用于治疗阿尔茨海默病或认知功能障碍的多奈哌齐和他达拉非的联合疗法的制作方法

1.本发明涉及用于治疗阿尔茨海默病或认知功能障碍的多奈哌齐和他达拉非的联合疗法。


背景技术：

2.认知功能障碍是在思维处理过程中出现了问题，其包括推理能力丧失、健忘、学习障碍、注意力不集中、智力低下及其他精神功能下降的概念。认知功能障碍可由胎儿发育期间或分娩、分娩后即刻或生命中某个时刻发生的疾病引起，尤其是在新生儿或幼儿中也存在无法确定原因的情况。认知功能障碍的早期原因包括染色体异常及遗传综合征、营养失调、分娩前接触药物、铅等重金属污染、低血糖症、新生儿黄疸、甲状腺功能减退症、外伤或虐待儿童、宫内缺氧、难产或早产等。
3.作为认知功能障碍的代表性疾病的痴呆是一种不同于正常衰老的病理现象，根据其病因分为阿尔茨海默病(alzheimer's disease)、血管性痴呆、其他酒精中毒引起的痴呆、外伤引起的痴呆、帕金森病后遗症引起的痴呆等。阿尔茨海默病占引起痴呆的疾病的50％～70％。
4.乙酰胆碱是一种神经递质，不仅作用于中枢神经系统，还作用于末梢神经系统。乙酰胆碱的低表达水平与认知功能障碍起显著作用的疾病有关，例如阿尔茨海默病。实际上，给药作为乙酰胆碱酯酶抑制剂的多奈哌齐(donepezil)是阿尔茨海默病的主要治疗模式之一。多奈哌齐用于治疗轻度至重度阿尔茨海默病，并且可根据疾病的严重程度每天给药5mg至23mg。胆碱能(cholinergic)神经传递缺失部分涉及阿尔茨海默病中出现的认知征候及症状表达，这已成为定论，其中，推测多奈哌齐通过乙酰胆碱酯酶(ache)的可逆性抑制来增加脑中乙酰胆碱的浓度，从而发挥其治疗功效。然而，多奈哌齐只能用于减缓疾病进展的治疗，迄今为止尚未发现可治愈阿尔茨海默病或预防或阻止疾病进展的治疗方法。并且，多奈哌齐并不能帮助所有患有阿尔茨海默病的人且对许多患者来说并非有效。由此，对更有效地治疗阿尔茨海默病或认知功能障碍症状及疾病调节/钝化疗法的需求未得到满足。
5.根据最近(2020年)的综述论文，在中枢神经系统中具有神经保护及神经毒性的双重特性的一氧化氮(nitric oxide，no)部分干预阿尔茨海默病，一氧化氮(no)信号通路的激活诱导作为转录因子的环磷腺苷反应结合蛋白(camp response element-binding protein，creb)的磷酸化(所谓的一氧化氮(no)/环化核苷酸(cgmp)/蛋白激酶g(pkg)/环磷腺苷反应结合蛋白(creb)信号通路)，从而可贡献于在阿尔茨海默病动物模型中变化的神经可塑性及记忆力缺失缓解，据记载，pde5抑制剂可用于通过激活上述通路来治愈记忆障碍(文献[zuccarello,elisa,et al."development of novel phosphodiesterase 5in hibitors for the therapy of alzheimer’s disease."biochemical pharma cology 176(2020):113818.])。
[0006]
然而，可发挥阿尔茨海默病或认知功能障碍症状的预防、治疗或改善效果的多奈
哌齐与pde5抑制剂的具体组合及配比是未知的。由此，本发明人确认到可根据作为pde5抑制剂之一的他达拉非(tadalaf il)与多奈哌齐的特定配比发挥阿尔茨海默病或认知功能障碍的预防、治疗或改善效果，并完成了本发明。


技术实现要素：

[0007]
技术问题
[0008]
本发明的目的在于，提供根据多奈哌齐和他达拉非联合给药的阿尔茨海默病或认知功能障碍的预防或治疗用途。
[0009]
本发明的另一目的在于，提供根据多奈哌齐和他达拉非联合给药的认知功能改善用途。
[0010]
技术方案
[0011]
本发明人为了实现上述目的而努力研究的结果，确认到与单独给药多奈哌齐相比，当多奈哌齐和他达拉非联合给药时，阿尔茨海默病或认知功能障碍的预防或治疗效果得到改善，并完成了本发明。
[0012]
一方面，本发明提供一种用于预防、治疗或改善阿尔茨海默病或认知功能障碍的组合物，其包含：(i)多奈哌齐(donepezil)或其药学上可接受的盐；以及(ii)他达拉非(tadalafil)或其药学上可接受的盐。
[0013]
在上述组合物中，多奈哌齐或其药学上可接受的盐与(ii)他达拉非或其药学上可接受的盐的重量比可以为5∶1至30∶1。
[0014]
上述组合物的(i)多奈哌齐或其药学上可接受的盐与(ii)他达拉非或其药学上可接受的盐可同时或不同时给药。当上述组合物同时给药时，组合物可以为包含(i)多奈哌齐或其药学上可接受的盐以及(ii)他达拉非或其药学上可接受的盐的复合剂型。
[0015]
当上述组合物为复合剂型时，上述复合剂型可包含：(i)2.5mg至23mg的多奈哌齐或其药学上可接受的盐；以及(ii)0.1mg至2.5mg的他达拉非或其药学上可接受的盐。
[0016]
上述组合物可以为药物组合物或食品组合物。
[0017]
另一方面，本发明提供一种用于改善认知功能的组合物，其包含：(i)多奈哌齐(donepezil)或其药学上可接受的盐；以及(ii)他达拉非(tadalafil)或其药学上可接受的盐。
[0018]
在上述用于改善认知功能的组合物中，(i)多奈哌齐或其药学上可接受的盐与(ii)他达拉非或其药学上可接受的盐的重量比可以为5∶1至30∶1。
[0019]
一方面，本发明提供一种阿尔茨海默病或认知功能障碍的预防、治疗或改善方法，其包括：一同给药有效量的(i)多奈哌齐(donepez il)或其药学上可接受的盐以及(ii)他达拉非(tadalafil)或其药学上可接受的盐的步骤。
[0020]
一方面，本发明提供一种认知功能的改善方法，其包括：一同给药有效量的(i)多奈哌齐(donepezil)或其药学上可接受的盐以及(ii)他达拉非(tadalafil)或其药学上可接受的盐的步骤。
[0021]
发明的效果
[0022]
由于本发明的多奈哌齐和他达拉非联合给药在阿尔茨海默病或认知功能障碍方面改善效果优于多奈哌齐单独给药，因此可有效利用为阿尔茨海默病或认知功能障碍的预
防、改善或治疗疗法或复合剂。
附图说明
[0023]
图1a至图1b示出在阿尔茨海默病或认知功能障碍动物模型中多奈哌齐和他达拉非联合处理后进行的长时程增强(ltp)实验结果。
[0024]
图2a及图2b示出在阿尔茨海默病或认知功能障碍动物模型中多奈哌齐和他达拉非联合给药后的水迷宫实验结果。
[0025]
图3示出在阿尔茨海默病或认知功能障碍动物模型中多奈哌齐和他达拉非联合给药后的y迷宫实验结果。
具体实施方式
[0026]
以下，参照附图通过本发明的实例详细说明本发明。然而，如下实例作为本发明的示例示出，若判断为对于普通技术人员周知著名的技术或结构的具体说明不必要的混淆本发明的主旨，则可省略其详细说明，由此本发明并不限定于此。本发明可从后述的发明要求保护范围的记载及其解释的等同范围内进行各种变形及应用。
[0027]
并且，本说明书中所使用的术语(terminology)是用于适当地表达本发明的优选实施例的术语，该术语可根据使用人员、操作人员的意图或本发明所属技术领域的惯例等会有所不同。因此，本术语的定义应该基于本说明书整体内容来定义。在整个说明书中，当提及某个部分“包括”某个结构要素时，除非另有特别相反的记载，否则意味着还包括其他结构要素，而不是排除其他结构要素。
[0028]
除非另有定义，否则本发明所使用的所有技术术语以与本发明相关技术领域的普通技术人员通常理解的相同含义使用。并且，虽然在本说明书中记载了优选的方法或试样，但与其相似或等同的也包括在本发明的范畴内。在本说明书中作为参考文件记载的所有刊物的内容通过引用并入本发明中。
[0029]
本发明人确认到与单独给药多奈哌齐相比，当多奈哌齐和他达拉非联合给药时，阿尔茨海默病或认知功能障碍的治疗效果得到改善，并完成了本发明。
[0030]
由此，本发明提供一种用于预防、治疗或改善阿尔茨海默病或认知功能障碍的组合物，其包含：(i)多奈哌齐(donepezil)或其药学上可接受的盐；以及(ii)他达拉非(tadalafil)或其药学上可接受的盐。
[0031]
在本发明中，术语“多奈哌齐(donepezil)”是由下述化学式1表示的化合物。
[0032]
[化学式1]
[0033][0034]
多奈哌齐或其药学上可接受的盐作为乙酰胆碱酯酶抑制剂(acet ylcholinesterase inhibitors；acei)，以盐酸多奈哌齐为基准，每天口服给药一次5mg～23mg，已知其可用于治疗阿尔茨海默型痴呆症状。
[0035]
在本发明中，术语“他达拉非(tadalafil)”是由下述化学式2表示的化合物。
[0036]
[化学式2]
[0037][0038]
他达拉非或其药学上可接受的盐作为磷酸二酯酶5(phosphodiest erase 5；pde5)抑制剂，以每天施用于男性5mg～20mg，已知其可用于治疗勃起功能障碍(erectile dysfunction)症状。在本发明中，他达拉非作为磷酸二酯酶5(pde5)抑制剂，在机制上区别于其他属于竞争性pde抑制剂的药物，例如pde1抑制剂(例如，长春西汀)、pde2抑制剂(例如，ehna(红-9-(2-羟基-3-壬基)腺嘌呤)、bay60-7550(2-[(3,4-二甲氧基苯基)甲基]-7-[(1r)-1-羟乙基]-4-苯丁基]-5-甲基-咪唑并[5,1-f][1,2,4]三嗪-4(1h)-酮))、羟吲哚、pdp(9-(6-苯基-2-氧代已-3-基)-2-(3,4-二甲氧基苄基)-嘌呤-6-酮)、pde3抑制剂(例如，阿那格雷、西洛他唑、依诺昔酮、氨力农、米力农、匹莫苯丹)、pd e4抑制剂(例如，阿普司特、屈他维林、异丁司特、木犀草素、松叶菊素、吡拉司特、罗氟司特、咯利普兰)、pde6抑制剂、pde7抑制剂(例如，喹唑啉)、pde8抑制剂、pde9抑制剂、pde10抑制剂(例如，罂粟碱)、pde11抑制剂、pde12抑制剂或其组合。并且，也区别于与他达拉非的化学结构及功能特性不同的pde5抑制剂，例如阿伐那非、双嘧达莫、淫羊藿苷、西地那非、乌地那非及伐地那非。
[0039]
在本发明中，阿尔茨海默病是一种占据导致痴呆的主要原因的神经退行性疾病，具有与本领域中常用的相同的含义。
[0040]
在本发明中，认知功能障碍是指人类的思维处理过程中出现了问题，其包括推理能力丧失、健忘、学习障碍、注意力不集中、智力低下及其他精神功能下降的概念。
initial clinical trials for therapeutics in adult healthy volunteers."fda,ed(2005).]中的人体等效剂量(human equivalent dose，hed)计算法。上述文献中提出的小鼠-人之间的剂量换算系数为12.3，将小鼠中确认的药物剂量(a)除以上述换算系数来导出a/12.3(mg/kg)的剂量。通常，由于医药品以60kg的成人为基准制备，因此可将上述导出的a/12.3(mg/kg)的数值乘以60kg，制备以约5
×
a(mg)的剂量给药到人的药物组合物。因此，可参考本发明的实施例中确认的多奈哌齐及他达拉非的最佳小鼠剂量比，导出给药到人的优选药物剂量比。
[0049]
综合考虑如上所述的小鼠-人之间剂量换算公式及已确立安全性的多奈哌齐的剂量等，当本发明的多奈哌齐和他达拉非联合组合物以复合剂型提供时，可设定多奈哌齐及他达拉非的优选重量。在一实施方式中，在上述复合剂型中包含的多奈哌齐的重量为2.5mg至23mg，他达拉非的重量为0.1mg至2.5mg。
[0050]
本发明的药物组合物能够以治疗有效量给药。上述治疗有效量是指对阿尔茨海默病或认知功能障碍表现出有效预防或治疗效果的药物剂量。合适的每天总使用量可由主治医师在正确的医学判断范围内确定。优选地，特定患者的具体治疗有效量取决于包括要实现的反应的种类及程度、联合给药的药物的种类及量、根据情况是否使用其他制剂在内的具体组合物、包括患者的年龄、体重、一般健康状态、性别和饮食、给药时间、给药途径、治疗期在内的各种因素及医学领域中众所周知的类似因素。
[0051]
本发明的药物组合物可口服或胃肠外给药，优选为口服给药。并且，本发明的药物组合物可与一种以上的中枢神经系统药物联合使用。
[0052]
在本发明的组合物中，多奈哌齐及他达拉非能够以单次剂量或多次剂量作为纯化合物单独给药或与药学上可接受的载体或赋形剂一同给药。本发明的药物组合物不仅可与药学上可接受的载体或稀释剂一同剂型化，还可与根据常规技术的任意其他公知的助剂及赋形剂一同剂型化，例如，该技术在例如文献[remington:the science and pract ice of pharmacy,21edition,hauber,ed.,lippincott williams&wi lkins,2006]中公开。
[0053]
为了给药，本发明的药物组合物可包含药学上可接受的载体、赋形剂和/或稀释剂等。作为上述载体、赋形剂和/或稀释剂，可例举乳糖、右旋糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露糖醇、木糖醇、赤藓糖醇、麦芽糖醇、淀粉、阿拉伯胶、海藻酸盐、明胶、磷酸钙、硅酸钙、纤维素、甲基纤维素、微晶纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、水、羟基苯甲酸甲酯、羟基苯甲酸丙酯、滑石粉、硬脂酸镁及矿物油，但并不限定于此。
[0054]
本发明的药物组合物可通过使用本领域公知的方法来制备成药物剂型。在剂型的制备中，可将活性成分与载体混合或稀释，或者封装在容器形式的载体中。当本发明的药物组合物被制备成口服给药剂型时，可剂型化为如片剂、锭剂、含片、水溶性或油性悬浮液、配制粉末或颗粒、乳剂、硬胶囊剂或软胶囊剂、糖浆剂或酏剂等。
[0055]
一方面，本发明提供一种阿尔茨海默病或认知功能障碍预防或治疗方法，其包括向患者给药治疗有效量的多奈哌齐及他达拉非的步骤。另一方面，本发明提供多奈哌齐及他达拉非在制备用于预防或治疗阿尔茨海默病或认知功能障碍的药剂中的用途。上述多奈哌齐及他达拉非、盐等如上所述。
[0056]
一方面，本发明提供一种用于预防、治疗或改善阿尔茨海默病或认知功能障碍疾病的组合物，其包含：第一制剂，包含多奈哌齐；以及第二制剂，包含他达拉非。
[0057]
在本发明中，术语“组合物”是指剂型中2种以上的活性物质的组合物及在治疗中相互以明示的间隔给药的活性物质的单独剂型的含义上的组合物。因此，当结合本发明描述时，术语“组合物”包括2种以上治疗有效化合物的同时给药的临床实现。
[0058]
在本发明的组合物中，第一制剂和/或第二制剂分别可胃肠外或口服给药，优选地，可以为口服给药。
[0059]
在本发明的组合物中，第一制剂及第二制剂可同时或不同时给药。
[0060]
本发明的组合物可以为包含第一制剂及第二制的复合剂型，具体地，可以为口服给药的复合剂型。
[0061]
一方面，本发明提供一种包含他达拉非(tadalafil)或其药学上可接受的盐的多奈哌齐(donepezil)的阿尔茨海默病或认知功能障碍改善辅助用组合物。
[0062]
在本发明中，术语“辅助用”是指作为辅助用给药的药物单独的预防、治疗或改善效果较低，但当与其他中枢神经系统药物联合给药时，发挥出阿尔茨海默病或认知功能障碍预防、治疗或改善效果得到显著改善的效果的用途。
[0063]
本发明的组合物可以为药物组合物或食品组合物。当上述组合物用作为食品组合物时，可将多奈哌齐、他达拉非或其药学上可接受的盐直接加入其他食品中或与食品成分一起使用，可根据常规方法适当使用。除了有效成分之外，上述组合物还可包含食品学上可接受的食品辅助添加剂，并且有效成分的混合量可根据使用目的(预防、健康或治疗处置)来适当地确定。
[0064]
本发明的食品组合物可包括保健功能食品。本发明中使用的术语“保健功能食品”是指通过使用对人体具有有益功能的原料或成分来制备及加工成片剂、胶囊剂、粉末、颗粒、液体剂、丸剂等形式的食品。其中“功能性”是指获得如针对人体的结构及功能调节营养素或生理学上的作用等保健用途有益的效果。
[0065]
并且，对可使用本发明的组合物的保健食品的种类没有限制。而且，包含本发明的多奈哌齐和/或他达拉非作为活性成分的组合物可根据普通技术人员的选择，通过将保健功能食品中可含有的适当的其他辅助成分与公知的添加剂混合而制备。可添加的食品的示例有肉类、香肠、面包、巧克力、糖果类、点心类、饼干类、比萨饼、拉面、其他面条类、口香糖类、包括冰淇淋类的酪农制品、各种汤、饮料、茶、口服液、酒精饮料及维生素复合剂等，可通过添加到将本发明的提取物作为主要成分而制备的汁、茶、果冻及果汁等中来制备。
[0066]
在本发明的所有组合物、治疗方法及用途中提及的事项除非相互矛盾，否则同等适用。
[0067]
将通过以下实施例更详细地说明本发明。然而，以下实施例仅用于具体说明本发明的内容，本发明并不限定于此。
[0068]
实施例1：多奈哌齐和他达拉非联合给药在阿尔茨海默病或认知功能障碍动物模型中的突触可塑性上升效果确认
[0069]
为了确认根据多奈哌齐和他达拉非联合给药的突触可塑性，分为用作对照组(control)的(1)二甲基亚砜(dmso)组(n＝4)、(2)β淀粉样蛋白组(n＝4)、(3)β淀粉样蛋白+多奈哌齐(100nm)单独处理组(n＝4)以及(4)～(7)β淀粉样蛋白+多奈哌齐(100nm)+他达拉非(1、3、10、100nm)联合处理组(各组n＝4)，测定每组脑切片的局部场电位记录(local field recording)。
[0070]
大脑中的神经细胞通过被称为突触的连接部位传递信息。突触增强或减弱的一系列过程(突触可塑性)是在学习及记忆中的重要过程。将突触的大小及活性的持续提高称为突触长时程增强(long-term pote ntiation，ltp)，这是典型的突触可塑性现象。突触长时程增强(ltp)是高级认知功能的重要机制，在痴呆症的情况下，众所周知，突触长时程增强(ltp)损伤为代表性病症。
[0071]
为了确认本发明的多奈哌齐和他达拉非联合给药对阿尔茨海默病或认知功能障碍的治疗效果，对阿尔茨海默病模型小鼠的脑组织切片评价突触长时程增强(ltp)的变化。
[0072]
具体地，为了构建阿尔茨海默病或认知功能障碍模型，用作为阿尔茨海默病患者的大脑中发现的淀粉样斑块的主要成分的3μm的β淀粉样蛋白(aβ)处理小鼠脑切片。β淀粉样蛋白(aβ)作为认知功能障碍的主要原因物质而周知。
[0073]
通过实验结果确认，与多奈哌齐单独处理组相比，多奈哌齐和他达拉非联合处理组中的突触长时程增强(ltp)得到显著改善(图1a)。尤其，以多奈哌齐与他达拉非的不同重量比为基准比较并测定长时程增强(ltp)效果的结果，确认当多奈哌齐∶他达拉非的重量比在5∶1至30∶1的范围内时，效果最佳(表1或图1b)。
[0074]
[表1]
[0075][0076]
上述表的数据显示，以β淀粉样蛋白组为基准，多奈哌齐单独处理组的突触长时程增强增加5.71％，多奈哌齐和他达拉非(他达拉非10nm)联合处理组增加25.22％。
[0077]
这表明，在众所周知为深度参与记忆机制的海马体的长期突触增强过程中，与多奈哌齐相比，本发明的多奈哌齐和他达拉非复合剂改善了阿尔茨海默病或认知功能障碍的治疗效果。
[0078]
实施例2：多奈哌齐和他达拉非联合给药在阿尔茨海默病或认知功能障碍动物模型中的水迷宫实验指标提高效果确认
[0079]
本实验中使用的5xfad小鼠是插入阿尔茨海默病诱导基因的转基因小鼠模型。具体地，均过表达具有瑞典变异(k670n、m671l)、佛罗里达变异(i716v)及伦敦变异(v717i)的淀粉样蛋白前体蛋白以及具有m146l及l286v突变的ps1。5xfad小鼠是最广泛使用的表现出阿尔茨海默病症状的小鼠模型。
[0080]
为了测试根据本发明的复合组合物给药的认知功能提高效果，进行了水迷宫实验。实验设备由装有温度为约22
±
2℃的水的圆形水槽(直径150cm、高度45cm)、逃避平台(直径10cm、高度30cm)及四个可记住逃避平台的位置并附着在壁面上的四个标记物组成。上述标记物在整个测试期间保持不变并留在原位。根据实验目的，逃避平台位于水面以上
1cm或水面以下0.5cm～1.5cm。当位于水面以下时，为了使逃避平台不被肉眼看到，用白色水性颜料使水变得不透明。水迷宫分为四象限，区分为北东(ne)、北西(nw)、南东(se)及南西(sw)，其中逃避平台放在南西四象限的中心部，将其余中的一个随机用作起始位置。逃避平台的位置在整个学习期间不会改变。
[0081]
在学习第0天，使逃避平台可见。每只小鼠经过训练认识到游向逃避平台并站在逃避平台上即可逃生。在第1天至第4天，将逃避平台放置于水面下隐藏后，学习逃避平台的位置。时间限制设置为60秒，若在60秒内找到逃避平台，则允许动物在逃避平台上停留5秒钟。之后立即将其移动到饲养笼中。在第5天，在不放置逃避平台的情况下进行实验。在学习期间，将小鼠放置在距离逃避平台所在四象限最远的地方进行实验，并将时间限制为60秒。将作为小鼠找到逃避平台所需时间的逃避潜伏期(latency)及在逃避平台所在的四象限中的停留时间(time spent in quadarant)作为检查指标。逃生所需的时间(图2a)越短、在逃避平台所在的四象限停留越久(图2b)，判断为小鼠的记忆及学习能力越好。
[0082]
为了确认根据多奈哌齐(donepezil)和他达拉非(tadalafil)联合给药的认知功能提高效果，分为(1)正常小鼠溶剂对照组(表示为wt vehicle，0.5％的甲基纤维素5ml/kg，n＝5)、(2)变异小鼠溶剂对照组(表示为mt vehicle，0.5％的甲基纤维素5ml/kg，n＝5)、(3)mt多奈哌齐(1mg/kg单独给药，n＝4)、(4)mt多奈哌齐(2mg/kg单独给药，n＝5)以及(5)～(6)mt多奈哌齐+他达拉非(多奈哌齐1mg/kg+他达拉非0.2mg/kg联合给药，n＝4及多奈哌齐2mg/kg+他达拉非0.2mg/kg联合给药，n＝5)组，每组口服给药，给药4周。
[0083]
结果显示，在学习最后一天(第4天)的逃避潜伏期(latency)中，与变异小鼠溶剂对照组相比，多奈哌齐和他达拉非联合给药组的逃避潜伏期时间与多奈哌齐1mg/kg及2mg/kg单独给药变异小鼠组相比明显减少(表2或图2a)。
[0084]
[表2]
[0085][0086][0087]
上述表的数据显示，以变异小鼠溶剂对照组为基准，多奈哌齐2mg/kg单独给药组的逃避潜伏期减少33.79％，多奈哌齐2mg/kg和他达拉非0.2mg/kg联合给药组减少76.39％。
[0088]
并且，确认多奈哌齐和他达拉非联合给药组(多奈哌齐2mg/kg及他达拉非0.2mg/kg)的在四象限中的停留时间(time spent in quadar ant)与变异小鼠多奈哌齐单独给药组相比显著增加(表3或图2b)。
[0089]
[表3]
[0090][0091]
上述表的数据显示，以变异小鼠溶剂对照组为基准，多奈哌齐2mg/kg单独给药组的在目标四象限中的停留时间增加148.46％，多奈哌齐2mg/kg和他达拉非0.2mg/kg联合给药组增加274.46％。
[0092]
这表明，与根据多奈哌齐单独给药的改善效果相比，多奈哌齐和他达拉非联合给药明显改善了记忆及学习能力。尤其，再次确认在联合给药组中，认知功能改善效果在图1b中确认的多奈哌齐与他达拉非的重量比为5∶1至30∶1的范围内最大化。
[0093]
实施例3：多奈哌齐和他达拉非联合给药在阿尔茨海默病或认知功能障碍动物模型中的y迷宫实验指标提高效果确认
[0094]
为了测试根据本发明的复合组合物给药的短期工作记忆能力提高效果，使用上述记载的阿尔茨海默病小鼠模型进行了y迷宫实验。实验设备使用被分为三个区域的y字型迷宫(宽36cm、长16cm、高15cm)，将三个区域随机用作起始位置。将小鼠放入迷宫中，确认小鼠身体的中心进入每个区域的次数及依次进入每个区域的情况。交替(alternation)定义为依次进入所有三个区域而不重叠，并由如下公式计算出自发交替(alternation)。
[0095]
交替(alternation)(％)＝(依次进入每个区域的次数/进入所有区域的次数-2)
×
100
[0096]
为了确认根据多奈哌齐(donepezil)和他达拉非(tadalafil)联合给药的认知功能提高效果，分为(1)正常小鼠溶剂对照组(表示为wt vehicle，0.5％的甲基纤维素5ml/kg，n＝6)、(2)变异小鼠溶剂对照组(表示为mt vehicle，0.5％的甲基纤维素5ml/kg，n＝6)、(3)mt多奈哌齐(2mg/kg单独给药，n＝5)以及(4)mt多奈哌齐+他达拉非(多奈哌齐2mg/kg+他达拉非0.2mg/kg联合给药，n＝5)组，每组口服给药后进行实验。
[0097]
结果确认，与多奈哌齐单独给药组相比，多奈哌齐和他达拉非联合给药组的工作记忆显著改善(表4或图3)。
[0098]
[表4]
[0099][0100]
上述表的数据显示，以变异小鼠溶剂对照组为基准，多奈哌齐2mg/kg单独给药组的自发交替增加25.15％，多奈哌齐2mg/kg和他达拉非0.2mg/kg联合给药组增加62.46％。

技术特征：
1.一种用于预防、治疗或改善阿尔茨海默病或认知功能障碍的组合物，其特征在于，包含：(i)多奈哌齐或其药学上可接受的盐；以及(ii)他达拉非或其药学上可接受的盐。2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，(i)多奈哌齐或其药学上可接受的盐与(ii)他达拉非或其药学上可接受的盐的重量比为5∶1至30∶1。3.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，(i)多奈哌齐或其药学上可接受的盐与(ii)他达拉非或其药学上可接受的盐同时或不同时给药。4.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，上述组合物为复合剂型，包含：(i)多奈哌齐或其药学上可接受的盐；以及(ii)他达拉非或其药学上可接受的盐。5.根据权利要求4所述的组合物，其特征在于，复合剂型包含：(i)2.5mg至23mg的多奈哌齐或其药学上可接受的盐；以及(ii)0.1mg至2.5mg的他达拉非或其药学上可接受的盐。6.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，上述组合物为药物组合物或食品组合物。7.一种用于改善认知功能的组合物，其特征在于，包含：(i)多奈哌齐或其药学上可接受的盐；以及(ii)他达拉非或其药学上可接受的盐。8.根据权利要求7所述的组合物，其特征在于，(i)多奈哌齐或其药学上可接受的盐与(ii)他达拉非或其药学上可接受的盐的重量比为5∶1至30∶1。

技术总结
本发明涉及用于预防、治疗或改善阿尔茨海默病或认知功能障碍的多奈哌齐和他达拉非联合疗法。由于本发明的多奈哌齐和他达拉非联合给药在阿尔茨海默病或认知功能障碍方面改善效果优于多奈哌齐单独给药，因此可有效利用为阿尔茨海默病或认知功能障碍的治疗疗法或复合剂等。合剂等。合剂等。


技术研发人员：李爽灿 池龙夏 柳贤熙 郑美笑
受保护的技术使用者：诺罗瑞韦有限公司
技术研发日：2021.11.05
技术公布日：2023/7/22