一种具有大斯托克斯位移特征的羧酸酯酶2识别近红外荧光探针及其制备方法与应用

1.本发明属于分析检测技术领域，具体涉及一种具有大斯托克斯位移特征的羧酸酯酶2识别近红外荧光探针及其制备方法与应用。


背景技术：

2.羧酸酯酶2(ces2)是丝氨酸酯酶超级家族的重要成员之一，主要位于内质网的管腔内部，其参与许多重要的生理过程，在维持内环境稳定，保持代谢防御系统正常生理功能上起到至关重要的作用。除此之外，它还承担了催化各种内生底物、临床药物和环境毒物的解毒以及抗癌前药的体内酶促或催化转化代谢的功能。它在肝脏、肠道和肾脏等器官内的异常表达常常与肥胖症、糖尿病、非酒精性脂肪肝以及癌症等疾病密切相关。在抗癌前药设计之初，尽管可以通过酯化反应提高抗癌前药的脂溶性，以达到更好的细胞膜穿透性和治疗效果的目的，但内质网内的ces2仍然是抗癌前药释放药物活性单元的关键因素之一。截止目前，关于ces2与上述疾病之间的作用机理仍不甚清楚。因此，开发新型的ces2活性监控技术，对于加深ces2在上述生理学和病理学过程中相关功能的理解和认识，提高相关癌症的诊断和治疗效果具有重要的意义。
3.近年来荧光探针技术逐渐应用于ces2活性的检测。然而，由于生物背景干扰、激发光散射以及生物组织中的穿透性低等原因，基于传统荧光平台ces2活性检测和成像的荧光探针仍然面临着严峻的挑战。虽然基于传统优良荧光团(如：半花菁基团、吲哚基团)的近红外荧光探针能够有效的避免上述问题，提高了对ces2荧光检测和成像的分辨率和信噪比，但由于斯托克斯位移相对较小，容易发生严重的自猝熄灭和激发光干扰，导致荧光测量偏差较大。因此，开发具有大斯托克斯位移的新型近红外荧光探针，实现活细胞和动物体内ces2活性的快速、高选择性和高灵敏度监控和成像具有重要意义。


技术实现要素：

4.本发明的一个目的是提供一种具有大斯托克斯位移、高选择性和高灵敏度检测ces2活性的近红外荧光探针分子—mor-ces2。
5.本发明所提供的mor-ces2，其结构式如式i所示：
[0006][0007]
所述mor-ces2的盐为碘盐。
[0008]
本发明的另一个目的是提供式i所示的mor-ces2的制备方法。
[0009]
本发明所提供的mor-ces2的制备方法，包括如下步骤(制备流程图见图1)：
[0010]
1)以化合物1和2-羟基-4-甲氧基苯甲醛为原料合成化合物2；
[0011]
2)以2-甲基苯并恶唑和碘乙烷为原料合成化合物3；
[0012]
3)将化合物2和化合物3在无水乙酸酐中进行反应，得到中间产物4，再将上述中间产物4在三溴化硼的催化下合成mor；
[0013]
4)将mor与苯甲酰氯进行反应，合成式i所示的化合物mor-ces2。
[0014][0015]
上述方法步骤1)中，合成化合物2的具体方法为：将黄色油状化合物1溶解在n,n-二甲基甲酰胺(dmf)中，随后添加2-羟基-4-甲氧基苯甲醛和碳酸铯进行搅拌反应。所述反应中，化合物1、2-羟基-4-甲氧基苯甲醛和碳酸铯的摩尔比为1.2：1：3，反应温度为室温(25℃)，反应时间为12小时。
[0016]
上述方法步骤2)中，合成化合物3的具体方法为：将2-甲基苯并恶唑和碘乙烷溶解
在乙腈中，回流搅拌下进行反应。所述反应中，2-甲基苯并恶唑和碘乙烷的摩尔比为1：1.5，反应温度为90℃，反应时间为12小时。
[0017]
上述方法步骤3)中，合成mor的具体方法为：首先将化合物2和化合物3溶于无水乙酸酐进行第一步反应得到中间产物4，然后在剧烈搅拌条件下，将三溴化硼逐滴加入到中间产物4的二氯甲烷溶液(体系温度为0℃)中，升温至室温(25℃)进行第二步反应，从而得到mor；所述第一步反应中，化合物2和化合物3的摩尔比为1：1.25，所述反应的温度为140℃，反应时间为12小时；所述第二步反应中，中间产物4与三溴化硼的摩尔比为1：10，所述反应的温度为室温(25℃)，反应时间为12小时。
[0018]
上述方法步骤4)中，合成化合物mor-ces2的具体方法为：将mor溶解在二氯甲烷中，加入一定量的三乙胺，然后降低反应体系温度至0℃，随后缓慢加入苯甲酰氯进行搅拌反应。所述反应中，mor、三乙胺和苯甲酰氯的摩尔比为1：1.38：1.5。所述反应的温度为室温(25℃)，反应时间为2小时。
[0019]
本发明的再一个目的是提供式i所示的mor-ces2的用途。
[0020]
本发明所提供的mor-ces2用途选自下述1)—9)中的至少一种：
[0021]
1)由mor-ces2制成的荧光探针；
[0022]
2)mor-ces2在作为荧光探针或作为检测ces2的荧光探针中的应用；
[0023]
3)含有mor-ces2的化学传感器；
[0024]
4)mor-ces2在制备化学传感器或检测ces2的化学传感器中的应用；
[0025]
5)mor-ces2在检测ces2中的应用；
[0026]
6)上述1)的荧光探针在检测ces2中的应用；
[0027]
7)上述3)的化学传感器在检测ces2中的应用；
[0028]
8)mor-ces2在制备肿瘤诊断试剂或肿瘤示踪试剂中的应用；
[0029]
9)mor-ces2在制备炎症性肠道疾病(ibd)诊断试剂中的应用。
[0030]
其中，1)所述荧光探针和3)所述化学传感器均可用于ces2的荧光成像。
[0031]
其中，8)所述试剂为肿瘤的荧光成像试剂，所述肿瘤为表达ces2的肿瘤细胞，如tpc-1细胞。
[0032]
其中，9)所述试剂为荧光成像试剂。
[0033]
所述荧光探针或化学传感器应用的对象可为细胞或活的生物体。具体的：可应用于tpc-1细胞中ces2的荧光成像；也可以应用于小鼠活体中ces2的荧光成像。
[0034]
本发明通过实验证实：mor-ces2本身无荧光，但可以选择性的与ces2发生荧光打开反应，生成光学性能优良的体系，且大大提高了对ces2的检测灵敏度和选择性。因此，mor-ces2适用于对ces2进行高选择性和高灵敏度的检测，该检测可以通过荧光光谱方法进行。
[0035]
采用荧光光谱法，以mor-ces2作为检测试剂对ces2进行检测时，检出限为0.3ng/ml，说明该传感器分子mor-ces2对ces2具有很好的响应和灵敏度，优于目前已被报道的ces2荧光检测方法的灵敏度。同时，mor-ces2对ces2的荧光响应具有高度的选择性，常见离子、内源性物质和水解酶(如ca
2+
、mg
2+
、glu、cys、urea、h2o2、
·
oh、1o2、onoo-、ascorbic acid、bsa、hsa、ache、bche、alkaline phosphatase、aminopeptidase n、leucine arylamidase和ces1等)对ces2的测定几乎没有干扰，因此能排除众多干扰离子和物种对检
测结果的干扰，检测特异性高。另外，应用mor-ces2对ces2进行检测时，由于检测灵敏度高，只需要微量的样品即可以完成，拓宽了该方法的应用范围。
附图说明
[0036]
图1为mor-ces2的制备流程图。
[0037]
图2为mor的核磁共振氢谱。
[0038]
图3为mor的核磁共振碳谱。
[0039]
图4为mor的高分辨质谱。
[0040]
图5为mor-ces2的核磁共振氢谱。
[0041]
图6为mor-ces2的核磁共振碳谱。
[0042]
图7为mor-ces2的高分辨质谱图。
[0043]
图8为cyr、mor和mor-ces2的紫外吸收光谱(a)及其荧光光谱图(b)。
[0044]
图9为不同ph下mor-ces2与ces2(150ng/ml)共存体系以及mor-ces2单独存在的体系的荧光强度变化图(a)和不同温度下mor-ces2与ces2共存体系以及单独mor-ces2体系的荧光强度变化图(b)。
[0045]
图10为不同孵育时间下mor-ces2与ces2(150ng/ml)共存体系以及mor-ces2单独存在体系的荧光强度变化图。
[0046]
图11为mor-ces2与不同浓度ces2共存体系的荧光强度变化图(a)；mor-ces2与不同浓度ces2共存体系735nm处的荧光强度与ces2浓度之间的线性关系图(b)；mor-ces2对ces2检测的选择性(c)；mor-ces2在10个人肝微粒体(hlms)样本中的水解活性图(d)；10个hlms样品中mor-ces2和二乙酰荧光素(fd)水解率的相关性分析图(e)。
[0047]
图12(a)为mor-ces2和mor细胞毒性cck-8实验结果；图12(b)为图12(c)中a-f的平均荧光强度；图12(c)为mor-ces2用于nthy-ori 3-1和tpc-1细胞成像；图12(d)为共培养细胞与mor-ces2(10μm)孵育20分钟的荧光图像(tpc-1细胞被标记出)。
[0048]
图13为脂多糖(lps)诱导的tpc-1细胞炎症在不同时间下的ces2荧光成像图(a)以及图(a)中不同时间下对应的荧光强度图(b)。
[0049]
图14为tpc-1肿瘤模型小鼠中ces2活性随时间变化的荧光强度成像图(a)；图像引导下肿瘤原位切除手术(b)；ibd小鼠模型中ces2的荧光成像(c)。
具体实施方式
[0050]
下面结合具体实施方式对本发明进行进一步的详细描述，给出的实施例仅为了阐明本发明，而不是为了限制本发明的范围。以下提供的实施例可作为本技术领域普通技术人员进行进一步改进的指南，并不以任何方式构成对本发明的限制。
[0051]
下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
[0052]
实施例1、化学传感器分子mor-ces2的制备
[0053]
反应流程如图1所示，具体方法如下：
[0054]
将化合物1(454mg，2.4mmol)溶解在10ml dmf中，加入2-羟基-4-甲氧基苯甲醛
(304mg，2.0mmol)和碳酸铯(1.2g，6.0mmol)，反应体系在室温下(25℃)搅拌过夜。反应完成后，粗产物以二氯甲烷为洗脱剂，采用硅胶色谱柱方法纯化。最终得到亮黄色结晶化合物2(产率：72％)。
[0055]
将2-甲基苯并恶唑(446mg，3.35mmol)和碘乙烷(780mg，5mmol)溶解于25ml乙腈中，反应体系加热至90℃回流，反应12小时。反应完成后，旋转蒸发除去溶剂。使用乙醚洗涤后过滤，得到白色固体化合物3(产率：90％)。该化合物无需纯化，可以直接用于下一步反应。
[0056]
将化合物2(97mg，0.4mmol)和化合物3(81mg，0.5mmol)溶解在10ml乙酸酐中，反应体系加热回流过夜。反应完成后，旋转蒸发除去溶剂。二氯甲烷溶解粗产物并用水洗涤三次后，溶剂蒸发得到中间产物4。中间产物4(97mg，0.25mmol)溶于10ml二氯甲烷中，反应体系冷却至0℃。在大力搅拌的同时，将三溴化硼(0.24ml，2.5mmol)缓慢滴入反应体系中，室温下搅拌过夜。反应完成后，将混合物倒入冰水中，用饱和的碳酸氢钠中和，二氯甲烷萃取。然后以二氯甲烷：甲醇(15：1,v/v)作为洗脱剂，采用硅胶色谱柱方法对混合物进行纯化，得到紫色固体mor(产率：70％)。
[0057]
将化合物mor(97mg，0.26mmol)溶于7ml二氯甲烷中，然后加入三乙胺(50μl，0.36mmol)。冷却至0℃后，缓慢加入苯甲酰氯(56mg，0.4mmol)，持续搅拌30分钟，升温至室温(25℃)，继续反应2小时。反应结束后，倒入冰水中，用二氯甲烷萃取。然后以二氯甲烷：甲醇(20：1，v/v)作为洗脱剂，使用硅胶色谱柱方法对混合物进行纯化，得到紫色固体mor-ces2(产率：65％)。
[0058]
mor的核磁鉴定结果：1h nmr(300mhz,methanol-d4)δ＝8.71(d,1h),7.88-7.77(m,2h),7.60(dd,2h),7.26(d,1h),7.13(s,1h),6.80(d,1h),6.70(dd,1h),6.34(d,1h),4.51(q,2h),2.66(dt,4h),1.88(m,2h),1.53(t,3h).
13
c nmr(75mhz,methanol-d4)δ＝164.49,163.10,156.27,145.94,133.79,130.34,128.95,128.75,127.74,115.19,114.00,113.58,113.46,103.56,94.37,92.29,42.06,30.71,26.04,22.23,14.19。核磁氢谱和碳谱鉴定结果分别见图2和图3。仪器型号：mercury 300bb核磁共振谱仪。mor的高分辨质谱鉴定结果：hr-ms(esi,m/z)calcd for[c
24h22
no3]
+
:372.1594；found:372.1601，结果见图4。仪器型号：tsq quantum access max三四极质谱仪。上述结果表明，所得化合物确为目标化合物mor。
[0059]
mor-ces2的核磁鉴定结果：1h nmr(500mhz,methanol-d4)δ＝8.77(d,1h),8.20(d,2h),8.00(d,1h),7.72(d,1h),7.61-7.53(m,5h),7.45(d,2h),7.33(s,1h),7.22(dd,1h),6.63(d,1h),4.39(q,2h),2.76(dt,4h),1.95(m,2h),1.58(t,3h).
13
c nmr(126mhz,methanol-d4)δ179.17,164.65,160.10,153.20,146.42,142.49,141.41,133.93,131.23,130.92,129.88(d),128.86(d),128.52(d),128.14,127.65,122.45,119.85,119.04,114.56,113.12,109.44,105.21,42.20,30.32,26.73,21.07,12.64。核磁氢谱和碳谱鉴定结果分别见图5和图6。仪器型号：mercury 300bb核磁共振谱仪。mor-ces2的高分辨质谱鉴定结果：hr-ms(esi,m/z)calcd for[c
31h26
no4]
+
:476.1856；found:476.1858，结果见图7。仪器型号：tsq quantum access max三四极质谱仪。上述结果表明，所得化合物确为目标化合物mor-ces2。
[0060]
实施例2、mor-ces2作为分析试剂对ces2进行紫外光谱和荧光光谱检测
[0061]
1、mos-ces2对ces2进行紫外和荧光光谱检测
[0062]
取5ml塑料ep管，将mor-ces2溶于二甲基亚砜(dmso)中，配制成浓度为1.0mm储备液，标记为：1.0mm的mor-ces2储备溶液。
[0063]
取适量的1.0mm的mor-ces2储备溶液溶于10mm pbs缓冲溶液(ph 7.4)中，然后添加一定量的ces2试剂，最后添加适当体积的10mm pbs缓冲溶液(ph 7.4)，使各测试体系中的ces2浓度为150ng/ml，mor-ces2的浓度为10μm。在37℃下孵育15分钟后转移体系至检测池中，测定反应体系的紫外可见吸收光谱和荧光光谱。图8中(a)和(b)分别为cyr、mor和mor-ces2的紫外吸收光谱及其荧光光谱。对同为包含半花菁结构的荧光基团的cyr、mor和mor-ces2的光学性质进行对比，可以看出：cyr在667nm处有最大紫外吸收峰，而mor在578nm处有最大紫外吸收峰，出现了明显的蓝移。此外，通过三维荧光扫描获得了mor和cyr的激发光谱和发射光谱，并确定了相应的绝对荧光量子产率(ф)。如表1所示，与cyr相比，mor的最大发射波长为735nm，红移了15nm，同时斯托克斯位移增加了65nm，量子产率提高。mor荧光性质的优化是因为恶唑基团中o原子拥有更强的给电子能力，表明mor是一种比cyr更好的近红外荧光基团。mor连接识别基团构成的mor-ces2，因为分子内电荷转移效应被阻断，相对于mor，其最大紫外吸收蓝移且荧光发射被关闭。
[0064]
表1mor和cyr的光物理性质对比
[0065][0066]
图9(a)和图9(b)分别为mor-ces2与ces2(150ng/ml)共存体系以及mor-ces2单独存在的体系在不同ph下和不同温度下的荧光强度变化图。从图9(a)和图9(b)可以看出：当ph处于5.0～9.0范围和温度处于20℃～45℃时，mor-ces2几乎无荧光，且其荧光强度不随着ph和温度的变化而变化。当ces2存在条件下，在ph＝7.4和温度为37℃时，体系的荧光强度最高，说明mor-ces2适用于生理条件下对ces2的荧光识别。图10为mor-ces2与ces2共存体系的荧光动力学研究结果。可以看出：mor-ces2单独存在时，随着时间的延长，荧光强度几乎不变；mor-ces2与ces2(150ng/ml)共存体系的荧光强度在15分钟之内随着时间的延长而增强，而15分钟之后，体系的荧光强度达到最大值，且几乎保持不变。上述事实说明，利用mor-ces2对ces2的荧光检测的最佳反应时间为15分钟。
[0067]
图11(a)和图11(b)分别为mor-ces2与不同浓度ces2共存体系的荧光强度变化图和mor-ces2与不同浓度ces2共存体系在735nm处的荧光强度与ces2浓度之间的线性关系图。如图11(a)所示，随着ces2浓度的提高，反应体系的荧光强度逐渐增加。图11(b)可以看出：在1～250ng/ml的范围内，ces2浓度与体系的荧光强度呈线性关系，线性方程为δf＝2.193c(ng/ml)+42.596，方法的检出限以3倍的空白信号的标准偏差除以标准曲线的斜率计算为0.3ng/ml。以上结果表明：分析试剂—mor-ces2具有优良的性能，能够实现对ces2的高灵敏度荧光检测。
[0068]
2、mor-ces2对ces2进行荧光检测的特异性
[0069]
同时取若干个ep管，进行上面类似的操作，只是将加入ces2变成加入各种常见干扰离子或物质，1-20号对应的样品依次为：blank、ca
2+
(2.5mm)、mg
2+
(2.5mm)、glu(1mm)、cys(1.0mm)、urea(10mm)、h2o2(50μm)、
·
oh(50μm)、1o2(50μm)、onoo-(10μm)、ascorbic acid(1.0mm)、bsa(100mg/ml)、has(100mg/ml)、ache(20u/ml)、bche(20u/ml)、alkaline phosphatase(20u/l)、aminopeptidase n(0.5μg/ml)、leucine arylamidase(12u/ml)、ces1(150ng/ml)和ces2(150ng/ml)，测试结果见图11(c)。从图11(c)中可以看出：1-19号样品未产生明显的荧光响应，而150ng/ml ces2(20号样品)的加入则产生强烈的荧光。实验现象说明：上述干扰离子不会影响mor-ces2作为分析试剂对ces2进行荧光检测，且作为检测试剂，mor-ces2对ces2的荧光检测具有高的选择性。图11(d)和图11(e)分别为mor-ces2在10个人肝微粒体(hlms)样本中的水解活性以及10个hlms样品中mor-ces2和二乙酰荧光素(fd)水解率的相关性分析图。结果表明：mor-ces2对ces2具有良好的代谢选择性，可用于复杂酶体系中ces2活性的定量检测。
[0070]
3、mor-ces2与其他相关ces2化学传感器的性能对比
[0071]
将mor-ces2对ces2的荧光检测性能与文献中检测ces2的相关化学传感器的性能进行总结和对比，结果见表2。从表2中可以看出，mor-ces2对ces2的荧光检测响应速度较快，检出限优于已报道的化学传感器。
[0072]
表2mor-ces2与其他已报道的ces2荧光探针的性能对比
[0073][0074][0075]
实施例3、mor-ces2作为试剂进行细胞和小鼠荧光成像
[0076]
1、mor-ces2对细胞中ces2进行荧光成像
[0077]
在进行细胞成像实验前，采用cck-8方法评估mor-ces2和mor的细胞毒性，结果见图12和图13。图12(a)所示：在浓度低于20μm时，mor-ces2对nthy-ori3-1细胞无明显毒性，说明mor-ces2可以作为活体细胞成像的荧光探针。使用mor-ces2探针对人甲状腺正常细胞(nthy-ori 3-1)和人甲状腺癌细胞(tpc-1)的内源性ces2进行荧光成像。两类细胞的操作
4415.
[0086]
[4]zhang m.,li p.,hai f.,jia y.chem.phys.lett.2021,785,139143.
[0087]
[5]jin q.,feng l.,wang d.,wu j.,hou j.,dai z.,sun s.,wang j.,ge g.,cui j.,yang l.biosens.bioelectron.2016,83,193-199.
[0088]
[6]ozsan c.,kailass k.,digby e.m.,almammadov t.,beharry a.a.,kolemen s.chem.commun.2022,58,10929-10932.
[0089]
[7]zhang x.,liu t.,liang j.,tian x.,zhang b.,huang h.,ma x.,feng l.,sun c.j.mater.chem.b 2021,9,2457-2461.

技术特征：
1.式i所示化合物mor-ces2：2.权利要求1中所述式i所示的mor-ces2的制备方法，包括如下步骤：1)以化合物1和2-羟基-4-甲氧基苯甲醛为原料合成化合物2；2)以2-甲基苯并恶唑和碘乙烷为原料合成化合物3；3)将化合物2和化合物3在无水乙酸酐中进行反应，得到中间产物4，再将上述中间产物4在三溴化硼的催化下合成mor；4)将mor与苯甲酰氯进行反应，合成式i所示的化合物mor-ces2；3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述步骤1)中，合成化合物2的具体方法为：将黄色油状化合物1溶解在n,n-二甲基甲酰胺中，随后添加2-羟基-4-甲氧基苯甲醛和碳酸铯进行搅拌反应；所述反应中，化合物1、2-羟基-4-甲氧基苯甲醛和碳酸铯的摩尔比为1.2：1：3，反应温度为室温(25℃)，反应时间为12小时；或，所述步骤2)中，合成化合物3的具体方法为：将2-甲基苯并恶唑和碘乙烷溶解在乙腈中，回流搅拌下进行反应。所述反应中，2-甲基苯并恶唑和碘乙烷的摩尔比为1：1.5，反应
温度为90℃，反应时间为12小时；或，所述步骤3)中，合成mor的具体方法为：首先将化合物2和化合物3溶于无水乙酸酐进行第一步反应得到中间产物，然后在剧烈搅拌条件下，将三溴化硼逐滴加入到中间产物的二氯甲烷溶液中，体系温度为0℃，升温至室温(25℃)进行第二步反应，从而得到mor；所述第一步反应中，化合物2和化合物3的摩尔比为1：1.25，所述反应的温度为140℃，反应时间为12小时；所述第二步反应中，中间产物与三溴化硼的摩尔比为1：10，所述反应的温度为室温(25℃)，反应时间为12小时；或，所述步骤4)中，合成化合物mor-ces2的具体方法为：将mor溶解在二氯甲烷中，加入三乙胺，然后降低反应体系温度至0℃，随后缓慢加入苯甲酰氯进行搅拌反应；所述反应中，mor、三乙胺和苯甲酰氯的摩尔比为1：1.38：1.5。所述反应的温度为室温(25℃)，反应时间为2小时。4.荧光探针，其特征在于：所述荧光探针为权利要求1所述的化合物mor-ces2。5.化学传感器，其特征在于：所述化学传感器含有权利要求1所述的化合物mor-ces2。6.肿瘤诊断和/或示踪的试剂，其特征在于：所述试剂含有权利要求1所述的化合物mor-ces2。7.根据权利要求4所述的荧光探针或根据权利要求5所述的化学传感器或权利要求6所述的试剂，其特征在于：所述荧光探针或所述化学传感器或试剂用于检测ces2或ces2的荧光成像。8.权利要求1所述的化合物、或权利要求4或7所述的荧光探针、或权利要求5或7所述的化学传感器、或权利要求6或7所述的试剂在检测ces2中的应用或在ces2的荧光成像中的应用。9.权利要求1所述的化合物在下述1)—4)中至少一种中的应用：1)在作为荧光探针或作为检测ces2的荧光探针中的应用；2)在制备化学传感器或制备检测ces2的化学传感器中的应用；3)在制备肿瘤诊断试剂或肿瘤示踪试剂中的应用；4)在制备炎症性肠道疾病诊断试剂中的应用。10.根据权利要求8或9所述的应用，其特征在于：所述荧光探针或化学传感器或所述试剂应用的对象为细胞或活的生物体。

技术总结
本发明公开了一种具有大斯托克斯位移特征的CES2识别近红外荧光探针MOR-CES2及其制备方法与应用。所述MOR-CES2，其结构式为式I。MOR-CES2本身无荧光，但可以选择性的与CES2发生荧光打开反应，由于具有较大的斯托克斯位移(105nm)和近红外发射特征，大大降低了系统背景荧光的干扰，提高了对CES2活性检测的灵敏度，获得优良的CES2检出限(0.3ng/mL)。因此，MOR-CES2适用于对CES2进行高选择性和高灵敏度的荧光检测。度的荧光检测。度的荧光检测。


技术研发人员：王晓春 高建 高英凯 范传凤 陈瑾
受保护的技术使用者：青岛科技大学
技术研发日：2023.02.13
技术公布日：2023/7/12