保护家禽抗家禽病原体的疫苗接种的制作方法

1.本发明总体上涉及通过疫苗接种保护家禽抗家禽病原体的方法，以及适于应用于这些方法的疫苗。


背景技术：

2.家禽动物(也称为“家禽”)在世界各地被作为动物蛋白的来源饲养。而且，家禽能够适应大多数地理区域和条件，它们的购买价格不贵，它们具有快速的世代时间且生产率高，并且它们无需大的土地面积。家禽生产系统不同，范围从农村养殖到高度工业化和垂直集成化的系统。散养家禽生产分布在世界上大多数农村和城郊地区，主要以驯化的家禽(陆生和水生)饲养为主。集约化家禽生产在发达国家最为常见，但在过去的几十年中，许多发展中国家也采用了这种系统，以满足对动物蛋白日益增长的需求。近年来，由于全球化以及传染病原(家禽病原体)经由驯养和野生宿主的可能的持续存在和传播，某些跨境家禽疾病向之前未受影响地区传播的风险有所增加。过去二十年发生的新城疫(newcastledisease,nd)、传染性法氏囊病(infectious bursal disease,ibd)和禽流感(avian influenza,ai)的广泛传播提供了这些疾病对家禽生产部门和整个社会造成负面影响的实例。在国际、国家和农场层面可以实施不同的策略来有效预防和控制动物疾病的传播，家禽疾病防控计划通常包括疫苗接种的使用。事实上，疫苗是全世界家禽疾病预防和控制的重要组成部分。它们在家禽生产中的使用传统上旨在避免或最大限度地减少农场水平上临床疾病的出现，从而提高产量。疫苗和疫苗接种计划变化广泛，取决于多种局部因素(例如生产类型、生物安全性水平、当地疾病模式、母源性免疫状态、可用疫苗、成本和潜在损失)。尽管家禽疫苗接种通常由家禽业管理，但仅少见地，在控制少量主要家禽疾病(例如ai和nd)的国家或区域层面的疾病根除计划框架中也有应用。施用家禽疫苗的第一预期结果是禽类将对病原体产生免疫力，从而免受疾病侵害。经由疫苗接种可能达到的结果可能有所不同。例如，针对疾病的临床形式的保护，降低对感染的易感性(与未接种疫苗的禽类相比，需要更高的感染剂量才能在接种疫苗的禽类中引发感染)以及感染情况下的传染性降低(例如排毒)。
3.通常根据可能会影响疫苗接种计划实施后的策略、设计和有效性的局部因素定制和调整用于控制家禽疾病疫苗接种的疫苗的使用。几个不同因素应予以考虑，包括家禽生产的类型(例如商业或农村)、产业的组织化(例如垂直集约化)、不同禽类物种的密度、流行疾病情况、疫苗的供应情况、其他疫苗的使用、其他疾病的流行性、可用资源(例如人力和设备)以及所涉及的成本。许多方法和疫苗类型均可用于家禽疫苗接种，例如卵内疫苗接种、喷雾疫苗接种、sc(皮下)和im(肌内)疫苗接种、翼蹼疫苗接种和通过饮用水施用。从亚单位到活疫苗的范围，所有种类的疫苗均可应用。使用灭活疫苗的肠外疫苗接种(通常通过肌内注射)常被应用且通常非常有效，但由于必须单独操作和治疗每只动物，因此执行成本昂贵。执行经喷雾的大规模疫苗接种(旨在到达眼和/或呼吸道和/或胃肠道的粘膜表面)方便且廉价，但通常需要抗原是活的，这对安全性产生负面影响。
4.发明目的
5.本发明的目的是设计一种安全、有效且易于执行的新的家禽疫苗接种策略，特别适合于大规模疫苗接种。


技术实现要素：

6.为实现本发明的目的，设计了一种疫苗接种方法，其中通过向家禽动物经粘膜施用疫苗，包含家禽病原体的非活抗原和粘膜粘附佐剂的疫苗被用于加强家禽动物中(已经存在)的免疫应答，所述(已经存在)的免疫应答针对所述家禽病原体。
7.在本领域中普遍认为，使用非活抗原在家禽动物中诱导充分的免疫应答只能通过肠外施用来实现。尽管从方便和经济的角度来看，粘膜施用是优选的，但是通过将非活抗原施用于粘膜表面，通常不会产生针对家禽病原体的充分的免疫应答，因此不会产生针对该病原体的充分保护。其原因尚不完全清楚，但实际上，粘膜免疫系统是复杂的，且在人类和动物健康中均尚未被完全了解。粘膜(免疫)部位持续暴露于来自环境的外来颗粒并适应于这些颗粒的存在。因此，据信粘膜免疫系统更倾向于耐受而非免疫应答。这使得诱导免疫应答变得更加困难，特别是在使用非活(例如灭活)抗原时。
8.然而，申请人发现粘膜施用对于加强已经存在于动物中的免疫应答可能是非常有效的，从而可以获得针对病原体的充分保护。为此，所使用的疫苗除活抗原之外包含所谓的粘膜粘附佐剂似乎是必要的。该佐剂用作抗原的递送系统和载体，以提高其与粘膜的粘附，从而加强抗原的局部粘膜停留时间和受控的局部释放。显然，通过添加具有粘膜粘附特性的佐剂来调整疫苗制剂，局部保留时间得到加强，从而改善抗原摄取及随后对潜在免疫系统的暴露和减少由流动引起的外排或由蛋白酶引起的局部降解。
9.对于一系列的多种家禽病原体，发现通过这种方式可以将免疫应答加强至接近于通过二次肠外疫苗接种注射加强的水平。因此，已证明，通过使用此种类型的施用，至少作为二次免疫，可使用安全(非活)的抗原和简易施用途径获得非常良好的免疫应答。如本领域所已知的，粘膜施用即可通过大规模疫苗接种来完成，例如使用喷雾疫苗接种器。初免免疫应答可以是已知对家禽有效的任何类型的免疫的结果，例如卵内疫苗接种、以活疫苗对日龄雏鸡的喷雾疫苗接种、肠外疫苗接种、野生型感染或甚至是以本发明疫苗的粘膜疫苗接种。本发明的要点在于，只要疫苗中存在粘膜粘附佐剂以携带和递送抗原，加强疫苗接种可使用非活抗原通过粘膜疫苗接种(且因此在需要时通过大规模疫苗接种)有效地完成。这样，可加强免疫应答，且如针对家禽动物所公知的，提供针对家禽病原体的保护，即，预防、缓解或治愈实际感染或由该感染引起的疾病。
10.本发明还涉及一种疫苗，其包含液体药学上可接受的载体、家禽病原体的非活抗原和粘膜粘附佐剂，以及一种增强家禽动物中的针对家禽病原体的免疫应答的方法，其通过向所述家禽动物经粘膜施用疫苗，所述疫苗包含所述家禽病原体的非活抗原和粘膜粘附佐剂。
11.定义
12.疫苗是可安全施用于宿主并保护该宿主抵抗疫苗接种后的病原体(如病毒或细菌的病原微生物)感染的组成物，也即，预防或减少由所述病原体引起的这种感染、或预防或减少由所述感染所致的临床疾病的组成物，通常通过(例如经由抗体)在接种疫苗的宿主中干扰病原体本身。因此，疫苗接种预防或至少降低感染水平和/或预防或至少降低由该感染
引起的临床疾病的水平。通常，疫苗包括在药学上可接受的载体(例如，水性(通常是缓冲的)溶液或任何其他液体载体)中的抗原。
13.病原体的非活抗原是活病原体本身(野生型或减毒形式)之外的任何物质或化合物(免疫应答针对其而被引发)，使得作为该免疫应答的结果，相应的毒性病原体或其一个或多个毒力因子被宿主的免疫系统所识别，并最终至少部分地被中和。病原体的非活抗原的典型实例是灭活的野生型病原体(例如杀灭的病毒或细菌)、病原体的亚基(例如表面表达的蛋白质)和毒素。后两者可以重组表达或可以不重组表达。对于家禽病原体，许多非活抗原是本领域公知的。
14.佐剂是能够非特异性刺激免疫应答的试剂。原则上，能够促进或放大免疫事件级联中的特定过程，从而最终导致更好的免疫应答(即对抗原的综合身体反应，特别是由淋巴细胞介导且通常涉及特异性抗体或先前致敏的淋巴细胞对抗原的识别的免疫应答)的每种试剂可被定义为佐剂。原则上，佐剂对于所述特定免疫过程的发生是非必需的，但促进或放大所述过程。
15.粘膜粘附佐剂是亲水性聚合物(例如具有羟基、羧基、胺或硫酸酯基团)，其具有为至少2,000(两千)da、优选至少5,000(五千)da的分子量，其用作疫苗抗原的递送系统和载体以改善对粘膜的粘附，从而加强局部粘膜停留时间和抗原的受控局部释放。优选地，聚合物具有与待接种疫苗的宿主动物的目标粘膜的ph不同的pk值，使得在与粘膜表面接触时诱导聚合物的电离。对于健康动物，家禽眼或口腔的粘膜表面的ph值通常接近中性，在6.5至7.5之间。优选地，粘膜佐剂是可生物降解的聚合物，即能够被目标生物体分解的聚合物。
16.影响粘膜粘附的因素是亲水性、分子量和pk值。粘膜粘附聚合物具有大量亲水性官能基团，例如羟基和羧基。这些基团允许与基底形成氢键，从而在水性介质中溶胀，由此允许潜在锚定位点的最大暴露。此外，溶胀的聚合物在其链间具有最大距离，导致增大的链柔性和对基底的有效渗透。对于分子量，低分子量聚合物促进聚合物分子的穿插，而在较高分子量下促进缠结。最大粘膜粘附的最佳分子量取决于聚合物的类型，粘附力随聚合物分子量达到100,000-300,000da而增加。超过该水平，则无进一步增长。对于pk值，对粘膜表面界面粘膜粘附的ph值可影响具有可电离基团的粘膜粘附剂的粘附。许多用于药物递送的粘膜粘附剂是具有羧酸官能团的聚阴离子。对于酸性粘膜粘附聚合物，如果局部ph值高于或为聚合物的pka，则其大部分电离；如果ph值低于聚合物的pka，则其大部分未电离。例如，聚(丙烯酸)家族聚合物的pka约为4至5。这些聚合物的最大粘着强度在约ph 4-5被观察到，并在ph 6以上逐渐降低。粘膜粘附佐剂的浓度并不认为是关键的，尽管一般而言最终制剂中对于每种粘膜粘附佐剂最佳的是1至30％w/w，主要1至15％w/w。
17.取决于宿主动物和目标粘膜表面，下列物质通常被用作粘膜粘附佐剂：天然聚合物(或其衍生物)，例如白蛋白、果胶、纤维素、明胶、藻酸盐(g-c模块的各种组合的一系列聚合物；最终重量在60-600kda之间变化)、壳聚糖(范围在110-360kda的一系列壳聚糖聚合物)、透明质酸；合成聚合物，例如泊洛沙姆(聚环氧烷嵌段共聚物；可作为synperonic f127从croda health care购得，一种12kda环氧乙烷/环氧丙烷嵌段共聚物)、peg(聚乙二醇)、paa(聚丙烯酸、卡波姆、70-4000kda)、plga(聚(d,l-乳酸-共-乙醇酸))、pla(聚d,l-乳酸)、pvp(聚乙烯吡咯烷酮)和pva(聚乙烯醇)。
18.家禽动物是可为蛋(蛋鸡)、肉(肉鸡)和/或羽毛而饲养的驯化鸟类物种动物。术语“家禽动物”涵盖广泛禽类，从本土和商业品种的鸡到番鸭、绿头鸭、火鸡、珍珠鸡、鹅、鹌鹑、鸽子、鸵鸟和野鸡。
19.将组合物粘膜施用至动物意味着该组合物被提供为与动物的一个或多个粘膜表面(例如眼、口腔或鼻腔的粘膜表面)接触。
20.针对病原体的免疫应答是能够预防、缓解或治愈该病原体的感染和/或由该感染所致的疾病的应答。
21.本发明的进一步实施方案
22.在用于粘膜施用的疫苗的另一个实施方案中，家禽动物中的免疫应答是家禽病原体自然感染或先前的针对病原体的疫苗的施用的结果。优选地，家禽动物中的免疫应答是先前的针对病原体的疫苗接种(通过肠外或粘膜施用先前的疫苗)的结果。例如，家禽动物中的免疫应答是通过肠外施用包含家禽病原体的非活抗原的先前的疫苗，或通过粘膜施用包含家禽病原体的活或非活抗原的先前的疫苗的结果。在一个实施方案中，包含家禽病原体的非活抗原和粘膜粘附佐剂的疫苗是在先前疫苗的施用后2-6周内被施用的，例如在2、3、4、5或6周内。
23.在又一个实施方案中，疫苗眼部(oc)和/或鼻内(in)施用。这些粘膜表面已显示出理想地适于本发明中的粘膜疫苗接种。
24.在再一个实施方案中，疫苗通过将所述疫苗喷洒至所述家禽动物来施用。喷洒可导致在眼或鼻腔中的直接施用或间接施用(在最初喷洒到动物上之后，例如通过啄食、呼吸等)。
25.在又一个实施方案中，粘膜粘附佐剂具有高于10,000da的分子量。所认为较长的聚合物链更利于粘着至粘膜表面以及维持抗原的递送。分子量的实际上限为1,000,000(一百万)da，尽管对于任何高于300,000da的重量没有预期粘着和持续递送的太大加强。
26.在再一个实施方案中，粘膜粘附佐剂具有低于6的pka值。酸性粘膜粘附佐剂对家禽粘膜表面刺激性较小，且低于6的pka确保了存在至少显著的电离，这改善了对表面的粘着。优选地，粘膜粘附佐剂具有3至5之间的pka值。
27.还在再一个实施方案中，粘膜粘附佐剂选自藻酸盐(即藻酸的盐)和聚环氧烷嵌段共聚物。
28.在疫苗的实施方案中，粘膜粘附佐剂以1至10％w/w的量存在，尽管不排除更高的量。然而，出于实践(例如增加的粘度)和经济(例如成本价格)原因，高于10％的量不是优选的。
29.在本发明的一个实施方案中，家禽病原体是病毒病原体。病毒病原体在不易进行肠外疫苗接种的家禽群中大量存在，因此本发明理想地适用于对抗病毒性家禽病原体(例如新城疫病毒(ndv)、禽呼肠孤病毒(arv)和传染性法氏囊病病毒(ibdv))，但也适用于对抗细菌病原体(例如鼠伤寒沙门氏菌)。
30.所有上述实施方案还涉及根据本发明的疫苗和用于处理家禽动物的任何方法。
31.现使用以下具体实施例进一步举例说明本发明。
32.实施例1
33.研究目的
34.新城疫(nd)是一种高度传染性的家禽病毒性疾病，其在全世界范围内造成经济损
失。本领域中，大多数禽类通过活疫苗初免(live priming)随后加强疫苗接种进行疫苗接种以对抗该病毒。用于活疫苗初免的大规模喷雾应用是常用的。加强疫苗接种通常通过肌肉途径进行。用于加强疫苗接种的粘膜(优选喷雾)方法中的灭活抗原是最便于农民应用于畜群的。
35.本研究旨在建立一种有效的疫苗接种方案，具有活的初免疫苗之后是包含灭活抗原的加强疫苗，所述加强疫苗可经由粘膜途径(例如通过喷雾施用)应用。特别地，需要评估喷雾疫苗接种的功效，因为受到实际影响的通过喷雾应用的有用抗原部分由于沉降、漂移和蒸发造成的损失而受到极大影响。因此，测试了包含与粘膜粘附佐剂组合的灭活抗原的不同疫苗制剂。本研究中使用的模型抗原是ndv clone30，因为ndv是一种呼吸道病毒性疾病，粘膜(特别是喷雾)疫苗接种对于其是受人注意的。
36.材料和方法
37.本研究中使用7个组(n＝13/组)1日龄spf鸡。此外，在t＝0的实验开始时，额外的5个孵化配对被用于获取参比样品。在t＝0疫苗接种后周(wkpv)，所有组接受活ndv clone 30的初次疫苗接种(0.1ml，经眼途径)。在t＝6wkpv时，组2-组7的动物接受加强疫苗接种。组2用作对照，其中动物通过0.5ml肌内(i.m.)注射以全剂量(“100％”)的杀灭(“inac”)ndv与gne佐剂(msd animal health)接受加强免疫。组3接受经由眼-途径施用的加强制剂(40％灭活ndv与5％w/v synperonic f127(泊洛沙姆407；croda health care)粘膜粘附佐剂；0.2ml/动物)。为降低由于喷雾应用(蒸发、沉降)导致的损失的潜在影响，组4-组7接受与按照加强制剂相同的抗原输入，但共混于不同的剂量体积内。
38.组4和组5的动物接受通过细喷雾应用的不同加强制剂，每动物总体积为1ml。组6和组7的动物接受每动物2ml。组别和处理如表1所示。
39.表1疫苗接种方案
[0040][0041][0042]
为确定疫苗制剂的功效，在t＝0加强免疫后周(wkpb)、t＝2wkpb、t＝4wkpb，从所有动物抽血。为确定血清学，分析血清样品中抗ndv血凝抑制抗体的存在。为表征外周血单核细胞(pbmc)，使用sepmate
tm
(stemcell technologies)15ml管分离细胞并使用neubauer计数室计数。使用southern biotech的apc和pacific blue荧光染料评估cd4和cd8α细胞。
[0043]
结果
[0044]
血清学结果如下表2所示。可见，如预期的那样，组1的2log抗体滴度保持在约5的低水平，而加强组的抗体水平上升到im组的约12的非常高的水平。然而，以粘膜应用的死疫苗加强的组也各自显示出约7-8的水平的显著加强效果，对应于抗ndv的充分保护的水平。
[0045]
表2加强疫苗接种后0、2和4周的2log抗体滴度
[0046]
组别加强时2wpb4wpb165525121236874577568766777588
[0047]
表3中提供了cd4和cd8α细胞占总细胞群的百分比。这是通过应用本发明的疫苗可诱导显著的免疫增强效果的另一指示。
[0048]
表3 cd4和cd8α细胞占总细胞群的百分比
[0049]
组别cd4cd8α1128231173352142337525366252072529
[0050]
实施例2
[0051]
研究目的
[0052]
目的在于通过使用研究1的粘膜粘附佐剂之外的另外两种粘膜粘附佐剂进一步评估粘膜粘附佐剂在家禽疫苗接种中的效果。将抗原改为灭活ibdv以评估对另一种家禽抗原的功效。
[0053]
材料和方法
[0054]
该第二研究中使用5组(n＝10/组)3周龄spf鸡。组1用作对照组，其不接受疫苗接种。在t＝0时，组2至组5的所有动物根据表4中提供的信息接受初免疫苗接种，使用灭活的ibdv毒株d78作为抗原。这些疫苗以0.5ml/剂量(100单位)肌肉注射于腿部(组2)应用或以0.2ml/剂量(5000单位)眼部/鼻内应用。组3-组5的所有鸡均按表4所示制剂和途径接受加强疫苗接种，且同时抽血用于血清学分析。组2仅接收初免疫苗接种，因为已知gne佐剂延长抗原释放，而无需加强疫苗接种。加强疫苗接种后两周，所有鸡都暴露于ibdv cs89株病毒的攻击性感染(challenge infection)，其通过滴眼液应用。同时，抽血用于血清学分析。攻击后，在11日的期间内(包括攻击日)对鸡的疾病临床症状或死亡进行监测。
[0055]
表4疫苗接种方案
[0056][0057]
结果
[0058]
血清学结果如下表5所示。可见，如预期的那样，组1的2log抗体滴度保持低于4.0的检测水平，而加强组的抗体水平上升至对于im组的约10的非常高的水平。然而，以粘膜应用的死疫苗加强的组也各自显示出约7-9的水平的显著加强效果，对应于抗ibdv的充分保护的水平。
[0059]
表5加强疫苗接种时和攻击时的2log抗体滴度
[0060]
组别加强疫苗接种时攻击时14.04.026.910.034.16.645.38.754.09.1
[0061]
表6中提供了攻击后的存活数据。可见，血清学结果与存活数据相对应，证实了血清学对应于抗病毒感染的保护。
[0062]
表6存活数据
[0063]
组别存活百分比120％2100％360％490％590％
[0064]
实施例3
[0065]
研究目的
[0066]
目的在于通过使用研究2中两种最具前景的粘膜粘附佐剂(即藻酸盐和聚环氧烷synperonic)，并将抗原改为灭活arv，同时使用喷雾疫苗接种代替直接oc/in疫苗接种进一步评估粘膜粘附佐剂在家禽疫苗接种中的作用。
[0067]
材料和方法
[0068]
本研究共包括3个组，使用1周龄spf蛋鸡(n＝10/组)。在d0，组1-组3的所有动物根据表7中提供的信息使用商业疫苗nobilis reo 2177(msd animal health)接受活reo 2177疫苗接种。该初免疫苗肌内应用于腿部。在d28，所有组如表中所示接受加强疫苗接种。喷雾疫苗中抗原的剂量高十倍以考虑任何未到达鸡的粘膜表面(而是到达羽毛、地面、墙壁等)的抗原。为通过建立作为加强免疫接种的结果的血清学反应来测量功效，在d28(加强免疫接种时)、d42(加强免疫接种后2周)和d56(加强免疫接种后4周)从所有动物抽血。
[0069]
表7疫苗接种方案
[0070][0071][0072]
结果
[0073]
抗arv抗体的血清学结果如下表8所示。可见，组1的2log抗体滴度非常高，但通过喷雾接受加强疫苗接种的组2和组3的2log抗体滴度处于相应水平，表明诱导了抗arv的充分免疫应答。特别地，使用粘膜粘附的聚环氧烷的数据表明可实现一定的保护水平(等同于通过im疫苗接种实现的保护)。
[0074]
表8初免和加强疫苗接种2周和4周后的2log抗体滴度
[0075]
组别加强时加强后2周加强后4周168.69.526.59.59.0357.67.0
[0076]
实施例4
[0077]
研究目的
[0078]
目的在于通过使用研究2和3的藻酸盐粘膜粘附佐剂进一步评估粘膜粘附佐剂在家禽疫苗接种中的作用，但现设置为评估在使用经眼/鼻途径的灭活多价沙门氏菌疫苗的初免-加强方案中抗细菌感染(即鼠伤寒沙门氏菌)的保护。
[0079]
材料和方法
[0080]
本研究共包括2个组，使用40只1日龄spf鸡(n＝20/组)。d0时，组2的动物经由oc/in途径接受使用含灭活的肠炎、鼠伤寒和婴儿血清型沙门氏菌以及1％藻酸盐的多价沙门氏菌疫苗的初免疫苗接种。d14时，组2的动物接受加强疫苗接种(相同疫苗，相同途径)。d21时，通过口服饲喂用毒性鼠伤寒沙门氏菌攻击组1(对照)和组2的动物。在第24、26、28、31和35天，从所有禽类收集泄殖腔拭子。一半禽类在攻击后7天被安乐死以收集脾和肝样品以及盲肠拭子。另一半在攻击后14天被安乐死以收集相同样品。
[0081]
结果
[0082]
结果(所有样品收集日期的平均值)示于下表9中，以样品总数中阳性样品的百分比表示。显示出抗沙门氏菌感染的保护作用。
[0083]
表9沙门氏菌疫苗接种的结果
[0084]
样品对照疫苗接种泄殖腔7454仅盲肠8555脾/肝/盲肠7352

技术特征：
1.一种疫苗，其包含家禽病原体的非活抗原和粘膜粘附佐剂，用于通过向家禽动物经粘膜施用所述疫苗来加强所述家禽动物中的针对所述家禽病原体的免疫应答。2.如权利要求1的用于所述用途的疫苗，其特征在于所述家禽动物中的所述免疫应答是所述家禽病原体的自然感染或施用先前针对所述病原体的疫苗的结果。3.如权利要求1或2的用于所述用途的疫苗，其特征在于所述家禽动物中的所述免疫应答是通过肠胃外或粘膜施用先前的疫苗，先前针对所述病原体的疫苗接种的结果。4.如前述权利要求中任一项的用于所述用途的疫苗，其特征在于所述家禽动物中的所述免疫应答是通过肠胃外施用包含家禽病原体的非活抗原的先前的疫苗或通过粘膜施用包含家禽病原体的非活抗原的先前的疫苗，先前针对所述病原体的疫苗接种的结果。5.如权利要求2-4中任一项的用于所述用途的疫苗，其特征在于包含家禽病原体的非活抗原和粘膜粘附佐剂的所述疫苗是在所述先前疫苗的施用后2-6周内施用。6.如前述权利要求中任一项的用于所述用途的疫苗，其特征在于所述疫苗眼部(oc)和/或鼻内(in)施用。7.如前述权利要求中任一项的用于所述用途的疫苗，其特征在于所述疫苗通过将所述疫苗喷洒至所述家禽动物上来施用。8.如前述权利要求中任一项的用于所述用途的疫苗，其特征在于所述粘膜粘附佐剂具有高于10,000da的分子量。9.如前述权利要求中任一项的用于所述用途的疫苗，其特征在于所述粘膜粘附佐剂具有高于10,000da且低于1,000,000da的分子量。10.如前述权利要求中任一项的用于所述用途的疫苗，其特征在于所述粘膜粘附佐剂具有高于10,000da且低于300,000da的分子量。11.如前述权利要求中任一项的用于所述用途的疫苗，其特征在于所述粘膜粘附佐剂具有低于6的pka值。12.如前述权利要求中任一项的用于所述用途的疫苗，其特征在于所述粘膜粘附佐剂具有3至5之间的pka值。13.如前述权利要求中任一项的用于所述用途的疫苗，其特征在于所述粘膜粘附佐剂选自藻酸盐和聚环氧烷嵌段共聚物。14.如前述权利要求中任一项的用于所述用途的疫苗，其特征在于所述粘膜粘附佐剂以1至10％w/w的量存在于所述疫苗中。15.如前述权利要求中任一项的用于所述用途的疫苗，其特征在于所述家禽病原体是病毒病原体。16.如前述权利要求中任一项的用于所述用途的疫苗，其特征在于所述家禽病原体选自新城疫病毒(ndv)、禽呼肠孤病毒(arv)、传染性法氏囊病病毒(ibdv)和鼠伤寒沙门氏菌。17.一种疫苗，其包含液体的药学上可接受的载体、家禽病原体的非活抗原和粘膜粘附佐剂。18.一种增强家禽动物中的针对家禽病原体的免疫应答的方法，其是通过向所述家禽动物经粘膜施用疫苗，所述疫苗包含所述家禽病原体的非活抗原和粘膜粘附佐剂。

技术总结
本发明涉及包含家禽病原体的非活抗原和粘膜粘附佐剂的疫苗，其用于通过向家禽动物经粘膜施用所述疫苗来加强所述家禽动物中针对所述家禽病原体的免疫应答。本发明还涉及一种疫苗，其包含液体的药学上可接受的载体、家禽病原体的非活抗原和粘膜粘附佐剂，以及一种增强家禽动物中的针对家禽病原体的免疫应答的方法，其通过向所述家禽动物经粘膜施用疫苗，所述疫苗包含所述家禽病原体的非活抗原和粘膜粘附佐剂。膜粘附佐剂。


技术研发人员：W
受保护的技术使用者：英特维特国际股份有限公司
技术研发日：2022.02.07
技术公布日：2023/10/11