一种黄精多组分同步提取法

1.本发明属于化工提取领域，尤其涉及一种黄精多组分同步提取法。


背景技术：

2.黄精为百合科(liliaceae)、黄精属polygonatum mill.多年生草本植物，是我国重要的药食同源性中药材，含有多糖、皂苷、黄酮、多酚等多种活性成分。已有研究表明黄精多糖具有降血糖、抗衰老、降血脂、增强记忆力等作用；黄精皂苷具有降血糖、抗肿瘤、抗氧化等方面；黄精黄酮的生物活性，主要包括抗疲劳、保护血管、降血糖、降血脂、抗衰老、抗菌等作用。因此提取分离纯化黄精中的多糖、甾体皂苷和黄酮等活性成分具有重要经济意义及生产价值。
3.但在实际生产作业过程中,黄精活性成分提取工艺效率较为低下或成本较为高昂，通常采用萃取法，如需要经过多次的正反萃取实现黄精多糖、黄酮和皂苷等多组分的分离和提取，而其余的工艺难以实现各类组分的有效分离。因而开发更加简洁高效、有利于黄精多组分的同步提取分离的方法，具有十分重要的产业价值。


技术实现要素：

4.为解决现有的提取工艺较为繁琐，或难以实现黄精中不同组分的分别提取和分离等问题，本发明提供了一种黄精多组分同步提取法。
5.本发明的目的在于：一、提高黄精三大重要成分的有效提取；二、提高提取效率，确保提取效果；三、确保各成分的收得率较高。
6.为实现上述目的，本发明采用以下技术方案。
7.一种黄精多组分同步提取法，所述方法包括：1)取黄精提取液，进行醇沉分离得到多糖，实现对多糖的提取后得到预提液；2)分离多糖后的预提液通过大孔吸附柱进行吸附，洗脱后分别得到黄酮液和皂苷液，即实现对黄酮和皂苷的分别提取。
8.作为优选，步骤1)所述黄精提取液取脱脂黄精粉末按照1：15～25的比例与水混合，依次进行水浴提取、浓缩后收集上层水相液，即黄精提取液。
9.作为优选，步骤2)所述预提液经过大孔吸附柱吸附至大孔吸附柱吸附饱和后，依次进行黄酮和皂苷的洗脱。
10.作为优选，所述黄酮洗脱时采用低醇洗脱液；所述低醇洗脱液为醇水溶液和/或水；所述醇水溶液中醇含量≤30％vol。
11.作为优选，所述黄酮洗脱终点为，洗脱液中黄酮含量≤2wt％。
12.作为优选，所述皂苷洗脱时采用高浓度醇溶液；所述高浓度醇溶液为醇的水溶液，其中醇含量≥50wt％。
13.作为优选，所述洗脱终点为，洗脱液中皂苷含量≤2wt％。
14.作为优选，所述预提液先与水混合稀释得到稀释液，随后将稀释液定量通过大孔吸附柱进行吸附，回收稀释液流出液，即得到黄酮溶液，随后再以醇含量≥50wt％的有机醇水溶液进行洗脱，回收洗脱液即得到皂苷溶液。
15.作为优选，所述预提液与其至少19倍体积的水混合得到稀释液；所述稀释液由大孔吸附柱进行吸附时，控制单次所用稀释液体积与大孔吸附柱内吸附填料的填充体积比值为(2～5)：1。
16.作为优选，所述大孔吸附柱中的填料为ab-8大孔吸附树脂。
17.对于本发明技术方案而言，主要提供了两种多组分的同步提取分离方式。
18.其中一种为醇沉-双层析二步法，在该方式中，首先由经过预处理的黄精粉作为原料配制为黄精提取液，其中主要成分为多糖、黄酮和皂苷，此类方法对于黄精粉的要求相对较低，能够简单地以市售的、未除杂的粗黄精渣料磨粉作为原料配制，将黄精粉中的有效成分均溶于溶液体系中，由于黄精多糖于醇中具有不溶性，因而能够非常高效、彻底地分离出高纯的多糖。而后，通过大孔吸附柱的配合，将目标成分吸附在大孔吸附柱上，后针对性地采用不同的洗脱液对目标成分分别进行洗脱。在试验过程中附带进行饱和单柱单次洗脱试验，发现如图1所示的，在低醇浓度下对于黄酮的洗脱转移具有针对性，能够实现针对黄酮进行洗脱；而在黄酮洗脱后，则能够进一步针对皂苷进行针对性的洗脱，实现两者的有效分离以及杂质成分的去除，相较于多次正反萃取，效率明显提升。
19.而第二种方式则为醇沉-单层析高效二步法，在该方式中，也同样能够利用黄精渣料作为原料进行制备，但需要对其进行脱蛋白脱脂处理，以去除杂质；随后将黄精粉中的有效成分均溶于溶液体系中，由于黄精多糖于醇中具有不溶性，因而能够非常高效、彻底地分离出高纯的多糖。而后，通过大孔吸附柱的配合，能够在通过大孔吸附树脂时直接分离黄酮和皂苷。因为本技术的发明研究人员在先前的试验过程中发现，在实际的吸附过程中，通过控制待吸附液的物质浓度，能够产生完全不同的吸附效果，从而实现单次吸附层析分离两者。在该过程中，将洗脱液快速通过大孔吸附柱(层析柱)，使其保持不饱和吸附状态，而洗脱液中的皂苷被吸附在层析柱上，黄酮却顺流而下，几乎不被吸附，实现直效分离，能够非常高效地提高工业化实施效率。相较于第一种方式而言，其对于黄酮和皂苷的分离更加彻底有效。
20.而对于上述两种方法而言，本发明技术方案所选用的层析柱中大孔吸附树脂类型将对结果产生较大的影响，如常见的大孔吸附树脂牌号有ab-8、d101、d201和d301等，一般情况下均可同等替换，但对于本发明技术方案而言，大孔吸附树脂略微的吸附性能改变可
能都会被较为明显的放大，产生较为显著的区别。
21.本发明的有益效果是：本发明提供了高效分离黄精提取物中多糖、黄酮和皂苷的方法，其能够非常显著且高效地实现对此三种成分的有效分离和纯化，得到高纯的产物，并且整体方法简洁高效、易于工业化实施。
附图说明
22.图1为醇-水浓度比对于黄酮和皂苷的饱和单柱-单次洗脱转移率试验结果图。
具体实施方式
23.以下结合具体实施例和说明书附图对本发明作出进一步清楚详细的描述说明。本领域普通技术人员在基于这些说明的情况下将能够实现本发明。此外，下述说明中涉及到的本发明的实施例通常仅是本发明一部分的实施例，而不是全部的实施例。因此，基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例，都应当属于本发明保护的范围。
24.如无特殊说明，本发明实施例所用原料均为市售或本领域技术人员可获得的原料；如无特殊说明，本发明实施例所用方法均为本领域技术人员所掌握的方法。
25.如无特殊说明，本发明实施例所用的黄精粗粉由以下工艺进行制备：将黄精废渣置于45℃烘干至恒重，然后经粉碎机粉碎，过60目筛，称取粉碎后的样本按照1g∶8ml的料液比加入无水乙醇，浸泡48h，抽滤，干燥，得脱脂后的样品，即黄精粗粉，即脱脂黄精粉末。
26.如无特殊说明，本发明实施例所用的黄精精粉由以下工艺进行制备：取黄精粗粉按照1g∶20ml的料液比加入去离子水，75℃条件下水浴2.5h后，离心取上清液，浓缩至原体积的35％后以sevage法脱除蛋白，随后冷冻干燥得到黄精精粉。
27.实施例1一种黄精多组分同步提取法，所述方法具体包括：1)将黄精粗粉与去离子水以1g∶20ml的料液比混合后，于75℃水浴条件下进行恒温浸提2.5h，随后浓缩至原体积的30％，收集水相溶液作为黄精提取液；2)取黄精提取液与无水乙醇以体积比1∶4的体积比混合，4℃条件下醇沉过夜后，离心回收沉淀的多糖样品，取上清得到预提液；3)通过层析柱对预提液进行吸附处理，所用层析柱为ab-8大孔吸附树脂柱，至层析柱吸附至饱和后，或待吸附液中无法检出黄酮或皂苷，再分别进行洗脱：3-1)先以10％vol乙醇水溶液洗脱层析柱，对洗脱液进行快速表征，待吸附液中黄酮含量≤2wt％后达到洗脱终点，合并洗脱液浓缩并冷冻干燥得到黄酮样品；3-2)再以50％vol乙醇水溶液洗脱层析柱，对洗脱液进行快速表征，至洗脱液中皂苷含量≤2wt％后达到洗脱终点，合并洗脱液浓缩并冷冻干燥后得到皂苷样品。
28.分别表征、计算本例的多糖回收率、黄酮回收率、皂苷回收率、样品(ele)纯度、黄酮转移率和皂苷转移率，其中样品(ele)纯度通过xrd表征。
29.其中：
回收率计算方式如下：式中：rec
ele
表示相应样品(ele)的回收率，无量纲，m
ele
表示相应样品(ele)的全部回收量(质量)，单位为g，c
ele
表示相应样品(ele)的纯度，无量纲，q
ele
表示黄精粗粉中相应样品(ele)的含量(质量)，单位为g，角标ele表示样品，为多糖或黄酮或皂苷。
30.转移率计算方式如下：tr
ele
表示相应样品(ele)的转移率，无量纲，m
ele
′
表示相应样品(ele)的单柱回收量(质量)，计单柱多次回收总量，单位为g，c
ele
表示相应样品(ele)的纯度，无量纲，q
ele
′
表示洗脱前饱和层析柱中相应样品(ele)的含量(质量)，单位为g，角标ele表示样品，为多糖或黄酮或皂苷。
31.经计算，本例的各样品回收率、纯度和转移率如下表所示。 多糖黄酮皂苷回收率98.6％91.2％93.2％纯度99.3％98.1％99.6％转移率/98.6％99.3％
32.可见，本发明能够高效实现对黄精中多糖、黄酮和皂苷的分离和提取，回收率均能够达到90％以上，并且纯度基本均能够达到98％以上，黄酮中主要杂质成分为皂苷。
33.实施例2一种黄精多组分同步提取法，所述方法具体包括：1)将黄精粗粉与去离子水以1g∶20ml的料液比混合后，于75℃水浴条件下进行恒温浸提2.5h，随后浓缩至原体积的30％，收集水相溶液作为黄精提取液；2)取黄精提取液与无水乙醇以体积比1∶4的体积比混合，4℃条件下醇沉过夜后，离心回收沉淀的多糖样品，取上清得到预提液；3)通过层析柱对预提液进行吸附处理，所用层析柱为ab-8大孔吸附树脂柱，至层析柱吸附至饱和后，或待吸附液中无法检出黄酮或皂苷，再分别进行洗脱：3-1)先以30％vol乙醇水溶液洗脱层析柱，对洗脱液进行快速表征，待吸附液中黄酮含量≤2wt％后达到洗脱终点，合并洗脱液浓缩并冷冻干燥得到黄酮样品；3-2)再以80％vol乙醇水溶液洗脱层析柱，对洗脱液进行快速表征，至洗脱液中皂苷含量≤2wt％后达到洗脱终点，合并洗脱液浓缩并冷冻干燥后得到皂苷样品。
34.分别表征、计算本例的多糖回收率、黄酮回收率、皂苷回收率、样品(ele)纯度、黄酮转移率和皂苷转移率，其中样品(ele)纯度通过xrd表征。
35.其中：回收率计算方式如下：式中：rec
ele
表示相应样品(ele)的回收率，无量纲，m
ele
表示相应样品(ele)的全部
回收量(质量)，单位为g，c
ele
表示相应样品(ele)的纯度，无量纲，q
ele
表示黄精粗粉中相应样品(ele)的含量(质量)，单位为g，角标ele表示样品，为多糖或黄酮或皂苷。
36.转移率计算方式如下：tr
ele
表示相应样品(ele)的转移率，无量纲，m
ele
′
表示相应样品(ele)的单柱回收量(质量)，计单柱多次回收总量，单位为g，c
ele
表示相应样品(ele)的纯度，无量纲，q
ele
′
表示洗脱前饱和层析柱中相应样品(ele)的含量(质量)，单位为g，角标ele表示样品，为多糖或黄酮或皂苷。
37.经计算，本例的各样品回收率、纯度和转移率如下表所示。 多糖黄酮皂苷回收率98.8％92.5％92.9％纯度99.5％97.3％99.8％转移率/99.7％98.1％
38.可见，本发明能够高效实现对黄精中多糖、黄酮和皂苷的分离和提取，回收率均能够达到90％以上，并且与实施例1相比，提高两次洗脱所用的醇浓度，均一定程度提高了黄酮和皂苷的实际洗脱转移率，但在上述表格计算过程中，由于黄酮中的皂苷部分无法列入计算，因而计算所得的转移率下降，但整体转移效果仍较为出色。
39.实施例3一种黄精多组分同步提取法，所述方法具体包括：1)将黄精粗粉与去离子水以1g∶20ml的料液比混合后，于75℃水浴条件下进行恒温浸提2.5h，随后浓缩至原体积的30％，收集水相溶液作为黄精提取液；2)取黄精提取液与无水乙醇以体积比1∶4的体积比混合，4℃条件下醇沉过夜后，离心回收沉淀的多糖样品，取上清得到预提液；3)通过层析柱对预提液进行吸附处理，所用层析柱为ab-8大孔吸附树脂柱，至层析柱吸附至饱和后，或待吸附液中无法检出黄酮或皂苷，再分别进行洗脱：3-1)先以30％vol乙醇水溶液洗脱层析柱，对洗脱液进行快速表征，待吸附液中黄酮含量≤2wt％后达到洗脱终点，合并洗脱液浓缩并冷冻干燥得到黄酮样品；3-2)再以95％vol乙醇水溶液洗脱层析柱，对洗脱液进行快速表征，至洗脱液中皂苷含量≤2wt％后达到洗脱终点，合并洗脱液浓缩并冷冻干燥后得到皂苷样品。
40.分别表征、计算本例的多糖回收率、黄酮回收率、皂苷回收率、样品(ele)纯度、黄酮转移率和皂苷转移率，其中样品(ele)纯度通过xrd表征。
41.其中：回收率计算方式如下：式中：rec
ele
表示相应样品(ele)的回收率，无量纲，m
ele
表示相应样品(ele)的全部回收量(质量)，单位为g，c
ele
表示相应样品(ele)的纯度，无量纲，q
ele
表示黄精粗粉中相应样品(ele)的含量(质量)，单位为g，角标ele表示样品，为多糖或黄酮或皂苷。
42.转移率计算方式如下：tr
ele
表示相应样品(ele)的转移率，无量纲，m
ele
′
表示相应样品(ele)的单柱回收量(质量)，计单柱多次回收总量，单位为g，c
ele
表示相应样品(ele)的纯度，无量纲，q
ele
′
表示洗脱前饱和层析柱中相应样品(ele)的含量(质量)，单位为g，角标ele表示样品，为多糖或黄酮或皂苷。
43.经计算，本例的各样品回收率、纯度和转移率如下表所示。 多糖黄酮皂苷回收率98.3％92.6％93.1％纯度99.7％97.1％99.1％转移率/99.5％99.0％
44.可见，本发明能够高效实现对黄精中多糖、黄酮和皂苷的分离和提取，回收率均能够达到90％以上，而在洗脱皂苷的过程中，采用浓度更高的乙醇水溶液，可见回收和转移效果均表现十分优异，但产物纯度反而产生一定的下降，表明部分残留的黄酮将随着高浓度的乙醇水溶液被洗脱，导致产物的纯度受到一定的不利影响。
45.对比例1一种黄精多组分同步提取法，所述方法具体包括：1)将黄精粗粉与去离子水以1g∶20ml的料液比混合后，于75℃水浴条件下进行恒温浸提2.5h，随后浓缩至原体积的30％，收集水相溶液作为黄精提取液；2)取黄精提取液与无水乙醇以体积比1∶4的体积比混合，4℃条件下醇沉过夜后，离心回收沉淀的多糖样品，取上清得到预提液；3)通过层析柱对预提液进行吸附处理，所用层析柱为d101大孔吸附树脂柱，至层析柱吸附至饱和后，或待吸附液中无法检出黄酮或皂苷，再分别进行洗脱：3-1)先以10％vol乙醇水溶液洗脱层析柱，对洗脱液进行快速表征，待吸附液中黄酮含量≤2wt％后达到洗脱终点，合并洗脱液浓缩并冷冻干燥得到黄酮样品；3-2)再以50％vol乙醇水溶液洗脱层析柱，对洗脱液进行快速表征，至洗脱液中皂苷含量≤2wt％后达到洗脱终点，合并洗脱液浓缩并冷冻干燥后得到皂苷样品。
46.分别表征、计算本例的多糖回收率、黄酮回收率、皂苷回收率、样品(ele)纯度、黄酮转移率和皂苷转移率，其中样品(ele)纯度通过xrd表征。
47.其中：回收率计算方式如下：式中：rec
ele
表示相应样品(ele)的回收率，无量纲，m
ele
表示相应样品(ele)的全部回收量(质量)，单位为g，c
ele
表示相应样品(ele)的纯度，无量纲，q
ele
表示黄精粗粉中相应样品(ele)的含量(质量)，单位为g，角标ele表示样品，为多糖或黄酮或皂苷。
48.转移率计算方式如下：
tr
ele
表示相应样品(ele)的转移率，无量纲，m
ele
′
表示相应样品(ele)的单柱回收量(质量)，计单柱多次回收总量，单位为g，c
ele
表示相应样品(ele)的纯度，无量纲，q
ele
′
表示洗脱前饱和层析柱中相应样品(ele)的含量(质量)，单位为g，角标ele表示样品，为多糖或黄酮或皂苷。
49.经计算，本例的各样品回收率、纯度和转移率如下表所示。 多糖黄酮皂苷回收率98.6％86.3％95.2％纯度99.3％96.3％99.9％转移率/95.2％96.9％
50.可见，本发明能够高效实现对黄精中多糖、黄酮和皂苷的分离和提取，回收率均能够达到90％以上，并且纯度基本均能够达到98％以上，黄酮中主要杂质成分为皂苷。
51.与实施例1相比，本例仅调整了所用吸附柱种类，将ab-8大孔吸附住替换为d101吸附柱，但结果表明黄酮的回收率和纯度产生大幅度的下降，而皂苷的回收率、纯度均有所上升，这主要是由于不同的吸附柱对于两种成分结合强度不同或受溶液体系等因素影响，导致黄酮洗脱时也容易带下皂苷。可见对于本发明技术方案而言，大孔吸附树脂的种类并不应当随意进行调整，至少进行同等试验内，ab-8大孔吸附树脂的层析柱相较于d101、d201和d301均有着显著不同的优势，而不如常规的层析法中层析柱的影响较小。
52.实施例4一种黄精多组分同步提取法，所述方法具体包括：1)将黄精粗粉与去离子水以1g∶20ml的料液比混合后，于75℃水浴条件下进行恒温浸提2.5h，随后浓缩至原体积的30％，以sevage法除去蛋白质杂质后，收集水相溶液作为黄精提取液；2)取黄精提取液与无水乙醇以体积比1∶4的体积比混合，4℃条件下醇沉过夜后，离心回收沉淀的多糖样品，取上清得到预提液；3)预提液与去离子水以体积比1∶19的比例混合稀释后得到稀释液，通过层析柱对稀释液进行吸附，控制单次吸附所用稀释液体积与层析柱内吸附填料的填充体积比值为5∶1，所用层析柱为ab-8大孔吸附树脂柱，稀释液通过层析柱后直接回收稀释液流出液，合并稀释液流出液浓缩并冷冻干燥得到黄酮样品，再以50％vol乙醇水溶液洗脱层析柱，单次洗脱过程所用洗脱液与层析柱内吸附填料的填充体积比值为5∶1，合并洗脱液浓缩并冷冻干燥后得到皂苷样品。
53.分别表征、计算本例的多糖回收率、黄酮回收率、皂苷回收率、样品(ele)纯度、黄酮转移率和皂苷转移率，其中样品(ele)纯度通过xrd表征。
54.其中：回收率计算方式如下：式中：rec
ele
表示相应样品(ele)的回收率，无量纲，m
ele
表示相应样品(ele)的全部
回收量(质量)，单位为g，c
ele
表示相应样品(ele)的纯度，无量纲，q
ele
表示黄精粗粉中相应样品(ele)的含量(质量)，单位为g，角标ele表示样品，为多糖或黄酮或皂苷。
55.转移率计算方式如下：tr
ele
表示相应样品(ele)的转移率，无量纲，m
ele
′
表示相应样品(ele)的单柱回收量(质量)，计单柱多次回收总量，单位为g，c
ele
表示相应样品(ele)的纯度，无量纲，q
ele
′
表示洗脱前饱和层析柱中相应样品(ele)的含量(质量)，单位为g，角标ele表示样品，为多糖或黄酮或皂苷。
56.经计算，本例的各样品回收率、纯度和转移率如下表所示。 多糖黄酮皂苷回收率98.5％98.7％93.6％纯度99.7％99.6％99.7％转移率//99.5％
57.本实施例与实施例1相比，可以非常明显地看出，本发明改变了层析的方式，采用直流直接回收黄酮，反而使得黄酮的回收率和纯度得到非常显著的提升，这是因为减少了层析柱层析过程中部分余液的损失，同时使得三类产物的纯度均能够直接达到99.5％以上，实现了高纯度产品的获取，整体工艺也更加高效。此外，皂苷的回收率和纯度等均得到了非常有效的保留。
58.实施例5一种黄精多组分同步提取法，所述方法具体包括：1)将黄精粗粉与去离子水以1g∶20ml的料液比混合后，于75℃水浴条件下进行恒温浸提2.5h，随后浓缩至原体积的30％，以sevage法除去蛋白质杂质后，收集水相溶液作为黄精提取液；2)取黄精提取液与无水乙醇以体积比1∶4的体积比混合，4℃条件下醇沉过夜后，离心回收沉淀的多糖样品，取上清得到预提液；3)预提液与去离子水以体积比1∶19的比例混合稀释后得到稀释液，通过层析柱对稀释液进行吸附，控制单次吸附所用稀释液体积与层析柱内吸附填料的填充体积比值为5∶1，所用层析柱为ab-8大孔吸附树脂柱，稀释液通过层析柱后直接回收稀释液流出液，合并稀释液流出液浓缩并冷冻干燥得到黄酮样品，再以90％vol乙醇水溶液洗脱层析柱，单次洗脱过程所用洗脱液与层析柱内吸附填料的填充体积比值为5∶1，合并洗脱液浓缩并冷冻干燥后得到皂苷样品。
59.分别表征、计算本例的多糖回收率、黄酮回收率、皂苷回收率、样品(ele)纯度、黄酮转移率和皂苷转移率，其中样品(ele)纯度通过xrd表征。
60.其中：回收率计算方式如下：式中：rec
ele
表示相应样品(ele)的回收率，无量纲，m
ele
表示相应样品(ele)的全部
回收量(质量)，单位为g，c
ele
表示相应样品(ele)的纯度，无量纲，q
ele
表示黄精粗粉中相应样品(ele)的含量(质量)，单位为g，角标ele表示样品，为多糖或黄酮或皂苷。
61.转移率计算方式如下：tr
ele
表示相应样品(ele)的转移率，无量纲，m
ele
′
表示相应样品(ele)的单柱回收量(质量)，计单柱多次回收总量，单位为g，c
ele
表示相应样品(ele)的纯度，无量纲，q
ele
′
表示洗脱前饱和层析柱中相应样品(ele)的含量(质量)，单位为g，角标ele表示样品，为多糖或黄酮或皂苷。
62.经计算，本例的各样品回收率、纯度和转移率如下表所示。 多糖黄酮皂苷回收率98.2％99.0％95.0％纯度99.8％99.5％99.8％转移率//99.8％
63.本实施例与实施例4相比，相较于实施例3与实施例1的对比，可以非常明显地看出，在改变了层析方式、弱化了黄酮吸附截留对于高浓度洗脱皂苷的影响后，采用更高浓度的乙醇对皂苷进行洗脱，并不会再发生纯度下降的影响，而会大幅度提升转移率和回收率，能够实现更好、更有效的洗脱回收效果。
64.对此，针对实施例4和实施例5进行横向试验研究，其中主要集中在预提液的稀释倍数以及单次所用稀释液体积与大孔吸附树脂柱内吸附填料的体积比。
65.在预提液的稀释倍数方面，低倍数稀释并不能避免黄酮在层析柱上的吸附。而于本发明实施例4和实施例5而言，主要的核心点即使得层析柱产生“选择性”吸附，而该选择性是通过稀释产生的，本身层析柱并不具备选择性。但在前置试验中获得如图1所示的单次洗脱试验结果后，发明人发现低浓度的乙醇水溶液甚至于纯水都能够对黄酮进行一定程度的洗脱，而对于皂苷则几乎无法进行洗脱，进而实际出现了发展出“选择性洗脱”的前景。
66.于洗脱过程中，设计如下试验，以若干组不同浓度的黄酮醇水溶液(对黄酮含量和醇含量进行双因素调整)对饱和挂载的层析柱进行洗脱试验，试验结果证明，在黄酮含量和乙醇含量均较低的情况下，能够极大程度地抑制层析柱对于黄酮的吸附结合，同时本身能够对黄酮进行有效洗脱，进而实现了层析方式的巨大转变，直接以待吸附液作为洗脱液，进行皂苷吸附挂载的同时对黄酮进行洗脱，能够极大地提高分离提取效率，并且提高产物得率、纯度，对于工业化生产而言具有巨大的使用前景和经济价值，仅需更加充分地进行前处理，以减少蛋白等杂质干扰即可。

技术特征：
1.一种黄精多组分同步提取法，其特征在于，所述方法包括：1)取黄精提取液，进行醇沉分离得到多糖，实现对多糖的提取后得到预提液；2)分离多糖后的预提液通过大孔吸附柱进行吸附，洗脱后分别得到黄酮液和皂苷液，即实现对黄酮和皂苷的分别提取。2.根据权利要求1所述的一种黄精多组分同步提取法，其特征在于，步骤1)所述黄精提取液取脱脂黄精粉末按照1：15～25的比例与水混合，依次进行水浴提取、浓缩后收集上层水相液，即黄精提取液。3.根据权利要求1所述的一种黄精多组分同步提取法，其特征在于，步骤2)所述预提液经过大孔吸附柱吸附至大孔吸附柱吸附饱和后，依次进行黄酮和皂苷的洗脱。4.根据权利要求3所述的一种黄精多组分同步提取法，其特征在于，所述黄酮洗脱时采用低醇洗脱液；所述低醇洗脱液为醇水溶液和/或水；所述醇水溶液中醇含量≤30％vol。5.根据权利要求4所述的一种黄精多组分同步提取法，其特征在于，所述黄酮洗脱终点为，洗脱液中黄酮含量≤于2wt％。6.根据权利要求3所述的一种黄精多组分同步提取法，其特征在于，所述皂苷洗脱时采用高浓度醇溶液；所述高浓度醇溶液为醇的水溶液，其中醇含量≥50wt％。7.根据权利要求6所述的一种黄精多组分同步提取法，其特征在于，所述洗脱终点为，洗脱液中皂苷含量≤2wt％。8.根据权利要求3所述的一种黄精多组分同步提取法，其特征在于，所述预提液先与水混合稀释得到稀释液，随后将稀释液定量通过大孔吸附柱进行吸附，回收稀释液流出液，即得到黄酮溶液，随后再以醇含量≥50wt％的有机醇水溶液进行洗脱，回收洗脱液即得到皂苷溶液。9.根据权利要求8所述的一种黄精多组分同步提取法，其特征在于，所述预提液与其至少19倍体积的水混合得到稀释液；所述稀释液由大孔吸附柱进行吸附时，控制单次所用稀释液体积与大孔吸附柱内吸附填料的填充体积比值为(2～5)：1。10.根据权利要求1至9任一所述的一种黄精多组分同步提取法，其特征在于，所述大孔吸附柱中的填料为ab-8大孔吸附树脂。

技术总结
本发明属于化工提取领域，尤其涉及一种黄精多组分同步提取法。所述方法包括：1)取黄精提取液，进行醇沉分离得到多糖，实现对多糖的提取后得到预提液；2)分离多糖后的预提液通过大孔吸附柱进行吸附，洗脱后分别得到黄酮液和皂苷液，即实现对黄酮和皂苷的分别提取。本发明提供了高效分离黄精提取物中多糖、黄酮和皂苷的方法，其能够非常显著且高效地实现对此三种成分的有效分离和纯化，得到高纯的产物，并且整体方法简洁高效、易于工业化实施。易于工业化实施。易于工业化实施。


技术研发人员：贾巧君 蒋宇杰 汪得凯 梁宗锁
受保护的技术使用者：浙江理工大学
技术研发日：2023.03.10
技术公布日：2023/7/12