一种组合物在制备治疗或预防心肌细胞纤维化的药物中的应用的制作方法

1.本发明涉及一种组合物及其药物制剂，特别是一种滴丸制剂，所述制剂具有治疗头痛、头晕、中风、视物昏花、健忘、失眠的效果，特别是具有治疗或预防心肌细胞纤维化的效果。


背景技术：

2.已知，许多中药具有理气活血、化瘀止痛的功效。如国家食品药品监督管理局国家药品标准ybz00432005-2009z公开的滴丸。
3.中国专利97105810.5公开了一种含有川芎、当归乙醚提取物的滴丸及其制备方法。其实施例公开制备工艺为：取川芎、当归粗粉各50％，混匀，用95％的乙醇作溶剂，使粗粉完全浸泡在乙醇中，浸渍24小时后，缓缓渗漉到渗漉液几乎近无色，收集渗漉液，再回收乙醇至无醇味，得到川芎、当归乙醇提取物；在常温下在乙醇提取物中加入等量乙醚；反复萃取3次，合并乙醚萃取液，再在60℃以下减压回收乙醚至无乙醚味，得到川芎、当归等量的混合的乙醚提取物。本发明在此基础上，经过多年研究，研究发现了一种新的组合物，无副作用，疗效优良。
4.本发明的组合物中含有阿魏酸，阿魏酸(ferulic acid)的化学名称为4羟基3甲氧基肉桂酸，是桂皮酸(又称肉桂酸，3苯基2丙烯酸，分子结构)的衍生物之一。阿魏酸(阿魏酸钠)具有抗血小板聚集，抑制血小板5-羟色胺释放，抑制血小板血栓素a2(txa2)的生成，增强前列腺素活性，镇痛，缓解血管痉挛等作用。是生产用于治疗心脑血管疾病及白细胞减少等症药品的基本原料。
5.本发明的组合物中还含有藁本内酯，藁本内酯，别名东当归酞内酯，是中药伞形科植物当归挥发油的主要活性成分。藁本内酯具有解痉，平喘，镇静作用，能改善微循环，松弛平滑肌，抑菌，提高机体免疫调节功能。
6.本发明研究了阿魏酸和藁本内酯各自以及联合应用的特性，发现两者分别具有舒张血管作用，且两者合用，具有协同增效作用，这在现有文献中尚无报道。本发明以阿魏酸和藁本内酯组合进行疗效研究，意外发现，两者具有协同增效作用，为此提供含有阿魏酸和藁本内酯组合的药物组合物，进一步的研究发现，根据该组合，可以增加其他成份如：洋川芎内酯i，(-)-芹菜子烯交酯，以及洋川芎内酯h，以增加疗效，更进一步的研究发现，增加丁苯酞，亚油酸，油酸，硬脂酸，棕榈酸，花生酸后，疗效更加显著，本发明发现这些组分的组合，不但具有协同增效作用，还具有新的用途，本发明的药物制剂，去除了苦味成份，减少了药物用量，各组分明确清晰，各司其职，溶解性好，稳定性好，口感好，特别适合口腔含服，以及中老年人服用。


技术实现要素：

7.本发明提供一种组合物，所述组合物含有阿魏酸和藁本内酯，两者重量比例如下：
含有阿魏酸和藁本内酯，两者重量比例为：
8.阿魏酸：z-藁本内酯＝1：4-10，或阿魏酸：z-藁本内酯＝1：4，或阿魏酸：z-藁本内酯＝1：10，或阿魏酸：z-藁本内酯＝1：9.43。
9.本发明所述的组合物，还含有洋川芎内酯i，(-)-芹菜子烯交酯，以及洋川芎内酯h，各组分重量百分比如下：
10.组分百分含量％z-藁本内酯16-19洋川芎内酯i1-3(-)-芹菜子烯交酯5-8阿魏酸1-3洋川芎内酯h2-4
11.其余为其他组分。
12.本发明所述的组合物，其中，各组分的重量百分比如下：
13.组分百分含量％z-藁本内酯17.26洋川芎内酯i1.84(-)-芹菜子烯交酯6.49阿魏酸1.83洋川芎内酯h2.61
14.其余为其他组分。
15.本发明所述的组合物，各组分的重量百分比如下：
16.组分百分含量％z-藁本内酯16-19洋川芎内酯i1-3(-)-芹菜子烯交酯5-8阿魏酸1-3洋川芎内酯h2-4丁苯酞0.5-0.9亚油酸16-19油酸3-5硬脂酸4-7棕榈酸0.5-1花生酸0.1-0.2
17.其余为药用辅料。
18.本发明所述的组合物，各组分的重量百分比如下：
19.组分百分含量％z-藁本内酯17.26洋川芎内酯i1.84
(-)-芹菜子烯交酯6.49阿魏酸1.83洋川芎内酯h2.61丁苯酞0.71亚油酸17.65油酸3.80硬脂酸5.27棕榈酸0.74花生酸0.12
20.其余为药用辅料，如糖粉或者聚乙二醇。
21.本发明所述的组合物，其中，各组分的结构式如下：
22.assafoetida l.、川芎ligusticum chuanxiong hort.根茎，石松科植物卷柏状石松lycopodium selago l.全草，木贼科植物木贼equisetum hiemale l.全草，毛茛科植物升麻cimicifuga foetida l.根茎，禾木科植物稻oryza sativa l.种皮，百合科植物洋葱allium cepa l.根、球茎、叶，十字花科植物莱菔raphanus sativus l.根，紫葳科植物梓树catalpa ovata g.don树皮，菊科植物白花春黄菊anthemis nobilis l.花，紫茉莉科植物光叶子花样bougainvillea glabrachoisy根等，因此，本发明所述阿魏酸可以通过对上述中药植物进行提取得到。
36.如富含z-藁本内酯的中药提取物，提取的中药植物来源有：中药伞形科植物当归，川芎ligusticum chuanxiong，东当归angelica acutiloba，辽藁本ligusticum jeholense，欧当归levisticum officinale，药用蛇床cnidium officinale等，因此，本发明所述z-藁本内酯可以通过对上述中药植物进行提取得到。
37.将上述富含阿魏酸的中药提取物和富含z-藁本内酯的中药提取物按本发明的比例混合，即可得到本发明组合物，含有其余组分的本发明组合物也可按类似或同样的方法制备得到，如取它们的单体或含有它们的提取物，按本发明所确定的比例混合得到，混合的方法均为物理混合，混合后即为药物活性物质，该活性物质也即本发明组合物，以本发明组合物为药物活性物质经过进一步加工，可制备成适合服用的药物制剂，如滴丸，也可以直接用来口服。
38.对本发明组合物的主要成份进行了研究，其中，组分中的阿魏酸(fa)对去甲肾上腺素引起的血管收缩具有舒张作用，其舒张作用与血管平滑肌细胞上外钙内流有关。阿魏酸还可减少无钙高钾k-h液中ne引起的收缩，与肌浆网储存钙释放有关。其中，组分中的z-藁本内酯(lg)对去甲肾上腺素引起的血管收缩具有舒张作用，其舒张作用与no信号通路有关，与cgmp-l-name途径有关。本发明对阿魏酸(fa)与z-藁本内酯(lg)联合使用进行了研究，联合使用过程中，当阿魏酸(fa)浓度为44μm、88μm、132μm时，藁本内酯(lg)浓度为70μm、140μm、210μm时，阿魏酸与z-藁本内酯(lg)浓度为44μm-70μm、88μm-140μm、132m-210μm时对去甲肾上腺素引起的血管收缩的抑制作用，ne引起的最大收缩率为100％。
39.利用概率和法(q值法)计算联合后的效果将所得数据以下述公式进行计算，得到q值，则q》1.15表示二者配伍后具有协同作用，q《0.85表示二者拮抗，处于两者之间则表示二者配伍后作用相加。
[0040][0041]
其中ea和eb分别代表药物单用时的效果，e(a+b)代表二者合用后实际的效果，ea+eb-ea
×
eb代表二者合用理论上应该得到的效果。
[0042]
经q值计算，
[0043]
fa-lg(44μm-70μm、88μm-140μm、132μm-210μm)联合后的q值依次为2.94、1.74、2.61，均大于1.15，提示阿魏酸与z-藁本内酯具有良好的协同效果。
[0044]
fa与lg联合后的舒张血管作用具有浓度依赖性，其舒张血管作用与肌浆网上内钙的释放和细胞外钙的内流有关。
[0045]
研究显示，阿魏酸(fa)、z-藁本内酯(lg)均具有较强的舒张胸主动脉血管的作用。其舒张作用可被血红素加氧酶-1(ho-1)抑制剂znpp抑制，其舒张作用与co信号分子有关。
对于血压的调节作用表现为：给予fa后，shr大鼠血压在1h时达到最低；fa、lt及fa-lt均与1h降压作用达到最低，fa-lt的降压作用大于fa和lt。shr大鼠的血压在1h和4h都下降，4h达到最低。超声心动实验结果表明fa，lt及其联合可以抑制shr的心肌肥厚，保护心脏。本发明进一步使用本发明滴丸进行研究，发现，相较于阿魏酸单体给药，本发明滴丸给药后，避免了阿魏酸的肝肠循环，提高了阿魏酸的有效浓度，进而提高阿魏酸的生物利用度。
[0046]
本研究进一步发现，阿魏酸、z-藁本内酯、(-)-芹菜子烯交酯、洋川芎内酯i、洋川芎内酯h是本发明滴丸发挥药效作用的主要物质。
[0047]
本发明滴丸具有多种用途，包括，本发明滴丸具有扩张血管作用，具有抗炎作用，具有治疗慢性脑缺血的作用。本发明滴丸具有钙离子拮抗作用；具有神经改善作用，具有降压作用。
[0048]
本发明滴丸对高血压引起的心肌肥厚有一定的抑制作用，可以作为高血压伴心肌肥厚病症的潜在药物进行研究，本发明滴丸具有良好的心血管和脑神经保护作用，可用于治疗心血管和脑神经损伤的病人。
[0049]
对本发明滴丸灌胃给药后大鼠血样检测，通过给药血样的bpi图与空白脑组织样品、本发明滴丸提取液的bpi图比较，可以看出，阿魏酸、洋川芎内酯i/h、洋川芎内酯a和z-藁本内酯均为本发明滴丸给药后的入血成分。这些成分为本发明滴丸发挥药效的有效成分，
[0050]
对本发明滴丸灌胃给药后大鼠脑组织检测，通过脑组织样品的bpi图与空白脑组织样品、本发明滴丸提取液的bpi图比较，得出本发明滴丸入脑成分主要为洋川芎内酯i/h和z-藁本内酯，这两种成分也是本发明滴丸中含量较多的苯酞类成分，表明这两种成分可以透过血脑屏障。
[0051]
本发明发现，本发明滴丸中具有ca2+拮抗活性的3种有效成分，包括阿魏酸，洋川芎内酯i/h，z-藁本内酯。
[0052]
本发明发现，本发明滴丸中具有调控atp作用的3种有效成分，包括阿魏酸，洋川芎内酯i/h，z-藁本内酯。
[0053]
本发明发现，本发明滴丸中具有抗氧化作用的成分，阿魏酸和z-藁本内酯能显著降低mda含量，并剂量依赖性的增加no、nos和sod的活性。
[0054]
本发明发现，本发明滴丸可调节47个生物学靶点，这些靶点名称如下：ptgs2，prkaca,ptgs1,cdk2,ccna2,esr2,esr1,ca1,hba2,ca2,oprm1,oprk1,pde4d,oprd1,scn5a,pgr,hsd17b1,ar,gltp,lcn2,ache,nr3c2,adrb2,adrb1,prss1,polk,adra2a,htr2a,drd2,drd1,ncoa1,chrm1,nos2,pla2g1b,adra1a,pde4b,ca4,nos3,ifng,gabbr1,abcc8,gabra1,gabra5,hrh1,adra2b,dhfrp1,tuba1a。
[0055]
以下通过试验数据，表格，附图，进一步说明本发明的有益效果。
[0056]
本发明人以本发明实施例13滴丸为研究药物，进行了药效学研究，有关研究结果如下：
[0057]
试验1.本发明滴丸的体外舒血管作用研究
[0058]
本发明滴丸(本发明实施例13滴丸)，由天津中新药业股份有限公司第六中药厂提供。
[0059]
实验动物，sprague-dawley大鼠，雄性，体重为200
±
20g，由军事医学科学院实验
动物中心提供；许可证号：scxk-2007-004，实验用大鼠于25℃条件下适应性饲养一周以后进行实验。
[0060]
供试药物的制备：将本发明滴丸在研钵中研碎，准确称取4.0g于10ml容量瓶中，加去离子水定容，超声10min后放至室温，4℃保存备用。
[0061]
统计分析，应用生物机能实验系统和spss 20两个软件完成。前者主要是采集图像数据，记录血管张力变化；后者用于数据分析，各组之间均数采用独立样本t检验，以p《0.05为有统计学意义。
[0062]
图11不同浓度本发明滴丸对去甲肾上腺素预收缩血管环的影响(内皮完整e+，去内皮e-)(与去内皮相比，*p《0.05**p《0.01)(n＝5).
[0063]
结论，通过体外舒血管的实验方法研究，结果表明：本发明滴丸能够引起胸主动脉血管的舒张。
[0064]
试验2.本发明滴丸急性降血压作用研究
[0065]
本发明滴丸(本发明实施例13滴丸)，由天津中新药业股份有限公司第六中药厂提供。
[0066]
按临床给药剂量，给shr大鼠及wistar大鼠口服本发明滴丸(5.25g/kg)，测定6h的急性降压作用，结果如下：
[0067]
图12口服本发明滴丸后自发性高血压大鼠的血压随时间变化.
[0068]
图13口服本发明滴丸6h内自发性高血压大鼠的收缩压变化.
[0069]
结论，给予本发明滴丸后，6小时内wistar大鼠的收缩压没有明显变化，shr大鼠的血压在1小时和4小时都下降，4小时达到最低。提示本发明滴丸对shr的血压有一定影响。
[0070]
试验3.本发明滴丸给药后血清中nos含量测定：
[0071]
本发明滴丸(本发明实施例13滴丸)，由天津中新药业股份有限公司第六中药厂提供。
[0072]
分组：本发明滴丸组，模型组m，空白对照组wky组给药8周后，于末次给药、测血压后5％乌巴比妥钠麻醉(0.6g/kg)，股主动脉取血处死动物。取4ml以上血3000rpm低温离心机离心30min，分离血清，血清检测前-80℃冻存，以备测定血清no，nos，co含量。
[0073]
图14本发明滴丸组shr大鼠血清中nos含量.
[0074]
图15本发明滴丸组shr大鼠血清中co含量.
[0075]
图16本发明滴丸组shr大鼠肺指数
[0076]
结论，给予本发明滴丸后，一氧nos的含量显著高于模型组(p《0.05，与m比较)，此与空白对照组wky组具有相同的趋势(p《0.01，与m比较)，说明本发明滴丸是通过增加nos的含量达到舒张血管，进而起到降压的作用。
[0077]
试验4.本发明滴丸对老年痴呆的治疗作用研究
[0078]
本发明滴丸(本发明实施例13滴丸)，由天津中新药业股份有限公司第六中药厂提供。
[0079]
图17口服本发明滴丸后ad大鼠的潜伏期
[0080]
图18口服本发明滴丸后ad大鼠的穿越平台次数
[0081]
图19本发明滴丸对d-gal诱导认知障碍大鼠血浆中sod含量的影响.
[0082]
结论，在空间探索实验中，空白组、脑复康给药组、本发明低剂量组、本发明高剂量
组的潜伏期均较模型组小，且空白组、本发明低剂量组、本发明高剂量组具有显著性差异(p《0.05,p《0.01,p《0.01)。空白组、脑复康给药组、本发明低剂量组、本发明高剂量组穿过平台的次数均大于模型组，且空白组、本发明低剂量组均较模型组具有显著性差异(p《0.05)。表明了本发明滴丸可减少d-半乳糖造模大鼠的潜伏期，提高其认知水平。通过对d-半乳糖致衰老大鼠血清中sod含量进行测定，本发明低剂量组、本发明高剂量组血清中sod含量显著高于模型组，提示本发明滴丸可能通过抗氧化应激作用，抵抗d-半乳糖引起的衰老损伤。
[0083]
海马区形态学观察
[0084]
大鼠海马ca1区结构正常，神经毯排列紧密且整齐，层次清楚，有4-6层细胞，细胞核呈圆形，核仁清晰。模型组大鼠海马ca1区病变严重，神经元排列散乱疏松，锥体细胞带不完整，细胞数量明显减少，核固缩明显，海马cal区病变较模型组明显改善，结构清晰，细胞排列较整齐，细胞核固缩不明显，其病变较模型组明显减轻，几乎与空白对照没有差异，显示本发明滴丸可明显改善模型大鼠脑组织的病理变化。
[0085]
在另一项ad动物试验中，进行了以下旷场实验，
[0086]
表1小鼠旷场(means
±
se，n＝10)
[0087][0088]
注：
#
表示与对照组比较p《0.05；
*
表示与模型对照组比较p《0.05。
[0089]
使用本发明滴丸和多奈哌齐做对比，模型对照组小鼠活动总距离和直立次数较对照组显著减少(p《0.05)，活动总距离反映小鼠自主活动能力，直立次数则反映小鼠对新奇环境的探索能力，表明模型对照组小鼠自主活动能力和探索能力下降，呈现类似抑郁症症状。阳性对照药多奈哌齐和本发明滴丸三个剂量均可不同程度的增加小鼠活动总距离和直立次数，提示本发明滴丸可以改善ad模型动物类抑郁症症状。
[0090]
试验5.本发明滴丸对脑缺血中风的治疗作用研究
[0091]
实验药物
[0092]
本发明滴丸(本发明实施例13滴丸)，由天津中新药业股份有限公司第六中药厂提供。
[0093]
供试药物制备，将本发明滴丸研碎，称取粉末，用5％的cmc-na溶解至一定浓度。
[0094]
分组及给药，1％苯巴比妥钠0.3ml(1ml/kg)腹腔麻醉，采用俯卧位固定大鼠于恒温手术台，无菌头顶部切口，暴露第一颈椎横突翼小孔，将电烧针插入翼小孔，烧灼双侧椎动脉，使之永久闭塞，缝合伤口，正常饲养。24h后再仰卧位，固定浅麻大鼠于恒温手术台，无
菌条件下，在喉头与胸骨间作3cm正中切口，分离双侧颈总动脉，应用手术缝合线打活结阻断双侧总动脉血液使脑缺血10min，松开活结造成大鼠全脑缺血再灌注模型。
[0095]
大鼠60只，分为6组，分别为假手术组、模型组、本发明滴丸高剂量组(bfmh，1日2次的30倍，)、本发明滴丸中剂量组(bfmm，成人剂量15倍)、本发明滴丸低剂量组(bfml，成人剂量5倍)、阳性药组(尼莫地平用量为折算后临床有效量(2mg/100g体重)，稀释后灌胃给药，连续给药7天。(本实验中尼莫地平用量也为折算后的临床有效量1.2mg/100g体重)。
[0096]
样本采集
[0097]
给药72h后，于末次给药、测血压后5％乌巴比妥钠麻醉(0.6g/kg)，股主动脉取血处死动物。取4ml以上血3000rpm低温离心机离心30min，分离血清，血清检测前-80℃冻存，以备测定血清no，nos，sod和h2s含量。脑于中性福尔马林中保存用于病理切片，海马及皮层液氮保存用于生化指标检测。
[0098]
观察指标及方法
[0099]
行为学测定
[0100]
大鼠完成手术后及牺牲前,皆会做神经学评分。将大鼠尾巴抓起离桌面30公分，观察大鼠前肢的延展性与身体旋转程度。评分标准：0分：正常,没有任何神经缺失；1分：手术对侧的前肢轻微往手术侧弯曲；2分：手术对侧的前肢完全往手术侧弯曲；3分：身体轻微往正常侧旋转；4分：身体完全往正常侧旋转；5分：完全不动。
[0101]
脑海马形态学观察及检测方法
[0102]
he染色后观察大脑海马ca1区组织病理形态变化。
[0103]
血清gsh、gpx、sod、mda和cat的检测
[0104]
血清gsh、gpx、sod、mda和cat的检测均严格按照试剂盒的说明进行。统计学处理，利用spss20.0统计分析处理软件，对测量参数参数进行统计学分析，实验数据采用双侧t检验进行比较，p《0.05则表示具有显著性差异。
[0105]
图20各组大鼠的神经功能学评分(*p《0.05,取材前与造模前比较)
[0106]
图21各组给药大鼠的死亡率(每组10只大鼠)
[0107]
试验6、本发明滴丸对shr心肌保护作用研究
[0108]
本研究利用shr大鼠超声心动图检查方法，获得大鼠心脏的各个切面与多项参数，评价其结构与功能，为本发明滴丸对于心血管疾病的治疗和预防提供依据。试验结果见图22shr大鼠心脏组织形态
[0109]
结论：研究结果表明本发明实施例13组合物对shr的血压的降压作用效果最优，且对保护心肌细胞预防心肌细胞纤维化的作用最优。
[0110]
wky正常大鼠组:心脏结构清晰，形态正常，心肌细胞排列整齐，横纹清晰，细胞核明显，未见细胞水肿。
[0111]
m模型大鼠组:心脏结构清晰，形态正常，心肌细胞排列整齐伴多发灶状及片状坏死，部分心肌细胞之间可见条状分布排列的心肌成纤维细胞，坏死区成纤维细胞增生，间质少量慢性炎细胞浸润，血管扩张充血。
[0112]
val阳性药物缬沙坦组:心脏结构清晰，形态正常，心肌细胞排列规整伴部分水肿，多发灶性坏死，部分心肌细胞之间可见条状分布排列的心肌成纤维细胞，坏死区成纤维细胞增生，间质少量慢性炎细胞浸润，血管扩张充血。
[0113]
ft本发明滴丸组：心脏结构清晰，形态正常，心肌细胞排列规整伴部分水肿，脂肪变性、粘液变及多发点状和小灶性坏死，坏死区成纤维细胞增生，间质少量慢性炎细胞浸润，血管扩张充血。
[0114]
在本发明滴丸抗脑缺血研究中，采用颈总动脉结扎的方法建立慢性脑缺血中风模型，利用longa/bederson5分法进行神经功能评分，试剂盒测定氧化应激指标，结果证明本发明滴丸对脑缺血损伤具有一定的治疗作用，其作用机制可能与抗氧化应激有关。
[0115]
试验中的中英文及缩写对照表
[0116][0117]
附图说明：
[0118]
图1、fa(1-44μm、2-88μm、3-132μm)、lg(1-70μm、2-140μm、3-210μm)和fa-lg(1-44μm-70μm、2-88μm-140μm、3-132μm-210μm)对去甲肾上腺素预收缩血管环的影响(内皮完整e+，去内皮e-)(与去内皮相比，*p《0.05**p《0.01)(n＝5)。
[0119]
图2、低、中、高浓度阿魏酸、z-藁本内酯、阿魏酸-z-藁本内酯对去氯化钾预收缩血管环的影响(内皮完整e+，去内皮e-)(与去内皮相比，*p《0.05**p《0.01)(n＝5)。
[0120]
图3、不同浓度阿魏酸-z-藁本内酯联合对去甲肾上腺素预收缩血管环的影响(内皮完整e+，去内皮e-)(与去内皮相比，*p《0.05**p《0.01)(n＝5)。
[0121]
图4、不同浓度阿魏酸-z-藁本内酯对去甲肾上腺素预收缩血管环的影响(内皮完整e+，去内皮e-)(与去内皮相比，*p《0.05**p《0.01)(n＝5)fa与lg联合后的舒血管作用为非内皮依赖性。
[0122]
图5、pag 10-4m、l-name 10-4m、odq 10-6m、znpp 10-5m对44μm-70μm浓度阿魏酸-z-藁本内酯(a)、88μm-140μm浓度阿魏酸-z-藁本内酯(b)引起的内皮完整血管环舒张作用的影响(与空白相比，*p《0.05**p《0.01)(n＝5)。
[0123]
图6、钾离子通道抑制剂对44μm-70μm浓度阿魏酸-z-藁本内酯(a)、88μm-140μm浓度阿魏酸-z-藁本内酯(b)引起的内皮完整血管环舒张作用的影响(与空白相比，*p《0.05**p《0.01)(n＝5)。
[0124]
图7、不同浓度阿魏酸-z-藁本内酯对去甲肾上腺素预收缩血管环的影响(内皮完整e+，去内皮e-)(与去内皮相比，*p《0.05**p《0.01)(n＝5)。
[0125]
图8、阿魏酸-z-藁本内酯对cacl2引起的去内皮血管环剂量依赖性收缩曲线的影响(与空白相比，*p《0.05**p《0.01)(n＝5)。
[0126]
图9、tnf-α诱导的模型组(m)与空白组(c)相比，nf-κb的抑制率显著下降(###p《0.001)，阳性药(dex)组与模型组相比，可以显著抑制nf-κb
·
的表达含量(***p《0.001)，本发明滴丸给药组与模型组相比，可以显著抑制nf-κb的表达(***p《0.001，**p《0.01)并且呈现浓度依赖性。
[0127]
图10、ionomycin和12-myristate-13-acetate诱导的模型组(m)与空白组(c)相比，钙离子相关因子表达显著升高(###p《0.001)，说明造模成功，阳性药(nimodipine)组与模型组相比，可以显著抑制ca2+表达的含量(*p《0.01)，本发明滴丸给药组与模型组相比，可以显著抑制ca2+的表达(**p《0.005)并且呈现浓度依赖性。
[0128]
图11、不同浓度本发明滴丸对去甲肾上腺素预收缩血管环的影响。
[0129]
图12、口服本发明滴丸后自发性高血压大鼠的血压随时间变化。
[0130]
图13、口服本发明滴丸6h内自发性高血压大鼠的收缩压变化。
[0131]
图14、本发明滴丸组shr大鼠血清中nos含量。
[0132]
图15、本发明滴丸组shr大鼠血清中co含量。
[0133]
图16、本发明滴丸组shr大鼠肺指数。
[0134]
图17、口服本发明滴丸后ad大鼠的潜伏期。
[0135]
图18、口服本发明滴丸后ad大鼠的穿越平台次数。
[0136]
图19、本发明滴丸对d-gal诱导认知障碍大鼠血浆中sod含量的影响。
[0137]
图20、各组大鼠的神经功能学评分。
[0138]
图21、各组给药大鼠的死亡率(每组10只大鼠)。
[0139]
图22、shr大鼠心脏组织形态
具体实施方式：
[0140]
以下通过实施例进一步说明本发明，但不作为对本发明的限制。
[0141]
实施例1
[0142]
组合物，含有阿魏酸和z-藁本内酯，两者重量比例为：
[0143]
阿魏酸：z-藁本内酯＝1：4。
[0144]
该组合物是由阿魏酸和z-藁本内酯混合得到，或由含有阿魏酸的中药提取物和含有z-藁本内酯的中药提取物混合得到，或由当归和川芎共同提取得到。
[0145]
实施例2
[0146]
组合物，含有阿魏酸和z-藁本内酯，两者重量比例为：
[0147]
阿魏酸：z-藁本内酯＝1：5
[0148]
该组合物是由阿魏酸和z-藁本内酯混合得到，或由含有阿魏酸的中药提取物和含有z-藁本内酯的中药提取物混合得到，或由当归和川芎共同提取得到。
[0149]
实施例3
[0150]
组合物，含有阿魏酸和z-藁本内酯，两者重量比例为：
[0151]
阿魏酸：z-藁本内酯＝1：6
[0152]
该组合物是由阿魏酸和z-藁本内酯混合得到，或由含有阿魏酸的中药提取物和含有z-藁本内酯的中药提取物混合得到，或由当归和川芎共同提取得到。
[0153]
实施例4
[0154]
组合物，含有阿魏酸和z-藁本内酯，两者重量比例为：
[0155]
阿魏酸：z-藁本内酯＝1：7
[0156]
该组合物是由阿魏酸和z-藁本内酯混合得到，或由含有阿魏酸的中药提取物和含有z-藁本内酯的中药提取物混合得到，或由当归和川芎共同提取得到。
[0157]
实施例5
[0158]
组合物，含有阿魏酸和z-藁本内酯，两者重量比例为：
[0159]
阿魏酸：z-藁本内酯＝1：8
[0160]
该组合物是由阿魏酸和z-藁本内酯混合得到，或由含有阿魏酸的中药提取物和含有z-藁本内酯的中药提取物混合得到，或由当归和川芎共同提取得到。
[0161]
实施例6
[0162]
组合物，含有阿魏酸和z-藁本内酯，两者重量比例为：
[0163]
阿魏酸：藁本内酯＝1：9.43
[0164]
该组合物是由阿魏酸和z-藁本内酯混合得到，或由含有阿魏酸的中药提取物和含有z-藁本内酯的中药提取物混合得到，或由当归和川芎共同提取得到。
[0165]
实施例7
[0166]
组合物，含有阿魏酸和z-藁本内酯，两者重量比例为：
[0167]
阿魏酸：藁本内酯＝1：10
[0168]
该组合物是由阿魏酸和z-藁本内酯混合得到，或由含有阿魏酸的中药提取物和含有z-藁本内酯的中药提取物混合得到，或由当归和川芎共同提取得到。
[0169]
实施例8
[0170]
组合物，其中，各组分的重量百分比如下：
[0171]
组分百分含量％z-藁本内酯17.26洋川芎内酯i1.84(-)-芹菜子烯交酯6.49阿魏酸1.83
洋川芎内酯h2.61
[0172]
其余为其他组分。
[0173]
该组合物是由上述组分混合得到，或由含有上述组分的中药提取物混合得到，或由当归和川芎共同提取得到。
[0174]
实施例9
[0175]
组合物，各组分的重量百分比如下：
[0176][0177][0178]
其余为糖粉。
[0179]
该组合物是由上述组分混合得到。
[0180]
实施例10
[0181]
组合物，各组分的重量百分比如下：
[0182]
组分百分含量％z-藁本内酯17.26洋川芎内酯i1.84(-)-芹菜子烯交酯6.49阿魏酸1.83洋川芎内酯h2.61丁苯酞0.71亚油酸17.65油酸3.80硬脂酸5.27棕榈酸0.74
花生酸0.12
[0183]
其余为聚乙二醇6000。
[0184]
该组合物是由上述组分混合得到。
[0185]
实施例11
[0186]
组合物，各组分的重量百分比如下：
[0187][0188][0189]
其余为聚乙二醇6000。
[0190]
该组合物是由含有上述组分的中药提取物混合得到，或由当归和川芎共同提取得到。
[0191]
实施例12
[0192]
组合物，各组分的重量百分比如下：
[0193]
组分百分含量％z-藁本内酯19洋川芎内酯i3(-)-芹菜子烯交酯8阿魏酸3洋川芎内酯h4丁苯酞0.9亚油酸19油酸5硬脂酸7棕榈酸1花生酸0.2
[0194]
其余为糖粉。
[0195]
该组合物是由含有上述组分的中药提取物混合得到，或由当归和川芎共同提取得到。
[0196]
实施例13
[0197]
用实施例9-12任意一种组合物为原料制备的滴丸制剂，所述滴丸制剂采用实施例9-12任意一种组合物作为药物活性物质，通过制剂学常规技术手段制备而成，如将药物活性物质添加到溶化的滴丸基质聚乙二醇6000中，通过滴制到冷的液体石蜡中得到滴丸。
[0198]
每一粒滴丸的重量为20mg，其中每一粒滴丸中含有实施例9-12任意一种组合物的重量为5mg，优选实施例10的组合物。
[0199]
实施例14
[0200]
用实施例11的组合物为原料制备的片剂，采用实施例11的组合物作为药物活性物质，通过制剂学常规技术手段制备而成，如加入淀粉，乙醇作为润湿剂，制粒，压片，包衣即得。
[0201]
实施例15
[0202]
用实施例11的组合物为原料制备的胶囊剂，采用实施例11的组合物作为药物活性物质，通过制剂学常规技术手段制备而成，如加入淀粉，乙醇作为润湿剂，制粒，装胶囊，即得。
[0203]
实施例16
[0204]
用实施例11的组合物为原料制备的颗粒剂，采用实施例11的组合物作为药物活性物质，通过制剂学常规技术手段制备而成，如加入糖粉，乙醇作为润湿剂，制粒，包装即得。
[0205]
实施例17
[0206]
用实施例9的组合物为原料制备的滴丸制剂，所述滴丸制剂采用实施例9的组合物作为药物活性物质，通过制剂学常规技术手段制备而成，如将药物活性物质添加到溶化的滴丸基质聚乙二醇6000中，通过滴制到冷的液体甲基硅油中得到滴丸。每一粒滴丸的重量为50mg，其中每一粒滴丸中含有实施例9组合物的重量为25mg。
[0207]
实施例18
[0208]
用实施例10的组合物为原料制备的滴丸制剂，所述滴丸制剂采用实施例10的组合物作为药物活性物质，通过制剂学常规技术手段制备而成，如将药物活性物质添加到溶化的滴丸基质聚乙二醇6000中，通过滴制到冷的液体甲基硅油中得到滴丸。每一粒滴丸的重量为40mg，其中每一粒滴丸中含有实施例10组合物的重量为20mg。
[0209]
实施例19
[0210]
用实施例1-7任意一种组合物为原料制备的滴丸制剂，所述滴丸制剂采用实施例1-7任意一种组合物作为药物活性物质，通过制剂学常规技术手段制备而成，如将药物活性物质添加到溶化的滴丸基质聚乙二醇6000中，通过滴制到冷的液体甲基硅油中得到滴丸。每一粒滴丸的重量为30mg，其中每一粒滴丸中含有实施例1-7任意一种组合物的重量为10mg。

技术特征：
1.一种组合物在制备治疗或预防心肌细胞纤维化的药物中的应用，其特征在于，所述组合物含有阿魏酸和藁本内酯，两者重量比例为：阿魏酸：z-藁本内酯＝1：4-10。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述组合物，其中，阿魏酸：z-藁本内酯＝1：4，或1：10，或1：9.43。3.根据权利要求1-2任何一项所述的应用，其特征在于，所述组合物，还含有洋川芎内酯i，(-)-芹菜子烯交酯，以及洋川芎内酯h，各组分重量百分比如下：组分百分含量％z-藁本内酯16-19洋川芎内酯i1-3(-)-芹菜子烯交酯5-8阿魏酸1-3洋川芎内酯h2-4。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述组合物，其中，各组分的重量百分比如下：组分百分含量％z-藁本内酯17.26洋川芎内酯i1.84(-)-芹菜子烯交酯6.49阿魏酸1.83洋川芎内酯h2.61。5.权利要求3所述应用，其特征在于，所述组合物，还含有以下组分：丁苯酞，亚油酸，油酸，硬脂酸，棕榈酸，花生酸，各组分的重量百分比如下：
其余为药用辅料。6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述组合物，各组分的重量百分比如下：组分百分含量％z-藁本内酯17.26洋川芎内酯i1.84(-)-芹菜子烯交酯6.49阿魏酸1.83洋川芎内酯h2.61丁苯酞0.71亚油酸17.65油酸3.80硬脂酸5.27棕榈酸0.74花生酸0.12其余为药用辅料。7.根据权利要求5，6任何一项所述的应用，其特征在于，所述组合物中药用辅料选自糖粉和聚乙二醇。8.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物是用权利要求1-7任何一项中所述的组合物作为药物活性成份制备而成的药物制剂。9.根据权利要求8所述的应用，其中所述的药物制剂，为口服药物制剂，选自片剂，胶囊剂，颗粒剂，口服液，丸剂，滴丸剂。10.根据权利要求9所述的应用，其中，所述口服药物制剂为滴丸剂。

技术总结
本发明涉及一种药物组合物的应用，所述应用包括治疗或预防心肌细胞纤维化；所述组合物含有阿魏酸和藁本内酯，两者重量比例为：阿魏酸：Z-藁本内酯＝1：4-10，或阿魏酸：Z-藁本内酯＝1：4，或阿魏酸：Z-藁本内酯＝1：10，或阿魏酸：Z-藁本内酯＝1：9.43，所述组合物中，还可含有洋川芎内酯I，(-)-芹菜子烯交酯，以及洋川芎内酯H，各组分重量百分比如下：组分百分含量％Z-藁本内酯16-19洋川芎内酯I1-3(-)-芹菜子烯交酯5-8阿魏酸1-3洋川芎内酯H2-444


技术研发人员：周鸿 刘丹 刘彤 王金磊
受保护的技术使用者：天津中新药业集团股份有限公司第六中药厂
技术研发日：2022.02.11
技术公布日：2023/8/24