一种白细胞制片方法及白细胞制片装置与流程

1.本技术涉及医疗器械技术领域，具体是涉及一种白细胞制片方法及白细胞制片装置。


背景技术：

2.细胞学检测是将细胞样本涂布在玻片上，以完成细胞制片，然后通过显微镜对玻片上的细胞进行观察，其中白细胞检测能够对白血病等疾病具有良好的检测效果，由于样本中除了包含白细胞，还包含其他细胞，比如红细胞，因此，在细胞制片的过程中，需要将白细胞分离出来。
3.现有技术中，一般采用血液离心法、密度离心法或者抗体法来分离白细胞，血液离心法由于白细胞界面较薄，人工提取白细胞纯度及效率不高，密度离心法需要反复离心洗涤去除分离液，才可以达到分离细胞的目的，但这也造成了操作过程中费时费力或者白细胞质量不高的情况，分离液有毒害性较高，抗体法在分离白细胞时，对环境要求高且需要的抗体浓度高，成本昂贵。


技术实现要素：

4.本技术主要是提供一种白细胞制片方法及白细胞制片装置，能够提高制片效率，降低制片成本。
5.为解决上述技术问题，本技术采用的一个技术方案是：提供一种白细胞制片方法，所述白细胞制片方法包括：在待制片样本中加入裂解液，以使得所述裂解液裂解所述待制片样本中的红细胞；将裂解后的待制片样本添加至沉降仓，以使得所述沉降仓中的待制片样本在玻片上沉降以形成细胞层；对所述玻片上的细胞层依次进行固定及染色。
6.在一具体实施方式中，所述将裂解后的待制片样本添加至沉降仓，以使得所述沉降仓中的待制片样本在玻片上沉降以形成细胞层包括：将裂解后的待制片样本添加至沉降仓；对所述沉降仓进行离心处理，以在离心作用下，所述待制片样本中的细胞在所述玻片上形成细胞层；或所述将裂解后的待制片样本添加至沉降仓，以使得所述沉降仓中的待制片样本在玻片上形成细胞层包括：将裂解后的待制片样本添加至沉降仓；使用粘附载玻片吸附所述待制片样本中的细胞，以使得被吸附的细胞在所述粘附载玻片上形成细胞层。
7.在一具体实施方式中，所述粘附载玻片包括载玻片及电荷介质，所述电荷介质设置于所述载玻片上，以形成正电荷层。
8.在一具体实施方式中，所述电荷介质选自有机溶剂、氨基硅烷、白蛋白、赖氨酸中的至少一种，所述有机溶剂、氨基硅烷、白蛋白、赖氨酸中的至少一种平铺于所述载玻片上；或所述电荷介质选自peg、pvp、pei、聚丙烯酰胺中的至少一种，所述peg、pvp、pei、聚丙烯酰胺中的至少一种粘附于所述载玻片上。
9.在一具体实施方式中，所述裂解液的成分包括裂解剂、表面活性剂、缓冲剂、固定剂、防腐剂。
10.在一具体实施方式中，所述裂解剂为氯化铵，所述表面活性剂选自吐温20、吐温80、tritonx-100中的至少一种，所述缓冲剂选自氯化钠、4-羟乙基哌嗪乙磺酸、碳酸二氢钾、碳酸氢钠、碳酸钠、氯化钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、盐酸、氢氧化钠、氢氧化钾中的至少一种，所述固定剂选自甲醛、丙酮、甲醇中的至少一种，所述防腐剂选自pc-300、bit-10、gml2中的至少一种。
11.在一具体实施方式中，所述裂解液的成分包括：2g/l的氯化钠、0.4g/l的吐温20、8.2g/l的氯化铵、3g/l的4-羟乙基哌嗪乙磺酸、0.2g/l的氢氧化钠、0.8g/l的碳酸钾、0.2g/l的pc-300；或9.45g/l的氯化铵、0.5g/l的tritonx-100、3g/l的4-羟乙基哌嗪乙磺酸、2.95g/l的二水磷酸氢二钠、3.02g/l的磷酸二氢钾、1.2g/l的碳酸氢钾、1.5/lml的甲醛、0.2g/l的gml2。
12.在一具体实施方式中，所述待制片样本与所述裂解液的比例为：所述待制片样本100-500ul，所述裂解液3-6ml；或所述在待制片样本中加入裂解液，以使得所述裂解液裂解所述待制片样本中的红细胞包括：将所述裂解液添加至样本容器，所述待制片样本盛放在所述样本容器中，以使得所述裂解液与所述待制片样本形成混匀液；对所述混匀液进行孵育；对所述样本容器进行充分震荡。
13.在一具体实施方式中，所述离心处理的离心时间为3～8min，离心力为1000-2000g；或所述粘附载玻片的吸附时间为3～8分钟。
14.为解决上述技术问题，本技术采用的另一个技术方案是：提供一种根据上述白细胞制片方法进行制片的白细胞制片装置，所述白细胞制片装置包括：裂解单元，用于注入待制片样本中及裂解液，以使得所述裂解液裂解所述待制片样本中的红细胞；沉降单元，所述沉降单元包括沉降仓，所述沉降仓用于注入裂解后的待制片样本，以使得所述沉降仓中的待制片样本在玻片上沉降以形成细胞层；染色单元，用于对玻片上的细胞层依次进行固定及染色。
15.本技术的有益效果是：区别于现有技术的情况，本技术实施方式提供的白细胞制片方法，所述白细胞制片方法包括：在待制片样本中加入裂解液，以使得所述裂解液裂解所述待制片样本中的红细胞；将裂解后的待制片样本添加至沉降仓，以使得所述沉降仓中的待制片样本在玻片上沉降以形成细胞层；对所述玻片上的细胞层依次进行固定及染色。通过这种方法，在提高包细胞提取效果的前提下，相比于现有技术中的血液离心法，不需要人工提取白细胞，避免了人工提取导致白细胞纯度不高，且提取效率较低的问题，相比于现有技术中的密度离心法，不需要洗涤去除分离液，提高白细胞的提取效率，也避免了分离液造成的毒性污染，相比于现有技术中的抗体法，降低了成本。
附图说明
16.为了更清楚地说明本技术实施方式中的技术方案，下面将对实施方式描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本技术的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
17.图1是本技术提供的白细胞制片方法实施方式的流程示意图；
18.图2是图1中步骤s11一实施方式的具体流程示意图；
19.图3是图1中步骤s12一实施方式的具体流程示意图；
20.图4是图3中步骤s121的沉降仓的结构示意图；
21.图5是图1中步骤s12另一实施方式的具体流程示意图；
22.图6是图5中步骤s12b的粘附载玻片结构示意图；
23.图7是采用图3中步骤s122完成白细胞制片的效果图；
24.图8是采用图5中步骤s12b完成白细胞制片的效果图；
25.图9是未采用图1中步骤s11～s13完成白细胞制片的效果图；
26.图10是本技术提供的白细胞制片方法另一实施方式的流程示意图；
27.图11是本技术提供的白细胞制片装置实施方式的立体结构示意图。
具体实施方式
28.下面结合附图和实施方式，对本技术作进一步的详细描述。特别指出的是，以下实施方式仅用于说明本技术，但不对本技术的范围进行限定。同样的，以下实施方式仅为本技术的部分实施方式而非全部实施方式，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施方式，都属于本技术保护的范围。
29.本技术中的术语“第一”、“第二”、“第三”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此，限定有“第一”、“第二”、“第三”的特征可以明示或者隐含地包括至少一个该特征。本技术的描述中，“多个”的含义是至少两个，方式如两个，三个等，除非另有明确具体的限定。本技术实施方式中所有方向性指示(诸如上、下、左、右、前、后
……
)仅用于解释在某一特定姿态(如附图所示)下各部件之间的相对位置关系、运动情况等，如果该特定姿态发生改变时，则该方向性指示也相应地随之改变。此外，术语“包括”和“具有”以及它们任何变形，意图在于覆盖不排他的包含。方式如包含了一系列步骤或单元的过程、方法、系统、产品或设备没有限定于已列出的步骤或单元，而是可选地还包括没有列出的步骤或单元，或可选地还包括对于这些过程、方法、产品或设备固有的其它步骤或单元。
30.在本文中提及“实施方式”意味着，结合实施方式描述的特定特征、结构或特性可以包含在本技术的至少一个实施方式中。在说明书中的各个位置出现该短语并不一定均是指相同的实施方式，也不是与其它实施方式互斥的独立的或备选的实施方式。本领域技术人员显式地和隐式地理解的是，本文所描述的实施方式可以与其它实施方式相结合。
31.请参阅图1，图1是本技术提供的白细胞制片方法实施方式的流程示意图，本实施方式中的白细胞制片方法可具体包括：
32.s11：在待制片样本中加入裂解液，以使得裂解液裂解待制片样本中的红细胞；
33.请参阅图2，图2是图1中步骤s11一实施方式的具体流程示意图，在该一实施方式中，步骤s11可具体包括：
34.s111：将裂解液添加至样本容器，以使得裂解液与待制片样本形成混匀液；
35.具体的，在实际应用时，待制片样本可盛放在样本容器中，然后将裂解液添加至该样本容器中，使得待制片样本与裂解液在样本容器中混匀，从而形成待制片样本与裂解液的混匀液。
36.其中，在本实施方式中，待制片样本与裂解液的比例为：待制片样本100-500ul，裂
解液3-6ml。
37.其中，在本实施方式中，裂解液的成分包括裂解剂、表面活性剂、缓冲剂、固定剂、防腐剂，裂解剂的作用为裂解样本中的红细胞，表面活性剂的作用为辅助裂解，提高裂解效果，缓冲剂的作用为调节混匀液的ph值以及调节渗透压，固定剂的作用为维持细胞形态，也即维持没有被裂解的细胞的形态，防腐剂的作用为防腐，避免滋生细菌。
38.可选地，在本实施方式中，裂解剂为氯化铵，表面活性剂选自吐温20、吐温80、tritonx-100中的至少一种，缓冲剂选自氯化钠、4-羟乙基哌嗪乙磺酸、碳酸二氢钾、碳酸氢钠、碳酸钠、氯化钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、盐酸、氢氧化钠、氢氧化钾中的至少一种，固定剂选自甲醛、丙酮、甲醇中的至少一种，防腐剂选自pc-300、bit-10、gml2中的至少一种。
39.在一具体实施方式中，裂解液的成分包括：2g/l的氯化钠、0.4g/l的吐温20、8.2g/l的氯化铵、3g/l的4-羟乙基哌嗪乙磺酸、0.2g/l的氢氧化钠、0.8g/l的碳酸钾、0.2g/l的pc-300。
40.在又一具体实施方式中，裂解液的成分包括：9.45g/l的氯化铵、0.5g/l的tritonx-100、3g/l的4-羟乙基哌嗪乙磺酸、2.95g/l的二水磷酸氢二钠、3.02g/l的磷酸二氢钾、1.2g/l的碳酸氢钾、1.5/lml的甲醛、0.2g/l的gml2。
41.可以理解的，上述两种具体实施方式中所表示的裂解液的成分是为了便于说明所举的例子，在具体应用时，裂解液的成分也可以根据实际所需选择其他的成分，对此不做限定。
42.可以理解的，在本实施方式中，待制片样本即为血液样本。
43.s112：对混匀液进行孵育；
44.具体的，当上述的混匀完成后，对待制片样本与裂解液形成的混匀液进行孵育，在本实施方式中，该混匀液的孵育采用常温孵育，孵育时间为5～20min，可以理解的，孵育温度及孵育时间可根据实际所需进行调整，对此不做限定。
45.s113：对样本容器进行充分震荡。
46.具体的，在在实际应用时，可通过人工震荡或其他设备震荡的方式对样本容器进行充分震荡，从而使得裂解液裂解待制片样本中的红细胞，通过对样本容器进行充分震荡，能够提高裂解液的裂解效率。
47.进一步参阅图1，本实施方式中的白细胞制片方法还包括：
48.s12：将裂解后的待制片样本添加至沉降仓，以使得沉降仓中的待制片样本在玻片上沉降以形成细胞层；
49.请一并参阅图3及图4，图3是图1中步骤s12一实施方式的具体流程示意图，图4是图3中步骤s121的沉降仓的结构示意图，在该一实施方式中，步骤s12可具体包括：
50.s121：将裂解后的待制片样本添加至沉降仓；
51.具体的，将上述充分震荡后的待制片样本与裂解液的混匀液添加至沉降仓110中。
52.s122：对沉降仓进行离心处理，以在离心作用下，待制片样本中的细胞在玻片上形成细胞层。
53.具体的，将沉降仓110放置于离心机中，通过离心机对沉降仓110进行离心处理，在离心作用下，待制片样本中比重较大的细胞优先沉降至玻片120上，从而在玻片120上形成均匀的细胞层。
54.其中，在本实施方式中，上述离心处理的离心时间为3～8min，离心力为1000-2000g，当然，在其他实施方式中，离心时间与离心力也可以根据实际情况进行调整，对此不做限定。
55.可以理解的，由于待制片样本中的红细胞已经被裂解，因此，在离心作用下，沉降至玻片上细胞只有白细胞。
56.请参阅图5，图5是图1中步骤s12另一实施方式的具体流程示意图，在该另一实施方式中，步骤s12可具体包括：
57.s12a：将裂解后的待制片样本添加至沉降仓；
58.该步骤与上述步骤s121相同，在此不再赘述。
59.s12b：使用粘附载玻片吸附待制片样本中的细胞，以使得被吸附的细胞在粘附载玻片上形成细胞层。
60.具体的，在该另一实施方式中，玻片120选用粘附载玻片，由于粘附载玻片120的表面带有正电荷，因此，待制片样本中的细胞在电荷作用下被吸附至粘附载玻片，从而在粘附载玻片120上形成均匀的细胞层。
61.请参阅图6，图6是图5中步骤s12b的粘附载玻片结构示意图，其中，粘附载玻片120包括载玻片1201及电荷介质1202，电荷介质1202设置于载玻片1201上，以形成正电荷层，从而使得待制片样本中的细胞被正电荷层的电荷作用吸附所粘附。
62.在一具体实施方式中，电荷介质1202包括有机溶剂、氨基硅烷、白蛋白、赖氨酸中的至少一种，有机溶剂、氨基硅烷、白蛋白、赖氨酸中的至少一种平铺于载玻片上。
63.在另一具体实施方式中，电荷介质1202选自peg、pvp、pei、聚丙烯酰胺中的至少一种，peg、pvp、pei、聚丙烯酰胺中的至少一种粘附于载玻片上。
64.其中，在本实施方式中，上述粘附载玻片120的吸附时间为3～8分钟，当然，在其他实施方式中，吸附时间也可以根据实际情况进行调整，对此不做限定。
65.可以理解的，由于待制片样本中的红细胞已经被裂解，因此，在粘附载玻片120的吸附作用下，吸附至粘附载玻片120上细胞只有白细胞。
66.进一步参阅图4，沉降仓110包括沉降管1101及底座1102，底座1102设有插槽110b，该插槽110b用于插置玻片120，沉降管1101安装在底座1102上，且设有容置腔110a，裂解后的待制片样本添加至容置腔110a内，然后如上述步骤s122所描述的，在离心作用下，待制片样本中的细胞在玻片120上形成细胞层，或如上述步骤s12b所描述的，粘附载玻片120吸附待制片样本中的细胞，以使得被吸附的细胞在粘附载玻片120上形成细胞层。
67.进一步参阅图1，本实施方式中的白细胞制片方法还包括：
68.s13：对玻片上的细胞层依次进行固定及染色。
69.具体的，在实际应用时，步骤s13中的染色可以直接在沉降仓110中进行，也可以将玻片120取出，然后在其他染色容器中进行。
70.其中，当步骤s13中的染色在沉降仓110中进行时，步骤s13中对玻片120上的细胞层进行染色之前，还需要吸去沉降仓110中的上清液，该上清液为沉降仓110中待制片样本与裂解液的混匀液被离心或吸附之后残留的废液，在染色之前，需要先将该上清液吸去，然后再向沉降仓110中添加染色试剂，使得玻片120上的细胞层完成染色。
71.可以理解的，对玻片120上的细胞层进行染色的染色方法可以选用瑞氏-姬姆萨染
色或巴氏染色等，对此不做限定。
72.为了便于说明，本实施方式中，以瑞氏-姬姆萨染色为例，先添加固定液，比如甲醇，以对玻片上的细胞层进行细胞固定，然后再吸去固定液并加入0.5-1ml瑞氏姬姆萨染液，最后加入磷酸缓冲液2-5ml常温孵育，进而完成染色。
73.其中，细胞固定的时间可为1min，瑞氏姬姆萨染液的染色时间可以为1min，常温孵育的时间可以为2-5min。
74.本实施方式中，通过在待制片样本中加入裂解液，以使得所述裂解液裂解所述待制片样本中的红细胞；将裂解后的待制片样本添加至沉降仓，以使得所述沉降仓中的待制片样本在玻片上形成细胞层；对所述玻片上的细胞层依次进行固定及染色的方法完成白细胞制片，在提高包细胞提取效果的前提下，相比于现有技术中的血液离心法，不需要人工提取白细胞，避免了人工提取导致白细胞纯度不高，且提取效率较低的问题，相比于现有技术中的密度离心法，不需要洗涤去除分离液，提高白细胞的提取效率，也避免了分离液造成的毒性污染，相比于现有技术中的抗体法，降低了成本。
75.请一并参阅图7、图8及图9，图7是采用图3中步骤s122完成白细胞制片的效果图，图8是采用图5中步骤s12b完成白细胞制片的效果图，图9是未采用图1中步骤s11～s13完成白细胞制片的效果图，可以很明显的看出，在相同视野下，图7与图8中的白细胞130的数量远远大于图9中白细胞130的数量，也即采用本实施方式的白细胞制片方法完成的白细胞制片，提高了单位视野内的白细胞130的数量，提高了制片效果，降低了镜检观察的难度。
76.请参阅图10，图10是本技术提供的白细胞制片方法另一实施方式的流程示意图，本实施方式中的步骤s22～s24分别与上述实施方式中的步骤s11～s13相同，在此不再赘述，本实施方式中的白细胞制片方法还包括：
77.s21：将待制片样本添加至样本容器，并静置至常温状态。
78.具体的，在实际应用时，取得的血细胞样本的温度一般都是高于常温的，因此，在取得血细胞样本之后，将血细胞样本添加至样本容器中，并静置一段时间，使得血细胞样本恢复至常温状态。
79.请参阅图11，图11是本技术提供的白细胞制片染色装置30实施方式的立体结构示意图，本实施方式中的白细胞制片染色装置30根据上述任一实施方式中的白细胞制片方法进行制片和染色，本实施方式中的白细胞制片装置30包括上样单元31、沉降单元32、染色单元33及转移单元(未示出)，其中转移单元位于制片装置顶部，且可以在制片装置上方沿三维方向移动。可以理解的，转移单元包括至少一个抓手和至少一组针组件，抓手可以用于抓取试管等容器，针组件可以用于吸/弃tip头或添加样本/裂解液/清洗液/染色液等，转移单元用于在上样单元31、沉降单元32、染色单元33之间转运样本和/或试剂(包括但不限于裂解液/清洗液/染色液等)。
80.上样单元31用于装载和存储样本容器及其他耗材，其他耗材包括但不限于离心管、tip头等。上样单元31包括多个样本容器放置位，转移单元向放置位上的样本容器添加裂解液，以使得裂解液裂解待制片样本中的红细胞。
81.转移单元吸取样本容器中裂解后的样本并转移至离心管中准备离心。后转移单元再抓取装载有裂解后的样本的离心管转移至离心单元(未示出)进行离心。转移单元再将离心后的离心管转移至缓存位，并从位于缓存位上的离心管中复溶离心后的样本并吸取样本
且将待制片样本添加至沉降单元32的沉降仓110中，沉降仓110用于注入裂解后的待制片样本，以使得沉降仓110中的待制片样本在玻片上沉降以形成细胞层；后转移单元再将沉降仓110的玻片取出并转移至染色单元33，以使染色单元33对玻片120上的细胞层依次进行固定及染色。
82.在其他实施例中，转移单元也可以直接吸取样本容器中裂解后的待制片样本并将其添加至沉降单元32的沉降仓110中，沉降仓110用于注入裂解后的待制片样本，以使得沉降仓110中的待制片样本在玻片上沉降以形成细胞层；后转移单元再抓取沉降仓并转移至离心单元(未示出)进行离心。离心后转移单元再将沉降仓110的玻片取出并转移至染色单元33，以使染色单元33对玻片120上的细胞层依次进行固定及染色。
83.在另一实施例中，沉降单元也可以和染色单元集成为一体，使得在同一工位先进行沉降再通过转移单元加注染色液直接进行染色。
84.可以理解的，上述上料单元31、沉降单元32及染色单元33的具体操作方法及原理可参阅上述任一实施方式的白细胞制片方法中的相关描述，在此不再赘述。
85.相比现有技术，本技术不仅不需要洗涤去除分离液，提高白细胞的提取效率，避免了分离液造成的毒性污染，实现了白细胞提高了制片效果，降低了镜检观察的难度。且实现了自动化提取、制片、染色的全流程操作，无需人工参与，提高准确性的同时更符合市场对自动化智能化的需求。
86.区别于现有技术的情况，本技术实施方式提供的白细胞制片方法，所述白细胞制片方法包括：在待制片样本中加入裂解液，以使得所述裂解液裂解所述待制片样本中的红细胞；将裂解后的待制片样本添加至沉降仓，以使得所述沉降仓中的待制片样本在玻片上沉降以形成细胞层；对所述玻片上的细胞层依次进行固定及染色。通过这种方法，在提高包细胞提取效果的前提下，相比于现有技术中的血液离心法，不需要人工提取白细胞，避免了人工提取导致白细胞纯度不高，且提取效率较低的问题，相比于现有技术中的密度离心法，不需要洗涤去除分离液，提高白细胞的提取效率，也避免了分离液造成的毒性污染，相比于现有技术中的抗体法，降低了成本。
87.以上所述仅为本技术的部分实施方式，并非因此限制本技术的保护范围，凡是利用本技术说明书及附图内容所作的等效装置或等效流程变换，或直接或间接运用在其他相关的技术领域，均同理包括在本技术的专利保护范围内。

技术特征：
1.一种白细胞制片方法，其特征在于，所述白细胞制片方法包括：在待制片样本中加入裂解液，以使得所述裂解液裂解所述待制片样本中的红细胞；将裂解后的待制片样本添加至沉降仓，以使得所述沉降仓中的待制片样本在玻片上沉降以形成细胞层；对所述玻片上的细胞层依次进行固定及染色。2.根据权利要求1所述的白细胞制片方法，其特征在于，所述将裂解后的待制片样本添加至沉降仓，以使得所述沉降仓中的待制片样本在玻片上沉降以形成细胞层包括：将裂解后的待制片样本添加至沉降仓；对所述沉降仓进行离心处理，以在离心作用下，所述待制片样本中的细胞在所述玻片上形成细胞层；或所述将裂解后的待制片样本添加至沉降仓，以使得所述沉降仓中的待制片样本在玻片上沉降以形成细胞层包括：将裂解后的待制片样本添加至沉降仓；使用粘附载玻片吸附所述待制片样本中的细胞，以使得被吸附的细胞在所述粘附载玻片上形成细胞层。3.根据权利要求2所述的白细胞制片方法，其特征在于，所述粘附载玻片包括载玻片及电荷介质，所述电荷介质设置于所述载玻片上，以形成正电荷层。4.根据权利要求3所述的白细胞制片方法，其特征在于，所述电荷介质选自有机溶剂、氨基硅烷、白蛋白、赖氨酸中的至少一种，所述有机溶剂、氨基硅烷、白蛋白、赖氨酸中的至少一种平铺于所述载玻片上；或所述电荷介质选自peg、pvp、pei、聚丙烯酰胺中的至少一种，所述peg、pvp、pei、聚丙烯酰胺中的至少一种粘附于所述载玻片上。5.根据权利要求1所述的白细胞制片方法，其特征在于，所述裂解液的成分包括裂解剂、表面活性剂、缓冲剂、固定剂、防腐剂。6.根据权利要求5所述的白细胞制片方法，其特征在于，所述裂解剂为氯化铵，所述表面活性剂选自吐温20、吐温80、tritonx-100中的至少一种，所述缓冲剂选自氯化钠、4-羟乙基哌嗪乙磺酸、碳酸二氢钾、碳酸氢钠、碳酸钠、氯化钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、盐酸、氢氧化钠、氢氧化钾中的至少一种，所述固定剂选自甲醛、丙酮、甲醇中的至少一种，所述防腐剂选自pc-300、bit-10、gml2中的至少一种。7.根据权利要求6所述的白细胞制片方法，其特征在于，所述裂解液的成分包括：2g/l的氯化钠、0.4g/l的吐温20、8.2g/l的氯化铵、3g/l的4-羟乙基哌嗪乙磺酸、0.2g/l的氢氧化钠、0.8g/l的碳酸钾、0.2g/l的pc-300；或9.45g/l的氯化铵、0.5g/l的tritonx-100、3g/l的4-羟乙基哌嗪乙磺酸、2.95g/l的二水磷酸氢二钠、3.02g/l的磷酸二氢钾、1.2g/l的碳酸氢钾、1.5/lml的甲醛、0.2g/l的gml2。8.根据权利要求1所述的白细胞制片方法，其特征在于，所述待制片样本与所述裂解液的比例为：所述待制片样本100-500ul，所述裂解液3-6ml；或
所述在待制片样本中加入裂解液，以使得所述裂解液裂解所述待制片样本中的红细胞包括：将所述裂解液添加至样本容器，所述待制片样本盛放在所述样本容器中，以使得所述裂解液与所述待制片样本形成混匀液；对所述混匀液进行孵育；对所述样本容器进行充分震荡。9.根据权利要求2所述的白细胞制片方法，其特征在于，所述离心处理的离心时间为3～8min，离心力为1000-2000g；或所述粘附载玻片的吸附时间为3～8分钟。10.一种根据权利要求1～9中任一项所述白细胞制片方法进行制片的白细胞制片装置，其特征在于，所述白细胞制片装置包括：上样单元，包括多个样本容器放置位，所述放置位上装载和存储有样本容器，所述样本容器中存放有样本；转移单元，用于向所述样本容器中注入裂解液，以使得所述裂解液裂解所述待制片样本中的红细胞；沉降单元，所述沉降单元包括沉降仓，所述沉降仓用于容纳裂解后的待制片样本，以使得所述沉降仓中的待制片样本在玻片上沉降以形成细胞层；染色单元，用于对玻片上的细胞层依次进行固定及染色。

技术总结
本申请提供了一种白细胞制片方法及白细胞制片装置，白细胞制片方法包括：在待制片样本中加入裂解液，以使得裂解液裂解待制片样本中的红细胞；将裂解后的待制片样本添加至沉降仓，以使得沉降仓中的待制片样本在玻片上形成细胞层；对玻片上沉降以形成细胞层；对玻片上的细胞层依次进行固定及染色。通过这种方法，在提高包细胞提取效果的前提下，相比于现有技术中的血液离心法，不需要人工提取白细胞，避免了人工提取导致白细胞纯度不高，且提取效率较低的问题，相比于现有技术中的密度离心法，不需要洗涤去除分离液，提高白细胞的提取效率，也避免了分离液造成的毒性污染，相比于现有技术中的抗体法，降低了成本。降低了成本。降低了成本。


技术研发人员：王译责 冯剑军 罗贯一
受保护的技术使用者：深圳市瑞图生物技术有限公司
技术研发日：2021.12.31
技术公布日：2023/7/13