一种制作CEF细胞的鸡胚破碎装置的制作方法

一种制作cef细胞的鸡胚破碎装置
技术领域
1.本实用新型属于疫苗制备技术过程中cef细胞制作领域，尤其涉及一种制作cef细胞的鸡胚破碎装置。


背景技术：

2.鸡胚就是鸡的胚胎，在疫苗的开发和研究中有着不可替代的作用。鸡胚成纤维细胞(chick embryo fibroblast，cef)是最早用于体外培养的细胞之一，它具有取材相对容易，增值能力强，适应性强，良好的耐受性，性状比较稳定，不易发生转化等特点，因此使得其被广泛应用于分子和细胞生物学研究等许多方面，同时也是疫苗生产的一种重要的细胞资源。用它可生产多种鸡的疫苗，如法氏囊、新城疫、马立克疫苗等。cef制备在疫苗生产中是很重要、也是最关键的一步，其制备过程主要包括鸡蛋的孵化、消毒、取出鸡胚、破碎、胰酶消化、分散细胞、分装细胞等过程。鸡胚破碎时，需要将鸡胚无菌破碎成米粒大小的组织块，然后经胰酶消化，使组织中细胞之间连接破坏，将组织离散成单细胞，加细胞营养液后分装于细胞瓶进行细胞增殖培养，在适宜的条件下细胞有丝分裂，最终形成致密的单层细胞供生产或研究使用。
3.cef制备过程主要包括鸡蛋的孵化、消毒、取出鸡胚、破碎、胰酶消化、分散细胞、分装细胞等过程。受精的鸡蛋经恒温恒湿孵化机孵育至9～11日龄，将发育良好的鸡胚外表消毒，剪去鸡胚气室部位蛋壳，无菌挑出鸡胚，再去掉头、爪和内脏，用洗液冲洗鸡胚，在容器内破碎鸡胚，再次洗胚除掉组织中血液，然后把破碎的鸡胚移入三角瓶中加入胰酶水浴消化，待组织发白、疏松时，倒出消化液并终止消化，分散细胞并用细胞培养液制备成细胞悬液，定量分装至细胞瓶恒温进行培养，一般24h细胞长成致密单层。
4.cef制备过程中的细胞破碎质量直接影响组织消化的好坏，组织消化的好坏又对细胞培养成功或质量起决定性作用。鸡胚破碎时，需要将鸡胚无菌破碎成米粒大小的组织块，然后经胰酶消化，使组织中细胞之间连接破坏，将组织离散成单细胞，加细胞营养液后分装于细胞瓶进行细胞增殖培养，在适宜的条件下细胞有丝分裂，最终形成致密的单层细胞供生产或研究使用。
5.现有的鸡胚破碎技术是人工剪切，即在烧杯中拿剪刀进行反复裁剪，很难做到把鸡胚剪切得大小均匀，常出现鸡胚剪切得到的团块有大有小，不均匀一致，在加胰酶消化时，消化程度很难把握，也无法合理把握。以小块组织消化到位终止消化时，大块组织还未消化完全，在进行细胞培养时，一则因分散的细胞数量不足造成细胞增殖减慢，二则未消化的组织团块不易贴附瓶壁，在细胞瓶旋转时滑动将所在之处一圈细胞刮掉，造成细胞生长不均匀；以大块组织消化到位终止消化时，小块组织则消化过火，细胞膜被胰酶消化破坏引起细胞死亡，在进行细胞培养时，死细胞粘附于瓶壁，影响活细胞的生长，造成细胞生长缓慢，死细胞还会释放胺类毒性物质，影响活细胞活性，造成细胞受伤变形，逐渐聚集，停止增殖。另外，由于人工剪切，耗时较长，增加了污染的风险几率，一旦细胞污染就无法培养成功，以失败告终。


技术实现要素：

6.本实用新型的目的是提供一种制作cef细胞的鸡胚破碎装置，以解决鸡胚人工剪切后大小不一，导致细胞死亡的问题。
7.本实用新型采用以下技术方案：一种制作cef细胞的鸡胚破碎装置，包括：
8.容纳筒，其内用于盛放鸡胚，其底部均匀开设有多个通过孔，
9.推动杆，竖向设置、且位于容纳筒内，
10.按压板，位于容纳筒内，水平设置，其上侧与推动杆的下端固定连接，用于自上而下沿容纳筒的轴线在推动杆的推动下移动，进而将容纳筒内的鸡胚挤压，使得鸡胚经过通过孔后破碎成大小均匀的颗粒，进而进行培养细胞，按压板上均匀开设有多个挤压孔，
11.剪切管，竖向设置，套设在推动杆的外围，其下端固定连接有多个弯刀，多个弯刀沿剪切管的轴线呈放射状排布，多个弯刀用于对进入容纳筒的鸡胚进行手动预破碎，进而使得鸡胚通过挤压孔后，被按压板挤压再经过通过孔。
12.进一步地，还包括：
13.推动板，水平设置，位于容纳筒的外部上侧，
14.多个立杆，竖向设置，位于容纳筒内腔，其上端与推动板的下侧固定连接，其下端固定连接有挤压板，各挤压板的直径与挤压孔的直径相同、且与挤压孔对应设置，多个挤压板用于在待鸡胚从挤压孔进入容纳筒下部后，伸入挤压孔并卡在挤压孔内，进而随着按压板一起向下运动，对鸡胚进行挤压。
15.进一步地，推动板中心开设有伸入孔，伸入孔用于推动杆的上端自下而上伸入，还用于剪切管的上端自下而上伸入。
16.进一步地，沿各挤压孔的下侧边沿设置有环状的挡板，各挡板的外沿与挤压孔的内沿固定连接，各挡板用于抵在立杆的下端，避免立杆伸出挤压孔的下侧，进而配合按压板对鸡胚进行挤压。
17.本实用新型的有益效果是：
18.1、本实用新型保证了鸡胚破碎的均一度，进而容易把握鸡胚的消化进程，达到鸡胚组织消化程度的同步，避免消化过火造成的死细胞或未消化的组织块，产生的单个细胞数量多，能较快培养形成致密、均匀、光滑的单层细胞；
19.2、本实用新型缩短了鸡胚破碎时间，降低了细胞污染的风险，保证了细胞培养的成功率；能较快培养形成致密、均匀、光滑的单层细胞供生产或研究使用；
20.3、本实用新型可以在容纳筒内的密闭状态下破碎鸡胚，防止因鸡胚破碎时开放操作而带来的污染风险，提高了细胞培养的成功率；
21.4、本实用新型通过设置剪切管，可以对鸡胚进行预破碎，进而加快鸡胚破碎的速度，提高生产效率。
附图说明
22.图1为本实用新型的剖视图；
23.图2为本实用新型的结构示意图。
24.其中：1、容纳筒；2、推动杆；3、按压板；4、剪切管；5、推动板；6、立杆；7、挤压板；8、挤压孔；9、通过孔。
具体实施方式
25.下面结合附图和具体实施方式对本实用新型进行详细说明。
26.在本实用新型的描述中，需要理解的是，术语“中心”、“纵向”、“横向”、“上”、“下”、“前”、“后”、“左”、“右”、“竖直”、“水平”、“顶”、“底”、“内”、“外”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本实用新型和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本实用新型的限制。此外，术语“第一”、“第二”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此，限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隐含地包括一个或者多个该特征。在本实用新型的描述中，除非另有说明，“多个”的含义是两个或两个以上。
27.在本实用新型的描述中，需要说明的是，除非另有明确的规定和限定，术语“安装”、“相连”、“连接”应做广义理解，例如，可以是固定连接，也可以是可拆卸连接，或一体地连接；可以是机械连接，也可以是电连接；可以是直接相连，也可以通过中间媒介间接相连，可以是两个元件内部的连通。对于本领域的普通技术人员而言，可以具体情况理解上述术语在本实用新型中的具体含义。
28.本实用新型公开了一种制作cef细胞的鸡胚破碎装置，如图1和图2所示，包括容纳筒1、推动杆2、按压板3、剪切管4。
29.容纳筒1内用于盛放鸡胚，容纳筒1底部均匀开设有多个通过孔9，推动杆2竖向设置、且位于容纳筒1内，按压板3位于容纳筒1内，按压板3水平设置，按压板3上侧与推动杆2的下端固定连接。
30.按压板3用于自上而下沿容纳筒1的轴线在推动杆2的推动下移动，进而将容纳筒1内的鸡胚挤压，使得鸡胚经过通过孔9后破碎成大小均匀的颗粒，进而进行培养细胞，按压板3上均匀开设有多个挤压孔8。
31.剪切管4竖向设置，剪切管4套设在推动杆2的外围，剪切管4下端固定连接有多个弯刀，多个弯刀沿剪切管4的轴线呈放射状排布，多个弯刀用于对进而容纳筒1的鸡胚进行手动预破碎，进而使得鸡胚通过挤压孔8后，被按压板3挤压再经过通过孔9。在预破碎时，必须是手动转动剪切管4，因为鸡胚在破碎时不能太碎，如果利用电动破碎机处理，就会导致鸡胚破碎度太高，导致鸡胚破碎成泥，无法进行试验，因此，必须是手动轻轻预破碎，提高效率即可。
32.本实用新型还包括：推动板5，推动板5水平设置，推动板5位于容纳筒1的外部上侧，多个立杆6竖向设置，多个立杆6位于容纳筒1内腔，多个立杆6的上端与推动板5的下侧固定连接，多个立杆6的下端固定连接有挤压板7。
33.挤压板7的直径与挤压孔8的直径相同，多个挤压板7用于在待鸡胚从挤压孔8进入容纳筒1下部后，伸入挤压孔8并卡在挤压孔8内，进而随着按压板3一起向下运动，对鸡胚进行挤压。
34.推动板5中心开设有伸入孔，伸入孔用于推动杆2的上端自下而上伸入，伸入孔还用于剪切管4的上端自下而上伸入。
35.沿各挤压孔8的下侧边沿设置有环状的挡板，各挡板的外沿与挤压孔8的内沿固定连接，各挡板用于抵在立杆6的下端，避免立杆6伸出挤压孔8的下侧，进而配合按压板3对鸡
胚进行挤压。
36.在制作鸡胚细胞时，需要米粒大小的鸡胚，因此需要将鸡胚弄碎，现有技术是人工剪切，即在烧杯中拿剪刀进行裁剪，因为如果用绞肉机会太烂，导致无法使用，而人工剪切造成大小不一，在加酶后，大块的还未消化，而小块的消化过了，造成肽链断裂，细胞死亡。
37.本实用新型保证了鸡胚破碎的均一度，进而容易把握鸡胚的消化进程，达到鸡胚组织消化程度的同步，避免消化过火造成的死细胞或未消化的组织块，产生的单个细胞数量多，能较快培养形成致密、均匀、光滑的单层细胞。
38.本实用新型缩短了鸡胚破碎时间，降低了细胞污染的风险，保证了细胞培养的成功率；能较快培养形成致密、均匀、光滑的单层细胞供生产或研究使用。
39.本实用新型可以在容纳筒内的密闭状态下破碎鸡胚，防止因鸡胚破碎时开放操作而带来的污染风险，提高了细胞培养的成功率。
40.本实用新型通过设置剪切管，可以对鸡胚进行预破碎，进而加快鸡胚破碎的速度，提高生产效率。
41.以上仅为本实用新型的较佳实施例，并不用以限制本实用新型，凡在本实用新型的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本实用新型的保护范围之内。

技术特征：
1.一种制作cef细胞的鸡胚破碎装置，其特征在于，包括：容纳筒(1)，其内用于盛放鸡胚，其底部均匀开设有多个通过孔(9)，推动杆(2)，竖向设置、且位于容纳筒(1)内，按压板(3)，位于容纳筒(1)内，水平设置，其上侧与推动杆(2)的下端固定连接，用于自上而下沿容纳筒(1)的轴线在推动杆(2)的推动下移动，进而将容纳筒(1)内的鸡胚挤压，使得鸡胚经过通过孔(9)后破碎成大小均匀的颗粒，进而进行培养细胞，所述按压板(3)上均匀开设有多个挤压孔(8)，剪切管(4)，竖向设置，套设在推动杆(2)的外围，其下端固定连接有多个弯刀，多个所述弯刀沿剪切管(4)的轴线呈放射状排布，多个所述弯刀用于对进入容纳筒(1)的鸡胚进行手动预破碎，进而使得鸡胚通过挤压孔(8)后，被按压板(3)挤压再经过通过孔(9)。2.根据权利要求1所述的一种制作cef细胞的鸡胚破碎装置，其特征在于，还包括：推动板(5)，水平设置，位于所述容纳筒(1)的外部上侧，多个立杆(6)，竖向设置，位于所述容纳筒(1)内腔，其上端与推动板(5)的下侧固定连接，其下端固定连接有挤压板(7)，各所述挤压板(7)的直径与挤压孔(8)的直径相同、且与挤压孔(8)对应设置，多个所述挤压板(7)用于在待鸡胚从挤压孔(8)进入容纳筒(1)下部后，伸入挤压孔(8)并卡在挤压孔(8)内，进而随着按压板(3)一起向下运动，对鸡胚进行挤压。3.根据权利要求2所述的一种制作cef细胞的鸡胚破碎装置，其特征在于，所述推动板(5)中心开设有伸入孔，所述伸入孔用于推动杆(2)的上端自下而上伸入，还用于剪切管(4)的上端自下而上伸入。4.根据权利要求2所述的一种制作cef细胞的鸡胚破碎装置，其特征在于，沿各所述挤压孔(8)的下侧边沿设置有环状的挡板，各所述挡板的外沿与挤压孔(8)的内沿固定连接，各所述挡板用于抵在立杆(6)的下端，避免立杆(6)伸出挤压孔(8)的下侧，进而配合按压板(3)对鸡胚进行挤压。

技术总结
本实用新型公开了一种制作CEF细胞的鸡胚破碎装置，包括：容纳筒，其内用于盛放鸡胚，其底部均匀开设有多个通过孔，推动杆，按压板，其上侧与推动杆的下端固定连接，用于自上而下沿容纳筒的轴线在推动杆的推动下移动，进而将容纳筒内的鸡胚挤压，使得鸡胚经过通过孔后破碎成大小均匀的颗粒，进而进行培养细胞，按压板上均匀开设有多个挤压孔，剪切管，套设在推动杆的外围，其下端固定连接有多个弯刀；本实用新型保证了鸡胚破碎的均一度，进而容易把握鸡胚的消化进程，达到鸡胚组织消化程度的同步，避免消化过火造成的死细胞或未消化的组织块，产生的单个细胞数量多，能较快培养形成致密、均匀、光滑的单层细胞。光滑的单层细胞。光滑的单层细胞。


技术研发人员：胡春艳 胡江锋
受保护的技术使用者：杨凌绿方生物工程有限公司
技术研发日：2023.04.06
技术公布日：2023/7/17