百香果megastigmane糖苷化合物及其制备方法和应用

1.本发明属于植物成分的提取、分离纯化技术领域，具体涉及百香果megastigmane糖苷化合物及其制备方法和应用。


背景技术：

2.目前市场上的抗焦虑、镇静催眠产品主要含有褪黑素的保健品，或者苯二氮卓类药物，如奥沙西泮、劳拉西泮、阿普唑仑等，这些产品或者药物对人体产生依赖性或毒副作用。而γ-氨基丁酸(γ-gaba)是人体中枢神经系统重要的抑制性传递物质，是脑组织中最重要的神经递质之一，具有抗焦虑、镇静催眠等生理活性，而且γ-gaba代谢受到γ-氨基丁酸转氨酶(γ-gaba-t)调控，因此，可通过抑制γ-gaba-t的活性，降低γ-gaba代谢水平，提升γ-gaba在机体内水平，发挥抗焦虑、镇静催眠的生理功能。
3.分子对接计算机辅助药物设计技术是通过化学计量学等学科技术，模拟分子几何结构与分子间作用力进行识别与预测配体与受体复合结构，其本质是两个或多个分子间的相互识别，是近年来比较成熟的直接药物设计方法。分子对接技术不仅可以研究配体(药物分子)与受体(已知的靶点蛋白或活性位点)间详细的相互作用，而且还可以发现并优化药物先导化合物分子结构，是现代创新药物研究中基于结构的药物设计的一种重要方法。
4.目前，已有多个化合物应用计算机辅助药物设计并最终成功上市，如roche公司基于hiv蛋白水解酶研制的hiv蛋白抑制剂药物saquinavir；biota公司基于神经氨酸苷酶研究的抗流感药物relenza；novartis公司基于abl-酪氨酸激酶研制的抗慢性粒细胞白血病药物gleevec；merck sharp&dohme公司基于碳酸酐酶研制的治疗青光眼药物dorzolamid等。因此，通过分子对接计算机辅助药物设计技术可以实现快速发现具有调节γ-gaba功能的天然产物。
5.megastigmane糖苷类化合物，是一类比较特殊的天然产物，是由c13降倍半萜苷元与糖相连形成的一类天然产物。该类化合物不仅具有抗焦虑、镇静助眠等广泛生理活性，而且是香味的前体成分，受热分解释放出紫罗兰醇、紫罗兰酮和巨豆三烯等大量香味成分。而且研究表明，植物芳香成分对改善各种焦虑、睡眠障碍也具有较好疗效，《本草纲目》中记载了35种香木，56种芳草以及各种芳香疗法。所以megastigmane糖苷类化合物通过热分解产生的香气具有抗焦虑、镇静催眠作用，因此，此类成分在香熏产品或香烟制品中也具有广阔的应用前景。
6.百香果含有许多有益于人体健康的植物次生代谢产物，普遍用于治疗焦虑、失眠、癫痫、神经紧张等症状，这类用途类似于镇静催眠药物，其根、藤、花、果可入药，对神经痛、失眠症、风热头昏等疾病有较好疗效。但目前百香果在治疗焦虑、失眠的物质基础仍然不明，因此，从百香果中挖掘具有抗焦虑、镇静催眠的天然产物并加以开发利用，是百香果高值化利用亟需解决技术。


技术实现要素：

7.为解决现有技术的不足，本发明提供了一种百香果megastigmane糖苷化合物及其制备方法和应用。本发明所提供的megastigmane糖苷化合物来源于特色水果百香果果汁，均为新结构化合物。
8.本发明解决上述技术问题的技术方案如下：
9.一种百香果megastigmane糖苷化合物，其具体结构式为以下结构中的任一种：
[0010][0011]
本发明的百香果megastigmane糖苷化合物的有益效果是：
[0012]
本发明的百香果megastigmane糖苷化合物，来源于百香果果汁，属于天然的植物次生代谢产物，由c13降倍半萜苷元通过氧苷键与葡萄糖、鼠李糖相连形成的二糖苷化合物，是一类新结构化合物。
[0013]
本发明的目的之二，是提供上述百香果megastigmane糖苷化合物的制备方法。本发明解决上述技术问题的技术方案如下：一种百香果megastigmane糖苷化合物的制备方法，包括如下步骤：
[0014]
步骤1：将去除果籽和果渣的百香果果浆经过高速连续流离心机进行固液分离，得
到百香果澄清果汁。
[0015]
步骤2：将步骤1得到的所述的百香果澄清果汁先经过截留分子量为100kd～200kd的陶瓷膜分离，将得到的透过液再经过2kd～4kd的超滤膜分离，收集透过液，得到百香果果汁超滤液。
[0016]
步骤3：将步骤2得到的所述的百香果果汁超滤液，经过非极性或弱极性的大孔树脂吸附后，先用4～6倍柱体积的纯水冲洗柱子，再分别用4～6倍柱体积的10％低碳醇溶液和20％～70％的低碳醇溶液依次进行梯度洗脱，并收集20％～70％低碳醇洗脱液，50℃浓缩、干燥，即得到富含megastigmane糖苷化合物的百香果果汁提取物。
[0017]
步骤4：将步骤3得到的所述的富含megastigmane糖苷化合物的百香果果汁提取物重复多次注入高效液相色谱柱内，分别累加收集保留时间为29.4min、37.0min、42.6min、47.9min和49.9min的色谱峰，分别浓缩、干燥，并分别对应得到化合物1、化合物2、化合物3、化合物4和化合物5。
[0018]
本发明制备百香果megastigmane糖苷化合物的有益效果是：
[0019]
百香果果汁成分复杂且水分含量高，若想从复杂果汁中快速制备目标成分，现在的技术需要经过多次柱色谱分离，需要花费大量的人力、物力和时间才能实现，而且现有的技术中未见联合应用膜分离与柱色谱分离技术制备百香果megastigmane糖苷化合物的报导。因此，本发明首先采用膜分离和大孔树脂分离技术不仅能够有效解决果汁含水量大的问题，而且能够对目标成分megastigmane糖苷化合物进行快速大量富集，然后通过高柱效、高灵敏度的制备液相色谱分离技术，高效制备高纯度的megastigmane糖苷化合物单体。
[0020]
与现有分离技术相比，采用本发明方法，能够实现快速富集megastigmane糖苷化合物，而且能够精准制备目标成分，有效减少分离过程，实现同步制备多个单体化合物，为百香果megastigmane糖苷化合物的快速制备提供一种便捷的途径。
[0021]
在上述技术方案的基础上，本发明还可以做如下改进。
[0022]
进一步，步骤1中，所述的高速连续流离心转速为8000r/min～20000r/min。
[0023]
采用上述进一步的有益效果是：高速离心力能够有效去除果汁中的各种微小植物纤维、悬浮颗粒等固体杂质，以获得澄清果汁，而且连续流离心分离更加高效。
[0024]
进一步，步骤3中，所述非极性大孔树脂为d101、hpd-100、x-5、xnd-11、h103、ads-17、hp-20、d3520中任一种；弱极性大孔树脂为ab-8、d201、hpd-300、ds-401、dm-130中任一种。
[0025]
采用上述进一步的有益效果是：上述特定型号的非极性、弱极性大孔树脂能够有效地吸附百香果果汁中的上述megastigmane糖苷化合物。
[0026]
进一步，步骤3中，所述的低碳醇为甲醇、乙醇中任一种。
[0027]
采用上述进一步的有益效果是：甲醇、乙醇对吸附了megastigmane糖苷化合物的非极性、弱极性大孔树脂具有较好的洗脱能力。
[0028]
进一步，步骤3中，浓缩步骤必须在50℃下进行的原因在于，避免长时间高温浓缩造成目标化合物结构改变。
[0029]
进一步，步骤4中，所述高效液相色谱制备参数为：10mm
×
250mm的shim-pack gis c18色谱柱，填料的粒度为10μm，柱温为30℃，流动相为乙腈和水，洗脱模式为梯度洗脱：0min，乙腈与水的体积比为19:81；55min，乙腈与水的体积比为19:81；60min，乙腈与水的体
积比为40:60。
[0030]
采用上述进一步的有效益果是：在该色谱条件下，可同时制备得到5个megastigmane糖苷单体化合物。
[0031]
本发明的目的之三，是提供一种百香果megastigmane糖苷化合物在制备抗焦虑、镇静催眠或增香产品中的应用。
[0032]
进一步的，本发明提供了上述megastigmane糖苷化合物在制备药品、功能食品或香烟制品中的应用。
[0033]
本发明开展了百香果megastigmane糖苷化合物与γ-氨基丁酸转氨酶(pdb：10hw)的分子对接计算机辅助药物设计研究，结果证明，本发明制备得到的megastigmane糖苷化合物均显示出对γ-氨基丁酸转氨酶强烈的结合活性，其中化合物1和化合物2与γ-氨基丁酸转氨酶的结合能与抗焦虑、镇静催眠药物奥沙西泮相当。表明本发明得到的megastigmane糖苷化合物在抗焦虑、镇静催眠产品方面具有广泛的应用前景。
[0034]
本发明开展了百香果megastigmane糖苷化合物热裂解－气相色谱/质谱的研究表明，megastigmane糖苷化合物受热降解，释放出紫罗兰醇、紫罗兰酮和巨豆三烯等大量香味成分，具有增香作用，能够应用于香烟等制品中，改善产品的香味和品质。
附图说明
[0035]
图1为本发明实施例1的化合物1的hr-esi-ms谱。
[0036]
图2为本发明实施例1的化合物1的1h-nmr谱。
[0037]
图3为本发明实施例1的化合物1的13c-nmr谱。
[0038]
图4为本发明实施例1的化合物2的hr-esi-ms谱。
[0039]
图5为本发明实施例1的化合物2的1h-nmr谱。
[0040]
图6为本发明实施例1的化合物2的13c-nmr谱。
[0041]
图7为本发明实施例1的化合物3的hr-esi-ms谱。
[0042]
图8为本发明实施例1的化合物3的1h-nmr谱。
[0043]
图9为本发明实施例1的化合物3的13c-nmr谱。
[0044]
图10为本发明实施例1的化合物4的hr-esi-ms谱。
[0045]
图11为本发明实施例1的化合物4的1h-nmr谱。
[0046]
图12为本发明实施例1的化合物4的13c-nmr谱。
[0047]
图13为本发明实施例1的化合物5的hr-esi-ms谱。
[0048]
图14为本发明实施例1的化合物5的1h-nmr谱。
[0049]
图15为本发明实施例1的化合物5的13c-nmr谱。
[0050]
图16化合物1与γ-氨基丁酸转氨酶分子对接图。
[0051]
图17化合物2与γ-氨基丁酸转氨酶分子对接图。
[0052]
图18化合物3与γ-氨基丁酸转氨酶分子对接图。
[0053]
图19化合物4与γ-氨基丁酸转氨酶分子对接图。
[0054]
图20化合物5与γ-氨基丁酸转氨酶分子对接图。
具体实施方式
[0055]
以下对本发明的原理和特征进行描述，所举实施例只用于解释本发明，并非用于限定本发明的范围。
[0056]
实施例1
[0057]
步骤1：取40kg去除果籽和果渣的百香果果浆，经过转速为15000r/min的连续流高速离心机，得到百香果澄清果汁。
[0058]
步骤2：将步骤1得到的所述的百香果澄清果汁先经过截留分子量为150kd的陶瓷膜分离，透过液再经过截留分子量为3kd的超滤膜分离，收集膜透过液，即得到百香果果汁超滤液。
[0059]
步骤3：将步骤2得到的所述的百香果果汁超滤液注入d101大孔树脂柱中进行吸附，吸附结束后，先用5倍柱体积的纯水冲洗柱子，再分别用5倍柱体积的10％乙醇和50％乙醇进行梯度洗脱，收集50％乙醇洗脱液，50℃浓缩、干燥，即得到富含megastigmane糖苷化合物的百香果果汁提取物。。
[0060]
步骤4：将步骤3所述的富含megastigmane糖苷化合物的百香果果汁提取物重复多次注入高效液相色谱柱内进行制备。高效液相色谱的制备参数为：10mm
×
250mm的shim-pack gis c18色谱柱，填料的粒度为10μm，柱温为30℃，流动相为体积比的乙腈和水，洗脱模式为梯度洗脱：0min，乙腈与水的体积比为19:81；55min，乙腈与水的体积比为19:81；60min，乙腈与水的体积比为40:60，分别累加收集保留时间为29.4min、37.0min、42.6min、47.9min和49.9min的色谱峰，浓缩、干燥，分别得到化合物1、化合物2、化合物3、化合物4和化合物5。经测定，化合物1、化合物2、化合物3、化合物4和化合物5的纯度分别为92.1％、90.3％、93.2％、92.8％、90.7％。
[0061]
结构鉴定：
[0062]
1、化合物1的结构鉴定
[0063]
无定形粉未，m/z为561.2558[m+hcoo]-，分子式为c
25h40o11
，1h-nmr和
13
c-nmr数据如表1所示。
[0064]
表1化合物1的1h-nmr和
13
c-nmr数据(氘代甲醇)
[0065]
[0066][0067]
2、化合物2结构鉴定
[0068]
无定形粉未，m/z为561.2534[m+hcoo]-，分子式为c
25h40o11
，1h-nmr和
13
c-nmr数据如表2所示。
[0069]
表2化合物2的1h-nmr和
13
c-nmr数据(氘代甲醇)
[0070][0071][0072]
3、化合物3结构鉴定
[0073]
无定形粉未，m/z为563.2730[m+hcoo]-，分子式为c
25h42o11
，1h-nmr和
13
c-nmr数据
如表3所示。
[0074]
表3化合物3的1h-nmr和
13
c-nmr数据(氘代甲醇)
[0075][0076][0077]
4、化合物4结构鉴定
[0078]
无定形粉未，m/z为563.2696[m+hcoo]-，分子式为c
25h42o11
，1h-nmr和
13
c-nmr数据如表4所示。
[0079]
表4化合物4的1h-nmr和
13
c-nmr数据(氘代甲醇)
[0080][0081]
[0082][0083]
5、化合物5结构鉴定
[0084]
无定形粉未，m/z为563.2686[m+hcoo]-，分子式为c
25h42o11
，1h-nmr和
13
c-nmr数据如表5所示。
[0085]
表5化合物5的1h-nmr和
13
c-nmr数据(氘代甲醇)
[0086][0087][0088]
实施例2
[0089]
本实施例的百香果megastigmane糖苷化合物制备包括如下步骤：
[0090]
步骤1：取40kg去除果籽和果渣的百香果果浆，经过转速为20000r/min的连续流高速离心机，得到百香果澄清果汁。
[0091]
步骤2：将步骤1得到的所述的百香果澄清果汁先经过截留分子量为200kd的陶瓷
膜分离，透过液再经过截留分子量为4kd的超滤膜分离，收集膜透过液，即得到百香果果汁超滤液。
[0092]
步骤3：将步骤2得到的所述的百香果果汁超滤液注入ab-8大孔树脂柱中进行吸附，吸附结束后，先用4倍柱体积的纯水冲洗柱子，再分别用4倍柱体积的10％甲醇和70％甲醇进行梯度洗脱，收集70％甲醇洗脱液，50℃浓缩、干燥，即得到富含megastigmane糖苷化合物的百香果果汁提取物。
[0093]
步骤4：将步骤3所述的富含megastigmane糖苷化合物的百香果果汁提取物重复多次注入高效液相色谱柱内进行制备。高效液相色谱的制备参数为：10mm
×
250mm的shim-pack gis c18色谱柱，填料的粒度为10μm，柱温为30℃，流动相为体积比的乙腈和水，洗脱模式为梯度洗脱：0min，乙腈与水的体积比为19:81；55min，乙腈与水的体积比为19:81；60min，乙腈与水的体积比为40:60，累加收集保留时间为29.4min、37.0min、42.6min、47.9min和49.9min的色谱峰，分别浓缩、干燥，得到化合物1、化合物2、化合物3、化合物4和化合物5。
[0094]
结构鉴定，同实施例1。
[0095]
实施例3
[0096]
本实施例的百香果megastigmane糖苷化合物制备包括如下步骤：
[0097]
步骤1：取40kg去除果籽和果渣的百香果果浆，经过转速为8000r/min的连续流高速离心机，得到百香果澄清果汁。
[0098]
步骤2：将步骤1得到的所述的百香果澄清果汁先经过截留分子量为100kd的陶瓷膜分离，透过液再经过截留分子量为2kd的超滤膜分离，收集膜透过液，即得到百香果果汁超滤液。
[0099]
步骤3：将步骤2的百香果果汁超滤液注入hp-20大孔树脂柱中进行吸附，吸附结束后，先用6倍柱体积的纯水冲洗柱子，再分别用6倍柱体积的10％乙醇和30％乙醇进行梯度洗脱，收集30％乙醇洗脱液，50℃浓缩、干燥，即得到富含megastigmane糖苷化合物的百香果果汁提取物。
[0100]
步骤4：将步骤3所述的富含megastigmane糖苷化合物的百香果果汁提取物重复多次注入高效液相色谱柱内进行制备。高效液相色谱的制备参数为：10mm
×
250mm的shim-pack gis c18色谱柱，填料的粒度为10μm，柱温为30℃，流动相为体积比的乙腈和水，洗脱模式为梯度洗脱：0min，乙腈与水的体积比为19:81；55min，乙腈与水的体积比为19:81；60min，乙腈与水的体积比为40:60，分别累加收集保留时间为29.4min、37.0min、42.6min、47.9min和49.9min的色谱峰，分别浓缩、干燥，得到化合物1、化合物2、化合物3、化合物4和化合物5。
[0101]
结构鉴定，同实施例1。
[0102]
实施例4
[0103]
(1)百香果megastigmane糖苷化合物与γ-氨基丁酸转氨酶进行分子对接计算机辅助药物设计研究。
[0104]
对接的配体化合物为本发明所述的化合物1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5。对接蛋白为γ-氨基丁酸转氨酶(gaba-t，pdb：10hw)。利用autodock vina软件，对分子对接所需的配体和蛋白质进行优化，包括目标蛋白的晶体结构去除或加氢、修饰氨基酸、优化
能量和调整力场等参数。最后将优化后的靶点结构与配体结构通过pyrx软件进行分子对接，其结合能(kcal/mol)值即代表两者结合的结合能力，结合能越低，配体与受体结合越稳定。并通过pymol对其进行可视化分析，2d图采用discovery studio 2020client进行可视化分析。对接结果如表6
[0105]
表6百香果megastigmane糖苷化合物与γ-氨基丁酸转氨酶的分子对接结合能
[0106]
化合物结合能(kcal/mol)化合物1-9.1化合物2-9.1化合物3-8.2化合物4-8.7化合物5-8.5奥沙西泮-9.0
[0107]
一般认为，配体化合物与靶点蛋白的结合能小于-4.25kcal/mol表示两者间有一定的结合活性，小于-7.0kcal/mol表示有强烈的结合活性。
[0108]
由表6结果可知，百香果megastigmane糖苷化合物与gaba-t的结合能均小于-8.0kcal/mol，而且化合物1与化合物2与gaba-t的结合能与镇静催眠药奥沙西泮相当，表明百香果megastigmane糖苷化合物具有调节gaba-t活性。进一步对结合蛋白可视化分析发现，百香果megastigmane糖苷化合物主要通过氢键、pi-signa、pi-alkyl和alkyl作用与γgaba-t相结合，结果如图16-图20所示。
[0109]
实施例5
[0110]
百香果megastigmane糖苷类化合物的热裂解成分分析
[0111]
鉴于本发明制备的百香果megastigmane糖苷化合物结构的相似性，本实施例中选取其中化合物1和化合物4进行热裂解－气相色谱/质谱分析，裂解温度为500℃。结果如下：
[0112]
(1)化合物1的主要热裂解产物为：α-环柠檬醛(5.78％)、紫罗兰酮(17.59％)、(2反式)-1-(2,6,6-三甲基-2环已烯-1-基)-2-丁烯-1-酮(5.05％)、2,6,6-三甲基-1-[(1顺式)-3-甲基-1,3-丁二烯基]-1,3-环己二烯(9.16％)、3-氧代-β-紫罗兰酮(6.25％)、二氢-3-氧代-α-紫罗兰酮(13.48％)、二氢-3-氧代-α-紫罗兰醇(27.29％)
[0113]
(2)化合物4的主要热裂解产物为：巨豆三烯酮(68.3％)和3-氧代-7,8-二氢-α-紫罗兰醇(9.28％)。
[0114]
百香果megastigmane糖苷化合物受热降解，主要产生紫罗兰酮、紫罗兰醇、巨豆三烯酮等具有气味的衍生物。表明本发明所述的百香果megastigmane糖苷化合物具有增香作用，可作为增香剂。而香烟产品的燃烧温度一般在300～800℃，处于megastigmane糖苷化合物解裂解温度范围，若在香烟制品中添加megastigmane糖苷化合物，该类化合物受热释放出香气成分，能够改善香烟制品品质，包括增强香烟香味，中和香烟中的不愉悦的味道，而且令人愉悦的香味还能够舒缓情绪，起到镇静作用。
[0115]
以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

技术特征：
1.百香果megastigmane糖苷化合物，其特征在于，其具体结构式为以下结构中的任一种：2.一种根据权利要求1所述的百香果megastigmane糖苷化合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1：将去除果籽和果渣的百香果果浆经过高速连续流离心机进行固液分离，得到百香果澄清果汁；步骤2：将步骤1得到的所述的百香果澄清果汁先经过截留分子量为100kd～200kd的陶瓷膜分离，将得到的透过液再经过2kd～4kd的超滤膜分离，收集透过液，得到百香果果汁超滤液；步骤3：将步骤2得到的所述的百香果果汁超滤液，经过非极性或弱极性的大孔树脂吸附后，先用4～6倍柱体积的纯水冲洗柱子，再分别用4～6倍柱体积的10％低碳醇溶液和20％～70％的低碳醇溶液依次进行梯度洗脱，并收集20％～70％低碳醇洗脱液，50℃浓缩、干燥，即得到富含megastigmane糖苷化合物的百香果果汁提取物；步骤4：将步骤3得到的所述的富含megastigmane糖苷化合物的百香果果汁提取物重复多次注入高效液相色谱柱内，分别累加收集保留时间为29.4min、37.0min、42.6min、
47.9min和49.9min的色谱峰，分别浓缩、干燥，并分别对应得到化合物1、化合物2、化合物3、化合物4和化合物5。3.根据权利要求2所述的百香果megastigmane糖苷化合物的制备方法，其特征在于：步骤1中所述的高速连续流离心转速为8000r/min～20000r/min。4.根据权利要求2所述的百香果megastigmane糖苷化合物的制备方法，其特征在于：步骤3中所述非极性大孔树脂为d101、hpd-100、x-5、xnd-11、h103、ads-17、hp-20或d3520中任一种；弱极性大孔树脂为ab-8、d201、hpd-300、ds-401或dm-130中任一种。5.根据权利要求2所述的百香果megastigmane糖苷化合物的制备方法，其特征在于：步骤3中，所述的低碳醇为甲醇或乙醇中任一种。6.根据权利要求2所述的百香果megastigmane糖苷化合物的制备方法，其特征在于：步骤4中，所述高效液相色谱制备参数为：10mm
×
250mm的shim-pack gis c18色谱柱，填料的粒度为10μm，柱温为30℃，流动相为乙腈和水的混合洗脱液，洗脱模式为梯度洗脱，0min，乙腈与水的体积比为19:81；55min，乙腈与水的体积比为19:81；60min，乙腈与水的体积比为40:60。7.一种根据权利要求1所述的百香果megastigmane糖苷化合物在制备抗焦虑、镇静催眠或增香产品中的应用。8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于：其剂型为液体制剂、半固体制剂或固体制剂。9.根据权利要求7所述的应用，其特征在于：其产品类型为药品、功能食品或者香烟制品。

技术总结
本发明属于植物成分的提取、分离纯化技术领域，具体涉及百香果megastigmane糖苷化合物及其制备方法和应用。本发明所提供的百香果megastigmane糖苷化合物，来源于百香果果汁，属于天然的植物次生代谢产物，由C13降倍半萜苷元通过氧苷键与葡萄糖、鼠李糖相连形成的二糖苷化合物，是一类新结构化合物，其在抗焦虑、镇静催眠或增香产品方面具有广泛的应用前景。镇静催眠或增香产品方面具有广泛的应用前景。镇静催眠或增香产品方面具有广泛的应用前景。


技术研发人员：宁德生 潘争红 符毓夏 李连春
受保护的技术使用者：广西壮族自治区中国科学院广西植物研究所
技术研发日：2023.02.16
技术公布日：2023/7/12