一种低苯丙氨酸紫苏肽粉的制备方法

1.本发明涉及食品加工技术领域，具体涉及一种低苯丙氨酸紫苏肽粉的制备方法。


背景技术：

2.苯丙酮尿症，也称为苯丙氨酸羟化酶缺乏症，是一种由苯丙氨酸羟化酶基因突变引起的常染色体隐性遗传疾。苯丙酮尿症患者由于体内苯丙氨酸羟化酶缺乏或活性降低，导致苯丙氨酸不能通过正常代谢途径转化为酪氨酸和其他代谢产物，从而旁路代谢途径增强，生成苯丙酮酸、苯乙酸和苯乳酸，并从尿中大量排出，产生苯丙酮尿的代谢疾病。若未得到及时治疗，则导致患者在出生3个月后表现出智力、运动发育落后，毛发由黑变黄，皮肤白，全身和尿液有特殊的鼠臭味，甚至对患者中枢神经系统造成严重和不可逆转的伤害，导致严重的智力残疾、瘢痫和行为问题。我国主要城市新生儿筛查的苯丙酮尿症发病率为1/113074。明显高于世界平均水平，且苯丙酮尿症在我国的发病率情况是北方地区高于南方地区。
3.紫苏为唇形科一年生草本植物，又名回苏、红紫苏、赤苏、苏子等。国家卫健委公布2019最新版药食同源目录里，将紫苏、紫苏子归纳到了药食同源可用种类里。紫苏饼粕是紫苏籽脱脂后的副产品，气味芳香，适口性好，紫苏籽粒蛋白质含量为20～23％，脱脂后饼粕中蛋白质含量28％，含18种氨基酸且富含人体所必需的8种氨基酸。目前，紫苏饼粕大多数只是作为饲料或肥料回入田中，未能得到充分利用，在一定程度上污染环境，造成优质蛋白质的浪费。


技术实现要素：

4.本发明提供一种低苯丙氨酸紫苏肽粉的制备方法。本发明的制备的低苯丙氨酸紫苏肽粉中苯丙氨酸含量较低，酪氨酸含量较高，为今后低苯丙氨酸紫苏肽粉领域提供理论依据和技术参考。
5.本发明提供的技术解决方案如下：
6.本发明提供了一种低苯丙氨酸紫苏肽粉的制备方法，包括以下步骤：
7.s1、将紫苏籽榨油后的副产品干燥，进行磨粉过筛，得到紫苏脱脂饼粕；
8.s2、以所述紫苏脱脂饼粕为原料，按料液比为3～5g:100g的比例添加去离子水，进行煮沸，按照原料质量的1～1.5％添加中性复合蛋白酶，进行酶解，得到第一酶解液；
9.s3、在所述第一酶解液中添加原料质量1～2％的氨基肽酶，再次进行酶解，得到第二酶解液；
10.s4、将所述第二酶解液进行离心处理，得到上清液；
11.s5、在所述上清液中加入活性炭，加热一段时间，调节ph，进行吸附；
12.s6、吸附完成后采用分液漏斗进行过滤，得到低苯丙氨酸紫苏肽混合液；
13.s7、将所述低苯丙氨酸紫苏肽混合液进行冷冻，冷冻干燥后即得到低苯丙氨酸紫苏肽粉。
14.进一步地，步骤s7中，所述低苯丙氨酸紫苏肽粉中苯丙氨酸含量占蛋白当量的0.09～0.12％。
15.进一步地，步骤s2中，所述进行煮沸具体为：在100℃的温度下煮沸8～12min；所述进行酶解具体为：在温度为55℃、ph为7.0的条件下添加中性复合蛋白酶，酶解4～6h。
16.进一步地，步骤s3中，所述再次进行酶解具体为：在温度为55℃、ph为8.0的条件下添加氨基肽酶，酶解4～6h。
17.进一步地，步骤s4中，所述将所述第二酶解液进行离心处理，具体为：将所述第二酶解液置于高速离心器上，设置转速为5000r/min，离心时间为10～20min，进行离心。
18.进一步地，所述在所述上清液中加入活性炭，加热一段时间，调节ph，进行吸附，具体为：
19.取所述上清液10ml，按上清液质量的5～9％添加活性炭粉末，加热至25℃，调整ph至4.0，在活性炭粉末中静态吸附2.0h。
20.进一步地，步骤s7中，所述将所述低苯丙氨酸紫苏肽混合液进行冷冻具体为：将所述低苯丙氨酸紫苏肽混合液放置于-80℃的冰箱中进行冷冻。
21.进一步地，步骤s1中，所述进行磨粉过筛选用100目筛。
22.与现有技术相比，本发明的有益效果是：
23.本发明提供了一种低苯丙氨酸紫苏肽粉的制备方法，以紫苏饼粕为原料，制备得到了低苯丙氨酸紫苏肽粉，制备得到的低苯丙氨酸紫苏肽粉中苯丙氨酸含量占蛋白当量的0.09～0.12％，通过该方法，将紫苏饼粕得到充分利用，避免了环境污染。
附图说明
24.图1为本发明实施例中低苯丙氨酸紫苏肽粉的制备方法的流程图；
25.图2为本发明实施例中紫苏脱脂饼粕添加量对苯丙氨酸释放率的影响图；
26.图3为本发明实施例中中性复合蛋白酶添加量对苯丙氨酸释放率的影响图；
27.图4为本发明实施例中氨基肽酶添加量对苯丙氨酸释放率的影响图。
具体实施方式
28.为使本技术实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本技术实施例中的附图，对本技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。显然，下面所描述的实施例是本技术的一部分实施例，而不是全部的实施例。通常在此处附图中描述和示出的本技术实施例的组件可以以各种不同的配置来布置和设计。
29.因此，以下结合附图提供的本技术实施例的详细描述旨在仅仅表示本技术的选定实施例，并非限制本技术要求保护的范围。基于本技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动的前提下所获得的其他所有实施例，都属于本技术保护的范围。
30.参阅图1，本发明提供了一种低苯丙氨酸紫苏肽粉的制备方法，包括以下步骤：
31.步骤101，将紫苏籽榨油后的副产品干燥，进行磨粉过筛，得到紫苏脱脂饼粕；
32.步骤102，以所述紫苏脱脂饼粕为原料，按料液比为3～5g:100g的比例添加去离子水，进行煮沸，按照原料质量的1～1.5％添加中性复合蛋白酶，进行酶解，得到第一酶解液；
33.步骤103，在所述第一酶解液中添加原料质量1～2％的氨基肽酶，再次进行酶解，
得到第二酶解液；
34.步骤104，将所述第二酶解液进行离心处理，得到上清液；
35.步骤105，在所述上清液中加入活性炭，加热一段时间，调节ph，进行吸附；
36.步骤106，吸附完成后采用分液漏斗进行过滤，得到低苯丙氨酸紫苏肽混合液；
37.步骤107，将所述低苯丙氨酸紫苏肽混合液进行冷冻，冷冻干燥后即得到低苯丙氨酸紫苏肽粉。
38.下面通过具体实施例做进一步说明：
39.实施例1
40.一种低苯丙氨酸紫苏肽粉的制备方法，包括以下步骤：
41.s1、将紫苏籽榨油后的副产品干燥后磨粉过100目筛，得到紫苏脱脂饼粕；
42.s2、称取1g紫苏脱脂饼粕，按3％(w/v)比例溶解于去离子水中，在100℃的温度下煮沸10min，在温度为55℃、ph为7.0的条件下添加內肽酶，內肽添加量为紫苏脱脂饼粕质量的1％，酶解4h，得到第一酶解液；
43.s3、在第一酶解液中再添加与内肽酶等量的外肽酶，在温度为55℃、ph为8.0的条件下，酶解4h，得到第二酶解液；
44.s4、酶解结束后，将第二酶解液置于高速离心器上，设置转速为5000r/min，离心时间10min，进行离心，得到上清液；
45.s5、取上清液10ml，按上清液质量的5％添加活性炭粉末，加热至25℃，调整ph至4.0，在活性炭粉末中静态吸附2.0h；
46.s6、吸附完成后采用分液漏斗进行过滤，得到低苯丙氨酸紫苏肽混合液；
47.s7、将所述低苯丙氨酸紫苏肽混合液放置于-80℃的冰箱中进行冷冻，冷冻干燥后即得到低苯丙氨酸紫苏肽粉。
48.本实施例中，经高效液相色谱测定，制得的phe释放率为83.53％，紫苏脱脂饼粕添加量对苯丙氨酸释放率的影响如图2所示，当紫苏饼粕浓度达到4％时，phe的释放率将达到最大值，酶的催化速率，随着紫苏饼粕添加量进一步增加，phe的释放率呈显著下降趋势。这可能是由于过量的底物或其代谢产物会与酶的活性位点发生竞争，从而抑制酶的催化作用，因此可以继续增加紫苏脱脂饼粕含量以提高phe释放率。
49.实施例2
50.该实施例与实施例1的区别在于：步骤s2中，将紫苏脱脂饼粕按5％(w/v)比例溶解于去离子水中、加入的酶为中性复合蛋白酶、酶解时间为5h；步骤s3中，加入的酶为氨基肽酶，酶解时间为5.5h。其余步骤均相同。
51.经高效液相色谱测定，按本实施制得的phe释放率为86.45％，中性复合蛋白酶添加量对苯丙氨酸释放率的影响如图3所示，在酶解反应的初始阶段，随着中性复合蛋白酶添加量的增加，酶解速率也随之增加。当酶的浓度增加到2.5％时，再增加酶量不会显著影响phe释放率，因此可以继续增加中性复合蛋白酶含量以提高phe释放率。
52.在本实施例中，氨基肽酶添加量对苯丙氨酸释放率的影响如图4所示。随着氨基肽酶浓度的逐步增加，phe释放率也逐渐升高。然而，当酶浓度增加到4％左右时，进一步增加酶浓度对phe释放率的提高效果变得缓慢。这可能是因为酶与底物的作用位点已经达到了饱和状态，继续增加酶浓度对phe释放率的作用有限。因此，还可以继续增加氨基肽酶含量
以提高phe释放率。
53.对得到的低苯丙氨酸紫苏肽粉中的所有氨基酸含量进行测定，结果如表1所示。其中苯丙氨酸含量占蛋白当量的1.05％。
54.在其他实施例中，得到的低苯丙氨酸紫苏肽粉中苯丙氨酸含量占蛋白当量的0.09～0.12％。通过该方法，以紫苏饼粕为原料，制备得到了低苯丙氨酸紫苏肽粉，将紫苏饼粕得到充分利用，避免了环境污染。
55.表1
[0056][0057][0058]
以上所述，仅为本技术的具体实施方式，但本技术的保护范围并不局限于此，任何在本技术揭露的技术范围内的变化或替换，都应涵盖在本技术的保护范围之内。因此，本技术的保护范围应以所述权利要求的保护范围为准。

技术特征：
1.一种低苯丙氨酸紫苏肽粉的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：s1、将紫苏籽榨油后的副产品干燥，进行磨粉过筛，得到紫苏脱脂饼粕；s2、以所述紫苏脱脂饼粕为原料，按料液比为3～5g:100g的比例添加去离子水，进行煮沸，按照原料质量的1～1.5％添加中性复合蛋白酶，进行酶解，得到第一酶解液；s3、在所述第一酶解液中添加原料质量1～2％的氨基肽酶，再次进行酶解，得到第二酶解液；s4、将所述第二酶解液进行离心处理，得到上清液；s5、在所述上清液中加入活性炭，加热一段时间，调节ph，进行吸附；s6、吸附完成后采用分液漏斗进行过滤，得到低苯丙氨酸紫苏肽混合液；s7、将所述低苯丙氨酸紫苏肽混合液进行冷冻，冷冻干燥后即得到低苯丙氨酸紫苏肽粉。2.根据权利要求1所述的低苯丙氨酸紫苏肽粉的制备方法，其特征在于：步骤s7中，所述低苯丙氨酸紫苏肽粉中苯丙氨酸含量占蛋白当量的0.09～0.12％。3.根据权利要求1所述的低苯丙氨酸紫苏肽粉的制备方法，其特征在于：步骤s2中，所述进行煮沸具体为：在100℃的温度下煮沸8～12min；所述进行酶解具体为：在温度为55℃、ph为7.0的条件下添加中性复合蛋白酶，酶解4～6h。4.根据权利要求1所述的低苯丙氨酸紫苏肽粉的制备方法，其特征在于：步骤s3中，所述再次进行酶解具体为：在温度为55℃、ph为8.0的条件下添加氨基肽酶，酶解4～6h。5.根据权利要求1所述的低苯丙氨酸紫苏肽粉的制备方法，其特征在于：步骤s4中，所述将所述第二酶解液进行离心处理，具体为：将所述第二酶解液置于高速离心器上，设置转速为5000r/min，离心时间为10～20min，进行离心。6.根据权利要求1所述的低苯丙氨酸紫苏肽粉的制备方法，所述在所述上清液中加入活性炭，加热一段时间，调节ph，进行吸附，其特征在于：取所述上清液10ml，按上清液质量的5～9％添加活性炭粉末，加热至25℃，调整ph至4.0，在活性炭粉末中静态吸附2.0h。7.根据权利要求1-6任一所述的低苯丙氨酸紫苏肽粉的制备方法，其特征在于：步骤s7中，所述将所述低苯丙氨酸紫苏肽混合液进行冷冻具体为：将所述低苯丙氨酸紫苏肽混合液放置于-80℃的冰箱中进行冷冻。8.根据权利要求7所述的低苯丙氨酸紫苏肽粉的制备方法，其特征在于：步骤s1中，所述进行磨粉过筛选用100目筛。

技术总结
本发明公开了一种低苯丙氨酸紫苏肽粉的制备方法，包括如下步骤：制备苏脱脂饼粕、制备第一酶解液、制备第二酶解液、离心处理制备上清液、加入活性炭进行吸附、低苯丙氨酸紫苏肽混合液、制备低苯丙氨酸紫苏肽粉。该方法以紫苏饼粕为原料，通过两部酶解法制备得到了低苯丙氨酸紫苏肽粉，制备得到的低苯丙氨酸紫苏肽粉中苯丙氨酸含量占蛋白当量的0.09～0.12％，通过该方法，将紫苏饼粕得到充分利用，避免了环境污染。环境污染。环境污染。


技术研发人员：张志军 李会珍 张天伟
受保护的技术使用者：中北大学
技术研发日：2023.03.09
技术公布日：2023/7/19