用于增加水生动物的ω-3/ω-6多不饱和脂肪酸比率的饲料添加剂的制作方法

用于增加水生动物的
ω-3/
ω-6多不饱和脂肪酸比率的饲料添加剂
1.本技术要求2020年12月4日提交的欧洲专利申请ep20383060.9的权益。
技术领域
2.本发明涉及动物饲料添加剂领域。特别地，它涉及可以添加到动物饲料中的辣椒素、胡椒碱和姜辣素的组合，以及包含所述组合的动物饲料添加剂和水产养殖饲料。本发明还涉及上述组合在改善水生动物肉如鱼肉的品质中的用途。


背景技术：

3.众所周知，ω3长链多不饱和脂肪酸(n-3lc-pufa)对人体健康非常有益。这与直接摄入足量的n-3lc-pufa以及平衡的膳食ω-3/ω-6pufa比率(n-3/n-6比率)有关。
4.然而，21世纪西方社会饮食的一般特征是n-3与n-6pufa比率明显失衡。因此，出于健康原因，强烈建议增加n-3lc-pufa的消费。因而，鱼类和海产品含有高浓度的n-3lc-pufa如epa(二十碳五烯酸，20:5n-3)和dha(二十二碳六烯酸，22:6n-3)以及高n-3/n-6pufa比率，被认为是健康人类饮食的重要部分。
5.肉食性鱼类物种没有生理上相关的能力将短链pufa如la(亚油酸，18:2n-6)和ala(α-亚麻酸，18:3n-3)去饱和和延长为生物活性的和必需的lc-pufa。然而，养殖鱼饲料原本含有高水平的鱼油，供应了所需的n-3lc-pufa。
6.然而，水产养殖产量的急剧增加，伴随着对用于饲料生产的以鱼类为基础的原料需求的增长以及鱼类原料供应的停滞或减少，已经导致水产饲料中的鱼油被陆生动物脂肪或植物油部分代替。这种替代影响了鱼的脂肪酸组成，与以鱼油为基础的饲粮喂养的鱼相比，将具有较低的n-3lc-pufa含量和较低的n-3/n-6pufa比率。
7.因此，需要为水产养殖饲料的生产找到可持续的替代品，同时提供对最终产品如鱼片、特别是用鱼油比例相对较低的水产饲料喂养的水生动物的营养质量改善。


技术实现要素：

8.本发明人发现，当将辣椒素、胡椒碱和姜辣素的组合添加到水产饲料中时，摄入该组合对水生动物如鱼类的脂肪代谢有积极影响。
9.令人惊讶的是，发现所述的组合提供了意想不到的效果，因为当添加到水产养殖饲料(包含鱼油)中时，用这样的饲料喂养的水生动物(例如鱼，特别是鱼肉)中的总脂质中的总n-3lc-pufa如epa、dpa(二十二碳五烯酸，22:5n-3)和dha的水平比用未补充的饲料(即，相同的饲料，但没有所述组合)喂养的水生动物中的所述水平提高。另外，所述组合还使鱼肉中的总n-6pufa降低，从而增加了n3/n-6pufa比率。这允许通过以陆生动物脂肪、植物油或两者部分取代鱼油来减少水产养殖饲料中鱼油的量。因此，用所述的组合补充减鱼油的水产养殖饲料(即含有相对较低比例的n-3pufa和较高比例的n-6pufa、或相对较高比例的单不饱和油酸、或相对较高比例的饱和脂肪酸、或这些特征的组合的水产饲料)，使得
在水生动物中产生更接近于用未减鱼油的水产养殖饲料(即，其中鱼油未被陆生动物脂肪或植物油部分取代)喂养的鱼类中见到的n-3和n-6pufa之间的平衡。
10.因此，在第一方面，本公开涉及一种用于水生动物、特别是鱼类如海鱼的动物饲料添加剂，所述添加剂包含：
11.包含类辣椒素、胡椒碱、姜辣素和选自肉桂醛、类姜黄素及其混合物的化合物的组合；
12.以及至少一种饲料可接受的赋形剂。
13.有利地，通过使用该添加剂，不仅最终产品如鱼片由于多不饱和脂肪酸组成改善而提高了营养质量，而且还观察到脂肪沉积减少。另外，还观察到饲料转化率(fcr)和增重的改善，这反映了对生产收益率的积极效果。
14.在第二方面，本公开涉及一种水产养殖饲料，所述进料包含有效量的如上限定的用于水生动物的动物饲料添加剂。
15.本公开的用于水生动物的动物饲料添加剂可以用于增加水生动物的营养质量，即改善多不饱和脂肪酸组成和减少脂肪沉积，特别是对以减鱼油的水产饲料(即，其中通常包含在水产饲料中的鱼油已被陆生动物脂肪或植物油部分取代)喂养的水产动物。与未减鱼油的水产饲料相比，减鱼油的水产饲料的特点在于相对较低比例的n-3pufa和较高比例的n-6pufa、或相对较高比例的单不饱和油酸、或相对较高比例的饱和脂肪酸、或这些特征的组合。
16.因此，本公开的另一个方面涉及如上限定的组合物、用于水生动物的动物饲料添加剂或水产养殖饲料的用途，即在用包含所述组合(或所述动物饲料添加剂)的饲粮喂养的水生动物中，与用没有所述组合(或所述动物饲料添加剂)的相同饲粮喂养的水生动物中的总脂质中ω3长链多不饱和脂肪酸的量、或总脂质中ω3/ω6多不饱和脂肪酸的比率、或其二者相比，增加总脂质中ω3长链多不饱和脂肪酸的量、或增加总脂质中ω3/ω6多不饱和脂肪酸的比率。该方面还可以制订为一种方法，所述方法用于在用包含所述组合(或所述动物饲料添加剂)的饲粮喂养的水生动物中，与用没有所述组合(或所述动物饲料添加剂)的相同饲粮喂养的水生动物中的总脂质中ω3长链多不饱和脂肪酸的量、或总脂质中ω3/ω6多不饱和脂肪酸的比率、或其二者相比，增加水生动物总脂质中ω3长链多不饱和脂肪酸的量、或增加水生动物总脂质中ω3/ω6多不饱和脂肪酸的比率、或其二者，所述方法包括用包含有效量的如上文或下文限定的组合(或动物饲料添加剂)的食料喂养水生动物。
附图说明
17.图1显示了鱼片中的脂质总量(毫克/克鱼片(dw)干重)，上标不同的条有显著差异(通过单因素方差分析(anova)继以图基(tukey's)多重比较检验评估，p《0.0 5)。
18.图2显示了鱼片脂质中各种pufa的水平(毫克脂肪酸/克脂质)，即鱼片中每克脂质中各种pufa的的量(以毫克计)。在每个图形中，具有不同上标字母的柱有显著差异(通过单因素方差分析(anova)继以图基多重比较检验评估，p《0.0 5)。
19.图3显示了鱼片脂质中n-3pufa和n-6pufa的总水平(毫克/克脂质)。n-3/n-6pufa之间的比率在第二(右手)轴上指示。
具体实施方式
20.如本技术中在此使用的所有术语，除非另有说明，均应以其在本领域中已知的普通含义来理解。对本技术中使用的术语的其它更具体的定义如下文所述，并且意欲在整个说明书和权利要求书中统一地应用，除非另有明确阐述的定义提供了更为广义的定义。
21.辣椒油树脂是辣椒属植物的干燥、成熟的辣椒果实的油性提取物。类辣椒素被认为是辣椒油树脂的活性成分。因此，所述油树脂通常被用作类辣椒素的天然来源。辣椒油树脂中类辣椒素的量可以为约5.0重量％至约6.6重量％，例如5.5重量％。出于本发明的目的，术语“类辣椒素(capsaicinoid)”是指类辣椒素或其盐。特别地，类辣椒素选自辣椒素、二氢辣椒素、去甲二氢辣椒素、高辣椒素、高二氢辣椒素、壬酸香草酰胺(nonivamide)及其混合物。更具体地说，类辣椒素是辣椒素。
22.黑胡椒油树脂是黑胡椒(piper nigrum)的干浆果的油性提取物，通常被用作胡椒碱的天然来源。黑胡椒油树脂中的胡椒碱的量可以为34重量％至42重量％，例如约33重量％或约36重量％。
23.姜油树脂是姜(zingiber officinale)的磨碎干燥根茎的油性提取物，通常被用作姜辣素的天然来源。姜油树脂中的姜辣素可以为约4重量％至约1重量％，例如约8重量％或约9重量％。
24.姜黄油树脂是姜黄(curuma longa l)的干燥成熟根茎的油性提取物，通常被用作类姜黄素的天然来源。姜黄油树脂中类姜黄素(curcuminoids)的量可以为约28重量％至约38重量％，例如约32重量％。为了本发明的目的，术语“类姜黄素”指的是类姜黄素或其盐。特别地，类姜黄素选自姜黄素、去甲氧基姜黄素和双去甲氧基姜黄素及其混合物。更特别地，类姜黄素是姜黄素。
25.辣椒油树脂、黑胡椒油树脂、姜油树脂、姜黄油树脂和肉桂醛都是可商购的。
26.如本文中所用的术语“动物饲料添加剂”是指适合于或意欲加入到动物饲料中的组合物。在本公开中，所述动物饲料添加剂是用于水生动物的。
27.术语“水生动物”是指甲壳类动物，如虾、对虾和蟹；鱼类，如鲷鱼、鲈鱼、鲑鱼、鳟鱼、石斑鱼、鲤鱼、罗非鱼、鲶鱼；软体动物，如蛤、牡蛎、帽贝和鲍鱼；头足类，如章鱼、鱿鱼和乌贼；以及其它无脊椎动物，如海参和海胆。
28.术语“动物饲料”是指适合于或意欲被动物摄取的制品或混合物。术语“水产养殖饲料”或“水产饲料”是指意欲被水生动物摄取的动物饲料，即补充或者代替天然饲料的人造或人工饲料。
29.如本文中所用的表述“有效量”是指足以达到期望和/或需要的效果的任何量，所述效果即，在水生动物中，相对于没有添加本公开的组合的情况下所述的脂肪酸的量和/或比率，增加总脂质中ω3长链多不饱和脂肪酸的量、增加ω3/ω6长链多不饱和脂肪酸的比率、或它们二者。
30.术语“饲料转化率(fcr)”是指动物将饲料重量输入转化为期望输出的增长的量度。在为吃肉而饲养的动物(如虾和鱼)中，所述输出是动物增加的体重。fcr以具体期限内的采食量除以增重来计算。fcr改善意味着fcr值降低。
31.术语“比生长速率(sgr)”是指每日体重增长(以％计)。
32.除非另有说明，否则术语“重量百分比”或“重量％”是指每重量的总组成中该成分
的重量百分比。
33.如本文中所用的不定冠词“a”和“an”与“至少一个”或“一个或多个”同义。除非另外指出，否则本文中所用的定冠词，如“所述”，也包括该名词的复数。
34.如上所述，本公开的用于水生动物的动物饲料添加剂包括包含类辣椒素、胡椒碱、姜辣素和选自肉桂醛、类姜黄素及其混合物的化合物的组合；以及至少一种饲料可接受的赋形剂。
35.在一个实施方式中：
[0036]-类辣椒素的量为0.1重量％至1.0重量％、或0.2重量％至0.7重量％，
[0037]-胡椒碱的量为0.025重量％至0.25重量％、或0.1重量％至0.2重量％，
[0038]-姜辣素的量为0.002重量％至0.05重量％、或0.01重量％至0.04重量％，以及
[0039]-肉桂醛的量为0.5重量％至3.0重量％、或0.75重量％至2.5重量％，例如2.0重量％，和
[0040]-类姜黄素的量为0重量％至3.0重量％、或0.5重量％至3.0重量％、或1.0重量％至2.5重量％，例如1.5重量％，
[0041]
或者，
[0042]-肉桂醛的量为0重量％至3.0重量％、或0.5重量％至3.0重量％、或0.75重量％至2.5重量％，例如2.0重量％，和
[0043]-类姜黄素的量为0.5重量％至3.0重量％、或1.0重量％至2.5重量％，例如1.5重量％，
[0044]
其中重量百分比是相对于动物饲料添加剂的总重量。
[0045]
在另一个实施方式中，任选与以上限定的特定实施方式的一个或多个特征相结合，所述类辣椒素选自辣椒素、二氢辣椒素、去甲二氢辣椒素、高辣椒素、高二氢辣椒素、壬酸香草酰胺及其混合物，并且所述类姜黄素选自姜黄素、去甲氧基姜黄素和双去甲氧基姜黄素及其混合物。
[0046]
在另一个实施方式中，任选与以上限定的特定实施方式的一个或多个特征相结合，类辣椒素是辣椒素。在另一个实施方式中，任选与以上限定的特定实施方式的一个或多个特征相结合，类姜黄素是姜黄素。
[0047]
在一个实施方式中，任选与以上限定的特定实施方式的一个或多个特征相结合，肉桂醛的量为0.5重量％至3.0重量％，并且类姜黄素的量为0重量％。
[0048]
在另一个实施方式中，任选与以上限定的特定实施方式的一个或多个特征相结合，类姜黄素的量为0.5重量％至3.0重量％，并且肉桂醛的量为0重量％。
[0049]
在另一个实施方式中，任选与以上限定的特定实施方式的一个或多个特征相结合，所述用于水生动物的动物饲料添加剂包含类辣椒素、胡椒碱、姜辣素和肉桂醛，其中相对于动物饲料添加剂的总重量，类辣椒素的量为0.25重量％至1.0重量％、或0.35重量％至0.85重量％，例如0.62重量％，胡椒碱的量为0.025重量％至0.25重量％、或0.04重量％至0.2重量％，例如0.13重量％或0.14重量％；姜辣素的量为0.002重量％至0.04重量％、或0.005重量％至0.03重量％，例如0.02重量％；肉桂醛的量为0.5重量％至3.0重量％、或0.75重量％至2.5重量％，例如2.0重量％；特别地，类姜黄素的量为0重量％。
[0050]
在另一个特定实施方式中，任选与以上限定的特定实施方式的一个或多个特征相
结合，所述用于水生动物的动物饲料添加剂包含类辣椒素、胡椒碱、姜辣素和类姜黄素，其中相对于动物饲料添加剂的总重量，类辣椒素的量为0.1重量％至0.5重量％、或0.15重量％至0.4重量％，例如0.26重量％；胡椒碱的量为0.04重量％至0.2重量％、或0.06重量％至0.16重量％，例如0.11重量％；姜辣素的量为0.01重量％至0.05重量％、或0.015重量％至0.04重量％，例如0.03重量％；类姜黄素的量为0.5重量％至3.0重量％、或1.0重量％至2.5重量％，例如1.5重量％；肉桂醛的量为0重量％。
[0051]
如上所述，类辣椒素通常以辣椒油树脂的形式商业化，胡椒碱以黑胡椒油树脂的形式商业化，姜辣素以姜油树脂的形式商业化，类姜黄素以姜黄油树脂的形式商业化。
[0052]
因此，在另一个实施方式中，任选与以上限定的特定实施方式的一个或多个特征相结合，在本发明的用于水生动物的动物饲料添加剂中，类辣椒素以辣椒油树脂的形式提供；胡椒碱以黑胡椒油树脂的形式提供；姜辣素以姜油树脂的形式提供，类姜黄素如果存在的话以姜黄油树脂的形式提供。
[0053]
所述动物饲料添加剂中每一种油树脂的量将取决于其相应活性成分的含量。特别是，知道活性成分在相应的商业油树脂中的含量，专家就会知道要添加到所述饲料添加剂中以获得每种活性成分的期望重量百分比的每种油树脂的量。
[0054]
因此，该实施方式也可以配制为如上限定的用于水生动物的动物饲料添加剂，所述动物饲料添加剂包含：
[0055]
一种组合，所述组合包含
[0056]-作为类辣椒素的来源的辣椒油树脂，特别地，其中所述油树脂为提供如上限定的类辣椒素量的量；
[0057]-作为胡椒碱来源的黑胡椒油树脂，特别地，其中所述油树脂为提供如上限定的胡椒碱量的量；
[0058]-作为姜辣素的来源的姜油树脂，特别地，其中所述油树脂是提供如上限定的姜辣素量的量；和
[0059]-肉桂醛，特别是以如上限定的量；或者，替代地，作为类姜黄素的来源的姜黄油树脂，特别地，其中所述油树脂提供如上限定的类姜黄素量的量；
[0060]
以及至少一种饲料可接受的赋形剂。
[0061]
因此，在一个特定实施方式中，辣椒油树脂的量为约1.8重量％至约18重量％，黑胡椒油树脂的量为约0.07重量％至约0.7重量％，姜油树脂的量为约0.02重量％至约0.6重量％，以及姜黄油树脂的量为约1.5重量％至约9.4％重量％。
[0062]
本公开的用于水生动物的动物饲料添加剂可以被加入到动物饲料组合物中以获得水产养殖饲料，所述水产养殖饲料包含类辣椒素、胡椒碱、姜辣素和作为附加组分的选自肉桂醛、类姜黄素及其混合物的化合物。
[0063]
因此，本公开的水产养殖饲料包含：a)用于水生动物的动物饲料组合物，特别是含鱼油的水产养殖饲料组合物，鱼油的量为例如相对于水产养殖饲料总重量的1重量％至25重量％，更特别是其中鱼油已被陆生动物脂肪或植物油部分取代的含鱼油的水产养殖饲料；和b)有效量的如上文和下文限定的用于水生动物的动物饲料添加剂。
[0064]
在本公开的水产养殖饲料的一个实施方式中，任选与以上限定的特定实施方式的一个或多个特征相结合，所述水产养殖饲料中用于水生动物的动物饲料添加剂的量为相对
于水产养殖饲料总重量的0.025重量％至0.30重量％、或0.05重量％至0.25wt.％、或0.10重量％至0.20重量％、或0.10重量％至0.15重量％。在一个特定实施方式中，所述用于水生动物的动物饲料添加剂的量为相对于水产养殖饲料总重量的0.15重量％。
[0065]
推荐的食料配方因每个种类的水生动物、例如每个种类的鱼而异。因此，在一个实施方式中，任选与以上限定的特定实施方式的一个或多个特征相结合，本公开的水产养殖饲料包含的添加的油的量相对于水产养殖饲料总重量为3重量％至35重量％，例如30重量％，其中添加的油包括鱼油、以及动物脂肪、植物油、或其二者。作为一个示例，相对于水产养殖饲料的总重量，所述水产养殖饲料中鱼油的量可以为1重量％至25重量％。
[0066]
添加的油的量取决于养殖的水生动物。作为一个示例，在标准的海鲷或海鲈养殖饲料中添加的油的量为10重量％至16重量％，其中所述添加的油的量可以为例如3重量％至12重量％；在标准的鲑鱼(salmonid)养殖饲料中添加的油的量为17重量％至35重量％，例如25重量％，其中鱼油的量可以为例如4重量％至35重量％、或10重量％至25重量％。
[0067]
本公开的用于水生动物的组合或动物饲料添加剂在加入到其中所含鱼油的一部分已被陆生动物脂肪或植物油取代的水产饲料中时特别有效。
[0068]
因此，在一个实施方式中，任选与以上限定的特定实施方式的一个或多个特征相结合，所述水产养殖饲料包含鱼油和陆生动物脂肪或植物油、或它们二者。陆地动物脂肪或植物油含有较低水平的n-3pufa和较高水平的n-6pufa、或相对较高比例的单不饱和油酸、或相对较高比例的饱和脂肪酸、或这些特征的组合。
[0069]
在本公开的水产养殖饲料的另一个特定实施方式中，任选与以上限定的特定实施方式的一个或多个特征相结合，鱼油总量的至多90重量％，例如5重量％至90重量％、或15重量％至75重量％、或25重量％至60重量％，已被相同重量的陆地动物脂肪、植物油或其二者代替。
[0070]
特别地，取代鱼油的脂肪以陆生动物脂肪的形式加入，所述陆生动物脂肪更特别地是哺乳动物的脂肪，如牛油和猪油(例如提炼的牛和/或猪脂肪)。
[0071]
如上所述，水生动物可以是甲壳类、鱼类、软体动物、头足类和其它无脊椎动物如海参和海胆。特别地，所述水生动物是鱼，更特别是海鱼。
[0072]
本公开的用于水生动物的动物饲料添加剂和水产养殖饲料可以通过本领域技术人员所知的常规方法、例如实施例中描述的方法制备。水产养殖饲料最常以通过造粒或挤出制造的颗粒的形式生产。
[0073]
作为一个示例，如上文和下文限定的水产养殖饲料的制备方法可以包括以下步骤：制造包含类辣椒素、胡椒碱和姜辣素以及任选的肉桂醛或类姜黄素素或其混合物的动物饲料添加剂，然后将所述动物饲料添加剂与用于水生动物的动物饲料组合物混合。
[0074]
作为一个示例，所述动物饲料添加剂的制造方法包括：将包括类辣椒素、胡椒碱、姜辣素的成分和包括选自肉桂醛、类姜黄素或其混合物的化合物的成分混合来制备活性混合物，然后进一步与包括至少一种载体、一种抗氧化剂、一种乳化剂和脂肪基质材料的其它饲料可接受的赋形剂混合，最终将所述整个组合物在例如喷雾冷却雾化器中雾化，从而获得脂肪包衣的包囊形式的动物饲料添加剂。
[0075]
特别地，可以通过将作为类辣椒素来源的辣椒油树脂、作为胡椒碱来源的黑胡椒油树脂、作为姜辣素来源的姜油树脂、以及选自肉桂醛、作为类姜黄素来源的姜黄油树脂或
其混合物的组分进行混合来获得所述活性混合物。
[0076]
此外，可通过如上限定的方法获得的动物饲料添加剂也构成本发明的一部分。本发明的方法的所有实施方式都考虑了提供本发明的动物饲料添加剂的所有实施方式及其组合的所有组合。
[0077]
在一个实施方式中，任选与以上限定的特定实施方式的一个或多个特征相结合，本发明的用于水生动物的动物饲料添加剂是以脂肪包衣的包囊形式。
[0078]
饲料可接受的成分或添加剂的例子包括植物脂肪和油，如氢化棕榈油或大豆油；抗氧化剂，如bht；乳化剂，如卵磷脂或用甘油酯化的脂肪酸；以及粘合剂，如胶体二氧化硅。
[0079]
作为另一个示例，用于水生动物的饲料组合物的成分可以在例如混合器中混合，然后所述混合物可以与所述饲料添加剂以粉末的形式混合，并且随后挤出或压制以形成颗粒。或者，所述饲料组合物可以通过挤出或压制而转变为颗粒，然后可以将根据本公开的包含水或食用油如植物油的饲料添加剂包被在所述颗粒上，特别是以上文限定的量，以获得最终的动物饲料。
[0080]
可以在其中添加本公开的动物饲料添加剂的组合的动物饲料组合物是可商购的。
[0081]
作为一个示例，用于水生动物的动物饲料组合物可以包含一种或多种选自下列的组分：包括鱼粉和植物粉的蛋白质、包括淀粉的碳水化合物、包括鱼油、陆生动物肪和植物油的脂质、维生素、氨基酸以及其它允许的饲料添加剂和饲料材料。
[0082]
在整个说明书和权利要求书中，单词“包含”和该单词的变体并不打算排除其它技术特征、添加剂、组分或步骤。此外，单词“包含”涵盖了“由
……
组成”的情况。
[0083]
提供以下实施例和附图作为说明，它们无意于限制本发明。此外，本发明覆盖了本文所述的特定和优选的实施方式的所有可能组合。
[0084]
实施例
[0085]
使用了可商购的含有5.5重量％辣椒素的辣椒油树脂、含有33重量％胡椒碱的黑胡椒油树脂、含有8重量％姜辣素的姜油树脂、含有32重量％类姜黄素的姜黄油树脂、和肉桂醛。
[0086]
测试了含有如表1所示的饲料添加剂a或b的饲粮。
[0087]
表1
[0088][0089][0090]
辣椒油树脂中所含的类辣椒素、黑胡椒油树脂中所含的胡椒碱、姜油树脂中所含的姜辣素和姜黄油树脂中所含的类姜黄素的量如下表2所示。
[0091]
表2
[0092][0093]
重量％是相对于添加剂的总量。
[0094]
*出现在原材料说明书中的平均值。
[0095]
测试了六种试验性饲粮。表3显示了被测饲粮中鱼油、哺乳动物脂肪、饲料添加剂a和饲料添加剂b的含量，其中饲粮a0.5、a1.0、a1.5和b1.0是以nc配方为基础，补充了规定量
的被测饲料添加剂a和b。
[0096]
表3
[0097]
成分(重量％)pcnca0.5a1.0a1.5b1.0鱼油11.56.36.36.36.36.3哺乳动物脂肪-5.25.25.25.25.2饲料添加剂a
‑‑
0.050.100.15-饲料添加剂b
‑‑ꢀ‑ꢀ
0.10
[0098]
在表3中：
[0099]-pc-阳性对照饲粮，模拟金头海鲷的商业饲粮，含有鱼粉、鱼蛋白水解物、羽毛粉水解物、猪血粉、禽粉、玉米蛋白粉、大豆粉、菜籽粉作为主要蛋白质来源、以及鱼油作为主要脂肪来源；
[0100]-nc-阴性对照饲粮，与pc饲粮的组成相同，但45％的鱼油被陆生动物脂肪代替，陆生动物脂肪被标明为哺乳动物脂肪，特别是富含棕榈酸(16:0，23.8％)、硬脂酸(18:0，14.4％)、油酸(18:1n-9，39.5％)和亚油酸(18:2n-6，9.4％)脂肪酸；
[0101]-a0.5饲粮-nc饲粮+0.5g/kg(0.05重量％)的饲料添加剂a；
[0102]-a1.0饲粮-nc+1.0g/kg(0.1重量％)的饲料添加剂a；
[0103]-a1.5饲粮-nc+1.5g/kg(0.15重量％)的饲料添加剂a；和
[0104]-b1.0饲粮-nc+1.0g/kg(0.1重量％)的饲料添加剂b。
[0105]
此外，pc和nc配方中补充了特定的维生素、结晶氨基酸和无机磷酸盐，以避免任何营养缺乏，这两种配方的目标组成都是46％的粗蛋白质，16％的粗脂肪，20.5mj/kg的总能量。
[0106]
饲粮通过挤出生产。将粉末成分和饲料添加剂a或b与nc配方在双螺旋混合器(500l型，tgc extrusion，法国)中混合，并在微型粉碎机锤磨机(sh1型，hosokawa-alpine，德国)中磨碎(低于400μm)。饲粮(颗粒大小：4.0mm)由螺杆直径为55.5mm的双螺杆挤出机(bc45型，clextral，法国)制造。挤出的颗粒在振动流化床干燥器(dr100型，tgc extrusion，法国)中干燥。冷却后，通过真空包衣(pg-10vclab型，dinnissen，荷兰)在挤出后添加的油。
[0107]
所述实验性饲粮的组成如表4所示。
[0108]
表4-鱼饲料组成
[0109] pcnca0.5a1.0a1.5b1.0水分，％5.8
±
0.05.6
±
0.06.0
±
0.05.1
±
0.05.2
±
0.05.2
±
0.0灰分，％7.9
±
0.17.8
±
0.07.8
±
0.07.9
±
0.18.0
±
0.07.8
±
0.0粗蛋白质，％45.9
±
0.145.9
±
0.145.9
±
0.145.9
±
0.046.0
±
0.045.9
±
0.1粗脂肪，％16.2
±
0.116.4
±
0.116.3
±
0.116.3
±
0.016.2
±
0.016.2
±
0.1总能量，mj/kg20.5
±
0.120.6
±
0.020.5
±
0.120.6
±
0.020.6
±
0.120.6
±
0.0
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
总脂肪酸的％
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
14:06.914.614.854.304.554.6615:00.550.430.450.370.390.41
16:021.4723.7924.8921.8922.8623.5217:00.730.690.730.650.680.718:04.638.989.468.779.209.3720:00.440.320.360.280.320.32总sfa35.3439.4941.3836.9038.5739.5116:1n-77.574.774.825.115.265.1318:1n-72.912.362.662.472.502.4918:1n-915.8025.3325.0925.6425.5525.3520:1n-91.811.171.151.251.241.2122:1n-111.741.140.891.261.051.0624:10.440.290.270.250.270.27总mufa30.6235.3335.1536.2936.1635.8018:2n-65.748.548.608.408.488.4818:3n-60.210.130.110.140.140.1520:4n-60.880.550.540.610.600.57总n-6pufa7.089.379.399.299.389.3518:3n-31.050.880.880.900.910.8920:5n-313.656.226.017.147.066.7422:5n-31.570.770.810.840.840.8122:6n-39.604.824.585.415.245.03总n-3pufa25.9913.9312.3715.7314.1813.60
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
n-3/n-6pufa3.671.491.321.691.511.45ara/epa0.060.090.090.090.080.08dha/epa0.700.770.760.760.740.75
[0110]
《0.25％的脂肪酸没有出现。值是平均值
±
标准差(n＝2)。对于脂肪酸，只进行了单一分析。
[0111]
从表4中的数据可以看出，用哺乳动物的脂肪代替45％的鱼油导致被测鱼饲料的脂肪酸组成中的重大变化。主要效果是与棕榈酸(16:0)和硬脂酸(18:0)增加关联的饱和脂肪酸(sfa)水平的增加；由油酸(18:1n-9)的含量引起的单不饱和脂肪酸(mufa)水平的增加；以及n-3和n-6系列的多不饱和脂肪酸组成(pufa)的明显改变，导致n-3/n-6pufa比率的重大下降。
[0112]
在c18 pufa方面，所述部分鱼油取代导致总脂质中亚油酸(la，18:2n-6)的百分比上升，而α-亚麻酸((ala，18:3n-3)减少。然而，在所述鱼油替代型饲粮的总脂质中，n-6和n-3系列的所有长链pufa(lc-pufa,c≤20)全部减少，这包括花生四烯酸(ara，20:4n-6)、二十碳五烯酸(epa，20:5n-3)、二十二碳五烯酸(dpa，22:5n-3)和二十二碳六烯酸(dha，22:6n-3)。
[0113]
实施例1
[0114]
如下评估补充上述饲料添加剂a和b对具有高水平提炼的动物脂肪的饲粮喂养的金头海鲷的生长性能的效果。
[0115]
1.成长性能试验
[0116]
1.1.试验动物
[0117]
试验中的实验物种为金头海鲷(sparus aurata)。鱼在研究设施处存放超过6个月，在此期间，它们饲喂标准商业饲料。
[0118]
1.2.研究条件
[0119]
试验开始时，将一式三组40尾平均初始体重(ibw)为84.7
±
3.8g的金头海鲷分派到18个圆形水箱(容积：1000l)中。水箱设在室外，供应开放式流动的充气海水(水流量：5.0l/min；溶解氧》6.9mg/l)，并处于冬春时期(一月至五月)期间的自然光周期条件下。水温在11.3和19.6℃之间波动(平均16.2
±
1.9℃)，平均水盐度为35.1psu。
[0120]
1.3.饲养和取样
[0121]
在112天在期间，每个重复的水箱饲喂所述六种饲粮中的一种。鱼在工作日期间每天两次(10.00和16.00点)、在周末期间每天一次(10.00点)人工饲喂至明显饱食，并最大限度注意避免饲料损失。在整个试验中，对分发的饲料进行量化。在试验开始时、在第29天、59天、92天和112天将麻醉的鱼成组称重。
[0122]
2.分析方法
[0123]
实验饲粮在分析之前被磨碎。使用以下程序进行饲粮的化学组成分析：在105℃干燥24小时后分析干物质；在550℃下燃烧12小时分析灰分；通过闪速燃烧技术继以气相色谱分离和热导率检测(leco fp428)分析粗蛋白质(n
×
6.25)；通过二氯甲烷提取(soxhlet)分析脂肪；在绝热压力罐式量热计(adiabatic bomb calorimeter)(ika)中分析总能量。
[0124]
哺乳动物脂肪和实验饲粮的脂肪酸分析是通过标准气相色谱法、例如下面的实施例2所解释的标准气相色谱法进行的。
[0125]
3.生长和养分利用的评价标准
[0126]
ibw(g)：初始平均体重。
[0127]
fbw(g)：最终平均体重。
[0128]
比生长速率，sgr(％/day)：(ln fbw
–
ln ibw)
×
100/天。
[0129]
饲料转化率，fcr：粗饲料摄入量/增重。
[0130]
饲料摄入率，fi(％bw/天)：(粗饲料摄入量/(ibw+fbw)/2/天)
×
100。
[0131]
蛋白质效率比，per：湿增重/粗蛋白摄入量。
[0132]
4.统计分析
[0133]
数据以三份复制的平均值
±
标准差表示。对数据进行单因素方差分析。在anova之前，以％表示的值进行反正弦平方根变换。以0.05概率水平检验统计显著性。所有统计检验均使用ibm spss v21软件进行。
[0134]
5.结果
[0135]
下面的表5报告了用各种实验饲粮喂养112天的海鲷的生长性能、饲料转化率和蛋白质效率比的数据。
[0136][0137]
112天的实验喂养后，pc饲粮(模拟商业的鱼油饲料)喂养的鱼的总体生长性能被认为令人满意，并且在11.3至19.6℃(平均16.2
±
1.9℃)之间波动的水温情况下饲养的金
头海鲷的正常范围内。在试验的前15天期间，平均水温为13℃(11.3至14.9℃)，这是鱼的摄食和生长非常习惯的条件。
[0138]
在所述最佳表现处理(pc)中，鱼表现出其初始体重的1.9倍的增长。所述处理之中的饲料转化率(fcr)在1.24和1.43之间变化，表明是总体上适宜的饲养实践。
[0139]
从实验数据得出的结论是：
[0140]-与100％鱼油的阳性对照(pc)相比，45％的鱼油被哺乳动物脂肪代替的阴性对照(nc)导致fbw、sgr和per显著降低而fcr增加。然而，哺乳动物脂肪的这种负面效果不能与较低的饲料摄入率直接关联。
[0141]-补充1.5g/kg添加剂a的nc饲粮(a1.5饲粮)显示出最终体重与pc相似。此外，当以比生长速率表示时，我们注意到在a1.0、a1.5和b1.0饲粮中补充添加剂导致生长速率与pc处理中发现的相似。
[0142]-与nc处理相比，在a0.5、a1.0、a1.5和b1.0饲粮中采用的添加剂补充导致fcr降低，这与在pc处理中发现的相似。相反，在a0.5、a1.0、a1.5和b1.0饲粮中采用添加剂补充导致蛋白质效率比(per)增至与pc处理中发现的相似的水平并且高于在nc处理中观察到的水平。
[0143]
实施例2
[0144]
在生长试验结束时，即112天后(见实施例1，1.3节.饲养和取样)，对补充上述饲料添加剂a和b对金头海鲷鱼片样品的脂质和脂肪酸分析的效果进行了评估。
[0145]
将从每条鱼取下的两片完整的鱼片去皮(从一式三个鱼缸每个取3条鱼，每个处理n＝9)，然后将来自各条鱼的鱼片一起切碎并分成两个子样品：一个用于确定水分含量(干重)，第二个新鲜用于脂质分析。
[0146]
将样品通过在含有0.01％丁基羟基甲苯(bht)的氯仿/甲醇(2:1，v/v)中均质化来提取总脂质，并在氮气流下蒸发溶剂、然后真空干燥过夜后以重量法来定量。总脂质在-20℃下在氯仿/甲醇(2:1,10mg ml-1
)中储存，直到最终分析。
[0147]
从总脂质中通过用2ml的1％ h2so4甲醇溶液加上1ml甲苯进行酸催化酯交换来制备脂肪酸甲酯(fame)，然后提取fame并进行纯化。通过气-液色谱(fisons gc8600，carlo erba，意大利米兰)，使用30m
×
0.32mm毛细管柱(cp wax 52cb，chrompak，英国伦敦)，利用50℃下的柱上进样和250℃下的火焰电离检测，对fame进行分离和定量。使用氢气作为载气(2.0ml min-1
恒定流量)，进样为柱上进样，温度程序为以40℃ min-1
从50℃到180℃、然后以2℃ min-1
到225℃。单个脂肪酸通过与良好表征的鱼油和公知的标准(supelco)进行比较来鉴定，并通过对在甲基转移之前添加的内标21:0脂肪酸的反应系数来定量。
[0148]
结果如下表6所示。
[0149]
表6.鱼片脂质和脂肪酸(fa)组成
[0150]
[0151][0152]
从表6可以看出，哺乳动物脂肪部分取代鱼油导致鱼片中脂肪沉积显著增加(毫克脂肪/克鱼片干重)，这种情况被饲料添加剂a和b抵消(也参见图1)。
[0153]
被测饲料添加剂a(饲粮a1.0和a1.5)和b以不反映饲粮的脂肪酸组成的方式显著影响鱼片脂肪酸组成(表6)。在sfa水平(很少不受鱼饲料或添加剂补充的影响)上观察到了一些意想不到的结果，但主要影响涉及n-3和n-6pufa组成。
[0154]
这两种添加剂当添加到阴性对照(nc)饲料中时，都明显改变了鱼片中脂质的pufa组成。总之，所述添加剂能够抵包含消哺乳动物脂肪的效果，并使鱼片的脂肪分布与饲喂含有100％鱼油的阳性对照(pc)饲料的鱼近似。特别是，在本发明的nc饲料中用哺乳动物脂肪部分代替鱼油导致与pc处理相比，总脂质中的c18 pufa、即la和ala二者的水平显著增加，而总脂质中的lc-pufa、包括ara、epa、dpa和dha显著降低。然而，用饲料添加剂a和b补充nc，通过降低饲喂这些饲粮的鱼的鱼片总脂质中的la和ala水平并且增加了总脂质中ara、epa、dpa和dha的水平，从而部分逆转了这些效果。此外，对饲料添加剂a观察到明显的剂量反应，在较高的剂量下效果更明显。结果如表6所示(也参见图2)。
[0155]
还值得注意的是，从鱼类和消费者的健康角度来看，饲料添加剂a和b以积极的方式影响鱼片脂质中n-3和n-6之间的平衡。具体地说，与饲喂nc饲料的鱼的鱼片相比，饲喂补充了所述添加剂的饲料的鱼的鱼片脂肪的总n-3pufa的水平提高并且总n-6pufa下降，因此n-3/n-6pufa比率更高。正如对单个pufa所观察到的那样，用添加剂a和b来补充鱼油减少的鱼饲料允许使鱼片脂质中n-3和n-6pufa之间的平衡更接近于在pc处理中发现的平衡(参见表6，图3)。
[0156]
实施例3
[0157]
进行了类似的测定，但用以下添加剂：
[0158]
表2
[0159][0160]
重量％是相对于添加剂的总量。
[0161]
*出现在原材料说明书中的平均值。
[0162]
结果与实施例1和实施例2中得到的结果相似。
[0163]
出于完整性的原因，在以下编号的条款中阐述本发明的各个方面：
[0164]
条款1.一种组合，所述组合包含类辣椒素、胡椒碱和姜辣素、以及任选的选自肉桂醛、类姜黄素及其混合物的化合物
[0165]
条款2.根据条款1所述的组合，其中所述类辣椒素选自辣椒素、二氢辣椒素、去甲二氢辣椒素、高辣椒素、高二氢辣椒素、壬酸香草酰胺及其混合物，并且其中所述类姜黄素选自姜黄素、去甲氧基姜黄素和双去甲氧基姜黄素及其混合物。
[0166]
条款3.根据条款1或2所述的组合，其中所述类辣椒素是辣椒素。
[0167]
条款4.一种用于水生动物的动物饲料添加剂，其包含如条款1至3中任一项限定的组合和至少一种饲料可接受的赋形剂。
[0168]
条款5.根据条款4所述的用于水生动物的动物饲料添加剂，其包含：
[0169]-0.1重量％至1.0重量％的类辣椒素，
[0170]-0.025重量％至0.25重量％的胡椒碱，
[0171]-0.002重量％至0.05重量％的姜辣素，
[0172]-0重量％至3.0重量％的肉桂醛，和
[0173]-0重量％至3.0重量％的类姜黄素，
[0174]
其中重量百分比是相对于动物饲料添加剂的总重量。
[0175]
条款6.根据条款5所述的用于水生动物的动物饲料添加剂，其包含类辣椒素、胡椒碱、姜辣素和肉桂醛，其中相对于动物饲料添加剂的总重量，类辣椒素的量为0.25重量％至1.0重量％，胡椒碱的量为0.025重量％至0.25重量％，姜辣素的量为0.002重量％至0.04重量％，以及肉桂醛的量为0.5重量％至3.0重量％。
[0176]
条款7.根据条款5所述的用于水生动物的动物饲料添加剂，其包含类辣椒素、胡椒碱、姜辣素和类姜黄素，其中相对于动物饲料添加剂的总重量，类辣椒素的量为0.1重量％至0.5重量％，胡椒碱的量为0.04重量％至0.2重量％，姜辣素的量为0.01重量％至0.05重量％，以及类姜黄素的量为0.5重量％至3.0重量％。
[0177]
条款8.根据条款4至7中任一项所述的用于水生动物的动物饲料添加剂，其是脂肪包衣的包囊形式。
[0178]
条款9.一种水产养殖饲料，其包含：a)包含鱼油的用于水生动物的动物饲料组合物和b)有效量的如条款4至8中限定的用于水生动物的动物饲料添加剂。
[0179]
条款10.根据条款9所述的水产养殖饲料，其中相对于水产养殖饲料总重量，所述用于水生动物的动物饲料添加剂的量为0.025重量％至0.30重量％，例如0.15重量％。
[0180]
条款11.根据条款9或10所述的水产养殖饲料，其包含添加的油的量为3重量％至30重量％，其中所述添加的油包含鱼油、以及动物脂肪、植物油、或其二者。
[0181]
条款12.根据条款11所述的水产养殖饲料，其中鱼油总量的至多90重量％,，例如5重量％至90重量％、或15重量％至75重量％、或25重量％至60重量％，被相同重量的陆地动物脂肪、植物油或其二者代替。
[0182]
条款13.如条款4至8中限定的用于水生动物的动物饲料添加剂或条款9至12的水产养殖饲料，其中所述水生动物是鱼，特别是海鱼。
[0183]
条款14.如条款1至3中限定的组合、如条款4至8中限定的用于水生动物的动物饲料添加剂或如条款9至12中限定的水产养殖饲料在增加水生动物的总脂质中的ω3长链多不饱和脂肪酸的量、增加水生动物的脂质中ω3/ω6多不饱和脂肪酸的比率、或其二者中的用途。
[0184]
条款15.根据条款12所述的用途，其中所述水生动物是鱼，特别是海鱼。

技术特征：
1.一种用于水生动物的动物饲料添加剂，所述添加剂包含：包含类辣椒素、胡椒碱、姜辣素和选自肉桂醛、类姜黄素及其混合物的化合物的组合；以及至少一种饲料可接受的赋形剂。2.根据权利要求1所述的用于水生动物的动物饲料添加剂，其包括：-类辣椒素的量为0.1重量％至1.0重量％，-胡椒碱的量为0.025重量％至0.25重量％，-姜辣素的量为0.002重量％至0.05重量％，以及-肉桂醛的量为0.5重量％至3.0重量％，和-类姜黄素的量为0重量％至3.0重量％，或者-肉桂醛的量为0重量％至3.0重量％，和-类姜黄素的量为0.5重量％至3.0重量％，其中重量百分比是相对于动物饲料添加剂的总重量。3.根据权利要求1所述的用于水生动物的动物饲料添加剂，其中所述类辣椒素选自辣椒素、二氢辣椒素、去甲二氢辣椒素、高辣椒素、高二氢辣椒素、壬酸香草酰胺及其混合物，并且其中所述类姜黄素选自姜黄素、去甲氧基姜黄素和双去甲氧基姜黄素及其混合物。4.根据权利要求1至3所述的用于水生动物的动物饲料添加剂，其中所述类辣椒素的量为0.2重量％至0.7重量％；所述胡椒碱的量为0.1重量％至0.2重量％；以及所述姜辣素的量为0.01重量％至0.04重量％。5.根据权利要求1至3中任一项所述的用于水生动物的动物饲料添加剂，其包含类辣椒素、胡椒碱、姜辣素和肉桂醛，其中相对于动物饲料添加剂的总重量，所述类辣椒素的量为0.25重量％至1.0重量％，所述胡椒碱的量为0.025重量％至0.25重量％，所述姜辣素的量为0.002重量％至0.04重量％，以及所述肉桂醛的量为0.5重量％至3.0重量％，并且所述类姜黄素的量为0重量％。6.根据权利要求1至3中任一项所述的用于水生动物的动物饲料添加剂，其包含类辣椒素、胡椒碱、姜辣素和类姜黄素，其中相对于动物饲料添加剂的总重量，所述类辣椒素的量为0.1重量％至0.5重量％，所述胡椒碱的量为0.04重量％至0.2重量％，所述姜辣素的量为0.01重量％至0.05重量％，以及所述类姜黄素的量为0.5重量％至3.0重量％，并且所述肉桂醛的量为0重量％。7.根据权利要求1至6所述的用于水生动物的动物饲料添加剂，其中：-类辣椒素以辣椒油树脂的形式提供；-胡椒碱以黑胡椒油树脂的形式提供；-姜辣素以姜油树脂的形式提供，并且-类姜黄素如果存在的话以姜黄油树脂的形式提供。8.根据权利要求1至7中任一项所述的用于水生动物的动物饲料添加剂，其是以脂肪包衣的包囊形式。9.根据权利要求1至8中任一项所述的用于水生动物的动物饲料添加剂，其中所述水生动物是鱼，特别是海鱼。
10.一种水产养殖饲料，其包含：a)包含鱼油的用于水生动物的动物饲料组合物和b)有效量的根据权利要求1至8中限定的用于水生动物的动物饲料添加剂。11.根据权利要求10所述的水产养殖饲料，其中相对于水产养殖饲料总重量，所述用于水生动物的动物饲料添加剂的量为0.025重量％至0.30重量％，例如0.15重量％。12.根据权利要求10或11所述的水产养殖饲料，其包含添加的油的量为3重量％至30重量％，其中所述添加的油包含鱼油、以及动物脂肪、植物油、或其二者，并且其中相对于水产养殖饲料总重量，所述水产养殖饲料中鱼油的量为1重量％至25重量％。13.根据权利要求12所述的水产养殖饲料，其中鱼油总量的至多90重量％,，例如5重量％至90重量％、或15重量％至75重量％、或25重量％至60重量％，被相同重量的陆地动物脂肪、植物油或其二者代替。14.根据权利要求1至9中限定的用于水生动物的动物饲料添加剂或如权利要求10至13中限定的水产养殖饲料的用途，所述用途即在用包含所述组合或所述动物饲料添加剂的饲粮喂养的水生动物中，与用没有所述组合或所述动物饲料添加剂的相同饲粮喂养的水生动物中的总脂质中ω3长链多不饱和脂肪酸的量、总脂质中ω3/ω6长链多不饱和脂肪酸的比率、或其二者相比，增加总脂质中ω3长链多不饱和脂肪酸的量、或增加总脂质中ω3/ω6多不饱和脂肪酸的比率。15.包含类辣椒素、胡椒碱、姜辣素和选自肉桂醛、类姜黄素及其混合物的化合物的组合的用途，所述用途即在用包含所述组合或所述动物饲料添加剂的饲粮喂养的水生动物中，与用没有所述组合或所述动物饲料添加剂的相同饲粮喂养的水生动物中的总脂质中ω3长链多不饱和脂肪酸的量、总脂质中ω3/ω6长链多不饱和脂肪酸的比率、或其二者相比，增加总脂质中ω3长链多不饱和脂肪酸的量、或增加总脂质中ω3/ω6多不饱和脂肪酸的比率。

技术总结
提供了用于水生动物的动物饲料添加剂，所述添加剂包含含有类辣椒素、胡椒碱、姜辣素和选自肉桂醛、类姜黄素及其混合物的化合物的组合，以及至少一种饲料可接受的赋形剂。还提供所述组合、包含所述组合的用于水生动物的动物饲料添加剂或水产养殖饲料在水生动物中增加总脂质中的长链ω3多不饱和脂肪酸的量、增加总脂质中ω3/ω6多不饱和脂肪酸的比率、或其二者中的用途。二者中的用途。


技术研发人员：S
受保护的技术使用者：卢斯塔公司
技术研发日：2021.12.03
技术公布日：2023/8/5