一种淫羊藿苷元一水合物晶体及其制备方法与流程

1.本发明涉及药物共晶领域，具体涉及一种淫羊藿苷元一水合物晶体及其制备方法。


背景技术：

2.淫羊藿苷元(icaritin,it)，又名淫羊藿素，是小檗科淫羊藿属植物淫羊中的一种多羟基黄酮类单体成分，其结构式如下式(i)所示：
[0003][0004]
药理研究表明，淫羊藿苷元抗骨质疏松活性较淫羊藿中其他黄酮苷类化合物强，在体外具有促进成骨细胞活性，抑制破骨细胞活性的作用。传统中药淫羊藿具有补肾助阳，强筋健骨，祛风除湿，洗疮杀虫，消疲化痛之功效。淫羊藿苷元作为其主要有效成分之一，近年来吸引了国内外众多学者的关注，并对其药理作用进行了深人而广泛的研究，迄今的结果发现淫羊藿苷元的主要生理活性在于改善心脑血管系统功能、增强机体免疫力及调节内分泌，同时还具有抗肿瘤、抗肝毒、抗缺氧再氧合和健骨等作用。
[0005]
虽然淫羊藿苷元具有较好的临床应用前景，但是，其较差的水溶性极大的限制了其临床应用。目前关于解决淫羊藿苷元的溶解性的研究主要集中在两个方面，一种是研究制备淫羊藿苷元或其衍生物的新晶型，一种比较常规的是通过制剂的手段改善其溶解性。比如贾东升等通过制备淫羊藿苷元磷脂复合物显著改善了原料药与物理混合物的溶解性(贾东升，赵江丽，施峰等.淫羊藿苷元磷脂复合物的制备及固体分散体研究[j].中草药，2010，9(41))，但是该方法存在溶出介质可能破坏药物结构或溶出介质蒸发的问题；王晋艳等通过微乳技术对淫羊藿苷元进行增溶研究(晋艳，陈彦，张振海等.淫羊藿苷元自微乳在caco-2细胞模型的肠吸收特性初步研究[j].中草药，2012，3(43))，虽然能够改善淫羊藿苷元的溶解与吸收，但是其工艺过程中使用了大量的乳化剂和助乳化剂，存在一定的质量安全隐患。
[0006]
而关于对淫羊藿苷元晶型的研究报道较少，专利cn101200743a虽然报道了制备出了晶体状的淫羊藿苷元，但是并没有改善其溶解特性。专利cn104860958a报道了脱水淫羊藿素的晶型a和晶型b，且研究结果表明较无定形粉末的脱水淫羊藿素其溶解性有一定的改善，但是并未有显著的提高。专利cn103936705a公开了4中淫羊藿素溶剂合物及1种无水晶型b，并且报道其溶剂合物晶型均不稳定，容易发生转晶，转变为无水晶型b。专利cn104230870a、cn104945364a公开了2种淫羊藿素水合物晶型，并研究淫羊藿素水合物晶型和无水晶型b的光照稳定性，报道了无水晶型b光照不稳定，水合物晶型在光照稳定性上取得了一定程度的改善。专利cn112294765a公开了一种淫羊藿素无定型，其相较于淫羊藿素
晶型，无定型淫羊藿素溶解度及生物利用度取得了改善，但无定型普遍具有稳定性差的特点，不利于其在药物中的应用。
[0007]
对于目前报道的淫羊藿素晶型，无论是稳定性还是溶解性问题均未得到很好地解决，药用效果改善并不理想，因此仍然需要研究新的显著改善淫羊藿苷元溶解性及稳定性的晶型，从根本上解决淫羊藿苷元的溶解性、稳定性问题，尽量减少制剂生产过程中辅料的加入，尽可能的减少用药隐患。


技术实现要素：

[0008]
鉴于现有技术存在的问题，本发明通过共晶技术成功制备获得了一种淫羊藿苷元一水合物晶体，该一水合物晶体可以显著的改善淫羊藿苷元的溶解特性，并且具有较好的理化稳定性。
[0009]
本发明的具体技术内容如下：
[0010]
本发明第一方面，提供了一种淫羊藿苷元一水合物晶体，其特征在于，晶体单元结构中淫羊藿苷元与水的摩尔比为1:1。
[0011]
优选地，所述淫羊藿苷元一水合物晶体，使用cu-kα辐射，以2θ表示的x射线衍射谱图在13.80
±
0.2
°
，16.24
±
0.2
°
，21.22
±
0.2
°
，23.09
±
0.2
°
，43.33
±
0.2
°
处有特征峰。
[0012]
优选地，所述淫羊藿苷元一水合物晶体，使用cu-kα辐射，以2θ表示的x射线衍射谱图在12.28
±
0.2
°
，13.80
±
0.2
°
，16.24
±
0.2
°
，21.22
±
0.2
°
，23.09
±
0.2
°
，23.99
±
0.2
°
，26.28
±
0.2
°
，31.12
±
0.2
°
，33.78
±
0.2
°
，43.33
±
0.2
°
处有特征峰。
[0013]
优选地，所述淫羊藿苷元一水合物晶体，使用cu-kα辐射，其特征峰具有图1所示的x射线粉末衍射图谱。
[0014]
优选地，所述淫羊藿苷元一水合物晶体，使用cu-kα辐射，其主要晶体学参数为：triclinic晶系，空间群为p-1；晶胞参数为：α＝87.719(2)
°
，β＝88.772(2)
°
，γ＝69.076(2)
°
，晶胞体积
[0015]
本发明第二方面，提供一种淫羊藿苷元一水合物晶体的制备方法，具体步骤如下：将淫羊藿苷元溶于有机溶剂和水的混合溶液中，加热搅拌，降温析晶，过滤、干燥得淫羊藿苷元一水合物晶体。
[0016]
优选地，所述有机溶剂选自乙腈、四氢呋喃、甲醇、乙醇中的一种或多种；进一步优选地，所述有机溶剂选自乙腈、甲醇中的一种。
[0017]
优选地，所述淫羊藿苷元与水的质量体积比为71～135：1，mg/ml；优选为90～106：1，mg/ml。
[0018]
优选地，所述有机溶剂与水的体积比为3～7：1，优选为4：1。
[0019]
优选地，所述的溶解加热的温度为35～42℃。
[0020]
优选地，所述的降温析晶温度为5～20℃。
[0021]
优选地，所述的析晶时间为12～30小时。
[0022]
优选地，所述干燥温度为25～40℃，干燥时间为11～15小时。
[0023]
进一步优选地，所述淫羊藿苷元一水合物晶体的制备方法的具体步骤如下：将淫羊藿苷元溶于有机溶剂/水的混合溶液中，35～42℃加热搅拌溶解，自然降温至5～20℃析
晶12～30小时，过滤，洗涤滤饼，干燥得淫羊藿苷元一水合物晶体。
[0024]
优选地，所述洗涤滤饼的溶剂选自乙醇、四氢呋喃中的一种。
[0025]
本发明第三方面，提供一种药物组合物，所述药物组合物含有本发明所述的淫羊藿苷元一水合物晶体及药学上可接受的其它组分。
[0026]
优选地，所述药物组合物制备方法如下：使用标准和常规的技术，使淫羊藿苷元一水合物晶体与制剂学上可接受的固体或液体载体结合，以及使之任意地与制剂学上可接受的辅助剂和赋形剂结合制备成药用剂型。
[0027]
优选地，所述药学上可接受的其它组分包括可联合使用的药物活性成分、赋形剂、填充剂等。
[0028]
优选地，所述的药物组合物的剂型包括但不限于喷雾剂、片剂、胶囊剂、粉针剂、注射剂等。
[0029]
本发明第四方面，提供一种淫羊藿苷元一水合物晶体作为活性成分在制备治疗肝损伤及肝纤维化、肿瘤等药物中的用途。
[0030]
晶体结构的确认：
[0031]
x射线晶体数据在日本理学xtalab synergy型号仪器上收集，测试温度293(2)k，用cuka辐射，以ω扫描方式收集数据并进行lp校正。晶体结构用01ex2软件中的shelxt程序计算得到，并采用shelxl程序通过最小二乘法修正结构参数和判别原子种类，使用几何计算法和差值fourier法获得全部氢原子位置，拟优合度(goof值)1.019，接近于1.0，表明权重方案合适，结构准确。测试及解析本发明制备的淫羊藿苷元一水合物所得晶体学数据见表1。本发明的淫羊藿苷元一水合物的ortep图及晶体堆积图如附图2、附图3所示。
[0032]
表1淫羊藿苷元一水合物主要晶体学数据
[0033][0034]
本发明中x-射线粉末衍射测试仪器及测试条件：x-射线粉末衍射仪:panalytical empyrean；cu-kα；样品台：平板；入射光路:bbhd；衍射光路：plxcel；电压45kv，电流40ma；发散狭缝:1/4；防散射狭缝:1；索拉狭缝:0.04rad；步长：0.5s；扫描范围：3～50
°
。依据晶体学数据，其对应的x射线粉末衍射图(cu-kα)中特征峰详见附图1及表2。
[0035]
表2.淫羊藿苷元一水合物的主要pxrd峰
[0036]
[0037][0038]
实施例1～5中所制备的样品均符合x射线粉末衍射谱图。
[0039]
本发明的有益效果：
[0040]
本发明提供的制备淫羊藿苷元一水合物共晶体的方法操作简便，制备的晶体纯度高，本发明提供的淫羊藿苷元一水合物晶体具有较好的稳定性，并且显著的改善了淫羊藿苷元的溶解性，为淫羊藿苷元的制剂生产提供了一种优质的原料选择。
附图说明
[0041]
图1：淫羊藿苷元一水合物的x射线粉末衍射图谱。
[0042]
图2：淫羊藿苷元一水合物的ortep图
[0043]
图3：淫羊藿苷元一水合物的堆积图。
具体实施方式
[0044]
下面通过实施例来进一步说明本发明，应该正确理解的是：本发明的实施例仅仅是用于说明本发明，而不是对本发明的限制，所以，在本发明的方法前提下对本发明的简单改进均属本发明要求保护的范围。
[0045]
本发明原料淫羊藿苷元可按照现有技术中的任何方法进行制备或者购买自市售产品(纯度≥98％)，其余试剂材料均市售可得。
[0046]
一、晶型制备
[0047]
实施例1
[0048]
将368.4mg淫羊藿苷元溶于14.8ml乙腈、3.7ml水的混合溶液中，40℃下搅拌至完全溶解，缓慢降温至10～15℃静置16～18小时左右析晶，过滤，用乙醇洗涤滤饼，30℃下真空干燥12～13小时，得淫羊藿苷元一水合物晶体，收率：98.6％，纯度：99.99％。
[0049]
实施例2(90,4)
[0050]
将368.4mg淫羊藿苷元溶于16.4ml乙腈、4.1ml水的混合溶液中，40～42℃下搅拌至完全溶解，缓慢降温至15～20℃静置1天左右析晶，过滤，用四氢呋喃洗涤滤饼，25℃下真空干燥14～15小时，得淫羊藿苷元一水合物晶体，收率：98.2％，纯度：99.98％。
[0051]
实施例3(106,4)
[0052]
将368.4mg淫羊藿苷元溶于13.9ml甲醇、3.5ml水的混合溶液中，35℃下搅拌至完全溶解，缓慢降温至5～10℃静置12～13小时左右析晶，过滤，用乙醇洗涤滤饼，40℃下真空
干燥11～12小时，得淫羊藿苷元一水合物晶体，收率：97.9％，纯度：99.96％。
[0053]
实施例4(71,3)
[0054]
将368.4mg淫羊藿苷元溶于15.6ml四氢呋喃、5.2ml水的混合溶液中，38～40℃下搅拌至完全溶解，缓慢降温至10～15℃静置16～18小时左右析晶，过滤，用四氢呋喃洗涤滤饼，30℃下真空干燥12～13小时，得淫羊藿苷元一水合物晶体，收率：96.4％，纯度：99.96％。
[0055]
实施例5(135,7)
[0056]
将368.5mg淫羊藿苷元溶于19.0ml乙醇、2.7ml水的混合溶液中，40℃下搅拌至完全溶解，缓慢降温至10～15℃静置30小时左右析晶，过滤，用乙醇洗涤滤饼，30℃下真空干燥12～13小时，得淫羊藿苷元一水合物晶体，收率：97.2％，纯度：99.97％。
[0057]
对比实施例1(d1
‑‑
单晶)
[0058]
将368.4mg淫羊藿苷元溶于30ml丙酮中，过滤，在滤液中加入约15ml蒸馏水，75℃回流溶解，20℃放置析晶。结晶24小时后，过滤得到淡黄色晶体。将得到的晶体在80℃下连续干燥，直到晶体的重量不再发生变化，得到淫羊藿苷元晶体，收率91.7％，纯度99.87％。
[0059]
对比实施例2(d6
‑‑
半水)
[0060]
将1g淫羊藿苷元粗品、70ml丙酮置于100ml烧杯中，温水浴中搅拌溶解，40℃下搅拌至完全溶解，然后将该溶液快速加入到装有400ml常温纯化水的烧杯中，剧烈搅拌10min，析出大量固体，待溶液降至室温后过滤，滤饼置于25℃鼓风干燥箱中干燥48小时，得淫羊藿苷元半水合晶型，收率89.8％，纯度99.86％。
[0061]
对比实施例3(d6
‑‑
一水)
[0062]
将1g淫羊藿苷元粗品、70ml丙酮置于1l烧瓶中，温水浴中搅拌溶解，40℃下搅拌至完全溶解，然后在搅拌下快速加入400ml纯化水，搅拌10min，析出大量固体，待溶液降至室温后过滤，滤饼置于25℃鼓风干燥箱中干燥48小时，得淫羊藿苷元一水合晶型，收率92.5％，纯度99.82％。
[0063]
二、验证实施例
[0064]
1.稳定性实验
[0065]
本发明的稳定性试验方法参照《中国药典》(2020年版)第四部有关稳定性考察的指导方法进行，高温试验条件：60℃，强光照射试验条件：4500lx
±
500lx，高湿测试条件：92.5％。纯度检测用hplc法进行检测，进行3次平行实验，结果取平均值。具体的检测结果见表3。
[0066]
表3淫羊藿苷元一水合物在光照、高温及高湿条件下的稳定性试验结果
[0067][0068]
同时，考察发现本技术实施例1～5具有相似的稳定性试验结果。
[0069]
2.溶解性实验
[0070]
方法：分别量取10ml的介质(水、0.01mol/lhcl溶液)于西林瓶中，加入过量的待测样品，将西林瓶密封置于25℃恒温水浴中搅拌1小时，经滤膜过滤，取滤液；在270nm的波长下测定吸光度，通过测试标准对照品的吸光度来计算其溶解度。
[0071]
表4淫羊藿苷元甲醇溶剂合物在不同介质中的溶解度(μg/ml)
[0072][0073][0074]
同时，考察发现本技术实施例1～5具有相似的溶解度试验结果。
[0075]
三、生物活性实验
[0076]
1.材料
[0077]
1.1药品
[0078]
实施例1及对比实施例1-3自制晶型物。
[0079]
1.2动物
[0080]
beagle实验犬30只，雌雄各半，体重(12～15kg)，由广州医药研究总院有限公司提供。
[0081]
2.beagle实验犬体内药代动力学实验
[0082]
30只beagle犬适应性饲养两周并检疫后，选取健康正常的24只分为4组分别给予实施例1及对比实施例1-3晶型物，以15mg/kg的剂量口服给药，分别在0、0.5、1、2、4、6、8和12小时从外周静脉采血，在2-8℃离心10分钟得到血浆。beagle犬血浆中淫羊藿苷元的浓度采用β-葡萄糖醛酸苷酶水解，lc-ms/ms法测定(参考黄莹,刘艳菊,胡雷,et al.lc-ms/ms法测定beagle血浆中阿可拉定的浓度[c]中国毒理学会第七次全国毒理学大会暨第八届湖北科技论坛论文集.2015.)。测得的药代动力学参数如表5所示，其中血药浓度-时间曲线下面积(auc)采用梯形法计算，消除半衰期(t
1/2
)采用best fit法计算，峰浓度(c
max
)及达峰时间(t
max
)采用实测值。
[0083]
表5beagle犬口服给药后的药代动力学参数(n＝6)
[0084][0085]
注：1组给药实施例1；2组给药对比实施例1；3组给药对比实施例2；4组给药对比实施例3。

技术特征：
1.一种淫羊藿苷元一水合物晶体，其特征在于，使用cu-kα辐射，以2θ表示的x射线衍射谱图在13.80
±
0.2
°
，16.24
±
0.2
°
，21.22
±
0.2
°
，23.09
±
0.2
°
，43.33
±
0.2
°
处有特征峰，晶体单元结构中淫羊藿苷元与水的摩尔比为1:1。2.根据权利要求1所述的淫羊藿苷元一水合物晶体，其特征在于，使用cu-kα辐射，其主要晶体学参数为：triclinic晶系，空间群为p-1；晶胞参数为：1；晶胞参数为：α＝87.719(2)
°
，β＝88.772(2)
°
，γ＝69.076(2)
°
，晶胞体积3.根据权利要求1所述的淫羊藿苷元一水合物晶体，其特征在于，使用cu-kα辐射，以2θ表示的x射线衍射谱图在12.28
±
0.2
°
，13.80
±
0.2
°
，16.24
±
0.2
°
，21.22
±
0.2
°
，23.09
±
0.2
°
，23.99
±
0.2
°
，26.28
±
0.2
°
，31.12
±
0.2
°
，33.78
±
0.2
°
，43.33
±
0.2
°
处有特征峰。4.根据权利要求1所述的淫羊藿苷元一水合物晶体，其特征在于，其特征峰具有图1所示的x射线粉末衍射图谱。5.一种权利要求1-4任一所述淫羊藿苷元一水合物晶体的制备方法，其特征在于，具体步骤如下：将淫羊藿苷元溶于有机溶剂和水的混合溶液中，加热搅拌，降温析晶，过滤、干燥得淫羊藿苷元一水合物晶体。6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述有机溶剂选自乙腈、四氢呋喃、甲醇、乙醇中的一种或多种。7.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述淫羊藿苷元与水的质量体积比为71～135：1，mg/ml；所述有机溶剂与水的体积比为3～7：1。8.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述的溶解加热的温度为35～42℃。9.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，具体步骤如下：将淫羊藿苷元溶于有机溶剂/水的混合溶液中，35～42℃加热搅拌溶解，自然降温至5～20℃析晶12～30小时，过滤，洗涤滤饼，干燥得淫羊藿苷元一水合物晶体。10.一种淫羊藿苷元一水合物晶体作为活性成分在制备治疗肝损伤及肝纤维化、肿瘤等药物中的用途。

技术总结
本发明属于药物晶型领域，具体涉及一种淫羊藿苷元水合物及其制备方法。本发明提供的淫羊藿苷元水合物晶体，使用Cu-Kα辐射，以2θ表示的X射线衍射谱图在13.80


技术研发人员：翟立海 夏祥来 张明明 刘玉婷
受保护的技术使用者：山东新时代药业有限公司
技术研发日：2021.12.29
技术公布日：2023/7/13