二氢杨梅素作为表观遗传活性物质用于化妆性皮肤护理或皮肤病学皮肤护理的用途的制作方法

1.本发明涉及一种化妆用制剂或皮肤病学制剂，其包含活性物质用于护理和保护皮肤，尤其是敏感皮肤以及特别优选是因内在和/或外在因素而已经老化或正在老化的皮肤，以及此类活性物质和此类活性物质的组合物在化妆性皮肤护理和皮肤病学皮肤护理领域中的用途。
2.在特定意义上，本发明涉及此类活性物质以及此类活性物质的组合物作为表观遗传活性物质的用途。尤其是它们用于部分或完全恢复青少年表观基因组的用途。


背景技术：

3.在细胞中，被认为是遗传学内容和进程“附加”的所有过程都是表观遗传的。在1942年，当dna的结构尚未为人所知时，表观遗传学(首先)被定义为生物学的一个分支，其研究基因及其产物之间产生表型的因果相互作用(“als the branch of biology which studies the causal interactions between genes and their products which bring the phenotype into being”)。
4.为了区别于更笼统的基因调控的概念，现今的定义更加具体，例如：术语“表观遗传学”定义了基因表达中所有减数分裂和有丝分裂的可遗传变化，这些变化未在dna序列本身中编码。
5.表观遗传过程可以存在于基因表达的阻断中。被阻断的基因在细胞分裂或遗传过程中不会丢失，而仅是处于非激活状态，并且可以借助合适的辅助工具重新激活。
6.化妆性皮肤护理首先被理解为加强或恢复皮肤的天然功能，即作为抵御环境影响(例如污垢、化学品、微生物)和抵御内源性物质(例如水、天然脂肪、电解质)流失的屏障。
7.如果该功能受到干扰，可能会增加有毒或致敏性物质的吸收或微生物的侵袭，从而导致中毒或过敏性皮肤反应。
8.皮肤护理的另一个目的在于补偿日常清洗所造成的皮肤油脂和水分的流失。这在天然再生能力不足时显得尤为重要。此外，皮肤护理产品应防止环境、尤其是阳光和风的影响，并延缓皮肤衰老。
9.伴随时间流逝的皮肤衰老是例如由内源性的、遗传决定的因素引起的。在表皮和真皮中，衰老会导致以下结构损伤和功能障碍，也可称为“老年性干燥症”：
10.a)干燥、粗糙和形成干燥细纹，
11.b)瘙痒，以及
12.c)减弱的皮脂腺再泛油(例如在清洗后)。
13.如紫外线和化学毒素这样的外源性因素会产生累积效应，例如会加速或补充内源性衰老过程。在表皮和真皮中，外源性因素尤其会导致皮肤出现例如以下结构损伤和功能障碍，其程度和质量超出了伴随时间流逝的老化造成的损伤：
14.d)可见的血管扩张(毛细血管扩张、红血丝)；
15.e)松弛以及形成皱纹；
16.f)局部色素沉着过度、色素沉着减退和色素沉着异常(例如老年斑)；以及
17.g)对机械应力的敏感性增加(例如皴裂)。


技术实现要素：

18.本本发明尤其涉及一种产品，其用于护理自然衰老的皮肤和用于处理光老化的后果性损伤、特别是a)至g)所列的现象。
19.用于护理衰老皮肤的产品本身是已知的。其包含例如类视黄醇(维生素a酸和/或其衍生物)或维生素a和/或其衍生物。然而，它们对结构损伤的影响范围有限。此外，在产品开发中，很难将活性成分稳定化到足以防止氧化分解。此外，使用含有维生素a酸的产品通常会引起强烈的红斑性皮肤刺激。因此，类视黄醇只能以低浓度使用。
20.表观遗传学是生命科学中一个相对年轻的研究领域，近年来引起了广泛关注。这并不奇怪，因为表观遗传学研究的是环境因素如何影响我们的身体。这与其说是进一步描述性地分析上述形态变化，不如说是理解潜在的分子生物学调控机制。与经典遗传学相反，表观遗传学不研究dna的一级序列的变化，而是研究基因调控的机制。在此，表观遗传学充当了环境与基因组之间的纽带。
21.表观遗传学中被描述得最详细的组成部分之一是所谓的dna甲基化。dna甲基化是dna的一种修饰，在哺乳动物中，如果胞嘧啶核苷酸位于鸟嘌呤核苷酸旁边的5'-方向(cpg)，则通常dna甲基化会在胞嘧啶核苷酸的c5位点对称地发生在两条dna链上[bird，202]。甲基化胞嘧啶核苷酸的高突变潜力意味着cpg二核苷酸(胞嘧啶鸟嘌呤二核苷酸)相对于整个基因组的比例非常低。甲基化胞嘧啶的水解脱氨自发地导致胸腺嘧啶的形成，同时发生tg碱基错配。相比之下，未甲基化的胞嘧啶脱氨为尿嘧啶发生得明显较慢，并且修复生成的ug-碱基错配明显更高效，因为尿嘧啶不是dna中天然存在的碱基[coulondre等人，1978年；jurkowska等人，2010]。
[0022]
尽管突变率很高，但基因组中仍有一些富含cg的dna片段，称为cpg岛。这些短dna片段被定义为长0.5-4kb的区域，其实际cg含量与预期cg含量之比大于0.65[takai和jones，2002]，人类基因组中约70％的启动子与此类cpg岛相关[saxonov等人，2006]，其中它们通常未甲基化，这与相应基因的转录表达相关。然而，一些生物过程也是已知的，在这些生物过程中，cpg岛的甲基化导致特定基因的沉寂。对此的例子包括x染色体以及生殖细胞系特异性基因和组织特异性基因的失活[bird，2002，avner和heard，2001，bird，1986]，这些阐明了dna甲基化在调控基因表达和确定细胞身份方面的基本作用。
[0023]
然而，更常见的是，甲基化可以在远离启动子的区域如重复序列或寄生序列中找到，其中甲基化阻止这些序列的转录，从而有助于基因组的完整性[yoder等人，1997，walsh等人，1998]，总的来说，基因组dna中约3-5％的胞嘧啶被甲基化，这最终意味着基因组的整个cpg位点的约80％被甲基化[ehrlich等人，1982，gama-sosa等人，1983]。
[0024]
大量研究结果证明，与健康细胞中的dna甲基化相比，退化的癌细胞中的dna甲基化模式会频繁发生改变。在癌症组织中发现，基因组甲基化整体减少(低度甲基化)的情况增加，这主要是由重复元件中甲基化水平的降低引起的[ehrlich，2002]，这种低度甲基化会导致这些转座元件的重新激活[yoder等人,1997,wash等人,1998]，因此对基因组完整性
有负面影响[gaudet,2003]，整体低度甲基化的同时，也可以观察到与基因启动子区域相关的cpg岛的高度甲基化[herman and baylin，2000，jones and baylin，2007]，这种高度甲基化通常伴随着基因的转录失活。
[0025]
此外，由于肿瘤抑制基因受到这种高度甲基化的影响，因此会导致重要的细胞机制发生失调。为了将这种表观遗传变化与常规的基因突变区分开，这种表观遗传变化被称为“表突变”[jeggo and holliday,1986]。
[0026]
近年来越发清楚的是，除癌症研究以外，表观遗传学对于健康有机体的发育与dna本身同样重要。科学研究还表明，表观基因组—所有表观遗传修饰的整体—可能比基因本身更容易受外部影响而改变。表观遗传有效分子作为环境与遗传物质之间的中介而发挥作用。已清楚地证明，外部因素可以打开或关闭基因，从而引起表型变化和/或疾病(jaenisch&bird,2003,bird等人，2007；reik，2007；feinberg，2008)。最新研究还表明，表观遗传变化-尤其是dna甲基化模式-也会在衰老过程中发生(fraga等人，2005年；esteller等人，2012年；winnefeld和lyko，2012年)。
[0027]
还可以证明，在皮肤老化过程中也可以观察到表观遗传变化(高度甲基化)(等人，2010年)，这会导致与皮肤相关的基因“沉寂”。
[0028]
为了改善皮肤状态，因此期望逆转表观遗传变化—随着年龄或发生某些皮肤状况—以重新激活与皮肤相关的基因。
[0029]
然而，迄今为止，已知仅有限数量的物质具有dna去甲基化活性。
[0030]
在这方面，物质二氢杨梅素出人预料地显示出对dna甲基转移酶1的抑制作用。该酶负责基因组中cpg的甲基化，从而维持细胞特定的甲基化模式。活性物质由此衍生的表观遗传活性可以在经二氢杨梅素处理后的皮肤样本的甲基化模式的修饰中得到证明(epic分析)。此外，二氢杨梅素的使用实现了年龄依赖性高度甲基化基因的增强表达(针对16个基因得以证明，见图3)。
[0031]
二氢杨梅素(或(+)-二氢杨梅素；蛇葡萄素；(2r，3r)-3,5,7-三羟基-2-(3,4,5-三羟基苯基)苯并二氢吡喃-4-酮)具有以下结构特征：
[0032][0033]
根据jp 63316711已知，二氢杨梅素用作皮肤增亮性活性物质。进而，根据fr 2868701已知，二氢杨梅素用作抗脂肪团的活性物质，因为它会影响脂肪细胞中的脂肪储存。此外，de 102009055916中描述了二氢杨梅素在增加皮肤胶原蛋白合成以及处理和预防内在和/或外在皮肤老化症中的用途。
[0034]
然而，现有技术均未指出本发明的方式。
[0035]
因此，本发明所基于的问题的解决方案在于使用二氢杨梅素作为脱甲基剂。
[0036]
有利的是，这些用途以局部制剂、尤其是以化妆用制剂或皮肤病学制剂的方式实现。
[0037]
根据本发明的化妆用制剂或皮肤病学制剂基于制剂总组成，优选含有0.001-10重量％、特别优选含有0.01-1重量％的二氢杨梅素。
[0038]
在本发明的意义上，乳剂是有利的给药剂型，例如有利的是霜剂、洗液、化妆乳的形式，并且含有例如脂肪、油、蜡和/或其他脂肪体，以及水和通常用于此类配制物的一种或多种乳化剂。
[0039]
在本发明的意义上，药用局部组合物通常包含一种或多种有效浓度的药物。为简单起见，化妆品和医疗用途以及相应的产品参考德意志联邦共和国的法律规定(例如化妆品指南、食品和药品法)进行明确区分。
[0040]
在此也有利的是，将根据本发明使用的活性物质作为添加剂添加到已经含有用于其他目的的其他活性物质的制剂中。
[0041]
在本发明的意义上，如果化妆用制剂或皮肤病学制剂制备成一种溶液或乳液或分散体，则可以使用以下物质作为溶剂：
[0042]-水或水溶液
[0043]-油，如癸酸或辛酸的甘油三酯，但优选蓖麻油；
[0044]-脂肪、蜡以及其他天然和合成的脂肪体，优选脂肪酸与低碳数醇(例如与异丙醇，丙二醇或者甘油)的酯，或者脂肪醇与低碳数链烷酸或者与脂肪酸的酯；
[0045]-低碳的醇、二醇或多元醇及其醚，优选乙醇、异丙醇、丙二醇、甘油、乙二醇、乙二醇单乙醚或乙二醇单丁醚、丙二醇单甲醚、丙二醇单乙醚或丙二醇单丁醚、二乙二醇单甲醚或二乙二醇单乙醚和类似产品。
[0046]
尤其是使用上述溶剂的混合物。在醇溶剂的情况下，水可以是一种其他组分。
[0047]
在本发明的意义上，乳液、油凝胶或者水性分散体或脂肪性分散体的油相有利地选自由饱和和/或不饱和、支链和/或无支链的链长为3至30个碳原子的烷羧酸与饱和和/或不饱和、支链和/或无支链的链长为3至30个碳原子的醇形成的酯，选自由芳香族羧酸与饱和和/或不饱和、支链和/或无支链的链长为3至30个碳原子的醇形成的酯。然后，这类酯性油可以有利地选自肉豆蔻酸异丙酯、棕榈酸异丙酯、硬脂酸异丙酯、油酸异丙酯、硬脂酸正丁酯、月桂酸正己酯、油酸正癸酯、硬脂酸异辛酯、硬脂酸异壬酯、异壬酸异壬酯、棕榈酸-2-乙基己酯、月桂酸-2-乙基己酯、硬脂酸-2-己基癸酯、棕榈酸-2-辛基十二烷基酯、油酸油酯、芥酸油酯、油酸芥酯、芥酸芥酯以及这类酯的合成、半合成和天然混合物，例如霍霍巴油。
[0048]
进而，油相可以有利地选自支链和无支链的烃和蜡、硅油、二烷基醚，选自饱和或不饱和、支链或无支链的醇以及脂肪酸甘油三酯，即饱和和/或不饱和、支链和/或无支链的链长为8至24、尤其为12-18个碳原子的烷羧酸的甘油三酯。脂肪酸甘油三酯可以例如有利地选自合成油、半合成油以及天然油如橄榄油、葵花子油、大豆油、花生油、菜籽油、杏仁油、棕榈油、椰子油、棕榈仁油等。
[0049]
这类油组分和蜡组分的任何混合物也是有利的。
[0050]
根据本技术的制剂的水相有利地任意含有：
[0051]-低碳的醇、二醇或多元醇及其醚，优选乙醇、异丙醇、丙二醇、甘油、乙二醇、乙二醇单乙醚或乙二醇单丁醚、丙二醇单甲醚、丙二醇单乙醚或丙二醇单丁醚、二乙二醇单甲醚或二乙二醇单乙醚以及类似的产品，进而为低碳醇如乙醇、异丙醇、1,2-丙二醇、甘油以及
特别是一种或多种增稠剂，其可以有利地选自二氧化硅、硅酸铝、多糖及其衍生物如透明质酸、黄原胶、羟丙基甲基纤维素，特别有利地选自聚丙烯酸酯类，优选自所谓的卡波普(carbopole)，例如980、981、1382、2984、5984型卡波普，各自单独或组合使用。
[0052]
根据本发明使用的凝胶通常含有低碳数的醇如乙醇、异丙醇、1,2-丙二醇、甘油和水或在增稠剂存在下的上述油，在油性醇凝胶的情况下优选是二氧化硅或硅酸铝，在水性醇凝胶或醇凝胶的情况下优选是聚丙烯酸酯。
[0053]
固体棒包含例如天然或合成蜡、脂肪醇或脂肪酸酯。
[0054]
在本发明的意义上，适合用作化妆棒的常见原料是液体油(例如石蜡油、蓖麻油、肉豆蔻酸异丙酯)、半固体组分(例如凡士林、羊毛脂)、固体组分(例如蜂蜡、地蜡和微晶蜡或地蜡)以及高熔点蜡(例如巴西棕榈蜡、小烛树蜡)。
[0055]
在本发明的意义上，作为用于将化妆用制剂和/或皮肤病学制剂从气溶胶容器中喷出的推进剂，合适的是通常已知的挥发性液化推进剂如烃类(丙烷、丁烷、异丁烷)，其可单独使用或相互混合使用。使用压缩空气也是有利的。
具体实施方式
[0056]
下面说明根据本发明的二氢杨梅素的作用：
[0057]
二氢杨梅素对dna甲基转移酶1(dnmt1)的抑制特性首先在无细胞活性测定(dnmt活性/抑制测定，active motif，比利时)中得到证实。在测定中可以证明重组dnmt1酶的浓度依赖性抑制(图1)。在此，使用测定制造商的标准方案。
[0058]
二氢杨梅素在皮肤中的表观遗传调节在体内研究中得到证实。为此，受试者(n＝32)在下背部涂抹一种赋形剂(vehikel)和一种含有脱氢杨梅素的被试物(verum)两周。在两周的处理周期后，受试者连续三天接受紫外线(0.8med)照射，以模仿与年龄相关的环境影响。最后一次紫外线照射后24小时，进行吸吹并获得表皮。从表皮中分离出dna，并通过illumina的epic技术确定了850000个cpg的dna甲基化状态。
[0059]
与未照射的对照相比，经被试物处理的区域显示16389个cpg发生甲基化变化，而经赋形剂处理的区域未显示出显著的甲基化变化。因此，可以证明二氢杨梅素是一种表观遗传调节剂(图2)。
[0060]
在另一项体内研究中，证实了皮肤中基因的重新激活，其源于去甲基化。为此，在8周的时段里，将一种赋形剂和一种含有二氢杨梅素的被试物涂抹于19名受试者(50-65岁)的前臂内侧。然后进行吸吹(suction-blowing)并获得表皮。从表皮样品中分离(rneasy fibrous tissue kit，qiagen，hilden)rna，并通过taqman系统(7900ht快速实时pcr系统，applied biosystems)分析45个基因(+3个内源性对照基因)的表达。可以证实，与用赋形剂处理的对照样品相比，16个基因的表达显著增加(图3)。通过
△△
ct法计算表达变化。
[0061]
以下的示例旨在说明本发明。除非另有说明，数值为重量百分比基准。
[0062]
实施例1
[0063]
杨梅素0.15乙基己基甘油0.3聚二甲基硅氧烷0.3合成蜂蜡3
椰油酸乙基己酯3甘油硬脂酸酯柠檬酸酯2二甲基甲硅烷基化硅石0.5聚乙烯吡咯烷酮(vp)/十六碳烯共聚物0.5甘油7水+氢氧化钠0.1苯氧乙醇+水0.5焦亚硫酸钠0.15水+edta三钠1变性乙醇+水6鲸蜡硬脂醇1.5丙烯酸酯/丙烯酸c10-30烷基酯的交联聚合物0.25黄原胶0.5亚丁香基丙二酸二乙基己酯+辛酸/癸酸甘油三酯0.1胡莫柳酯4.5奥克立林9水杨酸乙基己酯4.5双乙基己氧基苯酚甲氧基苯三嗪2丁基甲氧基二苯酰甲烷4.5水加至100

技术特征：
1.二氢杨梅素作为表观遗传活性物质用于化妆性皮肤护理或皮肤病学皮肤护理的用途。2.根据权利要求1所述的用途，其中，二氢杨梅素的表观遗传活性在于将二氢杨梅素作为dna去甲基化剂。3.根据权利要求1所述的用途，其中，二氢杨梅素的表观遗传活性在于二氢杨梅素引起随年龄增长而高度甲基化的基因的重新激活。4.根据权利要求1或2所述的用途，用在局部制剂、尤其是化妆用制剂或皮肤病学制剂中。5.根据前述权利要求中任一项所述的用途，用在含有0.001-10重量％、特别优选含有0.01-1重量％的二氢杨梅素的化妆用制剂或皮肤病学制剂中，基于制剂的总组成。

技术总结
本发明涉及二氢杨梅素作为表观遗传活性物质用于化妆性皮肤护理或皮肤病学皮肤护理的用途。的用途。


技术研发人员：马克
受保护的技术使用者：拜尔斯道夫股份有限公司
技术研发日：2021.09.27
技术公布日：2023/7/22