一种高纯度和厚朴酚提取纯化方法与流程

1.本发明属于医药技术领域，具体涉及一种高纯度和厚朴酚的提取纯化方法。


背景技术：

2.和厚朴酚(3',5-diallyl-2,4'-dihydroxybiphenyl, honokiol)，化学命名为 3',5-二-2-丙烯基-1,1'-联苯-2,4'-二酚。和厚朴酚主要来源于传统中药材厚朴，是一种具有广泛生理活性的酚类化合物，具有明显的、持久的中枢性肌肉松弛，中枢神经抑制作用，抗炎，抗菌，抗病原微生物，抗溃疡，抗氧化，抗衰老，降低胆固醇等药理作用，用于治疗急性肠炎、细菌性或阿米巴痢疾，慢性胃炎等。近年来研究发现和厚朴酚对黑色素瘤、肉瘤、骨髓瘤、白血病、膀胱、肺、前列腺和直肠癌细胞系均有促凋亡作用，显示其良好的开发价值。
3.厚朴药材是和厚朴酚的主要天然来源，但厚朴药材中的主要活性成分除了和厚朴酚，还有厚朴酚，由于厚朴酚与和厚朴酚为同分异构体，仅羟基的位置不同，造成分离困难。现有技术的提取工艺主要有:乙醇提取法、微波辅助提取法、碱提酸沉法等，微波及超声提取受工业设备规模限制，无法满足原料药生产的需要；乙醇提取及碱提酸沉则会耗费大量溶剂，提取成本高，不够环保。
4.此外，提取获得的厚朴粗提取物中杂质干扰较多，除了厚朴酚和色素，还有二聚体等杂质，如杂质1、杂质2和杂质3，结构如下： 杂质1
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杂质2
杂质3其中，杂质1和杂质3为白色粉末状，杂质2为黄色粉末状。
5.经研究发现，这类杂质去除难度大，而人体用药对和厚朴酚有非常高的纯度要求，当杂质含量高于0.1%时需要进行毒理研究，不仅增加了人用药研究周期，还增加了额外费用。而现有报道的从提取物中去除杂质的方法有：常压硅胶柱层析法、制备高效液相色谱法、高速逆流色谱法等。其中，常压硅胶柱层析法分离效率低，操作繁琐；制备高效液相色谱法虽然分离效果好，但成分复杂的提取物容易污染昂贵的柱填料，载样量少，生产成本高。高速逆流色谱法虽能分离出纯度较高的和厚朴酚，但周期长，产量较低且会产生大量的有机溶剂废液，设备维护及废液处理成本均很高。因此，如何提供一种制备高纯度和厚朴酚的方法且能兼具环保、降低生产成本是目前亟待解决的难题。


技术实现要素：

6.本发明的目的在于提供一种满足药用和厚朴酚原料药标准且生产周期短、生产成本低并适合工业化生产的高纯度和厚朴酚提取纯化方法。
7.本发明提供一种高纯度和厚朴酚提取纯化方法，包括如下步骤：（1）厚朴药材超临界萃取：厚朴药材粉碎至适当大小的粉末，转入萃取釜中，萃取压力30～50 mpa、萃取温度30～50℃、分离ⅰ压力7～20mpa、分离ⅰ温度30～55℃、分离ⅱ温度10～25℃，萃取时间1～3小时，得到厚朴超临界萃取物；（2）打浆洗涤：将厚朴超临界萃取物称重，按重量比例加入1～7倍量的有机溶剂低极性烷烃或低极性醚，搅拌混匀10～60分钟，过滤，干燥，得到厚朴粗提物；（3）萃取：将厚朴粗提物称重，按重量比例加入1～5倍量的有机溶剂低极性烷烃或低极性醚，60～80℃加热搅拌至完全溶解后，加入相对于已加入有机溶剂为2～15倍量溶剂体积的已加热至60～80℃的ph9.0～12的缓冲液，搅拌萃取2～30分钟，静置分层得有机溶剂层；（4）析晶：萃取后的有机溶剂层室温下静置析晶2～10小时，过滤，干燥，得到和厚朴酚粗品；（5）重结晶：将和厚朴酚粗品称重，按重量比例加入10～20倍量的有机溶剂低极性烷烃，60～85℃加热搅拌至完全溶解，室温下静置析晶5～20小时，过滤，干燥，得到和厚朴酚精品。
8.进一步地，本发明所述的方法，包括如下步骤：（1）厚朴药材超临界萃取：厚朴药材粉碎至适当大小的粉末，转入萃取釜中，萃取压力30～50 mpa、萃取温度30～50℃、分离ⅰ压力9～20mpa、分离ⅰ温度30～55℃、分离ⅱ温度10～25℃，萃取时间1～3小时，得到厚朴超临界萃取物；（2）打浆洗涤：将厚朴超临界萃取物称重，按重量比例加入1～7倍量的有机溶剂低极性烷烃或低极性醚，搅拌混匀10～60分钟，过滤，滤饼再重复此打浆洗涤过程1～2次，滤饼真空干燥，得到厚朴粗提物；（3）萃取：将厚朴粗提物称重，按重量比例加入1～5倍量的有机溶剂低极性烷烃或低极性醚，60～80℃加热搅拌至完全溶解后，加入相对于已加入有机溶剂为2～15倍量溶剂体积的已加热至60～80℃的ph9.0～12.0的缓冲液，搅拌萃取2～30分钟，静置分层得有机
溶剂层；重复萃取2～5次，得有机溶剂层；（4）析晶：萃取后的有机溶剂层室温下静置析晶2～10小时，过滤，并用适量干净的有机溶剂低极性烷烃或低极性醚洗涤滤饼，干燥，得到和厚朴酚粗品；（5）重结晶：将和厚朴酚粗品称重，按重量比例加入10～20倍量的有机溶剂低极性烷烃，60～85℃加热搅拌至完全溶解，室温下静置析晶5～20小时，过滤，干燥，得到和厚朴酚精品。
9.其中，上述步骤（1）中所述二氧化碳流量为600～800l/h。
10.优选地，上述步骤（1）中所述二氧化碳流量为700l/h。
11.其中，上述步骤（1）中所述萃取压力40～45mpa、萃取温度40～45℃，萃取时间1.5～3小时，分离ⅰ压力8～15mpa，分离ⅰ温度45～55℃。
12.优选地，上述步骤（1）中所述萃取压力40
±
0.5mpa、萃取温度40℃，萃取时间1.5～2小时，分离ⅰ压力9.5～10mpa，分离ⅰ温度55℃。
13.其中，上述步骤（2）中所述打浆时间为20～50分钟。
14.优选地，上述步骤（2）中所述打浆时间为25～35分钟。
15.更优选地，上述步骤（2）中所述打浆时间为30分钟。
16.其中，上述步骤（2）中所述有机溶剂低极性烷烃或低极性醚用量为1～7倍量、1～5倍量。
17.优选地，上述步骤（2）中所述有机溶剂低极性烷烃或低极性醚用量为1～5倍量。
18.其中，上述步骤（2）中所述有机溶剂低极性烷烃或低极性醚可以一次性加入也可以分批加入。
19.优选地，上述步骤（2）中所述有机溶剂低极性烷烃或低极性醚分批加入时，第一次加入量为1倍量、2倍量、3倍量、4倍量或5倍量，打浆搅拌后，再分批次或者一次性加入剩余有机溶剂。
20.其中，上述步骤（2）中所述干燥为真空干燥。
21.优选地，上述真空干燥条件为：干燥温度40～45℃，负压干燥2小时以上。
22.其中，上述步骤（2）至（4）中所述有机溶剂低极性烷烃为正己烷、环己烷或正庚烷。
23.优选地，上述步骤（2）至（4）中所述有机溶剂低极性烷烃为正己烷。
24.其中，上述步骤（2）至（4）中所述低极性醚为石油醚。
25.其中，上述步骤（2）和（3）中所述有机溶剂低极性烷烃或低极性醚的用量为5倍量或3倍量。
26.其中，上述步骤（3）中所述缓冲液为ph9.5～11.5；优选地，缓冲液为ph10～11；更优选地，缓冲液为ph10.5。
27.其中，上述步骤（3）中所述缓冲液由无机盐和/或无机碱和水配置而成。
28.其中，上述无机盐包括但不限于无机钠盐、钾盐、镁盐、铝盐。
29.优选地，上述无机盐包括但不限于碳酸钠、碳酸氢钠、磷酸钠、磷酸氢钠、磷酸二氢钠、硫酸钠、硫酸氢钠。
30.其中，上述无机碱包括但不限于氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钠镁。
31.优选地，上述步骤（3）中ph10.5的缓冲液配制方法为将碳酸氢钠2.1重量份和氢氧化钠0.712重量份，溶解于1重量份水中。
32.其中，上述水为纯化水或者超纯水。
33.优选地，上述水为超纯水。
34.其中，当缓冲液ph值不是10.5时，可以通过加酸或者减的方式调节ph10.5的缓冲液至所需ph值；上述酸包括但不限于盐酸，上述碱包括但不限于氢氧化钠。
35.其中，上述步骤（3）中所述缓冲液的用量为2～15倍溶剂体积，即缓冲液与有机溶剂的体积比为（2～15）:1。
36.优选地，上述步骤（3）中所述缓冲液的用量为5～10倍溶剂体积。
37.其中，上述步骤（4）中所述萃取后的有机溶剂层静置析晶前可以经60-80℃搅拌5～15分钟；优选地，所述搅拌时间为10分钟。
38.其中，上述步骤（4）中所述析晶时间为2～10小时。
39.优选地，上述步骤（4）中所述析晶时间为5～8小时。
40.其中，上述步骤（4）中所述干燥为真空干燥。
41.优选地，上述真空干燥条件为：干燥温度40～45℃，负压干燥2小时以上。
42.其中，上述步骤（5）中所述有机溶剂低极性烷烃为正庚烷、正己烷或环己烷。
43.优选地，上述步骤（5）中所述有机溶剂地极性烷烃为正庚烷。
44.其中，上述步骤（5）中所述有机溶剂低极性烷烃用量为10～15倍。
45.优选地，上述步骤（5）中所述有机溶剂低极性烷烃用量为12.5倍。
46.其中，上述步骤（5）中所述溶解温度为60～85℃；优选为70～85℃；更优选地80～85℃。
47.其中，上述步骤（5）中所述析晶时间为5～20小时。
48.优选地，上述步骤（5）中所述析晶时间为8～12小时；更优选地，析晶时间为8～10小时。
49.其中，上述步骤（5）中所述干燥为真空干燥。
50.优选地，上述真空干燥条件为：干燥温度40～45℃，负压干燥4小时以上。
51.有益效果：本发明高纯度和厚朴酚提取纯化方法操作简单、生产周期短、生产成本低、废液量少且环保、适合工业化大生产，除杂效果明显，所得和厚朴酚纯度高达99.9%以上，完全满足药用和厚朴酚原料药纯度要求。具体地，在优选的具体实施方式中纯度高达99.95%以上，最大单杂低于0.02%，总杂低于0.05%，为人用药制剂提供了高纯度原料药，有效降低制剂杂质含量，提高了药品安全性。同时，本发明高纯度和厚朴酚提取纯化方法相比传统方法（如碱提、逆流色谱纯化等）能够大幅降低生产成本（约90%）、缩短生产周期（约90%），且仅需传统方法约2%用量的有机溶剂，极大地减少废液，方法更加环保。
具体实施方式
52.下面将结合实施例对本发明的方案进行解释。本领域技术人员将会理解，下面的实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体技术或条件的，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。
53.本发明实施例中厚朴药材选用符合《中国药典》2020版一部里厚朴中饮片含量规定的药材，即厚朴酚与和厚朴酚的总量在1.6%以上的药材。
54.实施例1 一种高纯度和厚朴酚提取纯化方法一种高纯度和厚朴酚提取纯化方法，包括如下步骤：(1)超临界萃取：取适量厚朴药材粉碎，投料1.4kg进行超临界萃取，仪器参数如下：萃取压力40 mpa、萃取温度40℃、分离ⅰ压力10mpa、分离ⅰ温度55℃、分离ⅱ温度25℃，萃取时间2.5小时，得到超临界流体萃取物；(2)打浆洗涤：将得到的超临界流体萃取物称重后研磨至粉状，加入5倍萃取物重量的石油醚，混匀后室温搅拌打浆30分钟，减压过滤，用石油醚洗涤滤饼；将滤饼研磨成粉，再重复上述打浆过程2次，至滤饼为类白色，真空干燥，干燥温度40～45℃，在负压条件下，干燥2小时，得到和厚朴酚湿粗提物；(3)萃取：将和厚朴酚粗提物称量，转入烧杯，按重量比加入3倍量环己烷，60～70℃水浴搅拌至完全溶解，再加入已加热好的ph值为10.5的缓冲液（缓冲液配置方法：碳酸氢钠2.1g，氢氧化钠0.712g，溶解于1l超纯水中，水浴加热至60～70℃），缓冲液用量相对于已加入环己烷溶剂体积为10倍量，混匀后转入分液漏斗，静置10分钟分层，得上层环己烷层；再重复此步骤4次，萃取完毕后得环己烷层；(4)析晶：将萃取后的环己烷层在60～70℃水浴加热10分钟，室温避光析晶2小时；将析晶后样品转入布什漏斗，减压过滤，得滤饼，真空干燥，干燥温度45℃，真空度0.08mpa以下减压干燥15小时，得和厚朴酚析晶中间产物；(5)重结晶：将和厚朴酚析晶中间产物称量，置于烧杯中，加入和厚朴酚析晶中间产物重量的10倍量正庚烷，85℃水浴加热，玻棒搅拌至完全溶解后，室温避光析晶20 小时，过滤得滤饼，真空干燥，干燥温度45℃，真空度0.08mpa以下减压干燥24小时，得和厚朴酚精制品18.604g，纯度100%。
55.实施例2 一种高纯度和厚朴酚提取纯化方法一种高纯度和厚朴酚提取纯化方法，包括如下步骤：(1)超临界萃取：取适量厚朴药材粉碎，投料30kg进行超临界萃取，仪器参数如下：萃取釜温度40℃、萃取压力40
±
0.5mpa、分离釜1温度55℃、分离压力9.5～10mpa、分离ⅱ温度10℃、二氧化碳流量600～800l/h，萃取时间1.5小时，得超临界流体萃取物；(2)打浆洗涤：超临界流体萃取物转入反应釜中，再加入萃取物5倍重量的石油醚，搅拌打浆30分钟，过滤得滤饼；将滤饼转入反应釜中，并加入厚朴萃取物2倍重量的石油醚，搅拌打浆30分钟，过滤得滤饼，重复操作1次，过滤后得滤饼，真空干燥，干燥温度40～45℃，在负压条件下，干燥2小时，得厚朴酚粗提物；(3)萃取：称取厚朴酚粗提物5倍重量的环己烷置于反应釜中，开启搅拌，投入和厚朴酚粗提物，70℃加热搅拌至完全溶解；将ph值为10.5的缓冲液（缓冲液配置方法：碳酸氢钠2.1g，氢氧化钠0.712g，溶解于1l超纯水中，搅拌加热至60～70℃）泵入反应釜，缓冲液用量相对于已加入环己烷的溶剂体积为10倍量，保温搅拌萃取10分钟，静置20分钟分层，得环己烷层；按此方法再重复萃取3次；(4)析晶：萃取后的环已烷溶液室温析晶5小时，过滤，得滤饼，真空干燥，干燥温度40～45℃，减压干燥2小时，得和厚朴酚粗品；(5)重结晶：将和厚朴酚粗品称重，再称取和厚朴酚粗品12.5倍重量的正庚烷，抽入反应釜中，加入和厚朴酚粗品，80～85℃的加热搅拌溶解，待完全溶解后，静置，析晶10小
时，过滤，得滤饼，真空干燥，干燥温度40～45℃，负压干燥4小时，得和厚朴酚精制品573.56g，纯度99.972%。
56.实施例3 一种高纯度和厚朴酚提取纯化方法一种高纯度和厚朴酚提取纯化方法，包括如下步骤：(1)超临界萃取：取适量厚朴药材粉碎，投料30kg进行超临界萃取，仪器参数如下：萃取釜温度40℃、萃取压力40
±
0.5mpa、分离釜1温度55℃、分离压力9.5～10mpa、分离ⅱ温度15℃、二氧化碳流量600～800l/h，萃取时间1.5小时，得超临界流体萃取物；(2)打浆洗涤：超临界流体萃取物转入反应釜中，再抽入萃取物5倍重量的石油醚于反应釜中，搅拌打浆30分钟，过滤得滤饼；将滤饼转入反应釜中，并加入厚朴萃取物2倍重量的石油醚，搅拌打浆30分钟，过滤得滤饼，再重复上述操作打浆2次，过滤，得滤饼，真空干燥，干燥温度40～45℃，在负压条件下，干燥2小时，得厚朴酚粗提物；(3)萃取：称取厚朴酚粗提物1倍重量的环己烷，抽入反应釜 中，开启搅拌，投入和厚朴酚粗提物，80℃加热搅拌至完全溶解；将ph值为10.5的缓冲液（缓冲液配置方法：碳酸氢钠2.1g，氢氧化钠0.712g，溶解于1l超纯水中，搅拌加热至60～70℃）加入反应釜中，缓冲液用量相对于已加入环己烷的溶剂体积为15倍量，保温搅拌萃取10分钟，静置20分钟分层，得环己烷层；按此方法再重复萃取2次；(4)析晶：将萃取后的环已烷溶液于70-80℃搅拌10分钟后转入反应釜中，室温析晶10小时，过滤，得滤饼，真空干燥，干燥温度40～45℃，减压干燥2小时，得和厚朴酚粗品；(5)重结晶：将和厚朴酚粗品称重，再称取和厚朴酚粗品12.5倍重量的正庚烷，抽入反应釜中，加入和厚朴酚粗品，80～85℃的加热搅拌溶解，待完全溶解后，静置，析晶8小时，过滤，得滤饼，真空干燥，干燥温度40～45℃，负压干燥4小时，得和厚朴酚精制品625.02g，纯度99.979%。
57.实施例4 一种高纯度和厚朴酚提取纯化方法一种高纯度和厚朴酚提取纯化方法，包括如下步骤：(1)超临界萃取：取适量厚朴药材粉碎，投料50kg进行超临界萃取，仪器参数如下：萃取釜温度50℃、萃取压力50mpa、分离釜1温度40℃、分离压力15mpa、分离ⅱ温度20℃，萃取1.5小时，得超临界流体萃取物；(2)打浆洗涤：将超临界流体萃取物转入反应釜中，再抽入萃取物5倍重量的石油醚于反应釜中，搅拌打浆10分钟，过滤得滤饼；将滤饼转入反应釜中，并加入厚朴萃取物1倍重量的石油醚，搅拌打浆10分钟，过滤，得滤饼，真空干燥，干燥温度40～45℃，在负压条件下，干燥2小时，得厚朴酚粗提物；(3)萃取：称取厚朴酚粗提物3倍重量的环己烷，抽入反应釜 中，开启搅拌，投入和厚朴酚粗提物，70℃加热搅拌至完全溶解；将ph值为9.0的缓冲液（缓冲液配置方法：碳酸氢钠2.1g，氢氧化钠0.712g，溶解于1l超纯水中，搅拌溶解后用盐酸调节ph至9.0，搅拌加热至60～70℃）泵入反应釜中，缓冲液用量相对于已加入环己烷的溶剂体积为10倍量，保温搅拌萃取20分钟，静置20分钟分层，得环己烷层；(4)析晶：萃取后的环已烷溶液室温析晶5小时，过滤，得滤饼，真空干燥，干燥温度40～45℃，减压干燥2小时，得和厚朴酚粗品；(5)重结晶：将和厚朴酚粗品称重，再称取和厚朴酚粗品20倍重量的正庚烷，抽入
反应釜中，加入和厚朴酚粗品，70℃的加热搅拌溶解，待完全溶解后，静置，析晶15小时，过滤，得滤饼，真空干燥，干燥温度40～45℃，负压干燥4小时，得和厚朴酚精制品680g，纯度99.976%。
58.实施例5一种高纯度和厚朴酚提取纯化方法一种高纯度和厚朴酚提取纯化方法，包括如下步骤：(1)超临界萃取：取适量厚朴药材粉碎，投料60kg进行超临界萃取，仪器参数如下：萃取釜温度30℃、萃取压力30mpa、分离釜1温度30℃、分离压力20mpa、分离ⅱ温度25℃、二氧化碳流量700l/h，萃取时间3.0小时，得超临界流体萃取物；(2)打浆洗涤：超临界流体萃取物转入反应釜中，再抽入萃取物1倍重量的环己烷于反应釜中，搅拌打浆60分钟，过滤，得滤饼，真空干燥，干燥温度40～45℃，在负压条件下干燥2小时，得厚朴酚粗提物；(3)萃取：称取厚朴酚粗提物3倍重量的正己烷，抽入反应釜中，开启搅拌，投入和厚朴酚粗提物，60℃加热搅拌至完全溶解；将ph值为12.0的缓冲液（缓冲液配置方法：碳酸氢钠2.1g，氢氧化钠0.712g，溶解于1l超纯水中，搅拌溶解后加入氢氧化钠调节ph至12.0，搅拌加热至60～70℃）泵入反应釜中，缓冲液用量相对于已加入正己烷的溶剂体积为2倍量，保温搅拌萃取30分钟，静置20分钟分层，得正己烷层；按此方法再重复萃取2次；(4)析晶：萃取后的正已烷溶液室温析晶10小时，过滤，得滤饼，真空干燥，干燥温度40～45℃，减压干燥2小时，得和厚朴酚粗品；(5)重结晶：将和厚朴酚粗品称重，再称取和厚朴酚粗品15倍重量的环己烷，抽入反应釜中，加入和厚朴酚粗品，60℃的加热搅拌溶解，待完全溶解后，静置，析晶5小时，过滤，得滤饼，真空干燥，干燥温度40～45℃，负压干燥4小时，得和厚朴酚精制品1014.06g，纯度99.951%。
59.实验检测例1有关物质检测 将实施例1-5方法得到的和厚朴酚精制品进行有关物质检测：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以0.1%甲酸水溶液为流动相a，乙腈为流动相b，按表1参数进行线性梯度洗脱；流速为1.0ml/min；柱温为25℃；检测波长为254nm；检测仪器为高效液相色谱仪（waterse2695分离单元，waters2998二极管阵列检测器，waters-empower色谱工作站）。检测结果见表2。
60.表梯度洗脱表 表2有关物质检测结果
注：杂质1、杂质2和杂质3的定义如本发明背景技术所述。
61.结论：本发明方法得到的和厚朴酚纯度完全满足药用原料药要求，在优选实施方式中实施例1-5得到的和厚朴酚纯度高达99.95%以上，最大单杂低于0.02%，总杂低于0.05%，为人用药制剂提供了高纯度原料药，有效降低制剂杂质含量，提高了药品安全性。

技术特征：
1.一种高纯度和厚朴酚提取纯化方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）厚朴药材超临界萃取：厚朴药材粉碎至适当大小的粉末，转入萃取釜中，萃取压力30～50 mpa、萃取温度30～50℃、分离ⅰ压力7～20mpa、分离ⅰ温度30～55℃、分离ⅱ温度10～25℃，萃取时间1～3小时，得到厚朴超临界萃取物；（2）打浆洗涤：将厚朴超临界萃取物称重，按重量比例加入1～7倍量的有机溶剂低极性烷烃或低极性醚，搅拌混匀10～60分钟，过滤，干燥，得到厚朴粗提物；（3）萃取：将厚朴粗提物称重，按重量比例加入1～5倍量的有机溶剂低极性烷烃或低极性醚，60～80℃加热搅拌至完全溶解后，加入相对于已加入有机溶剂为2～15倍量溶剂体积的已加热至60～80℃的ph9.0～12的缓冲液，搅拌萃取2～30分钟，静置分层得有机溶剂层；（4）析晶：萃取后的有机溶剂层室温下静置析晶2～10小时；过滤，干燥，得到和厚朴酚粗品；（5）重结晶：将和厚朴酚粗品称重，按重量比例加入10～20倍量的有机溶剂低极性烷烃，60～85℃加热搅拌至完全溶解，室温下静置析晶5～20小时，过滤，干燥，得到和厚朴酚精品。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）厚朴药材超临界萃取：厚朴药材粉碎至适当大小的粉末，转入萃取釜中，萃取压力30～50 mpa、萃取温度30～50℃、分离ⅰ压力9～20mpa、分离ⅰ温度30～55℃、分离ⅱ温度10～25℃，萃取时间1～3小时，得到厚朴超临界萃取物；（2）打浆洗涤：将厚朴超临界萃取物称重，按重量比例加入1～7倍量的有机溶剂低极性烷烃或低极性醚，搅拌混匀10～60分钟，过滤，滤饼再重复此打浆洗涤过程1～2次，滤饼真空干燥，得到厚朴粗提物；（3）萃取：将厚朴粗提物称重，按重量比例加入1～5倍量的有机溶剂低极性烷烃或低极性醚，60～80℃加热搅拌至完全溶解后，加入相对于已加入有机溶剂为2～15倍量溶剂体积的已加热至60～80℃的ph9.0～12.0的缓冲液，搅拌萃取2～30分钟，静置分层得有机溶剂层；再重复萃取1～4次，得有机溶剂层；（4）析晶：萃取后的有机溶剂室温下静置析晶2～10小时，过滤，并用适量干净的有机溶剂低极性烷烃或低极性醚洗涤滤饼，干燥，得到和厚朴酚粗品；（5）重结晶：将和厚朴酚粗品称重，按重量比例加入10～20倍量的有机溶剂低极性烷烃，60～85℃加热搅拌至完全溶解，室温下静置析晶5～20小时，过滤，干燥，得到和厚朴酚精品。3.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述步骤（1）中萃取压力为40
±
0.5mpa、萃取温度40℃、分离ⅰ压力9.5～10mpa、分离ⅰ温度55℃、二氧化碳流量为600～800l/h，萃取时间1.5～3小时。4.如权利要求1~3任意一项所述的方法，其特征在于，所述步骤（2）至（4）中所述有机溶剂低极性烷烃为正己烷、环己烷或正庚烷；所述低极性醚为石油醚。5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述步骤（2）和（3）中所述有机溶剂低极性烷烃或低极性醚的用量为5倍量或3倍量。6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述步骤（3）中所述缓冲液配制方法为将碳酸氢钠2.1重量份和氢氧化钠0.712重量份，溶解于1重量份水中。
7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述水为纯化水或者超纯水。8.如权利要求1~7任意一项所述的方法，其特征在于，所述步骤（4）中所述萃取后的有机溶剂层静置析晶前在60-80℃下搅拌5～15分钟。9.如权利要求1~8任意一项所述的方法，其特征在于，所述步骤（5）中所述有机溶剂低极性烷烃为正庚烷、正己烷或环己烷，优选正庚烷。10.如权利要求1~9任意一项所述的方法，其特征在于，所述步骤（5）中所述有机溶剂低极性烷烃用量为和厚朴酚粗品重量的10～15倍。

技术总结
本发明属于医药技术领域，具体涉及一种高纯度和厚朴酚的提取纯化方法。本发明和厚朴酚提取纯化方法将厚朴药材经超临界CO2萃取、打浆洗涤、萃取、析晶和重结晶，得到高纯度的和厚朴酚。本发明方法生产周期短、生产成本低、废液降低且环保，除杂效果好，且所得和厚朴酚纯度高，适合工业化大生产。适合工业化大生产。


技术研发人员：请求不公布姓名 付杰 叶能 请求不公布姓名 李方群
受保护的技术使用者：成都金瑞基业生物科技有限公司
技术研发日：2022.03.04
技术公布日：2023/9/13