一种治疗肉牛子宫内膜炎的中药复方制剂

1.本发明涉及一种治疗肉牛子宫内膜炎的中药复方制剂，属于中医药技术领域。


背景技术：

2.牛子宫内膜炎定义为产后21天或更长时间的内膜炎症，是由分娩后至少3周炎症失调和持续存在一种或多种致病菌引起的感染，无全身性疾病体征。肉牛子宫内膜炎是导致肉牛繁殖障碍的主要原因之一，同时在繁殖性障碍疾病中危害最严重。子宫内膜炎严重影响母牛的发情周期和受胎率，是造成母牛不孕的主要原因。与子宫感染相关的炎症都会延迟卵泡生长，扰乱生殖功能，而卵泡发育、卵母细胞释放和黄体形成，是哺乳动物生育能力和维持生殖性能的关键组成部分，这些卵巢周期事件主要受下丘脑、垂体调节，从而影响卵巢卵泡发育、排卵和黄体功能，首先细菌感染抑制雌二醇的产生，导致卵巢显性卵泡的缓慢生长，并减少排卵数量，从而导致生产力低下。此外，患子宫内膜炎病牛需要频繁治疗，即使子宫内膜炎恢复，生育率仍然欠佳，对养殖业造成重大损失。子宫内膜炎对生殖性能的负面影响，主要表现在延长了每次受孕的时间、产犊至受孕间隔，增加了妊娠风险，并降低了受孕率。而繁殖性能是肉牛生产效率的重要参数，尤其是维持养殖场经济可持续性的必要条件。由于生育能力下降以及生殖寿命的浪费，从而造成了养殖肉牛高额的经济损失。综上所述，子宫内膜炎对养殖业造成巨大困扰和经济损失，严重制约了养殖业的发展。随着养殖业越来越规模化，人工授精技术越来越成熟，子宫内膜炎的发病率也逐年上升，因此对牛子宫内膜炎进行早期预防和及时确诊治疗至关重要。
3.肉牛子宫内膜炎的致病因素主要包括病原微生物感染，饲养管理，继发性因素和遗传因素，肉牛子宫内膜炎极少数为急性，大部分是慢性子宫内膜炎，而慢性子宫内膜炎多数是未及时治疗的急性子宫内膜炎转变而来的。与急性子宫内膜炎相比，慢性子宫内膜炎与体温升高无关，外表无明显症状，而且动物不会表现出疾病的一般迹象或抑郁的态度。慢性子宫内膜炎主要表现为在发情期间阴门有脓性分泌物排出，子宫颈黏膜充血、子宫角增大、屡配不孕、配种受孕后发生流产等。肉牛隐性子宫内膜炎没有外在临床症状，能正常发情且排卵，但在发情期间阴道中流出多量稀薄黏液，透明度下降且混浊。
4.子宫炎症是全球牛养殖过程中的一个严重问题，造成相当大的经济损失，主要是由微生物在子宫内膜中繁殖引起的。表现为细胞学检查中可见的白细胞浸润，导致削弱子宫内膜的局部免疫机制，使炎症持续很长时间。子宫内膜炎影响卵巢周期性，导致非周期性不育和产犊间隔延长，从而影响繁殖性能。临床治疗子宫内膜炎主要依靠抗生素，用抗菌剂治疗子宫内膜炎虽然取得了不同程度的成功，但全球抗生素耐药性已被公认为21世纪最大的公共卫生挑战，由于对抗疗法药物过度使用导致恢复率不一致，治疗成本高，对动物机体造成了一定的毒性和副作用。因此，需要开发天然来源的新型抗菌剂，所以中药在动物治疗中受到了广泛的重视。中兽医理论认为治疗子宫内膜炎时，应以祛瘀、活血、解毒类药物为主。
5.有鉴于此特提出本发明来帮助解决上述问题。


技术实现要素：

6.本发明的目的就在于为了解决上述问题而提供一种治疗肉牛子宫内膜炎的中药复方制剂，对肉牛子宫内膜炎具有显著治疗效果，相较于传统的抗生素治疗方式具有安全性高、低残、低毒和不易产生耐药性等突出优点。
7.本发明通过以下技术方案来实现上述目的，一种治疗肉牛子宫内膜炎的中药复方制剂，由当归、益母草、黑豆、川芎、生地、赤芍、泽泻、红花、巴戟天和红糖组成，所述当归的重量占比为30-40％，所述益母草的重量占比为20-30％，所述黑豆的重量占比为10-20％，所述川芎的重量占比为10-20％，所述生地的重量占比为5-10％，所述赤芍的重量占比为5-10％，所述泽泻的重量占比为5-10％，所述红花的重量占比为1-4％，所述巴戟天的重量占比为5-10％，所述红糖的重量占比为1-4％。
8.进一步的，所述复方制剂的制备包括以下步骤：
9.s1、原料准备：按照重量配比准备好需要使用的中药材料，称量后将中药材料清洗干净；
10.s2、粉碎处理：将当归、益母草、黑豆、川芎、生地、赤芍、泽泻、红花和巴戟天使用超微粉碎机依次进行粉碎处理，粉碎成颗粒状即可；
11.s3、混合：将上述操作中得到的当归、益母草、黑豆、川芎、生地、赤芍、泽泻、红花、巴戟天和红糖颗粒投入混合筒内并通过搅拌器进行均匀混合，混合后得到中药复方制剂。
12.进一步的，所述粉碎处理步骤中中药粉碎颗粒大小为300目。
13.本发明的技术效果和优点：
14.本发明提供的中药复方制剂对肉牛子宫内膜炎具有显著治疗效果，相较于传统的抗生素治疗方式具有安全性高、低残、低毒和不易产生耐药性等突出优点点。
具体实施方式
15.下面对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
16.实施例1：
17.本实施例提供了一种治疗肉牛子宫内膜炎的中药复方制剂，一种治疗肉牛子宫内膜炎的中药复方制剂，由当归、益母草、黑豆、川芎、生地、赤芍、泽泻、红花、巴戟天和红糖组成，所述当归的重量占比为38％，所述益母草的重量占比为20％，所述黑豆的重量占比为10％，所述川芎的重量占比为10％，所述生地的重量占比为5％，所述赤芍的重量占比为5％，所述泽泻的重量占比为5％，所述红花的重量占比为1％，所述巴戟天的重量占比为5％，所述红糖的重量占比为1％。
18.所述复方制剂的制备包括以下步骤：
19.s1、原料准备：按照重量配比准备好需要使用的中药材料，称量后将中药材料清洗干净；
20.s2、粉碎处理：将当归、益母草、黑豆、川芎、生地、赤芍、泽泻、红花和巴戟天使用超微粉碎机依次进行粉碎处理，粉碎成300目大小颗粒即可；
21.s3、混合：将上述操作中得到的当归、益母草、黑豆、川芎、生地、赤芍、泽泻、红花、巴戟天和红糖颗粒投入混合筒内并通过搅拌器进行均匀混合，混合后得到复方中药，随后按照与净水1:80的重量比混合得到中药复方制剂。
22.随机挑选五头经临床诊断患有子宫内膜炎的肉牛，患病牛没有经过治疗，无其他疾病。病牛表现为体温升高，屡配不孕，子宫分泌物增多，阴道当中会流出黄白色脓汁，直肠检查病牛子宫的收缩反应弱，子宫颈口开张，取上述得到的中药复方制剂0.4kg，总计五份，每天灌服1次，试验期共14d。
23.实施例2：
24.本实施例提供了一种治疗肉牛子宫内膜炎的中药复方制剂，一种治疗肉牛子宫内膜炎的中药复方制剂，由当归、益母草、黑豆、川芎、生地、赤芍、泽泻、红花、巴戟天和红糖组成，所述当归的重量占比为38％，所述益母草的重量占比为20％，所述黑豆的重量占比为10％，所述川芎的重量占比为10％，所述生地的重量占比为5％，所述赤芍的重量占比为5％，所述泽泻的重量占比为5％，所述红花的重量占比为1％，所述巴戟天的重量占比为5％，所述红糖的重量占比为1％。
25.所述复方制剂的制备包括以下步骤：
26.s1、原料准备：按照重量配比准备好需要使用的中药材料，称量后将中药材料清洗干净；
27.s2、粉碎处理：将当归、益母草、黑豆、川芎、生地、赤芍、泽泻、红花和巴戟天使用超微粉碎机依次进行粉碎处理，粉碎成300目大小颗粒即可；
28.s3、混合：将上述操作中得到的当归、益母草、黑豆、川芎、生地、赤芍、泽泻、红花、巴戟天和红糖颗粒投入混合筒内并通过搅拌器进行均匀混合，混合后得到复方中药，随后按照与净水1:80的重量比混合得到中药复方制剂。
29.随机挑选五头经临床诊断患有子宫内膜炎的肉牛，患病牛没有经过治疗，无其他疾病。病牛表现为体温升高，屡配不孕，子宫分泌物增多，阴道当中会流出黄白色脓汁，直肠检查病牛子宫的收缩反应弱，子宫颈口开张，取上述得到的中药复方制剂0.5kg，总计五份，每天灌服1次，试验期共14d。
30.实施例3：
31.本实施例提供了一种治疗肉牛子宫内膜炎的中药复方制剂，一种治疗肉牛子宫内膜炎的中药复方制剂，由当归、益母草、黑豆、川芎、生地、赤芍、泽泻、红花、巴戟天和红糖组成，所述当归的重量占比为38％，所述益母草的重量占比为20％，所述黑豆的重量占比为10％，所述川芎的重量占比为10％，所述生地的重量占比为5％，所述赤芍的重量占比为5％，所述泽泻的重量占比为5％，所述红花的重量占比为1％，所述巴戟天的重量占比为5％，所述红糖的重量占比为1％。
32.所述复方制剂的制备包括以下步骤：
33.s1、原料准备：按照重量配比准备好需要使用的中药材料，称量后将中药材料清洗干净；
34.s2、粉碎处理：将当归、益母草、黑豆、川芎、生地、赤芍、泽泻、红花和巴戟天使用超微粉碎机依次进行粉碎处理，粉碎成300目大小颗粒即可；
35.s3、混合：将上述操作中得到的当归、益母草、黑豆、川芎、生地、赤芍、泽泻、红花、
巴戟天和红糖颗粒投入混合筒内并通过搅拌器进行均匀混合，混合后得到复方中药，随后按照与净水1:80的重量比混合得到中药复方制剂。
36.随机挑选五头经临床诊断患有子宫内膜炎的肉牛，患病牛没有经过治疗，无其他疾病。病牛表现为体温升高，屡配不孕，子宫分泌物增多，阴道当中会流出黄白色脓汁，直肠检查病牛子宫的收缩反应弱，子宫颈口开张，取上述得到的中药复方制剂0.6kg，总计五份，每天灌服1次，试验期共14d。
37.对照组：
38.随机挑选五头经临床诊断患有子宫内膜炎的肉牛，患病牛没有经过治疗，无其他疾病。病牛表现为体温升高，屡配不孕，子宫分泌物增多，阴道当中会流出黄白色脓汁，直肠检查病牛子宫的收缩反应弱，子宫颈口开张，使用净水0.6kg，总计五份，每天灌服1次，试验期共14d。
39.将上述实施例1、实施例2、实施例3和对照组中选取的肉牛进行治疗观察，观察肉牛身体特征并于第15天晨饲前尾静脉采集5ml血液2份，一份用于测定外周血t淋巴细胞亚群比例、淋巴细胞转化率和凋亡率；另一份分离血清后，使用elisa法检测血清中细胞因子、免疫球蛋白和生殖激素含量。
40.身体特征反应分为显效、有效和无效，显效表现为用药14d后，体温回到正常温度，食欲增加，精神状态与健康牛无异，子宫无炎性分泌物；有效表现为用药14d后，体温趋于正常，精神状态有所恢复，子宫分泌物逐渐透明无异味，患病症状明显好转；无效表现为用药14d后，体温仍然略高，精神沉郁，采食量低，子宫有炎性分泌物，患病症状无变化甚至加重。
41.外周血淋巴细胞亚群cd4
+
、cd8
+
t细胞比例的测定：取60μl血液于流式管中，加入mouse anti sheep cd4：fitc和mouse anti sheep cd8：apc抗体，室温避光孵育20min。再加入2ml1
×
红细胞裂解液，轻轻混匀，室温避光孵育10min。300r/min离心5min，弃上清。再加入4ml1pbs，300r/min离心5min，弃上清。加入300μl1
×
pbs，上流式细胞仪检测。
42.外周血淋巴细胞转化率和凋亡率的测定：使用淋巴细胞分离试剂盒分离出外周血淋巴细胞，将其浓度调整为2
×
106个/ml，取100μl接种于96孔板中，标记组别，设置对照组，每个样品3个重复。试验组每孔加入10μg/ml刀豆蛋白(co-na)100μl，对照组加入等体积1
×
pbs，在37℃、5％co2培养箱中培养48h。培养结束前4h每孔加入cck-8溶液10μl，置于培养箱中继续培养。培养结束，取出96孔板，用酶标仪测定450nm处的吸光度值(od
450
)。
43.计算公式：外周血淋巴细胞转化率(％)＝100
×
(试验组od
450-对照组od
450
)/对照组od
450
44.将使用淋巴细胞分离试剂盒分离得到的外周血淋巴细胞，收集1
×
10
6-3
×
106个细胞，用预冷1
×
pbs离心洗涤两次，弃上清。加入500μl apoptosis positive control solution重悬，置冰上孵育30min。用预冷1
×
pbs离心洗涤，弃上清。加入适量预冷1
×
binding buffer重悬，并加入数量相同且未经处理的活细胞与之混合。加入预冷1
×
binding buffer补充至1.5ml，等分成三管，选取其中一管为空白对照管、另外两管为单染管。单染管分别加入5μl annexin v-fitc或10μl pi，室温避光孵育5min。在流式细胞仪上，用空白管调节fsc、ssc和荧光通道的电压，并在此电压条件下，用单染管调节荧光通道的补偿。
45.血清中细胞因子、免疫球蛋白和生殖激素含量的测定：采用酶联免疫吸附测定试
验(elisa)法测定血清中细胞因子白细胞介素-2(il-2)、白细胞介素-4(il-4)、白细胞介素-6(il-6)和干扰素-γ(iln-γ)；免疫球蛋白g(igg)、免疫球蛋白m(igm)和免疫球蛋白a(iga)含量；生殖激素抗苗勒管激素(amh)、雌二醇(e2)和抑制素b(inhb)含量。
46.在第15天进行检测子宫内膜炎的治疗效果并得到下表：
[0047][0048]
通过上表可得，通过使用本技术方案提供的中药复方制剂能够起到显著的治疗肉牛子宫内膜炎的效果，并且适量增加制剂使用量能够提高治疗效果。
[0049]
对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。
[0050]
此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。

技术特征：
1.一种治疗肉牛子宫内膜炎的中药复方制剂，其特征在于：由当归、益母草、黑豆、川芎、生地、赤芍、泽泻、红花、巴戟天和红糖组成，所述当归的重量占比为30-40％，所述益母草的重量占比为20-30％，所述黑豆的重量占比为10-20％，所述川芎的重量占比为10-20％，所述生地的重量占比为5-10％，所述赤芍的重量占比为5-10％，所述泽泻的重量占比为5-10％，所述红花的重量占比为1-4％，所述巴戟天的重量占比为5-10％，所述红糖的重量占比为1-4％。2.根据权利要求1所述的一种治疗肉牛子宫内膜炎的中药复方制剂，其特征在于：所述复方制剂的制备包括以下步骤：s1、原料准备：按照重量配比准备好需要使用的中药材料，称量后将中药材料清洗干净；s2、粉碎处理：将当归、益母草、黑豆、川芎、生地、赤芍、泽泻、红花和巴戟天使用超微粉碎机依次进行粉碎处理，粉碎成颗粒状即可；s3、混合：将上述操作中得到的当归、益母草、黑豆、川芎、生地、赤芍、泽泻、红花、巴戟天和红糖颗粒投入混合筒内并通过搅拌器进行均匀混合，混合后得到中药复方制剂。3.根据权利要求2所述的一种治疗肉牛子宫内膜炎的中药复方制剂，其特征在于：所述粉碎处理步骤中中药粉碎颗粒大小为300目。

技术总结
本发明涉及中医药技术领域，具体的说是一种治疗肉牛子宫内膜炎的中药复方制剂，由当归、益母草、黑豆、川芎、生地、赤芍、泽泻、红花、巴戟天和红糖组成，所述当归的重量占比为30-40％，所述益母草的重量占比为20-30％，所述黑豆的重量占比为10-20％，所述川芎的重量占比为10-20％，所述生地的重量占比为5-10％，所述赤芍的重量占比为5-10％，所述泽泻的重量占比为5-10％，所述红花的重量占比为1-4％，所述巴戟天的重量占比为5-10％，所述红糖的重量占比为1-4％，本发明提供的中药复方制剂对肉牛子宫内膜炎具有显著治疗效果，相较于传统的抗生素治疗方式具有安全性高、低残、低毒和不易产生耐药性等突出优点。生耐药性等突出优点。


技术研发人员：王建东 郭亚男 梁小军 郭延生 宣小龙 侯鹏霞 高海辉 施安 陈海燕 赵正伟 康晓冬 张久盘 于洋
受保护的技术使用者：宁夏农林科学院动物科学研究所（宁夏草畜工程技术研究中心）
技术研发日：2023.05.17
技术公布日：2023/10/15