托珠单抗在制备治疗痴呆症或年龄相关性认知功能损害的药物中的用途

1.本发明属于药物技术领域，具体涉及托珠单抗的新用途，尤其涉及一种托珠单抗在制备治疗痴呆症和年龄相关性认知功能损害的药物中的用途。


背景技术：

2.老年性痴呆(alzheimer’s disease，ad)是一种以进行性发展的神经退行性疾病。临床上表现为记忆障碍、失语、失用、失认、视空间能力损害、抽象思维和计算力损害、人格和行为改变，继而影响患者的日常生活功能。尽管目前在临床上胆碱酯酶抑制剂和nmda受体的拮抗剂等被用于痴呆患者的对症治疗，但仍缺乏特异的、高效的延缓痴呆进展的治疗药物。
3.ad的发病机制有多种假说，其中β-淀粉样蛋白(β-amyloid，aβ)假说影响最为广泛和深远。小胶质细胞是大脑中主要的先天免疫细胞，在脑内与ad的病理标志物aβ、tau蛋白均存在共定位，随着高龄、慢性炎症等微环境改变以及aβ、tau等毒性刺激引起小胶质细胞过度活化及表型改变，小胶质细胞产生神经毒性细胞因子和趋化因子，包括tnfα、il-6、il-1β、no和ros可导致神经炎症、细胞损伤、萎缩和功能丧失等病理过程。综上，aβ异常积聚、神经炎性反应、小胶质细胞功能紊乱为ad患者脑内的核心病理环节。因此，靶向减轻炎症反应、增强稳态的小胶质细胞、减少aβ沉积是寻求防治痴呆药物的新方向。
4.近年来的研究发现神经炎症在ad的发病中起着重要作用。中枢神经系统免疫与外周免疫存在密切的交互。随着年龄的增长，骨髓造血干细胞出现衰老相关分泌表型状态，其主要特征是炎症和抗炎网络之间的失衡，表现为持续的低度炎症和产生自身免疫反应，释放包括il-6、il-8、ifn-γ、mcp-1和mmp-2、timp-2。大量研究发现ad患者的体液和组织中各种促炎细胞因子、补体等炎性介质的水平增加，提示免疫系统在ad发展的早期就参与相应病理生理过程。因此，靶向干预外周免疫将可能是ad治疗的一个新方向。
5.白细胞介素-6(il-6)是一种重要的促炎细胞因子，在免疫细胞的成熟、活化、增殖中均发挥重要作用。然而过度产生il-6可导致慢性炎症性疾病的发展(如类风湿性关节炎)以及细胞因子风暴(如新冠病毒感染)等在内的各种疾病。托珠单抗(tocilizumab)，是一种重组人源化抗人白介素6(il-6)受体单克隆抗体。托珠单抗通过抑制il-6与跨膜和可溶性il6受体结合，阻断il6介导的信号转导，从而拮抗炎症反应。药物安全性可靠，目前临床上已用于治疗类风湿性关节炎、全身型幼年特发性关节炎、视神经脊髓炎。成人推荐剂量8mg/kg，每4周静脉滴注1次。但目前尚未有将托珠单抗应用于痴呆症及相关疾病治疗的报道。


技术实现要素：

6.为了解决上述技术问题中的至少一个，本发明提供了托珠单抗在制备治疗痴呆症或年龄相关性认知功能损害的药物中的用途。本发明经研究发现，托珠单抗通过抑制il-6受体结合，阻断il6介导的信号转导，从而拮抗炎症发展，本发明还发现托珠单抗能恢复小
胶质细胞的功能稳态，减少aβ沉积，这是托珠单抗治疗痴呆症及年龄相关性认知功能损害等相关疾病的有效策略之一。
7.本发明解决其技术问题所采用的技术方案之一是：
8.托珠单抗在制备治疗痴呆症或年龄相关性认知功能损害的药物中的用途。
9.本发明解决其技术问题所采用的技术方案之二是：
10.一种治疗痴呆症或年龄相关性认知功能损害的组合物，所述组合物包括托珠单抗。所述组合物还可以包括治疗痴呆症或年龄相关性认知功能损害的其他药物，即托珠单抗可以与其他治疗痴呆症或年龄相关性认知功能损害的药物联合用药。其他治疗痴呆症或年龄相关性认知功能损害的药物例如为靶向aβ的药物、靶向tau的药物、靶向神经免疫炎症的药物、改善认知及精神行为异常的药物、胆碱酯酶抑制剂、nmda受体拮抗剂、靶向大脑葡萄糖代谢的药物等，并不以此为限。
11.本发明解决其技术问题所采用的技术方案之三是：
12.所述的包括托珠单抗的组合物在制备治疗痴呆症或年龄相关性认知功能损害的药物中的用途。
13.在上述托珠单抗或包括托珠单抗的组合物的制备治疗痴呆症或年龄相关性认知功能损害的药物中的用途中：
14.所述痴呆症包括老年性痴呆、额颞叶痴呆、血管性痴呆、路易体痴呆及免疫相关性认知障碍中的至少一种。
15.所述年龄相关性认知功能损害指的是除痴呆之外，其他随着年龄增长出现的认知功能下降。
16.优选地，所述托珠单抗单独使用，或作为活性成分与其他辅料共同使用。优选地，所述药物还包括至少一种药学上可接受的辅料或载体，即托珠单抗或包括托珠单抗的组合物不但可以单独制备成药物进行使用，还可以作为活性成分与药学上可接受的辅料或载体共同制备成药物进行使用。所述辅料包括但不限于稀释剂、溶剂、赋形剂、吸收剂、润湿剂、黏合剂、崩解剂、润滑剂、增溶剂、乳化剂、助悬剂、表面活性剂、成膜剂、抛射剂、抗氧剂、矫味剂、芳香剂、杀菌剂、防腐剂等；所述载体指能够担载化合物，并且具有改变化合物进入人体的方式和在体内的分布，控制释放速度达到控释或缓释，靶向输送至靶器官等作用的体系，包括但不限于脂质体、微球、微囊、固体分散体、胶束、微乳液、凝胶、缓释型载体、控释型载体、靶向型载体、纳米颗粒材料等。进一步地，托珠单抗或包括托珠单抗的组合物可以直接采用药学上可接受的工艺，或者与上述的药学上可接受的辅料或载体混合共同采用药学上可接受的工艺，制备成为具体的药物剂型。
17.优选地，所述药物的有效剂量为8mg/kg～18mg/kg；给药频次为18mg/kg，隔天一次，持续一个月；8mg/kg，每2周一次，持续3个月。
18.优选地，所述药物为静脉给药剂型。例如为静脉注射剂。
19.优选地，托珠单抗在治疗痴呆症或年龄相关性认知功能损害时，能够提高小胶质细胞的稳态(减轻小胶质细胞异常活化水平)，并降低痴呆患者尤其是老年痴呆患者、年龄相关性认知功能损害患者海马内的aβ水平，显著改善认知能力。
20.本发明所涉及的设备、试剂、工艺、参数等，除有特别说明外，均为常规设备、试剂、工艺、参数等，不再作实施例。
21.本发明所列举的所有范围包括该范围内的所有点值。
22.相比于现有技术的缺点和不足，本发明具有以下有益效果：
23.本发明发现了托珠单抗的新用途，在给予托珠单抗后，早期可以延缓神经病理的进展，中晚期不仅可以延缓神经病理进展，还可以明显改善痴呆小鼠的认知功能，即既具有延缓疾病进展的作用，又能改善认知功能，在早期、中晚期均启到治疗痴呆症的效果。
附图说明
24.附图示出了本公开的示例性实施方式，并与其说明一起用于解释本公开的原理，其中包括了这些附图以提供对本公开的进一步理解，并且附图包括在本说明书中并构成本说明书的一部分。
25.图1是年轻痴呆小鼠给予药物干预示意图。
26.图2是年轻痴呆小鼠给予托珠单抗后海马及皮层组织aβ水平改变结果。
27.图3是年轻痴呆小鼠给予托珠单抗后胶质细胞形态学改变结果。
28.图4是中年痴呆小鼠给予托珠单抗后的行为学结果。
29.图5是中年痴呆小鼠给予托珠单抗后海马及皮层组织aβ水平改变结果。
30.图6是中年痴呆小鼠给予托珠单抗后胶质细胞形态学改变结果。
31.图7是老年痴呆小鼠给予托珠单抗后的行为学结果。
32.图8是老年痴呆小鼠给予托珠单抗后海马组织aβ水平改变结果。
33.图9是老年痴呆小鼠给予托珠单抗后胶质细胞形态学改变结果。
具体实施方式
34.下面结合附图和实施方式对本公开作进一步的详细说明。可以理解的是，此处所描述的具体实施方式仅用于解释相关内容，而非对本公开的限定。另外还需要说明的是，为了便于描述，附图中仅示出了与本公开相关的部分。
35.需要说明的是，在不冲突的情况下，本公开中的实施方式及实施方式中的特征可以相互组合。下面将参考附图并结合实施方式来详细说明本公开。
36.实施例1：年轻痴呆小鼠给予托珠单抗后的病理学改变。
37.3月龄清洁级对照小鼠和痴呆小鼠，分为痴呆-溶剂组、痴呆-给药组、对照-溶剂组、对照-给药组。痴呆-给药组和对照-给药组给予托珠单抗(18mg/kg)，腹腔注射给药，痴呆-溶剂组和对照-溶剂组腹腔注射等量溶剂生理盐水，隔天一次，给药持续1个月后留取标本，如图1。对脑片进行aβ斑块的ts染色，发现给托珠单抗的痴呆-给药组较痴呆-溶剂组海马及皮层的aβ沉积均减少，如图2中a-b。同样对海马组织进行aβ的elisa检测表明给予托珠单抗的痴呆-给药组海马组织可溶性aβ和不可溶性aβ均明显减少，如图2中c。通过小胶质细胞标记物iba1免疫荧光染色，发现痴呆-溶剂组小胶质细胞较对照-溶剂组异常活化，胞体增大(iba1免疫反应性％面积增加)，突起增多，突起变短增粗(分级指数降低)；而痴呆-给药组较痴呆-溶剂组小胶质细胞异常活化减轻，小胶质细胞iba1免疫反应性％面积降低及分级指数增加，如图3中a-c。
38.实施例2：中年痴呆小鼠给予托珠单抗后认知功能明显改善。
39.5月龄清洁级对照小鼠和痴呆小鼠，分为痴呆-溶剂组、痴呆-给药组、对照-溶剂
组、对照-给药组。痴呆-给药组和对照-给药组给予托珠单抗(8mg/kg)，静脉给药，痴呆-溶剂组和对照-溶剂组腹腔注射等量溶剂生理盐水，每2周一次，给药持续3个月后，水迷宫测试结果表明：与给溶剂的对照-溶剂小鼠相比，如图4中c-d，给溶剂的痴呆-溶剂组小鼠的逃避潜伏期明显延长，而穿越平台次数明显减少；与给溶剂的痴呆-溶剂组小鼠相比，给托珠单抗的痴呆-给药组小鼠的逃避潜伏期明显缩短，而穿越平台次数明显增加。y迷宫测试结果表明：与给溶剂的痴呆-溶剂组小鼠相比，给托珠单抗的痴呆-给药组小鼠的自发交替率明显增加，如图4中g。
40.行为学测试结束后，对脑片进行aβ斑块的ts染色，发现给托珠单抗的痴呆-给药组较痴呆-溶剂组海马及皮层的aβ沉积均减少，如图5中a-b。同样对海马组织进行aβ的elisa检测表明给予托珠单抗的痴呆-给药组海马组织可溶性aβ和不可溶性aβ均明显减少，如图5中c。通过小胶质细胞标记物iba1免疫荧光染色，发现痴呆-溶剂组小胶质细胞较对照-溶剂组异常活化，胞体增大(iba1免疫反应性％面积增加)，突起增多，突起变短增粗(分级指数降低)；而痴呆给托珠单抗的痴呆-给药组较痴呆-溶剂组小胶质细胞异常活化减轻，小胶质细胞iba1免疫反应性％面积降低及分级指数增加，如图6中a-c。
41.实施例3：老年痴呆小鼠给予托珠单抗后认知功能明显改善。
42.8月龄清洁级对照小鼠和痴呆小鼠，分为痴呆-溶剂组、痴呆-给药组、对照-溶剂组、对照-给药组。痴呆-给药组和对照-给药组予托珠单抗(18mg/kg)，灌胃给药，痴呆-溶剂组和对照-溶剂组腹腔注射等量溶剂生理盐水，隔天一次，给药持续1个月后，y迷宫测试结果表明：与给溶剂的痴呆-溶剂组小鼠相比，给托珠单抗的痴呆-给药组小鼠的自发交替率明显增加，如图7中b。
43.对脑片进行aβ斑块的ts染色，发现给托珠单抗的痴呆-给药组较痴呆-溶剂组海马组织aβ沉积减少，如图8中a-b。同样对海马组织进行aβ的elisa检测表明给予托珠单抗的痴呆-给药组海马组织可溶性aβ和不可溶性aβ均明显减少，如图8中c。通过小胶质细胞标记物iba1免疫荧光染色，发现痴呆-溶剂组小胶质细胞较对照-溶剂组异常活化，胞体增大(iba1免疫反应性％面积增加)；而痴呆给托珠单抗的痴呆-给药组较痴呆-溶剂组小胶质细胞异常活化减轻，小胶质细胞iba1免疫反应性％面积降低，如图9中a-b。
44.通过上述实施例的抗痴呆实验，可以得出：
45.1.给予托珠单抗能下调年轻痴呆小鼠(疾病早期阶段)海马组织的aβ水平，减轻小胶质细胞异常活化水平。
46.2.给予托珠单抗能明显改善中年及老年痴呆小鼠(疾病中晚期阶段)的认知功能，下调痴呆小鼠海马组织的aβ水平，减轻小胶质细胞异常活化水平。
47.在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例/方式”、“一些实施例/方式”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例/方式或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本技术的至少一个实施例/方式或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不必须针对的是相同的实施例/方式或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任一个或多个实施例/方式或示例中以合适的方式结合。此外，在不相互矛盾的情况下，本领域的技术人员可以将本说明书中描述的不同实施例/方式或示例以及不同实施例/方式或示例的特征进行结合和组合。
48.本领域的技术人员应当理解，上述实施方式仅仅是为了清楚地说明本公开，而并
非是对本公开的范围进行限定。对于所属领域的技术人员而言，在上述公开的基础上还可以做出其它变化或变型，并且这些变化或变型仍处于本公开的范围内。

技术特征：
1.托珠单抗在制备治疗痴呆症或年龄相关性认知功能损害的药物中的用途。2.一种治疗痴呆症或年龄相关性认知功能损害的组合物，其特征在于：所述组合物包括托珠单抗。3.权利要求2所述的组合物在制备治疗痴呆症或年龄相关性认知功能损害的药物中的用途。4.根据权利要求1或3所述的用途，其特征在于：所述痴呆症包括老年性痴呆、额颞叶痴呆、血管性痴呆、路易体痴呆或免疫相关性认知障碍中的至少一种。5.根据权利要求1或3所述的用途，其特征在于：所述药物中托珠单抗的有效剂量为8mg/kg～18mg/kg。6.根据权利要求1或3所述的用途，其特征在于：所述药物为静脉给药剂型。7.根据权利要求1或3所述的用途，其特征在于：所述用途包括改善痴呆症患者或年龄相关性认知功能损害患者的认知能力。8.根据权利要求1或3所述的用途，其特征在于：所述用途包括降低痴呆症患者或年龄相关性认知功能损害患者海马内的aβ水平。9.根据权利要求1或3所述的用途，其特征在于：所述用途包括提高小胶质细胞的稳态水平。

技术总结
本发明公开了托珠单抗在制备治疗痴呆症或年龄相关性认知功能损害的药物中的用途。本发明发现了托珠单抗的新用途，在治疗性使用托珠单抗后，可以明显改善痴呆模型小鼠的认知功能和神经病理进程，即托珠单抗具有治疗痴呆症及年龄相关性认知功能损害等相关疾病的效果，可以用于制备相应的治疗痴呆症的药物、治疗年龄相关性认知功能损害的药物。龄相关性认知功能损害的药物。


技术研发人员：陈晓春 刘强 张静 方雯婷
受保护的技术使用者：福建医科大学
技术研发日：2023.04.26
技术公布日：2023/7/20