Wee1激酶抑制剂的制备及其应用的制作方法

wee1激酶抑制剂的制备及其应用
技术领域
1.本发明属涉及药物化学领域，更具体而言，涉及具有wee1激酶抑制作用的新化合物，及其制备方法和该类化合物在抗肿瘤药物制备中的用途。


背景技术：

2.wee-1蛋白激酶是细胞周期检查点中重要的负调控蛋白。细胞周期检查点包括g1(细胞静息期)到s期(dna合成期)转变的g1期检查点，g2(细胞分裂准备期)到m(细胞分裂期)期转变的g2期检查点以及m期metaphase(细胞分裂期中期)到anaphase(细胞分裂期后期)转变的纺锤体检查点。wee-1蛋白激酶在g2期检查点中发挥了重要的作用。细胞进入m期依赖于cdk1激酶活性，wee-1通过磷酸化cdk1蛋白的tyr15，抑制cdk1的活性，阻止细胞进入m期(细胞分裂期)。而polo kinase激酶磷酸化wee-1，激活wee-1蛋白的降解，促进细胞进入m期。由此可见，wee-1激酶活性决定了g2检查点的活性，进而调节细胞g2到m期的转变[cell cycle,2013,12(19):3159-64.]。
[0003]
当细胞的dna受到损伤时，g1期、s期和g2期检查延迟细胞进入分裂期，为细胞进入分裂之前修复损伤的dna争取了时间，从而保证了基因组的完整性。g1期检查点的关键调控因子p53在很多恶性肿瘤细胞中是突变形式(pnas,2007,104(10):3753-3758)。p53功能缺陷的肿瘤细胞，在dna受到损伤时，不能将细胞周期阻滞在g1期，因此更加依赖于g2期检查点。针对dna损伤，g2期检查点通过平行且互相联系的两条路径抑制cdk1的磷酸化，从而延迟细胞进入分裂期。根据dna损伤类型，共济失调性毛细血管扩张症变异(atm)蛋白激酶或者共济失调性毛细血管扩张相关(atr)蛋白激酶被激活(oncotarget,2016,7(31):49902-49916)。
[0004]
因此，抑制g2期检查点，可以选择性的杀伤肿瘤细胞。而wee-1激酶活性在g2期检查点中的重要作用，提示wee-1激酶决定了dna损伤后肿瘤细胞的修复或死亡，抑制wee-1活性可以促进dna损伤后未修复的肿瘤细胞进入m期，诱发凋亡[curr clin pharmacol,2010.5(3):186-91]。
[0005]
wee1在很多恶性肿瘤中过表达，比如肝癌、乳腺癌、恶性胶质瘤、黑色素瘤、成人和儿童脑瘤。其中一部分肿瘤细胞g1检查点异常，如果抑制wee1活性会导致g2期检查点故障，此时带有没有修复的损伤dna的细胞会持续进行分裂，最终分裂致死。(molecular cancer therapeutics,2013,12(12):2675-2684.)无论通过嘧啶衍生物(pd0166285)或者小干扰rna敲低方式，抑制wee1的活性都会使卵巢癌、结肠癌、宫颈癌、骨肉瘤、恶性胶质瘤和肺癌细胞对放射和拓扑异构酶抑制产生的dna损伤更敏感。因此，wee1抑制剂单药和联合用药都具有广阔的发展空间(cancerbiology&therapy,2010,9(7):523-525)。
[0006]
astrazeneca的wee1抑制剂azd1775已进入临床ii期，有超过30项的临床实验正在开发，并已显示出良好的治疗效果。目前，相关的wee1抑制剂专利主要有：wo2007126122，wo2008133866，wo2011034743，wo2013039854，wo2018090939，wo2018133829，wo2019011228，wo2019037678，wo2019085933，wo2019173082，wo2020083404，
wo2020192581，wo2020221358，wo2021043152。但是，目前尚无上市的该靶点产品。因此，开发更高效抑制该靶点的抑制剂是具有十分重要意义。


技术实现要素：

[0007]
一种具有通式(i)所示的化合物、其立体异构体、可药用的盐、多晶型物或异构体，其中通式(i)所示的化合物结构如下：
[0008][0009]
其中，
[0010]
每个l1在每次出现时独立地选自键、o、nh、ch2、co或s；
[0011]
每个l2在每次出现时独立地选自键、o、nh、ch2、co或s；
[0012]
每个x1、x2在每次出现时独立地选自n或cr9；
[0013]
当a为单键时，x3选nr1或者nh；
[0014]
当a为双键时，x3选n；
[0015]
每个环b在每次出现时独立地选自3-8元杂环，所述3-8元杂环在每次出现时独立地包含1、2、3或4个选自n、o、或s的杂原子；每个b在每次出现时独立地可选地被1、2、3、4、5或6个r
11
取代或不取代；
[0016]
每个ar1在每次出现时独立地选自苯基、萘基、5元杂芳基、6元杂芳基、7元杂芳基、8元杂芳基、9元杂芳基或10元杂芳基，每个杂芳基在每次出现时独立地包含1、2、3或4个选自n、o、或s的杂原子；每个ar1在每次出现时独立地可选地被1、2、3、4、5或6个r
12
取代或不取代；
[0017]
每个ar2在每次出现时独立地选自苯基、萘基、5元杂芳基、6元杂芳基、7元杂芳基、8元杂芳基、9元杂芳基或10元杂芳基，每个杂芳基在每次出现时独立地包含1、2、3或4个选自n、o、或s的杂原子；每个ar2在每次出现时独立地可选地被1、2、3、4、5或6个r
13
取代或不取代；
[0018]
每个r
10
在每次出现时独立地选自氘、-c
1-6
烷基、-c
1-6
亚烷基-(卤素)
1-3
、c
1-6
杂烷基、-c
1-6
亚烷基-(or6)
1-3
、-c
1-6
亚烷基-nr6r7、-c(＝o)r6、-c(＝o)or6、-oc(＝o)r6、-c(＝o)nr6r7或-c
3-6
碳环基；每个r9独立地可选地被1、2、3、4、5或6个选自氘、卤素、-c
1-6
烷基、-c
1-6
烷氧基、氧代、-or6、-nr6r7、-cn、-c(＝o)r6、-c(＝o)or6、-oc(＝o)r6、-c(＝o)nr6r7、-nr6c(＝o)r7或-s(o)2nr6r7的取代基取代或不取代；
[0019]
每个r9、r
11
、r
12
、r
13
在每次出现时独立地选自氘、卤素、氧代、-c
1-6
烷基、-c
1-6
亚烷基-(卤素)
1-3
、c
1-6
杂烷基、-cn、-or6、-c
1-6
亚烷基-(or6)
1-3
、-o-c
1-6
亚烷基-(卤素)
1-3
、-sr6、-s-c
1-6
亚烷基-(卤素)
1-3
、-nr6r7、-c
1-6
亚烷基-nr6r7、-c(＝o)r6、-c(＝o)or6、-oc(＝o)r6、-c(＝o)nr6r7、-nr6c(＝o)r7、-s(o)2nr6r7或-c
3-6
碳环基；每个r9、r
11
、r
12
、r
13
独立地可选地被1、2、3、4、5或6个选自氘、卤素、-c
1-6
烷基、-c
1-6
烷氧基、氧代、-or6、-nr6r7、-cn、-c(＝o)r6、-c(＝o)or6、-oc(＝o)r6、-c(＝o)nr6r7、-nr6c(＝o)r7或-s(o)2nr6r7的取代基取代或不取代；
[0020]
每个r1在每次出现时独立地选自在每次出现时独立地选自或者-c
1-6
烷基、-c
2-6
烯基、-c
2-炔基、-c
1-6
亚烷基-(卤素)
1-3
、c
1-6
杂烷基、-cn、-or6、-c
1-6
亚烷基-(or6)
1-3
、-o-c
1-6
亚烷基-(卤素)
1-3
、-sr6、-s-c
1-6
亚烷基-(卤素)
1-3
、-nr6r7、-c
1-6
亚烷基-nr6r7、-c(＝o)r6、-c(＝o)or6、-oc(＝o)r6、-c(＝o)nr6r7、-nr6c(＝o)r7、-s(o)2nr6r7、-c
3-6
碳环基、3-8元杂环；3-8元杂环在每次出现时独立地包含1、2、3或4个选自n、o、或s的杂原子；每个r1独立地可选地被1、2、3、4、5或6个选自氘、卤素、-c
1-6
烷基、-c
1-6
烷氧基、氧代、-or6、-nr6r7、-cn、-c(＝o)r6、-c(＝o)or6、-oc(＝o)r6、-c(＝o)nr6r7、-nr6c(＝o)r7或-s(o)2nr6r7的取代基取代或不取代；
[0021]
其中：
[0022]
每个l3在每次出现时独立地选自键、o、nh、co或s；
[0023]
每个环a是c
3-10
碳环，所述的可以连接在所述环a的相同的碳原子上或不同的原子上；
[0024]
每个r2是-or6、-nr6r7、-sr6、-s(＝o)r6、-s(＝o)2r6、5-10元杂芳基或3-10元杂环基，每个杂环基和杂芳基在每次出现时独立地包含1、2、3或4个选自n、o、s、s＝o或s(＝o)2的杂原子，每个r3在每次出现时独立地可选地被1、2、3、4、5或6个r
19
取代或不取代；
[0025]
每个r3和r4在每次出现时独立地选自氘、氢、卤素、-c
1-6
烷基、、-c
2-6
烯基、-c
2-6
炔基、氧代、-or6、-nr6r7、-cn、-c(＝o)r6、-c(＝o)or6、-oc(＝o)r6、-c(＝o)nr6r7、-nr6c(＝o)r7或-s(o)2nr6r7或-c
3-10
碳环基、每个杂环基和杂芳基在每次出现时独立地包含1、2、3或4个选自n、0、s、s＝0或s(＝o)2的杂原子；每个r3和r4在每次出现时独立地可选地被1、2、3、4、5或6个选自氘、卤素、氧代、-c
1-6
烷基、-c
1-6
烷氧基、氧代、-or6、-nr6r7、-cn、-c(＝o)r6、-c(＝o)or6、-oc(＝o)r6、-c(＝o)nr6r7、-nr6c(＝o)r7或-s(o)2nr6r7的取代基取代或不取代；
[0026]
每个r5在每次出现时独立地选自氘、卤素、氧代、-c
1-6
烷基、-c
1-6
亚烷基-(卤素)
1-3
、c
1-6
杂烷基、-cn、-or6、-c
1-6
亚烷基-(or6)
1-3
、-o-c
1-6
亚烷基-(卤素)
1-3
、-sr6、-s-c
1-6
亚烷基-(卤素)
1-3
、-nr6r7、-c
1-6
亚烷基-nr6r7、-c(＝o)r6、-c(＝o)or6、-oc(＝o)r6、-c(＝o)nr6r7、-nr6c(＝o)r7、-s(o)2nr6r7或-c
3-6
碳环基，每个杂环基和杂芳基在每次出现时独立地包含1、2、3或4个选自n、o、s、s＝o或s(＝o)2的杂原子；每个r3和r4在每次出现时独立地可选地被1、2、3、4、5或6个选自氘、卤素、氧代、-c
1-6
烷基、-c
1-6
烷氧基、氧代、-or6、-nr6r7、-cn、-c(＝o)r6、-c(＝o)or6、-oc(＝o)r6、-c(＝o)nr6r7、-nr6c(＝o)r7或-s(o)2nr6r7的取代基取代或不取代；
[0027]
每个ar3在每次出现时独立地选自苯基、萘基、5元杂芳基、6元杂芳基、7元杂芳基、8元杂芳基、9元杂芳基或10元杂芳基，每个杂芳基在每次出现时独立地包含1、2、3或4个选自n、o、或s的杂原子；每个ar3在每次出现时独立地可选地被1、2、3、4、5或6个r
13
取代或不取代；
[0028]
每个r
13
在每次出现时独立地选自氘、卤素、氧代、-c
1-6
烷基、-c
1-6
亚烷基-(卤素)
1-3
、c1-6
杂烷基、-cn、-or6、-c
1-6
亚烷基-(or6)
1-3
、-o-c
1-6
亚烷基-(卤素)
1-3
、-sr6、-s-c
1-6
亚烷基-(卤素)
1-3
、-nr6r7、-c1-6亚烷基-nr6r7、-c(＝o)r6、-c(＝o)or6、-oc(＝o)r6、-c(＝o)nr6r7、-nr6c(＝o)r7、-s(o)2nr6r7或-c
3-6
碳环基；每个r
12
独立地可选地被1、2、3、4、5或6个选自氘、卤素、-c
1-6
烷基、-c
1-6
烷氧基、氧代、-or6、-nr6r7、-cn、-c(＝o)r6、-c(＝o)or6、-oc(＝o)r6、-c(＝o)nr6r7、-nr6c(＝o)r7或-s(o)2nr6r7的取代基取代或不取代；
[0029]
每个r6和r7在每次出现时独立地选自氢或-c1-6烷基，每个r6和r7独立地可选地被1、2、3、4、5或6个r8取代或不取代；或r7和r7与它们共同连接的n原子一起形成3-10元杂环，所述的3-10元杂环可进一步包含1、2、3或4个选自n、o、s、s(＝o)或s(＝o)2的杂原子，且所述的3-10元杂环独立地可选地被1、2、3、4、5或6个r8取代或不取代；
[0030]
每个r8在每次出现时独立地选自氘、卤素、氧代、-c
1-6
烷基、-c
1-6
亚烷基-(卤素)
1-3
、c
1-6
杂烷基、-cn、-o-c
1-6
亚烷基-(卤素)
1-3
、-sc
1-6
烷基、-s-c
1-6
亚烷基-(卤素)
1-3
、-nc
1-6c1-6
、-c
1-6
亚烷基-nc
1-6
烷基c
1-6
烷基、-c(＝o)c
1-6
烷基、-c(＝o)oc
1-6
烷基、-oc(＝o)c
1-6
烷基、-c(＝o)nc
1-6
烷基c
1-6
烷基、-nc
1-6
烷基c(＝o)c
1-6
烷基、-s(o)2nc
1-6
烷基c
1-6
烷基或-c
3-6
碳环基；
[0031]
n选自0、1、2、3、4、5或6；
[0032]
s选自0、1、2、3、4、5或6；
[0033]
p选自0、1、2、3、4、5或6；
[0034]
q选自0、1、2、3、4、5或6。
[0035]
在一些实施方式中，每个r1选自如下结构：
[0036][0037][0038]
学上可接受的盐选自以下化合物、其异构体、溶剂合物或其前体，或它们的药学上可接受的盐：
[0039]
[0040]
[0041]
[0042][0043]
一种具有通式(ii)所示的化合物、其立体异构体、可药用的盐、多晶型物或异构体，其中通式(ii)所示的化合物结构如下：
[0044][0045]
其中，
[0046]
每个l1在每次出现时独立地选自键、o、nh、ch2、co或s；
[0047]
每个l2在每次出现时独立地选自键、o、nh、ch2、co或s；
[0048]
每个x1、x2在每次出现时独立地选自n或c；
[0049]
每个r1在每次出现时独立地选自氘、-c
1-6
烷基、-c
1-6
烯基、-c
1-6
炔基、苯基、6元杂芳基、-c
1-6
亚烷基-(卤素)
1-3
、-c
1-6
亚烯基-(卤素)
1-3
、-c
1-6
亚炔基-(卤素)
1-3
、c
1-6
杂烷基、-c
1-6
亚烷基-nr6r7、-c(＝o)r6、-c(＝o)or6、-oc(＝o)r6、-c(＝o)nr6r7、-nr6c(＝o)r7、-s(o)2nr6r7或-c
3-6
碳环基；每个r1独立地可选地被1、2、3、4、5或6个选自氘、卤素、-c
1-6
烷基、-c
1-6
烷氧基、氧代、-or6、-nr6r7、-cn、-c(＝o)r6、-c(＝o)or6、-oc(＝o)r6、-c(＝o)nr6r7、-nr6c(＝o)r7或-s(o)2nr6r7的取代基取代或不取代；
[0050]
每个r2在每次出现时独立地选自苯基、萘基、6元杂芳基、9元杂芳基或10元杂芳基每个杂芳基在每次出现时独立地包含1、2、3或4个选自n、o、或s的杂原子；每个ar2在每次出现时独立地可选地被1、2、3、4、5或6个r8取代或不取代；
[0051]
每个环b在每次出现时独立地选自3-8元杂环，所述3-8元杂环在每次出现时独立地包含1、2、3或4个选自n、o、或s的杂原子；每个b在每次出现时独立地可选地被1、2、3、4、5或6个r9取代或不取代；
[0052]
每个ar2在每次出现时独立地选自苯基、萘基、5元杂芳基、6元杂芳基、7元杂芳基、8元杂芳基、9元杂芳基或10元杂芳基，每个杂芳基在每次出现时独立地包含1、2、3或4个选自n、o、或s的杂原子；每个ar2在每次出现时独立地可选地被1、2、3、4、5或6个r
10
取代或不取代；
[0053]
每个r8、r9、r
10
在每次出现时独立地选自氘、卤素、氧代、-c
1-6
烷基、-c
1-6
亚烷基-(卤素)
1-3
、c
1-6
杂烷基、-cn、-or6、-c
1-6
亚烷基-(or6)
1-3
、-o-c
1-6
亚烷基-(卤素)
1-3
、-sr6、-s-c
1-6
亚烷基-(卤素)
1-3
、-nr6r7、-c
1-6
亚烷基-nr6r7、-c(＝o)r6、-c(＝o)or6、-oc(＝o)r6、-c(＝o)nr6r7、-nr6c(＝o)r7、-s(o)2nr6r7或-c
3-6
碳环基；
[0054]
每个r6和r7在每次出现时独立地选自氢或-c
1-6
烷基、-c
1-6
亚烷基-(卤素)
1-3
、c
1-6
杂烷基、-cn；
[0055]
在一些实施方式中，式(i)所述的化合物或者其异构体、溶剂合物或其前体，或它们的药学上可接受的盐选自以下化合物、其异构体、溶剂合物或其前体，或它们的药学上可接受的盐：
[0056][0057]
本发明的另一个目的是一种药物组合物，其含有药理上可接受的赋形剂或载体，以及本发明的式(1a)或式(1b)所示的化合物、其异构体或其药学上可接受的盐作为活性成分。
[0058]
本发明的再一个目的提供了本发明的上述化合物、其异构体或其药学上可接受盐用于制备治疗由wee1介导的相关疾病的药物中的应用。
[0059]
某些化学术语
[0060]
除非有相反陈述，否则下列用在说明书和权利要求书中的术语。
[0061]
具有下述含义在本文中使用的表示方式“c
x-y”表示碳原子数的范围、其中x和y均为整数，例如c
3-8
环烷基表示具有3-8个碳原子的环烷基，即具有3、4、5、6、7或8个碳原子的
环烷基。还应理解，“c
3-8”还包含其中的任意亚范围、例如c
3-7
、c
3-6
、c
4-7
、c
4-6
、c
5-6
等。
[0062]“烷基”指含有1至20个碳原子，例如1至18个碳原子、1至12个碳原子、1至8个碳原子、1至6个碳原子或1至4个碳原子的直链或支链的烃基基团。烷基的非限制性实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1,1,2-三甲基丙基、1,1-二甲基丁基、1,2二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基和2-乙基丁基。所述烷基可以是取代的或未取代的。
[0063]“烯基”指含有至少一个碳碳双键和通常2至20个碳原子例如2至8个碳原子、2至6个碳原子或2至4个碳原子的直链或支链的烃基基团。烯基的非限制性实例包括乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、1-丁烯基、2-丁烯基、3-丁烯基、2-甲基-2-丙烯基、1，4-戊二烯基和1，4-丁二烯基。所述烯基可以是取代的或未取代的。
[0064]“炔基”指含有至少一个碳碳三键和通常2至20个碳原子，例如2至8个碳原子、2至6个碳原子或2至4个碳原子的直链或支链的烃基基团。炔基的非限制性实例包括乙炔基、1-丙炔基、2-丙炔基、1-丁炔基、2-丁炔基和3-丁炔基。所述炔基可以是取代的或未取代的。
[0065]“环烷基”指含有3至14个碳环原子的饱和环形烃基取代基。环烷基可以是单碳环，通常含有3至7个碳环原子。单环环烷基的非限制性实例包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基和环庚基。环烷基可选择地可以是稠合到一起的双或三环、如十氢萘基、所述环烷基可以是取代的或未取代的。
[0066]“杂环基”、“杂环烷基”、“杂环”是指稳定的3-18元单价非芳香环，包括2-12个碳原子，1-6个选自氮、氧和硫的杂原子。除非另作说明，杂环基基团可以是单环、双环、三环或四环系统，其可能包含稠环、螺环或桥环系统，杂环基上的氮、碳或硫可选择性的被氧化，氮原子可选择性的被季铵化，杂环基可以部分或完全饱和。杂环基可以通过环上的碳原子或杂原子与分子的其余部分通过一个单键连接。包含稠环的杂环基中可以包含一个或多个芳环或杂芳环，只要与分子的其余部分连接的是非芳香环上的原子。为了本技术，杂环基优选的是一个稳定的4-11元单价非芳香单环或二环，其包含1-3个选自氮、氧和硫的杂原子，更优选的是一个稳定的4-8元单价非芳香单环，其包含1-3个选自氮、氧和硫的杂原子。杂环基的非限制性实例包括氮杂环庚烷基、氮杂环丁基、十氢异喹啉基、二氢呋喃基、二氢吲哚基、二氧戊烷基、1,1-二氧-硫代吗啉基、咪唑烷基、咪唑啉基、异噻唑烷基、异恶唑烷基、吗啉基、八氢吲哚基、八氢异吲哚基、恶嗪基、哌嗪基、哌啶基、4-哌啶酮基、吡喃基、吡唑烷基、吡咯烷基、喹嗪基、奎宁环基、四氢呋喃基、四氢吡喃基等。
[0067]“螺杂环基”指5至20元，单环之间共用一个原子(称螺原子)的多环杂环基团，其中一个或多个环原子选自氮、氧或s(o)m(其中m是整数0至2)的杂原子，其余环原子为碳。这些可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共扼的电子系统优选为6至14元，更优选为7至10元。根据环与环之间共用螺原子的数目将螺环烷基分为单螺杂环基、双螺杂环基或多螺杂环基，优选为单螺环烷基和双螺环烷基。更优选为4元/4元、4元/5元、4元/6元、5元/5元或5元/6元单螺环基。螺杂环基的非限制性实施例包含：
[0068][0069]“稠杂环基”指5至20元，系统中的每个环与体系中的其他环共享毗邻的一对原子的多环杂环基团，一个或多个环可以含有一个或多个双键,但没有一个环具有完全共轭的π电子系统，其中一个或多个环原子选自氮、氧或s(o)m(其中m是整数0至2)的杂原子，其余环原子为碳。优选为6至14元，更优选为7至10元。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环稠杂环烷基，优选为双环或三环，更优选为5元/5元或5元/6元双环稠杂环基。稠杂环基的非限制性实施例包含：
[0070][0071]“芳基”或“芳香基”指含有6至14个碳原子的芳香族单环或稠合多环基团，优选为6至10元，例如苯基和萘基，更优选为苯基。所述芳基环可以稠合于杂芳基、杂环基或环烷基环上、其中与母体结构连接在一起的环为芳基环。
[0072]“杂芳基”或“杂芳香基”是指5-16元环状系统，其包含1-15个碳原子，优选的1-10个碳原子，1-4个选自氮，氧和硫的杂原子，至少一个芳香环。除非另作说明，杂芳基可以是单环、双环、三环或四环系统，其可能包含稠环或桥环系统，只要与分子其它部分的连接点为芳环原子，杂芳环上的氮原子、碳原子和硫原子可以透择性的被氧化，氮原子可选择性的被季铵化。为了本发明，杂芳基优选的为稳定的4-11元单芳香环，其包含1-3个选自氮、氧和硫的杂原子，更优选的为稳定的5-8元单芳香环，其包含1-3个选自选自氮、氧和硫的杂原子。杂芳基的非限定性实例包括吖啶基、氮杂卓基、苯并咪唑基、苯并吲哚基、苯并二氧芑基、苯并二恶茂基、苯并呋喃酮基、苯并呋喃基、苯并萘并呋喃基、苯并吡喃酮基、苯并吡喃基、苯并吡唑基、苯并噻二唑基、苯并噻唑基、苯并三唑基、呋喃基、咪唑基、吲唑基、吲哚基、恶唑基、嘌呤基、吡嗪基、吡唑基、哒嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、奎宁基、四唑基，噻二唑基、噻唑基、噻吩基、三嗪基，三唑基等。本技术中，杂芳基优选为5-8元杂芳基，其包含1-3选自选自氮、氧和硫的杂原子，更优选为吡啶基、嘧啶基、噻唑基。所述杂芳基可以是取代的或未取代的。
[0073]“卤素”指氟、氯、溴或碘。
[0074]“羟基”指-oh，“氨基”指-nh2，“酰胺基”指-nhco-，“氰基”指-cn，“硝基”指-cn，“异氰基”指-nc，“三氟甲基”指-cf3。
[0075]
本文单独或作为其它成分的一部分使用的术语“杂原子”或“杂”是指除碳和氢之外的原子，杂原子独立地选自氧、氮、硫、磷、硅、硒和锡，但不限于这些原子，在出现两个或更多杂原子的实施方案中，所述两个或更多杂原子可彼此相同，或者所述两个或更多杂原子中的一些或全部此不同。
[0076]
本文单独或组合使用的术语“稠”或“稠环”是指两个或更多个环共享一个或更多个键的环状结构。
[0077]
本文单独或组合使用的术语“螺”或“螺环”是指两个或更多个环共享一个或更多个原子的环状结构。
[0078]“任选”或“任选地”意味着随后所描述的事件或环境可以但不必发生，该说明包括该事件或环境发生或不发生地场合例如，“任选被烷基取代的杂环基团”意味着烷基可以但不必须存在，该说明包括杂环基团被烷基取代的情形和杂环基团不被烷基取代的情形。
[0079]“取代的”指基团中的一个或多个原子，较佳为5个、更佳为1～3个原子彼此独立地被相应数目的取代基取代。不言而喻，取代基处在它们的可能的化学位置本领域技术人员能够在不付出过多努力的情况下确定(通过实验或理论)可能或不可能的取代。例如，具有游离的胺基或羟基与具有不饱和(如烯烃)键的碳原子结合时可能是不稳定的。所述取代基包括但不限于羟基、胺基、卤素、氰基、c
1-6
烷基、c
1-6
烷氧基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
3-8
环烷基等。
[0080]“药物组合物”指含有一种或多种本文所述的化合物或其可药用的盐或前药以及其他分例如可药用的载体和赋形剂的组合物。药物组合物的目的是促对生物体的给药、利于活性成分的吸收进而发挥生物活性。
[0081]“异构体”指具有相同分子式但其原子结合的性质或顺序或其原子的空间排列不同的化合物称为“异构体”、其原子空间排列不同的异构体称为“立体异构体”。立体异构体包括光学异构体、几何异构体和构象异构体。本发明的化合物可以以光学异构体形式存在。根据手性碳原子周围取代基的构型，这些光学异构体是“r”或“s”构型。光学异构体包括对映异构体和非对映异构体、制备和分离光学异构体的方法是本领域中已知的。
[0082]
本发明的化合物也可以存在几何异构体。本发明考虑由碳-碳双键、碳-氮双键、环烷基或杂环基团周的取代基的分布所产生的各种几何异构体和其混合物。碳-碳双键或碳-氮键周围的取代基指定为z或e构型、环烷基或杂环周围的取代基指定为顺式或反式构型。
[0083]
本发明的化合物还可能显示互变异构现象，例如酮-烯醇互变异构。
[0084]
应该理解，本发明包括任何互变异构或立体异构形式和其混合物、并且不仅限于化合物的命名或化学结式中所使用的任何一个互变异构或立体异构形式。
[0085]“同位素”是在本发明化合物中出现的原子的所有同位素。同位素包括具有相同原子序数但不同质量数的那些原子。适合并入本发明化合物中的同位素的实例是氢、碳、氮、氧、磷、氟和氯，分别例如但不限于2h、3h、
13
c、
14
c、
15
n、
18
o、
31
p、
32
p、
35
s、
18
f和
36
cl。本发明的同位素标记化合物通常可通过本域技术人员已知的传统技术或通过与所附实施例中描的那些类似的方法使用适当的同位素标记的试剂代替非同位素标记的剂制。这样的化合物具有各种潜在用途、例如作为测定生物活性中的标样和试剂。在稳定同位素的情况下，这样的化合物具有有利地改变生物、药理学或药代动力学性质的潜力。
[0086]“前药”是指本发明的化合物可以以前药的形式给予。前药是指在活体内的生理条件下例如通过氧化、还原、水解等(它们各自利用酶或在没有酶参与下进行)转化成本发明的生物活性化合物的衍生物。前药的实例是下述化合物：其中本发明的化合物中的胺基被酰化、烷基化或磷酸化，例如二十烷酰基胺基、丙胺酰胺基、新戊酰氧基甲基胺基、或其中羟基被酰化、烷基化、磷酸化或转化成硼酸盐，例如乙酰氧基、棕榈酰氧基、新戊酰氧基、琥珀酰氧基、富马酰氧基、丙胺酰氧基、或其中羧基被酯化或酰胺化，或其中巯基与选择性地向靶和/或向细胞的胞质溶胶递送药物的载体分子，例如肽形成二硫桥键、这些化合物可以由
本发明的化合物根据公知方法制备。
[0087]“可药用的盐”或者“药学上可接受的”是指由可药用的碱或酸，包括无机碱或酸和有机碱或酸制成的。在本发明的化合物含有一个或多个酸性或碱性基团的情况下，本发明还包含它们相应的可药用盐。因此，含有酸性基团的本发明的化合物可以以盐形式存在并可根据本发明使用，例如作为碱金属盐、碱土金属盐或作为铵盐。这样的盐的更确切实例包括钠盐、钾盐、钙盐、镁盐或与胺或有机胺，例如伯胺、仲胺、叔胺、环胺等，例如氨、异丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺、乙醇胺、二乙醇胺、乙醇胺、二环己胺、乙二胺、嘌呤、哌嗪、哌啶、胆碱和咖啡因等特别优选的有机碱为异丙胺、二乙胺、乙醇胺、三甲胺、二环己胺、胆碱和咖啡因的盐。含有碱性基团的本发明的化合物可以盐形式存在并可根据本发明以它们与无机或有机酸的加成的形式使用。合适的酸的实例包括盐酸、氢溴酸、磷酸、硫酸、磷酸、甲磺酸、对甲苯磺酸、萘二磺酸、草酸、乙酸、酒石酸、乳酸、水杨酸、苯甲酸、甲酸、丙酸、特戊酸、丙二酸、琥珀酸、庚二酸、富马酸、马来酸、苹果酸、胺基磺酸、苯基丙酸、葡糖酸、抗坏血酸、异烟酸、柠檬酸、己二酸和本领域技术人员已知的其它酸。如果本发明的化合物在分子中同时含有酸性和碱性基团，本发明除所提到的盐形式外还包括内盐或内铵盐。各盐通过本领域技术人员已知的常规方法获得，例如通过在溶剂或分散剂中使这些与有机或无机酸或碱接触或通过与其它盐阴离子交换或阳离子交换。
[0088]
因此，在本技术中当提及“化合物”、“本发明化合物”或“本发明所化合物”时，包括所有所述化合物形式、例如其前药、稳定同位素衍生物、可药用的盐、异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异体及其混合物。
[0089]
在本文中、术语“肿瘤”包括良性肿瘤和恶性肿瘤(例如癌症)。
[0090]
在本文中，术语“癌症”包括bruton's酪氨酸激酶参与其发生的各种恶性肿瘤、包括但不限于非小细胞肺癌、食管癌、黑色素瘤、横纹肌肉榴、细胞癌、多发性骨髓瘤、乳腺癌卵巢癌、子宫膜癌、宫颈癌、胃癌、结癌、膀胱癌、胰腺癌、肺癌、乳腺癌、前列腺癌和肝癌(例如肝细胞癌)，更具体为肝癌、胃癌和膀胱癌。
[0091]
本文所使用术语“有效量”、“治疗有效量”或“药学有效量”是指服用后足以在某种程度上缓解所治疗的疾病或病症的一个或多个症状的至少一种药剂或化合物的量。其结果可以为迹象、症状或病因的消减和/或缓解或生物系统的任何其它所需变化。例如，用于治疗的“有效量”是在临床上提供显著的病症缓解效果所需的包含本文公开化合物的组合物的量。可使用诸如剂量递增试验的技术测定适合于任意个体病例中的有效量。
[0092]
本发明使用的术语“多晶型物”或“多晶型(现象)”是指本发明的化合物具有多种晶型格形态，本发明的一些化合物可能有一个以上的晶体形式，本发明涵盖所有的多品型态或其混合物。
[0093]
本发明化合物的中间体化合物及其多品形物也在本发明的范围内。
[0094]
结晶经常产生本发明化合物的溶剂化物，本文所用术语“溶剂化物”是指由一个或多个本发明化合物分子和一个或多个溶剂分子组合成的合体。
[0095]
溶剂可以是水，这种情况下，溶剂化物是水合物。另外还可以是有机溶剂。因此，本发明化合物可作为水合物存在，包括一水合物、二水合物、半水合物、三水合物、四水合物等，以及相应的溶剂化形态。本发明化合物可以是真溶剂化物，但在其它一些情况下，本发明化合物也可能只是偶然保留了水或水跟一些其它溶剂的混合物本发明化合物可在一种
groups in organic synthesis 3《rd》ed.，(wiley 1999)中的方法。化合物制备的一般方法可通过使用适当的试剂和在此提供的分子式中引入不同基团的条件来改变。
[0110]
一方面，本文所述的化合物根据工艺中公知的方法。然而方法的条件，例如反应物、溶剂、碱、所用化合物的量、反应温度、反应所需时间等不限于下面的解释。本发明化合物还可以任选将在本说明书中描述的或本领域已知的各种合成方法组合起来而方便的制得，这样的组合可由本发明所属领域的技术人员容易的进行。一方面，本发明还提供了一种所述的式(ii)或式(ii)化合物的制备方法，其采用下列方法制备：
[0111]
方法a
[0112][0113]
方法b
[0114][0115]
方法c
[0116][0117]
方法d
[0118][0119]
具体实施方法
[0120]
本发明还提供制备所述化合物的方法。本发明通式(i)所述化合物的制备，可通过以下示例性方法和实施例完成，但这些方法和实施例不应以任何方式被认为是对本发明范围的限制。也可地本领域技术人员所知的合成技术合成本发明所述的化合物，或者综合使用本领域已知方法和本发明所述的方法。每步应所得的产物用本领域已知的分离技术得到，包括但不限于萃取、过滤、蒸馏、结晶、色谱分离等。合成所需要的起始原料和化学试剂可以根据文献(reaxys)常规合成或购买。
[0121]
除非另有说明，温度是摄氏温度。试剂购自chem blocks inc、astatech inc或麦克林等商业供应商，并且这些试剂可直接使用无需进一步纯化，除非另有说明。
[0122]
除非另有说明，下列反应在室温、无水溶剂中、氮气或气的正压下或使用干燥管进行；玻璃器皿烘干和/或加热干燥。
[0123]
除非另有说明，柱色谱纯化使用青岛海洋化工厂的200-300目硅胶；制备薄层色谱使用烟台市化学工业研究所生产的薄层色谱硅胶预制板(hsgf254)；ms的测定用therno lcd fleet型(esi)液相色谱-质谱联用仪。
[0124]
核磁数据(1h nmr)使用bruker avance-400mhz或varian oxford-400hz核磁仪，核磁数据使用的溶剂有cdcl3、cd3od、d2o、dms-d6等，以四甲基硅烷(0.000ppm)为基准或以残留溶剂为基准(cdcl3:7.26ppm；cd3od:3.31ppm；d2o:4.79ppm；d6-dmso:2.50ppm)当标明峰形多样性时，以下简写表示不同峰形：s(单峰)、d(双重峰)、t(三重峰)、q(四重峰)、m(多重峰)、br(宽峰)、dd(双双重峰)、dt(双三重峰)。如果给出了耦合常数，则以hertz(hz)为单位。
[0125]
实施例1
[0126]
3-(2,6-二氯苯基)-7-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-2-((六氢-1h-吡咯啉-7a-基)甲氧基)嘧啶并[4,5-d]嘧啶-4(3h)-酮(化合物1)的制备
[0127][0128]
第一步:3-(2,6-二氯苯基)-7-甲硫基嘧啶[4,5-d]嘧啶-2,4(1h,3h)-二酮的制备
[0129]
将10g 4-氨基-2-(甲硫基)嘧啶-5-羧酸乙酯溶于150ml dmf中，然后加入3.15gnah，并在室温下搅拌5分钟。向反应液中添加9.70g2,6-二氯苯基异氰酸酯，并在室温下搅拌1小时。向反应溶液中加入乙酸乙酯和1n盐酸水溶液，并分离有机层。用饱和盐水冲洗，用无水硫酸钠干燥，然后蒸发掉溶剂。沉淀的固体用甲醇固化，并通过过滤取出固体，以获得13.7g作为白色固体化合物3-(2,6-二氯苯基)-7-(甲硫基)嘧啶[4,5-d]嘧啶-2,4(1h,3h)-二酮。
[0130]
lc/ms(esi):m/z＝355[m+h]
+
.
[0131]
第二步:2-氯-3-(2,6-二氯苯基)-7-甲硫基嘧啶[4,5-d]嘧啶-4(3h)-酮的制备
[0132]
将3-(2,6-二氯苯基)-7-(甲硫基)嘧啶[4,5-d]嘧啶-2,4(1h,3h)-二酮(5.31g 15mmol)溶于pocl3(80ml)中，加入少量n,n-二甲苯胺，加热回流搅拌反应4h。然后倒入冰水中淬灭，过滤得到固体产品，水洗，干燥得到粗品黄色固体2-氯-3-(2,6-二氯苯基)-7-(甲硫基)嘧啶[4,5-d]嘧啶-4(3h)-酮(4.86g，78％)，无需再纯化进行下一反应。
[0133]
lc/ms(esi):m/z＝374[m+h]
+
.
[0134]
第三步:2-(四氢-1h-吡呤环-7a(5h)-基)甲氧基)-3-(2,6-二氯苯基)-7-甲硫基嘧啶[4,5-d]嘧啶-4(3h)-酮的制备
[0135]
将2-氯-3-(2,6-二氯苯基)-7-(甲硫基)嘧啶[4,5-d]嘧啶-4(3h)-酮(373mg，1mmol)、六氢吡呤环-7a-甲醇(53mg，0.33mmol)、碳酸钾(62mg，0.45mmol)催化量碘化钾和dmf(10ml)混合，加热到120℃，搅拌反应4小时。冷却至室温，减压蒸溶，柱层析得到类白色固体2-(四氢-1h-吡呤环-7a(5h)-基)甲氧基)-7-(甲硫基)嘧啶[4,5-d]嘧啶-4(3h)-酮(416mg，87％)。lc/ms(esi):m/z＝479[m+h]
+
.
[0136]
第四步:2-(四氢-1h-吡呤环-7a(5h)-基)甲氧基)-3-(2,6-二氯苯基)-7-甲砜基嘧啶[4,5-d]嘧啶-4(3h)-酮的制备
[0137]
将2-(四氢-1h-吡呤环-7a(5h)-基)甲氧基)-7-(甲硫基)嘧啶[4,5-d]嘧啶-4(3h)-酮(382mg，0.8mmol)溶于10mlch2cl2中，加入间氯过氧苯甲酸(522mg，3mmol)，并在室温下搅拌2小时。反应溶液用ch2cl2稀释，并用饱和nahco3和na2s2o3清洗。有机层用mgso4干燥，减压蒸溶，柱层析得到黄色固体2-(四氢-1h-吡呤环-7a(5h)-基)甲氧基)-7-甲砜基嘧啶[4,5-d]嘧啶-4(3h)-酮(392mg，96％)。lc/ms(esi):m/z＝511[m+h]
+
.
[0138]
第五步:2-(四氢-1h-吡呤环-7a(5h)-基)甲氧基)-3-(2,6-二氯苯基)-7-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)嘧啶[4,5-d]嘧啶-4(3h)-酮的制备
[0139]
将2-(四氢-1h-吡呤环-7a(5h)-基)甲氧基)-7-甲砜基嘧啶[4,5-d]嘧啶-4(3h)-酮(51mg，0.1mmol)溶于10ml dmf中，加入dipea(65mg，0.5mmol)和4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯胺(23mg，0.12mmol)，并在室温下搅拌24小时。倒入冰水，过滤得到粗品，然后经快速柱分离得到黄色固体2-(四氢-1h-吡呤环-7a(5h)-基)甲氧基)-7-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)嘧啶[4,5-d]嘧啶-4(3h)-酮(50mg，83％)。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ10.77(s,1h),9.12(s,1h),7.42-7.99(m,4h),6.88-7.29(m,3h),4.41(s,2h),3.46-3.61(m,4h),3.01-3.15(m,4h),2.48
–
2.58(m,4h),2.01-2.27(m,5h),1.87-1.96(m,4h),1.78-1.80(m,2h),1.69-1.76(m,2h)；lc/ms(esi):m/z＝622.2[m+h]
+
.
[0140]
实施例2
[0141]
3-(2,6-二氟苯基)-7-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-2-((六氢-1h-吡咯啉-7a-基)甲氧基)嘧啶并[4,5-d]嘧啶-4(3h)-酮(化合物2)的制备
[0142][0143]
用与实施例1相似的方法得到化合物2(51mg，产率86％)。lc/ms(esi):m/z＝589.3[m+h]
+
。
[0144]
实施例3
[0145]
3-(2,6-二甲基苯基)-7-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-2-((六氢-1h-吡咯啉-7a-基)甲氧基)嘧啶并[4,5-d]嘧啶-4(3h)-酮(化合物3)的制备
[0146][0147]
用与实施例1相似的方法得到化合物3(45mg，产率78％)。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ9.22(s,1h),7.06-7.78(m,7h),4.19(s,2h),3.31(m,4h),2.60-2.68(m,6h),2.40(s,3h),2.15(s,6h),2.07-2.19(m,2h),1.87-1.98(m,4h),1.66-1.80(m,2h)；lc/ms(esi):m/z＝581.3[m+h]
+
。
[0148]
实施例4
[0149]
3-(2,6-二氯苯基)-7-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-2-((金刚烷-1-基)甲氧基)嘧啶并[4,5-d]嘧啶-4(3h)-酮(化合物4)的制备
[0150][0151]
用与实施例1相似的方法得到化合物4(53mg，产率82％)。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ10.78(s,1h),9.12(s,1h),7.42-7.80(m,4h),6.88-7.28(m,3h),4.04(s,2h),3.46-3.61(m,4h),3.01-3.15(m,4h),2.01(m,3h),1.69-1.72(m,12h)；lc/ms(esi):m/z＝647.2[m+h]
+
。
[0152]
实施例5
[0153]
3-(2,6-二氟苯基)-7-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-2-((金刚烷-1-基)甲氧基)嘧啶[4,5-d]嘧啶-4(3h)-酮(化合物5)的制备
[0154][0155]
用与实施例1相似的方法得到化合物5(56mg，产率91％)。lc/ms(esi):m/z＝614[m+h]
+
。
[0156]
实施例6
[0157]
3-(2,6-二甲基苯基)-7-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-2-((金刚烷-1-基)甲氧基)嘧啶[4,5-d]嘧啶-4(3h)-酮(化合物6)的制备
[0158][0159]
用与实施例1相似的方法得到化合物6(50mg，产率83％)。1h nmr(300mhz,cdcl3)δ9.22(s,1h),7.06-7.78(m,7h),3.93(s,2h),2.01(m,3h),1.70-1.76(m,12h)；lc/ms(esi):m/z＝606.3[m+h]
+
。
[0160]
实施例7
[0161]
2-(金刚烷-1-基甲氧基)-3-(2,6-二氯苯基)-7-((3-甲基-1,2,3,4,4a,5-六氢苯并[b]吡嗪并[1,2-d][1,4]恶嗪-8-基)氨基)嘧啶[4,5-d]嘧啶-4(3h)-酮(化合物7)的制备
[0162][0163]
用与实施例6相似的方法得到化合物7(53mg，产率78％)。lc/ms(esi):m/z＝675.3[m+h]
+
。
[0164]
实施例8
[0165]
2-(金刚烷-1-基甲氧基)-3-(2,6-二氯苯基)-7-((4-(1-甲基哌啶-4-基)苯基)氨基)嘧啶[4,5-d]嘧啶-4(3h)-酮(化合物8)的制备
[0166][0167]
用与实施例6相似的方法得到化合物8(49mg，产率76％)。lc/ms(esi):m/z＝646[m+h]
+
。
[0168]
实施例9
[0169]
2-(金刚烷-1-基甲氧基)-3-(2,6-二氯苯基)-7-((2,4,4-三甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)氨基)嘧啶[4,5-d]嘧啶-4(3h)-酮(化合物9)的制备
2-基)甲氧基)嘧啶[4,5-d]嘧啶-4(3h)-酮(化合物13)的制备
[0186][0187]
第一步:3-(2,6-二氯苯基)-7-甲砜基嘧啶[4,5-d]嘧啶-2,4(1h,3h)-二酮的制备
[0188]
将3-(2,6-二氯苯基)-7-甲硫基嘧啶[4,5-d]嘧啶-2,4(1h,3h)-二酮(3.82g，8mmol)溶于50mlch2cl2中，加入间氯过氧苯甲酸(5.22g，30mmol)，并在室温下搅拌2小时。反应溶液用ch2cl2稀释，并用饱和nahco3和na2s2o3清洗。有机层用mgso4干燥，减压蒸溶，柱层析得到黄色固体3-(2,6-二氯苯基)-7-甲砜基嘧啶[4,5-d]嘧啶-2,4(1h,3h)-二酮(2.84g，92％)。lc/ms(esi):m/z＝388[m+h]
+
.
[0189]
第二步:3-(2,6-二氯苯基)-7-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)嘧啶[4,5-d]嘧啶-2,4(1h,3h)-二酮的制备
[0190]
将3-(2,6-二氯苯基)-7-甲砜基嘧啶[4,5-d]嘧啶-2,4(1h,3h)-二酮(1.16g，3mmol)溶于25ml dmf中，加入dipea(1.94g，15mmol)和4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯胺(0.48g，0.12mmol)，并在室温下搅拌24小时。倒入冰水，过滤得到粗品，然后经快速柱分离得到黄色固体3-(2,6-二氯苯基)-7-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)嘧啶[4,5-d]嘧啶-2,4(1h,3h)-二酮(1.33g，89％)。
[0191]
lc/ms(esi):m/z＝499[m+h]
+
。
[0192]
第三步:2-氯-3-(2,6-二氯苯基)-7-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)嘧啶[4,5-d]嘧啶-4(3h)-酮的制备
[0193]
将3-(2,6-二氯苯基)-7-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)嘧啶[4,5-d]嘧啶-2,4(1h,3h)-二酮(1.25g 2.5mmol)溶于pocl3(20ml)中，加入少量n,n-二甲苯胺，加热回流搅拌反应4h。然后倒入冰水中淬灭，过滤得到固体产品，水洗，干燥得到粗品黄色固体2-氯-3-(2,6-二氯苯基)-7-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)嘧啶[4,5-d]嘧啶-4(3h)-酮(0.93g，72％)，无需再纯化进行下一反应。lc/ms(esi):m/z＝517[m+h]
+
.
[0194]
第四步:3-(2,6-二氯苯基)-7-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-2-((1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)嘧啶[4,5-d]嘧啶-4(3h)-酮的制备
[0195]
将2-氯-3-(2,6-二氯苯基)-7-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)嘧啶[4,5-d]嘧啶-4(3h)-酮(52mg，0.1mmol)、n-甲基吡咯烷-2-甲醇(23mg，0.2mmol)、碳酸钾(62mg，0.45mmol)催化量碘化钾和dmf(10ml)混合，加热到120℃，搅拌反应4小时。冷却至室温，倒入水中，过滤得到粗品经柱层析得到类白色固体3-(2,6-二氯苯基)-7-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-2-((1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)嘧啶[4,5-d]嘧啶-4(3h)-酮(53mg，92％)。lc/ms(esi):m/z＝576[m+h]
+
.
[0196]
实施例14
[0197]
3-(2,6-二氯苯基)-7-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-2-((1-(二甲基氨基甲基)环丙烷)甲氧基)嘧啶[4,5-d]嘧啶-4(3h)-酮(化合物14)的制备
[0198][0199]
用与实施例13相似的方法得到化合物14(51mg，产率84％)。lc/ms(esi):m/z＝610.2[m+h]
+
。
[0200]
实施例15
[0201]
3-(2,6-二氯苯基)-7-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-2-((1-(吡咯烷-1-甲基)环丙烷)甲氧基)嘧啶[4,5-d]嘧啶-4(3h)-酮(化合物15)的制备
[0202][0203]
用与实施例13相似的方法得到化合物15(58mg，产率91％)。lc/ms(esi):m/z＝636.2[m+h]
+
。
[0204]
实施例16
[0205]
3-(2,6-二氯苯基)-7-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-2-((1-甲基哌啶-3-基)甲氧基)嘧啶[4,5-d]嘧啶-4(3h)-酮(化合物16)的制备
[0206]
用与实施例13相似的方法得到化合物16(47mg，产率88％)。lc/ms(esi):m/z＝610[m+h]
+
。
[0207]
实施例17
[0208]
3-(2,6-二氯苯基)-7-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-2-((1,4-二甲基哌嗪-2-基)甲氧基)嘧啶[4,5-d]嘧啶-4(3h)-酮(化合物17)的制备
[0209]
用与实施例13相似的方法得到化合物17(49mg，产率79％)。lc/ms(esi):m/z＝625[m+h]
+
。
[0210]
实施例18
[0211]
3-(2,6-二氯苯基)-7-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-2-(3-(二甲氨基)丙氧基)嘧啶[4,5-d]嘧啶-4(3h)-酮(化合物18)的制备
[0212]
用与实施例13相似的方法得到化合物18(49mg，产率84％)。lc/ms(esi):m/z＝584[m+h]
+
。
[0213]
实施例19
[0214]
2-((六氢-1h-吡咯啉-7a-基)甲氧基)-3-(2,6-二氯苯基)-6-((3-甲基-1,2,3,4,
1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)氨基)嘧啶[4,5-d]嘧啶-4(3h)-酮(化合物26)的制备
[0236]
用与实施例3相似的方法得到化合物26(45mg，产率77％)。lc/ms(esi):m/z＝580[m+h]
+
。
[0237]
实施例27
[0238]
3-(2,6-二氯苯基)-7-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-2-苄氧基嘧啶[4,5-d]嘧啶-4(3h)-酮(化合物27)的制备
[0239]
用与实施例13相似的方法得到化合物27(52mg，产率88％)。lc/ms(esi):m/z＝589[m+h]
+
。
[0240]
实施例28
[0241]
3-(2,6-二氯苯基)-7-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-2-((吡啶-3-基)甲氧基)嘧啶[4,5-d]嘧啶-4(3h)-酮(化合物28)的制备
[0242]
用与实施例13相似的方法得到化合物28(49mg，产率83％)。lc/ms(esi):m/z＝590[m+h]
+
。
[0243]
实施例29
[0244]
n-(3-(2,6-二氯苯基)-7-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-4-氧代-3,4-二氢嘧啶[4,5-d]嘧啶-2-基)烟酰胺(化合物29)的制备
[0245]
用与实施例3相似的方法得到化合物29(48mg，产率79％)。lc/ms(esi):m/z＝603[m+h]
+
。
[0246]
实施例30
[0247]
n-(3-(2,6-二氯苯基)-7-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-4-氧代-3,4-二氢嘧啶[4,5-d]嘧啶-2-基)呋喃-2-甲酰胺(化合物30)的制备
[0248]
用与实施例3相似的方法得到化合物30(50mg，产率84％)。lc/ms(esi):m/z＝592[m+h]
+
。
[0249]
实施例31
[0250]
n-(3-(2,6-二氯苯基)-7-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-4-氧代-3,4-二氢嘧啶[4,5-d]嘧啶-2-基)恶唑-2-甲酰胺(化合物31)的制备
[0251]
用与实施例3相似的方法得到化合物31(53mg，产率89％)。lc/ms(esi):m/z＝593[m+h]
+
。
[0252]
实施例32
[0253]
n-(3-(2,6-二氯苯基)-7-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-4-氧代-3,4-二氢嘧啶[4,5-d]嘧啶-2-基)-1-甲基-1h-吡唑-5-甲酰胺(化合物32)的制备
[0254]
用与实施例3相似的方法得到化合物32(51mg，产率85％)。lc/ms(esi):m/z＝606[m+h]
+
。
[0255]
实施例33
[0256]
1-苄基-3-(2,6-二氯苯基)-7-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)嘧啶[4,5-d]嘧啶-2,4(1h,3h)-二酮(化合物33)的制备
[0257][0258]
第一步:1-苄基-3-(2,6-二氯苯基)-7-(甲硫基)嘧啶[4,5-d]嘧啶-2,4(1h,3h)-二酮的制备
[0259]
将3-(2,6-二氯苯基)-7-(甲硫基)嘧啶[4,5-d]嘧啶-2,4(1h,3h)-二酮(354mg，1mmol)、苄氯(151mg，1.2mmol)、碳酸钾(620mg，4.5mmol)催化量碘化钾和dmf(25ml)混合，加热到120℃，搅拌反应4小时。冷却至室温，倒入水中，过滤得到类白色固体3-(2,6-二氯苯基)-7-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-2-((1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)嘧啶[4,5-d]嘧啶-4(3h)-酮(347mg，78％)。lc/ms(esi):m/z＝446[m+h]
+
。
[0260]
第二步:1-苄基-3-(2,6-二氯苯基)-7-甲砜基嘧啶[4,5-d]嘧啶-2,4(1h,3h)-二酮的制备
[0261]
将3-(2,6-二氯苯基)-7-甲硫基嘧啶[4,5-d]嘧啶-2,4(1h,3h)-二酮(311mg，0.7mmol)溶于10mlch2cl2中，加入间氯过氧苯甲酸(359mg，2.1mmol)，并在室温下搅拌2小时。反应溶液用ch2cl2稀释，并用饱和nahco3和na2s2o3清洗。有机层用mgso4干燥，减压蒸溶，柱层析得到黄色固体1-苄基-3-(2,6-二氯苯基)-7-甲砜基嘧啶[4,5-d]嘧啶-2,4(1h,3h)-二酮(290mg，87％)。lc/ms(esi):m/z＝478[m+h]
+
.
[0262]
第三步:1-苄基-3-(2,6-二氯苯基)-7-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)嘧啶[4,5-d]嘧啶-2,4(1h,3h)-二酮的制备
[0263]
将1-苄基-3-(2,6-二氯苯基)-7-甲砜基嘧啶[4,5-d]嘧啶-2,4(1h,3h)-二酮(95mg，0.2mmol)溶于10ml dmf中，加入dipea(78mg，0.6mmol)和4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯胺(46mg，0.24mmol)，并在室温下搅拌24小时。倒入冰水，过滤得到粗品，然后经快速柱分离得到类白色固体1-苄基-3-(2,6-二氯苯基)-7-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)嘧啶[4,5-d]嘧啶-2,4(1h,3h)-二酮(104mg，89％)。
[0264]
lc/ms(esi):m/z＝589[m+h]
+
。
[0265]
实施例34
[0266]
3-(2,6-二氯苯基)-7-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-1-(吡啶-4-基甲基)嘧啶[4,5-d]嘧啶-2,4(1h,3h)-二酮(化合物34)的制备
[0267][0268]
用与实施例33相似的方法得到化合物96(88mg，产率74％)。lc/ms(esi):m/z＝590[m+h]
+
。
[0269]
实施例35
[0270]
3-(2,6-二氯苯基)-7-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-1-((六氢-1h-吡咯啉-7a-基)甲基)嘧啶[4,5-d]嘧啶-2,4(1h,3h)-二酮(化合物36)的制备
[0271][0272]
用与实施例33相似的方法得到化合物36(97mg，产率78％)。lc/ms(esi):m/z＝622[m+h]
+
。
[0273]
实施例36
[0274]
1-苄基-3-(2,6-二甲基苯基)-7-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)嘧啶[4,5-d]嘧啶-2,4(1h,3h)-二酮(化合物36)的制备
[0275][0276]
用与实施例33相似的方法得到化合物36(95mg，产率87％)。lc/ms(esi):m/z＝548[m+h]
+
。
[0277]
实施例37
[0278]
3-(2,6-二甲基苯基)-7-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-1-(吡啶-4-基甲
基)嘧啶[4,5-d]嘧啶-2,4(1h,3h)-二酮(化合物37)的制备
[0279][0280]
用与实施例33相似的方法得到化合物37(83mg，产率76％)。lc/ms(esi):m/z＝549.3[m+h]
+
。
[0281]
实施例38
[0282]
3-(2,6-二甲基苯基)-7-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-1-((六氢-1h-吡咯啉-7a-基)甲基)嘧啶[4,5-d]嘧啶-2,4(1h,3h)-二酮(化合物38)的制备
[0283][0284]
用与实施例33相似的方法得到化合物38(72mg，产率62％)。lc/ms(esi):m/z＝581[m+h]
+
。
[0285]
实施例39
[0286]
3-(2,6-二氯苯基)-7-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-1-((1-((二甲氨基)甲基)环丙基)甲基)嘧啶[4,5-d]嘧啶-2,4(1h,3h)-二酮(化合物39)的制备
[0287]
用与实施例33相似的方法得到化合物39(84mg，产率69％)。lc/ms(esi):m/z＝610[m+h]
+
。
[0288]
实施例40
[0289]
3-(2,6-二氯苯基)-7-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-1-((1-(吡咯烷-1-基甲基)环丙基)甲基)嘧啶[4,5-d]嘧啶-2,4(1h,3h)-二酮(化合物40)的制备
[0290]
用与实施例33相似的方法得到化合物40(91mg，产率72％)。lc/ms(esi):m/z＝636[m+h]
+
。
[0291]
实施例41
[0292]
3-(2,6-二氯苯基)-7-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)氨基)-1-(金刚烷-1-基甲基)嘧啶[4,5-d]嘧啶-2,4(1h,3h)-二酮(化合物41)的制备
[0293]
用与实施例33相似的方法得到化合物41(87mg，产率67％)。lc/ms(esi):m/z＝647
[m+h]
+
。
[0294]
类似1-41的合成，可以得到如下化合物：
[0295]
[0296][0297]
实施例42
[0298]
2-丙烯基-1-(6-(2-羟基丙基-2-基)吡啶-2-基)-6-((5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)-1,2-二氢-3h-吡唑[4,3-c]哒嗪-3-酮(化合物42)的制备
基)氨基)-1,2-二氢-3h-吡唑[4,3-c]哒嗪-3-酮(化合物43)的制备
[0309][0310]
用与实施例42相似的方法得到化合物43(62mg，产率62％)。lc/ms(esi):m/z＝501[m+h]
+
。
[0311]
实施例44
[0312]
(r)-2-丙烯基-1-(7-乙基-7-羟基-6,7-二氢-5h-环戊[b]吡啶-2-基)-6-((5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)-1,2-二氢-3h-吡唑[4,3-c]哒嗪-3-酮(化合物44)的制备
[0313][0314]
用与实施例42相似的方法得到化合物44(54mg，产率51％)。lc/ms(esi):m/z＝528[m+h]
+
。
[0315]
实施例45
[0316]
(r)-2-丙烯基-1-(7-乙基-7-羟基-6,7-二氢-5h-环戊[b]吡啶-2-基)-6-((4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)-1,2-二氢-3h-吡唑[4,3-c]哒嗪-3-酮(化合物45)的制备
[0317][0318]
用与实施例44相似的方法得到化合物45(60mg，产率57％)。lc/ms(esi):m/z＝527[m+h]
+
。
[0319]
实施例46
[0320]
2-丙烯基-1-(6-(2-羟基丙基-2-基)吡啶-2-基)-6-((3-甲基-1,2,3,4,4a,5-六氢苯并[b]吡嗪并[1,2-d][1,4]恶嗪-8-基)-1,2-二氢-3h-吡唑[4,3-c]哒嗪-3-酮(化合物46)的制备
[0321][0322]
用与实施例45相似的方法得到化合物46(48mg，产率45％)。lc/ms(esi):m/z＝529[m+h]
+
。
[0323]
实施例47
[0324]
(r)-2-丙烯基-1-(7-乙基-7-羟基-6,7-二氢-5h-环戊[b]吡啶-2-基)-6-((3-甲基-1,2,3,4,4a,5-六氢苯并[b]吡嗪并[1,2-d][1,4]恶嗪-8-基)-1,2-二氢-3h-吡唑[4,3-c]哒嗪-3-酮(化合物47)的制备
[0325][0326]
用与实施例45相似的方法得到化合物47(53mg，产率48％)。lc/ms(esi):m/z＝555[m+h]
+
。
[0327]
实施例48
[0328]
(r)-2-丙烯基-1-(6-(2-羟基丙基-2-基)吡啶-2-基)-6-((2,4,4-三甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)氨基)-1,2-二氢-3h-吡唑[4,3-c]哒嗪-3-酮(化合物48)的制备
[0329][0330]
用与实施例43相似的方法得到化合物48(57mg，产率58％)。lc/ms(esi):m/z＝500[m+h]
+
。
[0331]
实施例49
[0332]
(r)-2-丙烯基-1-(7-乙基-7-羟基-6,7-二氢-5h-环戊[b]吡啶-2-基)-6-(2'-甲基-2',3'-二氢-1'h-螺[环丙烷-1,4'-异异喹啉]-7
’‑
基)-1,2-二氢-3h-吡唑[4,3-c]哒嗪-3-酮(化合物49)的制备
[0333][0334]
用与实施例45相似的方法得到化合物49(56mg，产率54％)。lc/ms(esi):m/z＝524[m+h]
+
。
[0335]
实施例50
[0336]
(r)-2-丙烯基-1-(7-乙基-7-羟基-6,7-二氢-5h-环戊[b]吡啶-2-基)-6-((2,4,4-三甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-7-基)氨基)-1,2-二氢-3h-吡唑[4,3-c]哒嗪-3-酮(化合物51)的制备
[0337][0338]
用与实施例45相似的方法得到化合物50(50mg，产率48％)。lc/ms(esi):m/z＝526
[m+h]
+
。
[0339]
实施例51
[0340]
2-(2,6-二氯苯基)-1-(6-(2-羟基丙基-2-基)吡啶-2-基)-6-((5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)-1,2-二氢-3h-吡唑[4,3-c]哒嗪-3-酮(化合物94)的制备
[0341][0342]
第一步:2-(2,6-二氯苯基)-6-氯-1,2-二氢-3h-吡唑[4,3-c]哒嗪-3-酮的制备
[0343]
向4,6-二氯哒嗪-3-羧酸甲酯(9.89g，47.8mmol)溶于150ml的thf溶液中加入dipea(20.8ml，120mmol)和2,6-二氯苯肼盐酸盐(10.18g，47.8mmol)，反应物回流72小时，然后在真空中浓缩。向残渣中添加et2o(50ml)，过滤，滤液减蒸缩溶，残渣在冰浴中冷却，然后添加tfa(40ml)。在室温下搅拌所得溶液1h，然后在70℃下搅拌1h。减蒸缩溶，将残余物溶解在thf(50ml)中，并在冰浴中冷却，然后添加nah(75ml)。在rt下搅拌所得溶液15分钟，然后通过加醋酸调至ph＝3。减蒸缩溶，然后加入100ml氯仿和100ml水，并用50ml饱和食盐水洗涤有机相，无水mg2so4干燥，在真空中浓缩，并用正己烷打浆。用乙醇和et2o洗涤固体沉淀物，然后在真空下干燥，得到黄色固体化合物2-(2,6-二氯苯基)-6-氯-1,2-二氢-3h-吡唑[4,3-c]哒嗪-3-酮(8.13g，54％)。
[0344]
lc/ms(esi):m/z＝316[m+h]
+
.
[0345]
第二步:2-(2,6-二氯苯基)-6-((5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)-1,2-二氢-3h-吡唑[4,3-c]哒嗪-3-酮的制备
[0346]
将2-(2,6-二氯苯基)-6-氯-1,2-二氢-3h-吡唑[4,3-c]哒嗪-3-酮(1.58g，5mmol)、5-(4-甲基哌嗪-1-基)-2-氨基吡啶(0.96g，5mmol)、碳酸钾(3.45g，25mmol)催化量碘化钾和dmf(50ml)混合，加热到120℃，搅拌反应4小时。冷却至室温，倒入水中，过滤得到粗品经柱层析得到类白色固体2-(2,6-二氯苯基)-6-((5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)-1,2-二氢-3h-吡唑[4,3-c]哒嗪-3-酮(1.86g，79％)。
[0347]
lc/ms(esi):m/z＝471[m+h]
+
。
[0348]
第三步:2-(2,6-二氯苯基)-1-(6-(2-羟基丙基-2-基)吡啶-2-基)-6-((5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)-1,2-二氢-3h-吡唑[4,3-c]哒嗪-3-酮的制备
[0349]
向2-(2,6-二氯苯基)-6-((5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)-1,2-二氢-3h-吡唑[4,3-c]哒嗪-3-酮(94mg，0.2mmol)和2-(6-溴-2-吡啶基)丙烷-2-醇(52mg，0.24mmol)在10ml二氧六环中的搅拌溶液中添加cui(38mg，0.2mmol)、k2co3(42mg，0.3mmol)和n,n
’‑
二甲基乙二胺(20mg，0.22mmol)，并在80℃下搅拌过夜。反应完成后，减压除去溶剂；用水稀释残渣，并用乙酸乙酯(15ml*3)萃取。用盐水溶液洗涤合并的有机层，在无水硫
酸钠上干燥，并在减压下浓缩以获得粗产物，通过快速色谱法纯化以获得2-(2,6-二氯苯基)-1-(6-(2-羟基丙基-2-基)吡啶-2-基)-6-((5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)-1,2-二氢-3h-吡唑[4,3-c]哒嗪-3-酮(52mg，产率43％)。
[0350]
lc/ms(esi):m/z＝607[m+h]
+
。
[0351]
实施例52
[0352]
6-丙烯基-5-(6-(2-羟基丙基-2-基)吡啶-2-基)-3-((5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)-5,6-二氢-3h-吡唑[3,4-e][1,2,4]三嗪-7-酮(化合物101)的制备
[0353][0354]
第一步:6-丙烯基-3-(甲硫基)-5,6-二氢-3h-吡唑[3,4-e][1,2,4]三嗪-7-酮的制备
[0355]
向3-甲硫基-5-氯-[1,2,4]三嗪-6-甲酸乙酯(11.1g，47.8mmol)溶于150ml的thf溶液中加入dipea(20.8ml，120mmol)和1-烯丙基肼甲酸叔丁酯(8.23g，47.8mmol)，反应物回流72小时，然后在真空中浓缩。向残渣中添加et2o(50ml)，过滤，滤液减蒸缩溶，残渣在冰浴中冷却，然后添加tfa(40ml)。在室温下搅拌所得溶液1h，然后在70℃下搅拌1h。减蒸缩溶，将残余物溶解在thf(50ml)中，并在冰浴中冷却，然后添加naoh(75ml)。在rt下搅拌所得溶液15分钟，然后通过加醋酸调至ph＝3。减蒸缩溶，然后加入100ml氯仿和100ml水，并用50ml饱和食盐水洗涤有机相，无水mg2so4干燥，在真空中浓缩，并用正己烷打浆。用乙醇和et2o洗涤固体沉淀物，然后在真空下干燥，得到黄色固体化合物6-丙烯基-3-(甲硫基)-5,6-二氢-3h-吡唑[3,4-e][1,2,4]三嗪-7-酮(5.0g，47％)。
[0356]
lc/ms(esi):m/z＝224[m+h]
+
。
[0357]
第二步:6-丙烯基-5-(6-(2-羟基丙基-2-基)吡啶-2-基)-3-(甲硫基)-5,6-二氢-3h-吡唑[3,4-e][1,2,4]三嗪-7-酮的制备
[0358]
向6-丙烯基-3-(甲硫基)-5,6-二氢-3h-吡唑[3,4-e][1,2,4]三嗪-7-酮(224mg，1mmol)和2-(6-溴-2-吡啶基)丙烷-2-醇(260mg，1.2mmol)溶于20ml二氧六环中的溶液中，搅拌加入cui(190mg，1mmol)、k2co3(210mg，1.5mmol)和n,n
’‑
二甲基乙二胺(100mg，1.1mmol)，并在80℃下搅拌过夜。反应完成后，减压除去溶剂；用水稀释残渣，并用乙酸乙酯(10ml*3)萃取。用盐水溶液洗涤合并的有机层，在无水硫酸钠上干燥，并在减压下浓缩以获得粗产物，通过快速色谱法纯化以获得6-丙烯基-5-(6-(2-羟基丙基-2-基)吡啶-2-基)-3-(甲硫基)-5,6-二氢-3h-吡唑[3,4-e][1,2,4]三嗪-7-酮(258mg，产率72％)。
[0359]
lc/ms(esi):m/z＝359[m+h]
+
。
[0360]
第三步:6-丙烯基-3-((5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)-5,6-二氢-3h-吡
唑[3,4-e][1,2,4]三嗪-7-酮的制备
[0361]
将6-丙烯基-5-(6-(2-羟基丙基-2-基)吡啶-2-基)-3-(甲硫基)-5,6-二氢-3h-吡唑[3,4-e][1,2,4]三嗪-7-酮(180mg，0.5mmol)溶于10mlch2cl2中，加入间氯过氧苯甲酸(522mg，6mmol)，并在室温下搅拌2小时。反应溶液用ch2cl2稀释，并用饱和nahco3和na2s2o3清洗。有机层用mgso4干燥，减压蒸溶，柱层析得到黄色固体6-丙烯基-3-(甲砜基)-5,6-二氢-3h-吡唑[3,4-e][1,2,4]三嗪-7-酮(183mg，94％)。lc/ms(esi):m/z＝391[m+h]
+
。
[0362]
第四步:6-丙烯基-5-(6-(2-羟基丙基-2-基)吡啶-2-基)-3-((5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)-5,6-二氢-3h-吡唑[3,4-e][1,2,4]三嗪-7-酮的制备
[0363]
将6-丙烯基-3-(甲砜基)-5,6-二氢-3h-吡唑[3,4-e][1,2,4]三嗪-7-酮(117mg，0.3mmol)溶于25ml dmf中，加入dipea(194mg，1.5mmol)和4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯胺(70mg，0.36mmol)，并在室温下搅拌24小时。倒入冰水，过滤得到粗品，然后经快速柱分离得到黄色固体6-丙烯基-3-((5-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)-5,6-二氢-3h-吡唑[3,4-e][1,2,4]三嗪-7-酮(133mg，89％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)10.13(m,1h),7.56-8.10(m,6h),5.67(dd,1h),5.31(br,1h),5.01(dd,1h),4.69-4.84(m,3h),3.51-3.88(m,4h),3.11-3.23(m,4h),2.43(s,3h),1.47(s,6h)；lc/ms(esi):m/z＝502[m+h]
+
.
[0364]
类似43-52的合成路线，可以得到如下化合物：
[0365][0366][0367]
实施例53：生物活性测试
[0368]
以下结合测试试例进一步描述解释本发明，但这些实施并非意味着限制本发明的范围。
[0369]
测试例1、化合物抑制wee-1酶活性测定
[0370]
运用lanthra screen wee-1激酶试剂盒(invitrogen)，测定化合物抑制wee-1激
酶活性。在dmso中从0.2mm的工作浓度进行4倍梯度稀释，稀释10个浓度，5μlwee-1激酶(终浓度5nm)，5μl eu-anti-gstantibody(终浓度2nm)混合物和5μl kinase tracer 178(终浓度50nm)充分混合后，在室温孵育一小时后，读板。从单独的培养基(细胞数为零)得到最小信号值，抑制率％＝(最大信号值化合物信号值)/(最大信号值一最小信号值
×
100％，使用graphpadprism5软件处理数据。通过s形剂量反应曲线拟合计算ic
50
值。其中“a”表示ic
50
≤10nm；“b”表示10nm《ic
50
≤500nm；“c”表示500nm《ic
50
≤2000nm；“d”表示2000nm《ic
50
。
[0371]
表1.本发明化合物抑制wee1激酶活性的ic
50
[0372]
化合物ic
50
化合物ic
50
化合物ic
50
1a8a15a2a9a16a3a10a17a4a12a18a5a13a101a6a14a103a
[0373]
测试例2、化合物的细胞增殖活性测定
[0374]
采用celltiter-glo《tm》活细胞检测试剂盒，测定受试化合物对人非小细胞肺癌细胞nci-h23增殖的抑制作用。其中，培养基为添加终浓度为10％的胎牛血清、mccoy's 5a培养基。
[0375]
试验步骤：用胰酶消化已达到80％细胞融合的nci-h23细胞，离心重悬计数，用培养基分别制成6000个细胞/ml的nci-h23细胞悬液，加入96孔细胞培养板(90μl/孔)，置于含5％co2的细胞培养箱中于37℃培养。细胞培养24小时后，参考化合物表及受试化合物用dmso溶解成浓度为30mm的母液。用nci-h23的培养基将稀释好的化合物母液进行进一步稀释，并将稀释好的混合液分别转移至相应的细胞板中，受试化合物终浓度为1μm(作为ic
50
测试的起始浓度)，四倍递减稀释9个浓度，9个浓度分别为：10μm、2.5μm、0.625μm、0.156μm、0.039μm、0.0098μm、0.0024μm、0.0006μm和0.000015μm，混匀离心，置于含5％co2的细胞培养箱中于37℃培养3天。取出96孔细胞培养板，加入celltiterglo(ctg，化学发光细胞活性检测试剂盒)试剂(100μl/孔)，混匀离心，于室温孵育10分钟。轻轻震荡后在spectramax m5 reader上测定450nm波长处的吸光度，以650nm处吸光度作为参比(即450nm吸光度-650nm吸光度)，计算抑制率。运用软件graphpad prism 6并采用计算公式xy-analysis/nonlinear regression(curve fit)/dose response-inhibition/log(inhibitor)vs.response-variable slope(four parameters)进行ic
50
曲线拟合并计算出ic
50
值。其中“a”表示ic
50
≤10nm；“b”表示10nm《ic
50
≤500nm；“c”表示500nm《ic
50
≤2000nm；“d”表示2000nm《ic
50
。
[0376]
表2.本发明化合物抑制nci-h23细胞生长的ic
50
[0377]
化合物ic
50
化合物ic
50
化合物ic
50
1b4b34c3b33c101b
[0378]
尽管以上已经对本发明作了详细描述，但是本领域技术人员理解，在不偏离本发明的精神和范围的前提下可以对本发明进行各种修改和改变。本发明的权利范围并不限于上文所作的详细描述，而应归属于权利要求书。

技术特征：
nr6r7、-c
1-6
亚烷基-nr6r7、-c(＝o)r6、-c(＝o)or6、-oc(＝o)r6、-c(＝o)nr6r7、-nr6c(＝o)r7、-s(o)2nr6r7、-c
3-6
碳环基、3-8元杂环；3-8元杂环在每次出现时独立地包含1、2、3或4个选自n、o、或s的杂原子；每个r1独立地可选地被1、2、3、4、5或6个选自氘、卤素、-c
1-6
烷基、-c
1-6
烷氧基、氧代、-or6、-nr6r7、-cn、-c(＝o)r6、-c(＝o)or6、-oc(＝o)r6、-c(＝o)nr6r7、-nr6c(＝o)r7或-s(o)2nr6r7的取代基取代或不取代；其中：每个l3在每次出现时独立地选自键、o、nh、co或s；每个环a是c
3-10
碳环，所述的可以连接在所述环a的相同的碳原子上或不同的原子上；每个r2是-or6、-nr6r7、-sr6、-s(＝o)r6、-s(＝o)2r6、5-10元杂芳基或3-10元杂环基，每个杂环基和杂芳基在每次出现时独立地包含1、2、3或4个选自n、o、s、s＝o或s(＝o)2的杂原子，每个r3在每次出现时独立地可选地被1、2、3、4、5或6个r
19
取代或不取代；每个r3和r4在每次出现时独立地选自氘、氢、卤素、-c
1-6
烷基、、-c
2-6
烯基、-c
2-6
炔基、氧代、-or6、-nr6r7、-cn、-c(＝o)r6、-c(＝o)or6、-oc(＝o)r6、-c(＝o)nr6r7、-nr6c(＝o)r7或-s(o)2nr6r7或-c
3-10
碳环基、每个杂环基和杂芳基在每次出现时独立地包含1、2、3或4个选自n、0、s、s＝0或s(＝o)2的杂原子；每个r3和r4在每次出现时独立地可选地被1、2、3、4、5或6个选自氘、卤素、氧代、-c
1-6
烷基、-c
1-6
烷氧基、氧代、-or6、-nr6r7、-cn、-c(＝o)r6、-c(＝o)or6、-oc(＝o)r6、-c(＝o)nr6r7、-nr6c(＝o)r7或-s(o)2nr6r7的取代基取代或不取代；每个r5在每次出现时独立地选自氘、卤素、氧代、-c
1-6
烷基、-c
1-6
亚烷基-(卤素)
1-3
、c
1-6
杂烷基、-cn、-or6、-c
1-6
亚烷基-(or6)
1-3
、-o-c
1-6
亚烷基-(卤素)
1-3
、-sr6、-s-c
1-6
亚烷基-(卤素)
1-3
、-nr6r7、-c
1-6
亚烷基-nr6r7、-c(＝o)r6、-c(＝o)or6、-oc(＝o)r6、-c(＝o)nr6r7、-nr6c(＝o)r7、-s(o)2nr6r7或-c
3-6
碳环基，每个杂环基和杂芳基在每次出现时独立地包含1、2、3或4个选自n、o、s、s＝o或s(＝o)2的杂原子；每个r3和r4在每次出现时独立地可选地被1、2、3、4、5或6个选自氘、卤素、氧代、-c
1-6
烷基、-c
1-6
烷氧基、氧代、-or6、-nr6r7、-cn、-c(＝o)r6、-c(＝o)or6、-oc(＝o)r6、-c(＝o)nr6r7、-nr6c(＝o)r7或-s(o)2nr6r7的取代基取代或不取代；每个ar3在每次出现时独立地选自苯基、萘基、5元杂芳基、6元杂芳基、7元杂芳基、8元杂芳基、9元杂芳基或10元杂芳基，每个杂芳基在每次出现时独立地包含1、2、3或4个选自n、o、或s的杂原子；每个ar3在每次出现时独立地可选地被1、2、3、4、5或6个r
13
取代或不取代；每个r
13
在每次出现时独立地选自氘、卤素、氧代、-c
1-6
烷基、-c
1-6
亚烷基-(卤素)
1-3
、c
1-6
杂烷基、-cn、-or6、-c
1-6
亚烷基-(or6)
1-3
、-o-c
1-6
亚烷基-(卤素)
1-3
、-sr6、-s-c
1-6
亚烷基-(卤素)
1-3
、-nr6r7、-c1-6亚烷基-nr6r7、-c(＝o)r6、-c(＝o)or6、-oc(＝o)r6、-c(＝o)nr6r7、-nr6c(＝o)r7、-s(o)2nr6r7或-c
3-6
碳环基；每个r
12
独立地可选地被1、2、3、4、5或6个选自氘、卤素、-c
1-6
烷基、-c
1-6
烷氧基、氧代、-or6、-nr6r7、-cn、-c(＝o)r6、-c(＝o)or6、-oc(＝o)r6、-c(＝o)nr6r7、-nr6c(＝o)r7或-s(o)2nr6r7的取代基取代或不取代；每个r6和r7在每次出现时独立地选自氢或-c1-6烷基，每个r6和r7独立地可选地被1、2、3、4、5或6个r8取代或不取代；或r7和r7与它们共同连接的n原子一起形成3-10元杂环，所述的3-10元杂环可进一步包含1、2、3或4个选自n、o、s、s(＝o)或s(＝o)2的杂原子，且所述的
3-10元杂环独立地可选地被1、2、3、4、5或6个r8取代或不取代；每个r8在每次出现时独立地选自氘、卤素、氧代、-c
1-6
烷基、-c
1-6
亚烷基-(卤素)
1-3
、c
1-6
杂烷基、-cn、-o-c
1-6
亚烷基-(卤素)
1-3
、-sc
1-6
烷基、-s-c
1-6
亚烷基-(卤素)
1-3
、-nc
1-6
c
1-6
、-c
1-6
亚烷基-nc
1-6
烷基c
1-6
烷基、-c(＝o)c
1-6
烷基、-c(＝o)oc
1-6
烷基、-oc(＝o)c
1-6
烷基、-c(＝o)nc
1-6
烷基c
1-6
烷基、-nc
1-6
烷基c(＝o)c
1-6
烷基、-s(o)2nc
1-6
烷基c
1-6
烷基或-c
3-6
碳环基；n选自0、1、2、3、4、5或6；s选自0、1、2、3、4、5或6；p选自0、1、2、3、4、5或6；q选自0、1、2、3、4、5或6。2.根据权利要求1所述的式(i)的化合物、其药学上可接受的盐或其立体异构体，其中，r1选自如下结构：3.根据权利要求1-2所述的式(i)的化合物、其药学上可接受的盐或其立体异构体，所述的化合物选自：
或其药学上可接受的盐、溶剂化物、多晶型物或异构体。4.一种具有通式(ii)所示的化合物、其立体异构体、可药用的盐、多晶型物或异构体，其中通式(ii)所示的化合物结构如下：其中，每个l1在每次出现时独立地选自键、o、nh、ch2、co或s；每个l2在每次出现时独立地选自键、o、nh、ch2、co或s；每个x1、x2在每次出现时独立地选自n或c；每个r1在每次出现时独立地选自氘、-c
1-6
烷基、-c
1-6
烯基、-c
1-6
炔基、苯基、6元杂芳基、-c
1-6
亚烷基-(卤素)
1-3
、-c
1-6
亚烯基-(卤素)
1-3
、-c
1-6
亚炔基-(卤素)
1-3
、c
1-6
杂烷基、-c
1-6
亚烷基-nr6r7、-c(＝o)r6、-c(＝o)or6、-oc(＝o)r6、-c(＝o)nr6r7、-nr6c(＝o)r7、-s(o)2nr6r7或-c
3-6
碳环基；每个r1独立地可选地被1、2、3、4、5或6个选自氘、卤素、-c
1-6
烷基、-c
1-6
烷氧基、氧代、-or6、-nr6r7、-cn、-c(＝o)r6、-c(＝o)or6、-oc(＝o)r6、-c(＝o)nr6r7、-nr6c(＝o)r7或-s(o)2nr6r7的取代基取代或不取代；每个r2在每次出现时独立地选自苯基、萘基、6元杂芳基、9元杂芳基或10元杂芳基每个杂芳基在每次出现时独立地包含1、2、3或4个选自n、o、或s的杂原子；每个ar2在每次出现时独立地可选地被1、2、3、4、5或6个r8取代或不取代；每个环b在每次出现时独立地选自3-8元杂环，所述3-8元杂环在每次出现时独立地包含1、2、3或4个选自n、o、或s的杂原子；每个b在每次出现时独立地可选地被1、2、3、4、5或6个r9取代或不取代；每个ar2在每次出现时独立地选自苯基、萘基、5元杂芳基、6元杂芳基、7元杂芳基、8元杂芳基、9元杂芳基或10元杂芳基，每个杂芳基在每次出现时独立地包含1、2、3或4个选自n、o、或s的杂原子；每个ar2在每次出现时独立地可选地被1、2、3、4、5或6个r
10
取代或不取代；每个r8、r9、r
10
在每次出现时独立地选自氘、卤素、氧代、-c
1-6
烷基、-c
1-6
亚烷基-(卤素)
1-3
、c
1-6
杂烷基、-cn、-or6、-c
1-6
亚烷基-(or6)
1-3
、-o-c
1-6
亚烷基-(卤素)
1-3
、-sr6、-s-c
1-6
亚烷基-(卤素)
1-3
、-nr6r7、-c
1-6
亚烷基-nr6r7、-c(＝o)r6、-c(＝o)or6、-oc(＝o)r6、-c(＝o)nr6r7、-nr6c(＝o)r7、-s(o)2nr6r7或-c
3-6
碳环基；每个r6和r7在每次出现时独立地选自氢或-c
1-6
烷基、-c
1-6
亚烷基-(卤素)
1-3
、c
1-6
杂烷基、-cn；5.根据权利要求4所述的式(ii)的化合物、其药学上可接受的盐或其立体异构体，所述
的化合物选自：的化合物选自：或其药学上可接受的盐、溶剂化物、多晶型物或异构体。6.一种药物组合物，其包含根据权利要求1-5中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、多晶型物或异构体，以及药学上可接受的载体。7.根据权利要求1-5中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、多晶型物或异构体、以及根据权利要求6所述的组合物在制备用来治疗跟wee1活性相关的疾病的药物中的用途。8.根据权利要求7所述的用途，其中所述跟wee1活性相关的疾病为肝癌、乳腺癌、恶性
胶质瘤、黑色素瘤、成人脑瘤、儿童脑瘤、卵巢癌、结肠癌、宫颈癌、骨肉瘤、肺癌、胃癌、头颈癌或白血病。

技术总结
本发明公开了Wee1激酶抑制剂的制备及其应用，具体而言，涉及一种如式(I)或式(II)所示的化合物及其可药用的盐，含有所述化合和或其药用的盐的药物组合物、应用所述化合物或可药用的盐治疗或者预防Wee1激酶相关性病症、特别是肿瘤的药物中的用途，这是一类杂环类化合物，同时公开了该类化合物的或其可药用的盐的药物组合物的制备方法。其中通式(I)或式(II)的各取代基与说明书中的定义相同。的各取代基与说明书中的定义相同。的各取代基与说明书中的定义相同。


技术研发人员：梁永宏 许志勇 曾兆森 熊方均
受保护的技术使用者：药雅科技（上海）有限公司
技术研发日：2022.03.25
技术公布日：2023/10/7