一种弱酸环境增强磁共振横向弛豫信号的肿瘤造影剂及其制备方法和应用

1.本发明属于生物医学工程技术领域，具体涉及一种弱酸环境增强磁共振横向弛豫信号的肿瘤造影剂及其制备方法和应用。


背景技术：

2.磁共振成像是当前肿瘤影像学诊断的重要方法，其中，造影增强剂在提高肿瘤组织与正常组织间的对比度、缩短成像时间等方面起到关键作用。当前磁共振造影剂可分为即纵向弛豫(t1)和横向弛豫(t2)两种成像模式，其中以超顺磁性纳米颗粒(spion)为代表的t2造影增强剂，因其极高的生物相容性和较好的自旋-自旋弛豫增强效果，在临床肿瘤诊断中得到了广泛的应用。
3.基于spion的t2肿瘤成像其成像效果取决于三个方面：spion在肿瘤中的分布、spion的横向弛豫率r2(1/t2)、以及spion在肿瘤组织/正常组织中的衬度比。如spion在肿瘤中的分布受制于诸多影响因素，包括但不限于粒径、表面亲水配体的组成等。根据epr效应，肿瘤血管的高通透性可以使20～200nm粒径的纳米颗粒可以穿透肿瘤血管集中于肿瘤组织。但是临床研究发现，单纯的epr效应只能提高纳米颗粒在肿瘤血管中的集中。由于肿瘤组织的瘤内间质压很大，肿瘤组织指向血管方向形成正压，只有粒径小于50nm的纳米颗粒才能有效穿透肿瘤血管进入肿瘤组织内部，且粒径越小，穿透肿瘤组织的深度就越深。
4.除了血管通透性大，肿瘤组织还有一个普遍存在的特点就是warburg effect，所以肿瘤组织具有比正常组织和血液(ph＝7.35～7.45)都偏低的ph值(ph＝6.5～6.8)。目前相关ph敏感的聚合物已经有一定的报道，但是大部分为阳离子型ph敏感聚合物，而常见的阴离子型ph敏感聚合物的响应ph值一般都低于6.0，并不太适用于响应肿瘤的微环境。
5.spion的横向弛豫率r2(1/t2)也同样受多重因素影响，例如spion的粒径、spion的形状、结晶度、元素组成、以及spion团簇体的尺寸。尽管spion团簇体具有较高的横向弛豫率r2，但是这样的造影剂从注入体内一直到被代谢出体外，其较高的r2就一直保持着常开的状态(always on)，因此spion对肿瘤组织的t2显影还受到其在正常组织/肿瘤组织中衬度比的影响。而当前的t2造影增强剂对肿瘤诊断还是依赖于其在肿瘤组织中的积累，并不具备提高其在肿瘤组织中衬度的能力。
6.因此，需要开发一种新的能在弱酸环境中增强磁共振横向弛豫信号的肿瘤造影剂。


技术实现要素：

7.针对现有技术中存在不足，本发明提供了一种弱酸环境增强磁共振横向弛豫信号的肿瘤造影剂及其制备方法和应用；本发明所述肿瘤造影剂由相变ph值在6.5～6.8的梳状阴离子型ph敏感大分子和表面油酸稳定的疏水超顺磁性纳米颗粒通过疏水相互作用形成；所述肿瘤造影剂在生理环境中(ph值为7.35～7.45)具有较小的水合粒径(20nm～50nm)，横
向弛豫率较低(低r2)，且能保持良好的亲水性，可以通过epr效应滞留于肿瘤组织中，并渗漏到肿瘤组织的内部；所述肿瘤造影剂可以提高磁共振造影中肿瘤组织/正常组织中的衬度比，进而提高肿瘤早期诊断的精度。
8.为了实现上述技术目的，本发明提供了以下技术手段：
9.本发明首先提供了一种弱酸环境增强磁共振横向弛豫信号的肿瘤造影剂，所述肿瘤造影剂以梳状阴离子型ph敏感大分子为载体，内部包裹表面油酸稳定的疏水的超顺磁性纳米颗粒；所述梳状阴离子型ph敏感大分子上的梳状结构为1-十八烯；所述1-十八烯与超顺磁性纳米颗粒表面的油酸相互穿插。
10.优选地，所述梳状阴离子型ph敏感大分子的相变ph值为6.5～6.8。
11.优选地，所述肿瘤造影剂在ph值为7.35～7.45时的水合粒径为20nm～50nm；在ph值为6.5～6.8的弱酸环境中粒径增大至在200～5000nm。
12.本发明还提供了上述弱酸环境增强磁共振横向弛豫信号的肿瘤造影剂的制备方法，包括如下步骤：
13.(1)线性结构的ph敏感性大分子的制备：
14.以4-氰基-4-[(十二烷基磺胺基硫代羰基)磺胺基]戊醇为链转移剂、4,4'-偶氮双(氰基戊酸)为引发剂，在溶剂中将反应物通过可逆加成断裂链转移(raft)聚合得到解离常数(pka)在6.0～6.2的线性结构的ph敏感性大分子；
[0015]
所述反应物包括：
[0016]
(a)磺胺醋酰丙烯酰胺(sulfacetamide acrylamide，scaa)、苯甲酰磺胺丙烯酰胺(sulfabenzamide acrylamide，sbaa)、磺胺甲二唑丙烯酰胺(sulfamethizole acrylamide，smaa)中的任一种ph敏感单体和调节单体n,n-二甲基丙烯酰胺(dmam)；或
[0017]
(b)ph敏感单体磺胺多辛丙烯酰胺(sulfadoxine acrylamide，sdaa)；
[0018]
(2)梳状阴离子型ph敏感大分子的制备：
[0019]
以聚(马来酸酐-alt-1-十八烯)为梳状阴离子型ph敏感大分子的主体，将线性结构的ph敏感性大分子和聚(马来酸酐-alt-1-十八烯)反应，反应结束后得到梳状阴离子型ph敏感大分子；
[0020]
(3)肿瘤造影剂的制备：
[0021]
将梳状阴离子型ph敏感大分子分散在有机溶剂a中，得到分散液a；将表面油酸稳定的疏水的超顺磁性纳米颗粒分散在有机溶剂b中，得到分散液b；
[0022]
将分散液a和分散液b均匀混合，得到混合溶液c，然后将混合溶液c升温至有机溶剂b的沸点将有机溶剂b挥发，然后升温至有机溶剂a的沸点进行回流反应，反应结束后冷却至室温，用ph值为7.35～7.45的磷酸缓冲液透析除有机溶剂a，得到ph敏感超顺磁性纳米胶束，即所述肿瘤造影剂；
[0023]
所述有机溶液a与水、有机溶剂b互溶，且沸点高于有机溶剂b；所述有机溶剂b与水不互溶。
[0024]
优选地，所述步骤(1)中，所述溶剂为二甲基亚砜(dmso)或二甲基甲酰胺(dmf)；
[0025]
当反应物为(a)所述时，ph敏感单体和调节单体的摩尔比为1：5～5：1；
[0026]
所述4-氰基-4-[(十二烷基磺胺基硫代羰基)磺胺基]戊醇、4,4'-偶氮双(氰基戊酸)和反应物的摩尔比1:：0.02：20～1：0.1：100；
[0027]
所述可逆加成断裂链转移聚合的条件为在50～80℃下反应2～10h；
[0028]
所述线性结构的ph敏感性大分子的分子量在3000～5000。
[0029]
优选地，所述步骤(2)中，线性结构的ph敏感性大分子和聚(马来酸酐-alt-1-十八烯)的摩尔比为15～50：1；
[0030]
所述梳状阴离子型ph敏感大分子的相变ph值为6.5～6.8。
[0031]
优选地，所述步骤(3)中，所述表面油酸稳定的疏水的超顺磁性纳米颗粒采用现有技术中公开的高温前驱体分解法进行制备，所述制备方法包括：
[0032]
以二苄醚作为溶剂，加入摩尔比为1:5:3:3的三乙酰丙酮铁fe(acac)3，1,2-十六烷基二醇，油酸，油胺，在氩气的保护下搅拌均匀，然后加热至200℃保温2h，继续升温至300℃，并在该温度下回流反应1h，反应结束后冷却至室温，产物和无水乙醇共混，沉淀-离心三次，得到产物，常温真空干燥，分散于正己烷中，-20℃保存。
[0033]
所述有机溶剂a包括二甲基亚砜(dmso)或二甲基甲酰胺(dmf)；所述有机溶剂b包括甲基环己烷或者甲苯；
[0034]
所述有机溶剂a与所述有机溶剂b按照体积比为2～100：1混得，得到所述混合溶液c中；
[0035]
所述混合溶液c中，梳状阴离子型ph敏感大分子：超顺磁性纳米颗粒的的质量比为20～100：1；
[0036]
所述回流反应的时间为0.5～3h。
[0037]
优选地，本发明所述肿瘤造影剂制备步骤还包括肿瘤造影剂的纯化，所述步骤为：
[0038]
将步骤(3)中的透析液第一次离心取上清，然后提高离心转速进行第二次离心除去上清，将沉淀分散至磷酸缓冲溶液中，得到纯化后的肿瘤造影剂。
[0039]
优选地，所述第一次离心的条件为10000转/分钟的转速下4℃离心10～30分钟；
[0040]
第二次离心的条件为20000～50000转/分钟的转速下4℃离心30～60分钟；
[0041]
所述磷酸缓冲溶液的ph值为7.35～7.45。
[0042]
本发明还提供了上述弱酸环境增强磁共振横向弛豫信号的肿瘤造影剂在肿瘤成像中的应用。
[0043]
与现有技术相比，本发明的有益效果在于：
[0044]
现有的肿瘤磁共振t2造影增强剂，虽然都是以spion为内核的纳米磁流体，可以通过epr效应累积在肿瘤组织，但是通常粒径较大(＞50nm)无法有效穿透肿瘤组织，且不具有肿瘤弱酸环境响应能力，无法特异性增强其在肿瘤组织中的t2成像衬度。因此现有的肿瘤磁共振t2造影增强剂只能依赖于增加spion在肿瘤组织中的含量来增强肿瘤的mri效果。
[0045]
与现有技术相比，本发明所涉及的这种弱酸(ph＝6.5～6.8)环境增强磁共振横向弛豫信号的肿瘤造影剂，可以从以下三个方面提高肿瘤的mri效果。
[0046]
①
由于低团聚或者不团聚的spion，才能呈现较低的横向弛豫率(低r2)。相比现有技术中采用的超声辅助分散的制备大粒径的spion团聚体，本发明中首先制备了梳状阴离子型ph敏感大分子，由于其具有梳状结构，可以与超顺磁性纳米颗粒表面的油酸相互穿插。同时，本发明采用了双溶剂蒸发回流法，利用高温(～180℃)回流帮助spion表面的油酸充分与梳状阴离子型ph敏感大分子上的1-十八烯相互嵌入，从而形成只含有少量spion，甚至只单个spion的小粒径胶束。使得制备得到的弱酸(ph＝6.5～6.8)环境增强磁共振横向弛
豫信号的肿瘤造影剂在生理条件下的粒径在20～50nm，该粒径不仅适用于epr效应的粒径，还有助于造影剂在肿瘤组织中的穿透。
[0047]
②
本发明制备的弱酸(ph＝6.5～6.8)环境增强磁共振横向弛豫信号的肿瘤造影剂在生理环境中(ph＝7.35～7.45)具有较高的胶体稳定性，能长期保持在20nm～50nm的范围内。根据文献中的报道，4nm的spion的r2值为25.1mm-1
s-1
，更大粒径的团聚体粒径为16nm的spion的r2值为471mm-1
s-1
。比其单颗粒状态的显影剂，r2得到了大幅度的提升，前者是后者的18.7倍，大幅度提高了t2的显影灵敏度。
[0048]
本专利所述的弱酸(ph＝6.5～6.8)环境增强磁共振横向弛豫信号的肿瘤造影剂在体内注射后，这种粒径保持在20nm～50nm的ph敏感超顺磁性纳米胶束，在血液(生理环境)中保持较低的横向弛豫率(低r2)
[0049]
并且，本发明中所述弱酸(ph＝6.5～6.8)环境增强磁共振横向弛豫信号的肿瘤造影剂到达肿瘤组织后，可以对肿瘤组织的弱酸环境响应，快速团聚而提高其横向弛豫率r2，使得肿瘤的mri衬度被特异性增强。
[0050]
③
该弱酸(ph＝6.5～6.8)环境增强磁共振横向弛豫信号的肿瘤造影剂在生理条件下的粒径在20～50nm，而在肿瘤组织中粒径为200～5000nm。因此该肿瘤造影剂在生理条件下只具有较低的横向弛豫率r2，在肿瘤组织中具有横向弛豫率r2，可以进一步提高磁共振造影中，肿瘤组织/正常组织中的衬度比，提高肿瘤早期诊断的精度。
附图说明
[0051]
图1为增强磁共振横向弛豫信号的肿瘤造影剂在弱酸环境响应的示意图。
[0052]
图2为p(scaa-co-dmam)在不同ph值条件下的uv-vis透过率曲线图。
[0053]
图3为相变ph值在6.52的梳状阴离子型ph敏感大分子在不同ph环境中的uv-vis透过率情况图。
[0054]
图4为实施例1的ph敏感超顺磁性纳米胶束在不同ph环境中的粒径变化图。
[0055]
图5为p(sbaa-co-dmam)在不同ph值条件下的uv-vis透过率曲线图。
[0056]
图6为相变ph值在6.62的梳状阴离子型ph敏感大分子在不同ph环境中的uv-vis透过率情况图。
[0057]
图7为实施例2的ph敏感超顺磁性纳米胶束在不同ph环境中的粒径变化图。
[0058]
图8为p(smaa-co-dmam)在不同ph值条件下的uv-vis透过率曲线图。
[0059]
图9为相变ph值在6.71的梳状阴离子型ph敏感大分子在不同ph环境中的uv-vis透过率情况图。
[0060]
图10为实施例3的ph敏感超顺磁性纳米胶束在不同ph环境中的粒径变化图。
[0061]
图11为psdaa在不同ph值条件下的uv-vis透过率曲线图。
[0062]
图12为相变ph值在6.65的梳状阴离子型ph敏感大分子在不同ph环境中的uv-vis透过率情况图。
[0063]
图13为实施例4的ph敏感超顺磁性纳米胶束在不同ph环境中的粒径变化图。
[0064]
图14为实施例4的ph敏感超顺磁性纳米胶束在不同ph环境中t
2 map(a)和拟合曲线图(b)。
[0065]
图15为实施例4的ph敏感超顺磁性纳米胶束在4t1肿瘤模型中的造影增强作用情
况图。
具体实施方式
[0066]
下面结合附图以及具体实施例对本发明作进一步的说明，但本发明的保护范围并不限于此。下列实施例中未注明具体条件者，皆按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。除特殊注明外，本发明所采用的均为该领域现有技术。
[0067]
实施例1：弱酸环境增强磁共振横向弛豫信号的肿瘤造影剂的制备
[0068]
(1)线性结构的ph敏感性大分子的制备：
[0069]
4-氰基-4-[(十二烷基磺胺基硫代羰基)磺胺基]戊醇：磺胺醋酰丙烯酰胺的摩尔比为1：100，本反应先以4-氰基-4-[(十二烷基磺胺基硫代羰基)磺胺基]戊醇为链转移剂，磺胺醋酰丙烯酰胺(scaa)为ph敏感单体，n,n-二甲基丙烯酰胺(dmam)为调节单体，制备线性ph敏感大分子p(scaa-co-dmam)。具体步骤为：
[0070]
按照4-氰基-4-[(十二烷基磺胺基硫代羰基)磺胺基]戊醇：磺胺醋酰丙烯酰胺(scaa)的摩尔比为1：100，磺胺醋酰丙烯酰胺(scaa)：n,n-二甲基丙烯酰胺(dmam)的摩尔比为1：5的比例，在反应介质二甲亚砜中，加入4-氰基-4-[(十二烷基磺胺基硫代羰基)磺胺基]戊醇(1mmol)、磺胺醋酰丙烯酰胺(scaa，100mmol)、n,n-二甲基丙烯酰胺(dmam，500mmol)，经抽真空/氩气置换3次后，在氩气保护下，60℃反应2小时，得到分子量在5000、解离常数(pka)在6.16的线性结构ph敏感大分子，记为p(scaa-co-dmam)。
[0071]
所述线性结构的ph敏感性大分子不同ph环境中的uv-vis透过率曲线如图2所示。从图中可以看出，在ph7.4条件下，ph敏感聚合物保持透过率接近100％；当ph调节到线性结构ph敏感大分子的相变点，透过率接近50％，即ph为6.16左右时，聚合物发生亲疏水形态的改变，即透过率发生明显的下降并且是呈现出断崖式的快速突变。以上结果可以说明该线性结构ph敏感大分子具备环境响应的能力，分子量为5000的线性结构的ph敏感性大分子。
[0072]
(2)梳状阴离子型ph敏感大分子的制备：
[0073]
以二甲基亚砜(dmso)为溶剂，将pka为6.16的p(scaa-co-dmam)和聚(马来酸酐-alt-1-十八烯)按照摩尔比15：1投料，室温条件下搅拌48小时，然后透析，得到梳状阴离子型ph敏感大分子。
[0074]
考察梳状阴离子型ph敏感大分子在不同ph环境中的uv-vis透过率来评估其相变ph，考察结果如图3所示。在ph7.4条件下，梳状阴离子型ph敏感大分子保持透过率接近100％；当ph调节到梳状阴离子型ph敏感大分子的相变点，透过率接近50％，即ph为6.52左右时，聚合物发生亲疏水形态的改变，即透过率发生明显的下降并且是呈现出断崖式的快速突变。以上结果可以说明该梳状阴离子型ph敏感大分子具备环境响应的能力。(3)弱酸环境增强磁共振横向弛豫信号的肿瘤造影剂的制备：
[0075]
采用分步高温前驱体分解法，加入摩尔比1：5：3：3的fe(acac)3，1,2-十六烷基二醇，油酸，油胺，然后加入二苄醚作为溶剂，在氩气的保护下搅拌均匀。将反应环境置换成无氧环境，将混合物加热到200℃保温2h，继续升温至300℃，并在该温度下回流反应1h。反应结束后，反应体系静置冷却至室温。产物和无水乙醇共混，沉淀-离心三次，得到产物，常温真空干燥，即得粒径在18nm的超顺磁性fe3o4纳米颗粒，分散于正己烷中，-20℃保存。经透射
电镜和动态光散射测定，超顺磁性fe3o4纳米颗粒的粒径在18nm，呈球形、具有单分散性和超顺磁性，饱和磁化强度为98emu/g。
[0076]
然后，将相变ph值在6.52的梳状阴离子型ph敏感大分子冻干并取1g分散在10ml的dmso中，得到分散液a；将粒径在18nm的超顺磁性fe3o4纳米颗粒氩气吹干后，称50mg取分散在5ml的甲苯中，得到分散液b。
[0077]
将分散液a和分散液b混合，在室温条件下机械搅拌1小时得到混合溶液c，然后将混合溶液c在常压条件下被加热到在甲苯的沸点处(110℃)保温10分钟，使得甲苯挥发掉。接着，将混合溶液c在常压条件下继续升温到dmso的沸点(189℃)充分回流30分钟，回流结束后在回流状态下降至室温，用截留分子量50000的透析袋透析，透析液为ph值为7.35～7.45的磷酸盐缓冲液，透析24小时，除去dmso，得到ph敏感超顺磁性纳米胶束，即弱酸(ph＝6.5～6.8)环境中特异性增强磁共振横向弛豫信号的肿瘤造影剂，其示意图如图1所示。
[0078]
(4)肿瘤造影剂的纯化：
[0079]
利用分步离心法，将步骤(3)中得到的透析后溶液先用10000转/分钟的转速，在4℃条件下离心10分钟取上清，然后再用21000转/分钟的转速，在4℃条件下离心30分钟除掉上清，将沉淀分散在ph值为7.35～7.45的磷酸盐缓冲液中，即得到了纯化后的弱酸(ph＝6.5～6.8)环境中特异性增强磁共振横向弛豫信号的肿瘤造影剂。
[0080]
用ph计测定上述得到的肿瘤造影剂的原始ph值，然后通过0.1m的稀盐酸或氢氧化钠调节ph，获得生理ph 7.4左右和相变点6.5左右的纳米胶束溶液，将两种ph的胶束溶液通过高灵敏粒径分析仪测定粒径大小，如图4所示。
[0081]
图4为实施例1的ph敏感超顺磁性纳米胶束在不同ph环境中的粒径变化图，从图中可以看出，当造影剂处于生理环境条件(ph 7.4)下，呈现分散均一的状态，粒径较小，在31nm，pdi为0.105；而当环境条件呈现相变点6.5左右时，肿瘤弱酸响应纳米磁流体体现出其对环境的高度敏感性，发生形变聚集，粒径也明显变大，在256.6nm，pdi为0.169，这种不同ph条件下粒径大小的突然变化可以佐证实验流程中合成的造影剂是具备肿瘤弱酸微环境响应能力的。
[0082]
实施例2：弱酸环境增强磁共振横向弛豫信号的肿瘤造影剂的制备
[0083]
(1)线性结构的ph敏感性大分子的制备：
[0084]
4-氰基-4-[(十二烷基磺胺基硫代羰基)磺胺基]戊醇：苯甲酰磺胺丙烯酰胺的摩尔比为1：50，本反应先以4-氰基-4-[(十二烷基磺胺基硫代羰基)磺胺基]戊醇为链转移剂，苯甲酰磺胺丙烯酰胺(sbaa)为ph敏感单体，n,n-二甲基丙烯酰胺(dmam)为调节单体，制备线性ph敏感大分子p(sbaa-co-dmam)。具体步骤为：
[0085]
按照4-氰基-4-[(十二烷基磺胺基硫代羰基)磺胺基]戊醇：苯甲酰磺胺丙烯酰胺(sbaa)的摩尔比为1：50，磺胺醋酰丙烯酰胺(sbaa)：n,n-二甲基丙烯酰胺(dmam)的摩尔比为1：2的比例，在反应介质二甲亚砜中，加入4-氰基-4-[(十二烷基磺胺基硫代羰基)磺胺基]戊醇(1mmol)、苯甲酰磺胺丙烯酰胺(sbaa，50mmol)、n,n-二甲基丙烯酰胺(dmam，100mmol)，经抽真空/氩气置换3次后，在氩气保护下，55℃反应3小时，得到分子量在4500、解离常数(pka)在6.09的线性结构ph敏感大分子，记为p(sbaa-co-dmam)。
[0086]
所述线性结构的ph敏感性大分子不同ph环境中的uv-vis透过率曲线如图5所示。从图中可以看出，在ph7.4条件下，线性结构的ph敏感性大分子保持透过率接近100％；当ph
调节到线性结构的ph敏感性大分子的相变点，透过率接近50％，即ph为6.09左右时，聚合物发生亲疏水形态的改变，即透过率发生明显的下降并且是呈现出断崖式的快速突变。以上结果可以说明该梳状阴离子型ph敏感大分子具备环境响应的能力，得到分子量为4500的线性结构的ph敏感性大分子。(2)梳状阴离子型ph敏感大分子的制备：
[0087]
以dmso为溶剂，将pka为6.09的p(sbaa-co-dmam)和聚(马来酸酐-alt-1-十八烯)按照摩尔比20：1投料，室温条件下搅拌48小时，然后透析，得到梳状阴离子型ph敏感大分子。
[0088]
考察梳状阴离子型ph敏感大分子在不同ph环境中的uv-vis透过率来评估其相变ph，考察结果如图6所示。从图6中可以看出，在ph7.4条件下，梳状阴离子型ph敏感大分子保持透过率接近100％；当ph调节到梳状阴离子型ph敏感大分子的相变点，透过率接近50％，即ph为6.62左右时，聚合物发生亲疏水形态的改变，即透过率发生明显的下降并且是呈现出断崖式的快速突变。以上结果可以说明该梳状阴离子型ph敏感大分子具备环境响应的能力
[0089]
(3)弱酸环境增强磁共振横向弛豫信号的肿瘤造影剂的制备：
[0090]
采用分步高温前驱体分解法，加入摩尔比1：5：3：3的fe(acac)3，1,2-十六烷基二醇，油酸，油胺，然后加入二苄醚作为溶剂，在氩气的保护下搅拌均匀。将反应环境置换成无氧环境，将混合物加热到200℃保温2h，继续升温至300℃，并在该温度下回流反应1h。反应结束后，反应体系静置冷却至室温。产物和无水乙醇共混，沉淀-离心三次，得到产物，常温真空干燥，即得粒径在12nm的超顺磁性fe3o4纳米颗粒，分散于正己烷中，-20℃保存。经透射电镜和动态光散射测定，超顺磁性fe3o4纳米颗粒的粒径在12nm左右，呈球形、具有单分散性和超顺磁性，饱和磁化强度为59emu/g。
[0091]
然后，将相变ph值在6.62的梳状阴离子型ph敏感大分子冻干并取10g分散在500ml的dmso中，得到分散液a；将粒径在12nm的超顺磁性fe3o4纳米颗粒氩气吹干后，称100mg取分散在5ml的甲苯中，得到分散液b。
[0092]
将分散液a和分散液b混合，在室温条件下机械搅拌2小时得到混合溶液c，然后将混合溶液c在常压条件下被加热到在甲苯的沸点处(110℃)保温15分钟，使得甲苯挥发掉。接着，将混合溶液c在常压条件下继续升温到dmf的沸点(153℃)充分回流3h，回流结束后在回流状态下降至室温，用截留分子量50000的透析袋透析，透析液为ph值为7.35～7.45的磷酸盐缓冲液，透析24小时，除去dmf，得到ph敏感超顺磁性纳米胶束，即弱酸(ph＝6.5～6.8)环境中特异性增强磁共振横向弛豫信号的肿瘤造影剂。
[0093]
(4)肿瘤造影剂的纯化：
[0094]
利用分步离心法，将步骤(3)中得到的透析后溶液先用10000转/分钟的转速，在4℃条件下离心30分钟取上清，然后再用25000转/分钟的转速，在4℃条件下离心60分钟除掉上清，将沉淀分散在ph值为7.35～7.45的磷酸盐缓冲液中，即得到了纯化后的弱酸(ph＝6.5～6.8)环境中特异性增强磁共振横向弛豫信号的肿瘤造影剂。
[0095]
用ph计测定上述得到的肿瘤造影剂的原始ph值，然后通过0.1m的稀盐酸或氢氧化钠调节ph，获得生理ph 7.4左右和相变点6.6左右的纳米胶束溶液，将两种ph的胶束溶液通过高灵敏粒径分析仪测定粒径大小，如图7所示。
[0096]
图7为实施例2的ph敏感超顺磁性纳米胶束在不同ph环境中的粒径变化图，从图中
可以看出，当造影剂处于生理环境条件(ph 7.4)下，呈现分散均一的状态，粒径较小，在43nm，pdi为0.158；而当环境条件呈现相变点6.6左右时，肿瘤弱酸响应纳米磁流体体现出其对环境的高度敏感性，发生形变聚集，粒径也明显变大，在226.8nm，pdi为0.172，这种不同ph条件下粒径大小的突然变化可以佐证实验流程中合成的造影剂是具备肿瘤弱酸微环境响应能力的。
[0097]
实施例3：弱酸环境增强磁共振横向弛豫信号的肿瘤造影剂的制备
[0098]
(1)线性结构的ph敏感性大分子的制备：
[0099]
4-氰基-4-[(十二烷基磺胺基硫代羰基)磺胺基]戊醇：磺胺甲二唑丙烯酰胺的摩尔比为1：20，本反应先以4-氰基-4-[(十二烷基磺胺基硫代羰基)磺胺基]戊醇为链转移剂，磺胺甲二唑丙烯酰胺(smaa)为ph敏感单体，n,n-二甲基丙烯酰胺(dmam)为调节单体，制备线性ph敏感大分子p(smaa-co-dmam)。具体步骤为：
[0100]
按照4-氰基-4-[(十二烷基磺胺基硫代羰基)磺胺基]戊醇：磺胺甲二唑丙烯酰胺(smaa)的摩尔比为1：20，磺胺甲二唑丙烯酰胺(smaa)：n,n-二甲基丙烯酰胺(dmam)的摩尔比为5：1的比例，在反应介质dmf中，加入4-氰基-4-[(十二烷基磺胺基硫代羰基)磺胺基]戊醇(1mmol)、磺胺甲二唑丙烯酰胺(smaa，20mmol)、n,n-二甲基丙烯酰胺(dmam，4mmol)，经抽真空/氩气置换3次后，在氩气保护下，80℃反应2小时，得到分子量在3700、解离常数(pka)在6.01的线性结构ph敏感大分子，记为p(smaa-co-dmam)。
[0101]
所述线性结构的ph敏感性大分子不同ph环境中的uv-vis透过率曲线如图8所示。从图中可以看出，在ph7.4条件下，线性结构的ph敏感性大分子保持透过率接近100％；当ph调节到线性结构的ph敏感性大分子的相变点，透过率接近50％，即ph为6.01左右时，聚合物发生亲疏水形态的改变，即透过率发生明显的下降并且是呈现出断崖式的快速突变。以上结果可以说明该梳状阴离子型ph敏感大分子具备环境响应的能力，得到分子量为3700的线性结构的ph敏感性大分子。
[0102]
(2)梳状阴离子型ph敏感大分子的制备：
[0103]
以dmso为溶剂，将pka为6.01的p(sdaa-co-dmam)和聚(马来酸酐-alt-1-十八烯)按照摩尔比40：1投料，室温条件下搅拌48小时，然后透析，得到梳状阴离子型ph敏感大分子。
[0104]
考察梳状阴离子型ph敏感大分子在不同ph环境中的uv-vis透过率来评估其相变ph，考察结果如图9所示。从图9中可以看出，在ph7.4条件下，梳状阴离子型ph敏感大分子保持透过率接近100％；当ph调节到梳状阴离子型ph敏感大分子的相变点，透过率接近50％，即ph为6.71左右时，聚合物发生亲疏水形态的改变，即透过率发生明显的下降并且是呈现出断崖式的快速突变。以上结果可以说明该梳状阴离子型ph敏感大分子具备环境响应的能力。因此，所述梳状阴离子型ph敏感大分子的相变ph值为6.71。
[0105]
(3)弱酸环境增强磁共振横向弛豫信号的肿瘤造影剂的制备：
[0106]
采用分步高温前驱体分解法，加入摩尔比1：5：3：3的fe(acac)3，1,2-十六烷基二醇，油酸，油胺，然后加入二苄醚作为溶剂，在氩气的保护下搅拌均匀。将反应环境置换成无氧环境，将混合物加热到200℃保温2h，继续升温至300℃，并在该温度下回流反应1h。反应结束后，反应体系静置冷却至室温。产物和无水乙醇共混，沉淀-离心三次，得到产物，常温真空干燥，即得粒径在15nm的超顺磁性fe3o4纳米颗粒，分散于正己烷中，-20℃保存。经透射
电镜和动态光散射测定，超顺磁性fe3o4纳米颗粒的粒径在15nm左右，呈球形、具有单分散性和超顺磁性，饱和磁化强度为69emu/g。
[0107]
然后，将相变ph值在6.71的梳状阴离子型ph敏感大分子冻干并取5g分散在250ml的dmso中，得到分散液a；将粒径在15nm的超顺磁性fe3o4纳米颗粒氩气吹干后，称100mg取分散在10ml的甲苯中，得到分散液b。
[0108]
将分散液a和分散液b混合，在室温条件下机械搅拌2小时得到混合溶液c，然后将混合溶液c在常压条件下被加热到在甲基环己烷的沸点处(101℃)保温20分钟，使得甲基环己烷挥发掉。接着，将混合溶液c在常压条件下继续升温到dmf的沸点(153℃)充分回流1h，回流结束后在回流状态下降至室温，用截留分子量50000的透析袋透析，透析液为ph值为7.35～7.45的磷酸盐缓冲液，透析24小时，除去dmf，得到ph敏感超顺磁性纳米胶束，即弱酸(ph＝6.5～6.8)环境中特异性增强磁共振横向弛豫信号的肿瘤造影剂。
[0109]
(4)肿瘤造影剂的纯化：
[0110]
利用分步离心法，将步骤(3)中得到的透析后溶液先用10000转/分钟的转速，在4℃条件下离心20分钟取上清，然后再用30000转/分钟的转速，在4℃条件下离心50分钟除掉上清，将沉淀分散在ph值为7.35～7.45的磷酸盐缓冲液中，即得到了纯化后的弱酸(ph＝6.5～6.8)环境中特异性增强磁共振横向弛豫信号的肿瘤造影剂。
[0111]
用ph计测定上述得到的肿瘤造影剂的原始ph值，然后通过0.1m的稀盐酸或氢氧化钠调节ph，获得生理ph 7.4左右和相变点6.7左右的纳米胶束溶液，将两种ph的胶束溶液通过高灵敏粒径分析仪测定粒径大小，如图10所示。
[0112]
图10为实施例3的ph敏感超顺磁性纳米胶束在不同ph环境中的粒径变化图，从图中可以看出，当造影剂处于生理环境条件(ph 7.4)下，呈现分散均一的状态，粒径较小，在33nm，pdi为0.124；而当环境条件呈现相变点6.7左右时，肿瘤弱酸响应纳米磁流体体现出其对环境的高度敏感性，发生形变聚集，粒径也明显变大，在250nm，pdi为0.147，这种不同ph条件下粒径大小的突然变化可以佐证实验流程中合成的造影剂是具备肿瘤弱酸微环境响应能力的。
[0113]
实施例4：弱酸环境增强磁共振横向弛豫信号的肿瘤造影剂的制备
[0114]
(1)线性结构的ph敏感性大分子的制备：
[0115]
由于ph敏感单体为磺胺多辛丙烯酰胺(sulfadoxine acrylamide，sdaa)，其解离常数接近6.0～6.2，为6.03，则无需加入调节单体。本反应先以4-氰基-4-[(十二烷基磺胺基硫代羰基)磺胺基]戊醇为链转移剂，磺胺多辛丙烯酰胺(sulfadoxine acrylamide，sdaa)为ph敏感单体，制备线性ph敏感大分子psmaa。具体步骤为：
[0116]
按照4-氰基-4-[(十二烷基磺胺基硫代羰基)磺胺基]戊醇：磺胺多辛丙烯酰胺(sulfadoxine acrylamide，sdaa)的摩尔比为1：40的比例，在反应介质dmf中，加入4-氰基-4-[(十二烷基磺胺基硫代羰基)磺胺基]戊醇(1mmol)、磺胺多辛丙烯酰胺(sdaa，40mmol)，经抽真空/氩气置换3次后，在氩气保护下，70℃反应6小时，得到分子量在4000、解离常数(pka)在6.03的线性结构ph敏感大分子，记为psdaa。
[0117]
所述线性结构的ph敏感性大分子不同ph环境中的uv-vis透过率曲线如图11所示。从图中可以看出，在ph7.4条件下，线性结构的ph敏感性大分子保持透过率接近100％；当ph调节到线性结构的ph敏感性大分子的相变点，透过率接近50％，即ph为6.03左右时，聚合物
发生亲疏水形态的改变，即透过率发生明显的下降并且是呈现出断崖式的快速突变。以上结果可以说明该线性ph敏感大分子具备环境响应的能力。(2)梳状阴离子型ph敏感大分子的制备：
[0118]
以dmso为溶剂，将pka为6.03的psdaa和聚(马来酸酐-alt-1-十八烯)按照摩尔比50：1投料，室温条件下搅拌48小时，然后透析，得到梳状阴离子型ph敏感大分子。
[0119]
考察梳状阴离子型ph敏感大分子在不同ph环境中的uv-vis透过率来评估其相变ph，考察结果如图12所示。从图12中可以看出，在ph7.4条件下，梳状阴离子型ph敏感大分子保持透过率接近100％；当ph调节到梳状阴离子型ph敏感大分子的相变点，透过率接近50％，即ph为6.65左右时，聚合物发生亲疏水形态的改变，即透过率发生明显的下降并且是呈现出断崖式的快速突变。以上结果可以说明该梳状阴离子型ph敏感大分子具备环境响应的能力。因此，所述梳状阴离子型ph敏感大分子的相变ph值为6.65。
[0120]
(3)弱酸环境增强磁共振横向弛豫信号的肿瘤造影剂的制备：
[0121]
采用分步高温前驱体分解法，加入摩尔比1/5/3/3的fe(acac)3，1,2-十六烷基二醇，油酸，油胺，然后加入二苄醚作为溶剂，在氩气的保护下搅拌均匀。将反应环境置换成无氧环境，将混合物加热到200℃保温2h，继续升温至300℃，并在该温度下回流反应1h。反应结束后，反应体系静置冷却至室温。产物和无水乙醇共混，沉淀-离心三次，得到产物，常温真空干燥，即得粒径在6nm的超顺磁性fe3o4纳米颗粒，分散于正己烷中，-20℃保存。。经透射电镜和动态光散射测定，超顺磁性fe3o4纳米颗粒的粒径在6nm，呈球形、具有单分散性和超顺磁性，饱和磁化强度为72emu/g。
[0122]
然后，将相变ph值在6.65的梳状阴离子型ph敏感大分子冻干并取3g分散在100ml的dmso中，得到分散液a；将粒径在6nm的超顺磁性fe3o4纳米颗粒氩气吹干后，称50mg取分散在5ml的甲苯中，得到分散液b。
[0123]
将分散液a和分散液b混合，在室温条件下机械搅拌6小时得到混合溶液c，然后将混合溶液c在常压条件下被加热到在甲基环己烷的沸点处(101℃)保温15分钟，使得甲基环己烷挥发掉。接着，将混合溶液c在常压条件下继续升温到dmso的沸点(189℃)充分回流1.5h，回流结束后在回流状态下降至室温，用截留分子量50000的透析袋透析，透析液为ph值为7.35～7.45的磷酸盐缓冲液，透析24小时，除去dmso，得到ph敏感超顺磁性纳米胶束，即弱酸(ph＝6.5～6.8)环境中特异性增强磁共振横向弛豫信号的肿瘤造影剂。
[0124]
(4)肿瘤造影剂的纯化：
[0125]
利用分步离心法，将步骤(3)中得到的透析后溶液先用10000转/分钟的转速，在4℃条件下离心25分钟取上清，然后再用50000转/分钟的转速，在4℃条件下离心60分钟除掉上清，将沉淀分散在ph值为7.35～7.45的磷酸盐缓冲液中，即得到了纯化后的弱酸(ph＝6.5～6.8)环境中特异性增强磁共振横向弛豫信号的肿瘤造影剂。
[0126]
用ph计测定上述得到的肿瘤造影剂的原始ph值，然后通过0.1m的稀盐酸或氢氧化钠调节ph，获得生理ph 7.4左右和相变点6.65左右的纳米胶束溶液，将两种ph的胶束溶液通过高灵敏粒径分析仪测定粒径大小，如图10所示。
[0127]
图13为实施例4的ph敏感超顺磁性纳米胶束在不同ph环境中的粒径变化图，从图中可以看出，当造影剂处于生理环境条件(ph 7.4)下，呈现分散均一的状态，粒径较小，在36nm，pdi为0.116；而当环境条件呈现相变点6.65左右时，肿瘤弱酸响应纳米磁流体体现出
其对环境的高度敏感性，发生形变聚集，粒径也明显变大，在249.7nm，pdi为0.139，这种不同ph条件下粒径大小的突然变化可以佐证实验流程中合成的造影剂是具备肿瘤弱酸微环境响应能力的。
[0128]
实施例5：肿瘤造影剂的体外磁共振造影增强考察
[0129]
本实施例中采用以下手段考察了实施例4中所述方法制备的肿瘤造影剂的体外磁共振造影增强情况，具体考察方法如下所示：
[0130]
根据icp-ms测定的实际金属含量，分别取一定量的弱酸(ph＝6.5～6.8)环境中特异性增强磁共振横向弛豫信号的肿瘤造影剂冻干粉末溶于ph7.41和6.65的pbs中，配制成1070μm的ph敏感超顺磁性纳米胶束，并进行梯度稀释，最终得到含c
fe+mn
：33，67，135，268，535，1070μm的ph敏感超顺磁性纳米胶束。
[0131]
通过3.0t的核磁共振仪来扫描两种ph环境下(ph＝7.41/6.65)的含梯度金属含量浓度的ph敏感超顺磁性纳米胶束的t
2 map图，扫描结果如图14a所示。
[0132]
从图14a中可以看出，随着金属元素浓度的梯度增加，t2成像呈现一种越来越暗的趋势，并且在生理环境ph下的磁共振成像能力是远不如弱酸性条件下的t2成像能力，宏观上呈现一个更亮的趋势。
[0133]
计算其1/t2值，拟合一条浓度与驰豫时间倒数相关的直线，计算r2值。t2加权成像条件如下：tr＝5000ms，te＝10～90ms，层厚＝3mm，翻转角度＝150
°
，矩阵大小＝256
×
256，视野＝100mm，回声长度＝8，拟合曲线图如图14b所示。
[0134]
从图14b中可以看出，生理条件下(ph 7.41)，r2值为86.72mm-1
s-1
；弱酸性微环境(ph6.65)，r2值为202.76mm-1
s-1
，ph的改变使得r2值明显增大，说明通过肿瘤造影剂可以显著降低驰豫时间，增大r2值，增加肿瘤区域即弱酸性环境与正常组织即生理环境的对比称度，有利于微小肿瘤的早期诊断。
[0135]
实施例6：肿瘤造影剂的体内磁共振造影增强考察
[0136]
本实施例中采用以下手段考察了实施例4中所述方法制备的肿瘤造影剂的体内磁共振造影增强情况，具体考察方法如下所示：
[0137]
以非靶向载体(peg-pcl)包载同种超顺磁性纳米粒子作为对照组，实施例4中制备的肿瘤造影剂为试验组，分别配制铁浓度为5mg/kg的纳米胶束。其中，非靶向载体(peg-pcl)包载同种超顺磁性纳米粒子的制备方法为：按照peg-pcl与超顺磁性纳米粒子fe3o4的质量比7：3的比例制备胶束，peg-pcl与超顺磁性纳米粒子分散在dmf和四氢呋喃中，然后将其混合，在超声条件下滴加入过量的纯水中。经过透析除去有机溶剂后，在2000rpm条件下离心10min，取上清液，最后冻干即得非靶向纳米胶束。。
[0138]
采用4t1细胞(购自中国科学院上海药物研究所)在在江苏大学实验动物中心购入的6-8周雌性的balb/c小鼠(约25g)第4对乳腺位置处种瘤，得到实验小鼠。待种瘤后一周左右，肿瘤体积达到150mm3时，分别通过尾静脉注射0.15ml试验组和对照组中的纳米胶束至实验小鼠中。注射结束后0，2，12小时时分别通过3.0t的磁共振仪对其进行t2显影，对比注射前后试验组和对照组之间肿瘤和正常组织的对比称度的区别。其中，在进行磁共振显影成像前，向小鼠腹腔注射麻醉剂(0.1ml水合氯醛)；所述t2加权成像条件如下：tr＝5000ms，te＝10～90ms，层厚＝3mm，翻转角度＝150
°
，矩阵大小＝256
×
256，视野＝100mm，回声长度＝8。
[0139]
体内磁共振造影增强考察结果如图15所示，从图15中可以看出，在0h时，肿瘤区域(红色圆圈)与周围组织的对比很微弱，基本无法识别肿瘤的位置。然而在注射肿瘤造影剂后2h，ph敏感组就有明显的t2成像效果，宏观表现在肿瘤区域呈现较暗的颜色，与旁边的正常组织有明显的对比；在12h，这种增强的对比称度更为明显，可以看到肿瘤区域更加暗，而在非ph敏感组，12h中并未出现这些现象，佐证了ph敏感在肿瘤微环境的响应性和靶向性，由于材料在肿瘤区域形变聚集，增大了r2值，从而使得肿瘤造影增强剂具有良好的t2成像效果。
[0140]
综上所述，本发明所述肿瘤造影剂可以提高磁共振造影中肿瘤组织/正常组织中的衬度比，进而提高肿瘤早期诊断的精度。
[0141]
所述实施例为本发明的优选的实施方式，但本发明并不限于上述实施方式，在不背离本发明的实质内容的情况下，本领域技术人员能够做出的任何显而易见的改进、替换或变型均属于本发明的保护范围。

技术特征：
1.一种弱酸环境增强磁共振横向弛豫信号的肿瘤造影剂，其特征在于，所述肿瘤造影剂以梳状阴离子型ph敏感大分子为载体，内部包裹表面油酸稳定的疏水的超顺磁性纳米颗粒；所述梳状阴离子型ph敏感大分子上的梳状结构为1-十八烯；所述1-十八烯与超顺磁性纳米颗粒表面的油酸相互穿插。2.根据权利要求1所述的弱酸环境增强磁共振横向弛豫信号的肿瘤造影剂，其特征在于，所述梳状阴离子型ph敏感大分子的相变ph值为6.5～6.8。3.根据权利要求1所述的弱酸环境增强磁共振横向弛豫信号的肿瘤造影剂，其特征在于，所述肿瘤造影剂在ph值为7.35～7.45时的水合粒径为20nm～50nm；在ph值为6.5～6.8的弱酸环境中粒径增大至在200～5000nm。4.权利要求1～3任一项所述的弱酸环境增强磁共振横向弛豫信号的肿瘤造影剂的制备方法，其特征在于，包括：(1)线性结构的ph敏感性大分子的制备：以4-氰基-4-[(十二烷基磺胺基硫代羰基)磺胺基]戊醇为链转移剂、4,4'-偶氮双(氰基戊酸)为引发剂，在溶剂中将反应物通过可逆加成断裂链转移聚合得到解离常数在6.0～6.2的线性结构的ph敏感性大分子；所述反应物包括：(a)磺胺醋酰丙烯酰胺、苯甲酰磺胺丙烯酰胺、磺胺甲二唑丙烯酰胺中的任一种ph敏感单体和调节单体n,n-二甲基丙烯酰胺；或(b)ph敏感单体磺胺多辛丙烯酰胺；(2)梳状阴离子型ph敏感大分子的制备：以聚(马来酸酐-alt-1-十八烯)为梳状阴离子型ph敏感大分子的主体，将线性结构的ph敏感性大分子和聚(马来酸酐-alt-1-十八烯)反应，反应结束后得到梳状阴离子型ph敏感大分子；(3)肿瘤造影剂的制备：将梳状阴离子型ph敏感大分子分散在有机溶剂a中，得到分散液a；将表面油酸稳定的疏水的超顺磁性纳米颗粒分散在有机溶剂b中，得到分散液b；将分散液a和分散液b均匀混合，得到混合溶液c，然后将混合溶液c升温至有机溶剂b的沸点将有机溶剂b挥发，然后升温至有机溶剂a的沸点进行回流反应，反应结束后冷却至室温，用ph值为7.35～7.45的磷酸缓冲液透析除有机溶剂a，得到ph敏感超顺磁性纳米胶束，即所述肿瘤造影剂；所述有机溶液a与水、有机溶剂b互溶，且沸点高于有机溶剂b；所述有机溶剂b与水不互溶。5.根据权利要求4所述的弱酸环境增强磁共振横向弛豫信号的肿瘤造影剂的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述溶剂为二甲基亚砜或二甲基甲酰胺；当反应物为(a)所述时，ph敏感单体和调节单体的摩尔比为1：5～5：1；所述4-氰基-4-[(十二烷基磺胺基硫代羰基)磺胺基]戊醇、4,4'-偶氮双(氰基戊酸)和反应物的摩尔比1:：0.02：20～1：0.1：100；所述可逆加成断裂链转移聚合的条件为在50～80℃下反应2～10h；所述线性结构的ph敏感性大分子的分子量在3000～5000。
6.根据权利要求4所述的弱酸环境增强磁共振横向弛豫信号的肿瘤造影剂的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，线性结构的ph敏感性大分子和聚(马来酸酐-alt-1-十八烯)的摩尔比为15～50：1；所述梳状阴离子型ph敏感大分子的相变ph值为6.5～6.8。7.根据权利要求4所述的弱酸环境增强磁共振横向弛豫信号的肿瘤造影剂的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，所述有机溶剂a包括二甲基亚砜或n’n
’‑
二甲基甲酰胺；所述有机溶剂b包括甲基环己烷或者甲苯；所述有机溶剂a与所述有机溶剂b按照体积比为2～100：1混得，得到所述混合溶液c中，且混合溶液c中，梳状阴离子型ph敏感大分子：超顺磁性纳米颗粒的质量比为20～100：1；所述回流反应的时间为0.5～3h。8.根据权利要求4所述的弱酸环境增强磁共振横向弛豫信号的肿瘤造影剂的制备方法，其特征在于，所述肿瘤造影剂制备步骤还包括肿瘤造影剂的纯化，所述步骤为：将步骤(3)中的透析液第一次离心取上清，然后提高离心转速进行第二次离心除去上清，将沉淀分散至磷酸缓冲溶液中，得到纯化后的肿瘤造影剂。9.根据权利要求8所述的弱酸环境增强磁共振横向弛豫信号的肿瘤造影剂的制备方法，其特征在于，所述第一次离心的条件为10000转/分钟的转速下4℃离心10～30分钟；第二次离心的条件为20000～50000转/分钟的转速下4℃离心30～60分钟；所述磷酸缓冲溶液的ph值为7.35～7.45。10.权利要求1～3任一项所述的弱酸环境增强磁共振横向弛豫信号的肿瘤造影剂、或权利要求4～9任一项所述方法制备的弱酸环境增强磁共振横向弛豫信号的肿瘤造影剂在肿瘤成像中的应用。

技术总结
本发明提供了一种弱酸环境增强磁共振横向弛豫信号的肿瘤造影剂及其制备方法和应用，属于生物医学工程技术领域；本发明所述肿瘤造影剂由相变pH值在6.5～6.8的梳状阴离子型pH敏感大分子和表面油酸稳定的疏水超顺磁性纳米颗粒通过疏水相互作用形成；所述肿瘤造影剂在生理环境中(pH值为7.35～7.45)具有较小的水合粒径(20nm～50nm)，横向弛豫率较低(低R2)，且能保持良好的亲水性，可以通过EPR效应滞留于肿瘤组织中，并渗漏到肿瘤组织的内部；所述肿瘤造影剂可以提高磁共振造影中肿瘤组织/正常组织中的衬度比，进而提高肿瘤早期诊断的精度。断的精度。断的精度。


技术研发人员：屈阳 孙淼 鲍世雪 刘志昊 辛渊蓉 许颖
受保护的技术使用者：江苏大学
技术研发日：2023.06.09
技术公布日：2023/10/8