一种盐酸丙卡特罗口服溶液有关物质的测定方法与流程

1.本发明属于药物杂质检测分析领域，具体涉及一种盐酸丙卡特罗口服溶液有关物质的测定方法。


背景技术：

2.盐酸丙卡特罗是一种5-(1-羟基-2-异丙胺基丁基)-8-羟基喹诺酮盐酸盐半水合物，主要用于支气管哮喘、喘息性支气管炎、伴有支气管反应性增高的急性支气管炎、慢性阻塞性肺部疾病。盐酸丙卡特罗口服溶液中添加依地酸二钠作为金属螯合剂，依地酸二钠可以鳌合口服溶液中的微量金属离子，阻止了金属离子对药物自身氧化的催化作用，减缓并降低了盐酸丙卡特罗成分的降解，降低了产品中的杂质含量，但依地酸二钠的加入带来了新的辅料成分。
3.在《中国药典》2020年版及2017年版《日本药典》中收录了hplc法对盐酸丙卡特罗原料的有关物质检测方法，但是均无法有效分离杂质ⅰ(及对映体)、杂质ⅱ()和杂质ⅲ()及含有防腐剂等复杂成分的口服溶液的有关物质。目前现有技术中也还未有能够同时有效分离盐酸丙卡特罗口服溶液中盐酸丙卡特罗、杂质ⅰ、杂质ⅱ、杂质ⅲ及其他杂质的分析测定方法，因此急需开发一种适用于盐酸丙卡特罗口服溶液有关物质的测定方法。


技术实现要素：

4.本发明的目的在于提供一种盐酸丙卡特罗口服溶液有关物质的测定方法，可有效分离盐酸丙卡特罗、杂质ⅰ、杂质ⅱ、杂质ⅲ及其他未知杂质，并且能消除空白溶液和空白辅料溶液产生的干扰，可用于盐酸丙卡特罗口服溶液制备过程及最终产品的质量控制。
5.本发明的盐酸丙卡特罗口服溶液有关物质的测定方法，包括以下步骤：
6.采用高效液相色谱法测定盐酸丙卡特罗口服溶液中盐酸丙卡特罗，杂质ⅰ：及对映体，杂质ⅱ：及杂质ⅲ：的含量；其中，高效液相色谱法的色谱条件包括：
7.色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；
8.流动相包括流动相a和流动相b，采用梯度洗脱；其中，流动相a为庚烷磺酸钠溶液和冰醋酸按体积比700～800：5～15混合后得到的混合溶液，其中，庚烷磺酸钠溶液中庚烷磺酸钠的浓度为2～6mmol/l，冰醋酸的浓度为99％以上；流动相b为乙腈；
9.检测波长为259nm；色谱柱柱温为30-50℃；流动相流速为1.5-3.0ml/min。
10.在一些实施方式中，流动相a的配制方法为：称取0.87g 1-庚烷磺酸钠至1000ml水中，摇匀，取760ml加冰醋酸10ml，混匀即得。
11.在一些实施方式中，色谱柱的规格为内径为4.6mm，长度为250mm，填充剂粒径为5μm。
12.在一些实施方式中，色谱柱柱温为40℃；流动相流速为2.0ml/min。
13.在一些实施方式中，梯度洗脱的程序为：
14.在开始洗脱后的22分钟内，洗脱液为由93体积份流动相a和7体积份流动相b组成的第一混合液；
15.在开始洗脱第22分钟至第50分钟内，洗脱液由所述第一混合液进一步变为由85体积份流动相a和15体积份流动相b组成的第二混合液；
16.在开始洗脱第50分钟至第50.01分钟内，洗脱液由所述第二混合液进一步变为由30体积份流动相a和70体积份流动相b组成的第三混合液；
17.在开始洗脱第50.01分钟至第60分钟内，洗脱液为第三混合液；
18.在开始洗脱第60分钟至第60.01分钟内，洗脱液由所述第三混合液进一步变为由93体积份流动相a和7体积份流动相b组成的第四混合液；
19.在开始洗脱第60.01分钟至第70分钟内，洗脱液为第四混合液。
20.在一些实施方式中，进样体积为50～200μl。
21.本发明的盐酸丙卡特罗口服溶液有关物质的测定方法，包括以下步骤：
22.(1)对照品储备液的制备
23.盐酸丙卡特罗对照品储备液：精密称取12mg盐酸丙卡特罗对照品置于50ml量瓶中，用稀释剂稀释至刻度，得到盐酸丙卡特罗对照品储备液；
24.(2)对照品溶液、灵敏度溶液、系统适用性溶液和空白辅料溶液的制备
25.盐酸丙卡特罗对照品溶液：精密量取盐酸丙卡特罗对照品储备液2ml置于100ml量瓶中，用稀释剂稀释至刻度，得到定容溶液，再精密量取1ml定容溶液，置于另一个100ml量瓶中，用稀释剂稀释至刻度，摇匀，得到盐酸丙卡特罗对照品溶液；
26.灵敏度溶液：精密量取盐酸丙卡特罗对照品溶液5ml置于10ml量瓶中，用稀释剂稀释至刻度，摇匀，得到灵敏度溶液；
27.系统适用性溶液：精密量取盐酸丙卡特罗对照品储备液0.5ml，加入1mol/l氢氧化钠溶液2ml，混匀，于水浴中加热3小时，取出冷却至室温，然后加入1mol/l盐酸溶液2ml，用稀释剂稀释至10ml，摇匀，得到系统适用性溶液；
28.空白辅料溶液：取空白辅料，作为空白辅料溶液；
29.(3)系统适用性
30.取空白溶液、空白辅料溶液、灵敏度溶液、系统适用性溶液各100μl，分别注入高效液相色谱仪，记录色谱图，控制洗脱条件使空白溶液、空白辅料溶液不干扰有关物质检查；系统适用性溶液色谱图中盐酸丙卡特罗峰与相邻杂质峰间的最小分离度应≥1.5，灵敏度
溶液中盐酸丙卡特罗峰信噪比应＞10；
31.(4)供试品检测
32.取对照品溶液、供试品溶液各100μl，分别注入高效液相色谱仪，记录色谱图。
33.在一些实施方式中，稀释剂为流动相a，其配制方法为：称取0.87g 1-庚烷磺酸钠至1000ml水中，摇匀，取760ml加冰醋酸10ml，混匀即得。
34.在一些实施方式中，空白溶液为流动相a，其配制方法为：称取0.87g1-庚烷磺酸钠至1000ml水中，摇匀，取760ml加冰醋酸10ml，混匀即得。
35.在一些实施方式中，步骤(2)中，水浴的温度为60～80℃。
36.本发明的有益效果包括：
37.(1)本发明通过使用高效液相色谱梯度法同时测定盐酸丙卡特罗、杂质ⅰ、杂质ⅱ、杂质ⅲ及其他有关物质，通过对色谱条件的探索，确定了有效分离盐酸丙卡特罗、杂质ⅰ、杂质ⅱ、杂质ⅲ及其他有关物质的色谱条件。本发明的方法可有效分离盐酸丙卡特罗、杂质ⅰ、杂质ⅱ、杂质ⅲ及其他未知杂质，能消除空白溶液和空白辅料溶液产生的干扰，可用于盐酸丙卡特罗口服溶液制备过程及最终产品的质量控制。本发明的方法专属性好、分离度佳、灵敏度高、重现性好，对评价合成和制剂工艺的优劣、终产品质量控制及稳定性样品检测具有重要的意义。
38.(2)本发明适用于盐酸丙卡特罗口服溶液中间产品和成品的检测，本发明的检测方法可以充分满足有关物质检查与分解产物测定的要求，保证产品质量，在实际质量控制工作中实用性强。
附图说明
39.图1为空白溶液色谱图。
40.图2为空白辅料溶液色谱图。
41.图3为未破坏供试品溶液色谱图。
42.图4为系统适用性溶液色谱图。
43.图5为对比例1的色谱图。
具体实施方式
44.下面结合实施方式对本发明作进一步详细的说明。实施例仅用于解释而不以任何方式限制本发明。如无特殊说明，实施例中所用原料和试剂为可以通过市售获得的常规产品；实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照本领域常规条件或按照制造厂商建议的条件。
45.一、盐酸丙卡特罗口服溶液有关物质测定方法的建立
46.实施例1
47.1、仪器与试剂
48.主要仪器：waters e2695-2998系列高效液相色谱仪；色谱柱：ultimate xb-c18，4.6*250mm,5μm。
49.主要试剂：1-庚烷磺酸钠(分析纯)，冰醋酸(分析纯)，乙腈(色谱纯)。
50.稀释剂为流动相a，其配制方法为：称取0.87g 1-庚烷磺酸钠至1000ml水中，摇匀，
取760ml加冰醋酸10ml，混匀即得。
51.空白溶液为流动相a，其配制方法为：称取0.87g 1-庚烷磺酸钠至1000ml水中，摇匀，取760ml加冰醋酸10ml，混匀即得。
52.2、对照品信息
53.盐酸丙卡特罗工作对照品：来源于中国食品药品检定研究院，含量96.9％；
54.杂质ⅰ对照品：及对映体，来源于qcc，含量90.74％；
55.杂质ⅱ对照品：来源于cato，含量99.8％；
56.杂质ⅲ对照品：来源于cato，含量98.8％。
57.3、样品信息
58.供试品溶液：由深圳市贝美药业有限公司研发部提供，含量/规格：60ml:0.3mg；
59.空白辅料：由深圳市贝美药业有限公司研发部提供。
60.供试品溶液与空白辅料的组成如下表1所示：
61.表1供试品溶液与空白辅料的组成
62.供试品溶液空白辅料盐酸丙卡特罗/蔗糖蔗糖枸橼酸枸橼酸枸橼酸钠枸橼酸钠苯甲酸钠苯甲酸钠羟苯乙酯羟苯乙酯羟苯丁酯羟苯丁酯丙二醇丙二醇桔子香精桔子香精依地酸二钠依地酸二钠
63.4、溶液的配制
64.(1)对照品储备液的制备：
65.盐酸丙卡特罗对照品储备液：精密称取12mg盐酸丙卡特罗工作对照品置于50ml量瓶中，用稀释剂稀释至刻度，得到盐酸丙卡特罗对照品储备液；
66.杂质ⅰ对照品储备液：精密称取杂质ⅰ对照品约10mg置于100ml量瓶中，加甲醇溶解，并用稀释剂稀释至刻度，摇匀即得。
67.杂质ⅱ对照品储备液：精密称取杂质ⅱ对照品约10mg置于100ml量瓶中，加甲醇溶
解，并用稀释剂稀释至刻度，摇匀即得。
68.杂质ⅲ对照品储备液：精密称取杂质ⅲ对照品约10mg置于100ml量瓶中，加甲醇溶解，并用稀释剂稀释至刻度，摇匀即得。
69.(2)对照品溶液、灵敏度溶液、系统适用性溶液和空白辅料溶液的制备：
70.盐酸丙卡特罗对照品溶液：精密量取盐酸丙卡特罗对照品储备液2ml置于100ml量瓶中，用稀释剂稀释至刻度，得到定容溶液，再精密量取1ml定容溶液，置于另一个100ml量瓶中，用稀释剂稀释至刻度，摇匀，得到盐酸丙卡特罗对照品溶液；
71.灵敏度溶液：精密量取盐酸丙卡特罗对照品溶液5ml置于10ml量瓶中，用稀释剂稀释至刻度，摇匀，得到灵敏度溶液；
72.系统适用性溶液：精密量取盐酸丙卡特罗对照品储备液0.5ml，加入1mol/l氢氧化钠溶液2ml，混匀，于60～80℃的水浴中加热3小时，取出冷却至室温，然后加入1mol/l盐酸溶液2ml，用稀释剂稀释至10ml，摇匀，得到系统适用性溶液；
73.空白辅料溶液：取空白辅料，作为空白辅料溶液。
74.5、色谱条件
75.精密量取空白溶液、空白辅料溶液、灵敏度溶液、系统适用性溶液、对照品溶液和供试品溶液，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。色谱条件及其对应的出峰结果如表2所示。
76.表2色谱条件及其出峰结果
77.78.[0079][0080]
因此，以条件5作为盐酸丙卡特罗口服溶液有关物质检测的色谱条件。
[0081]
二、盐酸丙卡特罗口服溶液有关物质测定方法的考察
[0082]
实施例2
[0083]
专属性(强制降解实验)
[0084]
分别用高温、酸、碱、氧化、光照等剧烈条件对供试品溶液破坏后，进行有关物质测定，以考察所选择的色谱条件能否检测出供试品溶液可能产生的降解产物，具体如下：
[0085]
(1)未破坏供试品溶液：取盐酸丙卡特罗供试品溶液(60ml:0.3mg)即得。
[0086]
(2)酸破坏供试品溶液：取盐酸丙卡特罗供试品溶液(60ml:0.3mg)10ml，加入5mol/l的hcl溶液0.1ml，摇匀，静置24h后，加入5mol/l的naoh溶液0.1ml混合均匀，即得。
[0087]
(3)碱破坏供试品溶液：取盐酸丙卡特罗供试品溶液(60ml:0.3mg)10ml，加入5mol/l的naoh溶液0.1ml，摇匀，静置24h后，加入5mol/l的hcl溶液0.1ml混合均匀，即得。
[0088]
(4)氧化破坏供试品溶液：量取30％ h2o2溶液1ml于10ml量瓶中，用盐酸丙卡特罗供试品溶液(60ml:0.3mg)稀释至刻度，摇匀，静置24h，即得。
[0089]
(5)高温破坏供试品溶液：取盐酸丙卡特罗供试品溶液(60ml:0.3mg)置105℃下放置1h后即得。
[0090]
(6)光照破坏供试品溶液：取盐酸丙卡特罗供试品溶液(60ml:0.3mg)于4500
±
500lux条件下放置2天后即得。
[0091]
采用实施例1中确定的色谱条件5分别对(1)～(6)得到的溶液进行检测，记录色谱图，其中，未破坏供试品溶液色谱图如图3所示。检测结果如表3所示：
[0092]
表3强制降解实验结果
[0093][0094]
结果显示，酸、碱破坏条件下，降解杂质均为杂质ⅲ；氧化破坏条件下供试品溶液未降解出杂质，较稳定；高温破坏条件下，降解杂质为杂质ⅰ和杂质ⅲ；光照破坏条件下，降解杂质为rrt1.095的未知杂质。
[0095]
上述各破坏条件下主峰纯度角度小于主峰纯度阈值，特定杂质峰及主峰与相邻杂质峰分离度均大于5.95，降解前后总峰面积的比值(物料平衡)为94.2％～101.6％，物料守恒。
[0096]
综上表明本发明的盐酸丙卡特罗口服溶液中有关物质的检测方法专属性良好。
[0097]
实施例3
[0098]
系统适用性实验
[0099]
精密吸取系统适用性溶液100μl，注入高效液相色谱仪中，按照实施例1确定的色谱条件5进行检测，记录色谱图。色谱检测结果如图4及表4所示。
[0100]
表4系统适用性实验结果
[0101][0102][0103]
结果显示，系统适用性溶液中，杂质ⅲ、杂质ⅱ、盐酸丙卡特罗、杂质ⅰ依次出峰，盐酸丙卡特罗峰与相邻杂质峰的分离度为6.62，系统适用性符合要求。
[0104]
实施例4
[0105]
定量限与检测限
[0106]
杂质对照品溶液：精密量取盐酸丙卡特罗对照品储备液1ml，杂质ⅰ对照品储备液、
杂质ⅱ对照品储备液、杂质ⅲ对照品储备液各5ml置100ml量瓶中，用稀释剂稀释至刻度，摇匀即得。
[0107]
定量限溶液：精密量取杂质对照品溶液1ml至100ml量瓶中，用稀释剂稀释至刻度，摇匀即得。
[0108]
检测限溶液：精密量取杂质对照品溶液1ml至200ml量瓶中，用稀释剂稀释至刻度，摇匀即得。
[0109]
取定量限溶液和检测限溶液，分别进样100μl，按照实施例1确定的色谱条件5进行检测。
[0110]
检测限结果如表5所示，定量限结果如表6所示。
[0111]
表5检测限结果
[0112]
化合物浓度(μg/ml)与供试品浓度比(％)s/n盐酸丙卡特罗0.01280.311杂质ⅰ0.02320.521杂质ⅱ0.02530.525杂质ⅲ0.02530.522
[0113]
表6定量限结果
[0114]
化合物浓度(μg/ml)与供试品浓度比(％)s/n盐酸丙卡特罗0.025680.518杂质ⅰ0.046410.932杂质ⅱ0.050601.042杂质ⅲ0.050541.035
[0115]
结果显示，盐酸丙卡特罗、杂质ⅰ、杂质ⅱ和杂质ⅲ的检测限溶液浓度分别为0.01μg/ml，0.02μg/ml，0.02μg/ml，0.02μg/ml，信噪比分别为11，21，25和22，约相当于供试品溶液浓度的0.3％，0.5％，0.5％，0.5％时可被有效检出，方法灵敏度好。
[0116]
盐酸丙卡特罗、杂质ⅰ、杂质ⅱ和杂质ⅲ的定量限溶液浓度分别为0.02μg/ml，0.05μg/ml，0.05μg/ml，0.05μg/ml，信噪比分别为18，32，42和35，约相当于供试品溶液浓度的0.5％，0.9％，1.0％，1.0％时可被准确定量，方法灵敏度好。
[0117]
实施例5
[0118]
重复性实验
[0119]
配制加标供试品溶液：精密量取杂质ⅰ对照品储备液、杂质ⅱ对照品储备液、杂质ⅲ对照品储备液各1ml置50ml量瓶中，用稀释剂稀释至刻度，摇匀。再精密量取上述溶液1ml置20ml量瓶中，用稀释剂稀释至刻度，摇匀即得。
[0120]
平行配制6份加标供试品溶液，分别进样100μl，按照实施例1确定的色谱条件5进行检测，计算各杂质含量，实验结果如表7所示。
[0121]
表7重复性实验结果
[0122]
杂质名称123456平均值rsd杂质ⅰ2.062.052.092.122.032.102.0751.63％杂质ⅱ1.951.971.992.011.981.951.9751.19％
杂质ⅲ2.032.042.032.062.052.012.0370.86％
[0123]
结果显示，加标供试品溶液中杂质ⅰ、杂质ⅱ及杂质ⅲ的rsd分别为1.63％，1.19％，0.86％，均小于5.0％，表明本发明的方法重复性良好。
[0124]
实施例6
[0125]
溶液稳定性
[0126]
取加标供试品溶液置于室温条件下考察，并在不同时间点(0h，24h，48h，96h)取样检测，取样量为100μl，注入高效液相色谱仪，按照实施例1确定的色谱条件进行检测，记录色谱图，结果如表8所示。
[0127]
表8溶液稳定性检测结果
[0128]
时间总杂含量杂质ⅰ杂质ⅱ杂质ⅲ0h6.2％2.2％2.0％2.0％24h5.9％1.9％2.0％2.0％48h5.9％2.0％1.9％2.0％96h6.1％2.3％1.9％1.9％
[0129]
结果显示，室温条件下，与0h相比，96h后的加标供试品溶液中特定杂质含量和杂质总量比值均在0.86～1.05，说明加标供试品溶液可在室温条件下放置96h内使用。
[0130]
实施例7
[0131]
耐用性实验
[0132]
分别考察柱温变化
±
2℃，流速相对值变化
±
5％及色谱柱，进行耐用性实验。精密量取100μl系统适用性溶液注入高效液相色谱仪，按照实施例1确定的色谱条件5进行检测，记录色谱图，检测结果如表9所示。
[0133]
表9耐用性实验结果
[0134][0135]
结果显示，在柱温、流速及色谱柱发生微小变化时，盐酸丙卡特罗主峰理论塔板数，盐酸丙卡特罗与杂质i之间的分离度满足系统适用性要求，表明本发明的方法耐用性良好。
[0136]
对比例1
[0137]
采用2017年《日本药典》中收录的对于盐酸丙卡特罗原料的有关物质检测方法进行盐酸丙卡特罗口服溶液的有关物质检测，检测结果如图5所示。由图5可知，在《日本药典》记载的条件下，空白辅料出峰多，干扰盐酸丙卡特罗和杂质ⅰ出峰。
[0138]
以上所述的仅是本发明的一些实施方式。对于本领域的普通技术人员来说，在不
脱离本发明创造构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。

技术特征：
1.一种盐酸丙卡特罗口服溶液有关物质的测定方法，其特征在于，采用高效液相色谱法测定盐酸丙卡特罗口服溶液中盐酸丙卡特罗，杂质ⅰ：及对映体，杂质ⅱ：及杂质ⅲ：的含量；其中，所述高效液相色谱法的色谱条件包括：色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相包括流动相a和流动相b，采用梯度洗脱；其中，所述流动相a为庚烷磺酸钠溶液和冰醋酸按体积比700～800：5～15混合后得到的混合溶液，其中，所述庚烷磺酸钠溶液中庚烷磺酸钠的浓度为2～6mmol/l，所述流动相b为乙腈；检测波长为259nm；色谱柱柱温为30-50℃；流动相流速为1.5-3.0ml/min。2.根据权利要求1所述的盐酸丙卡特罗口服溶液有关物质的测定方法，其特征在于，所述流动相a的配制方法为：称取0.87g 1-庚烷磺酸钠至1000ml水中，摇匀，取760ml加冰醋酸10ml，混匀即得。3.根据权利要求1或2所述的盐酸丙卡特罗口服溶液有关物质的测定方法，其特征在于，所述色谱柱的规格为内径为4.6mm，长度为250mm，填充剂粒径为5μm。4.根据权利要求1或2所述的盐酸丙卡特罗口服溶液有关物质的测定方法，其特征在于，所述色谱柱柱温为40℃；流动相流速为2.0ml/min。5.根据权利要求1或2所述的盐酸丙卡特罗口服溶液有关物质的测定方法，其特征在于，所述梯度洗脱的程序为：在开始洗脱后的22分钟内，洗脱液为由93体积份流动相a和7体积份流动相b组成的第一混合液；在开始洗脱第22分钟至第50分钟内，洗脱液由所述第一混合液进一步变为由85体积份流动相a和15体积份流动相b组成的第二混合液；在开始洗脱第50分钟至第50.01分钟内，洗脱液由所述第二混合液进一步变为由30体积份流动相a和70体积份流动相b组成的第三混合液；在开始洗脱第50.01分钟至第60分钟内，洗脱液为第三混合液；在开始洗脱第60分钟至第60.01分钟内，洗脱液由所述第三混合液进一步变为由93体积份流动相a和7体积份流动相b组成的第四混合液；在开始洗脱第60.01分钟至第70分钟内，洗脱液为第四混合液。6.根据权利要求1或2所述的盐酸丙卡特罗口服溶液有关物质的测定方法，其特征在于，进样体积为50～200μl。7.根据权利要求1或2所述的盐酸丙卡特罗口服溶液有关物质的测定方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)对照品储备液的制备盐酸丙卡特罗对照品储备液：精密称取12mg盐酸丙卡特罗对照品置于50ml量瓶中，用
稀释剂稀释至刻度，得到盐酸丙卡特罗对照品储备液；(2)对照品溶液、灵敏度溶液、系统适用性溶液和空白辅料溶液的制备盐酸丙卡特罗对照品溶液：精密量取盐酸丙卡特罗对照品储备液2ml置于100ml量瓶中，用稀释剂稀释至刻度，得到定容溶液，再精密量取1ml定容溶液，置于另一个100ml量瓶中，用稀释剂稀释至刻度，摇匀，得到盐酸丙卡特罗对照品溶液；灵敏度溶液：精密量取盐酸丙卡特罗对照品溶液5ml置于10ml量瓶中，用稀释剂稀释至刻度，摇匀，得到灵敏度溶液；系统适用性溶液：精密量取盐酸丙卡特罗对照品储备液0.5ml，加入1mol/l氢氧化钠溶液2ml，混匀，于水浴中加热3小时，取出冷却至室温，然后加入1mol/l盐酸溶液2ml，用稀释剂稀释至10ml，摇匀，得到系统适用性溶液；空白辅料溶液：取空白辅料，作为空白辅料溶液；(3)系统适用性取空白溶液、空白辅料溶液、灵敏度溶液、系统适用性溶液各100μl，分别注入高效液相色谱仪，记录色谱图，控制洗脱条件使空白溶液、空白辅料溶液不干扰有关物质检查；系统适用性溶液色谱图中盐酸丙卡特罗峰与相邻杂质峰间的最小分离度应≥1.5，灵敏度溶液中盐酸丙卡特罗峰信噪比应＞10；(4)供试品检测取对照品溶液、供试品溶液各100μl，分别注入高效液相色谱仪，记录色谱图。8.根据权利要求7所述的盐酸丙卡特罗口服溶液有关物质的测定方法，其特征在于，所述稀释剂为流动相a。

技术总结
本发明属于药物杂质检测分析领域，具体涉及一种盐酸丙卡特罗口服溶液有关物质的测定方法。本发明采用高效液相色谱法测定盐酸丙卡特罗口服溶液中盐酸丙卡特罗，杂质Ⅰ，杂质Ⅱ，及杂质Ⅲ的含量；其中，高效液相色谱法的色谱条件包括：色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相包括流动相A和流动相B，采用梯度洗脱；其中，流动相A为庚烷磺酸钠溶液和冰醋酸按体积比700～800：5～15混合后得到的混合溶液，流动相B为乙腈；检测波长为259nm；色谱柱柱温为30-50℃；流动相流速为1.5-3.0mL/min。本发明可有效分离盐酸丙卡特罗、杂质Ⅰ、杂质Ⅱ、杂质Ⅲ及其他未知杂质，方法专属性好、分离度佳、灵敏度高、重现性好。重现性好。


技术研发人员：许佳佳 梁燕婷 刘娟 曾菊香 李红组
受保护的技术使用者：深圳市贝美药业有限公司
技术研发日：2023.06.27
技术公布日：2023/10/15