一种利用色谱技术分离纯化UMP转化液的工艺

一种利用色谱技术分离纯化ump转化液的工艺
技术领域
1.本发明属于生物分离技术领域，具体涉及一种利用色谱技术分离纯化ump转化液的工艺。


背景技术：

[0002]5′‑
尿嘧啶核苷酸(以下简称为尿苷酸，ump)是由尿嘧啶、核糖和磷酸组成的单核苷酸。药用的尿苷酸为二钠盐的混合物，呈白色或黄色的粉末，有鲜味，易溶于水，难溶于乙醇、丙酮等有机溶剂。目前来说，尿苷酸的生产技术主要包括核酸酶水解法、化学合成法和生物催化法。其中，生物催化法在近年来逐渐成为了热点。它的优势是：与其他方法相比，生物催化法不仅缩短了生产周期，而且大大增加了尿苷酸的产量。并且反应体系简单，一般只需要底物，表面活性剂、酶辅基(如镁离子)及一定量的ph调节剂。所以在ump转化液的生产中，尿苷-胞苷酶(uck)作为生物体核苷酸代谢补偿途径中的重要催化剂，可以催化尿苷和胞苷磷酸化成为尿苷酸和胞苷酸。得到的ump转化液中含有na
+
，mg
2+
，ump，少量的po
43-等，且转化液的ph值大约在2左右。根据ump在溶液中存在不同形式的理论浓度分布，如图1。可知ump在ph为2时大多以ump-形式存在。由于酶解液中的成分比较复杂，传统的分离ump转化液的方法通常是先采用1根阳离子交换柱分离4种单核苷酸
[1]
，分别得到ump、胞苷酸(cmp)、腺苷酸(amp)的稀溶液和鸟苷酸(gmp)、cmp的混合液；再将ump调ph值后，上氢氧型阴柱分离纯化、浓缩。该法存在树脂利用率低、4种核苷酸不易完全分离，且氢氧型阴离子交换树脂在纯化过程中，交换基团oh-易与mg
2+
形成沉淀，使得柱子堵塞，造成过多的资源消耗。例如，肖林平
[2]
研究了一种新的阳离子交换树脂，可以将4种核苷酸在阳柱上分离，但各产品色谱峰之间几乎没有距离，导致流出液产品收集存在一定的困难。李德莹
[3]
采用串联的阳离子交换柱在酸性条件下首先吸附amp、cmp、gmp，未经吸附的ump流经弱碱性树脂柱和强碱性树脂柱后，经洗脱、浓缩、干燥，得到ump产品，过程较为繁琐，树脂的再生会过多的消耗酸碱。
[0003]
参考文献：
[0004]
[1]deoda a j,singhal r s.5'-phosphodiesterase(5'-pde)from germinated barley for hydrolysis of rna to produce flavour nucleotides[j].bioresour technol,2003,88(3):245-50.
[0005]
[2]肖林平.5
’‑
尿苷酸分离纯化工艺的研究[d]；南京工业大学,2003.
[0006]
[3]tanaka,release of intracellularly stored 5-phosphodiesterase with preserved plant.biotech bioengineering 1985.


技术实现要素：

[0007]
本发明所要解决的技术问题是针对现有技术实验过程较为繁琐、能量消耗很大的不足，提供一种利用色谱技术分离纯化ump转化液的工艺，以解决ump转化液中ca
2+
、mg
2+
、atp
+
、amp
+
、ur-、po
43-难以去除的难题。
[0008]
为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案如下：
[0009]
一种利用色谱技术分离纯化ump转化液的工艺，将ump转化液上样到含有阴离子交换树脂的色谱柱中进行离子交换，通过吸附、洗杂、解吸三个步骤后，收集流出液，产品最终为ump钠盐。
[0010]
其中，所述的ump转化液为utp经酶解脱去两个磷酸根后生成ump料液，再经钠滤处理后得到ump转化液，所述的ump转化液的制备过程，由于加入了ca
2+
、mg
2+
等辅助因子，并且酸调节后，整个料液ph值为1～3，基本在ph2左右，所以整个ump转化液中含有ump-，ur-、po
43-、mg
2+
，ca
2+
、na
+
、atp
+
、amp
+
。纳滤的目的主要为了脱除大量的po
43
、ca
2+
，mg
2+
，na
+
，ur-，例如可以选择截留分子量为300da的纳滤膜，ump转化液经钠滤处理后，基本含ump-和部分剩余的ur-、po
43-、mg
2+
、ca
2+
、na
+
，atp
+
、amp
+
。
[0011]
优选的，所述的ump转化液，mg
2+
的含量为0.1mg/l～3g/l，na
+
的含量为1g/l～30g/l，ump-的含量为10g/l～70g/l，ca
2+
的含量0.1mg/l～3g/l，amp
+
的含量为2g/l～10g/l，atp
+
的含量为2g/l～10g/l，ur-的含量为3g/l～10g/l，po
43-的含量为0.1mg/l～1g/l。
[0012]
更优选的，所述的ump转化液，mg
2+
的含量为0.3g/l～0.7g/l，na
+
的含量为10g/l～20g/l，ump-的含量为40g/l～60g/l，ca
2+
的含量0.06g/l～0.08g/l，amp
+
的含量为2.5g/l～3.5g/l，atp
+
的含量为2g/l～3g/l，ur-的含量为2g/l～4g/l，po
43-的含量为0.1mg/l～0.4mg/l。
[0013]
其中，所述的阴离子交换树脂是以苯乙烯为骨架的i型或ii型强碱性阴离子交换树脂，或多胺类型的碱性阴离子交换树脂，或凝胶型的阴离子交换树脂。
[0014]
其中，所述的多胺包含三亚乙基四胺和/或四亚乙基五胺。
[0015]
其中，所述的阴离子交换树脂，其功能基团为季胺基和/或叔胺基，所述的季胺基的含量为1.0～2.5mmol/g阴离子交换树脂，所述的叔胺基的含量是1.0～2.5mmol/g阴离子交换树脂；所述的阴离子交换树脂的可交换离子是氯离子，氯离子的含量为1.0～2.5mmol/g，体积全交换容量≥1.35mmol/ml；所述的阴离子交换树脂的交联度为3～10％。
[0016]
其中，所述的阴离子交换树脂，其粒径为0.1～0.8mm，含水量为42～48％，湿真密度1.03～1.18g/cm3，比表面积为100～2000m2/g，孔容为0.51～1.33cm3/g，孔径为1～200nm。
[0017]
所述的阴离子交换树脂包括但不限于以上所述的阴离子交换树脂。
[0018]
其中，所述的吸附，其上样速率为0.3～1.5bv/h。上样量为使树快要脂饱和即可，继续增加上样量可能导致树脂吸附到饱和，使得ump-过多得损失在残余液和洗杂液中；其中，可通过对固定床穿透实验中穿透曲线的饱和点(c/c0＝1)来判断树脂是否吸附饱和。
[0019]
其中，所述的洗杂，洗杂剂为水，水的用量为0.8～1bv，流速为0.3～1.5bv/h。
[0020]
其中，所述的解吸，解吸剂为0.1m～3m nacl水溶液(优选1.5m的nacl水溶液)，解吸剂的用量为0.5～3bv，流速为0.3～1.5bv/h。
[0021]
其中，解吸完成后，树脂完全转化为氯型，不进行再生操作，树脂再次使用前用纯水洗去树脂间隙的nacl，此时对纯水的用量和流速没有特殊限定，纯水的优选用量为0.5～3bv，优选流速为0.3～1.5bv/h。
[0022]
上述工艺流程中，所涉及的吸附(含有ca
2+
、mg
2+
、na
+
、atp
+
、amp
+
、ur-、po
43-、ump-的ump转化液上样的过程)、洗杂(树脂颗粒间隙少量的ump转化液)、解吸(ump钠盐产品液)均是在常温下进行的。
[0023]
上述工艺流程中，本发明所使用的固定床柱分离装置，由1根装填有吸附剂的树脂柱、蠕动泵和自动部份收集器组成，通过切换流动相将整个系统分为吸附、洗杂、解吸三个步骤，按顺序切换。先进ump转化液待树脂柱吸附ump-饱和后，吸附段出口处收集残余液(ca
2+
、mg
2+
、na
+
、atp
+
、amp
+
、ur-、po
43-)。再切换纯水进行洗杂，去除树脂颗粒间隙的物料，该树脂间隙的物料主要含ca
2+
、mg
2+
、na
+
、atp
+
、amp
+
、ur-、po
43-，含有微量的ump-。后续用nacl水溶液进行解吸，收集吸附的ump钠盐产品液，解吸完成然后树脂即完全转化为氯型，再用纯水洗去树脂柱间隙的nacl后吸附剂可重复使用。
[0024]
有益效果：与现有技术相比，本发明具有如下优势：
[0025]
(1)色谱分离操作均在室温下进行，大大降低了能耗。
[0026]
(2)解吸剂nacl的使用，选用nacl作解吸剂，使得产品的洗脱和树脂的再生同时完成，简化了工艺过程，并极大降低了ump分离过程中的能耗，实现ump的规模清洁化生产。树脂可重复使用，还具有一定的除色素的效果，运行成本低，可直接进行工艺放大。
[0027]
(3)通过单根树脂柱，整个过程不使用酸和碱，将ca
2+
、mg
2+
、atp
+
、amp
+
、ur-、po
43-等杂质一步和产品ump分离，产品液中的ca
2+
、mg
2+
、po
43-含量已低于离子色谱检测限，保证了ump产品的纯度和品质，收率可达到99％以上，hplc纯度可达到100％，ca
2+
、mg
2+
、po
43-、atp
+
、amp
+
、ur-等离子的去除率达到了99％以上。
附图说明
[0028]
下面结合附图和具体实施方式对本发明做更进一步的具体说明，本发明的上述和/或其他方面的优点将会变得更加清楚。
[0029]
图1为ump在溶液中存在不同形式的理论浓度分布。
[0030]
图2为本发明的工艺流程图。
[0031]
图3为本发明的脱色效果图。
[0032]
图4为ump钠盐转化液的hplc图(样品稀释100倍)。
[0033]
图5为ump钠盐产品液的hplc图(样品稀释100倍)。
[0034]
图6为ump钠盐转化液的离子色谱图(样品稀释200倍)。
[0035]
图7为ump钠盐产品液的离子色谱图(样品未稀释)。
具体实施方式
[0036]
以下实施例中使用外标法对转化液中的ump浓度和mg
2+
进行检测。
[0037]
ca
2+
、mg
2+
、na
+
、po
43-等离子色谱条件为：
[0038]
1)检测器：thermo scientific-cd检测器；
[0039]
2)色谱柱：dionex ionpac
tm cs12a/as22；
[0040]
3)抑制器：dionex
tm cdrs 600 4mm/adrs 600 4mm；
[0041]
4)流动相：20mmol/l二甲基磺酸/4.5mmol/l碳酸钠和1.4mmol/l碳酸氢钠；
[0042]
5)流速：1ml/min；
[0043]
6)柱温：25℃；
[0044]
7)进样体积：25μl。
[0045]
ca
2+
、mg
2+
、na
+
的检测方法及步骤(po
43-类似)：
[0046]
1)色谱柱的平衡：配置好的20mmol/l的二甲基磺酸以1ml/min的流速冲洗色谱柱，同时开启柱温箱，开始采集基线，待cd信号值基线趋于0.5以下时，平衡结束。
[0047]
2)样品的检测：按照离子色谱条件编写进样序列及方法，将过膜处理后的标准品及样品按照进样序列置于自动进样器的相应位置上，开始进样并收集图谱信息。
[0048]
ump、atp
+
、amp
+
、ur-色谱条件为：
[0049]
1)检测器：agilent 1260型高效液相色谱仪-紫外检测器(254nm)；
[0050]
2)色谱柱：zorbax sb-aq液相色谱柱
[0051]
3)流动相：ph为6.5的磷酸三乙胺缓冲液：甲醇＝91：9；
[0052]
4)流速：0.7ml/min；
[0053]
5)柱温：25℃；
[0054]
6)进样体积：20μl。
[0055]
检测方法及步骤：
[0056]
1)色谱柱的平衡：配置流动相ph为6.5的磷酸三乙胺缓冲液：甲醇＝91：9，用孔径0.22μm的混合微孔滤膜过滤，再进行超声处理30min。用处理好的流动相以0.7ml/min的流速冲洗色谱柱，同时开启柱温箱，开始采集基线，待基线趋于直线时，平衡结束。
[0057]
2)样品的检测：按照色谱条件编写进样序列及方法，将过膜处理后的标准品及样品按照进样序列置于自动进样器的相应位置上，开始进样并收集图谱信息。
[0058]
使用以下方法计算产品液中ump的收率：
[0059][0060]
c1：产品液中ump的浓度；
[0061]
v2：产品液的体积；
[0062]
c：上样液中ump的浓度；
[0063]
v：上样液的体积。
[0064]
使用以下方法计算产品液中ca
2+
、mg
2+
、atp
+
、amp
+
、ur-、po
43-等离子的去除率：
[0065][0066]
c0：上样液中ca
2+
、mg
2+
、atp
+
、amp
+
、ur-、po
43-的浓度；
[0067]
c2：产品液中ca
2+
、mg
2+
、atp
+
、amp
+
、ur-、po
43-的浓度。
[0068]
以下实施例中，所使用的氯型阴离子交换树脂(hy06)是以苯乙烯为骨架的i型强碱性阴树脂。树脂的功能基团为三甲胺，所述的胺基的含量为1.0～2.5mmol/g阴离子交换树脂；可交换离子是氯离子，所述的氯离子的含量为1.0～2.5mmol/g阴离子交换树脂；离子交换树脂粒径为0.4～0.7mm，含水量42.00-48.00％，湿真密度1.07-1.10g/cm3，体积全交换容量≥1.35mmol/ml。树脂厂家可以根据上述条件自行合成。
[0069]
以下实施例所用的分离装置，由1根装填有吸附剂的树脂柱、蠕动泵和自动部份收集器组成，通过切换流动相将整个系统分为吸附、洗杂、解吸三个步骤，按顺序切换，先进量ump转化液待树脂柱吸附ump-饱和后切换纯水进行洗杂，吸附段出口处收集含ca
2+
、mg
2+
、na
+
、atp
+
、amp
+
、ur-、po
43-的液体，再切换nacl水溶液进行解吸，收集ump钠盐产品液。再生剂也即是解吸剂nacl，解吸完成然后用纯水洗去树脂柱间隙的nacl。
[0070]
实施例1：ump转化液p1的获得。
[0071]
ump转化液p1由南京同凯兆业生物技术有限责任公司提供，制备方法为utp经酶解脱去两个磷酸根后，生成ump料液，由于过程中加入了ca
2+
、mg
2+
等辅助因子，并且酸调节后，整个料液ph值为2左右，所以整个ump料液中含有ca
2+
、mg
2+
、na
+
、atp
+
、amp
+
、ur-、po
43-、ump-。ump料液再经钠滤处理后得到ump转化液，基本含ca
2+
、mg
2+
、na
+
、atp
+
、amp
+
、ur-、po
43-、ump-。
[0072]
按照上述方法重复四次实验，分别得到四批ump转化液。
[0073]
第一批转化液中，mg
2+
含量为0.3g/l，na
+
含量为15g/l，ca
2+
的含量为0.07g/l，amp
+
的含量为2.5g/l，atp
+
的含量为3g/l，ur-的含量为2.5g/l，po
43-的含量为0.2mg/l，ump-含量为50g/l；
[0074]
第二批转化液中，mg
2+
含量为0.5g/l，na
+
含量为10g/l，ca
2+
的含量为0.06g/l，amp
+
的含量为3g/l，atp
+
的含量为3g/l，ur-的含量为3g/l，po
43-的含量为0.1mg/l，ump-含量为60g/l；
[0075]
第三批转化液中，mg
2+
含量为0.4g/l，na
+
含量为14g/l，ca
2+
的含量为0.08g/l，amp
+
的含量为3.3g/l，atp
+
的含量为2.8g/l，ur-的含量为4g/l，po
43-的含量为0.3mg/l，ump-含量为45g/l；
[0076]
第四批转化液中，mg
2+
含量为0.65g/l，na
+
含量为16g/l，ca
2+
的含量为0.07g/l，amp
+
的含量为3.4g/l，atp
+
的含量为2.9g/l，ur-的含量为4.3g/l，po
43-的含量为0.4mg/l，ump-含量为53g/l。
[0077]
以下实施例2～5中，整个分离装置系统分为吸附、洗杂、解吸三个步骤，吸附段进料为1.35～1.5bv，洗杂阶段的纯水用量均为0.8bv，洗杂流速均为1.5bv/h，解吸段均用1.5m的nacl溶液进行解吸，解吸剂的体积均为1.5bv，解吸的流速均为1.5bv/h，解吸完成，收集ump产品液。再生剂也即是解吸剂nacl，解吸完成然后用1bv的纯水洗去树脂柱间隙的nacl，流速为0.3bv/h，最后树脂完全转化为氯型。
[0078]
实施例2：色谱分离ump转化液p1
[0079]
采用由1根装填有吸附剂的树脂柱、蠕动泵和自动部份收集器组成的分离系统。树脂柱装填0.6l树脂(hyo6)，该树脂柱直径4cm，高度56cm。将实施例1预处理后的第一批ump转化液p1上柱，上样体积为1.6bv，上样速率为1.5bv/h，通过切换流动相将整个系统分为吸附、洗杂、解吸三个步骤，按顺序切换，先进ump转化液待树脂柱吸附ump-饱和后，吸附段出口处收集残余液(ca
2+
、mg
2+
、na
+
、atp
+
、amp
+
、ur-、po
43-)，再切换0.8bv的纯水进行洗杂，得到树脂颗粒间隙的少量ump转化液，后续用1.5bv的nacl溶液进行解吸，收集吸附的ump产品。再生剂也即是解吸剂nacl，解吸完成然后用1bv的纯水洗去树脂柱间隙的nacl，流速为0.3bv/h，最后树脂完全转化为氯型。收集的产品流出液用hplc检测ump-、atp
+
、amp
+
、ur-浓度，用离子色谱检测ca
2+
、mg
2+
、po
43-等离子的浓度，ca
2+
、mg
2+
、po
43-浓度低于离子色谱检测限，atp
+
、amp
+
、ur-的浓度低于液相色谱检测限，ump钠盐产品的收率达到99％，hplc的纯度达到100％，ca
2+
、mg
2+
、po
43-等离子的去除率达到了99.4％。从hplc和离子色谱图谱来看，图4为纳滤后的ump转化液稀释100倍的hplc色谱图，从图4中可以看出，除了ump产品峰，还有一些杂质峰(比如atp
+
、amp
+
、ur-)，这些杂质峰与ump产品峰稍有重叠，使得色谱峰的自动积分稍有偏差，从图5的ump钠盐产品色谱图可以看出，ump的纯度达到了100％，杂质(atp
+
、amp
+
、ur-)完全去除掉。同时，图6是纳滤后的ump转化液稀释200倍的离子色谱色谱图，而图7
是未经稀释的ump钠盐产品的离子色谱图，图6和图7对比来看，ump钠盐产品中mg
2+
等离子(除na
+
外)的含量几乎全部为0，也说明本实验纯化效果良好。
[0080]
实施例3：色谱分离ump转化液p1
[0081]
采用由1根装填有吸附剂的树脂柱、蠕动泵和自动部份收集器组成的分离系统。树脂柱装填0.6l树脂(hyo6)，该树脂柱直径4cm，高度56cm。将实施例1预处理后的第二批ump转化液p1上柱，上样体积为1.35bv，上样速率为1.5bv/h，通过切换流动相将整个系统分为吸附、洗杂、解吸三个步骤，按顺序切换，先进ump转化液待树脂柱吸附ump-饱和后，吸附段出口处收集残余液(ca
2+
、mg
2+
、na
+
、atp
+
、amp
+
、ur-、po
43-),再切换0.8bv的纯水进行洗杂，得到树脂颗粒间隙的少量ump转化液，后续用1.5bv的nacl溶液进行解吸，收集吸附的ump产品。再生剂也即是解吸剂nacl，解吸完成然后用1bv的纯水洗去树脂柱间隙的nacl，流速为0.3bv/h，最后树脂完全转化为氯型。收集的产品流出液用hplc检测ump-、atp
+
、amp
+
、ur-浓度，用离子色谱检测ca
2+
、mg
2+
、po
43-等离子的浓度，ca
2+
、mg
2+
、po
43-浓度低于离子色谱检测限，atp
+
、amp
+
、ur-的浓度低于液相色谱检测限，ump产品的收率达到99％，hplc的纯度达到100％，ca
2+
、mg
2+
、po
43-等离子的去除率达到了99.8％。
[0082]
实施例4：色谱分离ump转化液p1
[0083]
采用由1根装填有吸附剂的树脂柱、蠕动泵和自动部份收集器组成的分离系统。树脂柱装填0.6l树脂(hyo6)，该树脂柱直径4cm，高度56cm。将实施例1预处理后的第三批ump转化液p1上柱，上样体积为1.8bv，上样速率为1.5bv/h，通过切换流动相将整个系统分为吸附、洗杂、解吸三个步骤，按顺序切换，先进ump转化液待树脂柱吸附ump-饱和后，吸附段出口处收集残余液(ca
2+
、mg
2+
、na
+
、atp
+
、amp
+
、ur-、po
43-)，再切换0.8bv的纯水进行洗杂，得到树脂颗粒间隙的少量ump转化液，后续用1.5bv的nacl溶液进行解吸，收集吸附的ump产品。再生剂也即是解吸剂nacl，解吸完成然后用1bv的纯水洗去树脂柱间隙的nacl，流速为0.3bv/h，最后树脂完全转化为氯型。收集的产品流出液用hplc检测ump-、atp
+
、amp
+
、ur-浓度，用离子色谱检测ca
2+
、mg
2+
、po
43-等离子的浓度，ca
2+
、mg
2+
、po
43-浓度低于离子色谱检测限，atp
+
、amp
+
、ur-的浓度低于液相色谱检测限，ump产品的收率达到99％，hplc的纯度达到100％，ca
2+
、mg
2+
、po
43-等离子的去除率达到了99.4％。
[0084]
实施例5：色谱分离ump转化液p1
[0085]
采用由1根装填有吸附剂的树脂柱、蠕动泵和自动部份收集器组成的分离系统。树脂柱装填0.6l树脂(hyo6)，该树脂柱直径4cm，高度56cm。将实施例1预处理后的第四批ump转化液p1上柱，上样体积为1.5bv，上样速率为1.5bv/h，通过切换流动相将整个系统分为吸附、洗杂、解吸三个步骤，按顺序切换，先进ump转化液待树脂柱吸附ump-饱和后，吸附段出口处收集残余液(ca
2+
、mg
2+
、na
+
、atp
+
、amp
+
、ur-、po
43-)，再切换0.8bv的纯水进行洗杂，得到树脂颗粒间隙的少量ump转化液，后续用1.5bv的nacl溶液进行解吸，收集吸附的ump产品。再生剂也即是解吸剂nacl，解吸完成然后用1bv的纯水洗去树脂柱间隙的nacl，流速为0.3bv/h，最后树脂完全转化为氯型。收集的产品流出液用hplc检测ump-、atp
+
、amp
+
、ur-浓度，用离子色谱检测ca
2+
、mg
2+
、po
43-等离子的浓度，ca
2+
、mg
2+
、po
43-浓度低于离子色谱检测限，atp
+
、amp
+
、ur-的浓度低于液相色谱检测限，ump产品的收率达到99％，hplc的纯度达到100％，ca
2+
、mg
2+
、po
43-等离子的去除率达到了99.7％。
[0086]
对比例1
[0087]
同实施例5，使用同一批次的料液，相同的进样量、流速等条件，将氯型阴离子离子交换树脂hy06分别更换为强碱性阴离子交换树脂201x7和d301，在吸附段出口处收集产品液中均检测出ump的存在，并且201x7树脂的收集液中ump产品收率为75％，d301树脂的收集液中ump产品收率为71％，说明这两种树脂都不能很好的提纯ump转化液中的ump产品。
[0088]
本发明提供了一种利用色谱技术分离纯化ump转化液的工艺的思路及方法，具体实现该技术方案的方法和途径很多，以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。本实施例中未明确的各组成部分均可用现有技术加以实现。

技术特征：
1.一种利用色谱技术分离纯化ump转化液的工艺，其特征在于，将ump转化液上样到含有阴离子交换树脂的色谱柱中进行离子交换，通过吸附、洗杂、解吸三个步骤后，收集流出液。2.根据权利要求1所述的工艺，其特征在于，所述的ump转化液为utp经酶解脱去两个磷酸根后生成ump料液，再经钠滤处理后得到ump转化液，所述的ump转化液含有mg
2+
、na
+
、ump-、ca
2+
、amp
+
、atp
+
、ur-和po
43-，ph1～3。3.根据权利要求2所述的工艺，其特征在于，所述的ump转化液，mg
2+
的含量为0.1mg/l～3g/l，na
+
的含量为1g/l～30g/l，ump-的含量为10g/l～70g/l，ca
2+
的含量0.1mg/l～3g/l，amp
+
的含量为2g/l～10g/l，atp
+
的含量为2g/l～10g/l，ur-的含量为2g/l～10g/l，po
43-的含量为0.1mg/l～1g/l。4.根据权利要求1所述的工艺，其特征在于，所述的阴离子交换树脂是以苯乙烯为骨架的i型或ii型强碱性阴离子交换树脂，或多胺类型的碱性阴离子交换树脂，或凝胶型的阴离子交换树脂。5.根据权利要求4所述的工艺，其特征在于，所述的多胺包含三亚乙基四胺和/或四亚乙基五胺。6.根据权利要求4或5所述的工艺，其特征在于，所述的阴离子交换树脂，其功能基团为季胺基和/或叔胺基，所述的季胺基的含量为1.0～2.5mmol/g阴离子交换树脂，所述的叔胺基的含量是1.0～2.5mmol/g阴离子交换树脂；所述的阴离子交换树脂的可交换离子是氯离子，氯离子的含量为1.0～2.5mmol/g，体积全交换容量≥1.35mmol/ml；所述的阴离子交换树脂的交联度为3～10％。7.根据权利要求1所述的工艺，其特征在于，所述的阴离子交换树脂，其粒径为0.1～0.8mm，含水量为42～48％，湿真密度1.03～1.18g/cm3，比表面积为100～2000m2/g，孔容为0.51～1.33cm3/g，孔径为1～200nm。8.根据权利要求1所述的工艺，其特征在于，所述的吸附，其上样速率为0.3～1.5bv/h。9.根据权利要求1所述的工艺，其特征在于，所述的洗杂，洗杂剂为水，水的用量为0.8～1bv，流速为0.3～1.5bv/h。10.根据权利要求1所述的工艺，其特征在于，所述的解吸，解吸剂为0.1m～3m nacl水溶液，解吸剂的用量为0.5～3bv，流速为0.3～1.5bv/h。11.根据权利要求10所述的工艺，其特征在于，解吸完成后，树脂完全转化为氯型，不进行再生操作，树脂再次使用前用纯水洗去树脂间隙的nacl。

技术总结
本发明公开了一种利用色谱技术分离纯化UMP转化液的工艺，将UMP转化液上样到含有阴离子交换树脂的色谱柱中进行离子交换，通过吸附、洗杂、解吸三个步骤后，收集流出液。本发明利用吸附和离子交换机理，采用固定床技术，一步实现了去除Ca


技术研发人员：吴菁岚 寇敬伟 向厚乐 张振 王耀辉
受保护的技术使用者：南京工业大学
技术研发日：2023.05.15
技术公布日：2023/8/13