一种改善睡眠作用的药物组合物及其制备方法和用途

1.本发明涉及一种改善睡眠作用的药物组合物，属于中药领域。


背景技术：

2.睡眠障碍是睡眠量不正常以及睡眠中出现异常行为的表现﹐也是睡眠和觉醒正常节律性交替紊乱的表现。可由多种因素引起，常与躯体疾病有关，包括睡眠失调和异态睡眠。睡眠与人的健康息息相关。调查显示，很多人都患有睡眠方面的障碍或者和睡眠相关的疾病，成年人出现睡眠障碍的比例高达30％。
3.焦虑抑郁与睡眠障碍是相互共存，互为影响的关系。根据流行病学调查表明睡眠障碍的患者中有30％左右合并有不同程度焦虑或者抑郁，而确诊售虑抑郁的患者中伴有睡眠障碍的比例更是高达50％以上。相关研究表明焦虑抑郁与睡眠障碍有着相同的发病机制，特别是5-郑色胺的缺失对于2种疾病的发病具有相同的病理作用，因此临床上如果有焦虑抑郁合并睡眠障碍的患者，往往需要联合用药才能有效切断2种疾病之间的联系，提高治疗效果，改善患者的临床症状。
4.中医治疗睡眠障碍，会根据临床辩证论治，如果是虚证，如阴虚火旺者，可选择黄连阿胶汤合朱砂安神丸，实证有肝郁化火型的，可以采用龙胆泻肝汤加味。中医治疗睡眠障碍，还可以从调整开始，调整气血平衡、养血养阴安神。例如，经典名方桂枝甘草汤，具有补助心阳，生阳化气之功效，有文献报道可用于治疗失眠(刘景超，等，桂枝甘草汤治疗50例失眠的经验，cnki:sun:hnzk.0.1996-04-038；黄强，等，基于网络药理学的桂枝甘草汤抗失眠作用的潜在机制研究，cnki:sun:hnzx.0.2020-04-014)。由于睡眠障碍的中医辩证复杂(如心火炽盛型、肝郁化火型、痰热内扰型、心脾两虚型、心虚胆怯型等)，临床使用时会有局限，不便于推广使用。


技术实现要素：

5.为了解决上述问题，本发明提供了一种新的改善睡眠作用的药物组合物。本发明还提供了该药物组合物的制备方法和用途。
6.本发明提供了一种改善睡眠作用的药物组合物，它是由下述重量配比的原料药制备而成：
7.玉兰花4-8份、玳玳花4-8份、桂枝8-16份、甘草4-8份、姜黄4-8份、陈皮4-8份。
8.进一步优选地，它是由下述重量配比的原料药制备而成：
9.玉兰花6份、玳玳花6份、桂枝12份、甘草6份、姜黄6份、陈皮6份。
10.本发明提供了该药物组合物是由所述原料的原生药粉、水或有机溶剂提取物为活性成分，加入药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成的制剂。
11.其中，所述的制剂是口服制剂、吸入制剂。进一步优选地，所述的口服制剂包括口服液、片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、散剂；所述的吸入制剂包括吸入气雾剂、雾化剂、芳香剂。
12.本发明提供了一种制备所述的药物组合物的方法，它包括如下步骤：
13.a、称取各重量配比的原料药；
14.b、原料打粉、或加水煎煮，提取液浓缩、加入药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成的制剂。
15.本发明提供了所述的药物组合物在制备改善睡眠作用的药物中的用途。
16.其中，所述的药物的给药方式是口服给药、吸入给药。
17.本发明还提供了该药物组合物在制备具有解郁疏肝、养心提神、温通血脉功效的药物中的用途。
18.其中，所述的药物用于调节抑郁、焦虑体质人群睡眠障碍；减少睡眠潜伏期、增加睡眠时间。
19.本发明药物主要是对于抑郁、焦虑体质人群，有比较好的调节作用。无论是点香熏蒸，精油按摩，还是配挂香囊。本发明药物是以仲景经方桂枝甘草汤加减，加入福建芳香药物玳玳花、玉兰花、及姜黄、陈皮而成。
20.原料组方中桂枝为君药，入心，辛温芳香，温阳棱寒，温经通脉，养心提神。臣以炙甘草益气和中，与君药配合，是历代温阳益气，温经通脉，温心提神的代表药对组合。辅以玉兰花辛温入肺,芳香解郁，宣肺通窍。佐以玳玳花疏肝和胃，理气解郁；姜黄辛热入肝脾，活血行气，通络止痛；陈皮理气醒脾和胃，顾护中焦脾胃。炙甘草为使药，调和诸药。全方合用，共奏解郁疏肝，养心提神，温通血脉之功效。
21.本发明药物原料配伍精当，药效明确，通过现代药理学方法证明，本发明各原料药配伍使用，改善睡眠功效，发挥了协同增效的作用。
具体实施方式
22.实施例1本发明药物口服液的制备
23.称取原料药：玉兰花6g、玳玳花6g、桂枝12g、甘草6g、姜黄6g、陈皮6g。
24.加水煎煮提取，浓缩，制备成口服液。
25.实施例2本发明药物颗粒剂的制备方法
26.称取原料药：玉兰花6g、玳玳花6g、桂枝12g、甘草6g、姜黄6g、陈皮6g，加水煎煮提取2次(100℃提取)，每次加10倍量的水提取2小时，过滤，滤液浓缩至比重1.12(室温)，在滤液中加入(1:1～1:1.5)倍量糊精制备软材，将软材过筛、干燥、整粒，即得颗粒剂。
27.实施例3本发明药物颗粒剂的制备方法
28.称取原料药：玉兰花4g、玳玳花4g、桂枝8g、甘草4g、姜黄4g、陈皮4g，加水煎煮提取2次(100℃提取)，每次加10倍量的水提取2小时，过滤，滤液浓缩至比重1.06(室温)，经喷雾干燥(进风温度165℃,进料流速400ml/min)，得粉末，加(1:1～1:1.5)倍量糊精、制软材，将软材过筛、干燥、整粒，即得颗粒剂。
29.实施例4本发明药物配方颗粒的制备
30.6味原料药采用中药配方颗粒，混合，加(1:1～1:1.2)倍量糊精制软材，将软材过筛、干燥、整粒，即得颗粒剂。
31.实施例5本发明药物颗粒剂的制备
32.称取原料药：玉兰花8g、玳玳花8g、桂枝16g、甘草8g、姜黄8g、陈皮8g，玉兰花、玳玳花、桂枝、姜黄、陈皮提取挥发油后药渣加入桂枝、甘草，加10倍量水，煎煮2次，每次1.5小
时，滤过，合并滤液，滤液浓缩至相对密度为1.30(30℃)的清膏，加入提取的挥发油，适量糊精，混匀，制成颗粒。
33.实施例6本发明复方香薰精油的制备
34.称取原料药：玉兰花6g、玳玳花6g、桂枝12g、甘草6g、姜黄6g、陈皮6g，经超临界co2萃取法提取各味药材挥发油，按比例均匀混合即得。
35.实施例7本发明香薰蜡的制备
36.将大豆蜡放入容器中，加热到80～85℃，使其完全融化呈液体状；再向容器中加入医用石蜡、椰子油及普罗尼克聚醚的混合物，使它们融化后与大豆蜡完全混合；降温至50～55℃，向容器中加入按实施例6的方法提取的中药精油，搅拌均匀后得到蜡水，冷却后即得。
37.以下通过药效学或功效学试验证明本发明的有益效果。
38.试验例1本发明药物(以下简称：桂枝甘草玉玳汤)改善睡眠作用
39.1材料
40.1.1试验动物
41.72只spf级icr小鼠，雄性，体质量为(18
±
2)g，购自上海斯莱克实验动物有限公司(生产许可证号：scxk(沪)2017-0005)。饲养于福建中医药大学实验动物中心spf级动物饲养室(使用合格证：syxk(闽)2019-0007)。
42.1.2主要药物与试剂
43.桂枝甘草玉玳汤(由实施例1制备)；复方枣仁胶囊；对氯苯丙氨酸(p-chlorophenylalanine,pcpa，上海麦克林生化科技有限公司，批号c12072894)；戊巴比妥钠(武汉goodbio技术有限公司，批号:172866)；小鼠谷氨酸(glu)检测试剂盒(上海西唐生物科技有限公司，批号：2105271)；小鼠γ氨基丁酸(gaba)检测试剂盒(上海西唐生物科技有限公司，批号：2105201)；小鼠去甲肾上腺素(na)检测试剂盒(上海西唐生物科技有限公司，批号：2105252)；小鼠5-羟色胺(5-ht)检测试剂盒(上海西唐生物科技有限公司，批号：2105271)；小鼠色氨酸羟化酶(tph)检测试剂盒(上海西唐生物科技有限公司，批号：2105234)；小鼠前列腺素d2(pgd2)检测试剂盒(上海西唐生物科技有限公司，批号：2105211)；小鼠褪黑素(mt)检测试剂盒(上海西唐生物科技有限公司，批号：2105267)；小鼠多巴胺(da)检测试剂盒(上海西唐生物科技有限公司，批号：2105273)。
44.1.3主要仪器
45.infinite 200pro型多功能酶标仪(瑞士tecan公司)；milli-q超纯水机(美国millipore公司)；microfuge 22r台式离心机(美国beckman coulter公司)；bt224s电子天平(赛多利斯称重设备有限公司)。
46.2方法
47.2.1造模、分组及给药
48.spf级icr小鼠正常适应性饲喂3d后，随机分为空白组(12只)、造模组(60)，除对照组外，连续两天于每日21:00给与各组动物腹腔注射pcpa(300mg/kg，0.1ml/10g)，当动物躁动不安、自主活动增强，表明模型制备成功。
49.造模成功后将造模组小鼠随机分为模型组、阳性对照组(复方枣仁胶囊)、桂枝甘草玉玳汤低组、桂枝甘草玉玳汤中组及桂枝甘草玉玳汤高组，每组12只。桂枝甘草玉玳汤组在造模后给药14d，给药组一日给药1次。阳性对照组在造模之后采取每日早上9点以灌胃的
方式给酸枣仁混悬液，给药14d。空白组和模型组不做药物处理。
50.桂枝甘草玉玳汤低、中、高剂量组分别以4.2、8.4及16.8g/kg剂量给药，对比组：桂枝甘草、玉兰花、玳玳花、姜黄及陈皮组均以16.8g/kg剂量给药，(其中桂枝甘草组的桂枝、甘草的比例为2：1)
51.2.2一般观察
52.实验期间，每天注意观察各组小鼠的毛发、活动和精神状态等情况，每两天称量一次小鼠体重。
53.2.3小鼠自主活动检测
54.给药结束1h后，将小鼠置于自主活动测定仪内，记录5min内小鼠活动次数，每隔5min记录1次，连续观察3次。
55.2.4入睡潜伏期和睡眠时间的测定
56.各组末次给药1h后，腹腔注射戊巴比妥钠(50mg/kg)，记录入睡潜伏期(即从开始注射戊巴比妥钠到翻正反射消失的时间)和睡眠时间(即从翻正反射消失到翻正反射恢复的时间)。
57.2.5氨基酸类与单胺类神经递质的检测
58.睡眠记录结束后2h，在冰面上迅速分离皮层、下丘脑组织，用预冷的0.01mol/l pbs缓冲液冲洗小鼠皮层、下丘脑组织，去除残留血液，称重，剪碎。按照1∶9的重量体积比加入pbs，冰上匀浆，5000
×
g离心10min，取上清液检测。按照检测试剂盒(glu、γ-gaba、ne、5-ht、tph、pgd2、da、mt)说明书进行操作。
59.2.6统计学分析
60.试验数据以平均数
±
标准差表示，采用spss22.0统计软件进行单因素方差分析，组间比较符合正态分布且方差齐时，采用lsd检验；方差不齐时，采用games-howell检验。以p《0.05为差异有统计学意义。
61.3结果
62.3.2桂枝甘草玉玳汤对小鼠自主活动的影响
63.如表1所示，在连续给药14d过程中，比较观察到模型组动物的整体活动频率较对照组偏高，而桂枝甘草玉玳汤给药后失眠动物活动频率显著降低，明显抑制失眠动物自主活动(p《0.05或p《0.01)。同等给药剂量下，与桂枝甘草比，在第7d有显著差异；与玳玳花、玉兰花、姜黄、陈皮相比，有极显著差异。本发明药物显著优于对比组。
64.表1桂枝甘草玉玳汤对小鼠自主活动的影响(n＝12)
[0065][0066]
注：与空白组比较，
##
p《0.01；与模型组相比，
*
p《0.05，
**
p《0.01。
[0067]
3.3桂枝甘草玉玳汤对小鼠入睡潜伏期和睡眠时间的影响
[0068]
如表2所示，与模型组比较，桂枝甘草玉玳汤给药后小鼠的睡眠潜伏期均减少，其中桂枝甘草玉玳汤高组小鼠可显著减少睡眠潜伏期(p《0.01)；桂枝甘草玉玳汤给药后小鼠的睡眠时间均显著增加(p《0.05或p《0.01)。同等给药剂量下，本发明药物显著优于对比组。
[0069]
表2桂枝甘草玉玳汤对小鼠入睡潜伏期和睡眠时间的影响
[0070][0071]
注：与空白组比较，
#
p《0.05；与模型组相比，
*
p《0.05，
**
p《0.01。
[0072]
3.4桂枝甘草玉玳汤对小鼠脑组织中氨基酸类与单胺类神经递质的影响
[0073]
3.4.1对小鼠下丘脑5-ht、tph及pgd2含量的影响
[0074]
如表3所示，与空白组比较，模型组小鼠下丘脑中5-ht、tph及pgd2含量均显著降低(p《0.01)；与模型组比较，桂枝甘草玉玳汤各组5-ht、tph及pgd2含量均升高，其中中、高组差异具有统计学意义(p《0.05或p《0.01)。同等给药剂量下，本发明药物显著优于对比组。
[0075]
表3对小鼠下丘脑5-ht、tph及pgd2含量的影响
[0076][0077]
注：与空白组比较，
##
p《0.01；与模型组相比，
*
p《0.05，
**
p《0.01。
[0078]
3.4.2对小鼠海马组织中glu、γ-gaba含量的影响
[0079]
如表4所示，与空白组比较，模型组小鼠海马组织中glu、γ-gaba含量均显著降低(p《0.01)，glu/gaba含量显著升高(p《0.01)；与模型组比较，桂枝甘草玉玳汤各组glu含量均无显著差异，γ-gaba含量均显著升高，glu/gaba显著降低(p《0.01)，恢复glu/gaba平衡状态。同等给药剂量下，本发明药物显著优于玉兰花、姜黄、陈皮组。
[0080]
表4对小鼠海马组织中glu、γ-gaba含量的影响
[0081][0082]
注：与空白组比较，
##
p《0.01；与模型组相比，
**
p《0.01。
[0083]
3.4.2对小鼠皮层组织中ne、da及mt含量的影响
[0084]
如表5所示，与空白组比较，模型组小鼠皮层组织中ne、da含量均显著升高(p《0.05或p《0.01)，mt含量显著降低(p《0.01)；与模型组比较，桂枝甘草玉玳汤各组ne、da含量均降低，其中高组da含量差异有统计学意义，桂枝甘草玉玳汤各组mt含量均有所升高，其中高组差异有统计学意义。同等给药剂量下，本发明药物显著优于对比组。
[0085]
表5对小鼠皮层组织中ne、da及mt含量的影响
[0086][0087]
注：与空白组比较，
#
p《0.05，
##
p《0.01；与模型组相比，
*
p《0.05，
**
p《0.01。
[0088]
4小结
[0089]
在本试验条件下，可观察到桂枝甘草玉玳汤可抑制失眠小鼠自主活动情况，减少小鼠睡眠潜伏期、增加小鼠睡眠时间，可提高5-ht、tph、pgd2及mt含量，升高γ-gaba含量，恢复glu/gaba平衡状态，降低ne、da含量，对失眠动物产生镇静作用，具有改善失眠作用。
[0090]
试验例2本发明药物桂枝甘草玉玳汤治疗肝郁型失眠的临床观察
[0091]
失眠是指以反复入睡困难、睡后易醒、醒后难以入睡、睡眠时间减少和睡眠质量下降等为主要表现的一类睡眠障碍疾病。我国普通成年人群中失眠的患病率为9.2％～11.2％，长期失眠不仅会导致患者出现焦虑、抑郁等精神症状，还可导致多种慢性疾病如心血管疾病的发生。本研究通过筛选肝郁型失眠患者，观察“从肝论治”桂枝甘草玉玳汤对肝郁型失眠患者的疗效。
[0092]
1临床资料
[0093]
1.1一般资料
[0094]
选取2021年1月至2023年5月于福建省人民医院中医科就诊的失眠患者，对其中符合纳入标准的属于肝郁型失眠的152例患者进行研究。其中男70例，女82例，平均年龄(36.23
±
13.51)岁。
[0095]
1.2西医诊断标准
[0096]
依据《中国成年人失眠诊断与治疗指南》(2020版)中关于失眠的诊断标准。主要包含:以失眠为唯一症状，伴随入睡困难、睡眠时间短、早醒多梦、睡眠易醒、醒后难以再次入眠、疲倦无力、精神恍惚、记忆力下降、白天困顿等临床症状持续发生1月以上。对睡眠质量表示严重不满，并对生活和工作造成影响。
[0097]
1.3中医诊断和分型标准
[0098]
参照《中医内科学》第7版中关于不寐的诊断标准，属于肝郁型失眠，主症:入寐困难、醒后不寐、睡眠时间短、呓语、辗转难眠、多梦；次症:或善太息，情绪低落，甚则急躁易怒、头晕头胀，目赤耳鸣，口干而苦，两胁胀痛，甚则便秘溲赤，舌红、苔黄、脉弦等临床症状。以上主要症状至少包含一项，次症包含三项及以上。经物理检查和实验室各项常规化验指标未见异常改变。
[0099]
1.4纳入标准
[0100]
①
符合上述西医失眠诊断标准和中医不寐诊断标准；
[0101]
②
中医证型为肝郁型；
[0102]
③
入睡时间＞30min，和/或夜间觉醒次数≥2次/晚，和/或总睡眠时间＜6h，症状持续≥1个月；
[0103]
④
患者年龄18～60周岁；
[0104]
⑤
符合伦理委员会规定，患者均知情、自愿接受试验并签署知情同意书；
[0105]
⑥
患者耐受本次治疗方案。
[0106]
1.5排除标准
[0107]
①
不符合纳入标准的患者；
[0108]
②
妊娠或计划妊娠及哺乳期患者；
[0109]
③
近1周出现感染及发热的患者；
[0110]
④
近3个月内曾参加过其他临床试验的患者；
[0111]
⑤
伴有重大躯体疾病的患者；
[0112]
⑥
既往有癫痫、睡眠呼吸暂停、双相性精神障碍、精神发育迟缓、认知障碍等病史患者；
[0113]
⑦
近6个月内长期服用抗生素、菌群调节剂、糖皮质激素、免疫调节剂的患者，或近2周内曾服用抗生素、菌群调节剂、糖皮质激素、免疫调节剂的患者；
[0114]
⑧
近2周内服用过助眠类药物、抗精神病类药物、促胃肠动力药物、泻药或止泻药的患者；
[0115]
⑨
体质量指数(bmi)≥28kg/m2或bmi＜18.5kg/m2的患者；
[0116]
⑩
长期素食或肉食，或有严重饮食偏好的患者；近1周食用益生菌类食材(如酸奶、益力多等)的患者；过去7天内，曾跨越3个或3个以上时区工作或生活的患者。
[0117]
2方法
[0118]
2.1治疗方法
[0119]
152例肝郁型失眠患者，随机分为观察组和对照组，每组76例。观察组给予口服桂枝甘草玉玳汤治疗，处方:玉兰花6g,玳玳花6g,桂枝12g,甘草6g,姜黄6g,陈皮6g，由福建省人民医院中药房提供，诸药水煎服，取汁400ml，分早晚兑服，连续用药4周。对照组给予盐酸氟西汀胶囊口服(商品名:百优解，美国礼来苏州制药有限公司分装，国药准字j20170022，每粒20mg)，1粒/次，1次/天，连续用药4周。
[0120]
2.2观察指标
[0121]
2.2.1临床有效率评估
[0122]
观察治疗4周后两组临床疗效情况，根据《中医病症诊断疗效标准》评估疗效，痊愈:睡眠完全恢复；有效:失眠有所改善；无效:失眠无任何改善。
[0123]
2.2.2睡眠质量评估
[0124]
评估治疗4周后两组患者睡眠质量改善情况。匹兹堡睡眠质量指数量表(psqi)评分和失眠严重程度指数量表(isi)评分的变化情况，以评价患者的睡眠质量。
[0125]
psqi主要由睡眠质量、入睡时间、睡眠时间、睡眠效率、日间功能障碍等7个条目构成，每个条目0～3分4个等级，总分为0～21分，睡眠质量愈好则总分愈低；isi包括7个条目，每个条目0～4分5个等级，总分为0～28分，睡眠质量愈好则总分愈低。
[0126]
2.2.3安全性指标
[0127]
观察治疗过程中患者的不良反应发生情况，观察和评估患者的血常规、尿常规、心
电图、肝肾功能的变化情况。
[0128]
2.3统计学处理
[0129]
采用spss20.0统计软件进行数据的统计分析。计量资料符合正态分布者用(x
±
s)表示，治疗前后psqi评分和isi评分比较采用配对t检验进行组内比较，组间比较采用独立样本t检验进行比较；计数资料用卡方检验。以p＜0.05为差异有统计学意义。
[0130]
3结果
[0131]
3.1两组患者临床疗效比较
[0132]
结果如表6所示，观察组临床治愈率及总有效率显著高于对照组(p＜0.05)。
[0133]
表6两组患者临床疗效比较[n(％)]
[0134][0135]
注：与对照组比较，
#
p＜0.05
[0136]
3.2两组患者治疗前后psqi评分比较
[0137]
结果如表7所示，与治疗前比较，治疗后观察组患者psqi总分及各项评分均显著降低(p＜0.05或p＜0.01)，且观察组psqi总分及除睡眠效率得分外各项评分均显著低于对照组(p＜0.05或p＜0.01)。
[0138]
表7两组患者治疗前后psqi评分比较(分，x
±
s，n＝76)
[0139][0140]
注:与本组治疗前比较，
*
p＜0.05，
**
p＜0.01；与对照组治疗后比较，
#
p＜0.5
[0141]
3.3两组患者治疗前后isi评分比较
[0142]
结果如表8所示，与治疗前比较，治疗后观察组患者isi评分均显著降低(p＜0.01)，且观察组isi评分显著低于对照组(p＜0.01)。
[0143]
表8两组患者治疗前后isi评分(分，x
±
s，n＝76)
[0144][0145]
注:与本组治疗前比较，**p＜0.01；与对照组治疗后比较，##p＜0.01。
[0146]
试验例3本发明复方精油改善睡眠作用研究
[0147]
1材料
[0148]
1.1试验动物
[0149]
72只spf级icr小鼠，雄性，体质量为(18
±
2)g，购自上海斯莱克实验动物有限公司(生产许可证号：scxk(沪)2017-0005)。饲养于福建中医药大学实验动物中心spf级动物饲养室(使用合格证：syxk(闽)2019-0007)。
[0150]
1.2主要药物与试剂
[0151]
复方精油(由实施例6制备)；复方枣仁胶囊；对氯苯丙氨酸(p-chlorophenylalanine,pcpa，上海麦克林生化科技有限公司，批号c12072894)；戊巴比妥钠(武汉goodbio技术有限公司，批号:172866)；小鼠5-羟色胺(5-ht)检测试剂盒(上海西唐生物科技有限公司，批号：2105271)。
[0152]
1.3主要仪器
[0153]
infinite 200pro型多功能酶标仪(瑞士tecan公司)；milli-q超纯水机(美国millipore公司)；microfuge 22r台式离心机(美国beckman coulter公司)；bt224s电子天平(赛多利斯称重设备有限公司)。
[0154]
2方法
[0155]
2.1造模、分组及给药
[0156]
spf级icr小鼠正常适应性饲喂3d后，随机分为空白组(12只)、造模组(60)，除对照组外，连续两天于每日21:00给与各组动物腹腔注射pcpa(300mg/kg，0.1ml/10g)，当动物躁动不安、自主活动增强，表明模型制备成功。
[0157]
造模成功后将造模组小鼠随机分为模型组、阳性对照组(复方枣仁胶囊)、复方精油15min组、复方精油30min组及复方精油45min组，每组12只。复方精油组在造模后将小鼠置于雾化箱内，雾化激发，以鼻吸入的方式给药14d，给药组一日给药1次，分别连续给药15min、30min、45min。阳性对照组在造模之后采取每日早上9点以灌胃的方式给酸枣仁混悬液，给药14d。空白组和模型组不做药物处理。
[0158]
2.2小鼠自主活动检测
[0159]
给药结束1h后，将小鼠置于自主活动测定仪内，记录5min内小鼠活动次数，每隔5min记录1次，连续观察3次。
[0160]
2.3入睡潜伏期和睡眠时间的测定
[0161]
各组末次给药1h后，腹腔注射戊巴比妥钠(50mg/kg)，记录入睡潜伏期(即从开始注射戊巴比妥钠到翻正反射消失的时间)和睡眠时间(即从翻正反射消失到翻正反射恢复的时间)。
[0162]
2.4氨基酸类与单胺类神经递质的检测
[0163]
睡眠记录结束后2h，在冰面上迅速分离皮层、下丘脑组织，用预冷的0.01mol/l pbs缓冲液冲洗小鼠下丘脑组织，去除残留血液，称重，剪碎。按照1∶9的重量体积比加入pbs，冰上匀浆，5000
×
g离心10min，取上清液检测。按照检测试剂盒(5-h)说明书进行操作。
[0164]
2.5统计学分析
[0165]
试验数据以平均数
±
标准差表示，采用spss22.0统计软件进行单因素方差分析，组间比较符合正态分布且方差齐时，采用lsd检验；方差不齐时，采用games-howell检验。以p《0.05为差异有统计学意义。
[0166]
3结果
[0167]
3.1复方精油对小鼠自主活动的影响
[0168]
如表9所示，在连续给药14d过程中，比较观察到模型组动物的整体活动频率较对照组高，而复方精油吸入给药后失眠动物活动频率显著降低，明显抑制失眠动物自主活动(p《0.01)。
[0169]
表9复方精油对小鼠自主活动的影响(n＝12)
[0170][0171]
注：与空白组比较，
##
p《0.01；与模型组相比，
*
p《0.05，
**
p《0.01。
[0172]
3.3复方精油对小鼠入睡潜伏期和睡眠时间的影响
[0173]
如表10所示，与模型组比较，复方精油吸入给药后小鼠的睡眠潜伏期均减少，其中复方精油45min组小鼠可显著减少睡眠潜伏期(p《0.01)；复方精油30、45min吸入给药后小鼠的睡眠时间均显著增加(p《0.05或p《0.01)。
[0174]
表10复方精油对小鼠入睡潜伏期和睡眠时间的影响
[0175][0176]
注：与空白组比较，
#
p《0.05；与模型组相比，
*
p《0.05，
**
p《0.01。
[0177]
3.4复方精油对小鼠下丘脑中5-ht的影响
[0178]
如表11所示，与空白组比较，模型组小鼠下丘脑中5-ht含量均显著降低(p《0.01)；与模型组比较，复方精油各组5-ht含量均升高，其中30、45min组差异具有统计学意义(p《0.05或p《0.01)。
[0179]
表11对小鼠下丘脑5-ht含量的影响
[0180][0181]
注：与空白组比较，
##
p《0.01；与模型组相比，
*
p《0.05，
**
p《0.01。

技术特征：
1.一种改善睡眠作用的药物组合物，其特征在于：它是由下述重量配比的原料药制备而成：玉兰花4-8份、玳玳花4-8份、桂枝8-16份、甘草4-8份、姜黄4-8份、陈皮4-8份。2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于：它是由下述重量配比的原料药制备而成：玉兰花6份、玳玳花6份、桂枝12份、甘草6份、姜黄6份、陈皮6份。3.根据权利要求1或2所述的药物组合物，其特征在于：它是由所述原料的原生药粉、水或有机溶剂提取物为活性成分，加入药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成的制剂。4.根据权利要求3所述的药物组合物，其特征在于：所述的制剂是口服制剂、吸入制剂。5.根据权利要求4所述的药物组合物，其特征在于：所述的口服制剂包括口服液、片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、散剂；所述的吸入制剂包括吸入气雾剂、雾化剂、芳香剂。6.一种制备权利要求1-5任意一项所述的药物组合物的方法，其特征在于：它包括如下步骤：a、称取各重量配比的原料药；b、原料打粉、或加水煎煮，提取液浓缩、加入药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成的制剂。7.权利要求1-5任意一项所述的药物组合物在制备改善睡眠作用的药物中的用途。8.根据权利要求7所述的用途，其特征在于：所述的药物的给药方式是口服给药、吸入给药。9.权利要求1-5任意一项所述的药物组合物在制备具有解郁疏肝、养心提神、温通血脉功效的药物中的用途。10.根据权利要求9所述的用途，其特征在于：所述的药物用于调节抑郁、焦虑体质人群睡眠障碍；减少睡眠潜伏期、增加睡眠时间。

技术总结
本发明提供了一种改善睡眠作用的药物组合物，它是由下述重量配比的原料药制备而成：玉兰花4-8份、玳玳花4-8份、桂枝8-16份、甘草4-8份、姜黄4-8份、陈皮4-8份。本发明还提供了该药物组合物的制备方法和用途。本发明药物原料配伍精当，药效明确，通过现代药理学方法证明，本发明各原料药配伍使用，改善睡眠功效，发挥了协同增效的作用。了协同增效的作用。


技术研发人员：张玉琴 罗书萍 褚克丹 徐伟 李煌
受保护的技术使用者：福建中医药大学
技术研发日：2023.08.14
技术公布日：2023/10/6