YTHDC1基因在制备治疗心肌梗死药物中的应用

ythdc1基因在制备治疗心肌梗死药物中的应用
技术领域
1.本发明属于生物技术领域，具体涉及ythdc1基因在制备治疗心肌梗死药物中的应用。


背景技术：

2.心肌梗死(myocardial infarction,mi)是心血管疾病中常见的急危重症，可造成多种心脏组织细胞结构和功能上完整性丧失，引发细胞死亡。目前针对心肌梗死的治疗方法主要是药物、介入及外科手术等，但无法从根本上对缺血坏死的心肌进行有效修复，mi后大量的功能性心肌细胞发生凋亡坏死，随之而来的心脏重构使得原有心脏结构和功能的完整性丧失并被纤维瘢痕组织所替代，最终不可避免导致心力衰竭的发生和恶化。
3.干细胞由于其独特的转分化及旁分泌能力，有望成为解决急性心肌梗死的不良心肌重塑及随后导致的心力衰竭的治疗方法。干细胞是存在于机体内的一类具有自我复制能力的多潜能细胞，保持了未定向分化状态，具有一定的增殖能力。在一定的条件下，干细胞可分化成机体的多种功能细胞。目前，国际上用于心血管病细胞移植治疗研究的干细胞类型主要有骨髓单个核细胞(bmmnscs)、骨髓间充质干细胞(bmscs)和人多能干细胞(hpscs)。
4.骨髓源间充质干细胞主要存在于全身结缔组织和器官间质中，以骨髓中含量最丰富。bmscs具有多向分化潜能，可分化为血管内皮细胞、心肌细胞、骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、神经组织等。bmscs以其来源方便且多次传代扩增后仍具有干细胞特性等优势使其作为种子细胞应用于临床，可通过分泌细胞营养因子，促进新生血管形成，定向分化等可显著改善心功能。
5.尽管bmscs功能强大，但心肌梗死后由于局部梗死区缺血缺氧恶劣微环境不能为移植的bmscs提供合适的生长条件，从而导致移植的bmscs耐受不良、归巢数量减少、生存能力降低且死亡率增高。这严重降低了bmscs对心肌梗死的修复效果并且极大的限制了bmscs移植治疗心肌梗死的临床应用。血运重建和循环改善是心肌细胞再生的前提和基础，同时心肌梗死后的心肌纤维化，更是导致心室重构、形成心力衰竭的重要原因。因此，重建梗死区血运及抑制纤维化同样是心肌梗死治疗的关键。
6.6-甲基腺嘌呤(n6-methyladenosine，m6a)参与了多种细胞的生物学过程并在干细胞命运的调控中发挥关键作用。ythn6-甲基腺苷rna结合蛋白c1(yth n6-methyladenosine rna binding protein c1,ythdc1)是参与m6a修饰调节蛋白之一。ythdc1主要定位于细胞核内并负责识别m6a甲基化，通过影响rna的核定位、稳定性、衰减和剪接等过程调控多种rna的转录后代谢反应，进而影响干细胞的生物学过程包括干细胞的定植、增殖、迁移及抗凋亡效应并最终影响疾病的发生发展。
7.现有技术“韩韦钰,陈远兴,李超中等.ythdc1 m-6a修饰调控与疾病发病机制的研究进展[j].中国病理生理杂志,2023,39(02):352-358.”中阐述了ythdc1作为m6a甲基结合蛋白，在基于识别m6a修饰的基础上通过调节靶分子的剪接、出核、稳定性和降解等作用于下游分子，调控疾病的发生发展，在肿瘤以及非肿瘤性疾病的研究中的作用。文中指出，心
脏特异性条件性敲减ythdc1可导致小鼠左心室显著扩大和严重收缩功能障碍，并伴随心肌细胞收缩力下降和肌节排列紊乱，即发生扩张型心肌病；高通量测序发现ythdc1通过对m6a修饰的肌凝蛋白(titin)mrna的异常剪接，诱导心肌细胞收缩障碍。但其中并未提及ythdc1用于mi的修复或心肌纤维化等方面的调控作用。
[0008]
公开号为cn115287263a的中国专利公开了sp7基因修饰的骨髓间充质干细胞及其制备方法和应用。其制备方法为将sp7基因或与sp7基因核苷酸序列中具有至少90％同源性、同等功能的核苷酸序列插入质粒中，再将质粒转染至骨髓间充质干细胞。该sp7基因修饰的骨髓间充质干细胞应用于放射性肺损伤药物。


技术实现要素：

[0009]
为了解决上述问题，本发明提供了ythdc1基因在制备治疗心肌梗死药物中的应用。
[0010]
一方面，本发明提供了ythdc1基因在制备治疗心肌梗死药物中的应用。
[0011]
具体地，所述的应用在于在干细胞中过表达ythdc1基因或与ythdc1基因核苷酸序列具有至少90％同源性的核苷酸序列。
[0012]
优选地，所述的药物用于改善心肌梗死后心功能和心脏纤维化。
[0013]
优选地，所述的干细胞为移植用干细胞，进一步优选为间充质干细胞，更进一步为骨髓源间充质干细胞。
[0014]
优选地，所述的干细胞中包括过表达ythdc1基因的慢病毒载体。
[0015]
具体地，所述的慢病毒载体的类型包括但不限于：hiv-1型载体系统，hiv-2型载体系统，猫免疫缺陷病毒等。
[0016]
另一方面，本发明提供了一种过表达ythdc1基因的骨髓源间充质干细胞。
[0017]
具体地，所述的骨髓源间充质干细胞中过表达ythdc1基因或与ythdc1基因核苷酸序列具有至少90％同源性的核苷酸序列。
[0018]
优选地，所述的过表达可以通过慢病毒载体实现。
[0019]
再一方面，本发明提供了一种治疗心肌梗死的药物。
[0020]
所述的药物包含过表达ythdc1基因的骨髓源间充质干细胞。
[0021]
具体地，所述的骨髓源间充质干细胞可以是原代细胞或传代细胞。
[0022]
优选地，所述的骨髓源间充质干细胞为传代细胞，优选为p3-p5代。
[0023]
所述的药物中还可以含有药学上可接受的辅料。
[0024]
具体地，所述的药学上可接受的辅料包括但不限于：人源白蛋白、自体血浆裂解物、干细胞条件培养基提取物、生理盐水。
[0025]
所述的药物的剂型可以但不限于注射剂。
[0026]
所述的药物可以用于改善心肌梗死后心功能和心脏纤维化。
[0027]
所述药物使用剂量可以根据病情而定。
[0028]
又一方面，本发明提供了一种治疗心肌梗死药物的制备方法。
[0029]
具体地，所述的制备方法包括在干细胞中过表达ythdc1基因或与ythdc1基因核苷酸序列具有至少90％同源性的核苷酸序列。
[0030]
所述的制备方法中的过表达通过慢病毒载体实现。
[0031]
优选地，所述的制备方法中的干细胞为骨髓源间充质干细胞。
[0032]
所述的制备方法包括以下步骤：
[0033]
(1)骨髓源间充质干细胞的培养与鉴定；
[0034]
(2)过表达ythdc1基因的慢病毒载体转染骨髓源间充质干细胞构建稳转株；
[0035]
(3)稳转株培养。
[0036]
优选地，所述的制备方法中的步骤(1)包括从骨髓中取骨髓源间充质干细胞，接种后置于培养箱中孵育；当细胞融合到80％-90％时，制成细胞悬液继续传代培养，待细胞铺满瓶底的80％时，继续传代。
[0037]
优选地，所述的制备方法中的步骤(1)中骨髓源间充质干细胞的鉴定包括表面标志物检测或成骨分化能力检测。
[0038]
优选地，所述的制备方法中的步骤(2)包括通过ythdc1基因过表达慢病毒转染骨髓源间充质干细胞构建ythdc1-bmscs稳转株。
[0039]
优选地，所述的制备方法中的步骤(2)中所述的骨髓源间充质干细胞为传代细胞，优选为p3-p5代。
[0040]
所述的制备方法中步骤(3)包括将ythdc1-bmscs稳转株继续培养至80-90％融合度。
[0041]
本发明的有益效果：
[0042]
本发明提供了ythdc1基因在制备治疗心肌梗死药物中的应用。所述的应用在于在干细胞中过表达ythdc1基因或与ythdc1基因核苷酸序列具有至少90％同源性的核苷酸序列。所述的药物制备方法包括过表达ythdc1基因的慢病毒载体转染骨髓源间充质干细胞构建ythdc1-bmscs稳转株。ythdc1-bmscs稳转株比骨髓源间充质干细胞对缺血缺氧环境的耐受性提高。动物实验也证实了，移植了ythdc1-bmscs稳转株后的心肌梗死大鼠的心脏功能显著提高且减少了心肌纤维化面积。
附图说明
[0043]
图1和图2为骨髓源间充质干细胞的培养与鉴定结果。
[0044]
图3为慢病毒过表达的载体图谱。
[0045]
图4为ythdc1-bmscs稳转株的构建检测结果。
[0046]
图5为ythdc1-bmscs稳转株对缺血缺氧环境的耐受性检测结果。
[0047]
图6为移植ythdc1-bmscs稳转株后的心肌梗死大鼠心功能及心肌纤维化改善检测结果。
具体实施方式
[0048]
下面结合具体实施例，对本发明作进一步详细的阐述，下述实施例不用于限制本发明，仅用于说明本发明。以下实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，下述实施例中所使用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
[0049]
实施例1bmscs的培养和鉴定
[0050]
1、bmscs的培养
[0051]
大鼠(sprague dawley,sd)购自湖南斯莱克景达实验动物有限公司，动物实验已通过遵义医科大学附属医院伦理委员会批准，动物许可证号：scxk(湘)2019-0004。
[0052]
(1)取2-3周龄、重50-90g大鼠1只，颈椎脱臼法处死后，75％乙醇冲洗两遍后浸泡5分钟。
[0053]
(2)剪去双后肢毛发及皮肤，沿髋关节剪开，迅速分离双后肢置于75％乙醇中。之后无菌操作下分离双后肢肌肉及筋膜，分离股骨与胫骨，置于含4％青霉素-的链霉素混合液pbs缓冲液中冲洗2遍。
[0054]
(3)分离好股骨与胫骨后，使用5ml一次性注射器吸取dmem培养液(#12320032,gibco
tm
)冲洗骨髓腔1-2遍。1200rpm，5min离心后弃去上清液，细胞沉淀用添加10％ fbs(#10100147,gibco
tm
)的培养基重悬，并接种于25cm2大小无菌培养瓶中并置于37℃、5％co2培养箱中孵育，每2天换液一次。
[0055]
(4)倒置显微镜下观察，当细胞融合到80％-90％时，加入胰蛋白酶-edta(0.05％)(#25300062,gibco
tm
)将贴壁的细胞消化分离吹打使贴壁的细胞完全脱落，将制成的细胞悬液按照体积比1:2的比例分装入两个培养瓶传代培养，待细胞铺满瓶底的80％时，继续传代。选择第3代到第5代(p3-p5)的bmscs用于后续试验。
[0056]
2、bmscs的鉴定
[0057]
2.1、bmscs表面标志物检测
[0058]
(1)取同一批次的p3代bmscs随机分成4组，分别标记为(cd90组、cd45组、cd29组、空白对照组)，pbs洗3次后胰酶消化吹打离心后弃上清收集细胞沉淀，调整细胞数为2
×
106个/ml至2ml ep管中；
[0059]
(2)使用2.5％的bsa洗涤，1000rpm，5min离心弃上清；
[0060]
(3)向各组细胞中加入相应的抗体：cd90-fitc(0.5μg/test)(#11-0900-81,ebioscience)、cd45-fitc(0.25μg/test)(#11-0461-82,ebioscience)、cd29-fitc(1.0μg/test)(#11-0291-82,ebioscience)抗体和空白对照(pbs)以及100μl1％bsa进行混匀，4℃避光孵育1h；
[0061]
(4)1000rpm，5min离心弃上清，加入pbs后离心弃上清，加入100μlpbs重悬后在流式细胞仪(cytoflex,beckman coulter)上机检测bmscs对应表面标记物抗体的荧光的表达强度。每组设置3个重复，实验重复3次。
[0062]
2.2、bmscs成骨分化生物学特性的检测
[0063]
成骨分化诱导试剂盒(#raxmx-90021，cyagen biosciences)。
[0064]
选取长势良好的第三代大鼠bmscs接种于6孔板中，待细胞贴壁后使用成骨分化诱导试剂盒按照说明书诱导bmscs成骨分化。于21％ o2，5％ co2，37℃孵箱中培养，每3天换液一次，诱导14天后，弃去分化液，用pbs洗3次。随后使用4％多聚甲醛固定20min，ddh2o润洗3次，使用茜素红染色液染色30min，光学显微镜下拍照。
[0065]
结果如图1、图2所示。
[0066]
图1中的a为通过骨髓分离培养的传代数为p0～p3的间充质干细胞的形态图；
[0067]
图1中的b为大鼠骨髓间充质干细胞在成骨分化诱导实际诱导14天后，茜素红染色结果图，反应间充质干细胞的成骨分化特性。
[0068]
图2中的a为通过流式细胞仪鉴定大鼠骨髓间充质干细胞表面分子阴性标记物
(cd45)，以及阳性标记物(cd29，cd90)的流式图，从而鉴定细胞的纯度；
[0069]
图2中的b为通过流式细胞仪鉴定大鼠骨髓间充质干细胞表面分子阴性标记物(cd45)，以及阳性标记物(cd29，cd90)的结果统计图。
[0070]
实施例2ythdc1-bmscs稳转株的构建与评估
[0071]
ythdc1基因过表达慢病毒及空载体过表达慢病毒均购买于上海汉恒生物公司。ythdc1基因过表达慢病毒为oe-ythdc1(#lv63021527，上海汉恒生物有限公司)；空载体过表达慢病毒为oe-nc(#lv63022504，上海汉恒生物有限公司)。
[0072]
ythdc1基因序列信息为：nm_133423.1，具体为seq id no.1所示的序列。慢病毒载体的克隆位点(ythdc1插入位点)为ecori/bamhi，图3为慢病毒过表达的载体图谱。空载体过表达慢病毒oe-nc为慢病毒骨架载体，未插入目的序列。
[0073]
1、ythdc1-bmscs稳转株的构建
[0074]
将p3代bmscs接种于6孔板中，设置2组：对照组bmscs感染空载体过表达慢病毒(oe-nc)，实验组bmscs感染ythdc1基因过表达慢病毒(oe-ythdc1)。感染moi值为50，培养条件为37℃、5％ co2，用5μg/μl嘌呤霉素进行筛选，筛选掉没有被慢病毒转染的细胞。
[0075]
2、ythdc1-bmscs稳转株的培养
[0076]
在步骤1的基础上感染72h后换液，继续培养细胞至80-90％融合度，分别获得nc-bmscs和ythdc1-bmscs。
[0077]
3、ythdc1-bmscs稳转株的评估
[0078]
分别提取步骤2培养后nc-bmscs和ythdc1-bmscs的蛋白，蛋白提取方法如步骤
①‑③
所示：
[0079]
①
提取蛋白：收集各组细胞，按照每个重复样品4瓶细胞计算，用胰酶消化吹打后的细胞培养液，1200rpm，5min离心吸除上清，沉淀至于冰上并加入ripa蛋白裂解液混合物200μl(ripa高强度蛋白裂解液：pmsf＝100:1)重悬使细胞与裂解液混合均匀，将离心管置于冰上裂解40min，每5～7min混合器震荡一次，让细胞充分裂解，随后将裂解的细胞液转移至2.5ml的ep管中，4℃，12000rpm离心30min，然后将上清移至另一个ep管中即得蛋白原液。
[0080]
②
bca法测定细胞蛋白浓度：配置bca工作液(bca试剂：cu试剂＝50:1)；稀释标准品：用pbs将bsa(5mg/ml)标准品稀释成2.5mg/ml，将标准品按照(表1.4)加入96孔板中；将待测样品稀释20倍，加入20μl到96孔板的样品孔中，之后各孔中加入200μl bca工作液，37℃放置温育30min，用酶标仪测定a562nm处od值，根据标准曲线计算出待测蛋白浓度。
[0081]
③
蛋白稀释变性：将已测得浓度的蛋白原液，用pbs稀释并按照4:1加入速溶型蛋白上样缓冲液(变性，还原5
×
)，使得最终蛋白浓度为2.5mg/ml，高温变性机内100℃，8min变性，冷却后标记短期放入-20℃保存，长期放入-80℃保存。
[0082]
采用westernblot检测ythdc1蛋白表达水平，每组实验重复3次。采用imagej软件分析条带样品孔的灰度值，以β-actin的灰度值为内参，计算目的蛋白ythdc1蛋白的相对表达量。结果如图4所示。
[0083]
图4中的a为在常氧条件ythdc1基因过表达慢病毒转染bmscs后western blot检测病毒转染效率图；
[0084]
图4中的b为在常氧条件ythdc1基因过表达慢病毒转染bmscs后western blot检测病毒转染效率的统计图。
[0085]
实施例3ythdc1-bmscs稳转株对缺血缺氧环境的耐受性检测
[0086]
参照实施例2的方法制备稳转株，将获得的nc-bmscs和ythdc1-bmscs分别置于在常氧+正常血清(normoxia,norm)(10％ fbs，20％ o2，5％ co2，37℃)培养条件以及缺氧+血清剥夺(hypoxia and serum deprivation,hsd)(1％fbs，1％ o2，5％ co2，37℃)培养条件下培养。
[0087]
参照实施例2的方法分别提取培养后nc-bmscs和ythdc1-bmscs的蛋白，采用westernblot检测ythdc1蛋白的表达，每组实验重复3次。采用imagej软件分析条带样品孔的灰度值，以β-actin的灰度值为内参，计算目的蛋白ythdc1的相对表达量。
[0088]
获得结果如图5所示。
[0089]
图5中的a为在常氧+正常血清以及缺氧+血清剥夺条件ythdc1基因过表达慢病毒转染bmscs后western blot检测病毒转染效率图；
[0090]
图5中的b为在常氧+正常血清以及缺氧+血清剥夺条件ythdc1基因过表达慢病毒转染bmscs后western blot检测病毒转染效率的统计图。
[0091]
实施例4ythdc1-bmscs稳转株对心肌梗死的治疗效果
[0092]
本实施例稳转株的制备方法参照实施例2。
[0093]
1、mi大鼠模型的构建
[0094]
本实施例采用的心肌梗死模型为结扎冠状动脉左前降支，假手术组只穿线不结扎。
[0095]
模型构建方法为：暴露心脏后，探查确定左心耳，按照解剖定位寻找冠状动脉左前降支，确定缝扎位置(肺动脉圆锥与左心耳交界处下方2mm)，使用带prolene线的5-0针在左心耳下缘1-2mm处进针，深度0.5-1mm，从肺动脉圆锥左缘出针，结扎冠状动脉左前降支。结扎后肉眼可见结扎线以下部位变白，尤以心尖处最明显，心电监护显示st段抬高。
[0096]
2、bmcss移植
[0097]
(1)选取8-10周龄(220-250g)spf级sd雄性，按以下条件随机分组：
[0098]
sham+pbs：假手术，仅注射pbs，注射量100μl；
[0099]
sham+oe-nc+bmscs：假手术，注射含1
×
107个nc-bmscs的pbs，注射量100μl；
[0100]
sham+oe-ythdc1+bmscs：假手术，注射含1
×
107个ythdc1-bmscs的pbs，注射量100μl；
[0101]
mi+pbs：心肌梗死模型，仅注射pbs，注射量100μl；
[0102]
mi+oe-nc+bmscs：心肌梗死模型，注射含1
×
107个nc-bmscs的pbs，注射量100μl；
[0103]
mi+oe-ythdc1+bmscs：心肌梗死模型，注射含1
×
107个ythdc1-bmscs的pbs，注射量100μl。
[0104]
在心肌梗死结扎位点周围使用微量注射器分5点进行心脏原位注射bmscs，移植后关闭胸腔，缝合皮肤，维持辅助呼吸至自主呼吸恢复后继续饲养4周。
[0105]
3、检测指标
[0106]
(1)心功能检测
[0107]
对继续饲养4周的大鼠进行超声心动图检查。使用小动物麻醉机异氟烷吸入式麻醉，使用脱毛膏将左胸前区的毛发脱干净，并将固定于鼠板上，在心前区均匀涂抹医用超声耦合剂，然后利用高分辨超声影像系统测定各组小鼠的心功能指标，包括左室射血分数
(lvef)，左室短轴缩短率(lvfs)等，每个测量指标均选取连续7个位点构成的连续3个心动周期后取平均值。
[0108]
(2)心脏组织masson三染色
[0109]
继续饲养4周的大鼠进行心脏取材，多聚甲醛固定后行常规石蜡包埋及切片。切片制作完成后常规脱蜡水化，行masson三染色观察心脏组织纤维化的情况。
[0110]
具体步骤如下：
[0111]
①
切片常规脱蜡至水：将切片放入玻片架上，放入to型生物制片透明制i中脱蜡15min(摇床)
→
to型生物制片透明制ii中脱蜡15min(摇床)
→
100％乙醇，5min
→
95％乙醇，5min
→
85％乙醇，5min
→
80％乙醇，5min
→
70％乙醇，5min
→
流水冲洗10min；
[0112]
②
切片平放在染色专用保湿盒中(正面朝上)，使用免疫组化笔将心脏切片周围画圈(尽量不触及组织)，防止试剂散开染色不充分，在免疫组化圈内滴加媒染液a浸染，保湿盒内加入适量自来水防止蒸发干燥，盖上保湿盒的盖子，小心放入60℃的温箱中恒温1h进行媒染，之后进行流水冲10min；
[0113]
③
滴加天青石蓝染液20min，水洗3次，每次5-10s；
[0114]
④
滴加苏木素染液20min，水洗3次，每次5-10s；
[0115]
⑤
滴加酸性分化液数秒，水洗终止分化，流水冲10min；
[0116]
⑥
滴加丽春品红染液8min，水洗3次，每次5-10s；
[0117]
⑦
滴加磷钼酸染液10min；
[0118]
⑧
倾去磷钼酸染液后滴加苯胺蓝染液15min，用弱酸洗去苯胺蓝染液，洗3次；
[0119]
⑨
滴加弱酸工作液2min；
[0120]
⑩
95％乙醇，30s
→
100％乙醇i，30-60s
→
100％乙醇ii，30-60s；
[0121]
切片置入to型生物制片透明制剂透明，1-2min，2次；中性树胶封固，并于显微镜下观察拍照。
[0122]
结果如图6所示。
[0123]
图6中：
[0124]
a为超声心动图检测大鼠心功能的m型图；
[0125]
b为超声心动图检测大鼠心功能指标(lvef)的结果统计图；
[0126]
c为超声心动图检测大鼠心功能指标(lvfs)的结果统计图；
[0127]
d为心脏组织切片masson纤维化染色图；
[0128]
e为心脏组织切片masson纤维化染色结果统计图。

技术特征：
1.ythdc1基因在制备治疗心肌梗死药物中的应用，其特征在于，在干细胞中过表达ythdc1基因或与ythdc1基因核苷酸序列具有至少90％同源性的核苷酸序列。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的药物用于改善心肌梗死后心功能或心脏纤维化。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的干细胞为移植用干细胞；所述的干细胞为间充质干细胞；所述的干细胞为骨髓源间充质干细胞。4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的干细胞中包括过表达ythdc1基因的慢病毒载体。5.一种过表达ythdc1基因的骨髓源间充质干细胞，其特征在于，在骨髓源间充质干细胞中过表达ythdc1基因或与ythdc1基因核苷酸序列具有至少90％同源性的核苷酸序列。6.一种治疗心肌梗死的药物，其特征在于，包括权利要求5所述的过表达ythdc1基因的骨髓源间充质干细胞。7.根据权利要求6所述的药物，其特征在于，所述的骨髓源间充质干细胞为原代细胞或传代细胞；传代细胞优选为p3-p5代。8.根据权利要求6所述的药物，其特征在于，所述的药物用于改善心肌梗死后心功能或心脏纤维化。9.一种治疗心肌梗死药物的制备方法，其特征在于，包括在干细胞中过表达ythdc1基因或与ythdc1基因核苷酸序列具有至少90％同源性的核苷酸序列。10.根据权利要求9所述的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)骨髓源间充质干细胞的培养与鉴定；(2)过表达ythdc1基因的慢病毒载体转染骨髓源间充质干细胞构建稳转株；(3)稳转株培养。

技术总结
本发明属于生物技术领域，公开了YTHDC1基因在制备治疗心肌梗死药物中的应用。所述的应用在于在干细胞中过表达YTHDC1基因或与YTHDC1基因核苷酸序列具有至少90％同源性的核苷酸序列。所述的药物制备方法包括过表达YTHDC1基因的慢病毒载体转染骨髓源间充质干细胞构建YTHDC1-BMSCs稳转株。YTHDC1-BMSCs稳转株比骨髓源间充质干细胞对缺血缺氧环境的耐受性提高。动物实验也证实了，移植了YTHDC1-BMSCs稳转株后的心肌梗死大鼠的心脏功能显著提高且减少了心肌纤维化面积。提高且减少了心肌纤维化面积。提高且减少了心肌纤维化面积。


技术研发人员：赵永超 韩韦钰 王艳 熊卫东 邓熠 张巍 刘志江 赵然尊 葛均波 石蓓
受保护的技术使用者：遵义医科大学附属医院
技术研发日：2023.05.22
技术公布日：2023/7/12