一种药敏检测试剂盒的制作方法

1.本发明涉及微生物检测技术领域，尤其涉及一种药敏检测试剂盒。


背景技术：

2.近年来，由于抗生素的广泛使用，使得耐药菌株普遍增多，为了减少治疗的失败率和不良反应，药敏试验逐渐受到重视，为了检测药物对细菌、真菌、病毒等的药敏性，先将细菌、真菌、病毒等加入到无菌稀释液中，然后点样至药敏培养板，药敏培养板上设有多个药敏孔，填充包被不同浓度抗生素的mh琼脂，点样后培养观察细菌、真菌、病毒的生长情况，判断细菌、真菌、病毒的耐药性。
3.目前，现有的药敏检测试剂盒如专利cn201410019031.1公开的结构，其包括药敏培养基、药敏测试板、无菌稀释液、无菌吸嘴等等，这些部件单独设置，比较零散，且无菌吸嘴一次只能加样一个培养格；单个培养格依次加样耗时长，操作繁琐，大大降低了检测效率。


技术实现要素：

4.本技术为了解决现有技术中存在的问题，提供一种药敏检测试剂盒。
5.为了实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：
6.本发明公开了一种药敏检测试剂盒，包括药敏培养板、无菌加样槽、无菌加样器、无菌稀释液管和底座，在底座其中两个相对的侧面设置有第一卡槽，所述的无菌加样器卡装在底座的第一卡槽上，在底座的另外两个侧面或者另外两个侧面的其中一个侧面设置第二卡槽和第三卡槽，所述的第二卡槽用于卡装无菌加样槽，所述的第三卡槽用于卡装无菌稀释液管，所述的无菌加样器蘸取无菌加样槽中的样液在药敏培养板中点样。所述无菌加样器包括连接杆和接触杆，若干接触杆等间距平行排列于连接杆上。
7.作为优选的技术方案，所述药敏培养板包括培养盒和培养盖，培养盒有按照行列规则排布的培养格，每个培养格为圆形，填充有培养基，培养盖置于培养盒的上方，所述的第一卡槽、第二卡槽和第三卡槽设置在培养盒的侧面。
8.作为优选的技术方案，接触杆远离连接杆的一端的底面为半圆形或弧形表面，表面积小于药敏培养板中培养基的表面积，相邻两个接触杆底面中心的距离与药敏培养板中相邻的两个培养基圆心的距离相等。
9.作为优选的技术方案，所述连接杆与接触杆可以为固定连接或可拆卸连接。
10.作为优选的技术方案，所述连接杆为长方体或圆柱体。
11.作为优选的技术方案，所述连接杆的长度大于或等于接触杆排列的长度。
12.作为优选的技术方案，所述接触杆的数目与药敏培养板中培养格的行数相等。
13.作为优选的技术方案，所述接触杆为空心或实心圆柱体。
14.作为优选的技术方案，所述无菌加样器为塑料或金属材质。
15.本发明的有益效果如下：
16.本发明中的药敏检测试剂盒，包含可以组装在一起的药敏培养板、无菌加样槽、无菌加样器、无菌稀释液管和底座等，整套装置为一个整体，方便拿取；同时无菌加样器的设计可以实现按列加样，大大提高加样速度。
附图说明
17.图1是本发明整体结构示意图；
18.图2是本发明的整体结构侧视图；
19.图3(a)是本发明的无菌稀释液管的俯视图；
20.图3(b)是本发明的无菌稀释液管的侧视图；
21.图4(a)、是本发明的无菌加样器的俯视图；
22.图4(b)、是本发明的无菌加样器的主视图；
23.图4(c)是本发明的无菌加样器的侧视图；
24.图5(a)是本发明的无菌加样槽的侧视图；
25.图5(b)是本发明的无菌加样槽的俯视图；
26.图5(c)是本发明的无菌加样槽的主视图；
27.图6是本发明的底座的示意图；
28.图7(a)是本发明的药敏培养板培养盒的侧视图；
29.图7(b)是本发明的药敏培养板培养盒的俯视图；
30.图7(c)是本发明的药敏培养板培养盒的主视图；
31.图8(a)是本发明的药敏培养板培养盖的侧视图；
32.图8(b)是本发明的药敏培养板培养盖的俯视图；
33.图8(c)是本发明的药敏培养板培养盖的主视图；
34.图中：1无菌稀释液管，2无菌加样器，3无菌加样槽，4底座，5药敏培养板；2-1接触杆,2-3连接杆；4-1第三卡槽，4-2第一卡槽，4-3第二卡槽；4-4底座本体，4-5第四卡槽；5-1培养盒，5-4培养盖；
具体实施方式
35.应该指出，以下详细说明都是例示性的，旨在对本发明提供进一步的说明。除非另有指明，本发明使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属技术领域的普通技术人员通常理解的相同含义。
36.需要注意的是，这里所使用的术语仅是为了描述具体实施方式，而非意图限制根据本发明的示例性实施方式。如在这里所使用的，除非本发明另外明确指出，否则单数形式也意图包括复数形式，此外，还应当理解的是，当在本说明书中使用术语“包含”和/或“包括”时，其指明存在特征、步骤、操作、器件、组件和/或它们的组合；
37.如图1所示，本实施例公开了一种药敏检测试剂盒，包括无菌稀释液管1、无菌加样器2、无菌加样槽3、底座4和药敏培养板5；在底座4包括底座本体4-4，在底座本体4-4其中两个相对的侧面设置有第一卡槽4-2，所述的无菌加样器卡装在底座4的第一卡槽4-2上，在底座4的另外两个侧面或者另外两个侧面的其中一个侧面设置第二卡槽4-3和第三卡槽4-1，所述的第二卡槽4-3用于卡装无菌加样槽，所述的第三卡槽4-1用于卡装无菌稀释液管，所
述的无菌加样器蘸取无菌加样槽中的样液在药敏培养板中点样；第四卡槽4-5用于卡装药敏培养板5。
38.如图4所示，本实施例公开的无菌加样器2包括接触杆2-1和连接杆2-3，若干接触杆2-1等间距平行排列于连接杆2-3上，接触杆2-1远离连接杆2-3的一端的底面为半圆形或弧形表面，方便与药敏培养板接触，实现点样，且接触杆2-1远离连接杆2-3的一端的底面表面积小于药敏培养板中培养基的表面积，进一步的，相邻两个接触杆2-1底面中心的距离与药敏培养板1中相邻的两个培养基圆心的距离相等，实现位于同一列上的不同培养基的同时点样。
39.进一步的，连接杆2-3与接触杆2-1可以为固定连接、可拆卸连接或者一体成型，优选的，采用可拆卸式连接，方便更换接触杆2-1。
40.进一步的，连接杆2-3为长方体或圆柱体，连接杆2-3一方面用于连接接触杆2-1，另外一方面，连接杆2-3可以作为手持把手。
41.进一步的，连接杆2-3的长度大于或等于接触杆2-1排列的长度，优选的，大于接触杆2-1排列的长度，方便操作者拿取。
42.进一步的，接触杆2-1的数目与药敏培养板中培养格的行数相等，一次可以完成一列点样。
43.进一步的，上述的接触杆2-1为空心或实心圆柱体。
44.进一步的，无菌加样器4为塑料或金属材质。
45.本实施例公开的药敏培养板包括培养盒5-1和培养盖5-4，培养盒5-1有八行十二列共九十六个培养格，每个培养格为圆形，填充有培养基，培养盖5-4置于培养盒的上方，可以填充例如mh琼脂、脱纤维羊血和7类11种抗生素，每种抗生素的mic范围：
[0046][0047]
药敏培养板浓度梯度内容示意图单位μg/ml：
[0048]
[0049][0050]
注意图中，药敏培养板a1-a11列为检测列，第a12列为对照列。对照列中q1孔为培养板琼脂无菌质控，加入无菌稀释液；q2孔为待测菌株生长质控，加入待检菌株；q3-q8孔为药敏质控孔，加入药敏检测质控菌株(同批药敏培养板质控菌株可只做一次)。下面以弯曲菌为例，对药敏检测试剂盒，使用方法如下：
[0051]
待检菌悬液制备：用无菌棉签或者取菌环挑取生长良好的待测弯曲菌菌落3-4个，悬浮于3ml无菌稀释液中，充分混匀；
[0052]
质控菌株菌悬液制备：用无菌棉签或者取菌环挑取生长良好的质控菌株c.jejuni atcc33560菌落3-4个，悬浮于3ml无菌稀释液中，充分混匀；稀释、调节菌液的浓度：
[0053]
将待检菌悬液与质控菌悬液分别使用麦氏比浊仪测量菌液浓度达到0.5麦氏单位；
[0054]
将0.5麦氏单位的菌悬液用无菌稀释液进行10倍稀释(取100ul的0.5麦氏单位的菌液加到900ul的生理盐水中，充分混匀)，以多点接种器吸取制备好的菌液(约1-2μl)接种于琼脂平板表面，每点菌数约为104cfu；
[0055]
点样培养：
[0056]
将稀释好的待检菌液倒入无菌加样槽，用无菌加样器蘸取104cfu/ml适量菌液点加到药敏培养板检测列(1-11列)每个孔以及质控孔q2中的琼脂上；用无菌加样器蘸取适量同样稀释的弯曲菌质控菌株atcc33560的稀释液加到药敏培养板的对照列(第12列)的q3-q8孔的培养基上；
[0057]
取2ul-3ul的无菌稀释液加到对照列(第12列)的q1孔中作为无菌培养基对照；
[0058]
盖上培养盖，将药敏培养板放入微需氧环境中，42℃培养24h或者37℃培养48h，取出药敏培养板，肉眼观察药敏培养板上每个培养孔中弯曲菌的生长结果。
[0059]
结果判读：
[0060]
首先观察药敏培养板对照列：加无菌生理盐水的琼脂质控q1孔上无任何细菌生长；待检菌株生长质控q2孔上为菌苔生长；质控菌株atcc33560在q3-q8孔中分别为：q3，q4，q5菌苔生长，q6，q7，q8无生长；
[0061]
如对照孔检测结果正确，开始判读检测孔，如不正确则检测孔结果无效；
[0062]
检测孔结果判读：1-11列检测孔，以列为单位，孔中培养基上完全没有细菌的生长则该孔中抗生素的浓度判定为该药物的mic值，如果有单一菌落或者因加样造成的薄雾状生长也判读为阴性生长(无生长)；如果在最大浓度的琼脂孔中仍有细菌生长则判读为：mic》64μg/ml或者mic》32μg/ml(泰利霉素、克林霉素)。
[0063]
以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修
改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

技术特征：
1.一种药敏检测试剂盒，包括药敏培养板、无菌加样槽、无菌加样器、无菌稀释液管和底座，其特征在于，在底座其中两个相对的侧面设置有第一卡槽，所述的无菌加样器卡装在底座的第一卡槽上，在底座的另外两个侧面或者另外两个侧面的其中一个侧面设置第二卡槽和第三卡槽，所述的第二卡槽用于卡装无菌加样槽，所述的第三卡槽用于卡装无菌稀释液管，所述的无菌加样器蘸取无菌加样槽中的样液在药敏培养板中点样；所述无菌加样器包括连接杆和若干接触杆，所述的若干接触杆等间距平行排列于连接杆上。2.如权利要求1所述的一种药敏检测试剂盒，其特征在于，所述药敏培养板包括培养盒和培养盖，培养盒有按照行列规则排布的培养格，每个培养格为圆形，填充有培养基，培养盖置于培养盒的上方。3.如权利要求1所述的一种药敏检测试剂盒，其特征在于，所述的接触杆远离连接杆的一端的底面为半圆形或弧形表面，表面积小于药敏培养板中培养基的表面积，相邻两个接触杆底面中心的距离与药敏培养板中相邻的两个培养基圆心的距离相等。4.如权利要求1所述的一种药敏检测试剂盒，其特征在于，所述的连接杆与接触杆可以为固定连接或可拆卸连接。5.如权利要求1所述的一种药敏检测试剂盒，其特征在于，所述的连接杆为长方体或圆柱体。6.如权利要求1所述的一种药敏检测试剂盒，其特征在于，所述连接杆的长度大于或等于接触杆排列的长度。7.如权利要求1所述的一种药敏检测试剂盒，其特征在于，所述接触杆的数目与药敏培养板中培养格的行数相等。8.如权利要求1所述的一种药敏检测试剂盒，其特征在于，所述接触杆为空心或实心圆柱体。9.如权利要求1所述的一种药敏检测试剂盒，其特征在于，所述无菌加样器为塑料或金属材质。10.如权利要求1所述的一种药敏检测试剂盒，其特征在于，所述的第三卡槽的形状与无菌稀释液管底部的形状匹配。

技术总结
本发明公开了一种药敏检测试剂盒，包括药敏培养板、无菌加样槽、无菌加样器、无菌稀释液管和底座，在底座其中两个相对的侧面设置有第一卡槽，无菌加样器卡装在药敏培养板的第一卡槽上，在底座的另外两个侧面或者另外两个侧面的其中一个侧面设置第二卡槽和第三卡槽，第二卡槽用于卡装无菌加样槽，第三卡槽用于卡装无菌稀释液管，所述的无菌加样器蘸取无菌加样槽中的样液在药敏培养板中点样。整套装置为一个整体，方便拿取；同时无菌加样器的设计可以实现按列加样，大大提高加样速度。大大提高加样速度。大大提高加样速度。


技术研发人员：李栋 钟源霞 徐丛梅 杜庆宝
受保护的技术使用者：青岛中创汇科生物科技有限公司
技术研发日：2023.05.23
技术公布日：2023/8/13