一种用HPLC法测定2，4-二氯氟苯及中间体色谱纯度的方法与流程

一种用hplc法测定2，4-二氯氟苯及中间体色谱纯度的方法
技术领域
1.本发明涉及医药化工技术领域，尤其涉及一种用hplc法测定2，4-二氯氟苯及中间体色谱纯度的方法。


背景技术：

2.2，4-二氯氟苯，其结构式如下：
[0003][0004]
其合成路线为：
[0005][0006]
邻二氯苯为此合成路线的原料，3,4-二氯硝基苯和3-氯-4-氟硝基苯为中间体。
[0007]
2,4-二氯氟苯是合成新型抗菌剂氟喹诺酮类药物的重要中间体。主要用于合成环丙氟哌酸和甲氟哌酸等。是用于制抗精神病特效药三氟哌啶醇、三氟哌丁苯、喹诺酮类药物-环丙沙星等产品的主要原材料。
[0008]
为了控制药品的质量，保证用药的安全需要开发出一种有效检测2,4-二氯氟苯的方法。2,4-二氯氟苯化合物具有两个氯原子和一个氟原子，化合物偏中性，2,4-二氯氟苯的原料和中间体也有类似的结构，在现有常用的反相色谱系统中，不利于组分分离。
[0009]
现有2,4-二氯氟苯色谱纯度检测多为气相色谱方法，操作效率较低，检测结果误差较大，无法实现3,4-二氯硝基苯和3-氯-4-氟硝基苯与2,4-二氯氟苯的有效分离，分离后检测误差较大。
[0010]
以十八烷基硅烷键合相作为固定相的反相色谱系统，虽cn201610140543.2公开用于苏沃雷生的分离检测中，但该苏沃雷生结构复杂，且所用a相为酸性性溶剂与有机溶剂的混合物，混合后的酸性a相易导致2,4-二氯氟苯化合物及其中间体变形，导致检测结果误差过大，无法直接用于2，4-二氯氟苯及其中间体的分离、检测中。


技术实现要素：

[0011]
本发明的提供一种用hplc法测定2，4-二氯氟苯及中间体色谱纯度的方法。
[0012]
本发明的方案是：
[0013]
一种用hplc法测定2，4-二氯氟苯及中间体色谱纯度的方法，采用十八烷基硅烷键合相作为固定相的色谱柱；流动相a相为纯化水；流动相b相为乙腈；采用梯度洗脱程序；采用检测器对2，4-二氯氟苯及中间体进行检测；
[0014]
所述中间体为3,4-二氯硝基苯与3-氯-4-氟硝基苯。
[0015]
作为优选的技术方案，所述色谱柱为poroshell 120ec-c18。
[0016]
作为优选的技术方案，所述检测器为dad检测器，检测波长210nm；
[0017]
色谱柱为30℃；
[0018]
流速为1.0ml/min。
[0019]
作为优选的技术方案，检测供试品溶液的进样量为10μl。
[0020]
作为优选的技术方案，所述供试品溶液为取供试品25mg，精密称定，置于100ml容量瓶中，用乙腈溶解并稀释至刻度，摇匀得到。
[0021]
本发明方法采用梯度洗脱程序进行的，其中梯度洗脱程序如下表1所示。
[0022]
表1
[0023][0024]
由于采用了上述技术方案，一种用hplc法测定2，4-二氯氟苯及中间体色谱纯度的方法，采用十八烷基硅烷键合相作为固定相的色谱柱；流动相a相为纯化水；流动相b相为乙腈；采用梯度洗脱程序；采用检测器对2，4-二氯氟苯及中间体进行检测；所述中间体为3,4-二氯硝基苯与3-氯-4-氟硝基苯。
[0025]
本发明的优点：
[0026]
本发明能够有效测定2,4-二氯氟苯色谱纯度，能同时检出原料邻二氯苯、中间体3,4-二氯硝基苯和3-氯-4-氟硝基苯，具有分离度好，操作方便，运行时间短的优点。
[0027]
本技术提供方法，采用该梯度程序进行洗脱，能有效实现增加2,4-二氯氟苯在b相中的溶解，实现2,4-二氯氟苯与其他中间体物质的有效分离。
[0028]
本技术提供方法，采用该柱温，能有效增大中间体物质在洗脱液中溶解量，从而实现二者的有效分离。
附图说明
[0029]
图1为2,4-二氯氟苯供试品溶液的高效液相色谱图；
[0030]
图2为邻二氯苯、3,4-二氯硝基苯、3-氯-4-氟硝基苯与2,4-二氯氟苯混合溶液的高效液相色谱图。
具体实施方式
[0031]
本发明提供了一种用hplc法测定2，4-二氯氟苯及中间体色谱纯度的方法以解决上述背景技术中的问题。
[0032]
为了使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。
[0033]
本发明所使用的试剂均可以从市场上购得或者可以通过本发明所描述的方法制备而得。
[0034]
实施例1：
[0035]
色谱系统：美国agilent 1100型高效液相色谱系统及工作站；
[0036]
色谱柱：poroshell 120ec-c18，4.6
×
100mm，4μm；
[0037]
检测器：dad检测器，检测波长210nm；
[0038]
色谱柱温：30℃；
[0039]
流速：1.0ml/min；
[0040]
供试品溶液进样体积为10μl；
[0041]
流动相a为纯化水，流动相b为乙腈；
[0042]
实验步骤：
[0043]
供试品溶液：精密称取供试品25mg，置100ml容量瓶中，用乙腈溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。
[0044]
梯度洗脱程序：
[0045][0046]
在实施例1色谱条件下进样检测，结果如图1、2所示，其中图1中2,4-二氯氟苯保留时9.309min，2,4-二氯氟苯在实施例1条件下峰型优良，可准确测定2，4-二氯氟苯的色谱纯度。图2中邻二氯苯、3,4-二氯硝基苯和3-氯-4-氟硝基苯均能分开获得特征峰，证明本发明方法可同时用于邻二氯苯、3,4-二氯硝基苯和3-氯-4-氟硝基苯的色谱纯度测定。
[0047]
对比例1
[0048]
与实施例1的区别在于采用现有常用方法进行2,4-二氯氟苯的检测及其上述中间体的分离。
[0049]
现有常用方法：
[0050]
色谱柱：shim-park clc-ods，150
×
6mm；
[0051]
检测器：dad检测器，检测波长254nm；
[0052]
色谱柱温：30℃；
[0053]
流速：1.0ml/min；
[0054]
供试品溶液进样体积为2μl；
[0055]
流动相:甲醇：水＝90:10；
[0056]
运行时间：30min。
[0057]
实验步骤：
[0058]
供试品溶液：精密称取供试品50mg，置20ml容量瓶中，用乙腈溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。
[0059]
本发明中方法整体所需检测时间为15min，远低于现有技术中常用检测方法。
[0060]
以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征及本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界。

技术特征：
1.一种用hplc法测定2，4-二氯氟苯及中间体色谱纯度的方法，其特征在于：采用十八烷基硅烷键合相作为固定相的色谱柱；流动相a相为纯化水；流动相b相为乙腈；采用梯度洗脱程序；采用检测器对2，4-二氯氟苯及中间体进行检测；所述梯度洗脱程序为：0min时，流动相a比例为70％；9min时，流动相a比例为20％；12min时，流动相a比例为20％；12.1min时，流动相a比例为70％；15min时，流动相a比例为70％；所述中间体为3,4-二氯硝基苯与3-氯-4-氟硝基苯。2.如权利要求1所述的一种用hplc法测定2，4-二氯氟苯及中间体色谱纯度的方法，其特征在于：所述色谱柱为poroshell120ec-c18。3.如权利要求1或2任一所述一种用hplc法测定2，4-二氯氟苯及中间体色谱纯度的方法，其特征在于：所述检测器为dad检测器，检测波长210nm
；
色谱柱为30℃；流速为1.0ml/min。4.如权利要求1所述的一种用hplc法测定2，4-二氯氟苯及中间体色谱纯度的方法，其特征在于：检测供试品溶液的进样量为10μl。5.如权利要求5所述的一种用hplc法测定2，4-二氯氟苯及中间体色谱纯度的方法，其特征在于：所述供试品溶液为取供试品25mg，精密称定，置于100ml容量瓶中，用乙腈溶解并稀释至刻度，摇匀得到。

技术总结
本发明公开了一种用HPLC法测定2，4-二氯氟苯及中间体色谱纯度的方法，采用十八烷基硅烷键合相作为固定相的色谱柱；流动相A相为纯化水；流动相B相为乙腈；采用梯度洗脱程序；采用检测器对2，4-二氯氟苯及中间体进行检测；所述中间体为3,4-二氯硝基苯与3-氯-4-氟硝基苯；本发明能够有效测定2,4-二氯氟苯色谱纯度，能同时检出原料邻二氯苯、中间体3,4-二氯硝基苯与3-氯-4-氟硝基苯，具有分离度好，操作方便，运行时间短的优点。运行时间短的优点。运行时间短的优点。


技术研发人员：李一明 马航 詹一谷 王文龙 田强 字慧敏 张桂菊 刘敬卫
受保护的技术使用者：云南云天化股份有限公司
技术研发日：2023.06.27
技术公布日：2023/8/5