大麻植物来源的细胞外囊泡及使用其的治疗方法

大麻植物来源的细胞外囊泡及使用其的治疗方法


背景技术：

1.由于其治疗不同疾病，如疼痛、癫痫、癌症化疗相关症状(例如恶心和呕吐)并且也由于其通过诱导肿瘤细胞中的细胞死亡的直接抗癌作用，长期使用大麻素。广泛使用的主要大麻素是δ9-四氢大麻酚(thc)和大麻二酚(cbd)。这些大麻素从含有不同比例粗酸性形式的不同大麻素的不同大麻植物品种提取、纯化和脱羧。虽然已经使用脱羧的大麻素进行了许多研究，但科学界已经开始认识到酸性形式的大麻素的治疗作用，例如大麻二酚酸(cbd-a)的抗肿瘤活性和四氢大麻酚酸(thc-a)的神经保护作用。
2.大麻素在治疗应用中不仅受到所使用的大麻素类型的限制，还受到其递送方法的限制；口服、口腔粘膜、经皮和瘤内施用，每种都有其独特的优点和缺点。对于在中枢神经系统中进行治疗，特别是对于脑肿瘤，为了达到治疗浓度(在脑肿瘤床中)，患者需要每天口服相对大剂量的大麻素。这具有挑战性，原因有几个：1-如果口服大麻素，则其经历广泛的肝脏首过代谢，这降低其血浆浓度，并且施用thc时增加精神活性代谢产物11-羟基thc。2-由于大麻素的亲脂性，口服给药导致在体内全身分布，并且从长远来看其在血管丰富且多脂肪的器官中累积。3-全身分布和累积对心血管、肾和肝功能有不良影响，特别是在患有基础疾病的老年人中。此外，为了避免thc的精神活性作用而施用低剂量可能导致肿瘤床中次优的浓度，这可能增加肿瘤增殖。为了避免cns肿瘤治疗中的这些问题，大麻素可以肿瘤内递送，其是侵入性的和创伤性的。此外，尽管在后一种方法中向肿瘤核心递送高浓度的大麻素，但足够的量可能无法到达远离输注部位的肿瘤位置，这进而可能导致差的治疗结果。
附图说明
3.在附图的各图中以示例而非限制的方式说明实施例。
4.以下附图仅是说明性的而非限制性的。
5.图1示出了大麻ev的表征：a)由nta确定的ev尺寸分布。b)大麻ev的tem图。c)基于lc-ms/ms分析的大麻ev的主要大麻素含量。
6.图2示出了用游离sytotm rnaselecttm染料染色的肿瘤细胞(人gbm l0)(a)vs孵育3小时后吸收sytotm rnaselecttm染色的大麻ev(b)。
7.图3示出了大麻ev对a)小鼠kr158vs(b)人l0 gbm系的体外抗增殖[不同浓度，7天]作用，以及(c)大麻np对培养中的人l0 gbm系的抗迁移[1μm，24小时]作用。*p《0.05，**p＝0.001，****p《0.0001。
[0008]
图4示出了sytotm rnaselecttm染色的大麻np鼻内递送到小鼠大脑中。1和2分别示出了大麻np在冠状脑切片的肿瘤[1]vs非肿瘤[2]区域中的分布。
[0009]
图5示出了对照(a)vs大麻np治疗(b)小鼠大脑中的小胶质细胞iba-1免疫染色。大麻np治疗改变了大脑中小胶质细胞的形态和密度。
[0010]
图6示出了大麻np治疗对携带kr158神经胶质瘤的小鼠存活率的影响。大麻np治疗增加了中位生存期(对数秩检验，**p＝0.0016，31天[对照]vs 42天[大麻np])。
[0011]
图7示出了大麻np治疗导致脑组织中大量cbd-a和cbg-a累积。
[0012]
图8示出了大麻np治疗导致脑肿瘤组织中大量cbd-a和cbg-a累积。
[0013]
图9示出了植物来源的细胞外囊泡[ev]将鼻内递送提高了5倍。
[0014]
图10示出了植物来源的细胞外囊泡[ev]改善了药物向中枢神经系统的口服递送。
[0015]
图11示出了植物来源的ev如何在tbi模型中减少炎症。
[0016]
图12示出了tbi后ev治疗的动物中iba-1表达水平降低。
[0017]
图13示出了植物ev如何靶向胶质瘤祖细胞和胶质瘤干细胞。
[0018]
图14示出了大麻ev不同地调节神经干细胞[nsc]和祖细胞增殖。
[0019]
详细说明
[0020]
虽然调节药物制剂中每种成分大麻素、如thc的总量可以提高这些抗神经胶质瘤化合物的广度和有效性，但大麻素的纳米包装、使用酸性大麻素和利用靶向、局部和非侵入性cns递送方法、如鼻内途径是用于癌症和其他cns疾病的有吸引力的转化方法。这些策略降低了大麻素的总给药剂量及其不希望的副作用，同时保持或甚至增强了大麻素对cns疾病的作用和抗肿瘤功效。
[0021]
在一实施例中，提供了一种治疗受试者脑癌的方法，包括向受试者施用含一种或多种大麻素的植物细胞外囊泡(pev)(cpev)，其中cpev递送到受试者的大脑。例如，此处所述的方法可用于治疗胶质母细胞瘤。在某些方面，通过鼻内或替代地肠胃外施用pev治疗脑癌。将cpev递送至大脑可导致高于其他施用方式(例如血管内或口服施用)造成的血清浓度的大脑浓度，从而允许待使用的含大麻素的cpev剂量对治疗脑癌是有效的，同时不会引起通常与在受试者中大麻素施用相关的上述副作用。
[0022]
在第二实施例中，提供了一种通过向受试者的中枢神经系统施用治疗有效量的cpev治疗神经退行性疾病的方法。用在此所述的组合物可治疗的cns的神经退行性疾病的示例包括但不限于阿尔茨海默病、帕金森病、亨廷顿病、运动神经元病、脊髓小脑性共济失调和脊髓性肌萎缩中的一种或多种。
[0023]
在第三实施例中，提供了一种通过施用治疗有效量的在此所述的cpev治疗受试者中cns损伤的方法。通过在此公开的方法的cns损伤的示例包括但不限于中风、创伤性脑损伤、脑震荡、脊髓损伤等。
[0024]
在第四实施例中，提供了一种通过施用治疗有剂量的在此公开的cpev减少受试者的cns中炎症病症的方法。通过在此所述的组合物可治疗的炎症病症的示例包括自身免疫性疾病(例如多发性硬化症、脑炎等)。
[0025]
在第五实施例中，提供了一种通过施用治疗有效量的在此公开的cpev增强cns功能的方法。增强cns功能包括但不限于减少大脑老化，维持或增强认知功能、运动功能和/或对损伤和疾病的复原力。
[0026]
在第六实施例中，提供了一种使用治疗有效量的cpev增强分子口服递送至cns的方法。这种递送方法可用于治疗各种cns疾病、功能障碍、减轻炎症和增强cns功能。
[0027]
在一些方面，在此公开的方法涉及向受试者施用包含cpev的组合物，从而将cpev递送到受试者的大脑。例如，cpev可以鼻内或颅内给药，并且在各个方面，给药1、2、3、4、5次或更多次。在一些方面，通过套管提供cpev完成cpev的颅内给药。在某些其他方面，cpev在配制用于鼻内给药的液体组合物中提供，所述液体组合物通常包括用于鼻内给药的赋形剂。此外，在一些情况下，通过对cpev组合物施加压力完成cpev的鼻内给药。因此，在一些情
况下，用于鼻内递送的cpev组合物包含在注射器、喷雾器、呼吸器或挤压瓶中，从而可以施加压力以促进cpev递送到受试者的鼻内通道(例如，通过人或泵的机械作用或通过压缩气体)。
[0028]
cpev可以以多种制剂提供，任何制剂可以用于在此公开的方法。在一些情况下，配制cpev组合物以增强从鼻内通道到大脑的吸收。
[0029]
在其它方面，提供了包含cpev的药物组合物。例如，在一方面，本发明提供了一种用于颅内给药的cpev组合物，包含在人工脑脊液(acsf)中配制的cpev。acsf的制剂是本领域已知的，并且在此详细描述了某些特定的制剂。替代地，提供了一种用于鼻内给药的药物组合物，包含当经鼻内途径向受试者施用时在配制用于鼻内给药的载体中有效治疗脑癌(例如胶质母细胞瘤)的cpev剂量。此外，在某些方面，cpev组合物通过注射器、喷雾器、呼吸器(或设计用于连接至喷雾器或呼吸器的药筒)或挤压瓶给药，以促进鼻内给药。在其它方面，用于颅内或鼻内给药的cpev组合物可以包含第二治疗剂，例如化疗剂、抗病毒药物、抗生素或抗炎剂。其他治疗剂可以使用已知方法通过外源递送或通过基因修饰从其分离pev的植物材料而添加到pev组合物。
[0030]
在另一实施例中，本发明提供了一种鼻内cpev递送系统，包括配制用于鼻内递送的cpev和足以将cpev递送到受试者的鼻内通道的压力源。在某些方面，压力源定义为提供足够的压力将cpev组合物递送到受试者的鼻内通道。例如，压力源可以是注射器、喷雾器、呼吸器、挤压瓶或泵。在某些方面，cpev递送系统包含对于在人类受试者中解决癌症、神经退行性疾病、炎症病症、cns损伤或增强cns功能有效的单个单位剂量的cpev。因此，在其它方面，提供了一种治疗脑癌的试剂盒，包含配制用于鼻内给药的一个或多个单位剂量的cpev。
[0031]
在另外的实施例中，本发明提供了在此所述的组合物用于制备药物的用途。例如，pev可以从植物、如大麻或其他大麻物种分离，并工程化以包括外源性有效载荷(payload)。在这样的示例中，pev用作某些成分和药物的递送载体。本发明还提供了其他相关方面。
[0032]
前述概要并非旨在限定本发明的每个方面，在其他部分、例如以下详细说明中说明了另外的方面。整个文件旨在作为一个统一的公开，并且应该理解的是，设想了在此所述的特征的所有组合，即使在本文件的同一句子、段落或章节中没有发现所述特征的组合。通过以下详细说明，本发明的其他特征和优点将显而易见。然而，应该理解的是，虽然指示了本发明的优选实施例，但详细说明和具体示例仅通过说明的方式给出，因为从详细说明，在本发明的精神和范围内的各种变化和修改对于本领域技术人员是显而易见的。
[0033]
定义
[0034]
当术语的定义偏离术语的常用含义，申请人将使用下面提供的定义，除非特别说明。
[0035]
在此使用的术语仅仅是为了描述特定实施例，并不旨在限制。在此使用的单数形式“一”和“所述”旨在包括复数形式，除非上下文另外明确指示，否则这些术语并不表示数量限制，而是表示存在至少一个提到的项。此外，对于详细说明和/或权利要求中使用的术语“包括”、“具有”、“带有”或其变体，这些术语旨在以类似术语“包括”的方式是包容性的。
[0036]
术语“约”或“近似”是指在所述值或范围中至多5％、6％、7％、8％、9％或10％的变化。例如，约2包括值1.9到2.1。
[0037]
在此使用的术语“辅助癌症治疗方案”是指治疗，例如手术、化疗、放射治疗、热疗和激光治疗，并且当与给药结合使用时可能提供有益效果。
[0038]
在此使用的术语“量”是指具有统计学上显著的量。
[0039]
在此使用的术语“癌症”旨在包括患者的任何肿瘤生长，包括初始肿瘤和任何转移。癌症可以是液体或实体肿瘤类型。液体肿瘤包括血液学起源的肿瘤(血液学癌症)，包括例如骨髓瘤(例如多发性骨髓瘤)、白血病(例如沃尔登斯特罗姆综合征、慢性淋巴细胞白血病、其他白血病)和淋巴瘤(例如b细胞淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤)。实体肿瘤可来源于器官，并且包括癌症，例如脑癌(例如胶质母细胞瘤)，或其他实体肿瘤，例如肺癌、乳腺癌、前列腺癌、卵巢癌、结肠癌、肾癌和肝癌。
[0040]
在此使用的术语“癌细胞”是指显示异常细胞生长、例如增加的细胞生长的细胞。癌细胞可以是增生细胞、在体外显示出缺乏生长接触抑制的细胞、不能在体内转移的肿瘤细胞或能够在体内转移的转移细胞。癌细胞还包括癌症干细胞。
[0041]
在此使用的术语“大麻素”是指在大麻或印度大麻中发现的，包括四氢大麻酚(thc)、四氢大麻酚酸(thc酸)、大麻二酚(cbd)、大麻二酚酸(cbd酸)、大麻萜酚酸、大麻萜酚、次大麻萜酚酸、次大麻萜酚、大麻环萜酚酸、大麻环萜酚、次大麻二酚、次大麻二酚酸、四氢次大麻酚酸、四氢大麻素、次大麻酚酸、次大麻酚、大麻酚酸、大麻酚及其异构体以及两种或多种前述物质的混合物。
[0042]
在此使用的术语“含大麻素的pev”或“cpev”是指含一种或多种大麻素的pev。
[0043]
在此使用的术语“共同给药”是指在施用另一种活性剂之前、同时或之后施用一种活性剂，从而使两种活性剂的生物效应重叠。在此教导的药剂的组合可以协同作用以治疗或预防在此所述的各种疾病、失调或病症。使用这种方法，可以通过每种药剂更低的剂量实现治疗效果，从而减少不良副作用的潜在性。
[0044]
在此使用的术语“浓缩”是指这样的过程，与该过程之前混合物中分子的浓度相比，在该过程之后，经过该过程的混合物中感兴趣的分子或结构具有更大的浓度。
[0045]
在此使用的术语“富集”是指这样的过程，与富集过程之前相比，在富集过程之后，混合物中感兴趣的分子或感兴趣的结构具有的该分子的量与该混合物中其他不期望组分的量之比增加。
[0046]“用于鼻内递送的赋形剂”例如在us2013/0337067中描述，并且包括药学上可接受的稀释剂、防腐剂、增溶剂、乳化剂、佐剂和/或载体。这种组合物是液体或冻干或以其他干燥的制剂，并且包括各种缓冲液含量(例如，tris-hcl、乙酸盐、磷酸盐)、ph和离子强度的稀释剂、防止吸附到表面的添加剂(例如白蛋白或明胶和洗涤剂(例如tween 20
tm
、tween 80
tm
、pluronic f68
tm
、胆汁酸盐)。药物组合物可包含药学上可接受的增溶剂(例如甘油、聚乙二醇)、抗氧化剂(例如抗坏血酸、焦亚硫酸钠)、防腐剂(例如硫柳汞、苯甲醇、对羟基苯甲酸酯)、膨松物质或张力调节剂(例如乳糖、甘露醇)。
[0047]“外源性有效载荷”是指载入pev中的来自外部来源，即并非来自ev中。pev可能包含内源性和外源性有效载荷的组合。
[0048]“内源性有效载荷”是指pev中自然存在的有效载荷。这些包括从基因工程和非基因工程植物分离的pev。
[0049]
在此使用的术语“配制用于递送至动物”是指包括药学上可接受的载体的pev组合
物。在此使用的“药学上可接受的”载体或赋形剂是适合向动物(例如，人)施用的载体或赋形剂，例如对动物(例如人)没有过多的不良副作用。
[0050]“鼻内递送”是指通过嗅觉和呼吸粘膜上皮从鼻腔到大脑的细胞外和跨细胞运输。上文引用的van woensel等(2013)详细描述了这一生理过程。用于鼻内递送的装置可商购，并且已知商品名有vianase(kurve technologies，美国)、directhaler(丹麦)或optimist(挪威)。
[0051]
在此使用的术语“分离”是指处理起始材料的任何人工(即非自然发生的)过程，其中该过程导致起始材料中感兴趣的分子或结构的更有用的形式(例如细胞外囊泡)。感兴趣的分子或结构的“更有用的形式”可以通过多种方式表征，没有一种是限制性的。例如，如在此使用的，某些实施例提供从大麻植物或其细胞分离细胞外囊泡的方法。此外，例如，用于分离的过程可以导致：
[0052]
(i)与起始材料相比，分离形式中感兴趣的分子或感兴趣的结构的浓度更高(例如浓缩)，
[0053]
(ii)从起始材料去除任何量或任何类型的杂质(例如纯化)，
[0054]
(iii)感兴趣的分子或感兴趣的结构的量与起始材料中任何不希望的组分的量的比例增加(例如富集)，
[0055]
(iv)将感兴趣的分子或结构从其天然来源或位置去除的任何人工过程；
[0056]
(v)将感兴趣的分子或结构与至少一种通常与其相关的其他组分分离的任何人工过程(例如纯化)，或
[0057]
(vi)(i)、(ii)、(iii)、(iv)或(v)的任何组合。
[0058]
类似地，在此使用的术语“分离的”通常是指在起始材料经过分离感兴趣的分子的方法之后感兴趣的分子或结构的状态。也就是说，从起始材料分离感兴趣的分子或感兴趣的结构将得到分离的分子。例如，本发明的方法用于制备分离的细胞外囊泡制剂。
[0059]
在此使用的术语“神经退行性疾病”是指涉及cns系统中神经元变性的病症。神经退行性疾病的示例包括但不限于阿尔茨海默病、帕金森病、亨廷顿病、运动神经元病、脊髓小脑性共济失调和脊髓性肌萎缩中的一种或多种。
[0060]
在此使用的术语“cns损伤”是指受试者的cns的损伤或创伤。cns损伤的示例包括但不限于中风、创伤性脑损伤、脑震荡和脊髓损伤中的一种或多种。
[0061]
在此使用的术语“炎症病症”是指本领域已知的任何慢性或急性炎症病症或病症。通过在此所述的组合物可治疗的炎症病症的示例包括自身免疫性疾病(例如多发性硬化症、脑炎等)。
[0062]
关于pev使用的术语“有效载荷”是指单个细胞外囊泡所含的成分。在各个实施例中，细胞外囊泡膜包括内表面和外表面，并包围内部空间。在某些实施例中，有效载荷封闭在内部空间内。在其他实施例中，有效载荷显示在细胞外囊泡的外表面上。在其他实施例中，有效载荷跨越细胞外囊泡的膜。在各个实施例中，有效载荷包括核酸、蛋白质、糖类、脂质、小分子和/或其组合。pev可以包含外源性和/或内源性有效载荷。此外，内源性有效载荷可以富集而高于自然界中发现的有效载荷。用于负载到pev中的有效载荷(即外源性有效载荷)可以包括人工化学合成的和/或从其他来源(包括其他植物或真菌材料)分离的选择性治疗剂。
[0063]
术语“pev组合物”是指与载体组合的pev。
[0064]
在此使用的术语“植物”是指整株植物(例如，整株幼苗或整株成株植物)、植物器官、植物部分、植物组织、种子、植物细胞、种子及其后代。
[0065]
在此使用的术语“植物细胞外囊泡”或“pev”是指脂质结构(例如，脂质双层、单层、多层结构，例如，囊泡脂质结构)，其直径为约5-2000nm(例如，至少5-1000nm、至少5-500nm、至少400-500nm、至少25-250nm、至少50-150nm或至少70-120nm)，来源于(例如，富集、分离或纯化)植物源或其片段、部分或提取物，包括与之相关的脂质或非脂质组分(例如肽、核酸或小分子)，并且其已从植物、植物部分或植物细胞富集、分离或纯化，或从其中培养了植物、植物部分或植物细胞的培养基(例如，植物细胞培养物或水培培养物的培养基，例如分泌的pev)中富集、隔离或纯化，富集或分离去除了来源于源植物、植物部分或植物细胞或培养基的一种或多种污染物或不希望的成分。在一些示例中，分离包括从培养基(例如，水培系统的培养基)去除完整的植物或植物部分，例如，在不破坏(例如，物理损坏)植物或植物部分的情况下去除植物或植物部分。pev可以是天然存在的ev的高纯制剂。优选地，从源植物去除至少1％的污染物或不期望的组分(例如，从源植株去除至少2％、5％、10％、15％、20％、25％、30％、40％、45％、50％、55％、60％、70％、80％、90％、95％、96％、98％、99％或100％的一种或多种污染物或不期望的组分)，例如植物细胞壁组分、胶质、植物细胞器(例如线粒体；质体，如叶绿体、白色体或淀粉体；以及细胞核)、植物染色质(例如植物染色体)；或植物分子聚集体(例如，蛋白质聚集体、核酸、蛋白质、蛋白质-核酸聚集体、脂蛋白聚集体、脂质蛋白质结构或糖)。优选地，pev相对于源植物的一种或多种污染物或不期望的组分为至少30％纯(例如，至少40％纯、至少50％纯、至少60％纯、至少70％纯、至少80％纯、至少90％纯、至少99％纯或100％纯)，如通过重量(w/w)、光谱成像(％透射率)或电导率(s/m)测量的。pev可以包含外泌体或微泡。通常，pev包含在pev与细胞结合时可以递送到细胞的有效载荷。在此举例说明了从大麻属植物的植物材料获得的pev。在此使用的cspev是指来自大麻属的pev。
[0066]
cpev可任选地包含其它试剂，例如异源功能试剂，如治疗剂、多核苷酸、多肽或小分子。cpev可以以多种方式携带或结合其它试剂(例如，异源功能试剂)，使得例如通过试剂包封、试剂掺入脂质双层结构或试剂与脂质双层结构的表面结合(例如，通过偶联)将试剂能够递送到目标植物。外源性功能试剂可以在体内(例如在植物中)或体外(例如组织培养、细胞培养或合成掺入)掺入到cpev中。
[0067]
在此使用的术语“纯化的”或“部分纯化的”是指从(1)其自然环境或从(2)起始材料(即它们从中分离)去除的感兴趣的分子或结构，并且其中(a)已经从起始材料去除了至少一种杂质，或(b)已经去除了至少一种与分子天然结合的组分。“纯化的”或“部分纯化的”分子可能仍然含有可能使分子的未来使用或研究次优、困难或不可能的其它成分。
[0068]
在此使用的术语“纯化”或“纯化”感兴趣的分子或结构是指从起始材料去除至少一种杂质或污染物的过程。例如，从起始材料纯化感兴趣的分子是指从起始材料去除至少一种杂质以得到感兴趣的分子相对更纯的形式的过程。
[0069]
在特定实施例中，本发明的cpev组合物可施用于具有癌症症状或诊断有癌症的受试者。本发明的组合物可以预防性施用，即在疾病、失调或病症的任何症状或表现出现发展之前。通常，在这种情况下，受试者将面临发展病症的风险。治疗还可以包括治疗表现出某
种疾病、失调或病症的症状的受试者。
[0070]
在此使用的术语“受试者”是指用在此教导的cpev治疗的动物。该术语包括任何动物，优选哺乳动物，包括但不限于农场动物、动物园动物、伴侣动物、服务动物、实验室或实验模型动物、运动动物。更具体的示例包括猿类、鸟类、猫科动物、犬科动物、马科动物、啮齿类动物、牛科动物、猪科动物、绵羊和山羊。该术语特别包括人类和人类患者。在具体实施例中，受试者涉及人类癌症患者或需要治疗癌症(包括胶质母细胞瘤)的人类。本发明合适的受试者可以是怀疑患有、已诊断患有或有风险发展可以通过施用一种或多种cpev改善、治疗或预防的疾病的任何动物，优选人类。因此，“有需要的受试者”是指在此定义的怀疑患有、已诊断患有或有风险发展可以通过施用一种或多种cpev和包含其的组合物改善、治疗或预防的疾病的受试者。
[0071]
在此使用的术语“基本上纯化的”是指从其自然环境或起始材料去除的感兴趣的分子或结构(即，它们被分离)，并且其中它们很大程度上不含与其天然结合的其他组分，或者基本上不含可能使未来的使用或研究次优、困难或不可能的其他成分。
[0072]“治疗有效量”是指当以适当的给药方案施用时足以降低或改善正在治疗的疾病(例如癌症)的严重程度、持续时间或进展，阻止正在治疗的疾病(例如癌症)的进展，导致正在治疗的疾病(例如癌症)消退，或增强或改善另一种治疗的预防或治疗效果的量。完全的治疗效果不一定通过施用一个剂量而发生，并且可能只在施用一系列剂量后发生。因此，治疗有效量可以以连续几天每天一次或多次给药而施用。
[0073]
在此使用的术语“治疗”是指为受试者提供任何类型的医疗管理。治疗包括但不限于使用任何已知方法向受试者施用组合物，用于治疗、逆转、减轻、降低疾病、失调或病症或一种或多种症状或表现的严重程度，抑制其进展或降低其可能性。
[0074]
植物细胞外囊泡
[0075]
包括外泌体的植物细胞外囊泡是一种与细胞间通讯有关的纳米级膜包裹颗粒，以促进蛋白质和遗传物质的运输。植物细胞外囊泡可以具有但不限于大于约5-2000nm(例如，至少5-1000nm、至少5-500nm，至少400-500nm、至少25-250nm、至少50-150nm或至少70-120nm)的直径。
[0076]
在此使用的植物细胞外囊泡还可以包括来源于质膜或内膜的任何脱落膜结合的颗粒。植物细胞外囊泡还可以包括由脂质双层膜限制的细胞来源结构，所述脂质双层膜是由质膜部分的突出外翻(起泡)分离和密封引起的，或者是由含有各种膜相关蛋白的任何细胞内膜限制囊泡结构输出引起的。植物细胞外囊泡也可以包括膜片段。
[0077]
可以从生物样品直接分析植物细胞外囊泡，从而没有事先分离、纯化或浓缩植物细胞外囊泡而确定植物细胞外囊泡的水平或确定植物细胞外囊泡的一种或多种生物标志物。替代地，可以在分析之前从样品分离、纯化或浓缩植物细胞外囊泡。
[0078]
植物细胞外囊泡的分析可以包括定量生物样品的一个或多个植物细胞外囊泡群体的量。例如，可以定量植物细胞外囊泡的异质群体，或可以从植物细胞外囊泡的异质群体分离植物细胞外囊泡的同质群体，例如具有特定生物标志物谱、特定生物标志物或来源于特定细胞类型(起源细胞特定植物细胞外囊泡)的植物细胞外囊泡的群体，并定量。植物细胞外囊泡的分析还可以包括定量或定性检测植物细胞外囊泡的特定生物标志物谱或生物标志物，如下所述。
[0079]
植物细胞外囊泡可以例如在生物流体罐中存储和存档，并在必要时检索以进行分析。植物细胞外囊泡也可以从先前已经从活的或死的受试者采集和储存的生物样品分离。此外，植物细胞外囊泡可以从生物样品分离，或者从存档或储存的样品分离。替代地，可以从生物样品分离植物细胞外囊泡，并在不储存或存档样品的情况下分析。此外，第三方可以获得或储存生物样品，或者获得或储存植物细胞外囊泡用于分析。
[0080]
植物细胞外囊泡的富集群体可以从生物样品获得。例如，植物细胞外囊泡可以使用尺寸排阻色谱、密度梯度离心、差速离心、纳米膜超滤、免疫吸收剂捕获、亲和纯化、微流体分离或其组合从生物样品浓缩或分离。这些方法可用于将植物细胞外囊泡与污染物分离。
[0081]
可以使用尺寸排阻色谱(如凝胶渗透柱)、离心或密度梯度离心以及过滤方法。例如，植物细胞外囊泡可以通过差速离心、阴离子交换和/或凝胶渗透色谱(例如，美国专利号6,899,863和6,812,023所述)、蔗糖密度梯度、细胞器电泳(例如，美国专利7,198,923所述)、磁性活化细胞分选(macs)或用纳米膜超滤浓缩器分离。可以使用各种分离或浓缩方法的组合。
[0082]
从生物样品分离或富集植物细胞外囊泡也可以通过使用超声处理(例如，通过应用超声波)，或使用洗涤剂、其他膜-活性剂或其任何组合增强。
[0083]
施用
[0084]
在一些实施例中，包含在此所述的cpev的组合物实施例将使用足以提供希望的生理效果的药物组合物水平鼻内施用至有需要的哺乳动物受试者。哺乳动物受试者可以是家畜或宠物，但优选地是人类受试者。本领域技术人员容易确定给予希望的生理效果所需的药物组合物水平。在确定在此所述的药物组合物实施例的剂量时可以考虑的其他参数可以包括受试者的疾病状态或受试者的年龄。组合物通常将包含用于鼻内递送的赋形剂。
[0085]
组合物可以采取油性或水性载体中的悬浮液、溶液或乳液的形式，并且可以含有配方剂，例如悬浮剂、稳定剂和/或分散剂。在一些实施例中，在此所述的组合物实施例可以通过乳液口服或静脉内(例如通过胃肠外营养治疗)向受试者施用。在一些实施例中，乳液可以包括水性连续相和分散相。相之间的边界称为“界面”。该乳液适于应用于脊椎动物、优选地哺乳动物(包括人类)的粘膜表面。这些组合物在应用于粘膜表面后提高了活性化合物的渗透性和生物利用度。感兴趣的粘膜表面包括肠粘膜。在一些示例中，在药物乳液中使用生物粘附聚合物提供了生物粘附聚合物包覆的悬浮液中增强的药物递送。生物粘附药物乳液可用于递送在此所述的以：a)延长原位停留时间，从而减少每天所需的给药次数；和b)可以在指定区域中定位，以改善和增强递送药物的靶向性和生物利用度。
[0086]
将cpev递送乳液保留和定位在选定区域中的能力导致改善的生物利用度，尤其是对于由于快速代谢转换或快速排泄而表现出窄的吸附窗口的药物。与靶吸收膜密切接触改善了药物吸收的程度和速率。
[0087]
生物粘附性是某些天然和合成聚合物与各种生物组织结合的特征。特别感兴趣的是与覆盖与外部环境直接或间接连通的许多组织的表面的粘膜衬(例如鼻粘膜)结合的聚合物。粘液结合聚合物可以称为粘膜粘合剂。几种生物粘附并且特别是粘膜粘附聚合物是已知的。主要的粘膜粘附聚合物的化学性能总结如下：
[0088]
a.相对高浓度的强氢键基团(-oh，-cooh)；
[0089]
b.强阴离子电荷；
[0090]
c.聚合物骨架足够的柔性以穿透粘液网络或组织缝隙；
[0091]
d.适于润湿粘液和粘膜组织表面的表面张力特性；和
[0092]
e.高分子量。
[0093]
生物粘附聚合物可用于在此所述的药物组合物实施例中，目前用于药物制剂中的生物粘附聚合物的示例包括：羧甲基纤维素(cmc)、羟丙基甲基纤维素(hpmc)、聚丙烯酸和聚甲基丙烯酸及其衍生物、果胶、海藻酸、壳聚糖、聚乙烯吡咯烷酮、透明质酸和聚乙烯醇。最常用的聚合物是carbopol(卡波姆)，它是一种高分子量的聚丙烯酸聚合物。它在用于生物粘附药物递送系统的许多制剂中用作悬浮剂、片剂包衣并用于眼部悬浮液中。
[0094]
在此所述的药物组合物实施例可包括包含掺入到惰性脂质载体(如油)、表面活性剂分散体、乳液、脂质体等中的pev、cpev或cspev的组合物。自乳化制剂是油、表面活性剂和助溶剂的理想地各向同性混合物，当引入水性介质中时其乳化形成细小的水包油乳液。细小的油滴将迅速从胃通过，并促进药物在整个胃肠道的广泛分布，从而克服固体剂型通常观察到的缓慢溶解步骤。这些实施例可以提供增加“自乳化”使用的控制释放自乳化颗粒、微球、片剂、胶囊等。
[0095]
鼻内递送是将pev、cpev或cspev递送到有需要的受试者的典型给药模式。然而，在替代的实施例中，可以设想其他给药方法。因此，根据本发明公开的主题的方法，用于施用含pev、cpev或cspev的组合物的合适方法包括但不限于口服给药、全身给药、肠外给药(包括血管内、肌肉内和/或动脉内给药)、口服、口腔给药、直肠给药、皮下给药、腹膜内给药、吸入、经皮给药(如局部应用)、气管内安装、手术植入、透皮给药、局部注射和高速注射/轰击。在适用的情况下，连续输注可以增强靶点处的药物累积(参见例如美国专利号6,180,082)。在此所述的治疗方法的一些实施例中，口服、静脉内、鼻内或腹膜内施用治疗组合物，从而治疗疾病或病症。
[0096]
无论给药途径如何，本发明公开的主题的组合物通常不仅包含有效量的pev，而且通常以有效量施用以实现期望的响应。因此，在此使用的术语“有效量”是指足以产生可测量的生物反应(例如，癌细胞减少)的治疗组合物(例如，pev和药物溶媒、载体或赋形剂)的量。可以改变本发明的治疗组合物中活性成分的实际剂量水平，从而施用对特定受试者和/或应用实现希望的治疗反应有效的活性化合物的量。当然，在任何特定情况下的有效量将取决于多种因素，包括治疗组合物的活性、制剂、给药途径、与其他药物或治疗的组合、正在治疗的病症的严重程度以及正在治疗的受试者的身体状况和既往病史。优选地，施用最小剂量，并且在未出现剂量限制的毒性的情况下将剂量增加到最低有效量。治疗有效剂量的确定和调整以及何时和如何进行这种调整的评估是本领域技术人员已知的。细胞外囊泡的配方和对ev负载外源性有效载荷的的背景信息在美国专利号10,723,782和tran等的“exosomes as nanocarriers for immunotherapy of cancer and inflammatory diseases.(2015)clin immunol.pmid:25842185中教导。
[0097]
试剂盒
[0098]
鉴于在此所述的新发现，即包裹在植物细胞外囊泡中的大麻素可以改善大麻素向组织或细胞(肿瘤细胞或正常细胞)的递送，提供了包括容纳pev的容器和用于递送pev的施用器的试剂盒。在具体示例中，施用器包括用于插入到受试者的鼻孔中的锥形喷嘴，其与容
器连接。在此所述的cpev组合物可以以任何合适的形式、例如以滴剂或喷雾剂的形式施用到鼻腔。
[0099]
适于向鼻腔施用cpev或cspev组合物的方法是本领域技术人员已知的。可以采用任何合适的方法。优选的施用方法是使用喷雾装置。喷雾装置可以是单(单位)剂量或多剂量系统，例如包括瓶子、泵和致动器，并且可以从包括pfeiffer、valois、bespak和becton-dickinson的各种商业来源获得。静电喷雾装置(例如美国专利号5,655,517中所述)也适于本发明的组合物的鼻内给药。
[0100]
对于喷雾装置，在单次喷雾致动中分配的液体的典型体积在0.01至0.15ml的范围。鼻喷雾产品的典型给药方案在一个鼻孔喷一次至每个鼻孔喷两次的范围。
[0101]
本发明还提供了一种装载如上定义的组合物的喷雾装置。
[0102]
示例
[0103]
为此，发现并分离了天然存在的大麻细胞外囊泡(ev)，其富含酸性形式的大麻素的有效载荷。将新鲜大麻植物的花部分榨汁。首先将大麻汁以不同的速度(2000-35000
×
g)离心，并过滤通过不同尺寸的过滤纸，以去除大于0.22μm的碎屑和颗粒，然后转移到超级离心管中，并在具有45型ti转子的beckman coulter optimatm xe超级离心机中以150000
×
g离心1小时。将ev沉淀物重悬于无菌pbs中，并储存在-80℃的冰箱中。纳米跟踪分析(nta，nanosight ns300仪器)表明，大麻ev的中值直径为112.6nm(图1a)。透射电子显微镜(tem，tecnai g2 f20-twin)评估验证了大麻ev的尺寸和形态，其具有ev典型的脂质双层结构(图1b)。使用液相色谱串联质谱法(lc-ms/ms)对大麻ev的主要大麻素(cbd、cbd-a、thc、thc-a、cbg、cbg-a)含量进行定量。使用固相萃取(c18柱)从ev提取分析物。ev样品在提取前加入氘化内标物，以检查回收率和校正提取效率。结果表明，cbd-a、cbg-a、thc-a、cbd和thc占大麻ev中总大麻素的69.1
±
2.1％、19.1
±
1.6％、6.5
±
0.54％、4.75
±
0.26％和0.5
±
0.3％(图1c)，没有cbg的任何可检测水平。
[0104]
为了分析细胞对ev的吸收，根据制造商的说明用sytotm rnaselecttm绿色荧光细胞染色剂标记大麻ev，并用外泌体旋转柱(mw 3000)从标记的ev去除多余的未结合的染料。将人胶质母细胞瘤肿瘤细胞接种在生长培养基中的层粘连蛋白涂覆盖玻片中过夜，然后将标记的ev加到每个孔中，3小时后评估细胞对ev的吸收。结果表明，ev可以在体外由gbm细胞吸收，呈现出特征性的点状染色模式，与暴露于游离染料的细胞的均匀细胞质染色模式相比(图2)。在人和小鼠gbm细胞系中研究了大麻ev的体外抗神经胶质瘤作用。首先，基于lc-ms/ms结果计算每个ev的平均cbd-a浓度，然后计算等于特定cbd-a浓度的ev的数量。将肿瘤细胞接种在96孔中补充对应于不同cbd-a浓度的大麻ev的神经球生长培养基中。7天后，采用阿尔玛蓝检测法测量平均荧光强度(作为细胞增殖的指标)，并根据对照条件的平均荧光强度标准化。大麻ev在相当于或超过1μm的cbd-a的量时开始显示出显著的抗神经胶质瘤作用(图3a，b)。在transwell迁移分析中，将人gbm肿瘤细胞用非杀死剂量的大麻ev过夜孵育有效减少gbm细胞迁移(图3c)。为了测试大麻ev的鼻内递送，使用了在左半球有kr-158肿瘤的c57/bl6小鼠，并在两个鼻孔中递送12μl sytotm rnaselecttm绿色荧光标记的大麻ev(每5分钟2μl/鼻孔)。
[0105]
24小时后处死动物，固定脑组织，冷冻切片，进行抗巢蛋白抗体染色，并用dapi复染以区分脑的肿瘤区vs非肿瘤区，标记的大麻ev散布整个大脑半球(图4)。
[0106]
为了分析大麻ev的抗肿瘤作用，一组动物植入kr-158肿瘤。植入后三天，将动物随机分为两组，每天鼻内接受pbs(大麻ev载体，对照组)或大麻ev，持续35天(每天两次，两次鼻内递送间隔6小时)。对照组和大麻ev治疗组脑组织的iba-1免疫荧光分析表明两组之间小胶质细胞形态和密度的明显差异(图5a，b)。使用对数秩检验的动物存活率分析表明，大麻ev治疗显著提高了动物存活率，并减缓了肿瘤生长(图6)。大脑(图7)和kr-158肿瘤组织(图8)的大麻素含量的lc-ms/ms分析表明，鼻内大麻ev递送导致这些组织中大量的cbd-a和cbg-a。这一发现令人兴奋，因为通过非侵入性鼻内方法将具有天然大麻素有效载荷的大麻ev直接递送到大脑将改善对恶性脑肿瘤细胞的杀伤力，从而提高治疗反应、提高患者生存率并有可能实现治愈。鼻内递送天然纳米囊泡形式的大麻素有望避免大麻素口服递送的全身效应，并绕过肝脏中的首过代谢。此外，大麻素的鼻内递送方法是一种有前途、安全和温和的替代，可替代侵入性、不方便和昂贵的递送方法，例如脑肿瘤的瘤内递送方法。大麻ev具有大麻素的内源性有效载荷，并且该技术可以迅速进入临床测试。
[0107]
将大麻二酚酸(cbda)溶于pbs(64ng/10μl)或大麻ev中，分离并稀释以具有与纯化的cbda相同的cbda浓度。c57/b6小鼠鼻内接受单剂量(10μl纯化的cbda或10μl大麻ev)。治疗后1小时处死动物，取出大脑，采用线性离子阱四极杆lc-ms/ms(ab sciex instruments)分析cbda含量。以大麻ev递送时，大脑中的cbda水平高出5倍(图9)。
[0108]
c57/b6小鼠管饲含有约6.4μg cbda和0.140μg thca的大麻来源的ev。管饲1小时、3小时、6小时和12小时后处死动物，取出大脑，采用线性离子阱四极杆lc-ms/ms(ab sciex instruments)分析cbda和thca含量。管饲后1小时观察到cbda和thca的峰值水平，脑组织的浓度分别为2.5ng/mg和0.06ng/mg(图10a)。这可以与anderson等(2019*)进行比较，他们通过ip注射向c57/b6小鼠递送溶解在植物油或乙醇吐温-80溶液中的约300μgcbda或thca，并分析每种化合物的血浆和大脑水平(图10b)。虽然大脑中的thca水平低于检测，但cbda在30分钟时表现出cmax，在植物油或吐温-80中的浓度分别为2.0ng/mg和13.2ng/mg。对比anderson等(2019)和植物ev递送(图10c)。对于每种方法大脑中cbda或thca的百分比(ng/mg组织/剂量)表明，植物ev的cbda脑渗透分别比tween-80或植物油载体增加7.5-43倍。采用植物ev的thca的渗透与cbda相似。
[0109]
使用单侧液压冲击损伤(fpi)模型诱导tbi，并在损伤后1小时用10μl pbs或大麻ev治疗动物，每天两次，持续7天。在tbi后24小时、72小时和7天对动物放血，并在第7天处死。对照和植物ev治疗的tbi动物的损伤皮层中gfap和血影蛋白水平的蛋白质印迹分析(图11a-b)。在植物ev治疗的tbi动物中，gfap和血影蛋白水平显著降低。损伤后24小时、72小时和7天使用v-plex促炎试剂盒(mesoscale diagnostics)进行的炎症细胞因子分析表明，植物ev导致il-4(图11c)和il-10(图11d)的抗炎细胞因子在72小时显著增加。
[0110]
使用单侧液压冲击损伤(fpi)模型诱导tbi，并在损伤后1小时用10μl pbs或大麻ev治疗动物，每天两次，持续7天。在第7天处死动物进行脑组织学分析。对照脑iba-11(兔抗iba-1，encor biotechnology)在小胶质细胞中上调，表明其激活(图12a)。ev治疗的动物表现出iba-1小胶质细胞表达定性降低，这支持植物ev能够减弱tbi后的炎症和小胶质细胞激活的观点(图12b)。
[0111]
植物ev提高了携带kr-186luc神经胶质瘤的小鼠的存活率。ev治疗提高了中位生存期(对数秩检验，从31天增加到42天)(图13)。
[0112]
在进行剂量反应分析以确定大麻ev的有效抗增殖浓度(ld50)后，将神经胶质瘤(小鼠kr-158和人l0)细胞接种在神经球分析培养物中，并用小于ld50的三种剂量的大麻ev(ev数量与其cbda浓度对应)治疗。在培养物中7天后，在每种条件下测定神经球的数量和大小。随大麻ev浓度增加，神经球形成频率和神经球大小都降低，这共同表明大麻ev对神经胶质瘤细胞的抗增殖作用(图14a)。使用数学模型，神经胶质瘤细胞在补充有效抗增殖剂量的大麻ev(1μm)的神经球培养物中的连续传代表明，大麻ev显著减少了神经胶质瘤干细胞中的对称细胞分裂，导致神经胶质瘤肿瘤细胞扩增随时间显著减少(图14b)。
[0113]
使用不同的大麻品种(富含b4 cbda和gold cbga)以分离ev，随后将其浓缩并每天两次鼻内递送，持续7天。处死动物，对脑室下区进行显微解剖，分离组织并开展神经球分析。7至10天后，对球体的数量及其直径进行定量。球体形成频率反映了体内nsc的数量，并因gold ev而增加(图15a)。富含cbda的b4品种没有增加nsc的数量，而含有脱羧cbg和cbg的酸性形式(cbga)的gold ev都显著增加了大脑中nsc的数量。神经球直径是神经祖细胞增殖的指标(神经祖细胞是独特的，与nsc不同)(图15b)。b4和gold品种都增加了神经祖细胞的增殖。这些数据共同证明了植物来源的ev通过鼻内递送将治疗药物递送至大脑的能力。
[0114]
鉴于对大麻植物开展生物工程用于某些大麻素的富集产生(或从不同大麻品种收获ev)的能力，提供了一种可用于治疗脑震荡、损伤和退行性疾病等非癌症病症的大麻素递送系统。鉴于若干正在进行的评估大麻素在脑癌、神经退行性疾病、疼痛等方面的临床试验，这项技术的商业相关性很高。
[0115]
虽然参考其某些优选形式对本发明进行了相当详细的说明，但是其它形式是可能得。因此，所附权利要求的精神和范围不应限于包括在此的优选形式的说明。
[0116]
读者的注意力在与此说明书同时提交且与此说明书一起对公众审查开放的所有论文和文件，所有这些论文和文件的内容通过引用并入本技术中。
[0117]
除非另外明确说明，否则本说明书(包括任何所附权利要求、摘要和附图)中公开的所有特征可以由用于相同、相当或类似目的的替代特征代替。因此，除非另外明确说明，否则公开的每个特征仅是相当或类似特征的通用系列的一个示例。
[0118]
权利要求中未明确声明用于执行规定功能的“装置”或执行特定功能的步骤的任何元件，并不解释为35u.s.c
§
112中第6段规定的“装置”或“步骤”条款。特别地，在此的权利要求中施用“步骤”并不旨在援引35u.s.c
§
112第6段的规定。

技术特征：
1.一种治疗有需要的受试者的脑癌的方法，包括向有需要的受试者施用治疗有效量的含大麻素的植物细胞外囊泡(cpev)。2.根据权利要求1所述的方法，其中组合物通过吸入、鼻内、口服、静脉内、皮下或肌肉内施用。3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述cpev通过鼻内施用。4.根据权利要求1-3任一项所述的方法，其中所述施用包括使用选自由鼻内吸入器、鼻内喷雾装置、雾化器、喷雾器、定量吸入器(mdi)、加压定量吸入器、吹入器、单位剂量容器、泵、滴管、鼻喷雾瓶、挤压瓶和双向装置组成的组的鼻内递送装置施用cpev。5.根据权利要求1-4任一项所述的方法，进一步包括联合实施辅助癌症治疗方案。6.根据权利要求5所述的方法，其中所述辅助癌症治疗方案包括在施用cpev之前、期间或之后用辐射治疗哺乳动物。7.根据权利要求5所述的方法，其中所述辅助癌症治疗方案包含另外的化学治疗剂。8.一种组合物，包含cpev和药学上可接受的载体。9.根据权利要求8所述的组合物，其中所述药学上可接受的载体包含用于鼻内递送的赋形剂。10.一种装置，包括容器，其中cpev组合物放在所述容器内，以及与所述容器相连的喷嘴，所述喷嘴配置为插入到有需要的受试者的鼻孔中。11.一种治疗有需要的受试者的神经退行性疾病的方法，包括向有需要的受试者施用治疗有效量的含大麻素的植物细胞外囊泡(cpev)。12.根据权利要求11所述的方法，其中组合物通过吸入、鼻内、口服、静脉内、皮下或肌肉内施用。13.根据权利要求11所述的方法，其中所述神经退行性疾病包括中风、阿尔茨海默病、als、ms、帕金森病、创伤性脑损伤或衰老。14.一种治疗有需要的受试者的cns损伤的方法，包括向有需要的受试者施用治疗有效量的含大麻素的植物细胞外囊泡(cpev)。15.根据权利要求14所述的方法，其中组合物通过吸入、鼻内、口服、静脉内、皮下或肌肉内施用。16.一种治疗有需要的受试者的炎症病症的方法，包括向有需要的受试者施用治疗有效量的含大麻素的植物细胞外囊泡(cpev)。17.根据权利要求16所述的方法，其中组合物通过吸入、鼻内、口服、静脉内、皮下或肌肉内施用。18.一种增强受试者的cns功能的方法，包括向有需要的受试者施用治疗有效量的含大麻素的植物细胞外囊泡(cpev)。19.根据权利要求18所述的方法，其中组合物通过吸入、鼻内、口服、静脉内、皮下或肌肉内施用。20.一种制备cspev的方法，包括：从大麻属植物获得pev；和使pev负载外源性有效载荷。21.一种组合物，包含负载外源性有效载荷的cspev。
22.一种向受试者递送有效载荷的方法，包括向受试者施用有效量的权利要求21所述的组合物。23.根据权利要求22所述的方法，其中施用包括所述组合物的鼻内递送或胃肠外递送。24.根据权利要求23所述的方法，其中所述组合物通过吸入、鼻内、口服、静脉内、皮下或肌肉内施用。25.一种包括容器的装置，其中一定量的权利要求21所述的组合物放在所述容器内。26.根据权利要求25所述的装置，进一步包括与所述容器相连的喷嘴，所述喷嘴配置为插入到有需要的受试者的鼻孔中。27.根据权利要求1-7任一项所述的方法，其中所述cpev包含分别占总大麻素的69.1
±
2.1％、19.1
±
1.6％、6.5
±
0.54％、4.75
±
0.26％和0.5
±
0.3％的cbd-a、cbg-a、thc-a、cbd和thc。28.根据权利要求8所述的组合物，其中所述cpev包含分别占总大麻素的69.1
±
2.1％、19.1
±
1.6％、6.5
±
0.54％、4.75
±
0.26％和0.5
±
0.3％的cbd-a、cbg-a、thc-a、cbd和thc。29.根据权利要求11-19任一项所述的方法，其中所述cpev包含分别占总大麻素的69.1
±
2.1％、19.1
±
1.6％、6.5
±
0.54％、4.75
±
0.26％和0.5
±
0.3％的cbd-a、cbg-a、thc-a、cbd和thc。

技术总结
公开了一种使用植物细胞外囊泡(EV)作为载体将治疗分子递送到CNS的方法和组合物。证明了植物EV是比通过其他方法的递送更有效的载体。这些载体可用于治疗中枢神经系统疾病，例如癌症、损伤(例如TBI)、退行性病变(例如阿尔茨海默病和衰老)以及认知障碍(例如PTSD、抑郁症和焦虑症)。包括使用大麻来源的EV治疗大脑中的癌症和影响大脑中的前体细胞及分离EV的新数据。此外，公开了使用EV时对鼻内递送和口服递送效果的改进。口服递送效果的改进。


技术研发人员：H
受保护的技术使用者：佛罗里达大学研究基金会有限公司
技术研发日：2021.09.28
技术公布日：2023/8/16