群(cfu/ml)不得检出未检出金黄色葡萄球菌(cfu/ml)不得检出未检出铜绿假单细胞(cfu/ml)不得检出未检出
[0081]
由表4-5可见，实验例4的精华液中重金属、风险物质均未检出，微生物指标符合标准，具有较好的防腐效力。
[0082]
三、实验例4精华液的皮肤功效检测
[0083]
试验对象：招募35名志愿者，年龄18到45岁，女性，自认为面部皮肤粗糙、暗沉。
[0084]
试验方法：每位志愿者每次使用7滴实验例4精华液，全脸使用除精华液外日常的其他护肤产品，且应保证其品牌和使用方式不变；每位志愿者每天早晚各使用1次精华液，连续使用4周；在精华液使用前、连续使用2周后和连续使用4周后，对随机一侧脸颊进行角质层水分含量(corneometer cm825)检测、皮肤弹性(cutometer dual mpa580)检测和对两侧眼角区、两侧眼下区域进行皮肤皱纹测试(primos-cr)检测，检测结果取平均值。
[0085]
实验例4精华液皮肤功效检测的测试结果如表6所示。
[0086]
表6实验例4精华液皮肤功效检测的测试结果
[0087][0088]
注：表6中皮肤水分含量数值越大，表示皮肤角质层水分含量越高；皮肤弹性的总弹性r2、静弹性r5和生物弹性r7的数值越大，表示皮肤弹性度越好；皮肤紧致度的数值越小，表示皮肤紧致度越好。
[0089]
由表6可见，使用实验例4精华液两周和四周后，面部皮肤的水分含量均显著性改善，分别提升了6.56和9.40；使用2周的皮肤弹性指标相较于使用前的改善率分别为4.66％、8.89％和15.10％，使用4周的皮肤弹性指标的改善率分别相较于使用前的改善率分别为19.95％、29.64％和36.00％；精华液使用2周和4周，相较于使用前，改善率分别为9.51％和11.73％；皮肤皱纹的平均深度、数量、体积、面积和长度指标在使用2周，相较于使用前，改善率为7.93％、10.99％、15.35％和10.89％，使用4周，改善率为11.26％、13.19％、24.51％和19.64％；皮肤功效检测试验表明：添加了酵母菌溶胞物提取物、胶原蛋白和胶原蛋白肽的精华液对皮肤的水分含量、弹性、紧致度以及皱纹有显著的改善作用。
[0090]
本发明还制备了含有实施例1的、浓度在5％-20％区间的组合物的多种精华液，并进行了上述抗衰效果测试，实验结果与含10％实施例1制备的精华液的结果一致，表现出提
升皮肤弹性、紧致度和改善眼角皱纹的效果，由于篇幅限制，此处不一一赘述
[0091]
以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

技术特征：
1.一种组合物，其特征在于，由以下质量份数的原料组成：酵母菌溶胞物提取物10-30份、胶原蛋白1-10份和胶原蛋白肽0.01-1份。2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述胶原蛋白为可溶性胶原蛋白。3.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述胶原蛋白肽为六肽-9。4.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述酵母菌溶胞物提取物中含有6.6-7.4g/l的γ-氨基丁酸和3.0-3.5g/l的β-葡萄糖。5.一种如权利要求1-4任一项所述的组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：分别取选定质量份的酵母菌溶胞物提取物、胶原蛋白和胶原蛋白肽，混合均匀，即得。6.一种包括权利要求1-4任一项所述的组合物的制剂。7.根据权利要求6所述的制剂，其特征在于，所述组合物的用量为5-20wt％。8.根据权利要求6所述的制剂，其特征在于，所述组合物中加入辅料，制成水剂、乳液、膏霜、精华液或面膜。9.一种如权利要求1-4任一项所述的组合物在制备化妆品或护肤品中的应用。10.一种如权利要求1-4任一项所述的组合物在制备促进皮肤胶原蛋白合成药物中的用途。

技术总结
本发明涉及日化用品技术领域，尤其涉及一种组合物及其制备方法和在促进胶原蛋白合成的用途。该组合物由以下质量份数的原料组成：酵母菌溶胞物提取物10-30份、胶原蛋白1-10份和胶原蛋白肽0.01-1份。本发明还公开了该组合物的制备方法和在促进多种胶原蛋白合成中的用途。本发明的组合物可以促进皮肤细胞的I型、III型、V型、IV型、VI型、XII型、VII型、XVII型和XVIII型胶原蛋白的合成再生，从根源上解决对内源性老化、紫外线、环境污染等因素导致的皮肤衰老的问题，显著的改善皮肤衰老，使用后皮肤的水分含量、弹性、鱼尾纹的指标均得到了改善，无毒副作用，应用安全。应用安全。


技术研发人员：樊雨梅 魏春花 廖峰 李金华
受保护的技术使用者：时垠（上海）生物科技有限公司
技术研发日：2023.06.15
技术公布日：2023/8/24