一种氧化氮供体型曲前列尼尔类衍生物及其药物组合物和用途的制作方法

1.本发明属于生物医药领域，具体涉及一种偶联no供体型曲前列尼尔衍生物或其可药用盐，其药物组合物及用途。


背景技术：

2.肺动脉高压(pah)是一类以肺血管阻力升高、右心室衰竭为特征的恶性疾病。机体内的前列素通过与血小板或血管平滑肌上的前列素受体作用，激活腺苷酸环化酶，进而提高细胞内camp的浓度，可以起到扩张血管的作用。
3.前列环素(pgi2)类药物是治疗pah的靶向药物的重要类型之一，曲前列尼尔作为一类前列素类似物，可以与前列素受体特异性结合，发挥舒张血管平滑肌、降低肺动脉压力并抑制肺动脉血管重构和原位血栓形成的作用。曲前列尼尔是目前用于治疗pah国外内唯一一种具有多种药方式，如皮下、静脉、吸入或口服皮下/静脉给药的前列环素类药物，具有抗血小板和血管扩张的特性，其结构稳定、作用时间比其他几个前列环素更长，是治疗肺动脉高压的优选的药物(nika skoro-sajer，drugs 2012；james c coons，等，therapeutic advances in respiratory disease，2021；steven d nathan,等,lancent respiratory medicine,2021)。
4.一氧化氮(nitric oxide，no)是一种广泛存在于人体内的信使分子，具有多种生理活性，在生理浓度下，可以通过激活平滑肌细胞中的可溶性鸟苷酸环化酶，增加胞内的cgmp水平，从而使得血管舒张，起到调节血压的作用。no也是用于肺动脉高压和肺栓塞的常用药物(fernanda blasina，等，pulmonary pharmacology&therapeutics，2019；jeffrey a.kline，am heart j.2017；)，尤其在儿童和新生儿肺高压治疗及晚期住院患者治疗上有特别的优势(puthiyachirakkal m等,front pediatr，2013；petros aj和pierce cm,paediatr anaesth，2006)，但由于其本身是气体，必须在医院内给药，同时需要采用吸入方式给药，但因患者个体差异较大，剂量较难控制，因此目前在临床上使用逐步减少，只在住院患者和危急状况下还有使用。
5.由于肺动脉高压发病机制较为复杂，临床上已有两种或三种不同作用机制的药物联合给药方案来提高疗效(white rj，等，am j respir crit care med，2020；verlinden nj，等，pulmonary circulation 2020)。由于no和曲前列尼尔各自特殊优势且是分别通过两种第二信使cgmp和camp途径来起效的，临床上也有采用联合给药的方式将来提高治疗效果的经验(stacy mandras，等，j of cardiovascular pharmacol and therap，2021)，但由于两种药物要分别采用不同给药方式(no必须是在医院吸入，曲前可以是口服或注射或吸入)，因此药物使用非常不便，患者依从度低较难获得理想治疗效果。
6.本发明为一系列曲前列尼尔和no供体偶联的创新药物，该类药物结合了曲前列尼尔和no两个特征成分，在体内分解成为曲前列尼尔和no供体并进而产生no，一方面提供曲前列尼尔和前列素受体特异性结合，发挥舒张血管平滑肌的作用，另一方面，该药物在体内
可以释放出no分子，能够快速起效，由于曲前列尼尔和no分别通过cgmps和camp不同的作用途径，因此，两者有相互协同增效功能，加强了舒张血管的作用，同时更方便给药，解决了患者依从性问题，能够在疗效上能够更有效治疗肺动脉高压、呼吸窘迫综合征、慢性动脉闭塞性疾病等等疾病。


技术实现要素：

7.发明目的：针对临床广泛使用曲前列尼尔疗效较弱的缺陷，提供了一种偶联no供体型曲前列尼尔衍生物或其可药用盐。该类偶联no供体型曲前列尼尔衍生物或其可药用盐可用于肺动脉高压、呼吸窘迫综合征、慢性动脉闭塞性疾病等的治疗。
8.技术方案：为了实现上述目的，如本发明所述一种如下式ⅰ所示的偶联no供体型曲前列尼尔衍生物或其可药用盐：
[0009][0010]
n为0-6，优选为0,1,2,3或4；
[0011]
r为-x-ono2、-oc(o)-x-ono2、-o-x-ono2、或其中x为直链或支链的c
1-c
10
烷基、c
5-7
环烷基或-c
1-c
10
烷基-芳环-；其中c
1-c
10
烷基、c
5-7
环烷基或芳环可被以下一个或者多个取代基取代：卤原子、羟基、羧基、氰基或-(c
1-c
10
烷基)-ono2。
[0012]
进一步，所述化合物包括以下任意一种结构：
[0013]
[0014][0015]
本发明还提供了一种药物组合物，含有治疗有效量的偶联no供体型曲前列尼尔衍生物或其可药用盐和药学上可接受的载体。
[0016]
本发明所述的载体可以为缓释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂、吸收促进剂、吸附载体、表面活性剂和润滑剂中的任意一种或两种以上的混合物。
[0017]
所述的药物组合物，优选外用制剂、口服制剂和注射制剂中的任意一种。
[0018]
所述口服制剂为颗粒剂、胶囊剂和片剂中的任意一种。
[0019]
本发明所述的偶联no供体型曲前列尼尔衍生物或其可药用盐，包括其作为前环列素类似物的应用。
[0020]
本发明所述的偶联no供体型曲前列尼尔衍生物或其可药用盐，包括其在制备治疗肺动脉高压、呼吸窘迫综合征、慢性动脉闭塞性疾病等药物中的应用。
[0021]
有益效果：与现有技术相比，本发明具有如下优点：
[0022]
本发明提供一类偶联no供体型曲前列尼尔衍生物或其可药用盐，解决了曲前列尼尔疗效较弱及no给药不便剂量无法控制等缺陷，并通过两者协同作用提高了药物的有效性和患者的依从性，及药物有效性控制也得到了提高。
附图说明
[0023]
图1为大鼠体内试验测定的低氧性肺动脉高压(mpap)的比较图。
具体实施方式
[0024]
以下结合实施例对本发明作进一步说明。
[0025]
实施例1
[0026][0027]
合成路线：
[0028][0029]
实施例1的合成
[0030]
将浓硫酸(13mmol)溶于二氯甲烷中，0℃条件下缓慢滴入发烟硝酸(14mmol)，继续反应20min后，将2-溴乙醇(6mmol)加入上述反应液中。0℃条件下继续反应4小时，将该反应液缓慢倒入冰水中，用二氯甲烷(50ml)萃取两次，收集有机相，水洗一次，饱和食盐水洗一次，旋干得产物2-溴乙基硝酸酯。
[0031]
将曲前列尼尔(60mg)，用2ml无水dmf溶解，将碘化钾(75mg)、碳酸钾(62mg)和2-溴乙基硝酸酯(80mg)的二氯甲烷溶液滴入，移至50℃条件下搅拌反应2h，tlc检测反应完全，旋干溶剂，hplc纯化得实施例1，收率56％。1h nmr(300mhz,dmso-d)δ7.08(t,j＝7.9hz,1h),6.78(dq,j＝7.8,1.1hz,2h),4.76
–
4.60(m,4h),4.47(td,j＝6.2,1.4hz,2h),3.96(qd,j＝5.7,4.8hz,1h),3.58
–
3.48(m,1h),3.10
–
2.92(m,2h),2.87
–
2.67(m,2h),2.24
–
1.96(m,3h),1.96
–
1.78(m,2h),1.73
–
1.50(m,4h),1.48
–
1.23(m,8h),0.96
–
0.79(m,3h).
[0032]
实施例2
[0033][0034]
参考实施例1的合成方法，可制得实施例2。1h nmr(300mhz,dmso-d)δ7.12(t,j＝7.2hz,1h),6.92
–
6.64(m,2h),4.41(t,j＝6.1hz,2h),4.29(dd,j＝6.4,5.7hz,2h),3.95(qd,j＝5.5,4.6hz,1h),3.61
–
3.49(m,1h),2.96(d,j＝7.2hz,2h),2.88
–
2.67(m,2h),2.29
–
1.98(m,5h),1.95
–
1.80(m,2h),1.70
–
1.53(m,4h),1.47
–
1.20(m,8h),0.98
–
0.79(m,
3h).
[0035]
实施例3
[0036][0037]
参考实施例1的合成方法，可制得实施例3。1h nmr(300mhz,methanol-d4)δ7.13(t,j＝7.0hz,1h),6.78(dq,j＝7.8,1.1hz,2h),4.67(s,2h),4.46
–
4.27(m,2h),4.23
–
4.09(m,2h),3.97(qd,j＝5.5,4.6hz,1h),3.64
–
3.46(m,1h),2.96(d,j＝7.2hz,2h),2.91
–
2.67(m,2h),2.27
–
1.97(m,3h),1.97
–
1.78(m,6h),1.78
–
1.51(m,4h),1.44
–
1.20(m,8h),1.02
–
0.77(m,3h).
[0038]
实施例4
[0039][0040]
参考实施例1的合成方法，可制得实施例4。1h nmr(300mhz,dmso-d4)δ7.08(t,j＝7.9hz,1h),6.89
–
6.66(m,2h),4.67(s,2h),4.28(t,j＝6.1hz,2h),4.12(t,j＝6.1hz,2h),3.97(qd,j＝5.5,4.6hz,1h),3.62
–
3.47(m,1h),2.87
–
2.68(m,2h),2.41(d,j＝5.3hz,1h),2.26
–
1.96(m,3h),1.96
–
1.49(m,12h),1.49
–
1.17(m,8h),0.94
–
0.79(m,3h).
[0041]
实施例5
[0042][0043]
参考实施例1的合成方法，可制得实施例5。1h nmr(300mhz,dmso-d4)δ7.08(t,j＝7.9hz,1h),6.89
–
6.71(m,2h),4.67(s,2h),4.29(t,j＝6.1hz,2h),4.12(td,j＝6.0,1.0hz,2h),3.97(qd,j＝5.5,4.6hz,1h),3.62
–
3.46(m,1h),2.89
–
2.67(m,2h),2.41(d,j＝5.3hz,1h),2.29
–
1.98(m,3h),1.98
–
1.52(m,10h),1.52
–
1.25(m,12h),0.98
–
0.78(m,3h).
[0044]
实施例6
[0045][0046]
实施例6的合成
[0047]
参考实施例1的合成方法，可制得化合物6。1h nmr(300mhz,dmso-d)δ7.61
–
7.39(m,2h),7.39
–
7.21(m,2h),7.07(t,j＝7.9hz,1h),6.87
–
6.68(m,2h),5.41(dt,j＝2.9,1.0hz,2h),5.19(t,j＝1.1hz,2h),3.97(qd,j＝5.5,4.6hz,1h),3.61
–
3.47(m,1h),2.92
–
2.68(m,2h),2.25
–
1.96(m,3h),1.96
–
1.80(m,2h),1.77
–
1.49(m,4h),1.49
–
1.21(m,8h),1.00
–
0.75(m,3h).
[0048]
实施例7
[0049][0050]
参考实施例1的合成方法，可制得实施例7。1h nmr(300mhz,dmso-d)δ7.43
–
7.34(m,2h),7.09(t,j＝7.9hz,1h),7.06
–
6.97(m,2h),6.81
–
6.72(m,2h),5.52
–
5.20(m,2h),4.67(s,2h),4.36
–
4.13(m,2h),3.97(qd,j＝5.5,4.6hz,1h),3.64
–
3.49(m,1h),2.89(tt,j＝6.5,1.0hz,2h),2.87
–
2.69(m,2h),2.22
–
1.97(m,3h),1.97
–
1.80(m,2h),1.76
–
1.51(m,4h),1.47
–
1.24(m,8h),0.94
–
0.77(m,3h).
[0051]
实施例8
[0052][0053]
参考实施例1的合成方法，可制得化合物8。1h nmr(300mhz,dmso-d)δ7.08(t,j＝7.9hz,1h),6.77(dd,j＝8.2,1.1hz,2h),4.71
–
4.54(m,3h),4.37(t,j＝6.0hz,2h),3.97(qd,j＝5.5,4.6hz,1h),3.62
–
3.47(m,1h),2.91
–
2.68(m,2h),2.26
–
1.96(m,3h),1.96
–
1.77(m,6h),1.77
–
1.50(m,6h),1.50
–
1.39(m,4h),1.39
–
1.25(m,4h),1.07
–
0.67(m,6h).
[0054]
实施例9
[0055][0056]
参考实施例1的合成方法，可制得实施例9。1h nmr(300mhz,dmso-d)δ7.08(t,j＝7.9hz,1h),6.83
–
6.60(m,2h),4.82
–
4.68(m,2h),4.65(s,2h),3.97(qd,j＝5.5,4.6hz,1h),3.60
–
3.44(m,1h),2.89
–
2.62(m,2h),2.29
–
1.99(m,3h),1.99
–
1.77(m,10h),1.77
–
1.48(m,4h),1.48
–
1.22(m,8h),0.97
–
0.82(m,3h).
[0057]
实施例10
[0058][0059]
参考实施例1的合成方法，可制得实施例10。1h nmr(300mhz,chloroform-d)δ7.13
–
6.99(m,1h),6.85
–
6.70(m,2h),5.33(p,j＝5.6hz,1h),4.82
–
4.62(m,6h),3.97(qd,j＝5.5,4.6hz,1h),3.65
–
3.46(m,1h),3.06
–
2.87(m,2h),2.87
–
2.69(m,2h),2.26
–
1.97(m,3h),1.97
–
1.78(m,2h),1.76
–
1.50(m,4h),1.50
–
1.25(m,8h),1.00
–
0.87(m,3h).
[0060]
实施例11
[0061][0062]
参考实施例1的合成方法，可制得实施例11。1h nmr(300mhz,dmso-d)δ7.09(t,j＝7.9hz,1h),6.88
–
6.68(m,2h),4.68(d,j＝1.0hz,2h),4.42(t,j＝6.6hz,2h),4.35(d,j＝6.2hz,2h),3.99(qd,j＝5.5,4.6hz,1h),3.60
–
3.49(m,1h),2.96(d,j＝7.2hz,2h),2.87
–
2.66(m,2h),2.38
–
2.16(m,2h),2.16
–
2.01(m,4h),2.01
–
1.78(m,2h),1.78
–
1.48(m,4h),1.48
–
1.24(m,8h),1.02
–
0.77(m,3h).
[0063]
实施例12
[0064][0065]
参考实施例1的合成方法，可制得实施例12。1h nmr(300mhz,dmso-d)δ7.08(t,j＝7.9hz,1h),6.78(dd,j＝7.7,1.4hz,2h),5.28
–
5.01(m,2h),4.62(t,j＝6.2hz,2h),3.97(qd,j＝5.5,4.6hz,1h),3.87(t,j＝6.2hz,2h),3.62
–
3.47(m,1h),2.87
–
2.63(m,2h),2.26
–
2.16(m,1h),2.16
–
1.98(m,2h),1.96
–
1.79(m,2h),1.76
–
1.51(m,4h),1.47
–
1.21(m,8h),0.96
–
0.80(m,3h).
[0066]
实施例13
[0067][0068]
参考实施例1的合成方法，可制得实施例13。1h nmr(300mhz,dmso-d)δ7.08(t,j＝7.9hz,1h),6.85
–
6.70(m,2h),5.18
–
5.00(m,2h),4.35(t,j＝6.1hz,2h),3.97(qd,j＝5.5,4.6hz,1h),3.68
–
3.48(m,3h),2.89
–
2.67(m,2h),2.30
–
2.16(m,1h),2.16
–
1.96(m,4h),1.96
–
1.77(m,2h),1.77
–
1.52(m,4h),1.49
–
1.24(m,8h),0.97
–
0.77(m,3h).
[0069]
实施例14
[0070][0071]
参考实施例1的合成方法，可制得化合物14。1h nmr(300mhz,dmso-d)δ7.08(t,j＝7.9hz,1h),6.85
–
6.68(m,2h),4.33(td,j＝6.0,1.7hz,2h),3.97(qd,j＝5.5,4.6hz,1h),3.60
–
3.50(m,1h),3.48
–
3.32(m,3h),2.91
–
2.67(m,2h),2.27
–
2.14(m,1h),2.14
–
1.97(m,2h),1.97
–
1.75(m,6h),1.75
–
1.49(m,4h),1.49
–
1.25(m,8h),0.99
–
0.77(m,3h).
[0072]
实施例15
[0073][0074]
参考实施例1的合成方法，可制得化合物15。1h nmr(300mhz,dmso-d)δ7.08(t,j＝7.9hz,1h),6.77(dd,j＝8.1,1.4hz,2h),4.57(t,j＝6.2hz,2h),4.37
–
4.21(m,2h),3.97(qd,j＝5.5,4.6hz,1h),3.81(t,j＝6.2hz,2h),3.72(t,j＝6.1hz,2h),3.61
–
3.49(m,1h),3.06
–
2.91(m,2h),2.88
–
2.68(m,2h),2.24
–
1.96(m,3h),1.96
–
1.77(m,2h),1.76
–
1.52(m,4h),1.47
–
1.24(m,8h),0.98
–
0.82(m,3h).
[0075]
实施例16
[0076][0077]
参考实施例1的合成方法，可制得化合物16。1h nmr(300mhz,dmso-d)δ7.08(t,j＝7.9hz,1h),6.89
–
6.70(m,2h),4.57(t,j＝6.2hz,2h),4.17(t,j＝6.1hz,2h),3.97(qd,j＝5.5,4.6hz,1h),3.76(t,j＝6.2hz,2h),3.59
–
3.41(m,3h),2.87
–
2.67(m,2h),2.25
–
1.79(m,7h),1.77
–
1.53(m,4h),1.49
–
1.21(m,8h),0.96
–
0.79(m,3h).
[0078]
实施例17
[0079][0080]
参考实施例1的合成方法，可制得化合物17。1h nmr(300mhz,dmso-d)δ7.17
–
6.99(m,1h),6.89
–
6.68(m,2h),5.86(dd,j＝25.8,2.7hz,2h),5.02(s,2h),4.70(s,2h),3.97(qd,j＝5.5,4.6hz,1h),3.62
–
3.48(m,1h),2.89
–
2.66(m,2h),2.27
–
2.15(m,1h),2.15
–
1.97(m,2h),1.97
–
1.78(m,2h),1.73
–
1.49(m,4h),1.48
–
1.24(m,8h),0.99
–
0.79(m,3h).
[0081]
实施例18
[0082][0083]
参考实施例1的合成方法，可制得化合物18。1h nmr(300mhz,dmso-d)δ7.09(t,j＝7.8hz,1h),6.91
–
6.68(m,2h),5.93
–
5.63(m,2h),4.61(td,j＝7.1,1.8hz,2h),3.97(qd,j＝5.5,4.6hz,1h),3.62
–
3.46(m,1h),2.93
–
2.63(m,4h),2.27
–
2.15(m,1h),2.15
–
1.96(m,2h),1.96
–
1.77(m,2h),1.77
–
1.49(m,4h),1.49
–
1.23(m,8h),0.98
–
0.70(m,3h).
[0084]
实施例19
[0085][0086]
参考实施例1的合成方法，可制得化合物19。1h nmr(300mhz,dmso-d)δ7.09(t,j＝7.8hz,1h),6.90
–
6.73(m,2h),5.93
–
5.73(m,2h),4.50
–
4.34(m,2h),3.97(qd,j＝5.5,4.6hz,1h),3.61
–
3.47(m,1h),2.86
–
2.67(m,2h),2.61
–
2.38(m,3h),2.25
–
1.96(m,5h),1.96
–
1.77(m,2h),1.77
–
1.50(m,4h),1.48
–
1.23(m,8h),0.99
–
0.78(m,3h).
[0087]
实施例20
[0088][0089]
参考实施例1的合成方法，可制得化合物20。1h nmr(300mhz,dmso-d)δ7.13
–
7.02(m,1h),6.85
–
6.71(m,2h),4.75
–
4.51(m,4h),4.50
–
4.21(m,4h),3.97(qd,j＝5.5,4.6hz,1h),3.61
–
3.48(m,1h),3.06
–
2.88(m,2h),2.88
–
2.66(m,4h),2.27
–
1.96(m,3h),1.96
–
1.77(m,2h),1.77
–
1.48(m,4h),1.48
–
1.19(m,9h),1.00
–
0.74(m,3h).
[0090]
实施例21
[0091][0092]
参考实施例1的合成方法，可制得化合物21。1h nmr(300mhz,dmso-d)δ7.07(t,j＝7.9hz,1h),6.88
–
6.65(m,2h),4.79
–
4.49(m,4h),4.31
–
4.04(m,4h),3.97(qd,j＝5.5,4.6hz,1h),3.64
–
3.49(m,1h),2.87
–
2.66(m,4h),2.25
–
1.98(m,5h),1.98
–
1.77(m,2h),1.77
–
1.49(m,4h),1.49
–
1.20(m,8h),0.98
–
0.78(m,3h).
[0093]
实施例22
[0094][0095]
参考实施例1的合成方法，可制得化合物22。1h nmr(300mhz,dmso-d)δ7.21
–
7.08(m,2h),7.00(ddt,j＝6.9,1.9,1.0hz,1h),5.78(qd,j＝15.6,6.2hz,2h),4.94(dt,j＝5.0,4.2hz,1h),4.54
–
4.31(m,2h),4.22
–
4.03(m,6h),3.42(dd,j＝5.5,4.2hz,1h),2.91
–
2.62(m,3h),2.49(t,j＝7.0hz,2h),2.40(t,j＝7.1hz,2h),2.21(dp,j＝6.2,2.0hz,2h),2.18
–
1.82(m,9h),1.55(t,j＝2.0hz,3h),1.00(d,j＝6.2hz,3h).
[0096]
实施例23
[0097][0098]
参考实施例1的合成方法，可制得化合物23。1h nmr(300mhz,dmso-d)δ8.08
–
7.89(m,2h),7.53
–
7.37(m,2h),7.12(t,j＝7.9hz,1h),6.77(tt,j＝6.7,1.1hz,2h),5.41(dt,j＝2.7,1.0hz,2h),4.66(s,2h),4.55
–
4.37(m,4h),4.04(qd,j＝5.5,4.6hz,1h),3.65
–
3.51(m,1h),3.05
–
2.88(m,2h),2.84
–
2.69(m,2h),2.31
–
2.16(m,1h),2.15
–
1.98(m,2h),1.97
–
1.79(m,2h),1.79
–
1.53(m,4h),1.53
–
1.23(m,8h),0.94
–
0.80(m,3h).
[0099]
实施例24
[0100][0101]
参考实施例1的合成方法，可制得化合物24。1h nmr(300mhz,dmso-d)δ8.03
–
7.89(m,2h),7.53
–
7.38(m,2h),7.11(t,j＝7.9hz,1h),6.88
–
6.64(m,2h),5.56
–
5.28(m,2h),4.66(s,2h),4.29
–
4.13(m,4h),4.04(qd,j＝5.5,4.6hz,1h),3.60
–
3.50(m,1h),3.03
–
2.85(m,2h),2.85
–
2.68(m,2h),2.26
–
1.96(m,5h),1.96
–
1.76(m,2h),1.76
–
1.51(m,4h),1.51
–
1.23(m,8h),1.00
–
0.80(m,3h).
[0102]
实施例25
[0103][0104][0105]
将曲前列尼尔(60mg)，氯甲基呋咱氮氧化物和dmap，tea用2ml无水二氯甲烷溶解，室温搅拌四小时后，反应液中加入3ml二氯甲烷稀释，依次用10％的盐酸洗两次，饱和食盐水洗一次，过滤，滤液浓缩，hplc纯化得实施例25，收率38％。1h nmr(300mhz,dmso-d)δ7.98
–
7.81(m,2h),7.71
–
7.52(m,3h),7.11(t,j＝7.9hz,1h),6.88
–
6.68(m,2h),6.12
–
5.92(m,2h),4.70(s,2h),4.04(qd,j＝5.5,4.6hz,1h),3.61
–
3.49(m,1h),2.94(dd,j＝7.2,1.2hz,2h),2.86
–
2.66(m,2h),2.21(ddddd,j＝7.5,6.8,5.7,4.8,4.1hz,1h),2.16
–
1.98(m,2h),1.98
–
1.78(m,2h),1.78
–
1.52(m,4h),1.52
–
1.22(m,8h),1.02
–
0.75(m,3h).
[0106]
实施例26
[0107][0108]
参考实施例25的合成方法，可制得化合物26。1h nmr(300mhz,dmso-d)δ7.72
–
7.55(m,5h),7.19
–
7.05(m,1h),6.77(ddt,j＝7.9,3.3,1.2hz,2h),4.71
–
4.39(m,6h),4.04(qd,j＝5.5,4.6hz,1h),3.62
–
3.49(m,1h),3.10
–
2.87(m,2h),2.87
–
2.67(m,2h),2.27
–
2.15(m,1h),2.15
–
1.97(m,2h),1.97
–
1.79(m,2h),1.79
–
1.53(m,4h),1.53
–
1.26(m,8h),0.96
–
0.79(m,3h).
[0109]
实施例27
[0110][0111]
参考实施例25的合成方法，可制得化合物27。1h nmr(300mhz,dmso-d)δ7.95
–
7.75(m,2h),7.69
–
7.50(m,3h),7.10(t,j＝7.9hz,1h),6.87
–
6.71(m,2h),4.67(s,2h),4.38(t,j＝6.1hz,2h),4.20(td,j＝6.1,1.1hz,2h),4.04(qd,j＝5.5,4.6hz,1h),3.64
–
3.49(m,1h),3.06
–
2.86(m,2h),2.86
–
2.67(m,2h),2.25
–
1.98(m,5h),1.98
–
1.77(m,2h),1.77
–
1.53(m,4h),1.53
–
1.19(m,8h),0.97
–
0.75(m,3h).
[0112]
实施例28
[0113][0114]
参考实施例25的合成方法，可制得化合物28。1h nmr(300mhz,dmso-d)δ7.96
–
7.77(m,2h),7.71
–
7.51(m,3h),7.10(t,j＝7.9hz,1h),6.88
–
6.71(m,2h),4.68(s,2h),4.32(t,j＝6.0hz,2h),4.15(t,j＝6.0hz,2h),4.04(qd,j＝5.6,4.6hz,1h),3.62
–
3.49(m,1h),3.05
–
2.88(m,2h),2.87
–
2.69(m,2h),2.25
–
1.97(m,3h),1.97
–
1.73(m,6h),1.73
–
1.52(m,4h),1.52
–
1.21(m,8h),0.98
–
0.75(m,3h).
[0115]
试验例1
[0116]
化合物的体外no释放测试
[0117]
采用griess法利用释放的no在水溶液中被瞬间氧化称no2-，no2-和griess试剂形成复合物，此复合物在540nm下有强的紫外吸收，从而确定化合物的no释放量。
[0118]
一、溶液的配制：
[0119]
1)空白溶液：10ml dmso和190ml pbs混合；
[0120]
2)griess试剂：磺胺(4.0g)、n-(1-萘基)乙二胺二盐酸盐(0.2g)和10ml 85％的h3po4溶于90ml蒸馏水中，搅拌至澄清溶液；
[0121]
3)l-半胱氨酸溶液：l-半胱氨酸精确称量后，加入一定量的pbs，配制称200μm的溶液；
[0122]
4)受试化合物溶液：受试化合物精确称量，用dmso溶解并稀释至浓度为1mm，然后用pbs稀释，使其浓度为200μm。
[0123]
二、标准曲线方程的制定：
[0124]
用空白溶液分别配制亚硝酸钠标准溶液浓度：0，0.78，1.56，3.13，6.25，12.5，25，50，100μmol/l，各个浓度每次取150μl，分别加入50μl的griess试剂混匀，在37℃恒温摇床中孵化30min后，酶标仪于540nm处测定各管吸光度，分别减去空白溶液读数后回归得标准曲线方程。
[0125]
三、受试化合物的测试：
[0126]
将配好的受试化合物溶液和l-半胱氨酸溶液各取2.5ml混合，在37℃恒温摇床中孵化120min，每个15min各取混合液150μl，分别加入50μl的griess试剂混匀，在37℃恒温摇床中再孵化30min后，酶标仪于540nm处测定各管吸光度，分别减去空白溶液读数后将数值代入标准曲线方程，即求得no释放量。
[0127]
通过测试，本发明的部分化合物数据如表1所示，测试结果显示本发明所述一氧化氮供体型曲前列尼尔类衍生物或其可药用盐具备良好的no释放效果。
[0128]
表1.实施例化合物no释放效果
[0129]
[0130][0131]
试验例2
[0132]
低氧性肺动脉高压大鼠体内试验
[0133]
(一)实验仪器和材料
[0134]
hx-200动物呼吸机，实验所用sd雄性大鼠均购自扬州大学。所有对照组在正常环境下饲养，干预组和模型组在低压低氧舱内饲养(气压50kpa，氧浓度10％)。
[0135]
(二)实验步骤
[0136]
化合物5使用dmso/solutol/water(10/10/80)溶解制成澄清溶液，干预组从低氧第二天开始，灌胃给药化合物化合物5剂量5mg/kg，所有大鼠每周称重，记录生存情况，四周后测定肺动脉压力。用水合氯醛(100g/l)麻醉大鼠(3ml/kg)，仰卧位固定，行气管切开，用小动物呼吸机辅助呼吸(频率60次/min，潮气量5ml，吸呼比4:5)。游离左侧第3肋骨，将一端连接张力换能器的导管送至肺动脉，通过bl-420e生物机能实验系统记录平均肺动脉压力(mpap)。检查并收集胸水、腹水，最后从腹主动脉抽血将大鼠处死。
[0137]
(三)实验结果
[0138]
参见图1，与对照组相比，模型组大鼠的mpap明显升高，给药化合物5的干预组mpap较模型组降低。
[0139]
试验例3、抗血小板聚集作用
[0140]
1)实验材料：adp，肾上腺素，胶原蛋白(拜力生物)
[0141]
2)实验方法：由健康受试者提供的血液样本，将血液用3.8％的柠檬酸溶液混合，160r/min离心，得到富血小板血浆。为校准数据，获得的富血小板血浆会进一步在2000r/min离心，获得贫血小板血浆，于-20℃的冰箱内储存备用。使用bornl’s浊度法进行测试。将225μl富血小板血浆加入反应杯，将实施例化合物配置成50nm溶液(25mmtris-acetate和120mm nacl)，将25μl实施例化合物溶液加入，37℃条件下共孵育2min后，加入5μl的adp(终浓度2μm)进行血小板聚集诱导。为了评估血小板聚集程度，吸光度最大值取空白组adp加入10min后数据，从而计算出各实施例化合物抑制adp诱导的血小板聚集的抑制率。由下表2数据可知，本技术实施例所述化合物都具备良好的抑制adp诱导的血小板聚集的效果。
[0142]
表2.实施例化合物抑制adp诱导的血小板聚集
[0143]
化合物血小板聚集抑制率(％)化合物血小板聚集抑制率(％)15915822711678364177148118545661944652207877221358672252
95623661050243311782556127226731358277714412860
[0144]
对于本领域技术人员，本公开不只局限于前述说明性实施例，在不脱离其必要属性的情况下能以其它特定形式体现。因此期望认为，所有方面均作为说明性而不是限制性、对所附权利要求进行参考的实施例而不是前述实施例，引用文献只是针对附加的权利要求而不是上述的实例，以及落入权利要求等效性的含义和范围之内的所有变化因此预期包含于此。
[0145]
本说明书中列举的所有专利、专利申请和文献参考均在此以其全部内容引入作为参考。在不一致的情况下，包括定义的本公开将是有说服力的。

技术特征：
1.一种如下式ⅰ所示的偶联no供体曲前列尼尔衍生物或其可药用盐：n为0-6；r为-x-ono2、-oc(o)-x-ono2、-o-x-ono2、或其中x为直链或支链的c
1-c
10
烷基、c
5-7
环烷基或-c
1-c
10
烷基-芳环-；其中c
1-c
10
烷基、c
5-7
环烷基或芳环可被以下一个或者多个取代基取代：卤原子、羟基、羧基、氰基或-(c
1-c
10
烷基)-ono2。2.根据权利要求1所述的偶联no供体曲前列尼尔衍生物或其可药用盐，其特征在于，所述n为0,1,2,3或4。3.根据权利要求1所述的偶联no供体曲前列尼尔衍生物或其可药用盐，其特征在于，所述化合物包括以下任意一种结构：
4.一种药物组合物，含有治疗有效量的权利要求1-3任何一项偶联no供体曲前列尼尔衍生物或其可药用盐和药学上可接受的载体。5.根据权利要求4所述的药物组合物，其特征在于，所述载体为缓释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂、吸收促进剂、吸附载体、表面活性剂和润滑剂中的任意一种或两种以上的混合物。6.根据权利要求4-5任一项所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物为外用制剂、口服制剂和注射制剂中的任意一种。7.根据权利要求6所述的一种药物组合物，其特征在于，所述口服制剂为颗粒剂、胶囊剂和片剂中的任意一种。8.一种权利要求1～3任一项所述的偶联no供体曲前列尼尔衍生物或其可药用盐，作为前环列素类似物的应用。9.一种权利要求1～3任一项所述的偶联no供体曲前列尼尔衍生物或其可药用盐，在制备治疗肺动脉高压、呼吸窘迫综合征、慢性动脉闭塞性疾病等的药物中的应用。

技术总结
本发明公开了曲前列尼尔偶联一氧化氮(NO)供体药物，如下式Ⅰ所示，本发明涉及曲前列尼尔偶联NO供体药物、其药物组合物及用途，本发明所述的曲前列尼尔偶联NO供体药物，解决了曲前列尼尔疗效较弱及NO给药不便剂量无法控制等缺陷，并通过两者协同作用提高了药物的有效性和患者的依从性，同时药物有效性控制也得到了提高。到了提高。到了提高。


技术研发人员：黄夏梦 鲁卓敏 吴晓川 王天雨 章翔宇 蒋晟
受保护的技术使用者：广州楷石医药有限公司
技术研发日：2022.01.07
技术公布日：2023/7/22