一种椪柑农药残留检测方法与流程

1.本发明涉及农残检测技术领域，尤其涉及一种椪柑农药残留检测方法。


背景技术：

2.椪柑是一种柑橘类的水果，包括果皮和果肉，对其进行农药残留检测时，一般以四分法进行取样，然后进行与其他水果类似的操作。在具体检测时，椪柑的果皮相较于其他柑橘类水果更松散，容易与果肉分离，在进行四分法时，会导致果皮和果肉之间取样的比例不一样，因此在进行平行检测时，容易导致各个样品之间出现较大的偏差(果肉和果皮的农药残留可能不一致)，最终导致检测结果不能真实反应样品情况。


技术实现要素：

3.针对现有技术中所存在的不足，本发明提供了一种椪柑农药残留检测方法，其解决了现有技术中因椪柑可能因果皮和果肉取样比例偏差导致检查结果偏差巨大的问题。
4.根据本发明的实施例，一种椪柑农药残留检测方法，其包括如下步骤：
5.第一步、先将椪柑果肉分离，分别称量计算比例，然后分别按计算比例称取总重10g的样品，将样品连同保护剂一同搅碎处理，然后加入乙腈、硫酸镁和氯化钠，振荡提取，再进行离心分层，分相，得有中间料a和残渣a；
6.第二步、在残渣a中再次加入乙腈，振荡提取，经离心分层、分相，得中间料b和残渣b；
7.第三步、合并中间料a和中间料b，经蒸发后得到浓缩液；
8.第四步、将浓缩液转移至固相萃取柱上，用正己烷和丙酮的混合液进行洗脱，收集洗脱液，并置于氮吹仪上吹干，用异辛烷溶解，过滤后得待测液进行气相色谱-串联质谱仪的测定。
9.进一步地，保护剂包括卡拉胶。
10.进一步地，样品和保护剂重量比例为1：2，加入乙腈的体积为样品和保护剂体积的5～10倍。
11.进一步地，加入硫酸镁和氯化钠的质量为样品的5-10％。
12.进一步地，固相萃取柱为c18固相萃取柱，并经乙腈活化，活化c18固相萃取柱过程中乙腈的用量为8-12ml。
13.进一步地，离心温度为4～5℃，转速为8000～10000r/min。
14.进一步地，正己烷和丙酮的混合溶液用量为8～10ml。
15.进一步地，洗脱次数为2～5次。
16.进一步地，气相色谱-串联质谱仪的测定条件为：
17.气相色谱条件：色谱柱为hp-5ms(14％氰丙基-苯基)-甲基聚硅烷色谱柱，柱长30mm，内径0.25mm，薄膜0.25μm，石英毛细管柱，载体高纯氮，流速为1.0ml/min，进样口温度为290℃，进样体积为1μl，不分流进样，溶剂延迟时间为4.50min；
18.程序升温：40℃保持1min，然后以30℃/min程序升温至130℃，再以5℃/min升温至250℃，再以10℃/min升温至300℃，保持5min；
19.质谱条件为电离方式：电子轰击(ei)离子源，电离能量70ev，离子源温度300℃，四级杆温度，180℃，传输线温度，280℃，扫描方式选择离子监测模式(sim)。
20.相比于现有技术，本发明具有如下有益效果：
21.采用不同与四分法的样品取样方法，能够使得各个样品的取样比例相差较小，因此能够降低各个样品之间的差异程度，同时，在样品中加入保护剂，减小样品之间的差异，使得样品之间具有更大的相似程度，最终使得样品检测结果准确性得以提升，同样的样品之间检测结果偏差极小。
具体实施方式
22.下面结合实施例对本发明中的技术方案进一步说明。
23.实施例1
24.本实施例提供了一种椪柑农药残留检测方法，将椪柑皮肉分离分别进行称重，然后按比例取样10g，加入20g卡拉胶一同搅碎，加入样品和卡拉胶搅碎物5倍体积的乙腈、占样品重量5％的硫酸镁和占样品重量5％的氯化钠，振荡提取，再进行离心分层(离心温度为4℃，转速为8000r/min)，分相，得有中间料a和残渣a，在残渣a中再次加入5倍体积的乙腈，振荡提取，经离心分层、分相，得中间料b和残渣b，合并中间料a和中间料b，经蒸发后得到浓缩液；将浓缩液转移至c18固相萃取柱(经乙腈活化，活化c18固相萃取柱过程中乙腈的用量为8ml)上，用4正己烷和4丙酮的混合液进行洗脱，收集洗脱液，并置于氮吹仪上吹干，用10ml异辛烷溶解，过滤后得待测液进行气相色谱-串联质谱仪的测定；气相色谱-串联质谱仪的测定条件为：
25.气相色谱条件：色谱柱为hp-5ms(14％氰丙基-苯基)-甲基聚硅烷色谱柱，柱长30mm，内径0.25mm，薄膜0.25μm，石英毛细管柱，载体高纯氮，流速为1.0ml/min，进样口温度为290℃，进样体积为1μl，不分流进样，溶剂延迟时间为4.50min；
26.程序升温：40℃保持1min，然后以30℃/min程序升温至130℃，再以5℃/min升温至250℃，再以10℃/min升温至300℃，保持5min；
27.质谱条件为电离方式：电子轰击(ei)离子源，电离能量70ev，离子源温度300℃，四级杆温度，180℃，传输线温度，280℃，扫描方式选择离子监测模式(sim)。
28.实施例2
29.本实施例提供了一种椪柑农药残留检测方法，将椪柑皮肉分离分别进行称重，然后按比例取样10g，加入20g卡拉胶一同搅碎，加入样品和卡拉胶搅碎物5倍体积的乙腈、占样品重量5％的硫酸镁和占样品重量8％的氯化钠，振荡提取，再进行离心分层(离心温度为4.5℃，转速为9000r/min)，分相，得有中间料a和残渣a，在残渣a中再次加入5倍体积的乙腈，振荡提取，经离心分层、分相，得中间料b和残渣b，合并中间料a和中间料b，经蒸发后得到浓缩液；将浓缩液转移至c18固相萃取柱(经乙腈活化，活化c18固相萃取柱过程中乙腈的用量为10ml)上，用4正己烷和4丙酮的混合液进行洗脱，收集洗脱液，并置于氮吹仪上吹干，用10ml异辛烷溶解，过滤后得待测液进行气相色谱-串联质谱仪的测定；气相色谱-串联质谱仪的测定条件为：
30.气相色谱条件：色谱柱为hp-5ms(14％氰丙基-苯基)-甲基聚硅烷色谱柱，柱长30mm，内径0.25mm，薄膜0.25μm，石英毛细管柱，载体高纯氮，流速为1.0ml/min，进样口温度为290℃，进样体积为1μl，不分流进样，溶剂延迟时间为4.50min；
31.程序升温：40℃保持1min，然后以30℃/min程序升温至130℃，再以5℃/min升温至250℃，再以10℃/min升温至300℃，保持5min；
32.质谱条件为电离方式：电子轰击(ei)离子源，电离能量70ev，离子源温度300℃，四级杆温度，180℃，传输线温度，280℃，扫描方式选择离子监测模式(sim)。
33.实施例3
34.本实施例提供了一种椪柑农药残留检测方法，将椪柑皮肉分离分别进行称重，然后按比例取样10g，加入20g卡拉胶一同搅碎，加入样品和卡拉胶搅碎物5倍体积的乙腈、占样品重量5％的硫酸镁和占样品重量10％的氯化钠，振荡提取，再进行离心分层(离心温度为5℃，转速为10000r/min)，分相，得有中间料a和残渣a，在残渣a中再次加入5倍体积的乙腈，振荡提取，经离心分层、分相，得中间料b和残渣b，合并中间料a和中间料b，经蒸发后得到浓缩液；将浓缩液转移至c18固相萃取柱(经乙腈活化，活化c18固相萃取柱过程中乙腈的用量为12ml)上，用4正己烷和4丙酮的混合液进行洗脱，收集洗脱液，并置于氮吹仪上吹干，用10ml异辛烷溶解，过滤后得待测液进行气相色谱-串联质谱仪的测定；气相色谱-串联质谱仪的测定条件为：
35.气相色谱条件：色谱柱为hp-5ms(14％氰丙基-苯基)-甲基聚硅烷色谱柱，柱长30mm，内径0.25mm，薄膜0.25μm，石英毛细管柱，载体高纯氮，流速为1.0ml/min，进样口温度为290℃，进样体积为1μl，不分流进样，溶剂延迟时间为4.50min；
36.程序升温：40℃保持1min，然后以30℃/min程序升温至130℃，再以5℃/min升温至250℃，再以10℃/min升温至300℃，保持5min；
37.质谱条件为电离方式：电子轰击(ei)离子源，电离能量70ev，离子源温度300℃，四级杆温度，180℃，传输线温度，280℃，扫描方式选择离子监测模式(sim)。
38.上述实施例1-3中均进行4次，进行气相色谱-质谱检测，所得的结果如下表(以二苯胺为例)：
39.项目第一次第二次第三次第四次实施例1100％99.95％100.01％100.02％实施例2100％100.05％100.02％100.01％实施例3100％99.97％99.98％100.05％
40.以第一次为基准，后面三次与第一次之间的偏差均在0.1％以内。即本发明在样品中加入保护剂，减小样品之间的差异，使得样品之间具有更大的相似程度，使得样品检测结果准确性得以提升，同样的样品之间检测结果偏差极小。
41.最后说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的宗旨和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。

技术特征：
1.一种椪柑农药残留检测方法，其特征在于，包括如下步骤：第一步、先将椪柑果肉分离，分别称量计算比例，然后分别按计算比例称取总重10g的样品，将样品连同保护剂一同搅碎处理，然后加入乙腈、硫酸镁和氯化钠，振荡提取，再进行离心分层，分相，得有中间料a和残渣a；第二步、在残渣a中再次加入乙腈，振荡提取，经离心分层、分相，得中间料b和残渣b；第三步、合并中间料a和中间料b，经蒸发后得到浓缩液；第四步、将浓缩液转移至固相萃取柱上，用正己烷和丙酮的混合液进行洗脱，收集洗脱液，并置于氮吹仪上吹干，用异辛烷溶解，过滤后得待测液进行气相色谱-串联质谱仪的测定。2.如权利要求1所述的一种椪柑农药残留检测方法，其特征在于，保护剂包括卡拉胶。3.如权利要求1所述的一种椪柑农药残留检测方法，其特征在于，样品和保护剂重量比例为1：2，加入乙腈的体积为样品和保护剂体积的5～10倍。4.如权利要求1所述的一种椪柑农药残留检测方法，其特征在于，加入硫酸镁和氯化钠的质量为样品的5-10％。5.如权利要求1所述的一种椪柑农药残留检测方法，其特征在于，固相萃取柱为c18固相萃取柱，并经乙腈活化，活化c18固相萃取柱过程中乙腈的用量为8-12ml。6.如权利要求1所述的一种椪柑农药残留检测方法，其特征在于，离心温度为4～5℃，转速为8000～10000r/min。7.如权利要求1所述的一种椪柑农药残留检测方法，其特征在于，正己烷和丙酮的混合溶液用量为8～10ml。8.如权利要求1所述的一种椪柑农药残留检测方法，其特征在于，洗脱次数为2～5次。9.如权利要求1-8中任一项所述的一种椪柑农药残留检测方法，其特征在于，气相色谱-串联质谱仪的测定条件为：气相色谱条件：色谱柱为hp-5ms(14％氰丙基-苯基)-甲基聚硅烷色谱柱，柱长30mm，内径0.25mm，薄膜0.25μm，石英毛细管柱，载体高纯氮，流速为1.0ml/min，进样口温度为290℃，进样体积为1μl，不分流进样，溶剂延迟时间为4.50min；程序升温：40℃保持1min，然后以30℃/min程序升温至130℃，再以5℃/min升温至250℃，再以10℃/min升温至300℃，保持5min；质谱条件为电离方式：电子轰击(ei)离子源，电离能量70ev，离子源温度300℃，四级杆温度，180℃，传输线温度，280℃，扫描方式选择离子监测模式(sim)。

技术总结
本发明提供了一种椪柑农药残留检测方法，其包括如下步骤：第一步、先将椪柑果肉分离，分别称量计算比例，然后分别按计算比例称取总重10g的样品，将样品连同保护剂一同搅碎处理，然后加入乙腈、硫酸镁和氯化钠，振荡提取，再进行离心分层，分相，得有中间料a和残渣a；第二步、在残渣a中再次加入乙腈，得中间料b和残渣b；第三步、合并中间料a和中间料b，经蒸发后得到浓缩液；第四步、将浓缩液转移至固相萃取柱上，用正己烷和丙酮的混合液进行洗脱，收集洗脱液，并置于氮吹仪上吹干，用异辛烷溶解，过滤后得待测液进行测定。本发明解决了现有技术中因椪柑可能因果皮和果肉取样比例偏差导致检查结果偏差巨大的问题。果偏差巨大的问题。


技术研发人员：张丽莉 李一利 刘文冰
受保护的技术使用者：张丽莉
技术研发日：2023.04.06
技术公布日：2023/7/12