一种自动化微生物检测方法及其应用与流程

1.本发明涉及微生物检测技术领域，具体而言，是一种自动化微生物检测方法及其应用。


背景技术：

2.微生物检测是衡量动植物性产品卫生质量的重要指标之一，同样也是判定被检产品能否食用的主要依据；通过微生物检验，判断产品加工环境及产品卫生环境，能够对产品被微生物污染的程度作出评价，提供传染病和人类、动物和食物中毒的防治措施。
3.常规的微生物检测包括样品选择、培养基配制、倒平板、多级稀释、接种、培养、计数、分离和鉴定等多个操作步骤；在上述过程中，抽样误差、稀释误差、操作误差和培养误差都会对检验结果造成影响。


技术实现要素：

4.为了实现减少微生物检测过程中的抽样误差的目的，本发明采用以下技术方案：本发明的目的在于提供一种将多份样品混合后，隔离放置一段时间后再进行小样提取的方案；使得多份样品中的微生物在混合样的分布范围增加，实现降低微生物检测过程中的抽样误差的目的，以便对样品内的微生物进行精准检测。
5.为了实现上述目的，本发明提供了一种自动化微生物检测方法，包括以下步骤：步骤一：从一批货品中选择6～10份样本；步骤二：将多份样本混合，得到混合样，将混合样置于消毒杀菌后的取样皿中，将取样皿在无菌环境隔离放置；步骤三：在取样皿中的各处位置提取小样，存入存样管内；步骤四：将取样皿中的残存混合样，在无菌环境下放置8～12h后，重复步骤三的小样提取操作；步骤五：将步骤三或步骤四中提取的小样通过vitek自动化微生物分析仪进行分析检测。
6.其中，步骤四可重复多次；将取样皿中的残存混合样在无菌环境下，独自培育，使得混合样中的微生物在取样皿内的分布范围增加，实现降低微生物检测过程中的抽样误差的目的，以便对样品内的微生物进行精准检测。
附图说明
7.以下附图仅旨在于对本发明做示意性说明和解释，其中：图1为本发明的微生物检测方法的步骤流程图；图2为本发明的微生物自动检测的操作流程图；图3为本发明的检测台、取样皿、插管和柔性变径端的结构示意图；
图4为本发明的存样管、通气管ⅰ和夹紧头的结构示意图；图5为本发明的存样管和活塞的结构示意图；图6为本发明的插管、橡胶环和柔性变径端的结构示意图；图7为本发明的扣环和滑套ⅰ的结构示意图；图8为本发明的插管、中继管和通气管ⅱ的结构示意图；图9为本发明的旋转定位臂、夹持座和滑套ⅱ的结构示意图；图10为本发明的滑柱、v型臂和同步控制柄的结构示意图；图11为本发明的柔性变径端、驱动夹臂和定位杆的结构示意图；图12为本发明的定位杆、气筒和滑筒的结构示意图；图13为本发明的夹持座和驱动夹臂的结构示意图。
8.图中：检测台11；取样皿12；横向定位座13；旋转定位臂14；夹持座15；扣环151；滑套ⅰ152；滑套ⅱ16；存样管21；活塞211；通气管ⅰ22；夹紧头23；滑柱24；v型臂25；插管31；橡胶环32；柔性变径端33；中继管41；通气管ⅱ42；驱动夹臂43；定位杆44；气筒45；滑筒46；伸缩夹台47；第二伸缩驱动器48；滑台51；同步控制柄52。
实施方式
9.为了实现减少微生物检测过程中的抽样误差的目的，本发明提供了一种自动化微生物检测方法，包括以下步骤：步骤一：从一批货品中选择6～10份样本；步骤二：将样本摇匀处理；步骤三：将多份样本混合，得到混合样，将混合样置于消毒杀菌后的取样皿12中，将取样皿12在无菌环境隔离放置；步骤四：在取样皿12中的各处位置提取小样，存入存样管21内；步骤五：将取样皿12中的残存混合样，在无菌环境下放置8～12h后，重复步骤四的小样提取操作；步骤六：将步骤四或步骤五中，提取的小样通过vitek自动化微生物分析仪进行分析检测。
10.vitek自动化微生物分析仪由充填机、恒温器、电脑主机和打印机组成；充填机三分钟内把样本注入试验卡中及封口，恒温箱自动恒定培养温度并同时读取卡内生化反应变化．电脑主机负责分析资料的储存、系统的操作及分析程式的运作，达到通过vitek自动化微生物分析仪对小样进行微生物分析检测的目的。
11.其中，步骤五可重复多次；将取样皿12中的残存混合样在无菌环境下，独自培育，使得混合样中的微生物在取样皿12内的分布范围增加，实现降低微生物检测过程中的抽样误差的目的，以便对样品内的微生物进行精准检测。
12.本技术的自动化微生物检测方法，用于降低微生物检测过程中的抽样误差。
13.以下对本发明的具体实施例进行说明。
14.参照图3、图6和图8所示，说明本发明提供的微生物检测方法中，利用存样管21对取样皿12内的混合样的各处位置进行取样操作的实施例：本技术的取样皿12和存样管21分别活动安装在检测台11上；
其中，存样管21内置活塞211和插管31，通过控制活塞211的滑动，将取样皿12内的样品通过插管31引入到存样管21内。
15.取样皿12转动安装在检测台11上，检测台11上安装有用于驱动取样皿12转动的第一转动驱动器，通过启动第一转动驱动器，带动取样皿12旋转，从而使得存样管21对取样皿12内的混合样的各处位置进行取样操作；本技术的检测台11置于无菌环境下，对取样皿12内部样品进行取样操作。
16.本技术的转动驱动器可选用步进电机或伺服电机。
17.进一步地，本技术的插管31的两侧分别设置有橡胶环32和柔性变径端33，橡胶环32与存样管21和中继管41的内壁抵接贴合，通过柔性变径端33将插管31一侧的开口变小，使得进入到插管31内的样品不会自动流出。
18.参照图3所示，说明本发明提供的微生物检测方法中，控制存样管21对取样皿12内的取样位置进行改变的实施例：本技术的存样管21安装在旋转定位臂14上；其中，旋转定位臂14转动连接在横向定位座13的端部，横向定位座13的另一端与检测台11滑动连接。
19.横向定位座13上安装有用于驱动旋转定位臂14转动的第二转动驱动器；检测台11上安装有用于驱动横向定位座13滑动的第一伸缩驱动器，本技术的伸缩驱动器可选用电动伸缩杆或液压缸。
20.通过启动第二转动驱动器和第一伸缩驱动器，使得存样管21对取样皿12内的取样位置进行改变。
21.对存样管21在旋转定位臂14上进行取放操作时，通过启动第二转动驱动器，调整旋转定位臂14在横向定位座13上的放置角度，避免存样管21内部的样品漏出。
22.参照图4-6所示，说明本发明提供的微生物检测方法中，对活塞211和夹紧头23的位置进行控制的实施例：本技术的存样管21端部设置有通气管ⅰ22，通气管ⅰ22的另一端通过设置有阀门和滤筒的软管与气泵ⅰ连通，启动气泵ⅰ，对活塞211的位置进行控制，完成存样管21对样品的吸取操作，取样皿12内的样品经过插管31进入到存样管21内存放。
23.其中，存样管21的两侧分别安装有夹紧头23，夹紧头23能够对弹性材质的插管31两侧进行夹紧，实现插管31在存样管21端部的密封操作，可使用快拆螺钉完成夹紧头23在存样管21侧部的安装。
24.参照图3和图7所示，说明本发明提供的微生物检测方法中，对存样管21进行夹持固定的实施例：本技术的旋转定位臂14上固定连接有夹持座15和滑套ⅱ16，夹持座15上通过紧固件安装有扣环151，扣环151上通过紧固件安装有滑套ⅰ152，滑套ⅰ152与滑套ⅱ16共同作用下，对存样管21进行夹持固定；滑套ⅰ152和滑套ⅱ16的内侧分别设置有弹性垫片，增加对存样管21的夹持性能。
25.参照图7-8所示，说明本发明提供的微生物检测方法中，增设中继管41，以便对插管31与活塞211之间的相对距离进行控制，并保持管路内部空气的洁净程度的实施例：本技术的旋转定位臂14上安装有与存样管21对接并连通的中继管41，中继管41卡
在扣环151上，完成对中继管41的安装；其中，插管31能够在中继管41的内侧滑动，并且中继管41上连接有通气管ⅱ42，通气管ⅱ42的另一端通过设置有阀门和滤筒的软管与气泵ⅱ连通，启动气泵ⅱ，以便对插管31与活塞211之间的相对距离进行控制，并保持管路内部空气的洁净程度，并使得插管31利用其前端位置对取样皿12内的混合样进行稳定抽取处理。
26.参照图3所示，说明本发明提供的微生物检测方法中，利用两组夹臂组件，将插管31从存样管21内抽离至中继管41内的实施例：本技术的旋转定位臂14上安装有用于控制插管31在存样管21和中继管41内滑动的两组夹臂组件，利用两组夹臂组件，将插管31从存样管21内抽离至中继管41内。
27.参照图3-6所示，说明本发明提供的微生物检测方法中，增加微生物检测中对于样品取样的效率的实施例：本技术的存样管21上焊接固定连接有滑柱24，滑柱24上滑动安装有v型臂25，v型臂25贯穿存样管21两侧的夹紧头23，并与夹紧头23滑动连接，使得v型臂25在滑柱24上竖向移动的过程中，带动两侧的夹紧头23同步的彼此靠近或彼此远离。
28.滑柱24外侧套接安装有拉簧，拉簧的一端与存样管21焊接固定连接，拉簧的另一端焊接固定连接有滑环，滑环通过紧固件安装在v型臂25的上侧，实现对存样管21内放置的插管31进行自动夹紧，以便对插管31进行快捷取放操作，增加微生物检测中对于样品取样的效率。
29.参照图6和图9-10所示，说明本发明提供的微生物检测方法中，增加微生物检测中对于样品取样的稳定性的实施例：本技术的旋转定位臂14上滑动安装有滑台51，旋转定位臂14上安装有用于驱动滑台51滑动的电机丝杆组件ⅰ，滑台51与电机丝杆组件ⅰ中的丝杆ⅰ通过螺纹传动连接；滑台51上滑动安装有能够与v型臂25嵌合卡接的同步控制柄52，滑台51上安装有用于驱动同步控制柄52滑动的电机丝杆组件ⅱ，同步控制柄52与电机丝杆组件ⅱ中的丝杆ⅱ通过螺纹传动连接；通过电机丝杆组件ⅰ和电机丝杆组件ⅱ，调整同步控制柄52的位置，使得同步控制柄52对v型臂25进行扣住，并在需要对插管31在存样管21内进行移防过程中，保持v型臂25与滑柱24的相对位置稳定，增加微生物检测中对于样品取样的稳定性。
30.参照图3和图11-13所示，说明本发明提供的微生物检测方法中，通过两级的移动驱动，使得插管31整体移动范围增加的实施例：本技术的夹持座15的两侧分别滑动安装一个夹臂组件；夹臂组件的主体为驱动夹臂43，驱动夹臂43与夹持座15滑动连接，夹持座15上安装有两个用于控制驱动夹臂43滑动的第二伸缩驱动器48，启动第二伸缩驱动器48，带动两侧的夹臂组件相互靠近，对插管31进行夹持处理。
31.进一步地，驱动夹臂43上滑动连接有定位杆44，驱动夹臂43上安装有用于驱动定位杆44滑动的第三伸缩驱动器，通过启动第三伸缩驱动器，使得夹臂组件端部部件对插管31在存样管21和中继管41中的位置进行初步调整操作。
32.定位杆44端部连接有两个气筒45，每个气筒45内均连通设置有滑筒46，气筒45的支管通过软管与气泵ⅲ连接；
两个气筒45上滑动安装有伸缩夹台47，伸缩夹台47上的两个圆柱分别与两个气筒45滑动连接，伸缩夹台47能够与插管31的侧部抵接；通过启动气泵ⅲ，带动伸缩夹台47在一对气筒45上滑动，对插管31在存样管21和中继管41中的位置进行次级调整操作；通过两级的移动驱动，使得插管31整体移动范围增加，避免定位杆44干涉到插管31对取样皿12内的样品取样。

技术特征：
1.一种自动化微生物检测方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一：从一批货品中选择6～10份样本；步骤二：将多份样本混合，得到混合样，将混合样置于消毒杀菌后的取样皿（12）中，将取样皿（12）在无菌环境隔离放置；步骤三：在取样皿（12）中的各处位置提取小样，存入存样管（21）内；步骤四：将取样皿（12）中的残存混合样，在无菌环境下放置8～12h后，重复步骤三的小样提取操作；步骤五：将步骤三或步骤四中提取的小样通过vitek自动化微生物分析仪进行分析检测。2.根据权利要求1所述的自动化微生物检测方法，其特征在于：所述步骤四可重复多次。3.根据权利要求1所述的自动化微生物检测方法，其特征在于：所述取样皿（12）和存样管（21）分别活动安装在检测台（11）上，存样管（21）内置活塞（211）和插管（31），通过控制活塞（211）的滑动，将取样皿（12）内的样品通过插管（31）引入到存样管（21）内。4.根据权利要求3所述的自动化微生物检测方法，其特征在于：所述取样皿（12）转动安装在检测台（11）上。5.根据权利要求3所述的自动化微生物检测方法，其特征在于：所述存样管（21）安装在旋转定位臂（14）上，旋转定位臂（14）转动连接在横向定位座（13）的端部，横向定位座（13）的另一端与检测台（11）滑动连接。6.根据权利要求5或3所述的自动化微生物检测方法，其特征在于：所述存样管（21）上设置有通气管ⅰ（22），通气管ⅰ（22）的另一端通过设置有阀门和滤筒的软管与气泵连通。7.根据权利要求6所述的自动化微生物检测方法，其特征在于：所述存样管（21）的两侧分别安装有夹紧头（23），夹紧头（23）能够对弹性材质的插管（31）两侧进行夹紧，实现插管（31）在存样管（21）端部的密封操作。8.根据权利要求7所述的自动化微生物检测方法，其特征在于：所述旋转定位臂（14）上安装有与存样管（21）对接并连通的中继管（41），插管（31）能够在中继管（41）的内侧滑动，中继管（41）上连接有通气管ⅱ（42），通气管ⅱ（42）的另一端通过设置有阀门和滤筒的软管与气泵连通。9.根据权利要求8所述的自动化微生物检测方法，其特征在于：所述旋转定位臂（14）上安装有用于控制插管（31）在存样管（21）和中继管（41）内滑动的两组夹臂组件。10.根据权利要求1所述的自动化微生物检测方法的应用，用于降低微生物检测过程中的抽样误差。

技术总结
本发明涉及微生物检测技术领域，具体而言，是一种自动化微生物检测方法及其应用；该方法包括以下步骤：步骤一：选择样本并将其混合，得到混合样，置于取样皿中放置；步骤二：在取样皿中提取小样，存入存样管内；步骤三：将取样皿中的残存混合样，在无菌环境下放置8～12h后，重复步骤二的小样提取操作；步骤四：将步骤二或步骤三中的小样通过VITEK自动化微生物分析仪进行分析检测；本申请的自动化微生物检测方法，用于降低微生物检测过程中的抽样误差；本申请通过将多份样品混合后，隔离放置一段时间后再进行小样提取，使得多份样品中的微生物在混合样的分布范围增加，实现降低微生物检测过程中的抽样误差的目的，以便对样品内的微生物进行精准检测。物进行精准检测。物进行精准检测。


技术研发人员：员松良 赵胜杰 王浩
受保护的技术使用者：员松良
技术研发日：2023.04.20
技术公布日：2023/9/14