一种靶向成纤维细胞和黑素细胞的美白纳米组合物及其制备方法和应用与流程

1.本发明属于化妆品技术领域，具体涉及一种靶向成纤维细胞和黑素细胞的美白纳米组合物及其制备方法和应用。


背景技术：

2.黑素细胞主要分布在皮肤表皮基底层，镶嵌于表皮基底细胞之间，是产生黑色素的神经嵴衍生细胞。黑色素的合成、分泌、转移、脱落对决定皮肤颜色起到尤为重要的作用。当黑素细胞受紫外线刺激时发生活化，促进黑色素的合成、转运，致使皮肤颜色变黑。研究发现，参与黑色素形成的关键酶主要包括酪氨酸酶(tyr)、dhica氧化酶(trp-1)以及多巴色素异构酶(trp-2)，主要有3条信号通路参与调控，分别是环磷酸腺苷依赖的信号通路(camp信号通路)、蛋白质wnt介导激发的信号通路(wnt信号通路)以及丝裂原活化蛋白激酶信号通路(mapk信号通路)，其中小眼畸形相关转录因子(mitf)是各个通路的重要靶标。
3.位于真皮层的成纤维细胞是疏松结缔组织的主要细胞成分，由间充质细胞分化而来。既合成和分泌胶原蛋白、弹性蛋白，生成胶原纤维、网状纤维和弹性纤维，也合成和分泌糖胺聚糖和糖蛋白等基质成分。成纤维细胞与黑素细胞在皮肤色素沉着过程中存在紧密联系。基质细胞衍生因子-1(sdf-1)是成纤维细胞和黑素细胞交流的关键蛋白，使酪氨酸酶处于受控状态。随着年龄的增长，衰老成纤维细胞中sdf-1减少，引起黑色素过度分泌。另一方面，年龄增长的同时蛋白酶体活性降低，蛋白酶体是蛋白酶解的主要降解途径。其活性降低将引起蛋白质和脂质残留物形成不能降解的脂褐质，使皮肤黯淡出现色斑。通过对黑色素、脂褐素等相关物质产生的关键酶活性、信号通路、作用因子等多方面调控，有望成为皮肤美白的新方向。同时，众所周知，紫外线、污染等外因及激素、炎症水平等内因也会共同作用于皮肤，通过不同机制及途径影响黑素细胞功能从而改变皮肤色度。
4.但从市场美白产品成分可以看出，现阶段大部分产品主要通过抑制、阻断或影响黑色素生成以及转移等达到相应效果，部分产品采用促进黑色素代谢及从角质层脱离达到美白效果。总的来说，当前美白产品作用靶点有限，作用机制单一，最终导致美白作用效果并不理想。


技术实现要素：

5.本发明的目的在于提供一种靶向成纤维细胞和黑素细胞的美白纳米组合物及其制备方法和应用。本发明提供的美白纳米组合物能同时靶向作用黑素细胞和成纤维细胞，从抑制黑色素生成路径(mitf)、调控sdf-1通路、降低黑色素生成相关酶活性、阻止黑色素转移、激活蛋白酶体活性、减少氧化炎症损伤以及uv刺激，美白效果显著。
6.为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
7.本发明提供了一种靶向成纤维细胞和黑素细胞的美白纳米组合物，按质量百分含量计，包括：1～10％二葡糖基棓酸、1～10％光果甘草根提取物、1～10％油橄榄叶提取物、1
～10％伸长海条藻提取物、1～10％油脂、1～20％乳化剂、1～30％助乳化剂和余量的水；
8.所述油脂包括辛酸/癸酸甘油三酯、棕榈酸甘油三酯、棕榈酸异丙酯、甘油三(乙基己酸)酯、肉豆蔻酸异丙酯、椰油酸乙基己酯、棕榈酸乙基己酯中的一种或多种；
9.所述乳化剂包括葡糖苷类、聚甘油类、聚山梨酯类、聚氧乙烯氢化蓖麻油类和磷脂类中的一种或多种；
10.所述助乳化剂包括二乙醇二硬脂酸、乙氧基二甘醇、双丙甘醇、甘油、丁二醇、山梨(糖)醇、异丙醇、1,2-己二醇、1,2-戊二醇和1,3-丙二醇中的一种或多种。
11.优选的，所述葡糖苷类包括辛基葡糖苷、椰油基葡糖苷和花生醇葡糖苷中的一种或多种；
12.所述聚甘油类包括聚甘油-10油酸酯、聚甘油-10肉豆蔻酸酯、聚甘油-10二异硬脂酸酯、聚甘油-4油酸酯和聚甘油-6聚蓖麻醇酸酯中的一种或多种；
13.所述聚山梨酯类包括聚山梨酯-20、聚山梨酯-40、聚山梨酯-60和聚山梨酯-80中的一种或多种；
14.所述聚氧乙烯氢化蓖麻油类包括peg-40氢化蓖麻油、peg-60氢化蓖麻油和peg-80氢化蓖麻油中的一种或多种；
15.所述磷脂类包括氢化卵磷脂、卵磷脂和大豆卵磷脂中的一种或多种。
16.优选的，所述油脂包括辛酸/癸酸甘油三酯、甘油三(乙基己酸)酯和椰油酸乙基己酯中的一种或多种。
17.优选的，所述乳化剂包括辛基葡糖苷、聚甘油-10油酸酯、聚甘油-10肉豆蔻酸酯和卵磷脂中的一种或多种。
18.优选的，所述助乳化剂包括甘油、1,2-己二醇、1,2-戊二醇和1,3-丙二醇中的一种或多种。
19.优选的，所述靶向成纤维细胞和黑素细胞的美白纳米组合物的粒径为10～500nm。
20.本发明提供了上述技术方案所述的靶向成纤维细胞和黑素细胞的美白纳米组合物的制备方法，包括以下步骤：
21.将光果甘草根提取物、油脂和乳化剂混合，得到油相；
22.将二葡糖基棓酸、油橄榄叶提取物、伸长海条藻提取物、助乳化剂和水混合，得到水相；
23.将所述油相与所述水相混合乳化后进行微米化处理，得到微米级分散体；
24.将所述微米级分散体进行纳米化处理，得到所述的靶向成纤维细胞和黑素细胞的美白纳米组合物。
25.优选的，所述微米化处理为剪切混合，所述剪切混合的转速为4000～30000rpm，时间为1～20min。
26.优选的，所述纳米化处理为高压均质处理或高压微射流处理；
27.所述高压均质处理的压力为300～1600bar，温度为20～70℃，循环次数为1～10次；
28.所述高压微射流处理的压力为3000～16000psi，温度为20～70℃，循环次数为1～10次。
29.本发明提供了上述技术方案所述的靶向成纤维细胞和黑素细胞的美白纳米组合
物或上述技术方案所述的制备方法制备得到的靶向成纤维细胞和黑素细胞的美白纳米组合物在制备美白化妆品中的应用。
30.本发明提供了一种靶向成纤维细胞和黑素细胞的美白纳米组合物，按质量百分含量计，包括：1～10％二葡糖基棓酸、1～10％光果甘草根提取物、1～10％油橄榄叶提取物、1～10％伸长海条藻提取物、1～10％油脂、1～20％乳化剂、1～30％助乳化剂和余量的水；所述油脂包括辛酸/癸酸甘油三酯、棕榈酸甘油三酯、棕榈酸异丙酯、甘油三(乙基己酸)酯、肉豆蔻酸异丙酯、椰油酸乙基己酯、棕榈酸乙基己酯中的一种或多种；所述乳化剂包括葡糖苷类、聚甘油类、聚山梨酯类、聚氧乙烯氢化蓖麻油类和磷脂类中的一种或多种；所述助乳化剂包括二乙醇二硬脂酸、乙氧基二甘醇、双丙甘醇、甘油、丁二醇、山梨(糖)醇、异丙醇、1,2-己二醇、1,2-戊二醇和1,3-丙二醇中的一种或多种。本发明综合考虑多种美白机制，采用二葡糖基棓酸、光果甘草根提取物、油橄榄叶提取物和伸长海条藻提取物配伍，实现多效多靶点功效成分协同增效，具体为：二葡糖基棓酸可通过抑制活性氧簇ros产生，防止脂褐素在皮肤的生成；作用于黑素细胞，通过抑制酪氨酸酶的活性，有效阻止黑色素合成；通过wnt信号途径，抑制黑色素产生的关键基因mitf表达；同时可阻止毛孔内的皮脂氧化，修护毛孔粗大现象；抑制uv导致dna损伤，修护皮肤暗红现象；抑制炎症因子il-1的产生，修护皮肤炎症现象；光果甘草根提取物不仅对酪氨酸酶活性有明显抑制作用，还可作用于多巴色素互变酶(trp-2)、dhica氧化酶和α-msh促黑激素；另外光果甘草根提取物还具有抑制炎症及活性氧生成作用；伸长海条藻产生的海藻多酚可以激活色素沉着障碍的关键靶点—sdf-1的表达，实现成纤维母细胞对黑色素细胞的调控；油橄榄叶提取物具有抗炎作用，改善炎症引起的红血丝、炎症后色素沉着；帮助提升皮肤自身清除氧自由基的能力，保护皮肤细胞不受紫外线的伤害。本发明提供上述四种美白功效组分的配伍，能有效靶向作用黑素细胞和成纤维细胞，抑制黑色素生成路径(mitf)、调控sdf-1通路、降低黑色素生成相关酶活性、阻止黑色素转移、激活蛋白酶体活性、减少氧化炎症损伤以及uv刺激，形成一种多功效美白纳米组合物。另一方面：本发明采用上述油脂、乳化剂和助乳化剂对四种功效成分进行纳米化包裹递送。基于上述油脂、乳化剂和助乳化剂形成的纳米载体结构以及特性，本发明经过纳米化包裹得到的组合物，具有良好的稳定性和水分散性，增大了多组分美白功效成分的溶解度，同时也改善了功效成分的刺激性，使得功效成分在产品中可以达到足够的浓度从而发挥相应的功能效果。在有效提高各功效成分溶解性的同时为其提供稳定储存空间，避免功效成分存储与使用前发生非必要降解或失活，有利于提高美白产品中功效物质浓度。更重要的，本发明充分利用了纳米载体的经皮渗透特性，生物相容性，控释缓释特性等优点。本发明提供的纳米组合物能促进上述四种功效成分高效透过皮肤屏障，能迅速到达黑色素细胞分布的基底层以及位于皮肤深处的真皮层。美白纳米组合物皮肤渗透性和滞留性能良好，能在靶组织高浓度富集，长时间滞留，缓释控释，有效被靶细胞摄取，提高功效成分的生物利用度，增强美白效果，延长作用时间。
附图说明
31.图1为细胞安全性评价结果；
32.图2为鸡胚刺激评价结果；
33.图3为皮肤累积透过量和皮肤储留量结果；
34.图4为激光共聚焦显微镜观察皮肤渗透结果；
35.图5为激光共聚焦观察b16f10细胞摄取行为结果；
36.图6为流式细胞术检测细胞摄取结果；
37.图7为黑素细胞酪氨酸酶活性的测定结果；
38.图8为黑素细胞黑素含量的测定结果；
39.图9为3d皮肤模型相关测定结果；
40.图10为使用美白纳米组合物精华液前后变化对比结果；
41.图11为使用美白纳米组合物精华液前后变化结果。
具体实施方式
42.本发明提供了一种靶向成纤维细胞和黑素细胞的美白纳米组合物，按质量百分含量计，包括：1～10％二葡糖基棓酸、1～10％光果甘草根提取物、1～10％油橄榄叶提取物、1～10％伸长海条藻提取物、1～10％油脂、1～20％乳化剂、1～30％助乳化剂和余量的水；
43.所述油脂包括辛酸/癸酸甘油三酯、棕榈酸甘油三酯、棕榈酸异丙酯、甘油三(乙基己酸)酯、肉豆蔻酸异丙酯、椰油酸乙基己酯、棕榈酸乙基己酯中的一种或多种；
44.所述乳化剂包括葡糖苷类、聚甘油类、聚山梨酯类、聚氧乙烯氢化蓖麻油类和磷脂类中的一种或多种；
45.所述助乳化剂包括二乙醇二硬脂酸、乙氧基二甘醇、双丙甘醇、甘油、丁二醇、山梨(糖)醇、异丙醇、1,2-己二醇、1,2-戊二醇和1,3-丙二醇中的一种或多种。
46.在本发明中，若无特殊说明，所有制备原料/组分均为本领域技术人员熟知的市售产品。
47.以质量百分含量计，本发明提供的靶向成纤维细胞和黑素细胞的美白纳米组合物包括1～10％二葡糖基棓酸，优选为1～5％。
48.在本发明中，二葡糖基棓酸可通过抑制活性氧簇ros产生，防止脂褐素在皮肤的生成；作用于黑素细胞，通过抑制酪氨酸酶的活性，有效阻止黑色素合成；通过wnt信号途径，抑制黑色素产生的关键基因mitf表达。同时可阻止毛孔内的皮脂氧化，修护毛孔粗大现象；抑制uv导致dna损伤，修护皮肤暗红现象；抑制炎症因子il-1的产生，修护皮肤炎症现象。二葡糖基棓酸还可抑制黑素小体从黑素细胞的树突向角质层转运，阻止皮肤黑化现象。
49.以质量百分含量计，本发明提供的靶向成纤维细胞和黑素细胞的美白纳米组合物包括1～10％光果甘草根提取物，优选为1～5％。
50.在本发明中，光果甘草根提取物是从光果甘草中提取的黄酮类物质，主要活性物为光甘草定。其不仅对酪氨酸酶活性有明显抑制作用，还可作用于多巴色素互变酶(trp-2)、dhica氧化酶和α-msh促黑激素。另外光果甘草根提取物还具有抑制炎症及活性氧生成作用，有实验数据表明光果甘草根提取物的美白效果比维生素c高出232倍。
51.以质量百分含量计，本发明提供的靶向成纤维细胞和黑素细胞的美白纳米组合物包括1～10％油橄榄叶提取物，优选为1～5％。
52.在本发明中，油橄榄叶提取物富含生物多酚、黄酮等活性分子，主要的活性成分是橄榄苦甙和羟基酪醇，可以刺激巨噬细胞活性，降低致炎因子表达，具有抗炎作用，改善炎症引起的红血丝、炎症后色素沉着。橄榄苦苷可以帮助提升皮肤自身清除氧自由基的能力，
保护皮肤细胞不受紫外线的伤害。羟基酪醇是强力的抗氧化剂之一，抗氧化能力高于辅酶q10。另一方面，油橄榄叶提取物还可以激活蛋白酶体活性，从而减少色沉面积，减少脂褐素和年龄斑点。
53.以质量百分含量计，本发明提供的靶向成纤维细胞和黑素细胞的美白纳米组合物包括1～10％伸长海条藻提取物，优选为1～5％。
54.在本发明中，伸长海条藻产生的海藻多酚可以激活色素沉着障碍的关键靶点—sdf-1的表达，实现成纤维母细胞对黑色素细胞的调控。试验显示，其能使白种人志愿者黑斑中的黑色素含量显著降低(一个月内下降12.6％，效果是安慰剂的两倍)，亚洲人皮肤上可见斑点的数量显著减少(一个月内减少156％)，而非洲人皮肤上色素沉着斑的黑色素含量显著下降(2个月内下降327％)。
55.虽然科学选择搭配不同美白机制，同时从数个靶点途径起效，可有效提高整体美白效果。但是多靶点起效也意味着需要采用多种不同的功效成分组合，或搭配具有多功能的不同成分，在此过程中要避免成分相互干扰或反应，才能够增加整体美白作用效果。本发明创造性的采用二葡糖基棓酸、光果甘草根提取物、油橄榄叶提取物和伸长海条藻提取物四种美白功效组分协同配伍，实现了组分间的协同增效，能够实现多功效美白，从而增强美白效果。
56.本发明采用二葡糖基棓酸、光果甘草根提取物、油橄榄叶提取物和伸长海条藻提取物四种美白功效组分协同配伍，四种美白功效组分的质量百分含量不能过高也不能过低，当所述美白纳米组合物中功效成分含量过低时，其美白效果不显著；随功效成分含量增高，美白效果增加，但功效成分含量超过一定值时，会引起美白纳米组合物粒径大小显著增加，不利于产品长期稳定。
57.以质量百分含量计，本发明提供的靶向成纤维细胞和黑素细胞的美白纳米组合物包括1～10％油脂，优选为1～8％。
58.在本发明中，所述油脂包括辛酸/癸酸甘油三酯、棕榈酸甘油三酯、棕榈酸异丙酯、甘油三(乙基己酸)酯、肉豆蔻酸异丙酯、椰油酸乙基己酯、棕榈酸乙基己酯中的一种或多种；更优选包括辛酸/癸酸甘油三酯、甘油三(乙基己酸)酯和椰油酸乙基己酯中的一种或多种。
59.以质量百分含量计，本发明提供的靶向成纤维细胞和黑素细胞的美白纳米组合物包括1～20％乳化剂，优选为5～20％。
60.在本发明中，所述乳化剂包括葡糖苷类、聚甘油类、聚山梨酯类、聚氧乙烯氢化蓖麻油类和磷脂类中的一种或多种。
61.在本发明中，所述葡糖苷类优选包括辛基葡糖苷、椰油基葡糖苷和花生醇葡糖苷中的一种或多种。
62.在本发明中，所述聚甘油类优选包括聚甘油-10油酸酯、聚甘油-10肉豆蔻酸酯、聚甘油-10二异硬脂酸酯、聚甘油-4油酸酯和聚甘油-6聚蓖麻醇酸酯中的一种或多种。
63.在本发明中，所述聚山梨酯类优选包括聚山梨酯-20、聚山梨酯-40、聚山梨酯-60和聚山梨酯-80中的一种或多种。
64.在本发明中，所述聚氧乙烯氢化蓖麻油类优选包括peg-40氢化蓖麻油、peg-60氢化蓖麻油和peg-80氢化蓖麻油中的一种或多种。
65.在本发明中，所述磷脂类优选包括氢化卵磷脂、卵磷脂和大豆卵磷脂中的一种或多种。
66.在本发明中，所述乳化剂优选包括辛基葡糖苷、聚甘油-10油酸酯、聚甘油-10肉豆蔻酸酯和卵磷脂中的一种或多种。
67.以质量百分含量计，本发明提供的靶向成纤维细胞和黑素细胞的美白纳米组合物包括1～30％助乳化剂，优选为5～20％。
68.在本发明中，所述助乳化剂包括二乙醇二硬脂酸、乙氧基二甘醇、双丙甘醇、甘油、丁二醇、山梨(糖)醇、异丙醇、1,2-己二醇、1,2-戊二醇和1,3-丙二醇中的一种或多种；更优选包括甘油、1,2-己二醇、1,2-戊二醇和1,3-丙二醇中的一种或多种。
69.本发明采用上述限定的油脂、乳化剂、助乳化剂种类与质量百分含量与本发明中四种美白功效组分配伍，能够形成纳米载体包裹结构，制备的美白纳米组合物粒径更小、大小均一、稳定性高。
70.以质量百分含量计，本发明提供的靶向成纤维细胞和黑素细胞的美白纳米组合物包括余量的水。
71.在本发明中，所述水优选为蒸馏水或纯化水。
72.在本发明中，所述靶向成纤维细胞和黑素细胞的美白纳米组合物的粒径优选为10～500nm，更优选为10～200nm。本发明提供的美白纳米组合物的粒径优选为10～200nm范围内时，美白纳米组合物稳定性更高。
73.本发明采用多中美白功效成分组合，由于各种功效成分的分子量大小、亲疏水性、溶解性等存在差异，使其难以在目标浓度下，在同一分散体系中长时间保持充分溶解、分散状态；会导致多种功效成分在体系中易发生析出、分层及沉淀等不稳定现象，将直接影响产品的使用。另外，对于部分功效成分，其化学结构易解离显酸性或碱性，或发生变性失活，在应用时，这些物质可能引起皮肤刺激甚至过敏反应。本发明采用二葡糖基棓酸、光果甘草根提取物、油橄榄叶提取物和伸长海条藻提取物四种美白功效组分协同配伍，同时采用上述限定的油脂、乳化剂、助乳化剂种类与质量百分含量与四种美白功效组分配伍，得到的美白组合物具有良好的稳定性和水分散性，增大了功效成分的溶解度，同时也改善了功效成分的刺激性，使得功效成分在产品中可以达到足够的浓度从而发挥相应的功能效果。在有效提高各功效成分溶解性的同时为其提供稳定储存空间，避免功效成分存储与使用前发生非必要降解或失活。
74.同时，本发明充分考虑了由于皮肤屏障的存在，以及多功效成分的理化性质例如分子量，溶解度，油水分配系数等不同，会导致成分透过皮肤屏障进入靶部位的效果存在显著差异，甚至部分成分无法有效透过屏障。本发明将美白纳米组合物的粒径优选为10～500nm，通过上述限定的油脂、乳化剂、助乳化剂种类与质量百分含量形成美白功效组分的纳米载体，充分利用纳米载体的经皮渗透特性，生物相容性，控释缓释特性等优点，形成的纳米组合物能促进上述四种功效成分高效透过皮肤屏障，能迅速到达黑色素细胞分布的基底层以及位于皮肤深处的真皮层。美白纳米组合物皮肤渗透性和滞留性能良好，能在靶组织高浓度富集，长时间滞留，缓释控释，有效被靶细胞摄取，提高功效成分的生物利用度，增强美白效果，延长作用时间。
75.本发明提供了上述技术方案所述的靶向成纤维细胞和黑素细胞的美白纳米组合
物的制备方法，包括以下步骤：
76.将光果甘草根提取物、油脂和乳化剂混合，得到油相；
77.将二葡糖基棓酸、油橄榄叶提取物、伸长海条藻提取物、助乳化剂和水混合，得到水相；
78.将所述油相与所述水相混合乳化后进行微米化处理，得到微米级分散体；
79.将所述微米级分散体进行纳米化处理，得到所述的靶向成纤维细胞和黑素细胞的美白纳米组合物。
80.本发明将光果甘草根提取物、油脂和乳化剂混合(以下称为第一混合)，得到油相。在本发明中，所述第一混合的温度优选为40～50℃，更优选为50℃。在本发明中，所述第一混合优选在水浴加热条件下进行。
81.本发明将二葡糖基棓酸、油橄榄叶提取物、伸长海条藻提取物、助乳化剂和水混合(以下称为第二混合)，得到水相。在本发明中，所述第二混合的温度优选为40～50℃，更优选为50℃。在本发明中，所述第二混合优选在水浴加热条件下进行。
82.得到水相和油相后，本发明将所述油相与所述水相混合乳化后进行微米化处理，得到微米级分散体。在本发明中，所述水相和油相的混合优选为：将所述水相滴加至所述油相中，所述滴加的速度优选为8滴/秒。在本发明中，所述混合乳化在搅拌的条件下进行，所述混合乳化的转速优选为500～600rpm，所述混合乳化的温度优选为40～50℃。
83.在本发明中，所述微米化处理优选为剪切混合，所述剪切混合的转速优选为4000～30000rpm，更优选为10000～30000rpm；时间优选为1～20min，更优选为3～15min。所述微米化处理的温度优选为40～50℃。
84.得到微米级分散体后，本发明将所述微米级分散体进行纳米化处理，得到所述的靶向成纤维细胞和黑素细胞的美白纳米组合物。
85.在本发明中，所述纳米化处理优选为高压均质处理或高压微射流处理。在本发明中，所述高压均质处理的压力优选为300～1600bar，更优选为800～1400bar；温度优选为20～70℃，更优选为30～50℃；循环次数为1～10次，更优选为3～8次。在本发明中，所述高压微射流处理的压力优选为3000～16000psi，更优选为8000～14000psi；温度优选为20～70℃，更优选为30～50℃；循环次数优选为1～10次，更优选为2～8次。
86.本发明通过上述制备方法将上述四种功效成分共同包裹于纳米载体中，包载后依然保持成分结构的完整性和生物活性，同时提高功效成分光、热稳定性，改善难溶活性成分的溶解性和水分散性，降低部分活性成分刺激性，能够有效促进高含量的功效成分高效透过皮肤屏障，能迅速到达黑色素细胞分布的基底层以及位于皮肤深处的真皮层，长时间滞留，缓释控释，有效被靶细胞摄取，提高功效成分的生物利用度，增强美白效果，延长作用时间。
87.本发明提供了上述技术方案所述的靶向成纤维细胞和黑素细胞的美白纳米组合物或上述技术方案所述的制备方法制备得到的靶向成纤维细胞和黑素细胞的美白纳米组合物在制备美白化妆品中的应用。
88.在本发明中，所述美白化妆品的形式包括但不限于爽肤水、膏霜、乳液、精华和凝胶。本发明所述美白纳米组合物易溶于水，使用方便。本发明所述美白纳米组合物在美白化妆品中添加的质量百分含量优选为0.1～30％，更优选为1～30％。
89.为了进一步说明本发明，下面结合实施例对本发明提供的技术方案进行详细地描述，但不能将它们理解为对本发明保护范围的限定。
90.实施例1
91.按质量百分比计，将2％光果甘草根提取物、3％辛酸/癸酸甘油三酯、3％甘油三(乙基己酸)酯、5％辛基葡糖苷、5％聚甘油-10油酸酯混合，50℃水浴加热溶解，得到油相；
92.将2％二葡糖基棓酸、2％油橄榄叶提取物、2％伸长海条藻提取物、10％1,2-戊二醇、10％1,2-己二醇加到余量纯化水中，50℃水浴加热溶解，得到水相；
93.将水相以8滴/秒的速度滴加至油相中并在50℃、600rpm的转速下不断搅拌，混合均匀后在10000rpm的转速下高速剪切处理3min，得到微米级分散体；
94.将微米级分散体在温度为50℃，压力为800bar的条件下进行高压均质处理，循环4次，冷却至室温，得到美白纳米组合物。
95.实施例2～12
96.实施例2～12配方如表1所示，余量为纯化水，制备方法与实施例1相同，区别在于配方中物质种类或含量发生变化。
97.实施例13
98.配方与实施例1相同，区别在于，按照实施例1步骤获得微米级分散体后，在压力为8000psi，温度为50℃的条件下进行高压微射流处理，循环2次，冷却至室温，得到美白纳米组合物。
99.实施例14
100.配方与实施例1相同，区别在于，按照实施例1步骤获得微米级分散体后，在压力为500bar，温度为50℃的条件下进行高压均质处理，循环2次，冷却至室温，得到美白纳米组合物。
101.实施例15
102.配方与实施例1相同，区别在于，按照实施例1步骤获得微米级分散体后，在压力为800bar，温度为50℃的条件下进行高压均质处理，循环2次，冷却至室温，得到美白纳米组合物。
103.表1实施例1～15组成
104.105.[0106][0107]
对比例1
[0108]
配方如表2所示，余量为纯化水，制备方法与实施例1相同，区别在油脂剂种类为环甲氧基硅氧烷和异壬酸异壬酯。
[0109]
对比例2
[0110]
配方如表2所示，余量为纯化水，制备方法与实施例1相同，区别在乳化剂种类为吐温80和司盘80。
[0111]
对比例3
[0112]
配方如表2所示，余量为纯化水，制备方法与实施例1相同，区别在助乳化剂种类为正丁醇。
[0113]
对比例4～7
[0114]
配方如表2所示，余量为纯化水，制备方法与实施例1相同，区别在于配方中功效成分种类含量发生变化。
[0115]
对比例8
[0116]
配方如表2所示，余量为纯化水，将全部功效成分、油脂、助乳化剂与10％二甲基亚砜加入到纯化水中，50℃超声助溶，得到游离美白组合物。
[0117]
对比例9
[0118]
制备方法与实施例1相同，区别在于配方中功效成分仅为2％油橄榄叶提取物，得到含2％油橄榄叶提取物的单包纳米载体。
[0119]
对比例10
[0120]
制备方法与实施例1相同，区别在于配方中功效成分为2％光果甘草根提取物、2％二葡糖基棓酸及2％伸长海条藻提取物原料，得到含2％光果甘草根提取物、2％二葡糖基棓酸和2％伸长海条藻提取物的纳米组合物。
[0121]
表2对比例1～10组成
[0122]
[0123][0124]
应用例1
[0125]
制备人体功效测试样品
[0126]
将2.0％甘油、0.3％卡波姆，0.1％黄原胶、苯氧乙醇0.5％、和97.2％纯化水于室温下搅拌溶解，得到空白精华液。并按下表准备各组测试样品。
[0127]
表3测试精华制备方式
[0128]
对照组1空白精华对照组2空白精华液+5％对比例4所得样品对照组3空白精华液+5％对比例5所得样品对照组4空白精华液+5％对比例6所得样品对照组5空白精华液+5％对比例7所得样品对照组6空白精华液+5％对比例8所得样品样品组空白精华液+5％实施例1所得样品
[0129]
测试例1
[0130]
存储稳定性
[0131]
将实施例1～15以及对比例1～3制备得到的美白纳米组合物置于密闭容器中，分别在常温、4℃、45℃、条件下各放置3个月，并进行冻融实验，检查样品在贮存前后各条件下的外观，测试纳米组合物在贮存前后各条件下的粒径，综合评价纳米组合物的稳定性。
[0132]
冻融实验：将样品置于密闭容器中，于-20℃放置48小时后置于45℃放置48小时，循环两次，观察样品变化。
[0133]
纳米组合物的粒径与zeta电位均采用zetasizernano-zs90纳米粒度电位仪检测，取适量纳米组合物，用超纯水稀释50倍，使样液的平均光强为200～300，激光粒度仪粒径测定角度为90
°
，测试温度为25℃。
[0134]
测试结果见表4。
[0135]
表4稳定性结果
[0136]
[0137]
[0138][0139]
由表4中数据可以看出，按照本发明所述的功效物、油脂、乳化剂、助乳化剂种类及含量条件下制备的不同美白纳米组合物外观均一，在室温、4℃、45℃下存储3个月后无分层、析出等不稳定现象，粒径分布范围为20～500nm，zeta电位为-5～-50mv。按更优选条件下配方制备的美白纳米组合物(实施例1、3、4、8)粒径更小，均小于100nm，在应用时更具有优势，其zeta电位在-15～-35mv范围内，有利于纳米组合物的长期稳定。实施例13为高压微射流处理获得的纳米组合物，其粒径稳定性均相比于同配方高压均质处理的纳米组合物无明显差别。高压均质压力与均质次数的调整会影响纳米组合物性质(实施例1、14、15)，在800bar条件下处理4次后获得纳米组合物粒径最优(实施例1)。替换本发明所述的油脂、乳化剂、助乳化剂种类会导致纳米组合物稳定性降低，对比例1在45℃存储3个月后出现明显浮油，对比例2无法形成稳定纳米组合物，对比例3对低温稳定性极差，易发生析出。
[0140]
测试例2
[0141]
离心稳定性
[0142]
化妆品用纳米载体制品的离心稳定性暂无行业标准，因此在化妆品行业原料离心稳定性实验规定的基础上，选择以3000、5000、8000、10000r/min，30min的标准对实施例1、3、4、8、13进行纳米载体离心加速实验，实验结果见表5。
[0143]
表5美白纳米组合物离心稳定性
[0144][0145]
由表5结果可知，在3000、5000、8000、10000r/min的转速下离心30min，上述实施例美白纳米组合物外观仍均一、澄清透明，无浑浊、分层、析出现象，说明美白纳米组合物具有良好的离心稳定性。
[0146]
测试例3
[0147]
包封率及载药量测定
[0148]
实施例1美白纳米组合物稀释后离心，测定游离光甘草定的含量wf，同时样品破乳后离心测定上清中光甘草定的含量w
t
。按公式1计算美白纳米组合物的载药量(drugloadingefficiency，dle)，按公式2计算美白纳米组合物的包封率(encapsulationefficiency，ee)。
[0149][0150][0151]wt
：总光甘草定质量，wf：游离光甘草定质量，w
l
代表纳米载体质量。
[0152]
经hplc检测，美白纳米组合物中光甘草定的包封率为88.7
±
0.6％，载药量为1.77
±
0.12％。
[0153]
测试例4
[0154]
细胞安全性评价
[0155]
以hacat细胞(人角质细胞)存活率为指标，测试不同浓度实施例1所述美白纳米组合物和对比例8所述游离美白组合物的细胞安全性，对照组为完全培养基。
[0156]
不同浓度的美白纳米组合物、游离美白组合物对hacat细胞安全性评价结果见图1(注：与相同浓度游离组合物相比，**p《0.01)。图1实验结果表明，美白纳米组合物浓度为400、800、1600μg/ml时，游离成分组细胞活性较游离成分组显著增高，载体的浓度在100～800μg/ml范围内，美白纳米组合物对hacat细胞无毒性，结果说明，纳米组合物能对美白功效成分有减毒作用。
[0157]
测试例5
[0158]
鸡胚尿囊膜刺激性评价
[0159]
将实施例1-15所述美白纳米组合物稀释，滴加在绒毛尿囊膜表面，观察血管变化并记录数据，计算刺激分值is。
[0160]
本发明实施例1～15最终结果相似，实施例2美白纳米组合物的刺激性评价结果见图2。当稀释10倍后的美白纳米组合物与鸡胚尿囊膜接触300s后，毛细血管无出血、无血管融解、凝血现象，反应积分为0.7，说明稀释10倍后的美白纳米组合物的安全性较好，无刺激性。
[0161]
测试例6
[0162]
斑贴试验
[0163]
选择30例受试者，将10％实施例1～15所述美白纳米组合物和空白对照均贴于受试者的前臂曲侧持续24h，待压痕消失后观察皮肤反应。
[0164]
结果显示，30例受试者均未出现淡红斑、红斑、水肿性红斑、显著红肿、浸润或丘疹和伴丘疹或疱等，说明此次试验中的美白纳米组合物对人体皮肤无刺激性。
[0165]
测试例7
[0166]
累积透过量和皮肤滞留量测定
[0167]
采用franz扩散池法进行离体猪皮的透皮实验，分析计算不同时间应用例1中样品组10％美白纳米组合物精华液和对照组6所述10％游离美白组合物精华液中功效成分的单位面积累积透过量合单位面积皮肤储留量。按公式3计算不同取样时间功效成分的皮肤累计透过量。
[0168][0169]
其中，qn为药物累积透过量，cn为第n次测得的药物浓度，ci为第i个点所测得的药
物浓度，v0为扩散池的体积即加入释放介质的量，vi为每次取样量。单位面积累计渗透量q＝qn/s，其中s为扩散池的面积2.27cm2。
[0170]
计算试样中光果甘草根提取物主活性物光甘草定的单位面积皮肤累积透过量和皮肤储留量，结果见图3(注：游离组合物相比，**p《0.01)。游离组合物精华液、纳米组合物精华液中光甘草定的24h单位面积皮肤累积透过量分别为1.88μg/cm2和8.42μg/cm2，皮肤储留量分别为13.29μg/cm2和55.47μg/cm2。与游离组合物精华液比较，纳米组合物精华液中光甘草定的单位面积皮肤累积透过量提高了347.87％，皮肤储留量提高了317.38％，说明活性成分经纳米载体包裹后能有效促进功效成分的透皮吸收和在皮肤中的储留量，提高其皮肤生物利用率。
[0171]
测试例8
[0172]
激光共聚焦显微镜观察皮肤渗透行为
[0173]
本测试实验装置同上述透皮实验装置，将罗丹明b(rhodamine b，rhob)标记的应用例1中样品组10％美白纳米组合物精华液和对照组6所述10％游离美白组合物精华液试验后样品冷冻切片，通过激光共聚焦显微镜观察。
[0174]
激光共聚焦显微镜观察不同时间点游离rhob、rhob纳米载体的皮肤组织渗透行为见图4。可以看出，随着时间的延长，皮肤的荧光渗透深度增加。结果表明，在相同时间内，rhob标记美白纳米组合物精华液在皮肤中荧光强度明显强于游离美白组合物精华液，美白纳米组合物精华液可渗透进入皮肤深层组织。纳米载体能够促进包载成分快速渗透皮肤。
[0175]
测试例9
[0176]
(1)激光共聚焦显微镜观察细胞摄取行为
[0177]
将添加量为0.1％的异硫氰酸荧光素(fitc)代替美白功效成分，按照表1、2中实施例1和对比例8配方制备fitc标记纳米载体以及游离fitc。分别对b16f10细胞处理后染色，使用激光共聚焦显微镜观察。
[0178]
激光共聚焦显微镜观察b16f10细胞对纳米载体摄取行为，结果见图5，图5中的游离fitc、fitc载体分别对应对比例8、实施例1。孵育4h时，b16f10细胞中游离fitc组荧光强度微弱，而fitc纳米载体荧光已进入细胞中，荧光强度明显强于游离fitc。实验结果表明，与游离fitc比较，fitc纳米载体能够更多的被b16f10细胞摄取，将包载的活性物有效递送进入皮肤靶细胞发挥作用。
[0179]
(2)流式细胞仪检测细胞摄取行为
[0180]
b16f10细胞经游离fitc、fitc纳米载体处理后用流式细胞仪检测细胞内荧光强度。
[0181]
流式细胞仪检测b16f10细胞对纳米载体摄取行为结果见图6(注：与游离相比，**p《0.01)。由图6可知，对于b16f10细胞孵育2h和4h后，与游离fitc相比，纳米载体样品平均荧光强度分别提高了175.40％和111.63％。实验结果表明纳米载体可以显著提升b16f10细胞对其包载物的细胞摄取和细胞内蓄积。
[0182]
测试例10
[0183]
细胞内酪氨酸酶活性测定
[0184]
采用l-dopa氧化法测定细胞内酪氨酸酶的活性。取处于对数生长期的b16f10细胞，以5.0
×
104个/孔的密度接种于24孔板，培养24h后，将细胞分为对照组、模型组和实验
组，每组设3个复孔。对照组仅加dmem完全培养基，模型组仅加含有100nmol/lα-msh的dmem完全培养基，实验组加入含有100nmol/lα-msh和均稀释2000倍的对比例8、对比例9、对比例10和实施例1所制备组合物的dmem完全培养基。继续培养48h后，每孔添加200μl含有1％(v％)tritonx-100的细胞裂解液，-80℃冷冻裂解30min，收集细胞裂解液离心，取100μl上清液于96孔板，并加入100μl 0.1％(w/v)l-多巴溶液，37℃孵育2h，用酶标仪于495nm波长下测量各孔的吸光度(a)。图7为黑素细胞酪氨酸酶活性的测定结果，注：与模型组相比，
**
p《0.01；与对比例8相比，
##
p《0.01；与对比例10相比，
&&
p《0.01。
[0185]
由图7可知，与模型组相比，对比例8、对比例9、对比例10与实施例1均能显著降低酪氨酸酶活性。与对比例8相比，实施例1对b16f10细胞酪氨酸酶活性降低效果更显著(p《0.01)。与对比例9相比，实施例1对b16f10细胞酪氨酸酶活性降低效果更显著(p《0.01)。与对比例10相比，实施例1对b16f10细胞酪氨酸酶活性降低效果更显著(p《0.01)。结果表明，只加油橄榄叶提取物的单包纳米载体(对比例9)酪氨酸酶活性抑制率为17％，加光果甘草根提取物、二葡糖基棓酸及伸长海条藻提取物3种原料的纳米组合物(对比例10)酪氨酸酶活性抑制率为28％，加光果甘草根提取物、二葡糖基棓酸、伸长海条藻提取物及油橄榄叶提取物4种原料的纳米组合物(实施例1)酪氨酸酶活性抑制率为66％，实施例1酪氨酸酶抑制率高于对比例9和对比例10酪氨酸酶抑制率的总和。与对比例9相比，实施例1酪氨酸酶活性抑制率提升了288％，与对比例10相比，实施例1酪氨酸酶活性抑制率提升了136％。加了4种原料的游离组合物(对比例8)酪氨酸酶活性抑制率为22％，与对比例8相比，实施例1酪氨酸酶活性抑制率提升了187％。证明油橄榄叶提取物与光果甘草根提取物、二葡糖基棓酸及伸长海条藻提取物原料复配能够促进美白功效成分作用效果提升，且经包裹后的纳米组合物的美白功效比游离成分大大增强。
[0186]
测试例11
[0187]
细胞黑素含量的测定及生成情况观察
[0188]
采用naoh裂解法测定细胞内黑色素的含量。取处于对数生长期的b16f10细胞，以5.0
×
104个/孔的密度接种于24孔板，培养24h后，将细胞分为对照组、模型组和实验组，每组设3个复孔。对照组仅加dmem完全培养基，模型组仅加含有100nmol/lα-msh的dmem完全培养基，实验组加入含有100nmol/lα-msh和和均稀释2000倍的对比例8、对比例9、对比例10和实施例1所制备组合物的dmem完全培养基。继续培养48h后，将每孔细胞分别收集于离心管，向每个离心管加入200μl含10％dmso的1mol/l naoh溶液，然后将ep管置于80℃恒温水浴锅加热1h，裂解细胞，溶解黑色素，离心，取上清于96孔板，用酶标仪于405nm波长下测量各孔的吸光度(a)。图8黑素细胞黑素含量的测定结果，注：与模型组相比，
**
p《0.01；与对比例8相比，
##
p《0.01；与对比例10相比，
&&
p《0.01。
[0189]
由图8可知，与模型组相比，对比例8、对比例9、对比例10与实施例1均能显著降低胞内黑素含量。与对比例8相比，实施例1对b16f10细胞胞内黑素含量降低效果更显著(p《0.01)。与对比例9相比，实施例1对b16f10细胞胞内黑素含量降低效果更显著(p《0.01)。与对比例10相比，实施例1对b16f10细胞胞内黑素含量降低效果更显著(p《0.01)。图8结果表明，只加油橄榄叶提取物的单包纳米载体(对比例9)胞内黑素含量抑制率为13％，加光果甘草根提取物、二葡糖基棓酸及伸长海条藻提取物3种原料的纳米组合物(对比例10)胞内黑素含量抑制率为22％，加光果甘草根提取物、二葡糖基棓酸、伸长海条藻提取物及油橄榄叶
提取物4种原料的实施例1胞内黑素含量抑制率为59％，实施例1胞内黑素含量抑制率高于对比例9和对比例10胞内黑素含量抑制率的总和。与对比例9相比，实施例1胞内黑素含量抑制率提升了353％，与对比例10相比，实施例1胞内黑素含量抑制率提升了168％。加了4种原料的游离组合物(对比例8)胞内黑素含量抑制率为19％，与对比例8相比，实施例1胞内黑素含量抑制率提升了211％。证明油橄榄叶提取物与光果甘草根提取物、二葡糖基棓酸及伸长海条藻提取物原料复配能够促进美白功效成分作用效果提升，且经包裹后的纳米组合物的美白功效比游离成分大大增强。
[0190]
测试例12
[0191]
3d皮肤黑素模型的美白功效评价
[0192]
利用3d黑素皮肤模型测定阴性对照(nc)、阳性对照(pc，曲酸500μg/ml)及样品组(实施例1所述美白纳米组合物，含量为100μg/ml；)对3d皮肤黑素模型的表观色度、表观亮度(l*值)及黑素含量。结果见图9。
[0193]
图9中的(a)显示，与空白组相比，各组经uvb辐照处理后表观色度明显变黑，与阴性对照组相比，经美白纳米组合物处理后，皮肤模型的表观色度明显变白，且美白效果优于高剂量的曲酸(pc 500μg/ml)。
[0194]
图9中的(b)显示，与空白组相比，各组经uvb辐照处理后表观亮度显著降低p《0.01)，与阴性对照组相比，经美白纳米组合物处理后，皮肤模型的表观亮度显著升高(p《0.01)，效果优于高剂量的曲酸(pc 500μg/ml)。图9中的(c)显示，与空白组相比，各组经uvb辐照处理后黑素含量显上升(p《0.01)，与阴性对照组相比，经美白纳米组合物处理后，皮肤模型的黑素含量显著降低(p《0.01)。
[0195]
测试例13
[0196]
人体功效评价
[0197]
召集35名实验志愿者，年龄在20～55岁、身体健康、无皮肤性疾病、非妊娠或者哺乳期、对产品成分无过敏。在告知评价流程、可能的效果、风险、注意事项与签署功效评价知情同意书后进行应用例1中不同试样的功效评价测试。于面部每日两次定时规范使用试样，测试中途不得使用其它可能对皮肤状态产生影响的产品或药物，真实准确记录与反馈使用后皮肤状态与感受。施用试样四周后观察比较志愿者各疗效指标。采用上海肤焕智能皮肤分析系统和德国ck皮肤黑素测试仪mx18测定面部皮肤ita角；皮肤光泽度(l值)；黑色与色斑总面积；黑色与色斑mi值，计算使用样品后各指标参数变化并取均值。
[0198]
表6志愿者使用样品前后面部皮肤ita
°
和l*值变化
[0199][0200][0201]
表7志愿者使用样品前后皮肤黑素和色斑mi和总面积变化
[0202][0203]
皮肤肤色及均匀度指标测定原理：通过vplus设备检测皮肤表层结构上的反射光，能够用l*a*b色度系统与ita
°
综合评价皮肤色度的变化，ita
°
值越大肤色越浅。其中，l*值越大表明皮肤越白；a*值越大表明皮肤越红；b*值越大表明皮肤越黄。ita
°
计算按照公式4：
[0204][0205]
黑色素与色斑指标测定原理：基于光谱吸收的原理(rgb)，通过vplus设备测定特定波长光线在皮肤上的反射率，测得皮肤中黑色素的吸光度，从该值计算出黑素指数(mi)，该值越小，表示皮肤黑素含量越低，反之皮肤黑素含量越高。
[0206]
部分志愿者使用5％美白纳米组合物精华液28天前后面部状态由vplus设备采集，见图10、图11。图10中的(a)为面部色素与色斑对比；图10中的(b)为面部肤色对比；图11中的(a)为面部色素与色斑对比；图11中的(b)为面部肤色对比。如表6、7所示，志愿者使用对照组1空白精华液四周后测得ita
°
值增加0.27％，皮肤l*值增加0.19％；mi值减少1.65％，
黑素色斑面积减少0.99％，上述指标均无明显变化，说明空白精华液对皮肤肤色及均匀度、黑素与色斑情况无改善作用。与之相比较，含有美白功效物的对照组2-6及样品组在使用四周后皮肤ita
°
和l*值改善明显；mi值和黑素色斑总面积显著减少。其中，对照组2-5分别含有单一种类美白功效物，当4种功效物组合使用时，具有同样功效物浓度的对照组6作用效果获得显著提升。使用对照组6后ita
°
值增加7.08％，l*值增加5.27％，mi值减少15.85％，黑素色斑总面积减少13.26％。以上结果说明了美白组合物中四种功效成分搭配的科学性，不同美白机制搭配同时作用获得了优异美白效果。最后，基于纳米载体递送技术获得的样品组美白纳米组合物精华液使用后ita
°
值增加10.47％，l*值增加7.47％，mi值减少17.60％，黑素色斑总面积减少20.04％，其改善皮肤肤色及均匀度、黑素与色斑效果进一步提升。
[0207]
由上可知，本发明提供的美白纳米组合物具有优异的稳定性，在高功效成分含量情况下，纳米组合物在常温、4℃、45℃等储存条件下放置3个月后粒径未发生显著性变化，外观未出现析出、分层等现象，粒径在10～200nm之间，满足实际应用需求。美白纳米组合物安全性好，无皮肤刺激性。经纳米载体包裹后能有效促进四种美白成分的透皮吸收和在皮肤中的储留量，渗透进入皮肤深层组织起效，黑素细胞对美白纳米组合物摄取量显著提高。美白纳米组合物可显著降低b16f10细胞酪氨酸酶活性以及抑制黑色素生成，效果优于同剂量游离成分，具有显著清除ros自由基的作用。经人体美白测试结果表明，使用5％美白纳米组合物精华28天后，在使用样品后黑素与色斑数量与平均面积减少、肤色均匀度与光泽度明显提高，具有优异美白效果。
[0208]
尽管上述实施例对本发明做出了详尽的描述，但它仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部实施例，还可以根据本实施例在不经创造性前提下获得其他实施例，这些实施例都属于本发明保护范围。

技术特征：
1.一种靶向成纤维细胞和黑素细胞的美白纳米组合物，其特征在于，按质量百分含量计，包括：1～10％二葡糖基棓酸、1～10％光果甘草根提取物、1～10％油橄榄叶提取物、1～10％伸长海条藻提取物、1～10％油脂、1～20％乳化剂、1～30％助乳化剂和余量的水；所述油脂包括辛酸/癸酸甘油三酯、棕榈酸甘油三酯、棕榈酸异丙酯、甘油三(乙基己酸)酯、肉豆蔻酸异丙酯、椰油酸乙基己酯、棕榈酸乙基己酯中的一种或多种；所述乳化剂包括葡糖苷类、聚甘油类、聚山梨酯类、聚氧乙烯氢化蓖麻油类和磷脂类中的一种或多种；所述助乳化剂包括二乙醇二硬脂酸、乙氧基二甘醇、双丙甘醇、甘油、丁二醇、山梨(糖)醇、异丙醇、1,2-己二醇、1,2-戊二醇和1,3-丙二醇中的一种或多种。2.根据权利要求1所述的靶向成纤维细胞和黑素细胞的美白纳米组合物，其特征在于，所述葡糖苷类包括辛基葡糖苷、椰油基葡糖苷和花生醇葡糖苷中的一种或多种；所述聚甘油类包括聚甘油-10油酸酯、聚甘油-10肉豆蔻酸酯、聚甘油-10二异硬脂酸酯、聚甘油-4油酸酯和聚甘油-6聚蓖麻醇酸酯中的一种或多种；所述聚山梨酯类包括聚山梨酯-20、聚山梨酯-40、聚山梨酯-60和聚山梨酯-80中的一种或多种；所述聚氧乙烯氢化蓖麻油类包括peg-40氢化蓖麻油、peg-60氢化蓖麻油和peg-80氢化蓖麻油中的一种或多种；所述磷脂类包括氢化卵磷脂、卵磷脂和大豆卵磷脂中的一种或多种。3.根据权利要求1所述的靶向成纤维细胞和黑素细胞的美白纳米组合物，其特征在于，所述油脂包括辛酸/癸酸甘油三酯、甘油三(乙基己酸)酯和椰油酸乙基己酯中的一种或多种。4.根据权利要求2所述的靶向成纤维细胞和黑素细胞的美白纳米组合物，其特征在于，所述乳化剂包括辛基葡糖苷、聚甘油-10油酸酯、聚甘油-10肉豆蔻酸酯和卵磷脂中的一种或多种。5.根据权利要求1所述的靶向成纤维细胞和黑素细胞的美白纳米组合物，其特征在于，所述助乳化剂包括甘油、1,2-己二醇、1,2-戊二醇和1,3-丙二醇中的一种或多种。6.根据权利要求1所述的靶向成纤维细胞和黑素细胞的美白纳米组合物，其特征在于，所述靶向成纤维细胞和黑素细胞的美白纳米组合物的粒径为10～500nm。7.权利要求1～6任一项所述的靶向成纤维细胞和黑素细胞的美白纳米组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将光果甘草根提取物、油脂和乳化剂混合，得到油相；将二葡糖基棓酸、油橄榄叶提取物、伸长海条藻提取物、助乳化剂和水混合，得到水相；将所述油相与所述水相混合乳化后进行微米化处理，得到微米级分散体；将所述微米级分散体进行纳米化处理，得到所述的靶向成纤维细胞和黑素细胞的美白纳米组合物。8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述微米化处理为剪切混合，所述剪切混合的转速为4000～30000rpm，时间为1～20min。9.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述纳米化处理为高压均质处理或高压微射流处理；
所述高压均质处理的压力为300～1600bar，温度为20～70℃，循环次数为1～10次；所述高压微射流处理的压力为3000～16000psi，温度为20～70℃，循环次数为1～10次。10.权利要求1～6任一项所述的靶向成纤维细胞和黑素细胞的美白纳米组合物或权利要求7～9任一项所述的制备方法制备得到的靶向成纤维细胞和黑素细胞的美白纳米组合物在制备美白化妆品中的应用。

技术总结
本发明属于化妆品技术领域，具体涉及一种靶向成纤维细胞和黑素细胞的美白纳米组合物及其制备方法和应用。本发明提供了一种靶向成纤维细胞和黑素细胞的美白纳米组合物，包括二葡糖基棓酸、光果甘草根提取物、油橄榄叶提取物、伸长海条藻提取物、油脂、乳化剂、助乳化剂和余量的水。本发明提供的美白纳米组合物能同时靶向作用黑素细胞和成纤维细胞，从抑制黑色素生成路径(MITF)、调控SDF-1通路、降低黑色素生成相关酶活性、阻止黑色素转移、激活蛋白酶体活性、减少氧化炎症损伤以及UV刺激；且本发明提供的纳米组合物能促进上述四种功效成分高效透过皮肤屏障，能在靶组织高浓度富集，长时间滞留，缓释控释，从而美白效果显著。从而美白效果显著。从而美白效果显著。


技术研发人员：李泽巧
受保护的技术使用者：律恩泽雅集团有限公司
技术研发日：2023.06.21
技术公布日：2023/8/5