一种具有仿生界面的涤纶/丝素复合血管支架覆膜及其制备方法

1.本发明属于生物医用材料领域，涉及血管支架覆膜的制备，具体涉及一种具有仿生血管内膜界面的涤纶编织物复合再生丝素蛋白的血管支架覆膜及其制备方法。


背景技术：

2.心脑血管疾病其发病率、患病率和死亡率已呈逐年升高的趋势。动脉粥样硬化是这类疾病的主要原因，始于内膜受激如脂质或糖质集聚等，从而导致动脉壁增厚变硬和狭窄，最终恶化为闭塞性动脉疾病(包括冠心病、脑梗死和外周血管疾病)。
3.目前，临床上越来越多采用覆膜支架来达到治疗血管阻塞的目的，常用的商用覆膜支架覆膜材料主要是涤纶和聚四氟乙烯，这两种合成材料虽具有优异的力学性能，但存在顺应性差和生物惰性等缺陷，植入体内后难以实现内皮化，这是诱发术后并发症的主要原因。特别是对于中老年人群体，不仅血栓发生率高且自身组织再生能力较弱，因此对这类合成高分子支架覆膜内表面的生物活性提出了更高的要求——植入后希望在维持长期力学支撑的同时实现快速内皮化，根本上抑制血栓和炎症的发生。
4.丝素蛋白是来源于动物的天然蛋白，由20种氨基酸组成，具有与细胞外基质相同的成分，已有文献研究表明丝素蛋白构建的人工血管能够支持血管细胞的粘附、生长和增殖，植入体内后能够诱导内皮化，保持血流通畅，并且能够原位诱导血管组织的再生，在血管组织工程材料方面受到极大的关注，基于良好的血液相容性，也是作为现有临床应用的合成高分子如涤纶或聚四氟乙烯覆膜表面改性的优选材料。
5.鉴于目前覆膜支架在术后中、远期仍易发生支架移位、内漏、血栓和再狭窄等并发症、导致较高比例介入不理想的技术问题，有必要研发一种仿生血管微结构的活性支架覆膜以解决上述问题。


技术实现要素：

6.针对现有技术的不足，本发明旨在解决所述技术问题，提供一种具有仿生血管内膜界面的涤纶编织物复合再生丝素蛋白的血管支架覆膜及其制备方法，用于生产快速诱导内皮化、防止血栓形成、保持血流稳态、长期通畅的血管支架。
7.本发明提供了一种具有仿生血管内膜界面的涤纶编织物复合再生丝素蛋白的血管支架覆膜及其制备方法，在覆膜内表面设计的同时调节其微观结构，赋予覆膜良好力学性能和优异生物活性。
8.为了实现以上技术目的，本发明采用的具体步骤如下：
9.(1)将家蚕丝采用沸水、碳酸钠、碳酸氢钠或生物酶中的任意一种进行脱胶，获得家蚕丝素(以下简称丝素)纤维，然后完全溶解于溴化锂溶液中，得到丝素溶解液；将所述丝素溶解液灌注于透析袋内，采用去离子水透析后，经过滤得到纯化后的丝素蛋白水溶液，蒸发浓缩调整丝素蛋白水溶液浓度为10～200mg/ml；
10.(2)将涤纶丝置于碳酸钠溶液中处理一段时间后，经去离子水洗涤，完成去油脱浆处理，重复去油脱浆处理数次，最后得到预处理的涤纶丝；将所述预处理后的涤纶丝再置于氢氧化钠溶液中进行表面活化处理，表面活化处理后经去离子水洗涤，得到碱处理后的涤纶丝；
11.(3)支架覆膜内层的制备；
12.(a)以丝素蛋白水溶液作为电纺液，通过静电纺丝在圆柱形辅助棒上纺制丝素纳米纤维，得到带有丝素纳米纤维的辅助棒；所述丝素蛋白水溶液浓度为50～180mg/ml，所述丝素纳米纤维的平均直径为100～5000nm，丝素纳米纤维的平均取向度为30～90％；
13.(b)在丝素蛋白水溶液中加入亲水的柔性的交联剂，得到改性丝素蛋白混合溶液；再将带有丝素纳米纤维的辅助棒于改性丝素蛋白混合溶液中浸渍，浸渍后取出置于20～50℃环境下旋转成膜，完成一次浸渍处理；重复浸渍处理数次，形成支架覆膜的内层；所述改性丝素蛋白混合溶液中丝素蛋白浓度为30～100mg/ml；
14.(4)将步骤(2)碱处理后的涤纶丝采用编织技术在步骤(3)支架覆膜内层的外表面编织30～150
°
编织角、1～20根/cm轴向编织密度的涤纶管状织物，形成血管支架覆膜的芯层；
15.(5)将步骤(4)的血管支架覆膜的芯层浸泡于上述步骤(3)中的改性丝素蛋白混合溶液，浸泡后取出置于20～50℃环境下旋转成膜，即完成一次浸泡处理；重复浸泡处理数次，得到血管支架覆膜；最后将血管支架覆膜浸泡于无菌去离子水中，去除未反应的交联剂和丝素分子并溶蚀丝素纳米纤维，得到具有仿生界面的涤纶/丝素复合血管支架覆膜。
16.优选的，步骤(1)中所述溴化锂溶液的浓度为9.3m；所述透析袋为半透膜，截留分子量为3～50kda，采用去离子水透析3天。
17.优选的，步骤(2)中所述碳酸钠溶液的质量浓度为1％，脱浆处理的温度为95～100℃，处理时间为2小时；所述处理数次为2-5次；所述氢氧化钠溶液的浓度为20～50g/l，表面活化处理温度为30～80℃，处理时间为1～3小时。
18.优选的，步骤(3)的(a)-(b)中所述圆柱形辅助棒为不锈钢棒，直径为1～30mm；
19.优选的，步骤(3)的(a)中静电纺丝时圆柱形辅助棒的旋转速度为100～3000rpm。
20.优选的，步骤(3)的(b)中所述丝素蛋白与交联剂质量比为1.0:(0.3～1.0)，所述交联剂为聚乙二醇二缩水甘油醚，所述于改性丝素蛋白混合溶液中浸渍的时间为10～60秒，重复浸渍处理数次为0～5次，旋转成膜时的旋转速度为20～80rpm，旋转方向为沿辅助棒圆周方向。
21.优选的，步骤(4)中所述涤纶丝为涤纶单丝和涤纶复丝的任意一种，规格为5～200d。
22.优选的，步骤(5)中于改性丝素蛋白混合溶液中浸泡的时间为10～60秒，旋转成膜时的旋转速度为20～80rpm，旋转方向为沿辅助棒圆周方向，时间为10～30分钟；所述重复浸泡处理数次为2～10次。
23.优选的，步骤(5)中所述无菌去离子水的温度为4～37℃，浸泡时间为1～3天。
24.有益效果：
25.本发明的技术方案与创造性在于制备的血管支架覆膜具有优异的促内皮化功能，根本上解决了临床上应用的涤纶或聚四氟乙烯血管支架无法内皮化、术后仍易产生血栓的
问题。
26.本发明提供的涤纶/丝素复合血管支架覆膜具有良好的性能，轴向抗拉伸强度为12.0mpa，断裂伸长率为120％，圆周向抗拉伸强度为6.0mpa，断裂伸长率为50％，水爆破强度为3500mmhg，顺应性为10.0％/100mmhg，整体水渗漏在120mmhg水压下小于10ml/min.cm2，溶血率《0.1％。
27.本发明制备的血管支架覆膜具有优异的促内皮化功能，以实施例3为例，内皮细胞在其表面培养3天后，本发明的涤纶/丝素复合血管支架覆膜上的细胞粘附率与对照实施例4相比增加了94％，细胞增殖率与对照实施例4相比增加了90％，内皮细胞no释放量与对照实施例4相比增加了80％。
28.本发明提供的涤纶/丝素复合血管支架覆膜复合的丝素蛋白层具有理想的生物活性，尤其能够很好地支持血管内皮细胞生长以及负电荷的内表面防止了血浆中蛋白和血细胞的粘附；涤纶编织物内外表面复合的丝素蛋白使其植入后与自体的血管组织形成理想的组织相容性，芯层与外层之间紧密连接，紧密贴合于血管病变部位，不会因材料和力学性能的不配性而不吻合或滑移。
29.本发明的创新性更在于血管支架覆膜中构筑的丝素蛋白内表面溶蚀出了紧密连接的扁平岛状纳米级线槽，具有高仿天然血管内皮层的微观拓扑结构，更有利于内皮(祖)细胞的归巢与增殖，促进内皮(祖)细胞归巢、快速内皮化是永久地抑制植入物再次诱发血栓和再狭窄的根本策略。新形成的完整内皮层能够有效维持血液凝血平衡，保持长久通畅。该血管支架覆膜内表面仿生的纳米级线槽的拓扑结构，其线槽尺寸、方向性和有序性可调控，不仅解决了防止血栓形成和再狭窄的问题，还可以降低血液流速、维持血流稳态并且缓冲高压血流。本发明提供的血管支架覆膜植入后，随着内皮化的快速形成和丝素膜层的逐渐降解吸收，最终在原位重现自体血管的内膜组织，并穿过编织物网格与中膜组织紧密相连。
具体实施方式
30.现详细说明本发明的多种示例性实施方式，该详细说明不应认为是对本发明的限制，而应理解为是对本发明的某些方面、特性和实施方案的更详细的描述。
31.应理解本发明中所述的术语仅仅是为描述特别的实施方式，并非用于限制本发明。在不背离本发明的范围或精神的情况下，可对本发明说明书的具体实施方式做多种改进和变化，这对本领域技术人员而言是显而易见的。由本发明的说明书得到的其他实施方式对技术人员而言是显而易见得的。本发明说明书和实施例仅是示例性的。
32.实施例1:
33.(1)将家蚕丝按1:50g/ml的浴比置于质量浓度0.1％的碳酸钠水溶液中，在98～100℃温度下处理三次，每次30分钟，然后用去离子水充分清洗，置于60℃烘箱干燥12小时，得到脱胶后的丝素纤维。称取脱胶后的丝素纤维按1:10g/ml的浴比在65
±
5℃水浴环境下完全溶解于9.3m的溴化锂溶液中，得到丝素溶解液；
34.将丝素溶解液灌注于透析袋内(截留分子量为14kda)，采用去离子水透析3天得到纯化后的丝素蛋白水溶液。将纯化后的丝素蛋白水溶液浓缩、调整至所需浓度。
35.(2)将涤纶丝按1:50g/ml的浴比置于质量浓度1％的碳酸钠溶液，在98～100℃温
度下处理三次，每次2小时，然后用去离子水充分清洗，得到预处理后的涤纶丝；将预处理后的涤纶丝按1:50g/ml的浴比置于20g/l的氢氧化钠水溶液中表面活化处理，表面活化处理温度为35
±
5℃，处理时间为1小时，再经去离子水洗涤，得到碱处理后的涤纶丝。
36.(3)以50mg/ml丝素蛋白水溶液作为电纺液，通过静电纺丝在旋转速度为1500rpm的不锈钢棒(直径为10mm)上电纺丝素纳米纤维，丝素纳米纤维平均直径为200
±
80nm，平均取向度为50
±
15％，得到卷绕有丝素纳米纤维的不锈钢棒；
37.然后将卷绕有丝素纳米纤维的不锈钢棒浸渍含有亲水的柔性的交联剂的改性丝素蛋白混合溶液中，丝素蛋白与交联剂质量比为1:0.5，交联剂为聚乙二醇二缩水甘油醚，改性丝素蛋白混合溶液中丝素蛋白浓度为60mg/ml，浸渍60秒，取出置于35℃环境下沿圆周方向旋转成膜，旋转速度为60rpm，形成支架覆膜的内层。
38.(4)将碱处理后的涤纶丝采用编织技术在作为支架覆膜内层的外表面编织成120
°
编织角、4根/cm轴向编织密度的涤纶管状织物，形成血管支架覆膜的芯层。
39.(5)将上述步骤(4)的血管支架覆膜的芯层浸渍于上述步骤(3)中含交联剂的改性丝素蛋白混合溶液中，浸渍60秒，取出置于35℃环境下沿圆周方向旋转成膜，旋转速度为60rpm，完成一次浸渍处理；并控制所述膜表面保持润湿，重复浸渍处理6次，形成血管支架覆膜的外层，进而得到血管支架覆膜，最后将血管支架覆膜浸泡于37℃无菌去离子水中1天，去除未反应的交联剂和丝素分子并溶蚀所述的丝素纳米纤维，得到具有仿生界面的涤纶/丝素复合血管支架覆膜。
40.经检测，上述具有仿生界面的涤纶/丝素复合血管支架覆膜具有优异的促内皮化能力，内皮细胞在其表面培养3天后，本发明的涤纶/丝素复合血管支架覆膜上的细胞粘附率与对照实施例4相比增加了59％，细胞增殖率与对照实施例4相比增加了48％，内皮细胞no释放量与对照实施例4相比增加了42％。
41.实施例2:
42.(1)将家蚕丝按1:50g/ml的浴比置于质量浓度0.1％的碳酸钠水溶液中，在98～100℃温度下处理三次，每次30分钟，然后用去离子水充分清洗，置于60℃烘箱干燥12小时，得到脱胶后的丝素纤维。称取脱胶后的丝素纤维按1:10g/ml的浴比在65
±
5℃水浴环境下完全溶解于9.3m的溴化锂溶液中，得到丝素溶解液；
43.将丝素溶解液灌注于透析袋内(截留分子量为14kda)，采用去离子水透析3天得到纯化后的丝素蛋白水溶液。将纯化后的丝素蛋白水溶液浓缩、调整至所需浓度。
44.(2)将涤纶丝按1:50g/ml的浴比置于质量浓度1％的碳酸钠溶液，在98～100℃温度下处理三次，每次2小时，然后用去离子水充分清洗，得到预处理后的涤纶丝。将预处理后的涤纶丝按1:50g/ml的浴比置于20g/l的氢氧化钠水溶液中表面活化处理，表面活化处理温度为35
±
5℃，处理时间为1小时，再经去离子水洗涤，得到碱处理后的涤纶丝。
45.(3)以140mg/ml丝素蛋白水溶液作为电纺液，通过静电纺丝在旋转速度为1500rpm的不锈钢棒(直径为10mm)上电纺丝素纳米纤维，丝素纳米纤维平均直径为700
±
150nm，平均取向度为50
±
18％，得到卷绕有丝素纳米纤维的不锈钢棒；然后将卷绕有丝素纳米纤维的不锈钢棒浸渍含有亲水的柔性的交联剂的改性丝素蛋白混合溶液中，丝素蛋白与交联剂质量比为1:0.5，交联剂为聚乙二醇二缩水甘油醚，丝素蛋白混合液中丝素蛋白浓度为60mg/ml，浸渍60秒，取出置于35℃环境下沿圆周方向旋转成膜，旋转速度为60rpm，形成支
架覆膜的内层。
46.(4)将碱处理后的涤纶丝采用编织技术在作为支架覆膜内层的外表面编织成120
°
编织角、4根/cm轴向编织密度的涤纶管状织物，形成血管支架覆膜的芯层。
47.(5)将上述步骤(4)的血管支架覆膜的芯层浸渍于上述步骤(3)中含交联剂的改性丝素蛋白混合溶液中，浸渍60秒，取出置于35℃环境下沿圆周方向旋转成膜，旋转速度为60rpm，完成一次浸渍处理；并控制所述膜表面保持润湿，重复浸渍处理6次，形成血管支架覆膜的外层，进而得到血管支架覆膜，最后将血管支架覆膜浸泡于37℃无菌去离子水中1天，去除未反应的交联剂和丝素分子并溶蚀所述的丝素纳米纤维，得到具有仿生界面的涤纶/丝素复合血管支架覆膜。
48.经检测，上述具有仿生界面的涤纶/丝素复合血管支架覆膜具有优异的促内皮化能力，内皮细胞在其表面培养3天后，本发明的涤纶/丝素复合血管支架覆膜上的细胞粘附率与对照实施例4相比增加了75％，细胞增殖率与对照实施例4相比增加了69％，内皮细胞no释放量与对照实施例4相比增加了61％。
49.实施例3:
50.(1)将家蚕丝按1:50g/ml的浴比置于质量浓度0.1％的碳酸钠水溶液中，在98～100℃温度下处理三次，每次30分钟，然后用去离子水充分清洗，置于60℃烘箱干燥12小时，得到脱胶后的丝素纤维。称取脱胶后的丝素纤维按1:10g/ml的浴比在65
±
5℃水浴环境下完全溶解于9.3m的溴化锂溶液中，得到丝素溶解液；
51.将丝素溶解液灌注于透析袋内(截留分子量为14kda)，采用去离子水透析3天得到纯化后的丝素蛋白水溶液。将纯化后的丝素蛋白水溶液浓缩、调整至所需浓度。
52.(2)将涤纶丝按1:50g/ml的浴比置于质量浓度1％的碳酸钠溶液，在98～100℃温度下处理三次，每次2小时，然后用去离子水充分清洗，得到预处理后的涤纶丝；将预处理后的涤纶丝按1:50g/ml的浴比置于20g/l的氢氧化钠水溶液中表面活化处理，表面活化处理温度为35
±
5℃，处理时间为1小时，再经去离子水洗涤，得到碱处理后的涤纶丝。
53.(3)以140mg/ml丝素蛋白水溶液作为电纺液，通过静电纺丝在旋转速度为3000rpm的不锈钢棒(直径为1～30mm)上电纺丝素纳米纤维，丝素纳米纤维平均直径为700
±
150nm，平均取向度为80
±
10％，得到卷绕有丝素纳米纤维的不锈钢棒；然后将卷绕有丝素纳米纤维的不锈钢棒浸渍含有亲水的柔性的交联剂的改性丝素蛋白混合溶液中，丝素蛋白与交联剂质量比为1:0.5，交联剂为聚乙二醇二缩水甘油醚，丝素蛋白混合液中丝素蛋白浓度为60mg/ml，浸渍60秒，取出置于35℃环境下沿圆周方向旋转成膜，旋转速度为60rpm，形成支架覆膜的内层。
54.(4)将碱处理后的涤纶丝采用编织技术在作为支架覆膜内层的外表面编织成120
°
编织角、4根/cm轴向编织密度的涤纶管状织物，形成血管支架覆膜的芯层。
55.(5)将上述步骤(4)的血管支架覆膜的芯层浸渍于上述步骤(3)中含交联剂的改性丝素蛋白混合溶液中，浸渍60秒，取出置于35℃环境下沿圆周方向旋转成膜，旋转速度为60rpm，完成一次浸渍处理；并控制所述膜表面保持润湿，重复浸渍处理6次，形成血管支架覆膜的外层，进而得到血管支架覆膜，最后将血管支架覆膜浸泡于37℃无菌去离子水中1天，去除未反应的交联剂和丝素分子并溶蚀所述的丝素纳米纤维，得到具有仿生界面的涤纶/丝素复合血管支架覆膜。
56.经检测，上述具有仿生界面的涤纶/丝素复合血管支架覆膜具有优异的促内皮化能力，内皮细胞在其表面培养3天后，本发明的涤纶/丝素复合血管支架覆膜上的细胞粘附率与对照实施例4相比增加了94％，细胞增殖率与对照实施例4相比增加了90％，内皮细胞no释放量与对照实施例4相比增加了80％。
57.上述具有仿生界面的涤纶/丝素复合血管支架覆膜具有卓越的力学性能，覆膜内表面按照国标检测方法测定该覆膜轴向抗拉伸强度为12.0mpa，断裂伸长率为120％，圆周向抗拉伸强度为6.0mpa，断裂伸长率为50％，水爆破强度为3500mmhg，顺应性为10.0％/100mmhg，整体水渗漏在120mmhg水压下小于10ml/min.cm2，溶血率《0.1％。
58.实施例4(对照例):
59.(1)将家蚕丝按1:50g/ml的浴比置于质量浓度0.1％的碳酸钠水溶液中，在98～100℃温度下处理三次，每次30分钟，然后用去离子水充分清洗，置于60℃烘箱干燥12小时，得到脱胶后的丝素纤维。称取脱胶后的丝素纤维按1:10g/ml的浴比在65
±
5℃水浴环境下完全溶解于9.3m的溴化锂溶液中，得到丝素溶解液；
60.将丝素溶解液灌注于透析袋内(截留分子量为14kda)，采用去离子水透析3天得到纯化后的丝素蛋白水溶液。将纯化后的丝素蛋白水溶液浓缩、调整至所需浓度。
61.(2)将涤纶丝按1:50g/ml的浴比置于质量浓度1％的碳酸钠溶液，在98～100℃温度下处理三次，每次2小时，然后用去离子水充分清洗，得到预处理后的涤纶丝；将预处理后的涤纶丝按1:50g/ml的浴比置于20g/l的氢氧化钠水溶液中表面活化处理，表面活化处理温度为35
±
5℃，处理时间为1小时，再经去离子水洗涤，得到碱处理后的涤纶丝。
62.(3)将不锈钢棒(直径为10mm)浸渍于含有亲水的柔性的交联剂的改性丝素蛋白混合溶液中，丝素蛋白与交联剂质量比为1:0.5，交联剂为聚乙二醇二缩水甘油醚，丝素蛋白混合液中丝素蛋白浓度为60mg/ml，浸渍60秒，取出置于35℃环境下沿圆周方向旋转成膜，旋转速度为60rpm，形成支架覆膜的内层。
63.(4)将碱处理后的涤纶丝采用编织技术在作为支架覆膜内层的外表面编织成120
°
编织角、4根/cm轴向编织密度的涤纶管状织物，形成血管支架覆膜的芯层。
64.(5)将上述步骤(4)的血管支架覆膜的芯层浸渍于上述步骤(3)中含交联剂的改性丝素蛋白混合溶液中，浸渍60秒，取出置于35℃环境下沿圆周方向旋转成膜，旋转速度为60rpm，完成一次浸渍处理；并控制所述膜表面保持润湿，重复浸渍处理6次，形成血管支架覆膜的外层，进而得到血管支架覆膜，最后将血管支架覆膜浸泡于37℃无菌去离子水中1天，去除未反应的交联剂和丝素分子，得到涤纶/丝素复合血管支架覆膜。
65.说明：以上实施例仅用以说明本发明而并非限制本发明所描述的技术方案；因此，尽管本说明书参照上述的各个实施例对本发明已进行了详细的说明，但是本领域的普通技术人员应当理解，仍然可以对本发明进行修改或等同替换；而一切不脱离本发明的精神和范围的技术方案及其改进，其均应涵盖在本发明的权利要求范围内。

技术特征：
1.一种具有仿生界面的涤纶/丝素复合血管支架覆膜，其特征在于，所述改性涤纶血管支架覆膜为内层、芯层和外层结构；以涤纶管状织物为芯层，以改性丝素纳米纤维为内层和外层；所述改性涤纶血管支架覆膜的轴向抗拉伸强度为12.0mpa，断裂伸长率为120％，圆周向抗拉伸强度为6.0mpa，断裂伸长率为50％，水爆破强度为3500mmhg，顺应性为10.0％/100mmhg，整体水渗漏在120mmhg水压下小于10ml/min.cm2，溶血率<0.1％。2.一种具有仿生界面的涤纶/丝素复合血管支架覆膜的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将家蚕丝采用沸水、碳酸钠、碳酸氢钠或生物酶中的任意一种进行脱胶，获得家蚕丝素纤维，然后完全溶解于溴化锂溶液中，得到丝素溶解液；将所述丝素溶解液灌注于透析袋内，采用去离子水透析后，经过滤得到纯化后的丝素蛋白水溶液，蒸发浓缩调整丝素蛋白水溶液浓度为10～200mg/ml；(2)将涤纶丝置于碳酸钠溶液中处理一段时间后，经去离子水洗涤，完成去油脱浆处理，重复去油脱浆处理数次，最后得到预处理的涤纶丝；将所述预处理后的涤纶丝再置于氢氧化钠溶液中进行表面活化处理，表面活化处理后经去离子水洗涤，得到碱处理后的涤纶丝；(3)支架覆膜内层的制备；(a)以步骤(1)的丝素蛋白水溶液作为电纺液，通过静电纺丝在圆柱形辅助棒上纺制丝素纳米纤维，得到带有丝素纳米纤维的辅助棒；所述丝素蛋白水溶液浓度为50～180mg/ml，所述丝素纳米纤维的平均直径为100～5000nm，丝素纳米纤维的平均取向度为30～90％；(b)在步骤(1)的丝素蛋白水溶液中加入亲水的柔性的交联剂，得到改性丝素蛋白混合溶液；再将带有丝素纳米纤维的辅助棒于改性丝素蛋白混合溶液中浸渍，浸渍后取出置于20～50℃环境下旋转成膜，完成一次浸渍处理；重复浸渍处理数次，形成支架覆膜的内层；所述改性丝素蛋白混合溶液中丝素蛋白浓度为30～100mg/ml；(4)将步骤(2)碱处理后的涤纶丝采用编织技术在步骤(3)支架覆膜内层的外表面编织30～150
°
编织角、1～20根/cm轴向编织密度的涤纶管状织物，形成血管支架覆膜的芯层；(5)将步骤(4)的血管支架覆膜的芯层浸泡于上述步骤(3)中制备的改性丝素蛋白混合溶液，浸渍后取出置于20～50℃环境下旋转成膜，即完成一次浸渍处理；重复浸渍处理数次，得到血管支架覆膜；最后将血管支架覆膜浸泡于无菌去离子水中，去除未反应的交联剂和丝素分子并溶蚀丝素纳米纤维，得到具有仿生界面的涤纶/丝素复合血管支架覆膜。3.根据权利要求2所述的一种具有仿生界面的涤纶/丝素复合血管支架覆膜的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述溴化锂溶液的浓度为9.3m；所述透析袋为半透膜，截留分子量为3～50kda，采用去离子水透析3天。4.根据权利要求2所述的一种具有仿生界面的涤纶/丝素复合血管支架覆膜的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述碳酸钠溶液的质量浓度为1％，去油脱浆处理的温度为95～100℃，处理时间为2小时；所述处理数次为2-5次；所述氢氧化钠溶液的浓度为20～50g/l，表面活化处理温度为30～80℃，处理时间为1～3小时。5.根据权利要求2所述的一种具有仿生界面的涤纶/丝素复合血管支架覆膜的制备方法，其特征在于，步骤(3)的(a)-(b)中所述圆柱形辅助棒为不锈钢棒，直径为1～30mm。6.根据权利要求2所述的一种具有仿生界面的涤纶/丝素复合血管支架覆膜的制备方
法，其特征在于，步骤(3)的(a)中静电纺丝时圆柱形辅助棒的旋转速度为100～3000rpm。7.根据权利要求2所述的一种具有仿生界面的涤纶/丝素复合血管支架覆膜的制备方法，其特征在于，步骤(3)的(b)中所述丝素蛋白与交联剂质量比为1.0:(0.3～1.0)，所述交联剂为聚乙二醇二缩水甘油醚，所述于改性丝素蛋白混合溶液中浸渍的时间为10～60秒，重复浸渍处理数次为0～5次，旋转成膜时的旋转速度为20～80rpm，旋转方向为沿辅助棒圆周方向。8.根据权利要求2所述的一种具有仿生界面的涤纶/丝素复合血管支架覆膜的制备方法，其特征在于，步骤(4)中所述涤纶丝为涤纶单丝和涤纶复丝的任意一种，规格为5～200d。9.根据权利要求2所述的一种具有仿生界面的涤纶/丝素复合血管支架覆膜的制备方法，其特征在于，步骤(5)中于改性丝素蛋白混合溶液中浸渍的时间为10～60秒，旋转成膜时的旋转速度为20～80rpm，旋转方向为沿辅助棒圆周方向，时间为10～30分钟；所述重复浸渍处理数次为2～10次。10.根据权利要求2所述的一种具有仿生界面的涤纶/丝素复合血管支架覆膜的制备方法，其特征在于，步骤(5)中所述无菌去离子水的温度为4～37℃，浸泡时间为1～3天。

技术总结
本发明公开了一种具有仿生界面的涤纶/丝素复合血管支架覆膜及其制备方法，包括以下步骤：(1)采用静电纺丝技术在芯棒表面纺制丝素纳米纤维，然后快速浸渍于混合有柔性交联剂的改性丝素蛋白混合溶液，经旋转烘干并重复此步骤数次后形成血管支架覆膜的内层；(2)采用编织技术在支架覆膜内层的基础上编织涤纶管状织物，形成血管支架覆膜的芯层；(3)将支架覆膜的芯层浸渍于混合有柔性交联剂的改性丝素蛋白混合溶液，旋转烘干并重复数次，形成层层紧密结合的血管支架覆膜，最后浸泡于去离子水中溶蚀纳米纤维，形成具有紧密连接的扁平岛状微观形貌的覆膜内表面，得到具有仿生血管内膜界面的能快速诱导内皮化的涤纶/丝素复合血管支架覆膜。架覆膜。


技术研发人员：王建南 俞杨销 裔洪根 许建梅
受保护的技术使用者：苏州大学
技术研发日：2023.03.22
技术公布日：2023/7/13