一种宠物专用伤口护理复合凝胶敷料及其制备方法

1.本发明涉及兽药制备技术领域，特别是涉及一种宠物专用伤口护理复合凝胶敷料及其制备方法。


背景技术：

2.皮肤是动物机体最大的器官，具有感受外界刺激、调节体温、保护组织器官等作用；皮肤直接与外界接触，极容易受到外界因素影响而造成损伤。多数的皮肤损伤可以在一段时间内自行恢复，但在大面积全层皮肤缺损，尤其是在细菌感染的情况下，完全修复需要较长的时间。由于自愈时间长，伤口长期与外界接触，可能继发性的引起细菌或真菌感染，从而引起伤口，溃烂严重的可引发全身感染，不仅延长了伤口，自愈所需的时间，还增加了动物的痛苦，甚至有可能危及动物的生命。创口敷料主要作用是保护创面，减少外界物理化学刺激和病原微生物侵袭等因素对创面修复的影响，维持创口愈合环境。现有的创口敷料并不理想，使用过程中需要定期更换，极易对创面进行二次损伤，干扰创面修复的进程。
3.随着创口敷料研究的不断深入，新的敷料材料也已经被不断开发。其中，壳聚糖不仅具有良好的生物相容性。还具有抗菌、消炎、止血、止痛、止痒、祛疤、促进伤口愈合、吸湿保湿性等功能。由于其分子中所带的正电荷和微生物细胞膜所带的负电荷的相互作用,导致细菌的蛋白质和其它细胞成分的泄漏，使其对细菌、酵母、真菌等微生物都有很好的抑制作用，被广泛用于伤口敷料的制备。
4.氟苯尼考作为动物专用的、第三代氯霉素类广谱抗生素，因其内服和肌注吸收快、体内分布广、半衰期长等特点，广泛在临床上应用。它可强烈干扰细菌蛋白质的合成，对多种革兰阳性菌、革兰阴性菌以及立克次体、螺旋体、支原体等均有很强的抑制作用。
5.温敏凝胶作为一种新型的创口敷料与传统敷料相比，具有紧密贴合却不粘连伤口，避免产生二次损伤；其在常温下为溶胶状，给药后填充创口，包括不规则的创面，转化为凝胶，粘附在创面上可将创面完全覆盖，保护创面免受外界因素影响，维持创面愈合环境。
6.本发明的目的是提供一种宠物专用伤口护理复合凝胶敷料及其制备方法。通过结合壳聚糖的抗菌活性及包合的作用对氟苯尼考进行包裹，提升了氟苯尼考抗菌活性，同时结合了温敏凝胶能紧密贴合，完美填充伤口的优点，将其开发成一种具有优异抗菌性能，能够促进感染性创口修复和术后伤口护理用凝胶敷料。


技术实现要素：

7.为实现上述目的，本发明提供了如下方案：
8.本发明的技术方案之一：一种宠物专用伤口护理复合凝胶敷料，包括以下质量份数的原料：
9.氟苯尼考0.1～5份、壳聚糖0.1～5份、交联剂0.1～5份、温度敏感性生物材料20～50份、乙酸0.1～10份、甲醇1～10份、水50～100份。
10.进一步地，所述宠物专用伤口护理复合凝胶敷料，包括以下质量份数的原料：氟苯
尼考0.3份、壳聚糖1份、交联剂0.1份、温度敏感性生物材料30份、乙酸0.1份、甲醇4份、水65份。
11.进一步地，所述交联剂为三聚磷酸钠、甲醛、戊二醛、京尼平中的一种或多种。
12.更进一步地，所述交联剂为京尼平。
13.进一步地，所述温度敏感性生物材料包括所述温度敏感性生物材料为聚n-异丙基丙烯酰胺、泊洛沙姆407中的一种或多种。
14.更进一步地，所述温度敏感型材料为泊洛沙姆407。
15.本发明的技术方案之二：提供一种宠物专用伤口护理复合凝胶敷料的制备方法，包括以下步骤：
16.(1)按比例将壳聚糖加入水中，并加入乙酸使其溶解，得到溶液1；
17.(2)按比例将氟苯尼考加入甲醇中搅拌均匀，超声助溶，得到溶液2；
18.(3)将所述溶液2滴加在溶液1中，搅拌均匀，得到溶液3；
19.(4)按比例将交联剂加入到溶液3中，搅拌2h进行交联，得到溶液4；
20.(5)按比例将温度敏感性生物材料加入溶液4中，搅拌均匀，使其溶胀，得到所述宠物专用伤口护理复合凝胶敷料。该方法制备的复合凝胶敷料中含有氟苯尼考与壳聚糖的复合物。
21.进一步地，步骤(3)所述滴加的同时进行搅拌，搅拌条件为1500r/mi n。
22.进一步地，步骤(4)所述交联温度为50℃。
23.进一步地，步骤(5)所述溶胀的温度为4℃，时间为24h。
24.本发明的技术方案之三：一种宠物专用伤口护理复合凝胶敷料在抗菌，促进感染性损伤修复和术后护理中的应用。
25.与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
26.本发明提供了一种宠物专用伤口护理复合凝胶敷料，本发明通过结合纳米包裹技术及温敏凝胶技术两种制剂制备的技术优点，将氟苯尼考与壳聚糖联合使用，从而得到一种具有优异抗菌性能的伤口护理用凝胶敷料。尤其是利用壳聚糖将氟苯尼考进行包裹，既增强其抗菌效果，又延长了药物的释放时间，可以有效的缩短创口愈合所需的时间，减少创口继发性感染，促进创口愈合。
附图说明
27.为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
28.图1为本发明实施例1制备的宠物专用伤口护理复合凝胶敷料的外观形态图；
29.图2为本发明实施例1制备的宠物专用伤口护理复合凝胶敷料的扫描电镜图；
30.图3为本发明实施例1制备的宠物专用伤口护理复合凝胶敷料的粒径测定结果图；
31.图4为本发明实施例1制备的宠物专用伤口护理复合凝胶敷料的zeta电位测定结果图；
32.图5为本发明实施例1制备宠物专用伤口护理复合凝胶敷料的抑菌效果图；
33.图6为不同处理组小鼠创面代表性图片；
34.图7为不同处理组创面面积变化。
具体实施方式
35.现详细说明本发明的多种示例性实施方式，该详细说明不应认为是对本发明的限制，而应理解为是对本发明的某些方面、特性和实施方案的更详细的描述。
36.应理解本发明中所述的术语仅仅是为描述特别的实施方式，并非用于限制本发明。另外，对于本发明中的数值范围，应理解为还具体公开了该范围的上限和下限之间的每个中间值。在任何陈述值或陈述范围内的中间值以及任何其他陈述值或在所述范围内的中间值之间的每个较小的范围也包括在本发明内。这些较小范围的上限和下限可独立地包括或排除在范围内。
37.除非另有说明，否则本文使用的所有技术和科学术语具有本发明所述领域的常规技术人员通常理解的相同含义。虽然本发明仅描述了优选的方法和材料，但是在本发明的实施或测试中也可以使用与本文所述相似或等同的任何方法和材料。本说明书中提到的所有文献通过引用并入，用以公开和描述与所述文献相关的方法和材料。在与任何并入的文献冲突时，以本说明书的内容为准。
38.在不背离本发明的范围或精神的情况下，可对本发明说明书的具体实施方式做多种改进和变化，这对本领域技术人员而言是显而易见的。由本发明的说明书得到的其他实施方式对技术人员而言是显而易见的。本技术说明书和实施例仅是示例性的。
39.关于本文中所使用的“包含”、“包括”、“具有”、“含有”等等，均为开放性的用语，即意指包含但不限于。
40.以下实施例所述的“份”均为“质量份”。
41.下面结合实施例对本发明作进一步说明。
42.实施例1
43.一种宠物专用伤口护理复合凝胶敷料，由以下原料组成：
44.氟苯尼考(原药)0.3份、壳聚糖1份、京尼平(交联剂)0.1份、泊洛沙姆407(温度敏感性生物材料)30份、乙酸0.1份、甲醇4份、去离子水65份。
45.所述宠物专用伤口护理复合凝胶敷料的制备方法，步骤如下：
46.(1)按比例将壳聚糖加入水中，并加入乙酸使其溶解，得到溶液1；
47.(2)按比例将氟苯尼考加入甲醇中搅拌均匀，超声助溶，得到溶液2；
48.(3)将所述溶液2滴加在溶液1中，滴加的同时进行高速搅拌(1500r/mi n)，得到溶液3；
49.(4)按比例将交联剂加入到溶液3中，50℃，高速搅拌(1500r/mi n)，2h使壳聚糖与交联剂进行交联，得到溶液4；
50.(5)按比例将温度敏感性生物材料加入溶液4中，搅拌均匀，用保鲜膜封好口放置在4℃冰箱中24h，使其充分溶胀，得到所述宠物专用伤口护理复合凝胶敷料。所述复合凝胶敷料中含有氟苯尼考与壳聚糖的复合物。
51.(6)采用“倒置法”检测其温敏性。取制备好的宠物专用伤口护理复合凝胶5ml至玻璃瓶中，放置在恒温水浴锅中，从20℃开始缓慢升温，每5mi n升高1℃，每升高1℃后取出，
将玻璃瓶倒置，玻璃瓶内的凝胶溶液不流动时为该凝胶的凝胶温度。
52.实施例2
53.一种宠物专用伤口护理复合凝胶敷料，由以下原料组成：
54.氟苯尼考(原药)0.3份、壳聚糖1份、甲醛(交联剂)0.1份、泊洛沙姆407(温度敏感性生物材料)30份、乙酸0.1份、甲醇4份、去离子水65份。
55.所述宠物专用伤口护理复合凝胶敷料的制备方法，步骤如实施例1
56.实施例3
57.一种宠物专用伤口护理复合凝胶敷料，由以下原料组成：
58.氟苯尼考(原药)0.3份、壳聚糖1份、甲醛(交联剂)0.1份、聚n-异丙基丙烯酰胺(温度敏感性生物材料)30份、乙酸0.1份、甲醇4份、去离子水65份。
59.所述宠物专用伤口护理复合凝胶敷料的制备方法，步骤如实施例1
60.实施例4
61.一种宠物专用伤口护理复合凝胶敷料，由以下原料组成：
62.氟苯尼考(原药)0.3份、壳聚糖1份、三聚磷酸钠(交联剂)0.1份、聚n-异丙基丙烯酰胺(温度敏感性生物材料)30份、乙酸0.1份、甲醇4份、去离子水65份。
63.所述宠物专用伤口护理复合凝胶敷料的制备方法，步骤如实施例1
64.实施例5
65.一种宠物专用伤口护理复合凝胶敷料，由以下原料组成：
66.氟苯尼考(原药)0.3份、壳聚糖1份、三聚磷酸钠(交联剂)0.1份、泊洛沙姆407(温度敏感性生物材料)30份、乙酸0.1份、甲醇4份、去离子水65份。
67.所述宠物专用伤口护理复合凝胶敷料的制备方法，步骤如实施例1
68.对比例1
69.一种宠物专用伤口护理复合凝胶敷料，由以下原料组成：
70.氟苯尼考(原药)0.3份、壳聚糖1份、京尼平(交联剂)0.1份、泊洛沙姆407(温度敏感性生物材料)10份、乙酸0.1份、甲醇4份、去离子水85份。
71.所述宠物专用伤口护理复合凝胶敷料的制备方法，步骤如下：
72.(1)按比例将壳聚糖加入水中，并加入乙酸使其溶解，得到溶液1；
73.(2)按比例将氟苯尼考加入甲醇中搅拌均匀，超声助溶，得到溶液2；
74.(3)将所述溶液2滴加在溶液1中，滴加的同时进行高速搅拌(1500r/mi n)，得到溶液3；
75.(4)按比例将交联剂加入到溶液3中，50℃，高速搅拌(1500r/mi n)，2h使壳聚糖与交联剂进行交联，得到溶液4；
76.(5)按比例将温度敏感性生物材料加入溶液4中，搅拌均匀，用保鲜膜封好口放置在4℃冰箱中24h，使其充分溶胀得到所述宠物专用氟苯尼考复合抑菌凝胶敷料。所述复合凝胶敷料中含有氟苯尼考与壳聚糖的复合物。
77.(6)采用“倒置法”检测其温敏性。取制备好的宠物专用伤口护理复合凝胶5ml至玻璃瓶中，放置在恒温水浴锅中，从20℃开始缓慢升温，每5mi n升高1℃，每升高1℃后取出，将玻璃瓶倒置，玻璃瓶内的凝胶溶液不流动时为该凝胶的凝胶温度。
78.该对比例制备的凝胶，因为温度敏感性生物材料比例过低，制备出的凝胶，不具有
温敏性。
79.效果例1
80.(一)对实施例1制备的水凝胶进行表征，结果见图1～4。
81.图1为本发明实施例1制备的凝胶敷料的外观形态示意图；
82.从图1中可以看出，本发明实施例1制备的凝胶，为蓝灰色溶胶状(这是凝胶中京尼平与壳聚糖中氨基交联后，产生蓝色化合物导致)，温度上升至33℃转变为蓝灰色固体凝胶。
83.将本发明实施例1制备的凝胶样品冷冻干燥后，用导电胶粘在扫描电镜样品盘上，用离子溅射仪进行溅射喷金，然后通过扫描电镜观察样品的结构表征，结果见图2。
84.从图2中可以看出，本发明实施例1制备的水凝胶，形成的三维网格孔洞结构，孔径约为5～35μm，分布均匀，能够很好的承载药物，且在组织修复过程中，有利于营养物质的传输与气体交换，维持适宜的创口愈合环境，促进创口愈合。
85.取1ml本发明实施例1制备的水凝胶，用去离子水稀释100倍，超声30mi n，保存备用，使用纳米粒度及zeta电位分析仪(dls)进行粒径及zeta电位检测检测，结果见图3-图4。
86.本发明实施例1制备的凝胶的粒径为121.82
±
0.58nm(图3)，由于该凝胶粒径较小，可以较好的使药物通过组织间隙，递送至用药部位，从而达到抗菌、促进组织修复的作用；zeta电位为-1.85
±
0.35ma(图4)，表明表面电荷为中性电荷，能吸附在细菌表面，抑制细菌生长。
87.(二)抗菌活性检测
88.用移液枪吸取108cfu/ml的对数期金黄色葡萄球菌200μl加入mh琼脂培养基平板中，用涂布棒涂布均匀，静置3～5mi n；用灭菌的200μl黄色枪头，在涂布菌液的mh琼脂培养基上打孔4个，分加入0.3％氟苯尼考壳聚糖复合抑菌凝胶、0.3％氟苯尼考溶液、1％壳聚糖凝胶、灭菌去离水，放置在37℃恒温培养箱，过夜后测量抑菌圈，比较抑菌圈大小，结果见图5(1为宠物专用伤口护理复合凝胶敷料，2为0.3％氟苯尼考溶液，3为1％壳聚糖凝胶，4为灭菌去离水)。
89.从图5中可以看出，宠物专用伤口护理复合凝胶敷料与同浓度的氟苯尼考溶液、壳聚糖凝胶抑菌作用明显增强。说明，宠物专用伤口护理复合凝胶敷料具有良好的抗菌活性。
90.(三)宠物专用伤口护理复合凝胶敷料对小鼠感染性皮肤损伤修复的影响
91.选用健康的昆明系小鼠(18～22g)，36只，用盐酸氯胺酮(60mg/kg体重)麻醉，去除毛发后，在小鼠背部形成直径12mm的全层皮肤缺损创面。经生理盐水冲洗后，用1
×
108cfu/ml的金黄色葡萄球菌覆盖创面，制作感染性创面模型。感染24h后，可观察到创面和创面边缘产生淡黄色脓状物，表明模型构建成功。采用随机抽签法将小鼠随机分为4组，每组9只，对照组不做任何处理。其余3组分别使用宠物专用伤口护理复合凝胶敷料，0.3％氟苯尼考溶液及1％壳聚糖凝胶覆盖创面，每48h更换一次敷料。治疗后第3，7，14天观察4组小鼠的创面愈合情况，并对创面进行拍照记录，将照片导入image j软件测量未愈合创面面积。
92.如图6，7所示，随着治疗时间的延长，所有组小鼠创面面积均不断缩小，宠物专用伤口护理复合凝胶敷料组小鼠创面愈合速度明显快于其它3组；治疗后第14天，宠物专用伤口护理复合凝胶敷料组小鼠创面基本愈合，出现毛发覆盖，其它3组小鼠仍可见未修复的创面。表明宠物专用伤口护理复合凝胶敷料能有效的促进创口的愈合。
93.以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

技术特征：
1.一种宠物专用伤口护理复合凝胶敷料，其特征在于，包括以下质量份数的原料：氟苯尼考0.1～5份、壳聚糖0.1～5份、交联剂0.1～5份、温度敏感性生物材料20～50份、乙酸0.1～10份、甲醇1～10份、水50～100份。2.根据权利要求1所述的一种宠物专用伤口护理复合凝胶敷料，其特征在于，所述宠物专用伤口护理复合凝胶敷料，包括以下质量份数的原料：氟苯尼考0.3份、壳聚糖1份、交联剂0.1份、温度敏感性生物材料30份、乙酸0.1份、甲醇4份、水65份。3.根据权利要求1所述的一种宠物专用伤口护理复合凝胶敷料，其特征在于，所述交联剂为三聚磷酸钠、甲醛、戊二醛、京尼平中的一种或多种。4.根据权利要求1所述的一种宠物专用伤口护理复合凝胶敷料，其特征在于，所述温度敏感性生物材料为聚n-异丙基丙烯酰胺、泊洛沙姆407中的一种或多种。5.根据权利要求1～4任一所述的一种宠物专用伤口护理复合凝胶敷料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)按比例将壳聚糖加入水中，并加入乙酸使其溶解，得到溶液1；(2)按比例将氟苯尼考加入甲醇中搅拌均匀，超声助溶，得到溶液2；(3)将所述溶液2滴加在溶液1中，搅拌均匀，得到溶液3；(4)按比例将交联剂加入到溶液3中，搅拌2h进行交联，得到溶液4；(5)按比例将温度敏感性生物材料加入溶液4中，搅拌均匀，使其溶胀，得到所述宠物专用伤口护理复合凝胶敷料。6.根据权利要求5所述的一种宠物专用伤口护理复合凝胶敷料的制备方法，其特征在于，步骤(3)所述滴加的同时进行搅拌，搅拌转速为1500r/min。7.根据权利要求5所述的一种宠物专用伤口护理复合凝胶敷料的制备方法，其特征在于，步骤(4)所述交联温度为50℃。8.根据权利要求5所述的一种宠物专用伤口护理复合凝胶敷料的制备方法，其特征在于，步骤(5)所述溶胀的温度为4℃，时间为24h。

技术总结
本发明提供了一种宠物专用伤口护理复合抑菌凝胶敷料及其制备方法，所述宠物专用伤口护理复合凝胶敷料包含氟苯尼考和壳聚糖复合物，具有优异的抗菌活性。可以有效的缩短伤口愈合所需要的时间，减少伤口继发性感染，可广泛用于宠物普通伤口、感染性伤口的治疗。感染性伤口的治疗。感染性伤口的治疗。


技术研发人员：刘俊峰 马蓓 丁泽 王天扬
受保护的技术使用者：塔里木大学
技术研发日：2023.05.10
技术公布日：2023/7/7