一种松土促根剂及其制备方法与流程

1.本发明属于微生物肥料技术领域，具体是指一种松土促根剂及其制备方法。


背景技术：

2.钾被视为植物最重要的必需营养素之一，在植物的一些代谢过程的激活中发挥着重要作用，钾的不充足供应会导致植株根系发育不良，形成小种子，生长缓慢，产量下降；土壤中的钾大部分都固定在硅酸盐矿物中，植物无法吸收，只有少部分可以被植物直接利用，限制了作物的生长和产量；大部分钾肥中的钾元素以氯化钾的形式存在，其所含的氯离子会对土壤微生物群落产生不利影响，而且过量施用钾肥会造成土壤环境及水体污染；土壤中解钾微生物的解钾机制很多，它们可以通过酸解、酶解和胞外多糖络合等多种机制提高钾矿物的溶解度，有机酸的产生是钾溶解的主要机制之一，它可以直接溶解岩石中的钾，也可以螯合硅离子将钾置换出来，有机酸释放的质子可以从云母、伊利石、长石和正长石等矿物中置换不溶性钾，此外，有机酸还能通过形成金属有机配合物来加速钾矿物的风化，金属有机配合物会削弱晶格结构，将钾释放到土壤中。
3.目前现有技术主要存在以下问题：植物对土壤中钾的利用率低。


技术实现要素：

4.针对上述情况，为克服现有技术的缺陷，本发明提供了一种松土促根剂及其制备方法，为了解决植物对土壤中钾的利用率低的问题，本发明通过改性生物炭负载聚多巴胺包覆解钾菌，提高了解钾菌的存活率和代谢效率，从而提高植物对土壤中钾的利用率，促进植物根系发育，同时改性生物炭可以改良土壤物理结构，促进植物生长。
5.为了实现上述目的，本发明采取的技术方案如下：本发明提出了一种松土促根剂及其制备方法，所述松土促根剂包括如下重量份的组分：解钾菌菌剂30-50份、尿素5-10份、磷酸二氢铵7-12份、黄腐酸钾1-2份、聚谷氨酸1-3份、膨润土2-4份；所述解钾菌菌剂为：改性生物炭负载聚多巴胺包覆解钾菌。
6.进一步地，所述解钾菌菌剂的制备方法包括如下步骤：
7.（1）将小麦秸秆用去离子水洗净，放入烘箱80℃烘干，切为小段，用粉碎机粉碎，过100目筛，得到小麦秸秆粉；
8.（2）将步骤（1）所述小麦秸秆粉放入瓷舟中，置于真空管式炉，通入氮气，以10℃/min加热至500℃，保温2-3h，冷却至室温后取出，用去离子水洗涤3次，80℃烘干，研磨并过100目筛，得到生物炭；
9.（3）取步骤（2）所述生物炭加入500ml去离子水，超声分散30-50min，功率为300w，加入fecl3·
6h2o和mgcl2·
6h2o，调节ph至10，磁力搅拌4-7h，速度为100-200rpm，真空抽滤，70℃烘干，得到生物炭混合物；
10.（4）将步骤（3）所述生物炭混合物放入坩埚，置于马弗炉中，以5℃/min加热至300-400℃后保温2-3h，冷却至室温后取出，用去离子水洗涤3次，70℃烘干，研磨过100目筛，得
到金属改性生物炭；
11.（5）取1-2g步骤（4）所述金属改性生物炭置于烧杯中，加入50ml硝酸溶液，磁力搅拌1-2h，速度为200rpm，过滤，用去离子水洗涤至中性，得到酸改性生物炭；
12.（6）取步骤（5）所述酸改性生物炭置于烧杯中，加入300ml去离子水，加入盐酸多巴胺，磁力搅拌30-60min，速度为200rpm，用去离子水洗涤3次，得到改性生物炭；
13.（7）将解钾菌菌种接种在培养基，在25℃、150rpm的条件下培养至对数生长期，6000rpm离心10-20min，用pbs缓冲液洗涤3次，加入50ml生理盐水，得到菌悬液；所述解钾菌为胶冻样芽胞杆菌，来源于中国工业微生物菌种保藏管理中心，菌种编号：cicc23575；
14.（8）取500μl步骤（7）所述菌悬液放入100ml10mm的tris-hcl缓冲液，加入1-2g步骤（6）所述改性生物炭，调节其ph至8-9，在30℃、150rpm的条件下反应30-60min，以5000rpm离心10min，得到解钾菌菌剂。
15.进一步地，在步骤（3）中，所述fecl3·
6h2o与mgcl2·
6h2o的质量比为1-2:1。
16.进一步地，在步骤（3）中，所述fecl3·
6h2o和mgcl2·
6h2o的总质量与生物炭的质量比为2-3:1。
17.进一步地，在步骤（5）中，所述硝酸溶液的质量分数为65%。
18.进一步地，在步骤（6）中，所述酸改性生物炭与盐酸多巴胺的质量比为4-5:1。
19.进一步地，在步骤（7）中，所述解钾菌菌种接种量为2%。
20.进一步地，在步骤（7）中，所述培养基为蒸馏水配制的含有10.0g/l蔗糖、0.2g/lnacl、0.2g/lmgso4·
7h2o、0.1g/lcaso4·
2h2o、0.2g/lk2hpo4、5g/lcaco3和5.0g/l琼脂的无氮琼脂培养基。
21.进一步地，在步骤（7）中，所述pbs缓冲液为蒸馏水配制的含有8.0g/lnacl、0.2g/lkcl、1.44g/lna2hpo4、0.24g/lkh2po4的ph值为8.5的混合溶液。
22.本发明提供了一种松土促根剂的制备方法，具体包括如下步骤：
23.①
将尿素、磷酸二氢铵、黄腐酸钾、聚谷氨酸和膨润土搅拌均匀，粉碎、过筛，得到混合物；
24.②
将解钾菌菌剂加入混合物中搅拌均匀，送至造粒机中，形成颗粒，得到松土促根剂。
25.本发明取得的有益效果如下：
26.本发明通过制备改性生物炭负载聚多巴胺包覆解钾菌菌剂，改善解钾菌的存活率和代谢效率，提高了植物土壤中钾的利用率，从而促进植物根系发育；生物炭具备疏松多孔的结构，能够贮存水分及养分，提升土壤持水性和透气性的同时促进土壤中营养元素的循环，从而促进植物的生长；金属改性生物炭使金属氧化物附着在生物炭表面，使生物炭表面的阳离子电荷量增加，提升生物炭对阴离子的吸附性能，能够将其吸附在其表面或内部，同时负载的解钾菌将吸附在生物炭上及生物炭周围的可利用部分进行分解，提高了解钾菌的代谢效率；接枝于生物炭上的多巴胺发生聚合反应，对解钾菌形成载体结构，同时聚多巴胺的聚合反应十分温和不会影响解钾菌的生存和增殖，聚多巴胺具有良好的耐腐蚀性和稳定性，能够有效阻隔强氧化剂以及酸碱物质对于解钾菌的侵蚀，为解钾菌的长期生存提供有利环境，在土壤中能够持续转化有效钾，对植物根系的发育具有长期促进作用。
附图说明
27.图1为本发明实施例和对比例所制备的松土促根剂解钾功效测试结果图；
28.图2为本发明实施例和对比例所制备的松土促根剂酸碱环境中解钾能力测试结果图；
29.图3为本发明实施例和对比例所制备的松土促根剂存活率测试结果图；
30.图4为本发明实施例1所制备的解钾菌菌剂的微观形貌图像。
31.附图用来提供对本发明的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与本发明的实施例一起用于解释本发明，并不构成对本发明的限制。
具体实施方式
32.下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例；基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
33.除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域技术人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本发明中。文中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用，但不能限制本技术的内容。
34.下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法；下述实施例中所用的试验材料及试验菌株，如无特殊说明，均为从商业渠道购买得到的。
35.本发明所涉及的材料及菌株来源如下：
36.解钾菌，菌种编号：cicc 23575，中文名称：胶冻样芽胞杆菌，拉丁名称：bacillus mucilaginosus，来源于中国工业微生物菌种保藏管理中心；
37.fecl3·
6h2o，casno:10025-77-1，购自阿拉丁生化科技股份有限公司；
38.mgcl2·
6h2o，casno:7791-18-6，购自阿拉丁生化科技股份有限公司；
39.盐酸多巴胺，casno:62-31-7，购自阿拉丁生化科技股份有限公司。
40.实施例1
41.本发明提出了一种松土促根剂及其制备方法，所述松土促根剂包括如下重量份的组分：解钾菌菌剂30份、尿素5份、磷酸二氢铵7份、黄腐酸钾1份、聚谷氨酸1份、膨润土2份。
42.解钾菌菌剂的制备方法包括如下步骤：
43.（1）将小麦秸秆用去离子水洗净，放入烘箱80℃烘干，切为小段，用粉碎机粉碎，过100目筛，得到小麦秸秆粉；
44.（2）将步骤（1）所述小麦秸秆粉放入瓷舟中，置于真空管式炉，通入氮气，以10℃/min加热至500℃，保温2h，冷却至室温后取出，用去离子水洗涤3次，80℃烘干，研磨并过100目筛，得到生物炭；
45.（3）取10g步骤（2）所述生物炭加入500ml去离子水，超声分散30min，功率为300w，加入10gfecl3·
6h2o和10gmgcl2·
6h2o，调节ph至10，磁力搅拌4h，速度为100rpm，真空抽滤，70℃烘干，得到生物炭混合物；
46.（4）将步骤（3）所述生物炭混合物放入坩埚，置于马弗炉中，以5℃/min加热至300℃后保温2h，冷却至室温后取出，用去离子水洗涤3次，70℃烘干，研磨过100目筛，金属改性
生物炭；
47.（5）取1g将步骤（4）所述金属改性生物炭置于烧杯中，加入50ml质量分数为65%的硝酸溶液，磁力搅拌1h，速度为200rpm，过滤，用去离子水洗涤至中性，得到酸改性生物炭；
48.（6）取1g将步骤（5）所述酸改性生物炭置于烧杯中，加入300ml去离子水，加入250mg盐酸多巴胺，磁力搅拌30min，速度为200rpm，用去离子水洗涤3次，得到改性生物炭；
49.（7）将解钾菌菌种接种在培养基，解钾菌菌种接种量为2%，培养基为蒸馏水配制的含有10.0g/l蔗糖、0.2g/lnacl、0.2g/lmgso4·
7h2o、0.1g/lcaso4·
2h2o、0.2g/lk2hpo4、5g/lcaco3和5.0g/l琼脂的无氮琼脂培养基，在25℃、150rpm的条件下培养至对数生长期，6000rpm离心10min，用pbs缓冲液洗涤3次，pbs缓冲液为蒸馏水配制的含有8.0g/lnacl、0.2g/lkcl、1.44g/lna2hpo4、0.24g/lkh2po4的ph值为8.5的混合溶液，加入50ml生理盐水，得到菌悬液；
50.（8）取500μl步骤（7）所述菌悬液放入100ml10mm的tris-hcl缓冲液，加入1g步骤（6）所述改性生物炭，调节其ph至8，在30℃、150rpm的条件下反应30min，以5000rpm离心10min，得到解钾菌菌剂。
51.本发明提供了一种松土促根剂的制备方法，具体包括如下步骤：
52.①
将尿素、磷酸二氢铵、黄腐酸钾、聚谷氨酸和膨润土搅拌均匀，粉碎、过筛，得到混合物；
53.②
将解钾菌菌剂加入混合物中搅拌均匀，送至造粒机中，形成颗粒，得到松土促根剂。
54.实施例2
55.本发明提出了一种松土促根剂及其制备方法，所述松土促根剂包括如下重量份的组分：解钾菌菌剂50份、尿素10份、磷酸二氢铵12份、黄腐酸钾2份、聚谷氨酸3份、膨润土4份。
56.解钾菌菌剂的制备方法包括如下步骤：
57.（1）将小麦秸秆用去离子水洗净，放入烘箱80℃烘干，切为小段，用粉碎机粉碎，过100目筛，得到小麦秸秆粉；
58.（2）将步骤（1）所述小麦秸秆粉放入瓷舟中，置于真空管式炉，通入氮气，以10℃/min加热至500℃，保温3h，冷却至室温后取出，用去离子水洗涤3次，80℃烘干，研磨并过100目筛，得到生物炭；
59.（3）取10g步骤（2）所述生物炭加入500ml去离子水，超声分散50min，功率为300w，加入20gfecl3·
6h2o和10gmgcl2·
6h2o，调节ph至10，磁力搅拌7h，速度为200rpm，真空抽滤，70℃烘干，得到生物炭混合物；
60.（4）将步骤（3）所述生物炭混合物放入坩埚，置于马弗炉中，以5℃/min加热至400℃后保温3h，冷却至室温后取出，用去离子水洗涤3次，70℃烘干，研磨过100目筛，得到金属改性生物炭；
61.（5）取2g步骤（4）所述金属改性生物炭置于烧杯中，加入50ml质量分数为65%的硝酸溶液，磁力搅拌2h，速度为200rpm，过滤，用去离子水洗涤至中性，得到酸改性生物炭；
62.（6）取1g步骤（5）所述酸改性生物炭置于烧杯中，加入300ml去离子水，加入200mg盐酸多巴胺，磁力搅拌60min，速度为200rpm，用去离子水洗涤3次，得到改性生物炭；
63.（7）将解钾菌菌种接种在培养基，解钾菌菌种接种量为2%，培养基为蒸馏水配制的含有10.0g/l蔗糖、0.2g/lnacl、0.2g/lmgso4·
7h2o、0.1g/lcaso4·
2h2o、0.2g/lk2hpo4、5g/lcaco3和5.0g/l琼脂的无氮琼脂培养基，在25℃、150rpm的条件下培养至对数生长期，6000rpm离心20min，用pbs缓冲液洗涤3次，pbs缓冲液为蒸馏水配制的含有8.0g/lnacl、0.2g/lkcl、1.44g/lna2hpo4、0.24g/lkh2po4的ph值为8.5的混合溶液，加入50ml生理盐水，得到菌悬液；
64.（8）取500μl步骤（7）所述菌悬液放入100ml10mm的tris-hcl缓冲液，加入2g步骤（6）所述改性生物炭，调节其ph至9，在30℃、150rpm的条件下反应60min，以5000rpm离心10min，得到解钾菌菌剂。
65.本实施例还提供一种松土促根剂的制备方法，具体步骤与实施例1相同。
66.实施例3
67.本发明提出了一种松土促根剂及其制备方法，所述松土促根剂包括如下重量份的组分：解钾菌菌剂40份、尿素7份、磷酸二氢铵10份、黄腐酸钾1.5份、聚谷氨酸2份、膨润土3份。
68.解钾菌菌剂的制备方法包括如下步骤：
69.（1）将小麦秸秆用去离子水洗净，放入烘箱80℃烘干，切为小段，用粉碎机粉碎，过100目筛，得到小麦秸秆粉；
70.（2）将步骤（1）所述小麦秸秆粉放入瓷舟中，置于真空管式炉，通入氮气，以10℃/min加热至500℃，保温2.5h，冷却至室温后取出，用去离子水洗涤3次，80℃烘干，研磨并过100目筛，得到生物炭；
71.（3）取10g步骤（2）所述生物炭加入500ml去离子水，超声分散40min，功率为300w，加入15gfecl3·
6h2o和10gmgcl2·
6h2o，调节ph至10，磁力搅拌5h，速度为150rpm，真空抽滤，70℃烘干，得到生物炭混合物；
72.（4）将步骤（3）所述生物炭混合物放入坩埚，置于马弗炉中，以5℃/min加热至350℃后保温2.5h，冷却至室温后取出，用去离子水洗涤3次，70℃烘干，研磨过100目筛，得到金属改性生物炭；
73.（5）取1.5g步骤（4）所述金属改性生物炭置于烧杯中，加入50ml质量分数为65%的硝酸溶液，磁力搅拌1.5h，速度为200rpm，过滤，用去离子水洗涤至中性，得到酸改性生物炭；
74.（6）取1g步骤（5）所述酸改性生物炭置于烧杯中，加入300ml去离子水，加入220mg盐酸多巴胺，磁力搅拌45min，速度为200rpm，用去离子水洗涤3次，得到改性生物炭；
75.（7）将解钾菌菌种接种在培养基，解钾菌菌种接种量为2%，培养基为蒸馏水配制的含有10.0g/l蔗糖、0.2g/lnacl、0.2g/lmgso4·
7h2o、0.1g/lcaso4·
2h2o、0.2g/lk2hpo4、5g/lcaco3和5.0g/l琼脂的无氮琼脂培养基，在25℃、150rpm的条件下培养至对数生长期，6000rpm离心15min，用pbs缓冲液洗涤3次，pbs缓冲液为蒸馏水配制的含有8.0g/lnacl、0.2g/lkcl、1.44g/lna2hpo4、0.24g/lkh2po4的ph值为8.5的混合溶液，加入50ml生理盐水，得到菌悬液；
76.（8）取500μl步骤（7）所述菌悬液放入100ml10mm的tris-hcl缓冲液，加入1.5g步骤（6）所述改性生物炭，调节其ph至8.5，在30℃、150rpm的条件下反应45min，以5000rpm离心
10min，得到解钾菌菌剂。
77.本实施例还提供一种松土促根剂的制备方法，具体步骤与实施例1相同。
78.对比例1
79.本对比例提供一种松土促根剂，其与实施例1的区别在于使用未进行金属改性的生物炭，制备步骤不包含步骤（3）、（4），其余与实施例1相同。
80.对比例2
81.本对比例提供一种松土促根剂，其与实施例1的区别在于使用未进行多巴胺改性的生物炭，制备步骤不包含步骤（5）、（6），其余与实施例1相同。
82.实验例1
83.对本发明实施例1-3及对比例1、2所制备的松土促根剂进行解钾功效测试，具体方法如下：取农业用地耕层土壤，风干并碾碎过2mm筛，取样并测量取样土壤中速效钾含量，加入松土促根剂，松土促根剂的质量分数为0.2%，温度20℃，培养28天，分别在第1、3、7、14、28天取样并测量取样土壤中速效钾含量。
84.土壤中速效钾的测定方法为：向5g土壤样品中加入50ml1mol/l的nh4oac溶液，震荡30min后用滤纸过滤，用火焰分光光度计测定滤液中速效钾含量，土壤中速效钾根据以下公式计算：
[0085][0086]
式中：c为土壤速效钾含量（mg/kg）；
[0087]
c1为待测液速效钾含量（mg/kg）；
[0088]
v为加入浸提液的量（ml）；
[0089]
m为土壤样品质量（g）。
[0090]
图1为本实施例1-3与对比例1、2的解钾功效测试结果图；如图所示，土壤初始速效钾含量为172.3mg/kg，实施例1-3在第28天土壤中速效钾含量分别为232.6、231.7、232.4mg/kg，对比例1为221.2mg/kg，对比例2为230.2mg/kg；相较于对比例1，实施例1使用金属改性生物炭作为载体提高了5%的解钾量，这是由于改性生物炭使金属氧化物附着在生物炭表面，使生物炭表面的阳离子电荷量增加，提升其对硅酸盐中阴离子的吸附性能，将硅酸盐吸附在其表面或内部，同时负载的解钾菌将吸附在生物炭上及生物炭周围的可利用部分进行分解，提高了解钾菌的解钾效率。
[0091]
实验例2
[0092]
对本发明实施例1-3及对比例1、2所制备的松土促根剂进行酸碱环境中溶解钾的能力测试，具体方法如下：取农业用地耕层土壤，风干并碾碎过2mm筛，取样并测量取样土壤中速效钾含量，加入松土促根剂，松土促根剂的质量分数为0.2%，分别调节土壤ph值为4、7、10，温度20℃，培养28天，取样并测量取样土壤中速效钾含量。
[0093]
土壤初始速效钾含量为172.3mg/kg，图2为放实施例1-3与对比例1、2在不同ph值的条件下的解钾功效测试结果图；在ph值为4的条件下，实施例1-3在第28天土壤中速效钾含量分别222.9、221.3、223.1mg/kg，对比例1为210.2mg/kg，对比例2为162.7mg/kg，在ph值为7的条件下，实施例1-3在第28天土壤中速效钾含量分别232.8、232.1、232.5mg/kg，对比例1为221.5mg/kg，对比例2为224.2mg/kg，在ph值为10的条件下，实施例1-3在第28天土壤
中速效钾含量分别219.8、218.1、220.7mg/kg，对比例1为207.6mg/kg，对比例2为151.4mg/kg；通过实施例1和对比例2可以得出，在ph值为4的条件下，使用多巴胺改性生物炭负载解钾菌提高了37%的解钾量，在ph值为10的条件下，提高了45%的解钾量，这是由于聚多巴胺具有良好的耐腐蚀性和稳定性，能够有效阻隔酸碱物质对于解钾菌的侵蚀。
[0094]
实验例3
[0095]
对本发明实施例1-3及对比例1、2所制备的松土促根剂进行存活率测试，具体方法如下：在温度20℃的室内条件下，将松土促根剂放置50天，分别取1g样品加入100ml生理盐水，在20℃、150rpm下震荡1h，采用稀释平板计数法测定菌数，测得菌数与初始菌数的比值即为菌体存活率。
[0096]
图3为本实施例1-3与对比例1、2的存活率测试结果图；如图所示，实施例1-3的存活率分别为75%、74%、77%，对比例1为68%，对比例2为51%；相较于对比例2，实施例1使用多巴胺改性生物炭负载解钾菌提高了24%的存活率，可见聚多巴胺能够有效提高解钾菌的存活率。
[0097]
实验例4
[0098]
本实验例对实施例1所述的解钾菌菌剂的表面形貌以采用扫描电子显微镜观察。
[0099]
图4为本发明实施例1所述的解钾菌菌剂的微观形貌。
[0100]
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。
[0101]
以上对本发明及其实施方式进行了描述，这种描述没有限制性，附图中所示的也只是本发明的实施方式之一，实际的应用并不局限于此。总而言之如果本领域的普通技术人员受其启示，在不脱离本发明创造宗旨的情况下，不经创造性的设计出与该技术方案相似的方式及实施例，均应属于本发明的保护范围。

技术特征：
1.一种松土促根剂，其特征在于：所述松土促根剂的制备原料包括如下重量份的组分：解钾菌菌剂30-50份、尿素5-10份、磷酸二氢铵7-12份、黄腐酸钾1-2份、聚谷氨酸1-3份、膨润土2-4份；所述解钾菌菌剂为：改性生物炭负载聚多巴胺包覆解钾菌。2.根据权利要求1所述的一种松土促根剂，其特征在于：所述解钾菌菌剂的制备方法具体包括以下步骤：（1）将小麦秸秆用去离子水洗净，放入烘箱80℃烘干，切为小段，用粉碎机粉碎，过100目筛，得到小麦秸秆粉；（2）将步骤（1）所述小麦秸秆粉放入瓷舟中，置于真空管式炉，通入氮气，以10℃/min加热至500℃，保温2-3h，冷却至室温后取出，用去离子水洗涤3次，80℃烘干，研磨并过100目筛，得到生物炭；（3）取步骤（2）所述生物炭加入500ml去离子水，超声分散30-50min，功率为300w，加入fecl3·
6h2o和mgcl2·
6h2o，调节ph至10，磁力搅拌4-7h，速度为100-200rpm，真空抽滤，70℃烘干，得到生物炭混合物；（4）将步骤（3）所述生物炭混合物放入坩埚，置于马弗炉中，以5℃/min加热至300-400℃后保温2-3h，冷却至室温后取出，用去离子水洗涤3次，70℃烘干，研磨过100目筛，得到金属改性生物炭；（5）取1-2g步骤（4）所述金属改性生物炭置于烧杯中，加入50ml硝酸溶液，磁力搅拌1-2h，速度为200rpm，过滤，用去离子水洗涤至中性，得到酸改性生物炭；（6）取步骤（5）所述酸改性生物炭置于烧杯中，加入300ml去离子水，加入盐酸多巴胺，磁力搅拌30-60min，速度为200rpm，用去离子水洗涤3次，得到改性生物炭；（7）将解钾菌菌种接种在培养基，在25℃、150rpm的条件下培养至对数生长期，6000rpm离心10-20min，用pbs缓冲液洗涤3次，加入50ml生理盐水，得到菌悬液；所述解钾菌为胶冻样芽胞杆菌，来源于中国工业微生物菌种保藏管理中心，菌种编号：cicc23575；（8）取500μl步骤（7）所述菌悬液放入100ml10mm的tris-hcl缓冲液，加入1-2g步骤（6）所述改性生物炭，调节其ph至8-9，在30℃、150rpm的条件下反应30-60min，以5000rpm离心10min，得到解钾菌菌剂。3.根据权利要求2所述的一种松土促根剂，其特征在于：在步骤（3）中，所述fecl3·
6h2o与mgcl2·
6h2o的质量比为1-2:1。4.根据权利要求3所述的一种松土促根剂，其特征在于：在步骤（3）中，所述fecl3·
6h2o和mgcl2·
6h2o的总质量与生物炭的质量比为2-3:1。5.根据权利要求4所述的一种松土促根剂，其特征在于：在步骤（5）中，所述硝酸溶液的质量分数为65%。6.根据权利要求5所述的一种松土促根剂，其特征在于：在步骤（6）中，所述酸改性生物炭与盐酸多巴胺的质量比为4-5:1。7.根据权利要求6所述的一种松土促根剂，其特征在于：在步骤（7）中，所述解钾菌菌种接种量为2%。8.根据权利要求7所述的一种松土促根剂，其特征在于：在步骤（7）中，所述培养基为蒸馏水配制的含有10.0g/l蔗糖、0.2g/lnacl、0.2g/lmgso4·
7h2o、0.1g/lcaso4·
2h2o、0.2g/lk2hpo4、5g/lcaco3和5.0g/l琼脂的无氮琼脂培养基。
9.根据权利要求8所述的一种松土促根剂，其特征在于：在步骤（7）中，所述pbs缓冲液为蒸馏水配制的含有8.0g/lnacl、0.2g/lkcl、1.44g/lna2hpo4、0.24g/lkh2po4的ph值为8.5的混合溶液。10.根据权利要求1-9任一项所述松土促根剂的制备方法，其特征在于：具体包括以下步骤：
①
将尿素、磷酸二氢铵、黄腐酸钾、聚谷氨酸和膨润土搅拌均匀，粉碎、过筛，得到混合物；
②
将解钾菌菌剂加入混合物中搅拌均匀，送至造粒机中，形成颗粒，得到松土促根剂。

技术总结
本发明公开了微生物肥料领域的一种松土促根剂及其制备方法，所述松土促根剂包括如下重量份的组分：解钾菌菌剂30-50份、尿素5-10份、磷酸二氢铵7-12份、黄腐酸钾1-2份、聚谷氨酸1-3份、膨润土2-4份。本发明通过改性生物炭负载聚多巴胺包覆解钾菌，提高了解钾菌的存活率和代谢效率，从而提高植物对土壤中钾的利用率，促进植物根系发育，同时改性生物炭可以改良土壤物理结构，促进植物生长。促进植物生长。促进植物生长。


技术研发人员：陈长锁 杨子阔
受保护的技术使用者：河北冀丰民泰科技有限公司
技术研发日：2023.07.14
技术公布日：2023/10/15