一种中性环境水溶性脱细胞真皮基质材料、其制备方法以及其应用与流程

1.本发明涉及医用材料、医疗美容、食品及化妆品领域，具体涉及一种中性环境水溶性脱细胞真皮基质材料、其制备方法以及其应用。


背景技术：

2.脱细胞真皮基质(acellular dermal matrix,adm)是通过物理、化学及酶处理的方式，获得的一种具有细胞外基质特征的材料，其主要成份包括胶原蛋白、纤维蛋白、层粘连蛋白、糖胺聚糖及生长因子，其三维多孔网络结构、具有良好的生物相容性，较低的免疫原性是细胞生长和组织修复良好的基质材料，并已在组织工程中发现其良好的再生能力。
3.胶原蛋白是构成脱细胞真皮基质的主要成份，其占比为25～35％，是广泛存在人与动物的组织中。研究发现，保留三螺旋结构的胶原蛋白具有更高的生物活性，目前提取具有三螺旋结构的胶原蛋白主要通过酶水解的方式，该方式获得的胶原蛋白在中性环境中不具备水溶性，仅能在酸性ph条件下溶解。
4.中国专利(公开号：cn 113736841a)公开了一种能够使i型胶原蛋白在中性环境下溶解的方法，该方法于水解后的胶原溶液中加入丁二酸酐或戊二酸酐或己二酸酐，通过对胶原修饰来提高胶原蛋白的水溶性，虽然该方式提高了i型胶原蛋白的水溶性，但相对复杂的工艺及酸酐自身存在一定的毒性，限制其进一步的扩大生产
5.因此，本发明中提出了一种中性环境水溶性脱细胞真皮基质材料的制备方法，不需额外进行化学修饰，仅需控制原料浓度及离心转速，即可提取出具有能在中性环境下具有良好水溶性的脱细胞真皮基质材料。


技术实现要素：

6.针对上述不足，本发明的目的是提供一种中性环境水溶性脱细胞真皮基质材料、其制备方法以及其应用。
7.本发明提供了如下的技术方案：
8.一种中性环境水溶性脱细胞真皮基质材料的制备方法，具体步骤包括如下：
9.步骤s1.将脱细胞真皮基质(adm)原料溶解于盐酸溶液中，加入酶消化，室温下搅拌直至消化完成；
10.步骤s2.采用氢氧化钠中和溶液至ph＝7.4，加入pbs溶液进行稀释；
11.步骤s3.将稀释后的溶液于4℃离心，收集上层清液于pbs溶液中透析，透析后的样品冻干后即可得到中性环境下水溶性脱细胞真皮基质材料。
12.作为一种中性环境水溶性脱细胞真皮基质材料的制备方法的优选技术方案，步骤s1中所述脱细胞真皮基质原料为块状、颗粒或粉末式。
13.作为一种中性环境水溶性脱细胞真皮基质材料的制备方法的优选技术方案，步骤s1中所述盐酸浓度为0.01～0.1mol/l，其ph小于4.0。
14.作为一种中性环境水溶性脱细胞真皮基质材料的制备方法的优选技术方案，步骤s1中所述酶为胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、枯草甘菌蛋白酶和复合蛋白酶中的一种或几种，所述酶的整体活力为10～18万iu/g。
15.作为一种中性环境水溶性脱细胞真皮基质材料的制备方法的优选技术方案，步骤s1中，所述脱细胞真皮基质和酶加入量的质量比为5～200。
16.作为一种中性环境水溶性脱细胞真皮基质材料的制备方法的优选技术方案，步骤s1中，酶消化时间为2～48h。
17.作为一种中性环境水溶性脱细胞真皮基质材料的制备方法的优选技术方案，步骤s2中，所述氢氧化钠浓度为0.1～1mol/l，稀释后的样品浓度为6～8mg/l。
18.作为一种中性环境水溶性脱细胞真皮基质材料的制备方法的优选技术方案，步骤s3中，离心转速为5000～10000rpm，离心时间为20～50min。
19.作为一种中性环境水溶性脱细胞真皮基质材料的制备方法的优选技术方案，步骤s3中，所用透析袋截留分子量为1000～4000da，所用透析液为0.5和0.25
×
pbs和去离子水，透析时间为36～96h。
20.本发明的有益效果是：本发明以脱细胞真皮基质为原料，采用本发明方法获得中性条件下能够完全溶解于水的脱细胞真皮基质材料。产品不需经额外的修饰，仅通过控制溶液浓度及离心条件即可获得，所得产品中包含胶原、蛋白、多糖及生长因子成份，还保留了胶原三螺旋结构的构像，克服了传统胶原蛋白材料在中性条件下不溶的问题，实现了脱细胞真皮基质材料在医用材料、医疗美容、食品及化妆品领域的应用。
附图说明
21.附图用来提供对本发明的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与本发明的实施例一起用于解释本发明，并不构成对本发明的限制。在附图中：
22.图1是实施例1-6获得的样品在水溶液中的溶解图；
23.图2是实施例1-6获得的每一个步骤中样品的蛋白含量图；
24.图3是实施例1-6获得的样品的sgag含量图；
25.图4是实施例1-6获得的样品的dsdna含量图；
26.图5是实施例1-6获得的样品的蛋白分子量分布图；
具体实施方式
27.为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合说明书实施例对本发明的具体实施方式做详细的说明。
28.在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明，但是本发明还可以采用其他不同于在此描述的其它方式来实施，本领域技术人员可以在不违背本发明内涵的情况下做类似推广，因此本发明不受下面公开的具体实施例的限制。
29.其次，此处所称的“一个实施例”或“实施例”是指可包含于本发明至少一个实现方式中的特定特征、结构或特性。在本说明书中不同地方出现的“在一个实施例中”并非均指同一个实施例，也不是单独的或选择性的与其他实施例互相排斥的实施例。
30.测试方法：
31.1.溶解性测试：将步骤3制备的冻干后的粉末(adm提取物)用去离子水配置成浓度为1mg/ml的溶液，用肉眼观察溶解性；
32.2.样品的蛋白浓度、sgag含量、dsdna含量均通过相应的试剂盒进行测试；
33.3.样品的蛋白分子量通过聚丙烯酰胺凝胶电泳法(sds-pa ge)进行测试；
34.4.产率测试：步骤3中制备的adm提取物的冻干粉末的重量记为m1，步骤1中的脱细胞真皮基质颗粒记为m0，m1与m0的比值为制备的adm提取物产率。
35.实施例0-1
36.步骤1.将5.03g脱细胞真皮基质颗粒浸泡于pbs缓冲液中，直至颗粒完全吸水并沉淀于烧杯底部，弃去上层溶液，得到100.25g湿重的脱细胞真皮基质；向烧杯中加入100ml、0.01mol/l的盐酸溶液中，并向其中加入103.1mg胃蛋白酶，室温下搅拌消化6h；
37.步骤2.消化完成后，样品静置30min后，取上层清液于离心管中，向清液中加入0.01mol/l的氢氧化钠溶液，调节溶液ph至7.4，并加pbs缓冲液将凝胶溶液稀释至3mg/ml；
38.步骤3.将稀释后的溶液在4℃环境下，8000rpm下离心35min，取上层清液，装入透析袋中，在0.5
×
pbs溶液中透析24h，随后在0.25
×
pbs中透析24h，再使用去离子水透析24h，透析中每隔12h更换一次透析液。透析完成后，取上层透析液冻干，研磨成粉后4℃保存；
39.步骤4.将步骤3冻干后的粉末用去离子水配置成浓度为1mg/ml的溶液。
40.实施例0-2
41.本实施例中与实施例0-1中步骤相同，只是在步骤s2中凝胶溶液稀释至4mg/ml。
42.实施例0-3
43.本实施例中与实施例0-1中步骤相同，只是在步骤s2中凝胶溶液稀释至5mg/ml。
44.实施例0-4
45.本实施例中与实施例0-1中步骤相同，只是在步骤s2中凝胶溶液稀释至6mg/ml。
46.实施例0-5
47.本实施例中与实施例0-1中步骤相同，只是在步骤s2中凝胶溶液稀释至8mg/ml。
48.实施例0-6
49.本实施例中与实施例0-1中步骤相同，只是在步骤s2中凝胶溶液稀释至10mg/ml。
50.实施例0-7
51.本实施例中与实施例0-1中步骤相同，只是在步骤s2中凝胶溶液稀释至12mg/ml。
52.实施例0-8
53.本实施例中与实施例0-5中步骤相同，只是在步骤s3中离心转速为1000rpm。
54.实施例0-9
55.本实施例中与实施例0-5中步骤相同，只是在步骤s3中离心转速为3000rpm。
56.实施例0-10
57.本实施例中与实施例0-5中步骤相同，只是在步骤s3中离心转速为5000rpm。
58.实施例0-11
59.本实施例中与实施例0-5中步骤相同，只是在步骤s3中离心转速为10000rpm。
60.实施例0-12
61.本实施例中与实施例0-5中步骤相同，只是在步骤s3中离心转速为12000rpm。
62.实施例0-13
63.本实施例中与实施例0-5中步骤相同，只是在步骤s3中离心转速为15000rpm。
64.实施例0-14
65.本实施例中与实施例0-11中步骤相同，只是在步骤s3中离心时间为10min。
66.实施例0-15
67.本实施例中与实施例0-11中步骤相同，只是在步骤s3中离心时间为20min。
68.实施例0-16
69.本实施例中与实施例0-11中步骤相同，只是在步骤s3中离心时间为30min。
70.实施例0-17
71.本实施例中与实施例0-11中步骤相同，只是在步骤s3中离心时间为40min。
72.实施例0-18
73.本实施例中与实施例0-11中步骤相同，只是在步骤s3中离心时间为50min。
74.实施例0-19
75.本实施例中与实施例0-11中步骤相同，只是在步骤s3中离心时间为60min。
76.实施例0-20
77.本实施例中与实施例0-11中步骤相同，只是在步骤s3中离心时间为70min。
78.实施例0-21
79.本实施例中与实施例0-11中步骤相同，只是在步骤s3中离心时间为80min。
80.表1实施例1至21制备的adm提取物的实验数据
81.[0082][0083]
从表1中的数据可以得出，步骤2中样品浓度过高时，由于样品中黏度增加，离心效果变差，不能很好的对adm提取物进行有效分离，因此溶解性降低，从而导致在去离子水中溶解时会有絮状物出现，随着样品浓度的逐渐降低，adm提取物溶解性会有显著的提高，并且随着样品浓度的逐渐降低，产率和蛋白浓度会呈现先增大后降低的趋势，稀释后的样品浓度为6～8mg/l时，产率和蛋白浓度达到最佳值；随着离心转速的逐渐增大，对样品的分离能力逐渐提高，并且随着转速的逐渐增大，蛋白浓度会逐渐降低，产率先增大后减小，离心转速为5000～10000rpm时，蛋白浓度为359至378ug/ml，产率为20.7至17.9％，当离心转速达到15000rpm时，adm提取物溶解性虽然较好，但由于过度离心，最终的产率变的很低；最后，随着离心时间的增大，蛋白浓度及产率会呈逐渐降低的趋势，离心时间为20～50min时，蛋白浓度为378至578ug/ml，产率为18.2至19.6％。
[0084]
实施例1
[0085]
步骤1.将5.03g脱细胞真皮基质颗粒浸泡于pbs缓冲液中，直至颗粒完全吸水并沉淀于烧杯底部，弃去上层溶液，得到100.25g湿重的脱细胞真皮基质；向烧杯中加入100ml、0.01mol/l的盐酸溶液中，并向其中加入103.1mg胃蛋白酶，室温下搅拌消化6h；
[0086]
步骤2.消化完成后，样品静置30min后，取上层清液于离心管中，向清液中加入0.01mol/l的氢氧化钠溶液，调节溶液ph至7.4，并加入pbs缓冲液将凝胶溶液稀释至9mg/ml；
[0087]
步骤3.将稀释后的溶液在4℃环境下，8000rpm下离心35min，取上层清液，装入透析袋中，在0.5
×
pbs溶液中透析24h，随后在0.25
×
pbs中透析24h，再使用去离子水透析24h，透析中每隔12h更换一次透析液。透析完成后，取上层透析液冻干，研磨成粉后4℃保存；
[0088]
步骤4.将步骤3冻干后的粉末用去离子水配置成浓度为1mg/ml的溶液。
[0089]
实验数据：
[0090]
步骤4制备的溶液的溶解性结果见图1(a)；
[0091]
步骤1、2、和3中制备样品的蛋白含量测试结果见图2；
[0092]
步骤4制备的溶液的sgag含量见图3；
[0093]
步骤4制备的溶液的dsdna含量见图4；
[0094]
步骤4制备的溶液的蛋白分子量分布见图5。
[0095]
实施例2
[0096]
步骤1.将4.97g脱细胞真皮基质颗粒浸泡于pbs缓冲液中，直至颗粒完全吸水并沉淀于烧杯底部，弃去上层溶液，得到100.25g湿重的脱细胞真皮基质；向烧杯中加入100ml、0.01mol/l的盐酸溶液中，并向其中加入133.1mg木瓜蛋白酶，室温下搅拌消化46h；
[0097]
步骤2.消化完成后，样品静置30min后，取上层清液于离心管中，向清液中加入
0.01mol/l的氢氧化钠溶液，调节溶液ph至7.4，并加入pbs缓冲液将凝胶溶液稀释至6.5mg/ml；
[0098]
步骤3.将稀释后的溶液在4℃环境下，9000rpm下离心20min，取上层清液，装入透析袋中，在0.5
×
pbs溶液中透析24h，随后在0.25
×
pbs中透析24h，再使用去离子水透析24h，透析中每隔12h更换一次透析液。透析完成后，取上层透析液冻干，研磨成粉后4℃保存；
[0099]
步骤4.将步骤3冻干后的粉末用去离子水配置成浓度为1mg/ml的溶液。
[0100]
实验数据
[0101]
步骤4制备的溶液的溶解性结果见图1(b)；
[0102]
步骤1、2、和3中制备样品的蛋白含量测试结果见图2；
[0103]
步骤4制备的溶液的sgag含量见图3；
[0104]
步骤4制备的溶液的dsdna含量见图4；
[0105]
步骤4制备的溶液的蛋白分子量分布见图5。
[0106]
实施例3
[0107]
步骤1.将5.15g脱细胞真皮基质颗粒浸泡于pbs缓冲液中，直至颗粒完全吸水并沉淀于烧杯底部，弃去上层溶液，得101.33g湿重的脱细胞真皮基质；向烧杯中加入100ml、0.01mol/l的盐酸溶液中，并向其中加入80.1mg胃蛋白酶,30.3mg木瓜蛋白酶及12.8mg枯草甘菌蛋白酶，室温下搅拌消化20h；
[0108]
步骤2.消化完成后，样品静置30min后，取上层清液于离心管中，向清液中加入0.01mol/l的氢氧化钠溶液，调节溶液ph至7.4，并加入pbs缓冲液将凝胶溶液稀释至6mg/ml；
[0109]
步骤3.将稀释后的溶液在4℃环境下，7500rpm下离心30min，取上层清液，冻干，研磨成粉后4℃保存；
[0110]
步骤4.将步骤3冻干后的粉末用去离子水配置成浓度为1mg/ml的溶液。
[0111]
实验数据
[0112]
步骤4制备的溶液的溶解性结果见图1(c)；
[0113]
步骤1、2和3中制备样品的蛋白含量测试结果见图2；
[0114]
步骤4制备的溶液的sgag含量见图3；
[0115]
步骤4制备的溶液的dsdna含量见图4；
[0116]
步骤4制备的溶液的蛋白分子量分布见图5。
[0117]
实施例4
[0118]
步骤1.将5.20g脱细胞真皮基质颗粒浸泡于pbs缓冲液中，直至颗粒完全吸水并沉淀于烧杯底部，弃去上层溶液，得到93.15g湿重的脱细胞真皮基质；向烧杯中加入100ml、0.01mo l/l的盐酸溶液中，并向其中加入90.1mg复合蛋白酶，室温下搅拌消化30h；
[0119]
步骤2.消化完成后，样品静置30min后，取上层清液于离心管中，向清液中加入0.01mol/l的氢氧化钠溶液，调节溶液ph至7.4，并加入pbs缓冲液将凝胶溶液稀释至7mg/ml；
[0120]
步骤3.将稀释后的溶液在4℃环境下，5000rpm下离心60min，取上层清液，装入透析袋中，在0.5
×
pbs溶液中透析24h，随后在0.25
×
pbs中透析24h，再使用去离子水透析
24h，透析中每隔12h更换一次透析液。透析完成后，取上层透析液冻干，研磨成粉后4℃保存。
[0121]
步骤4.将步骤3冻干后的粉末用去离子水配置成浓度为1mg/ml的溶液。
[0122]
实验数据
[0123]
步骤4制备的溶液的溶解性结果见图1(d)；
[0124]
步骤1、2、和3中制备样品的蛋白含量测试结果见图2；
[0125]
步骤4制备的溶液的sgag含量见图3；
[0126]
步骤4制备的溶液的dsdna含量见图4；
[0127]
步骤4制备的溶液的蛋白分子量分布见图5。
[0128]
实施例5
[0129]
步骤1.将5.01g脱细胞真皮基质颗粒浸泡于pbs缓冲液中，直至颗粒完全吸水并沉淀于烧杯底部，弃去上层溶液，得到93.15g湿重的脱细胞真皮基质；向烧杯中加100ml、0.01mol/l的盐酸溶液中，并向其中加入60.1mg胃蛋白酶，15.2mg枯草甘菌蛋白酶，室温下搅拌消化12h；
[0130]
步骤2.消化完成后，样品静置30min后，取上层清液于离心管中，向清液中加入0.01mol/l的氢氧化钠溶液，调节溶液ph至7.4，并加入pbs缓冲液将凝胶溶液稀释至6.2mg/ml；
[0131]
步骤3.将稀释后的溶液在4℃环境下，6500rpm下离心40min，取上层清液，装入透析袋中，在0.5
×
pbs溶液中透析24h，随后在0.25
×
pbs中透析24h，再使用去离子水透析24h，透析中每隔12h更换一次透析液。透析完成后，取上层透析液冻干，研磨成粉后4℃保存；
[0132]
步骤4.将步骤3冻干后的粉末用去离子水配置成浓度为1mg/ml的溶液。
[0133]
实验数据
[0134]
步骤4制备的溶液的溶解性结果见图1(e)；
[0135]
步骤1、2、和3中制备样品的蛋白含量测试结果见图2；
[0136]
步骤4制备的溶液的sgag含量见图3；
[0137]
步骤4制备的溶液的dsdna含量见图4；
[0138]
步骤4制备的溶液的蛋白分子量分布见图5。
[0139]
实施例6
[0140]
步骤1.将5.0g脱细胞真皮基质颗粒浸泡于pbs缓冲液中，直至颗粒完全吸水并沉淀于烧杯底部，弃去上层溶液，得到93.15g湿重的脱细胞真皮基质；向烧杯中加入100ml、0.01mol/l的盐酸溶液中，并向其中加入100.1mg胃蛋白酶，15.2mg枯草甘菌蛋白酶，室温下搅拌消化24h；
[0141]
步骤2.消化完成后，样品静置30min后，取上层清液于离心管中，向清液中加入0.01mol/l的氢氧化钠溶液，调节溶液ph至7.4；
[0142]
步骤3.将稀释后的溶液在4℃环境下，7500rpm下离心30min，弃上层清液取下层沉淀，装入透析袋中，在0.5
×
pbs溶液中透析24h，随后在0.25
×
pbs中透析24h，再使用去离子水透析24h，透析中每隔12h更换一次透析液。透析完成后，取上层透析液冻干，研磨成粉后4℃保存；
[0143]
步骤4.将步骤3冻干后的粉末用去离子水配置成浓度为1mg/ml的溶液。
[0144]
实验数据
[0145]
步骤4制备的溶液的溶解性结果见图1(f)；
[0146]
步骤1、2、和3中制备样品的蛋白含量测试结果见图2；
[0147]
步骤4制备的溶液的sgag含量见图3；
[0148]
步骤4制备的溶液的dsdna含量见图4；
[0149]
步骤4制备的溶液的蛋白分子量分布见图5。
[0150]
对照例1：
[0151]
将5.03g脱细胞真皮基质颗粒研磨成粉末，用去离子水配置成浓度为1mg/ml的溶液。
[0152]
实验数据：
[0153]
上述制备的溶液的sgag含量见图3；
[0154]
上述制备的溶液的蛋白分子量分布见图5。
[0155]
表1是实施例1至6以及对照例1的实验数据
[0156][0157]
从表1以及图1至5可以得知，实施例1至5步骤4得到的adm提取物在去离子水中均能较好溶解，然而实施例6步骤4得到的adm提取物在去离子水中溶解性较差，可以看到冻干的类似海绵状物质悬浮于水溶液中，主要是因为实施例6的步骤3中取了下层沉淀进行透析、冻干，主要成分为酸溶性胶原及不可溶性杂质，导致溶解性较差；实施例1至5中随样品
经提取及透析处理，得到的样品中蛋白浓度随之升高。实施例6中由于通过离心取下层物料，导致产品中存在不可溶性纤维及杂质的存在，因此蛋白样品浓度相对较低并随提取浓缩后，蛋白浓度发生下降，因此，实施例1至5中步骤3得到的样品中蛋白浓度相对于步骤1有较大的提升，实施例6中步骤3得到的样品中蛋白浓度相对于步骤1有所下降；实施例1～5随提取步骤进行仍然能很好保留样品中sgag含量，能够保留细胞外基质的主要成分，实施例6中也包含有一定量的sgag；实施例1～6中酶提取的方法均能够较好保留胶原蛋白的三螺旋结构；实施例1～6中均能提取出胶原蛋白的α1和α2的螺旋结构，实施例2、4和5中均能够得到纯度较高的胶原蛋白，实施例1、3和6中存在部分杂蛋白，实施例4能够提取杂蛋白含量较低并保留adm中细胞外基质中多种蛋白的蛋白提取物。
[0158]
以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

技术特征：
1.一种中性环境水溶性脱细胞真皮基质材料的制备方法，其特征在于，具体步骤包括如下：步骤s1.将脱细胞真皮基质(adm)原料溶解于盐酸溶液中，加入酶消化，室温下搅拌直至消化完成；步骤s2.采用氢氧化钠中和溶液至ph＝7.4，加入pbs溶液进行稀释；步骤s3.将稀释后的溶液于4℃离心，收集上层清液于pbs溶液中透析，透析后的样品冻干后即可得到中性环境下水溶性脱细胞真皮基质材料。2.根据权利要求1所述的一种中性环境水溶性脱细胞真皮基质材料的制备方法，其特征在于，步骤s1中所述盐酸浓度为0.01～0.1mol/l，其ph小于4.0。3.根据权利要求1所述的一种中性环境水溶性脱细胞真皮基质材料的制备方法，其特征在于，步骤s1中所述酶为胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、枯草甘菌蛋白酶和复合蛋白酶中的一种或几种，所述酶的整体活力为10～18万iu/g。4.根据权利要求1所述的一种中性环境水溶性脱细胞真皮基质材料的制备方法，其特征在于，步骤s1中，所述脱细胞真皮基质和酶加入量的质量比为5～200。5.根据权利要求1所述的一种中性环境水溶性脱细胞真皮基质材料的制备方法，其特征在于，步骤s1中，酶消化时间为2～48h。6.根据权利要求1所述的一种中性环境水溶性脱细胞真皮基质材料的制备方法，其特征在于，步骤s2中，所述氢氧化钠浓度为0.1～1mol/l，稀释后的样品浓度为6～8mg/l。7.根据权利要求1所述的一种中性环境水溶性脱细胞真皮基质材料的制备方法，其特征在于，步骤s3中，离心转速为5000～10000rpm，离心时间为20～50min。8.根据权利要求1所述的一种中性环境水溶性脱细胞真皮基质材料的制备方法，其特征在于，步骤s3中，所用透析袋截留分子量为1000～4000da，所用透析液为0.5
×
pbs、0.25
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pbs以及去离子水，透析时间为36～96h。9.一种基于权利要求1至8任一所述制备方法制备出中性环境水溶性脱细胞真皮基质材料，其特征在于，所述中性环境水溶性脱细胞真皮基质材料包括胶原、蛋白、多糖及生长因子，并且其保留了胶原三螺旋结构的构像。10.一种基于权利要求9所述中性环境水溶性脱细胞真皮基质材料的应用包括医用材料、医疗美容、食品以及化妆品。

技术总结
本发明公开了一种中性环境水溶性脱细胞真皮基质材料、其制备方法以及其应用，所述材料选用具有良好生物相容性和组织修复功能的脱细胞真皮基质为基体，可广泛应用于医用材料、食品、医疗美容、化妆品等领域。所述制备方法具体如下：脱细胞真皮基质原料准备；酶水解制备提取液；酶失活；水溶性脱细胞真皮基质材料提取；原料纯化。本方法制得的可溶性脱细胞真皮基质材料，不需要对材料进行修饰提高水溶性，同时，保存了脱细胞基质材料中胶原蛋白的三维构像、多糖及生长因子，更好的保存了原有的细胞基质的特点。另外，该制备方法克服了传统脱细胞组织酶水解产品在中性环境下不溶的问题，进一步拓展了脱细胞真皮基质材料其应用范围。范围。范围。


技术研发人员：刘平 戴继东
受保护的技术使用者：南京普立蒙医疗科技有限公司
技术研发日：2023.04.20
技术公布日：2023/8/24