一种食用的天然植物萃取组合物及其制备方法与流程

1.本发明属于天然植物活性成分提取与制备技术领域，具体涉及一种食用的天然植物萃取组合物及其制备方法。


背景技术：

2.天然植物中含有大量活性物质，研究表明，从天然植物中提取出来的植物活性成分具备抗氧化、抗菌、抗病毒、抗炎、抑制胃肠道甲烷排放等功能，因此被认为是具有巨大开发和应用潜力的饲料添加剂，受到越来越多的关注。
3.可饲用天然植物活性功能组分包括酚类、生物碱、挥发油、苷类、多糖和有机酸等。要获得大量且较纯的植物活性功能组分是一个复杂的过程，涉及几个步骤，包括植物初步筛选、提取、分离纯化和结构解析等，然而涉及饲料添加剂的天然植物成分仍然研究较少。
4.传统溶剂萃取(cse)主要包括液液萃取(lle)、固相萃取(spe)和固相微萃取(spme)。cse工艺虽然简便易上手，但制备效率低，耗费大量有机溶剂，造成环境污染。近年来，超声辅助萃取、微波辅助萃取、酶解辅助萃取、加压液体萃取、亚临界水萃取、瞬时控制压降萃取、超临界二氧化碳萃取等新型绿色方法开始涌现。
5.由于天然植物中活性功能组分的提取和分离纯化所占用的时间最多，因此选择合适的制备方法关系到目标产物的得率和纯度，更关系到体内、体外评价的可靠性。
6.当前，虽然涌现了以微波、超声、酶、超临界流体等为代表的新型辅助萃取手段，以及以柱色谱、hplc和大孔吸附树脂等新型分离纯化方法，但方法学研究仍存在诸多问题，具体如下：(1)制备工艺的研究大多只关注某植物中的一种(类)活性功能组分，多种植物活性功能组分在动物体内代谢可能产生协同效应提高生物活性和生物利用度，因此对于单一组分追求太高纯度，则可能造成制备成本提高；(2)制备工艺优化的条件不一，即使采用同一方法，但选择的优化参数不同，导致大量研究无法进行比较和归纳；研究结果更注重产物的得率，而对制备过程中植物活性功能组分的分子结构损害程度缺乏关注，而这直接关系到制备后物质的生物活性。
7.天然植物提取物中的多酚类、皂苷类、多糖类等活性成分是较为理想的替抗物质，可以作为可食成分添加到饲料中。可饲用天然植物提取物能够改善畜禽的生长性能、抗氧化能力、肠道形态、菌群结构和免疫功能。与抗生素相比，可饲用天然植物提取物具有来源天然、功能全面、低毒副作用、不易产生耐药性等优势，具有很大的应用前景。
8.天然植物功能组分多样且复杂，制备工艺也呈现出多样化特征。不同的生产工艺提取的有效成分含量具有较大的差异，所附带的毒性也不相同。不同的提取时间、提取温度也会对有效成分的获得率产生影响。朱国健等分别采用回流法、超声回流法、超声波法提取金银花中的绿原酸，发现采用超声回流法的绿原酸得率最高。黄娜娜等通过比较不同工艺提取的决明子对小鼠毒性的影响，得出正丁醇萃取物、水提物、全粉提取物、醇提物的毒性依次增强的结论。史秀玲等采用普通水提醇沉法探究提取温度、提取时间、料液比对杜仲多糖提取率的影响，结果发现，提取时间的影响因素最大，其次为提取温度和料液比。因此，生
产工艺选择不当，可能会导致有效成分流失，造成原料的浪费，进而造成生产成本的提高。
9.如何提供一种食用的天然植物萃取组合物及其制备方法，以期将其添加到饲料中作为可饲用天然植物成分，实现更好地促进动物生长，提高生产性能，改善肠道健康，增强免疫力，成为亟待解决的技术问题。


技术实现要素：

10.本发明的目的就是为了解决上述技术问题，从而提供一种食用的天然植物萃取组合物及其制备方法。本发明的技术目的在于：提供一种可食用的天然植物萃取组合物，该萃取组合物可以适用于多种可饲用天然植物进行活性成分的提取，且提取获得的多种活性成分含量高，纯度高，不需要复杂的纯化步骤，同时解决现有的天然植物活性成分添加到饲料中对促进动物生长，提高生产性能，增强免疫力等功效仍有较大不足的缺陷。
11.本发明的目的之一是提供一种食用的天然植物萃取组合物，包括蜜炙黄芪12～20份、枇杷叶提取物15～18份、罗汉果提取物6～8份、鱼腥草提取物3～6份和猕猴桃提取物10～12份。
12.作为优选的方案，本发明提供食用的天然植物萃取组合物包括蜜炙黄芪18份、枇杷叶提取物16份、罗汉果提取物6份、鱼腥草提取物4份和猕猴桃提取物10份。
13.本发明提供的上述天然植物萃取组合物，含有大量的活性物质黄酮、科罗索酸、罗汉果苷、鱼腥草素和多酚，这些活性成分能够很好用于饲料中，起到促进动物生长、提高生产性能、增强免疫力的功能。然而，由于这些活性成分的口感并不好，含有较重的苦涩味，会影响饲料的食口性，本发明选择将口感同样不好的生黄芪制备成蜜炙黄芪，并按照上述组分混合后制备饲料添加剂，发现能够显著增加断奶仔猪的生长性能和肉质，并提高其生产性能和免疫力。
14.本发明的目的之二是提供一种如上所述的食用的天然植物萃取组合物的制备方法，包括以下步骤：
15.(1)以枇杷叶、罗汉果、鱼腥草和猕猴桃的混合物为天然植物原料，将天然植物原料研磨成细粉后混合；
16.(2)取上述混合细粉置于提取液中，超声波辅助提取15～25min，所述提取液为乙醇、甲醇和甲酸的混合溶液，其中，所述乙醇的质量浓度为95％～98％，甲醇的质量浓度为0.5～2％，甲酸的质量浓度为2～4％；控制超声波辅助提取的参数依次为100w提取12min，150w提取18min，200w提取15min，350w提取20min；
17.(3)将提取液离心，取离心后的上清液用过滤膜过滤得到滤液，所得滤液采用多级膜联用分离系统进行浓缩分离，控制多级膜联用分离系统中四级反渗透膜的尺寸为0.45～0.15μm，渗透压力为5～25bar，收集各部分浓缩滤液，即得到枇杷叶提取物、罗汉果提取物、鱼腥草提取物和猕猴桃提取物；
18.(4)取蜂蜜和水按1：2混合，搅拌均匀，然后涂抹于生黄芪上，待其吸收至干，然后置入炒锅中进行文火炒制，至黄芪片表面呈棕黄色，加10倍量水，煮沸，放凉至一定温度，制得蜜炙黄芪；
19.(5)将枇杷叶提取物、罗汉果提取物、鱼腥草提取物和猕猴桃提取物与蜜炙黄芪按照相应重量份混合，即得到食用的天然植物萃取组合物。
20.本发明提供的上述制备方法，能够同时从多种天然植物原料中提取分离多种活性成分，以能够获得多种活性成分为目的。由于乙醇是最好的有机溶剂，其无毒且对大部分活性分子具有较好的溶解性，发明人选择以乙醇为提取剂，起初的研究虽然能够对几种天然植物原料进行混合提取，但所需的提取时间很长，往往需要24h以上，而且提取效果很差，混合提取所得的每种活性成分的量极少，无法用于后续的萃取和浓缩步骤。
21.发明人对提取工艺和条件进行了大量摸索，并尝试了各种提取方式的组合，最终，发明人意外发现，采用本发明的上述萃取和浓缩工艺，特别是采用了本发明的四种提取物，能够大大缩短提取物的提取时间，并获得大量的活性成分。
22.同时，在获得相应的四种提取物之下，本发明将枇杷叶提取物、罗汉果提取物、鱼腥草提取物和猕猴桃提取物这四种提取物与蜜炙黄芪进行混合，并研究了其配比，发现按照本发明的配方制备得到的食用的天然植物萃取组合物用于饲料添加剂，能够最大程度促进动物生长、提高生产性能和增强免疫力。
23.进一步的是，步骤(1)中将各种天然植物原料研磨成粒度为100～200目的细粉。
24.进一步的是，步骤(2)中所述混合细粉与提取液的料液比为5∶30g/ml。
25.进一步的是，步骤(3)中所述离心的步骤为于12000rpm离心10min。
26.进一步的是，步骤(3)中所述多级膜联用分离系统中各级反渗透膜的尺寸依次为0.45μm、0.35μm、0.28μm和0.15μm。
27.进一步的是，控制多级膜联用分离系统中各级反渗透膜之间的渗透压力依次为5bar、12bar、18bar和22bar。
28.进一步的是，步骤(4)中所述蜂蜜与生黄芪的重量比为1∶4。
29.进一步的是，步骤(4)中所述炒制的温度为100～110℃。
30.本发明的有益效果如下：
31.(1)本发明提供了一种可以同时提取得到枇杷叶提取物、罗汉果提取物、鱼腥草提取物和猕猴桃提取物的方法，无需经过复杂的纯化步骤即可从不同天然植物原料中高效提取得到多种不同的活性成分，且活性成分的含量高，纯度高；
32.(2)本发明将四种提取物与蜜炙黄芪按照相应重量份混合，得到了食用的天然植物萃取组合物，将其作为饲料添加剂，能够显著增加断奶仔猪的生长性能，并提高其免疫力。
具体实施方式
33.为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例对本发明进行具体描述，有必要指出的是，以下实施例仅仅用于对本发明进行解释和说明，并不用于限定本发明。本领域技术人员根据上述发明内容所做出的一些非本质的改进和调整，仍属于本发明的保护范围。
34.实施例1
35.一种食用的天然植物萃取组合物，包括蜜炙黄芪12份、枇杷叶提取物15份、罗汉果提取物6份、鱼腥草提取物3份和猕猴桃提取物10份。
36.其制备方法包括以下步骤：
37.(1)选择枇杷叶、罗汉果、鱼腥草和猕猴桃为天然植物原料，将上述四种天然植物
原料分别经真空干燥处理，研磨成100目的细粉，取枇杷叶粉5g、罗汉果粉2g、鱼腥草粉3g、黄芪粉1g和猕猴桃粉4g，得到天然植物混合细粉；
38.(2)取上述混合细粉置于提取液中，按照料液比为5g混合细粉：30ml提取液的比例混合，经超声波辅助提取15～25min，提取液为乙醇、甲醇和甲酸的混合溶液，其中，所述乙醇的质量浓度为96％，甲醇的质量浓度为1％，甲酸的质量浓度为3％；控制超声波辅助提取的参数依次为100w提取12min，150w提取18min，200w提取15min，350w提取20min；待提取完成后将提取液于12000rpm下离心10min，取离心后的上清液用0.45μm过滤膜过滤得到滤液，减压浓缩去除提取液中的有机溶剂；
39.(3)将所得滤液采用多级膜联用分离系统进行浓缩分离，控制多级膜联用分离系统中各级反渗透膜的尺寸依次为0.45μm、0.35μm、0.28μm、0.15μm，渗透压力依次为5bar、12bar、18bar、22bar，收集各部分浓缩滤液，即得到枇杷叶提取物、罗汉果提取物、鱼腥草提取物和猕猴桃提取物；
40.(4)取蜂蜜和水按1∶2混合，搅拌均匀，然后涂抹于生黄芪上，所述蜂蜜与生黄芪的重量比为1∶4，待其吸收至干，然后置入炒锅中于100℃进行文火炒制，至黄芪片表面呈棕黄色，加10倍量水，煮沸，放凉至常温，制得蜜炙黄芪；
41.(5)将枇杷叶提取物、罗汉果提取物、鱼腥草提取物和猕猴桃提取物与蜜炙黄芪按照相应重量份混合，即得到食用的天然植物萃取组合物。
42.对食用的天然植物萃取组合物中各天然植物活性成分进行，得到包括黄酮、科罗索酸、罗汉果苷、鱼腥草素和多酚五种活性成分，各活性成分的含量为20％～40％、纯度均高达80％以上。
43.实施例2
44.一种食用的天然植物萃取组合物，包括蜜炙黄芪20份、枇杷叶提取物18份、罗汉果提取物8份、鱼腥草提取物6份和猕猴桃提取物12份。
45.其制备方法包括以下步骤：
46.(1)选择枇杷叶、罗汉果、鱼腥草和猕猴桃为天然植物原料，将上述四种天然植物原料分别经真空干燥处理，研磨成200目的细粉，取枇杷叶粉10g、罗汉果粉4g、鱼腥草粉6g、黄芪粉2g和猕猴桃粉8g，得到天然植物混合细粉；
47.(2)取上述混合细粉置于提取液中，按照料液比为5g混合细粉：30ml提取液的比例混合，经超声波辅助提取25min，提取液为乙醇、甲醇和甲酸的混合溶液，其中，所述乙醇的质量浓度为95％，甲醇的质量浓度为2％，甲酸的质量浓度为3％；控制超声波辅助提取的参数依次为100w提取12min，150w提取18min，200w提取15min，350w提取20min；待提取完成后将提取液于12000rpm下离心10min，取离心后的上清液用0.45μm过滤膜过滤得到滤液，减压浓缩去除提取液中的有机溶剂；
48.(3)将所得滤液采用多级膜联用分离系统进行浓缩分离，控制多级膜联用分离系统中各级反渗透膜的尺寸依次为0.45μm、0.35μm、0.28μm、0.15μm，渗透压力依次为5bar、12bar、18bar、22bar，收集各部分浓缩滤液，即得到枇杷叶提取物、罗汉果提取物、鱼腥草提取物和猕猴桃提取物；
49.(4)取蜂蜜和水按1∶2混合，搅拌均匀，然后涂抹于生黄芪上，所述蜂蜜与生黄芪的重量比为1∶4，待其吸收至干，然后置入炒锅中于110℃进行文火炒制，至黄芪片表面呈棕黄
色，加10倍量水，煮沸，放凉至常温，制得蜜炙黄芪；
50.(5)将枇杷叶提取物、罗汉果提取物、鱼腥草提取物和猕猴桃提取物与蜜炙黄芪按照相应重量份混合，即得到食用的天然植物萃取组合物。
51.对食用的天然植物萃取组合物中各天然植物活性成分进行，得到包括黄酮、科罗索酸、罗汉果苷、鱼腥草素和多酚五种活性成分，各活性成分的含量为20％～40％、纯度均高达80％以上。
52.实施例3
53.一种食用的天然植物萃取组合物，包括蜜炙黄芪18份、枇杷叶提取物16份、罗汉果提取物6份、鱼腥草提取物4份和猕猴桃提取物10份。
54.其制备方法包括以下步骤：
55.(1)选择枇杷叶、罗汉果、鱼腥草和猕猴桃为天然植物原料，将上述四种天然植物原料分别经真空干燥处理，研磨成100目的细粉，取枇杷叶粉5g、罗汉果粉2g、鱼腥草粉3g、黄芪粉1g和猕猴桃粉4g，得到天然植物混合细粉；
56.(2)取上述混合细粉置于提取液中，按照料液比为5g混合细粉：30ml提取液的比例混合，经超声波辅助提取25min，提取液为乙醇、甲醇和甲酸的混合溶液，其中，所述乙醇的质量浓度为97％，甲醇的质量浓度为1％，甲酸的质量浓度为2％；控制超声波辅助提取的参数依次为100w提取12min，150w提取18min，200w提取15min，350w提取20min；待提取完成后将提取液于12000rpm下离心10min，取离心后的上清液用0.45μm过滤膜过滤得到滤液，减压浓缩去除提取液中的有机溶剂；
57.(3)将所得滤液采用多级膜联用分离系统进行浓缩分离，控制多级膜联用分离系统中各级反渗透膜的尺寸依次为0.45μm、0.35μm、0.28μm、0.15μm，渗透压力依次为5bar、12bar、18bar、22bar，收集各部分浓缩滤液，即得到枇杷叶提取物、罗汉果提取物、鱼腥草提取物和猕猴桃提取物；
58.(4)取蜂蜜和水按1∶2混合，搅拌均匀，然后涂抹于生黄芪上，所述蜂蜜与生黄芪的重量比为1∶4，待其吸收至干，然后置入炒锅中于100～110℃进行文火炒制，至黄芪片表面呈棕黄色，加10倍量水，煮沸，放凉至常温，制得蜜炙黄芪；
59.(5)将枇杷叶提取物、罗汉果提取物、鱼腥草提取物和猕猴桃提取物与蜜炙黄芪按照相应重量份混合，即得到食用的天然植物萃取组合物。
60.对食用的天然植物萃取组合物中各天然植物活性成分进行，得到包括黄酮、科罗索酸、罗汉果苷、鱼腥草素和多酚五种活性成分，各活性成分的含量为20％～40％、纯度均高达80％以上。
61.实验例1
62.将本发明实施例1-3所得食用的天然植物萃取组合物作为饲料添加剂，添加到断奶仔猪的常用饲料中，添加量为3％。
63.(一)试验设计：
64.选取250头日龄胎次相近、体重约7kg的健康“长白
×
大白”杂交的断奶仔猪，随机分成空白组、对照组和试验组，每组5个重复，每个重复10头猪。试验在四川省某生猪养殖基地进行，试验期35d。空白组仔猪饲喂基础日粮，对照组在基础日粮的基础上添加吉他霉素53.2mg/kg+杆菌肽锌39.2mg/kg，试验组在基础日粮的基础上添加实施例1-3所得天然植物
萃取组合物。基础日粮组成及营养水平见表1。
65.表1
66.原料组成含量％玉米64麸皮5豆粕21鱼粉5乳清粉5合计100
67.(二)饲养管理
68.试验前对猪舍进行彻底清扫和消毒，仔猪自由采食与饮水，每日按时打扫舍内卫生，清理料槽，防疫按猪场防疫管理规程进行。每日记录观察猪的粪便、精神状态和采食量。试验开始和试验结束前空腹12h称重。
69.(三)测定指标及方法
70.1、生长性能
71.试验开始和结束时测定各组的体重，统计每栏试验猪的总投料量，计算平均日增重(adg)、平均日采食量(adfi)和料重比(f/g)。
72.平均日增重＝(末重-初重)/(试验天数
×
头数)
73.平均日采食量＝总投料量/头数
×
试验天数
74.料重比＝平均日采食量/平均日增重
75.2、血清生化指标、抗氧化能力及免疫功能
76.试验结束空腹采血5～10ml。静置2h，3000r/min离心10min，取上层血清，-20℃保存。使用试剂盒(南京建成生物工程研究所)测定总蛋白(tp)、白蛋白(alb)、总胆固醇(tc)、甘油三酯(tg)、低密度脂蛋白胆固醇(ldl)、高密度脂蛋白胆固醇(hdl)、血清尿素氮(bun)含量、谷草转氨酶(ast)、谷丙转氨酶(alt)、碱性磷酸酶(alp)活性。使用试剂盒(南京建成生物工程研究所)测定总抗氧化能力(t-aoc)、丙二醛(mda)含量以及谷胱甘肽过氧化物酶(gsh-px)和总超氧化物歧化酶(t-sod)活性。使用试剂盒(南京建成生物工程研究所)测定白介素-4(il-4)、白介素-6(il-6)、肿瘤坏死因子-β(tnf-β)、免疫球蛋白a(iga)、免疫球蛋白g(igg)、免疫球蛋白m(igm)含量。测定方法均参照说明书步骤进行。
77.3、试验结果
78.天然植物萃取组合物作为饲料添加剂对断奶仔猪生长性能的影响见表2。由表2可知，试验组和对照组均有提高断奶仔猪生长性能的趋势；与空白组相比，试验组能够极显著提升仔猪的生长性能。
79.表2
[0080][0081]
另外，经测定，天然植物萃取组合物作为饲料添加剂对断奶仔猪抗氧化能力有较大提升，同时对断奶仔猪血清免疫性能有明显提升。

技术特征：
1.一种食用的天然植物萃取组合物，其特征在于，包括蜜炙黄芪12～20份、枇杷叶提取物15～18份、罗汉果提取物6～8份、鱼腥草提取物3～6份和猕猴桃提取物10～12份。2.根据权利要求1所述的食用的天然植物萃取组合物，其特征在于，包括蜜炙黄芪18份、枇杷叶提取物16份、罗汉果提取物6份、鱼腥草提取物4份和猕猴桃提取物10份。3.一种如权利要求1或2所述的食用的天然植物萃取组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)以枇杷叶、罗汉果、鱼腥草和猕猴桃的混合物为天然植物原料，将天然植物原料研磨成细粉后混合；(2)取上述混合细粉置于提取液中，超声波辅助提取15～25min，所述提取液为乙醇、甲醇和甲酸的混合溶液，其中，所述乙醇的质量浓度为95％～98％，甲醇的质量浓度为0.5～2％，甲酸的质量浓度为2～4％；控制超声波辅助提取的参数依次为100w提取12min，150w提取18min，200w提取15min，350w提取20min；(3)将提取液离心，取离心后的上清液用过滤膜过滤得到滤液，所得滤液采用多级膜联用分离系统进行浓缩分离，控制多级膜联用分离系统中四级反渗透膜的尺寸为0.45～0.15μm，渗透压力为5～25bar，收集各部分浓缩滤液，即得到枇杷叶提取物、罗汉果提取物、鱼腥草提取物和猕猴桃提取物；(4)取蜂蜜和水按1∶2混合，搅拌均匀，然后涂抹于生黄芪上，待其吸收至干，然后置入炒锅中进行文火炒制，至黄芪片表面呈棕黄色，加10倍量水，煮沸，放凉，制得蜜炙黄芪；(5)将枇杷叶提取物、罗汉果提取物、鱼腥草提取物和猕猴桃提取物与蜜炙黄芪按照相应重量份混合，即得到食用的天然植物萃取组合物。4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中将各种天然植物原料研磨成粒度为100～200目的细粉。5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述混合细粉与提取液的料液比为5∶30g/ml。6.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中所述离心的步骤为于12000rpm离心10min。7.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中所述多级膜联用分离系统中各级反渗透膜的尺寸依次为0.45μm、0.35μm、0.28μm和0.15μm。8.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，控制多级膜联用分离系统中各级反渗透膜之间的渗透压力依次为5bar、12bar、18bar和22bar。9.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(4)中所述蜂蜜与生黄芪的重量比为1∶4。10.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(4)中所述炒制的温度为100～110℃。

技术总结
本发明提供了一种食用的天然植物萃取组合物及其制备方法，属于天然植物提取与制备技术领域。本发明提供的食用的天然植物萃取组合物包括蜜炙黄芪12～20份、枇杷叶提取物15～18份、罗汉果提取物6～8份、鱼腥草提取物3～6份和猕猴桃提取物10～12份。该天然植物萃取组合物，含有大量的活性物质黄酮、科罗索酸、罗汉果苷、鱼腥草素和多酚，这些活性成分能够很好用于饲料中，起到促进动物生长、提高生产性能、增强免疫力的功能。且其中的蜜炙黄芪能够很好改善饲料口感，能够显著增加断奶仔猪的生长性能和提高其免疫力。和提高其免疫力。


技术研发人员：刘波 康丽君
受保护的技术使用者：云南米利食品有限公司
技术研发日：2023.04.18
技术公布日：2023/7/21