一种水果中草甘膦及其代谢物的检测方法

1.本发明属于农药残留检测技术领域，具体涉及一种水果中草甘膦及其代谢物的检测方法。


背景技术：

2.草甘膦(gly)为灭生性除草剂，在世界范围内广泛用于果园除草。随着越来越多来自动物试验、生态系统指标监测以及人类健康研究的证据表明，草甘膦可对土壤、水体及生物等造成极大的污染，可通过食物链的生物富集作用对人体产生潜在及长期的毒性。国际癌症研究机构(iarc)在2015年3月将草甘膦划分为2a类致癌物，2017年欧洲化学品管理局(echa)认为草甘膦会对眼睛造成严重伤害，并对水生生物产生持久毒性。近期多项研究表明，草甘膦在低剂量下可导致肝肾损伤。草甘膦对人体健康造成的危害需要引起一定的关注。近年来，国内外研究发现在葡萄、蘑菇等果蔬及其制品中均能检出草甘膦及其代谢物氨甲基膦酸(ampa)残留。因此有必要开发复杂基质中草甘膦及其代谢物的快速检测方法。
3.由于草甘膦及其代谢物水溶性强，缺乏显色和荧光基团，其检测一直是一个难点问题。目前报道的草甘膦及其代谢物的前处理多采用9-芴甲基氯甲酸酯(fmoc-cl)衍生的方法，再采用气相色谱法、液相色谱法、气质联用法、液质联用法等技术检测其衍生物，但是存在步骤复杂，衍生时间长(需要过夜)，重现性差，灵敏度低等问题。因此，需要寻找一种专属性更强，衍生化步骤简单，快速且稳定性好的衍生化试剂，以便于准确测定草甘膦及其代谢物含量。


技术实现要素：

4.为了解决上述现有检测技术中存在的问题，本发明提供一种水果中草甘膦及其代谢物的检测方法，该方法具有简便快速、专属性强、灵敏度高、适用性强的优点，可以满足痕量草甘膦及其代谢物检测的需求。
5.为实现上述目的，本发明采用以下的技术方案为：
6.一种水果中草甘膦及其代谢物的检测方法，其包括如下步骤：
7.s1、将待测水果样品中草甘膦及其代谢物用水提取出来，制备获得提取液；
8.s2、提取液的净化；
9.s3、将净化后的提取液加入衍生化试剂进行衍生化；所述衍生化试剂为6-氨基喹啉-n-羟基琥珀酰亚胺氨基甲酸酯；
10.s4、草甘膦含量测定，采用同位素稀释内标-高效液相色谱串联质谱法定量；
11.同时用上述不加内标的水果样品的空白提取液加入草甘膦、氨甲基膦酸和草甘膦gly-13
c2，
15
n内标制备混合标准工作溶液；同时进行步骤s3-s4，进行检测，分别以草甘膦衍生物和氨甲基膦酸衍生物的峰面积与内标衍生物峰面积比值为纵坐标，草甘膦和氨甲基膦酸浓度与内标浓度比值为横坐标，制作标准曲线，得到线性回归方程，将测定的待测样品中草甘膦和氨甲基膦酸峰面积与内标峰面积比值代入线性回归方程，获得提取液中草甘膦及
其代谢物的浓度，然后根据提取液所代表试样的质量计算得到对应样品中草甘膦及其代谢物的含量。
12.如上所述的检测方法，优选地，在步骤s1中，提取液的制备具体是将水果用冷冻干燥机冻干后，研磨成细粉末；称取细粉末加入草甘膦gly-13
c2,
15
n作为内标，加水超声提取，离心后取上层的提取液。
13.如上所述的检测方法，优选地，内标的浓度为50μg/l，加水的量按照g：ml为1：20进行，超声15～30min，离心为8000r/min离心3min。
14.如上所述的检测方法，优选地，在步骤s2中，将提取液加入二氯甲烷，混匀后，离心，取上清液ⅰ，加入交联聚乙烯吡咯烷酮(pvpp)，混合后离心，获得上清液ii；
15.mcx柱净化分别用甲醇、水活化，吸取上清液ii过柱，弃去滤液，再次用上清液ii上样，收集滤液，离心后，得到上清液iii，待衍生化。
16.如上所述的检测方法，优选地，提取液与二氯甲烷加入比例为3:1，上清液ⅰ与pvpp添加量为1ml：5mg，离心为8000r/min下离心5min。
17.如上所述的检测方法，优选地，在步骤s3中，将上清液iii加入ph为8.8的硼酸钠缓冲液，混匀后，加入6-氨基喹啉-n-羟基琥珀酰亚胺氨基甲酸酯，混匀后，进行进样检测。
18.如上所述的检测方法，优选地，6-氨基喹啉-n-羟基琥珀酰亚胺氨基甲酸酯加入乙腈制成浓度为2.85mg/ml的溶液，上清液iii与硼酸钠缓冲液和的6-氨基喹啉-n-羟基琥珀酰亚胺氨基甲酸酯溶液添加比例为1:7:2。
19.如上所述的检测方法，优选地，在步骤s4中，液相色谱串联质谱的色谱条件为：色谱柱：acquity uplc hss t3，规格为100
×
2.1mm，粒径为1.8μm；
20.流动相a：5mmol/l甲酸铵、0.3％甲酸水溶液；
21.流动相b：纯乙腈；
22.柱温：50℃；流速：0.45ml/min；
23.梯度洗脱比例：
24.0-0.5min，2.0％ b；
25.0.5-5.0min，2.0％-8.0％ b；
26.5.0-6.0min，8.0％-20.0％ b；
27.6.0-7.0min，20.0％-60.0％ b；
28.7.0-8.0min，60.0％ b；
29.8.0-10.0min，2.0％ b；
30.所述液相色谱串联质谱的质谱条件为：
31.离子源：电喷雾电离源(esi)；扫描方式：正离子；监测模式：多反应监测模式(mrm)；毛细管电压：2.7kv(正离子模式，esi+)；雾化气温度：500℃；去溶剂气流量：1000l
·
h-1
；离子源温度：150℃；
32.草甘膦衍生物的质谱分析参数：保留时间为2.00min，母离子339.83m/z，子离子115.95m/z、170.90*m/z，锥孔电压15v，碰撞能量55、15ev；
33.草甘膦-13
c2,
15
n衍生物的质谱分析参数：保留时间为2.00min，母离子342.83m/z，子离子115.95m/z、170.90*m/z，锥孔电压15v，碰撞能量55、15ev；
34.氨甲基膦酸衍生物的质谱分析参数：保留时间为2.56min，母离子281.86m/z，子离
子116.00m/z、170.90*m/z，锥孔电压15v，碰撞能量55、25ev。
35.如上所述的检测方法，优选地，混合标准工作溶液中的草甘膦和氨甲基膦酸浓度分别为5、10、20、50、100μg/l，gly-13
c2,
15
n内标浓度为50μg/l。
36.如上所述的检测方法，优选地，计算的公式按如下进行：
[0037][0038]
xi—试样中草甘膦和氨甲基膦酸的含量，单位为毫克每千克mg
·
kg-1
；
[0039]ci
—从标准工作曲线中计算得到的试样中草甘膦和氨甲基膦酸的质量浓度值，单位为毫克每升；
[0040]
v—加入的提取液体积，单位为毫升；
[0041]
m—试样质量，单位为克。
[0042]
本发明经大量实验研究发现，与现有技术常用的水相乙腈-乙酸水溶液、乙腈-乙酸铵水溶液相比，本发明中采用甲酸铵和甲酸作为水相，采用纯乙腈作为有机相，可以有效地提高草甘膦及其代谢物氨甲基膦酸衍生产物离子化效率，提高灵敏度；采用acquity uplc hss t3色谱柱，与相同规格acquity beh c18色谱柱相比，峰对称性更好。研究表明，采用上述优化后的条件，草甘膦及其代谢物氨甲基膦酸衍生物峰形好，分离度高，灵敏度高。
[0043]
本发明的有益效果在于：
[0044]
(1)本发明提供的一种水果中草甘膦及其代谢物的检测方法，主要针对葡萄这一水果的特殊属性，含有糖类、维生素、多酚、色素等多种水溶性物质。因葡萄冻干粉用水提取时，除了提取出目标化合物草甘膦及其代谢物氨甲基膦酸外，这些含量远高于目标化合物的色素、多酚等水溶性干扰物质也一起被提取出来，给检测造成极大的困难。本发明的检测方法采用液液萃取、分散固相萃取和固相萃取三种净化方法相结合的方法，可以有效地去除提取液中大量基质的干扰，提高检测灵敏度。
[0045]
(2)本发明提供的检测方法，通过采用新型衍生试剂6-氨基喹啉-n-羟基琥珀酰亚胺氨基甲酸酯(aqc)对净化液进行衍生，使衍生效率得到大幅度提高，大大节省了前处理时间，提高了回收率和灵敏度，解决了现有痕量草甘膦及其代谢物检测中存在的衍生耗时长、稳定性和重复性差的问题。
[0046]
(3)本发明在样品提取前加入内标，采用内标法定量，与传统的外标法相比，可以有效地校正前处理过程损失，提高回收率；同时还可以降低基质效应，提高定量结果的准确度。
[0047]
(4)本发明提供的检测方法，通过对色谱条件及质谱条件的优化，进一步提高了痕量草甘膦及其代谢物检测的准确性。
[0048]
(5)本发明提供的检测方法，适用范围广泛，可满足大批量葡萄等浆果及其他小型水果中草甘膦及其代谢物的检测需求，也可用于其他水果中草甘膦及其代谢物的检测。
[0049]
(6)本发明提供的检测方法，具有简便、快速、灵敏度高、精密度和准确度高、适用性强的特点，而且衍生试剂使用量少，环境友好，检出限和定量限低，重现性强。本发明使用同位素内标法，定量结果更准确。
附图说明
[0050]
图1为草甘膦、氨甲基膦酸和草甘膦衍生物的mrm总离子流色谱图；
[0051]
图2为pvpp不同添加量对草甘膦和氨甲基膦酸回收率的影响；
[0052]
图3为mwcnt不同添加量对草甘膦和氨甲基膦酸回收率的影响；
[0053]
图4为gcb不同添加量对草甘膦和氨甲基膦酸回收率的影响；
[0054]
图5为提取过程流程图。
具体实施方式
[0055]
本发明提供的一种水果中草甘膦及其代谢物的检测方法，首次通过采用6-氨基喹啉-n-羟基琥珀酰亚胺氨基甲酸酯(aqc)作为衍生试剂，专属性强，衍生物稳定、无副产物干扰，可以有效消除杂质干扰，提高灵敏度，降低方法检出限，1分钟内即可完成衍生化操作，具有简便快速、重现性好、高效，所需时间和设备少，简便易于操作等优点，解决了现有衍生化方法时间长、重现性差的问题。该方法适用于大批量样品中草甘膦及其代谢物的检测，为葡萄等浆果及其他小型水果中草甘膦及其代谢物的提供了更为便捷、快速、准确的检测方法。
[0056]
以下实施例用于进一步说明本发明，但不应理解为对本发明的限制。在不背离本发明精神和实质的前提下，对本发明所作的修饰或者替换，均属于本发明的范畴。
[0057]
若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段。实施例中所用材料与试剂、仪器与设备来源可采用如下：乙腈(hplc级，美国fisher公司)；二氯甲烷(hplc级，美国fisher公司)；交联聚乙烯吡咯烷酮(pvpp，阿拉丁试剂公司)；多壁碳纳米管(mwcnt，阿拉丁试剂公司)；gcb(石墨化碳黑，阿拉丁试剂公司)；草甘膦、氨甲基膦酸标准样品(德国dr.ehrenstorfer公司)；6-氨基喹啉-n-羟基琥珀酰亚胺氨基甲酸酯(aqc，上海源叶生物科技有限公司)；oasis mcx(60mg，3ml)固相萃取小柱(waters公司)；acquity超高效液相色谱仪，xevo tqs三重四极杆质谱仪，配有esi电离源(waters公司)；3k30高速冷冻离心机(美国sigma公司)；超声波清洗机(昆山市超声仪器有限公司)。
[0058]
实施例1
[0059]
一种检测葡萄等浆果和其他小型水果中草甘膦及其代谢物氨甲基膦酸的方法，具体测定步骤如下：
[0060]
(1)样品前处理
[0061]
粉碎：将葡萄样品用冷冻干燥机冻干后，加入液氮研磨成细粉末。
[0062]
提取：称取粉末样品0.5g于50ml离心管中，加入50μl 10μg/ml草甘膦内标(gly-13
c2，
15
n)，加入10ml水，进行超声提取30min，然后8000r/min离心3min，保留上层的水提取液。
[0063]
净化：取6ml水提取液加入2ml二氯甲烷，涡旋1min，于8000r/min离心3min，得到上清液ⅰ；取3ml上清液ⅰ，加入15mg pvpp，涡旋1min，8000r/min下离心3min，得到上清液ⅱ；将mcx柱净化(60mg/3ml)分别用3ml甲醇、3ml水活化，吸取1.0ml上清液ⅱ过柱，弃去滤液，再取1.0ml上清液ⅱ上样，收集滤液，8000r/min下离心5min，得到上清液ⅲ，待衍生化。
[0064]
衍生：吸取上清液ⅲ10μl，加入70μl硼酸钠缓冲液(3g硼酸钠用纯水溶解定容至100ml，用甲酸调ph为8.8)，涡旋混匀后，再次边涡旋边快速加入20μl 6-氨基喹啉-n-羟基
琥珀酰亚胺氨基甲酸酯(aqc)衍生试剂，涡旋混匀15s后，倒入液相进样小瓶。
[0065]
所述衍生过程如下：
[0066][0067]
(2)lc-ms/ms条件
[0068]
超高效液相色谱条件色谱柱：acquity uplc hss t3(100
×
2.1mm，1.8μm)；
[0069]
色谱柱温：50℃；
[0070]
样品室温度：10℃；
[0071]
进样体积：5μl；
[0072]
流动相a：5mm/l甲酸铵、0.1％甲酸水；
[0073]
流动相b：乙腈；流速为0.45ml
·
min-1
；
[0074]
梯度洗脱条件：0-0.5min，2.0％ b；0.5-5.0min，2.0％-8.0％ b；5.0-6.0min，8.0％-20.0％ b；6.0-7.0min，20.0％-60.0％ b；7.0-8.0min，60.0％ b；8.0-10.0min，2.0％ b。
[0075]
(3)质谱条件
[0076]
离子源：电喷雾电离源(esi)；
[0077]
扫描方式：正离子；
[0078]
监测模式：多反应监测模式(mrm)；
[0079]
毛细管电压：2.7kv(正离子模式，esi
+
)；
[0080]
雾化气温度：500℃；
[0081]
去溶剂气流量：1000l
·
h-1
；
[0082]
离子源温度：150℃。
[0083]
质谱分析参数见表1。
[0084]
表1质谱分析参数
[0085][0086]
注：表中*代表定量离子。
[0087]
(4)定量方程的建立
[0088]
选取不含草甘膦和氨甲基膦酸的葡萄样品(不加内标)按上述方法进行前处理，作为空白基质溶液。准确吸取浓度为1μg/ml草甘膦和氨甲基膦酸混合标准溶液25、50、100、
250、500μl于5ml容量瓶中，再分别加入1μg/ml gly-13
c2,
15
n内标标准溶液250μl，用空白基质溶液稀释定容至刻度，配制成不同浓度具体为5、10、20、50、100μg/l 5个浓度的草甘膦和氨甲基膦酸标准溶液，其中gly-13
c2,
15
n内标浓度为50μg/l，制作标准曲线，内标法定量，即混合标准工作溶液为含草甘膦、氨甲基膦酸和gly-13
c2,
15
n的混合标准溶液。
[0089]
其次，方法线性范围、检出限与定量限
[0090]
按上述条件，对不同浓度的草甘膦、氨甲基膦酸和gly-13
c2,
15
n混合标准溶液进行衍生化处理后，上机测定，分别以衍生化后获得的草甘膦衍生物和氨甲基膦酸衍生物的峰面积与内标衍生物峰面积比值为纵坐标，草甘膦和氨甲基膦酸浓度与内标浓度比值为横坐标，制作标准曲线，得到线性回归方程。
[0091]
以3倍信噪比作为检出限，10倍信噪比作为定量限，具体结果见表2。
[0092]
表2草甘膦和氨甲基膦酸线性方程、相关系数、检出限和定量限
[0093][0094]
由上可见，本发明的方法，检测草甘膦的检出限0.02μg
·
kg-1
，检测氨甲基膦酸的检出限0.19μg
·
kg-1
。
[0095]
(5)水果样品中草甘膦及其代谢物氨甲基膦酸含量的测定
[0096]
将s4测得的待测样品中草甘膦及其代谢物氨甲基膦酸峰面积与内标峰面积比值代入线性回归方程，获得提取液中草甘膦及其代谢物的浓度，然后根据提取液所代表试样的质量计算得到对应样品中草甘膦及其代谢物的含量。计算公式如下：
[0097][0098]
xi—试样中草甘膦和氨甲基膦酸的含量，单位为毫克每千克mg
·
kg-1
；
[0099]ci
—从标准工作曲线中计算得到的试样中草甘膦和氨甲基膦酸的质量浓度值，单位为毫克每升(mg/l)；
[0100]
v—加入的提取液体积，单位为毫升(ml)；
[0101]
m—试样质量，单位为克(g)。
[0102]
按照上述的方法得到的色谱图如图1所示，其中，横坐标为时间(min)，纵坐标为响应值，由图1中可看出，草甘膦衍生物的保留时间即出峰时间为2min，草甘膦-13
c2,
15
n衍生物的出峰时间为2min，氨甲基膦酸衍生物的出峰时间为2.56min。
[0103]
实施例2方法加标回收率
[0104]
在空白葡萄样品中添加0.01、0.02、0.05mg
·
kg-1
共3个质量分数的草甘膦和氨甲基膦酸的混合标准溶液，按照实施例1中的的实验方法进行测定，计算回收率，回收率按下面公式(2)计算，每个添加水平重复测定6次。
[0105][0106]
ω0—理论加入草甘膦和氨甲基膦酸含量，单位为毫克每千克(mg/kg)；
[0107]
ω1—添加后样品中实测的草甘膦和氨甲基膦酸含量，单位为毫克每千克(mg/kg)。
[0108]
结果见表3，草甘膦和氨甲基膦酸这两种农药回收率在72.0％～81.5％之间，相对标准偏差在3.7％～7.1％之间。
[0109]
表3加标回收率及精密度
[0110][0111]
结果说明本发明建立的方法准确度满足回收率在70％～120％之间的要求。
[0112]
对比例
[0113]
本发明还对所述检测方法的主要关键技术点进行考虑，主要是对吸附剂种类及其用量的考察，具体如下：
[0114]
在空白葡萄样品中添加0.01mg
·
kg-1
质量分数的草甘膦和氨甲基膦酸的混合标准溶液，采用与实施例1相同的检测步骤，区别仅在于吸附剂的添加量不同，吸附剂添加量分别为pvpp(15、30、50mg)；其他条件不变，计算回收率。
[0115]
吸附剂采用mwcnt替换pvpp，添加量分别为1、2、5mg；其他操作同实施例1，检测并计算回收率。
[0116]
吸附剂采用gcb替换pvpp，添加量分别为1、2mg；其他操作同实施例1，检测并计算回收率。
[0117]
结果如图2-4所示，pvpp添加量为15mg时，ampa和gly的回收率均在80％以上，随着添加量的增加回收率降低；mwcnt添加量为1mg时，gly回收率低，仅为51.2％，且随着添加量的增加回收率降低，添加量为5mg时回收率仅有3.8％；gcb添加量为1mg时，gly回收率低，仅为54.0％，随着添加量的增加回收率降低。综合考虑gly和ampa回收率均能满足要求，优选pvpp的添加量15mg。

技术特征：
1.一种水果中草甘膦及其代谢物的检测方法，其特征在于，其包括如下步骤：s1、将待测水果样品中草甘膦及其代谢物用水提取出来，制备获得提取液；s2、提取液的净化；s3、将净化后的提取液加入衍生化试剂进行衍生化；所述衍生化试剂为6-氨基喹啉-n-羟基琥珀酰亚胺氨基甲酸酯；s4、草甘膦含量测定，采用同位素稀释内标-高效液相色谱串联质谱法定量；同时用上述不加内标的水果样品的空白提取液加入草甘膦、氨甲基膦酸和草甘膦gly-13
c2,
15
n内标制备混合标准工作溶液；同时进行步骤s3-s4，进行检测，分别以草甘膦衍生物和氨甲基膦酸衍生物的峰面积与内标衍生物峰面积比值为纵坐标，草甘膦和氨甲基膦酸浓度与内标浓度比值为横坐标，制作标准曲线，得到线性回归方程，将测定的待测样品中草甘膦和氨甲基膦酸峰面积与内标峰面积比值代入线性回归方程，获得提取液中草甘膦及其代谢物的浓度，然后根据提取液所代表试样的质量计算得到对应样品中草甘膦及其代谢物的含量。2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，在步骤s1中，提取液的制备具体是将水果用冷冻干燥机冻干后，研磨成细粉末；称取细粉末加入草甘膦gly-13
c2,
15
n作为内标，加水超声提取，离心后取上层的提取液。3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，内标的浓度为50μg/l，加水的量按照g：ml为1:20进行，超声15～30min，离心为8000r/min离心3min。4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，在步骤s2中，将提取液加入二氯甲烷，混匀后，离心，取上清液ⅰ，加入交联聚乙烯吡咯烷酮，混合后离心，获得上清液ii；mcx柱净化分别用甲醇、水活化，吸取上清液ii过柱，弃去滤液，再次用上清液ii上样，收集滤液，离心后，得到上清液iii，待衍生化。5.根据权利要求4所述的检测方法，其特征在于，提取液与二氯甲烷加入比例为3:1，上清液ⅰ与交联聚乙烯吡咯烷酮添加量为1ml：5mg，离心为8000r/min下离心5min。6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，在步骤s3中，将上清液iii加入ph为8.8的硼酸钠缓冲液，混匀后，加入6-氨基喹啉-n-羟基琥珀酰亚胺氨基甲酸酯，混匀后，进行进样检测。7.根据权利要求6所述的检测方法，其特征在于，6-氨基喹啉-n-羟基琥珀酰亚胺氨基甲酸酯加入乙腈制成浓度为2.85mg/ml的溶液，上清液iii与硼酸钠缓冲液和的6-氨基喹啉-n-羟基琥珀酰亚胺氨基甲酸酯溶液添加比例为1:7:2。8.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，在步骤s4中，液相色谱串联质谱的色谱条件为：色谱柱：acquity uplc hss t3，规格为100
×
2.1mm，粒径为1.8μm；流动相a：5mmol/l甲酸铵、0.3％甲酸水溶液；流动相b：纯乙腈；柱温：50℃；流速：0.45ml/min；梯度洗脱比例：0-0.5min，2.0％b；0.5-5.0min，2.0％-8.0％b；5.0-6.0min，8.0％-20.0％b；
6.0-7.0min，20.0％-60.0％b；7.0-8.0min，60.0％b；8.0-10.0min，2.0％b；所述液相色谱串联质谱的质谱条件为：离子源：电喷雾电离源(esi)；扫描方式：正离子；监测模式：多反应监测模式(mrm)；毛细管电压：2.7kv(正离子模式，esi+)；雾化气温度：500℃；去溶剂气流量：1000l
·
h-1
；离子源温度：150℃；草甘膦衍生物的质谱分析参数：保留时间为2.00min，母离子339.83m/z，子离子115.95m/z、170.90*m/z，锥孔电压15v，碰撞能量55、15ev；草甘膦-13
c2,
15
n衍生物的质谱分析参数：保留时间为2.00min，母离子342.83m/z，子离子115.95m/z、170.90*m/z，锥孔电压15v，碰撞能量55、15ev；氨甲基膦酸衍生物的质谱分析参数：保留时间为2.56min，母离子281.86m/z，子离子116.00m/z、170.90*m/z，锥孔电压15v，碰撞能量55、25ev，其中*代表定量离子。9.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，混合标准工作溶液中的草甘膦和氨甲基膦酸的浓度分别为5、10、20、50、100μg/l，gly-13
c2,
15
n内标浓度为50μg/l。10.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，计算的公式按如下进行：x
i
—试样中草甘膦和氨甲基膦酸的含量，单位为毫克每千克mg
·
kg-1
；c
i
—从标准工作曲线中计算得到的试样中草甘膦和氨甲基膦酸的质量浓度值，单位为毫克每升；v—加入的提取液体积，单位为毫升；m—试样质量，单位为克。

技术总结
本发明提供了一种水果中草甘膦及其代谢物的检测方法，其包括S1、制备提取液；S2、提取液的净化；S3、提取液衍生化；S4、草甘膦含量测定，采用同位素稀释内标-高效液相色谱串联质谱法定量；同时用上述样品(不加内标)的空白提取液加入草甘膦、氨甲基膦酸和草甘膦GLY-13


技术研发人员：平华 赵天宇 马智宏 李成 李杨 孔红玲 付海龙
受保护的技术使用者：北京市农林科学院
技术研发日：2023.03.15
技术公布日：2023/7/25