一种增强声动力联合抗包虫药物治疗包虫病的自组装纳米药物及其制备方法与应用

1.本发明属于生物医药技术领域，尤其涉及一种增强声动力联合抗包虫药物治疗包虫病的自组装纳米药物及其制备方法与应用。


背景技术：

2.包虫病(hydatid disease)又称棘球蚴病(echinococcosis)，是一种人畜共患寄生病，呈世界性分布，在我国主要分布于新疆、青海、西藏等西部牧业地区，严重危害人类健康，阻碍畜牧业的发展。
3.目前，包虫病的治疗方法以手术治疗为首选方案，但调查研究发现手术治疗仅适用于包囊数量少且早期包虫病患者，对于改善复发、多发、晚期包虫病患者的生活质量，药物治疗的地位是不可取代的。who唯一推荐用于临床治疗包虫病的药物苯并咪唑类药物仍是主要的治疗手段。其中阿苯达唑(albendazole,abz)是治疗包虫病的最佳药理选择，但其不溶于水和大多数有机溶剂，导致阿苯达唑的肠道吸收差、血药浓度低、生物利用度低，使其药效受到限制以致治愈率偏低(仅为30％左右)。近年来一些学者致力于阿苯达唑新剂型的研究，得到了阿苯达唑乳剂、阿苯达唑脂质体、阿苯达唑壳聚糖等剂型，并进行了药效学研究，取得了一定的进展，但都存在响应不足的缺陷，除了每种药物自身药性影响之外，还会受到包虫囊泡数量、大小、类型和位置影响及包虫囊壁影响，使药物难以完全透过囊壁发挥最佳药效，从而很难达到理想治疗效果。现有技术中利用苯并咪唑类药物和其他药物的联合使用治疗棘球蚴病取得了一定成果，但其中大部分疗效甚微或仍停留于实验室阶段。并且，包虫通常寄生于肝脏，使得肝脏负担增重，解毒作用下降，高剂量长期连续的给药大大增加药物的毒副作用。因此，如何提高抗包虫药物的生物利用度，加强药物透过包虫囊壁的能力，增加囊内有效浓度是包虫病治疗首要解决的问题。
4.本发明发明人前期采用光动力联合阿苯达唑抗包虫也获得显著的治疗效果(已申请专利并授权：光动力的组合物及其制备方法和应用，专利号：zl 202010479494.1)，但光动力中使用的激光，不能到达器官深部，治疗光动力难以治疗的深部病灶，故而提高阿苯达唑的临床疗效不仅需增加药物的溶解度、生物利用率及还应该需要考虑药物对包虫囊壁的穿透输送能力及多重杀虫功能。
5.声动力治疗(sonody-namictherapy，sdt)是在pdt基础上产生的一种新型的非侵入性治疗方法，它是利用超声诱导的空化作用以及声敏剂被激活后产生的自由基，杀死周围不断分裂的癌细胞。人体组织在声动力治疗的超声(ultrasound，us)照射下，其穿透组织的深度能够达到7-10厘米，而且诱导局部产生细胞毒性的活性氧可以被超声照射声敏介质激活释放出，进而产生对深层肿瘤的巨大损伤而引起了广泛关注。声动力治疗具有穿透力强、成本低、治疗精准和损伤轻微等优点，与光动力学治疗中使用的激光或微波相比，超声作为一种机械波，能够深入到肿瘤组织，准确聚焦于肿瘤细胞部位，有效地选择激活肿瘤中积累的超声增敏剂有利于避免对超声波传播路径上正常组织造成损害，对治疗肿瘤特别是
深部肿瘤有较强的靶向性和安全性。因此，可以克服光动力疗法中存在的激发光穿透能力差的缺点，对治疗体内深部的肿瘤病灶具有不可替代的作用。并且声动力治疗所需要的超声技术已经发展十分成熟，临床设备价格较为低廉。
6.因此，如何提供一种基于纳米技术的核靶向药物递送系统，将抗包虫药物送入具有满意治疗效果的细胞核是本领域技术人员亟需解决的技术问题。


技术实现要素：

7.为解决上述技术问题，本发明提出了一种增强声动力联合抗包虫药物治疗包虫病的自组装纳米药物及其制备方法与应用。
8.为实现上述目的，本发明提供了以下技术方案：
9.一种增强声动力联合抗包虫药物治疗包虫病的自组装纳米药物的制备方法，包括以下步骤：
10.以空心tio2纳米粒子为载体，利用原位光沉积法制备au/tio2纳米粒，再将所得au/tio2纳米粒加入到抗包虫药物溶液中进行载药，得到抗包虫药物@au/tio2，最后基于静电吸引法制备ha/pfob@au/tio2@抗包虫药物nps，即所述增强声动力联合抗包虫药物治疗包虫病的自组装纳米药物。
11.有益效果：本发明提供的自组装纳米药物是由靶向纳米载体和靶向纳米载体所装载的药物组成；靶向纳米载体由外壳和外壳包覆的内核组成，外壳为修饰透明质酸(ha)和pfob(全氟辛溴)封装在载体纳米颗粒的表面；内核为利用负载纳米金的介孔二氧化钛纳米颗粒(tio2)包裹化疗药物抗包虫药物。本发明所得ha/pfob@au/tio2@抗包虫药物nps中，pfob作为携氧体，增强声动力治疗效果，pfob使得纳米药物具备携氧能力，改善包虫囊泡内缺氧微环境，进而逆转抗包虫药物耐药，提高抗包虫效果，本发明所得自组装纳米药物可将抗包虫药物富集于病灶，避免抗包虫药物与外周组织的接触，防止抗包虫药物于外周组织的毒性作用，并且利用纳米载体产生活性氧的特性，增强抗包虫药物抗包虫效果，提高抗包虫药物治疗包虫效率，更有效地发挥抗包虫药物治疗包虫病的作用。
12.优选的，所述空心tio2纳米粒子的制备方法具体包括以下步骤：
13.将聚乙烯吡咯烷酮水溶液、盐酸以及无水乙醇混合均匀后，逐滴加入四氟化钛溶液搅拌均匀，再进行水热反应，反应结束后离心、洗涤、干燥后煅烧，得到所述空心tio2纳米粒子。
14.优选的，所述聚乙烯吡咯烷酮水溶液的浓度为10mg/ml，且所述聚乙烯吡咯烷酮为pvp-k30；
15.所述盐酸的浓度为0.1mol/l；
16.所述四氟化钛水溶液浓度为0.8-1.2ml/ml；
17.所述聚乙烯吡咯烷酮水溶液、盐酸、无水乙醇以及四氟化钛水溶液的体积比为5：0.15：75：0.2；
18.所述水热反应的温度为180℃，时间为3h；
19.所述煅烧的温度为350℃，时间为3h。
20.优选的，所述原位光沉积法制备au/tio2具体包括以下步骤：
21.将haucl4溶液调节ph后加入所述空心tio2纳米粒子搅拌均匀，然后利用氙灯光沉
积，反应结束后离心、洗涤沉淀、干燥，再经煅烧，得到所述au/tio2。
22.优选的，所述调节ph为调节至ph为9.0；
23.所述haucl4溶液浓度为0.1g/ml；
24.所述haucl4溶液与tio2的添加量之比为30mg：0.8mg；
25.所述沉积时间为50min；
26.所述煅烧的温度为350℃，时间为3h。
27.优选的，所述载药具体包括以下步骤：
28.将所述au/tio2与抗包虫药物溶液混合均匀后避光搅拌，搅拌结束后将所得沉淀进行洗涤，即完成载药，得到抗包虫药物@au/tio2。
29.优选的，所述抗包虫药物选自阿苯达唑、阿苯达唑亚砜、甲苯咪唑、氟苯达唑、奥芬达唑、青蒿琥脂、骆驼蓬碱类化合物和汉防己甲素中的一种或多种。
30.所述搅拌的时间为48h；
31.所述au/tio2与抗包虫药物溶液的添加量之比为10mg：5ml；
32.所述抗包虫药物溶液的溶剂为dmso，浓度为1mg/ml。
33.优选的，所述基于静电吸引法制备ha/pfob@au/tio2@抗包虫药物nps具体包括以下步骤：
34.向所述抗包虫药物@au/tio2的乙醇分散液中依次滴加透明质酸溶液以及全氟辛溴溶液，避光搅拌48h后将所得溶液滴加至水中继续避光搅拌48h，然后经透析、冻干即得所述ha/pfob@au/tio2@抗包虫药物nps。
35.一种增强声动力联合抗包虫药物治疗包虫病的自组装纳米药物的制备方法制备得到的自组装纳米药物。
36.一种自组装纳米药物在增强声动力联合抗包虫药物治疗包虫病的药物的制备中的应用。
37.本发明提供了一种增强声动力联合抗包虫药物治疗包虫病的自组装纳米药物及其制备方法与应用，其具有以下有益效果：
38.(1)本发明以介孔空心tio2作为药物载体，能通过控制纳米粒的粒径，很好的装载药物，超声响应，加快释放抗包虫药物。并且，在ha/pfob@au/tio2@抗包虫药物nps中，在超声激活下，tio2发生电子空穴分离，与周围的水或氧分子反应产生活性氧(相比于传统声敏剂，tio2纳米颗粒介导的sdt能产生更多单线态氧)。aunps负载于介孔空心tio2，利用了aunps增强声动力治疗的特点，提高治疗效果，也提高了基于tio2声动治疗技术的应用价值。ha包裹tio2nps，赋予了声敏剂巨噬细胞靶向性(在包虫囊泡寄生的宿主组织周围有大量巨噬细胞浸润)；
39.(2)本发明所得到的纳米药物可通过超声发挥声动力治疗效果，该治疗方式能够深入到寄生于组织深部包虫囊泡，准确聚焦于包虫寄生部位，有效地选择性激活包虫中积累的超声增敏剂联合化疗药物，使得少量化疗药物即可完全起效，进而增加了药物生物利用率，降低了给药剂量和药物毒副作用，提高患者的顺应性；
40.(3)本发明所得ha/pfob@au/tio2@抗包虫药物nps为双重功能纳米颗粒，使用pfob@au/tio2增强了机体ros的累积起到氧化损伤抗包虫效果，再联用传统药物抗包虫药物(抑制寄生虫摄取利用葡萄糖阻及阻碍atp生成)治疗联合作用抗包虫，能够放大药物杀
虫能力并逆转抗包虫药物耐药，达到“1+1》2”的效果，并且，ha/pfob@au/tio2@抗包虫药物nps更容易渗漏到包虫于组织的间隙，延长停留时间，具有被动靶向包虫部位的能力，且超声技术已经发展十分成熟，临床设备价格较为低廉。因此，本发明中的新型抗包虫病治疗体系的提出为临床包虫病治疗提供了新的策略。
附图说明
41.构成本技术的一部分的附图用来提供对本技术的进一步理解，本技术的示意性实施例及其说明用于解释本技术，并不构成对本技术的不当限定。在附图中：
42.图1为纳米颗粒携氧能力稳定性结果图；
43.图2为纳米颗粒的稳定性结果示意图；
44.图3为纳米颗粒的药物释放示意图；
45.图4为纳米颗粒活性氧产生强度结果图；
46.图5为纳米颗粒对原头蚴存活率水平的影响。
具体实施方式
47.下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
48.为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合附图和具体实施方式对本发明作进一步详细的说明。
49.本发明实施例中的原料均通过市售途径购买获得。
50.实施例1
51.一种增强声动力联合抗包虫药物治疗包虫病的自组装纳米药物的制备方法，包括以下步骤：
52.(1)空心tio2纳米粒子的制备：将5ml聚乙烯吡咯烷酮pvp-k30(10mg/ml)水溶液及0.15ml盐酸(0.1mol/l)加入75ml无水乙醇，室温下磁力搅拌混合均匀，随后在磁力搅拌状态下向所得分散液中逐滴加入10ml浓度为(1mg/ml)的四氟化钛水溶液，滴加完成后磁力搅拌1h，然后将所得悬浮液转移到不锈钢高压釜中，在180℃下恒温水热反应3h，反应结束后冷却至室温。离心收集白色产物，分别用水和乙醇洗涤数次。在60℃下干燥24h后，在马弗炉中350℃下煅烧3h，得到空心tio2纳米粒子；
53.(2)au/tio2的制备：将5ml的haucl4溶液(0.1g/ml)加入到200ml水中，用1mol
·
l-1
naoh溶液将ph值调至9.0，然后加入0.8mg步骤(1)所得空心tio2纳米粒子，搅拌3h得到悬浮液，将所得悬浮液用氙灯进行光沉积50min，并通过离心收集浅紫色的产物，用高纯水洗涤数次，在60℃下干燥24h后放入马弗炉中于350℃下煅烧3h，得到紫色的au/tio2；
54.(3)au/tio2载药制备abz@au/tio2：将10mg步骤(2)所得au/tio2加入到5ml游离的abz溶液中(溶剂为dmso，1mg/ml)，并在室温下避光搅拌48h，搅拌结束后收集沉淀物，用高纯水多次洗涤，直到上清液无色，得到abz@au/tio2。载药量由abz在λ＝295nm处的特征光吸光度确定，经检测载药量为29％；
55.(4)基于静电吸引法制备ha/pfob@au/tio2@abz nps：取步骤(3)所得abz@au/tio2分散于乙醇中，得到浓度为2mg/ml的abz@au/tio2乙醇溶液，在剧烈搅拌下，向10mlabz@au/tio2乙醇溶液依次滴加1ml 0.15％(w/v)的透明质酸溶液以及2ml 0.25mg/ml的全氟辛溴溶液，并在避光条件下磁力搅拌48h；搅拌结束后，将所得溶液缓慢滴加到15ml高纯水中，室温避光条件下再次磁力搅拌48h，反应结束后将反应液于去离子水中透析(透析袋截留分子量为8000-14000da)，然后经冻干，即得ha/pfob@au/tio2@abz nps，即为增强声动力联合抗包虫药物治疗包虫病的自组装纳米药物。
56.经检测，所得自组装纳米药物的粒径为80-400nm。
57.对比例1
58.一种增强声动力联合抗包虫药物治疗包虫病的自组装纳米药物的制备方法，与实施例1不同之处在于，步骤(5)中包括以下步骤：
59.(5)基于静电吸引法制备pfob@au/tio2@abz nps：取步骤(3)所得abz@au/tio2分散于乙醇中，得到浓度为2mg/ml的abz@au/tio2乙醇溶液，在剧烈搅拌下，向10mlabz@au/tio2乙醇溶液依次滴加2ml 0.25mg/ml的全氟辛溴溶液并在避光条件下磁力搅拌48h；搅拌结束后，将所得溶液缓慢滴加到15ml高纯水中，室温避光条件下再次磁力搅拌48h，反应结束后将反应液于去离子水中透析(透析袋截留分子量为8000-14000da)，然后经冻干，即得pfob@au/tio2@abz nps药物。
60.应用例1
61.1.ha/pfob@au/tio2@abz纳米粒携氧能力检测
62.采用uv-vis(ultraviolet
–
visible spectroscopy)，是紫外-可见光吸收光谱测定，将kmno4配制成0、0.1、0.2、0.4、0.8mmol/l系列浓度，用uv-vis测量不同浓度kmno4的紫外吸收值，绘制出kmno4的标准曲线，标准曲线方程为：y＝0.97+0.019，r2＝0.9983。
63.取相同浓度相同体积的pfob@au/tio2@abz和ha/pfob@au/tio2@abz纳米粒分别与过量的na2so3反应，未反应的na2so3与kmno4发生化学反应，根据kmno4发生反应前后的吸光值变化以及氧化还原反应的摩尔质量比定量测出pfob@au/tio2@abz和ha/pfob@au/tio2@abz纳米粒含氧量。根据上述氧化还原反应分别在1、2、3、4、5天同一时间取样，测含氧稳定性。其中，pfob@au/tio2@abz中pfob的含氧量为0.381
±
0.057mg/ml，纳米粒ha/pfob@au/tio2@abz中pfob的含氧量为0.367
±
0.081mg/mlμ，如图1所示，5天内，纳米粒含氧量只有少数下降，携氧能力较为稳定。
64.2.纳米粒的粒径和表面电位测定：
65.将实施例1制备的纳米粒au/tio2@abz和ha/pfob@au/tio2@abz用超纯水稀释，配制质量浓度为10％的悬浮液，采用动态光散射粒度测定仪(dls)来测定纳米粒au/tio2@abz、pfob@au/tio2@abz、ha/pfob@au/tio2@abz的粒径分布和表面zeta电势。各纳米药物的粒径分布、电势结果如表1所示，各纳米粒呈现负电性。
66.表1不同纳米粒的粒径和电势
67.样品平均粒径(nm)平均电势(mv)au/tio2@abz152.01
±
10.12-13.23
±
2.17pfob@au/tio2@abz160.35
±
14.73-15.22
±
1.31ha/pfob@au/tio2@abz166.93
±
10.89-14.08
±
3.55
68.3.评价纳米颗粒的稳定性
69.将制备得到的声动力纳米颗粒，分别放置在4℃和37℃，取样，采用激光粒度仪测定纳米颗粒的粒径，通过粒径的改变来反映纳米颗粒的稳定性，结果显示在不同储存条件下纳米颗粒在10天内粒径没有明显变化，说明所制备得到的ha/pfob@au/tio2@abz纳米颗粒具有良好的稳定性(参见图2)。
70.4.药物释放率测定
71.评价ha/pfob@au/tio2@abz纳米颗粒在超声作用下的药物释放行为
72.取实施例1中制备得到的纳米颗粒，放置在聚焦超声焦点位置，实验中所采用的超声装置主要参数为：频率1.0mhz，采用不同的超声强度(us0-0w/cm2，us1-0.2w/cm2，us2-0.3w/cm2，us3-0.4w/cm2，us4-0.5w/cm2，us5-0.6w/cm2)，超声处理5min，随后采用透析法测定药物释放率，结果显示在超声作用下，ha/pfob@au/tio2@abz nps中药物abz能够快速释放，且随着超声强度的增加，药物释放明显加快(见图3)，而在没有au/tio2负载的情况下(abz nps:采用plga-peg包封的纳米粒)结合超声处理，药物释放速率明显降低，其中abz nps指没有负载mtn的纳米颗粒，其制备方法为采用plga-peg包封的纳米粒，具体如下：
73.精确称取100mg高分子材料plga-peg和10mg阿苯达唑，溶于1ml dmso中，超声使其充分溶解后，使用移液枪将该溶液缓慢滴加入5倍体积的搅拌状态下的磷酸缓冲液(pbs，10mm，ph＝7.4)中，滴加完毕后室温下搅拌20min，随后以3500r/min转速离心5min，除去未包封的药物，即得到abz nps。
74.5.评价纳米颗粒在超声作用下ros的产生量
75.取实施例1制备得到的纳米颗粒，加入ros探针dcfh-da后放置在聚焦超声焦点处进行超声处理，超声装置与4中相同，选用us3为超声强度，随后采用荧光倒置显微镜观察活性氧产生强度，结果显示，ha/pfob@au/tio2@abz+sdt的强度明显高于au/tio2@abz+sdt。
76.6.考察纳米粒对eg atp水平的影响
77.以2000头每孔的浓度将原头蚴培养于24孔板中，各纳米粒给药干预并选用us3为超声强度，us干预5min，于培养板孔中加入100μlatp裂解液，充分裂解并转移至ep管，离心4℃、12700
×
g、10min，吸取上清。bca法进行蛋白定量检测，将各组蛋白终浓度调整至相同。按照atp检测试剂盒说明书，检测atp标准溶液和样品的发光值，根据atp浓度标准曲线获得样品的atp浓度。结果如表2所示，与eg对照组相比，au/tio2@abz、pfob@au/tio2@abz、ha/pfob@au/tio2@abz组eg atp水平均显著降低(均p＜0.01)；与abz nps组相比，atp水平均显著降低(均p＜0.01)与光动力结果对比。
78.表2sdt各纳米粒对egatp水平的影响
79.[0080][0081]
注：*与空白对照组比较，p＜0.05；**与空白对照组比较，p＜0.01；
##
与空白对照组比较，p＜0.01。
[0082]
表3 pdt各药物干预组细粒棘球蚴atp含量(n＝3,x
±
sd)
[0083]
组别atp含量(nmol/mg)空白对照组301.10
±
5.28abz nps组292.54
±
6.556ce6组222.06
±
8.91
**
abz nps+pdt38.59
±
5.94
**
[0084]
注(notes)：*与空白对照组比较，p＜0.05；**与空白对照组比较，p＜0.01；
[0085]
7.体外考察纳米粒抗包虫双重效果作用
[0086]
将原头蚴以200个/孔接种于96孔板中，用含有药物的纳米颗粒(abz nps、au/tio2@abz、ha/pfob@au/tio2@abz)孵育原头蚴12h，随后更换培养基，超声处理(参数和装置同4一致)5min，之后37℃孵育原头蚴24h，采用亚甲蓝染色观察死亡率，结果显示在没有超声作用之前，纳米颗粒对原头蚴死亡率的影响没有明显的变化，而超声作用之后，原头蚴死亡率明显上升，且随超声强度的增加而增加(见表4)。
[0087]
表4纳米粒干预后原头蚴的存活率(％)
[0088][0089]
注：*与空白对照组比较，p＜0.05；**与空白对照组比较，p＜0.01。
[0090]
8.体外pdt与sdt的eg存活率对比
[0091]
将原头蚴以200个/孔接种于96孔板中，
①
用含25μg/ml的阿苯达唑的纳米颗粒(ha/pfob@au/tio2@abz nps)孵育原头蚴12h，随后更换培养基，超声处理(参数和装置同4一致)us3强度超声5min，之后37℃孵育原头蚴24h，采用亚甲蓝染色观察死亡率；
②
使用10μg/ml ce6培养液对原头蚴进行2h的共培养，除去培养液，用pbs清洗原头蚴三次，再换用新的培养液，用5mw/cm2光剂量的635nm可见光进行5min光照。然后用含50μg/ml的阿苯达唑纳米粒对光动力治疗处理后的原头蚴进行24h的共培养。每孔各取3次10μl原头蚴用h&e进行染色统计其生存率。
[0092]
对比两种方法原头蚴的死亡率，结果显示超声作用后原头蚴死亡比光动力显著上升，见表5、图5。
[0093]
表5各纳米粒对原头蚴存活率水平的影响
[0094]
组别存活率eg control98.57
±
5.53abz nps97.23
±
2.36abz nps+pdt75.58
±
6.17**ha/pfob@au/tio2@abz+sdt27.43
±
5.24**
##
[0095]
注：*与空白对照组比较，p＜0.05；**与空白对照组比较，p＜0.01；
##
与空白abz nps组比较，p＜0.01；abz nps。
[0096]
以上，仅为本技术较佳的具体实施方式，但本技术的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本技术揭露的技术范围内，可轻易想到的变化或替换，都应涵盖在本技术的保护范围之内。因此，本技术的保护范围应该以权利要求的保护范围为准。

技术特征：
1.一种增强声动力联合抗包虫药物治疗包虫病的自组装纳米药物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：以空心tio2纳米粒子为载体，利用原位光沉积法制备au/tio2纳米粒，再将所得au/tio2纳米粒加入到抗包虫药物溶液中进行载药，得到抗包虫药物@au/tio2，最后基于静电吸引法制备ha/pfob@au/tio2@抗包虫药物nps，即所述增强声动力联合抗包虫药物治疗包虫病的自组装纳米药物。2.根据权利要求1所述的一种增强声动力联合抗包虫药物治疗包虫病的自组装纳米药物的制备方法，其特征在于，所述空心tio2纳米粒子的制备方法具体包括以下步骤：将聚乙烯吡咯烷酮水溶液、盐酸以及无水乙醇混合均匀后，逐滴加入四氟化钛溶液搅拌均匀，再进行水热反应，反应结束后离心、洗涤、干燥后煅烧，得到所述空心tio2纳米粒子。3.根据权利要求2所述的一种增强声动力联合抗包虫药物治疗包虫病的自组装纳米药物的制备方法，其特征在于，所述聚乙烯吡咯烷酮水溶液的浓度为10mg/ml，且所述聚乙烯吡咯烷酮为pvp-k30；所述盐酸的浓度为0.1mol/l；所述四氟化钛水溶液浓度为0.8-1.2ml/ml；所述聚乙烯吡咯烷酮水溶液、盐酸、无水乙醇以及四氟化钛水溶液的体积比为5：0.15：75：0.2；所述水热反应的温度为180℃，时间为3h；所述煅烧的温度为350℃，时间为3h。4.根据权利要求1所述的一种增强声动力联合抗包虫药物治疗包虫病的自组装纳米药物的制备方法，其特征在于，所述原位光沉积法制备au/tio2具体包括以下步骤：将haucl4溶液调节ph后加入所述空心tio2纳米粒子搅拌均匀，然后利用氙灯光沉积，反应结束后离心、洗涤沉淀、干燥，再经煅烧，得到所述au/tio2。5.根据权利要求1所述的一种增强声动力联合抗包虫药物治疗包虫病的自组装纳米药物的制备方法，其特征在于，所述调节ph为调节至ph为9.0；所述haucl4溶液与tio2的添加量之比为20mg：0.8mg；所述沉积时间为50min；所述煅烧的温度为350℃，时间为3h。6.根据权利要求1所述的一种增强声动力联合抗包虫药物治疗包虫病的自组装纳米药物的制备方法，其特征在于，所述载药具体包括以下步骤：将所述au/tio2与抗包虫药物溶液混合均匀后避光搅拌，搅拌结束后将所得沉淀进行洗涤，即完成载药，得到抗包虫药物@au/tio2。7.根据权利要求1所述的一种增强声动力联合抗包虫药物治疗包虫病的自组装纳米药物的制备方法，其特征在于，所述搅拌的时间为48h；所述au/tio2与抗包虫药物溶液的添加量之比为10mg：5ml；所述抗包虫药物溶液的溶剂为dmso，浓度为1mg/ml；所述抗包虫药物选自阿苯达唑、阿苯达唑亚砜、甲苯咪唑、氟苯达唑、奥芬达唑、青蒿琥脂、骆驼蓬碱类化合物和汉防己甲素中的一种或多种。
8.根据权利要求1所述的一种增强声动力联合抗包虫药物治疗包虫病的自组装纳米药物的制备方法，其特征在于，所述基于静电吸引法制备ha/pfob@au/tio2@抗包虫药物nps具体包括以下步骤：向所述抗包虫药物@au/tio2的乙醇分散液中依次滴加透明质酸溶液以及全氟辛溴溶液，避光搅拌48h后将所得溶液滴加至水中继续避光搅拌48h，然后经透析、冻干即得所述ha/pfob@au/tio2@抗包虫药物nps。9.如权利要求1-8任一项所述的一种增强声动力联合抗包虫药物治疗包虫病的自组装纳米药物的制备方法制备得到的自组装纳米药物。10.如权利要求9所述的自组装纳米药物在增强声动力联合抗包虫药物治疗包虫病的药物的制备中的应用。

技术总结
本发明公开了一种增强声动力联合抗包虫药物治疗包虫病的自组装纳米药物及其制备方法与应用，属于生物医药技术领域，制备方法包括以下步骤：以空心TiO2纳米粒子为载体，利用原位光沉积法制备Au/TiO2纳米粒，再将其进行载药，得到抗包虫药物@Au/TiO2，最后基于静电吸引法制备自组装纳米药物。本发明还公开了上述制备方法制备得到的自组装纳米药物及其在增强声动力联合抗包虫药物治疗包虫病的药物的制备中的应用。本发明所得自组装纳米药物可防止抗包虫药物于外周组织的毒性作用，且利用纳米载体产生活性氧的特性，增强抗包虫药物抗包虫效果，提高抗包虫药物治疗包虫效率，有效发挥抗包虫药物治疗包虫病的作用。发挥抗包虫药物治疗包虫病的作用。发挥抗包虫药物治疗包虫病的作用。


技术研发人员：杨建华 巩月红 王建华 温浩 孙亚军
受保护的技术使用者：新疆医科大学第一附属医院
技术研发日：2023.08.24
技术公布日：2023/10/11