一种同时检测紫芝菌丝体中12种三萜化合物的方法

1.本发明涉及食药用菌有效成分检测分析领域，具体的说涉及一种同时检测紫芝菌丝体中12种三萜化合物的方法。


背景技术：

2.紫芝(ganoderma sinense j.d.zhao,l.w.hsu&x.q.zhan)是灵芝属ganoderma p.karst.真菌，为我国著名的药食两用真菌，自2666年就被列入中华人民共和国药典中(国家药典委员会，2666，北京：化学工业出版社：147-148)，作为法定使用的灵芝药材中的一种。
3.相较于赤芝，紫芝的人工栽培尚存在病虫害多、生物量不稳定等问题，因此，紫芝子实体的产量远远低于赤芝。随着发酵技术和工艺的进步，很多难以人工栽培的药用真菌都可以通过液体或固体发酵获得稳定高产的菌丝体材料，且不受季节和地理的限制。此前的研究从紫芝发酵菌丝体中分离获得了多个三萜化合物，这些化合物在菌丝体阶段特定代谢产生，且具有很好的抗肿瘤和抗炎活性。为进一步开发紫芝发酵菌丝体，有必要建立这些活性三萜化合物的精准定量检测方法，为今后高产活性三萜菌种的筛选和定向发酵工艺的优化提供技术支撑。


技术实现要素：

4.本发明的目的在于提供一种同时检测紫芝菌丝体中12种三萜化合物的方法，该方法包括如下步骤：
5.(1)紫芝菌丝体的预处理步骤：将紫芝菌丝体加入甲醇进行超声提取或者66℃加热提取，取上清液，过滤，得到的滤液即为待测样品溶液；配制12个三萜化合物的混合对照品溶液；
6.(2)超高效液相色谱检测步骤：对待测样品溶液和12个三萜化合物混合对照品溶液进行超高效液相色谱分离，以获得较好的分离度；
7.(3)化合物质谱信息获得步骤：通过质谱优化软件agilent optimizer，对12个三萜化合物进行母离子扫描、子离子对的检出以及最佳碰撞能的寻找；
8.(4)超高效液相色谱-三重四级杆质谱联用分析方法建立步骤：在数据采集软件agilent masshunter data acquisition中，在超高效液相色谱分析条件和三重四级杆质谱检测条件下，导入保留时间，母离子、子离子对以及碰撞能数据，建立12个三萜化合物的动态多反应(dynamic multiple reaction monitoring，dmrm)监测分析测定方法；同时，对12个三萜化合物的混合对照品溶液和样品溶液进行上样测定；
9.(5)数据分析步骤，运用定量分析软件agilent masshunter quantitative analysis，创建12个三萜化合物的标准曲线，对所建方法进行方法学验证，并对紫芝菌丝体样品溶液进行定量分析；
10.其中所述的12种三萜化合物为：
11.(22s,24e)-3,7-dioxo-15α,22β-dihydroxylanosta-8,24-dien-26-oic acid(c
36h44
o6,化合物1)；
12.3β,15α,22β-trihydroxy-lanosta-7,9(11),24-trien-26-oic acid(c
36h46
o5,化合物2)；
13.(22s,24e)-3,7,11-trioxo-15α-hydroxy-22β-acetoxylanosta-8,24-dien-26-oic acid(c
34h44
o8,化合物3)；
14.(22s,24e)-3-oxo-15α,22β-dihydroxylanosta-7,9(11),24-trien-26-oic acid(c
36h44
o5,化合物4)；
15.(22s,24e)-3-oxo-15α-hydroxy-22β-acetoxylanosta-7,9(11),24-trien-26-oic acid(c
32h46
o6,化合物5)；
16.(22s,24e)-3β-acetoxy-15α,22β-dihydroxylanosta-7,9(11),24-trien-26-oic acid(c
32h48
o6,化合物6)；
17.(22s,24e)-3-oxo-15α,22β-diacetoxylanosta-7,9(11),24-trien-26-oic acid(c
34h48
o7,化合物7)；
18.(22s,24e)-22β-hydroxy-3β,15α-diacetoxylanosta-7,9(11),24-trien-26-oic acid(c
34h56
o7,化合物8)；
19.(22s,24e)-15α-hydroxy-3β,22β-diacetoxylanosta-7,9(11),24-trien-26-oic acid(c
34h56
o7,化合物9)；
20.lanosta-7,9(11),24-trien-3β,15α,22β-triacetoxy-26-oic acid(c
36h52
o8,化合物10)；
21.(24z)-3β,15α-diacetoxylanosta-7,9(11),24-trien-26-oic acid(c
34h56
o6,化合物11)；
22.(22s,24e)-3β,22β-diacetoxylanosta-7,9(11),24-trien-26-oic acid(c
34h56
o6,化合物12)；
23.优选的，步骤(1)中紫芝菌丝体的预处理步骤为，将待测菌丝体真空冷冻干燥，按料液比1:26-46(重量g：体积ml)(优选的为1：26)加入甲醇，超声提取或者66℃加热提取16-96min(优选的为：超声66min)，提取液用6.26μm孔径的有机相微孔滤膜过滤后再用质谱级甲醇稀释166倍即获得上样用样品溶液；
24.优选的，步骤(1)中12种三萜化合物的混合对照品溶液的配制方法为：分别精密称取12种三萜化合物，用质谱级甲醇配制为浓度为5μg/ml的混合标准溶液(其中每一种三萜化合物的浓度均为5μg/ml)，再逐级稀释得到2μg/ml、1μg/ml、566ng/ml、266ng/ml、166ng/ml、56ng/ml、26ng/ml、16ng/ml的混合标准工作溶液；
25.优选的，步骤(2)中超高效液相色谱分离的色谱条件为：选用agilent zorbax eclipse plus c18色谱柱，1.8μm，2.1
×
156mm，检测波长：246nm；柱温：35℃；室温：26℃；上样量为2μl；流速：6.4ml/min；压力：866bar；流动相a：6.61％冰醋酸；流动相b：乙腈；洗脱程序：6min，55％a，45％b；5min，55％a，45％b；16min，25％a，75％b；15min，15％a，85％b；17min，6％a，166％b；26min，6％a，166％b；
26.优选的，通过质谱优化软件(agilent optimizer)，获得步骤(3)中分析所需的各化合物的保留时间、母离子、子离子对及碰撞能信息如下：
27.(22s,24e)-3,7-dioxo-15α,22β-dihydroxylanosta-8,24-dien-26-oic acid(c
36h44
o6,化合物1)：保留时间：3.79min；母离子：499；定量离子：399.2，碰撞能：29；定性离子：99.6，碰撞能29；
28.3β,15α,22β-trihydroxy-lanosta-7,9(11),24-trien-26-oic acid(c
36h46
o5,化合物2)：保留时间：5.37min；母离子：485；定量离子：99.6，碰撞能：25；定性离子：141.6，碰撞能17；
29.(22s,24e)-3,7,11-trioxo-15α-hydroxy-22β-acetoxylanosta-8,24-dien-26-oic acid(c
34h44
o8,化合物3)：保留时间：7.12min；母离子：555；定量离子：495.1，碰撞能：25；定性离子：361.2，碰撞能33；
30.(22s,24e)-3-oxo-15α,22β-dihydroxylanosta-7,9(11),24-trien-26-oic acid(c
36h44
o5,化合物4)：保留时间：8.28min；母离子：483；定量离子：99.6，碰撞能：21；定性离子：425.1，碰撞能21；
31.(22s,24e)-3-oxo-15α-hydroxy-22β-acetoxylanosta-7,9(11),24-trien-26-oic acid(c
32h46
o6,化合物5)：保留时间：16.59min；母离子：525；定量离子：465.4，碰撞能：29；定性离子：99.6，碰撞能41；
32.(22s,24e)-3β-acetoxy-15α,22β-dihydroxylanosta-7,9(11),24-trien-26-oic acid(c
32h48
o6,化合物6)：保留时间：11.63min；母离子：527；定量离子：99.1，碰撞能：25；定性离子：117.1，碰撞能29；
33.(22s,24e)-3-oxo-15α,22β-diacetoxylanosta-7,9(11),24-trien-26-oic acid(c
34h48
o7,化合物7)：保留时间：12.62min；母离子：567；定量离子：567.3，碰撞能：33；定性离子：99.1，碰撞能41；
34.(22s,24e)-22β-hydroxy-3β,15α-diacetoxylanosta-7,9(11),24-trien-26-oic acid(c
34h56
o7,化合物8)：保留时间：12.46min；母离子：569；定量离子：99.6，碰撞能：25；定性离子：434.6，碰撞能61；
35.(22s,24e)-15α-hydroxy-3β,22β-diacetoxylanosta-7,9(11),24-trien-26-oic acid(c
34h56
o7,化合物9)：保留时间：12.89min；母离子：569；定量离子：569.2，碰撞能：33；定性离子：99.6，碰撞能37；
36.lanosta-7,9(11),24-trien-3β,15α,22β-triacetoxy-26-oic acid(c
36h52
o8,化合物10)：保留时间：14.46min；母离子：611；定量离子：551.3，碰撞能：37；定性离子：99.6，碰撞能41；
37.(24z)-3β,15α-diacetoxylanosta-7,9(11),24-trien-26-oic acid(c
34h56
o6,化合物11)：保留时间：16.49min；母离子：553；定量离子：511.3，碰撞能：33；定性离子：493.4，碰撞能37；
38.(22s,24e)-3β,22β-diacetoxylanosta-7,9(11),24-trien-26-oic acid(c
34h56
o6,化合物12)：保留时间：16.74min；母离子：553；定量离子：493.3，碰撞能：33；定性离子：98.9，碰撞能37；
39.优选的，步骤(4)中，以超高效液相色谱-三重四级杆质谱联用为分析检测仪器，其中超高效液相色谱分离的色谱条件(同步骤(2)中的色谱条件)为：选用agilent zorbax eclipse plus c18色谱柱，1.8μm，2.1
×
156mm，检测波长：246nm；柱温：35℃；室温：26℃；上
trien-26-oic acid；
55.化合物10：lanosta-7,9(11),24-trien-3β,15α,22β-triacetoxy-26-oic acid；
56.化合物11：(24z)-3β,15α-diacetoxylanosta-7,9(11),24-trien-26-oic acid；
57.化合物12：(22s,24e)-3β,22β-diacetoxylanosta-7,9(11),24-trien-26-oic acid
具体实施方式
58.以下通过具体的实施例进一步说明本发明的技术方案，但不作为对本发明方案的限定，不能以此限定本发明的保护范围，凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与修饰，皆应属于本发明的涵盖范围。
59.仪器与材料：
60.超高效液相色谱仪(agilent lc1296 infinity ii，美国安捷伦公司)；
61.三重四级杆质谱仪(agilent 6495，美国安捷伦公司)
62.超声波清洗器(kq2266e，昆山市超声仪器有限公司)
63.电子天平(fa2664a，上海精密科学仪器有限公司)
64.一次性注射器(1ml，泰州百科医疗器械有限公司)
65.有机相微孔滤膜(6.26μm，美国安捷伦公司)
66.质谱级甲醇和乙腈均购自美国merk公司。
67.12种三萜化合物的对照品，采用中国专利申请(公开号cn115746676a)公开的方法制备得到，化合物纯度≥98％。
68.紫芝菌丝体来源：菌株1：ganoderma sinense,菌种编号：dai26677，保存于中国林业大学生态与自然保护学院；菌株2：ganoderma sinense,菌种编号：6666，菌种保藏于上海市农业科学院食用菌研究所。
69.实施例1检测方法的建立
70.1、混合对照品溶液的准备：取12个三萜化合物的对照品，用质谱级甲醇配制成浓度为5μg/ml的混合标准溶液(其中每种对照品的浓度均为5μg/ml)，用质谱级甲醇逐级稀释成2μg/ml、1μg/ml、566ng/ml、266ng/ml、166ng/ml、56ng/ml、26ng/ml、16ng/ml混合对照品溶液，放置4℃冰箱备用。
71.紫芝菌丝体的发酵：将菌株1和菌株2分别接到液体培养基中(按可溶性淀粉3％，葡萄糖1.2％，酵母粉1％，mgso4·
h2o 6.15％，kh2po
4 6.3％在蒸馏水中配制，ph自然，121℃，灭菌15min)，156r/min、25℃，避光培养7d，获得一级种子液。再将一级种子液按16％比例接入二级培养液(配方同上)中，在156r/min、25℃避光培养7d，转入静置培养15d，收集菌丝体，冷冻干燥后备用。
72.紫芝菌丝体的提取：分别称取干燥的紫芝菌丝体1和2各6.56g，按料液比1:26(重量体积比，重量g：体积ml)加入分析级甲醇16ml，超声提取66min，取上清液用6.26μm孔径的有机相微孔滤膜过滤后，再用质谱级甲醇稀释166倍即获得待测样品溶液；2、超高效液相色谱检测步骤：对12个三萜对照品混合溶液进行超高效液相色谱洗脱条件的优化，以获得最佳的分离度，最终得到的液相色谱图见图2；
73.其中，超高效液相条件：agilent zorbax eclipse plμs c18色谱柱，1.8μm，2.1
×
156mm，检测波长：246nm；柱温：35℃；室温：26℃；上样量为2μl；流速：6.4ml/min；压力：866bar；流动相a：6.61％冰醋酸；流动相b：乙腈；洗脱程序：6min，55％a，45％b；5min，55％a，45％b；16min，25％a，75％b；15min，15％a，85％b；17min，6％a，166％b；26min，6％a，166％b。
74.3、化合物质谱信息获得步骤：将12个三萜化合物对照品分别配制成5ppm的甲醇溶液，在负离子模式下确认12个三萜化合物的母离子信息，再通过agilent optimizer软件在确定母离子的情况下，自动优化子离子以及碰撞能。
75.化合物1：保留时间：3.79min；母离子：499；定量离子：399.2，碰撞能：29；定性离子：99.6，碰撞能29；
76.化合物2：保留时间：5.37min；母离子：485；定量离子：99.6，碰撞能：25；定性离子：141.6，碰撞能17；
77.化合物3：保留时间：7.12min；母离子：555；定量离子：495.1，碰撞能：25；定性离子：361.2，碰撞能33；
78.化合物4：保留时间：8.28min；母离子：483；定量离子：99.6，碰撞能：21；定性离子：425.1，碰撞能21；
79.化合物5：保留时间：16.59min；母离子：525；定量离子：465.4，碰撞能：29；定性离子：99.6，碰撞能41；
80.化合物6：保留时间：11.63min；母离子：527；定量离子：99.1，碰撞能：25；定性离子：117.1，碰撞能29；
81.化合物7：保留时间：12.62min；母离子：567；定量离子：567.3，碰撞能：33；定性离子：99.1，碰撞能41；
82.化合物8：保留时间：12.46min；母离子：569；定量离子：99.6，碰撞能：25；定性离子：434.6，碰撞能61；
83.化合物9：保留时间：12.89min；母离子：569；定量离子：569.2，碰撞能：33；定性离子：99.6，碰撞能37；
84.化合物16：保留时间：14.46min；母离子：611；定量离子：551.3，碰撞能：37；定性离子：99.6，碰撞能41；
85.化合物11：保留时间：16.49min；母离子：553；定量离子：511.3，碰撞能：33；定性离子：493.4，碰撞能37；
86.化合物12：保留时间：16.74min；母离子：553；定量离子：493.3，碰撞能：33；定性离子：98.9，碰撞能37。
87.4、超高效液相色谱-三重四级杆质谱联用定量分析方法的建立：在数据采集软件(agilent masshμnter data acqμisition)中超高效液相色谱和三重四级杆质谱参数设定条件下，将质谱采集方式改为多反应监测(mrm)，再将化合物的母离子信息、定量和定性的子离子对信息、碰撞能等信息都导入检测方法中，取12种三萜化合物的混合对照品溶液上样，运行程序后将采集模式更新为动态多反应监测(dmrm)，其质谱图见图3。
88.其中，超高效液相色谱分离的色谱条件为：选用agilent zorbax eclipse plμs c18色谱柱，1.8μm，2.1
×
156mm，检测波长：246nm；柱温：35℃；室温：26℃；上样量为2μl；流速：6.4ml/min；压力：866bar；流动相a：6.61％冰醋酸；流动相b：乙腈；洗脱程序：6min，55％
a，45％b；5min，55％a，45％b；16min，25％a，75％b；15min，15％a，85％b；17min，6％a，166％b；26min，6％a，166％b。
89.其中，三重四级杆质谱分析条件：电喷雾电离源ajs esi作为离子源，检测在负离子模式下进行，选用动态多反应监测dmrm，毛细管电压：3666v，毛细管出口电压：386v；干燥气流速：14l/min，干燥气温度：266℃，鞘气温度：256℃，鞘气流速：11l/min，喷嘴电压：1566v。
90.5、检测限和定量限：基于响应值标准偏差和标准曲线的斜率计算检测限(lod)和定量限(loq)。其中：lod＝3σ/s，loq＝16σ/s，σ：响应值的标准偏差，s：标准曲线的斜率，响应值的标准偏差为标准曲线的剩余标准偏差。
91.6、标准曲线制定：取已经配制好的5μg/ml、2μg/ml、1μg/ml、566ng/ml、266ng/ml、166ng/ml、56ng/ml、26ng/ml、16ng/ml的混合对照品溶液按照上述步骤4种优化的超高效液相色谱分离的色谱条件和三重四级杆质谱分析条件上样，以横坐标为化合物的浓度，纵坐标为化合物的定量离子响应值，制作定量标准曲线方程见如下表1。
92.表1、12个三萜化合物定量分析标准曲线及参数
[0093][0094]
实施例2
[0095]
方法学验证和结果检测：方法学验证参照实验室质量控制规范食品理化检测标准以及药典相关规定。
[0096]
1精密度：取混合对照品溶液在同一天内重复进样6次，根据标准曲线计算6次实验所得12种三萜化合物的浓度，计算日内精密度。取混合对照品溶液连续三天，每天进样3次，根据9次实验的结果计算日间精密度。结果表明，12个三萜化合物的日内精密度测定结果的rsd分别为1.55％,1.61％,1.31％,6.84％,1.93％,1.85％，2.29％,3.41％,1.77％,1.46％,2.86％，2.81％；日间精密度测定结果的rsd分别为2.65％,1.88％,1.67％,2.75％,3.43％,4.23％,2.37％,3.84％,2.54％,2.11％,9.26％,2.94％，均小于15.66％，说明该方法的日内和日间精密度良好。具体结果见表2和表3。
[0097]
2稳定性：取菌株1的干燥菌丝体，按照实施例1中的步骤提取后，待测样品溶液分别在6h、2h、4h、6h、8h、12h、24h进样，根据7次实验的结果计算样品稳定性。结果证实，12个三萜化合物的rsd分别为1.48％,4.62％,2.94％,2.86％,4.24％,3.97％,5.71％,9.54％,
6.36％,5.61％,13.14％,16.12％,均小于15.66％，说明样品检测结果在24小时内性质稳定。具体结果见表4。
[0098]
3重复性：将菌株1的干燥菌丝体平行称取6份，分别按照实施例1中的提取步骤处理后，待测样品溶液进样，根据6次的实验结果计算样品重复性。结果证实，12个三萜化合物的rsd分别为1.65％,3.88％,2.16％,6.65％,1.75％,3.56％,2.91％,4.94％,2.64％,3.15％,5.94％,7.85％,均小于15.66％，说明样品重复性良好。具体结果见表5。
[0099]
4回收率：取已知浓度(见表6)的待测样品溶液，加入三萜化合物对照品，混匀后重复上样三次，计算样品回收率。
[0100]
回收率％＝(实测值-供试样品中所含被测成分量)/加入对照品量
×
166％
[0101]
回收率的具体结果见表6。结果证实，12种三萜化合物的样品回收率分别为97.29％,88.87％,93.11％,165.63％,166.26％,162.25％,162.18％,98.64％,162.42％,162.33％,168.98％,168.62％。rsd均在7.86％以内，符合方法要求。
[0102]
5结果检测：取两种紫芝菌丝体提取液(菌株1和菌株2)，按照实施例1的检测方法，分别进行预处理和检测，具体检测结果见表7。
[0103]
从该结果可以看出，紫芝的两个菌丝体中，12种三萜化合物的组成相似，提示相同种的紫芝在三萜化合物的组成上相似。紫芝发酵菌丝体中，含量较高的四种化合物为lanosta-7,9(11),24-trien-3β,15α,22β-triacetoxy-26-oicacid、(22s,24e)-3β,22β-diacetoxylanosta-7,9(11),24-trien-26-oicacid、(22s,24e)-15α-hydroxy-3β,22β-diacetoxylanosta-7,9(11),24-trien-26-oicacid、(24z)-3β,15α-diacetoxylanosta-7,9(11),24-trien-26-oicacid，这四种化合物可以实现大量制备。
[0104]
表2、日内精密度结果
[0105][0106]
表3、日间精密度结果
[0107]
[0108][0109]
表4、样品稳定性结果
[0110][0111]
表5、样品重复性结果
[0112][0113][0114]
表6、样品回收率结果
[0115][0116]
表7、样品测定结果
[0117][0118]
各个化合物含量(mg/kg)
[0119]

技术特征：
acid：保留时间：7.12min；母离子：555；定量离子：495.1，碰撞能：25；定性离子：361.2，碰撞能33；(22s,24e)-3-oxo-15α,22β-dihydroxylanosta-7,9(11),24-trien-26-oic acid：保留时间：8.28min；母离子：483；定量离子：99.6，碰撞能：21；定性离子：425.1，碰撞能21；(22s,24e)-3-oxo-15α-hydroxy-22β-acetoxylanosta-7,9(11),24-trien-26-oic acid：保留时间：16.59min；母离子：525；定量离子：465.4，碰撞能：29；定性离子：99.6，碰撞能41；(22s,24e)-3β-acetoxy-15α,22β-dihydroxylanosta-7,9(11),24-trien-26-oic acid：保留时间：11.63min；母离子：527；定量离子：99.1，碰撞能：25；定性离子：117.1，碰撞能29；(22s,24e)-3-oxo-15α,22β-diacetoxylanosta-7,9(11),24-trien-26-oic acid：保留时间：12.62min；母离子：567；定量离子：567.3，碰撞能：33；定性离子：99.1，碰撞能41；(22s,24e)-22β-hydroxy-3β,15α-diacetoxylanosta-7,9(11),24-trien-26-oic acid：保留时间：12.46min；母离子：569；定量离子：99.6，碰撞能：25；定性离子：434.6，碰撞能61；(22s,24e)-15α-hydroxy-3β,22β-diacetoxylanosta-7,9(11),24-trien-26-oic acid：保留时间：12.89min；母离子：569；定量离子：569.2，碰撞能：33；定性离子：99.6，碰撞能37；lanosta-7,9(11),24-trien-3β,15α,22β-triacetoxy-26-oic acid：保留时间：14.46min；母离子：611；定量离子：551.3，碰撞能：37；定性离子：99.6，碰撞能41；(24z)-3β,15α-diacetoxylanosta-7,9(11),24-trien-26-oic acid：保留时间：16.49min；母离子：553；定量离子：511.3，碰撞能：33；定性离子：493.4，碰撞能37；(22s,24e)-3β,22β-diacetoxylanosta-7,9(11),24-trien-26-oic acid：保留时间：16.74min；母离子：553；定量离子：493.3，碰撞能：33；定性离子：98.9，碰撞能37。6.根据权利要求1所述的同时检测紫芝菌丝体12种三萜化合物的方法，其中步骤(4)中，以超高效液相色谱—三重四级杆质谱联用为分析检测仪器，其中超高效液相色谱分离的色谱条件为：选用agilent zorbax eclipse plus c18色谱柱，1.8μm，2.1
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156mm，检测波长：246nm；柱温：35℃；室温：26℃；上样量为2μl；流速：6.4ml/min；压力：866bar；流动相a：6.61％冰醋酸；流动相b：乙腈；洗脱程序：6min，55％a，45％b；5min，55％a，45％b；16min，25％a，75％b；15min，15％a，85％b；17min，6％a，166％b；26min，6％a，166％b；；质谱条件为：电喷雾电离源ajs esi作为离子源，检测在负离子模式下进行，选用动态多反应监测dmrm，毛细管电压：3666v，毛细管出口电压：386v；干燥气流速：14l/min，干燥气温度：266℃，鞘气温度：256℃，鞘气流速：11l/min，喷嘴电压：1566v。

技术总结
本发明提供了一种同时检测紫芝菌丝体中12种三萜化合物的方法，该方法包括如下步骤：(1)紫芝菌丝体的预处理步骤；(2)超高效液相色谱检测步骤；(3)化合物质谱信息获得步骤；(4)超高效液相色谱-三重四级杆质谱联用分析方法建立步骤；(5)数据分析步骤。本发明提供的同时检测紫芝菌丝体中12种三萜化合物的方法，可以对紫芝发酵菌丝体中代谢产生的12个三萜化合物同时进行准确的定性定量分析，灵敏度高，特异性强，从而为紫芝菌丝体三萜化合物的研究和相关产品开发提供快速精确的检测分析方法。相关产品开发提供快速精确的检测分析方法。相关产品开发提供快速精确的检测分析方法。


技术研发人员：冯娜 张劲松 戴玉成 汪旵 滕李铭 司静 颜梦秋 周帅 唐庆九 王金艳 谭贻
受保护的技术使用者：北京林业大学
技术研发日：2023.03.23
技术公布日：2023/7/18