一种多功能性复合生物探针及其制备方法和应用与流程

1.本发明属于生命科学技术领域，涉及一种多功能性复合生物探针及其制备方法和应用。


背景技术：

2.表面增强拉曼散射(sers)是基于贵金属或金属化合物纳米结构的局域等离子共振，对拉曼信号显著增强的现象，可增强10
6-10
10
倍，sers光谱技术具有选择性好、灵敏度高、无光漂白、抗干扰、快速无损等优点，表面增强拉曼散射光谱等在光学检测领域中显示出巨大的应用潜力，如体外诊断和液体活检领域。目前常规的sers生物探针分为贵金属探针和半导体生物探针，前者具有高检测灵敏度的优势，后者具有功能性的优势，如信号稳定性好、具有光电磁响应等特性。通常为了集合两者的优势，通过化学合成的方法把贵金属和功能性半导体材料复合，该方法相对复杂，且不容易获得均匀性好的复合材料，严重制约了贵金属和半导体材料在sers领域的应用与发展。


技术实现要素：

3.本发明针对现有技术中的不足，提供一种多功能性复合生物探针及其制备方法和应用。
4.本发明的一个目的通过以下技术方案来实现：
5.一种多功能性复合生物探针，包括贵金属sers生物探针中的一种或多种以及磁性半导体sers生物探针中的一种或多种。
6.作为优选，贵金属sers生物探针的粒径为0.1nm～10000nm；进一步优选，粒径为0.1～1000nm，进一步优选，粒径为0.1～800nm，进一步优选，粒径为1～500nm。
7.作为优选，磁性半导体sers生物探针的粒径为0.1nm～10000nm；进一步优选，粒径为0.1～1000nm，进一步优选，粒径为0.1～800nm，进一步优选，粒径为1～500nm。
8.作为优选，所述贵金属sers生物探针和磁性半导体sers生物探针的形貌包括但不限于片层状、四面体状、六面体状、八面体状、十二面体状、空心笼状、圆颗粒状、棒状中的任一种。
9.作为优选，贵金属sers生物探针包括具有sers性能的贵金属材料，所述贵金属材料包括但不限于金、银、钯、铜等单质材料和复合材料中的一种或多种，所述复合材料为包含金、银、钯或铜的复合材料。
10.作为优选，贵金属材料的粒径为0.1～500nm，可选地，贵金属材料的粒径为0.5、1、5、10、20、30、40、50、100、150、200、250、300、350、400、450、500中的任意一个值或任意两个值之间的范围值。
11.作为优选，磁性半导体sers生物探针包括具有sers性能的磁性金属氧化物，磁性金属氧化物包括但不限于fe、zn、co、ni、cr、mn中的一种或多种对应的氧化物材料和包含上述材料的复合材料中的一种或多种。上述材料为：fe、co、ni、cr、mn中的一种或多种对应的
氧化物材料。
12.作为优选，磁性金属氧化物的粒径为0.1～500nm，可选地，磁性金属氧化物的粒径为0.5、1、5、10、20、30、40、50、100、150、200、250、300、350、400、450、500中的任意一个值或任意两个值之间的范围值。
13.作为优选，所述磁性金属氧化物为zn、co、ni、cr、mn中的一种或多种与fe的氧化物材料。基于zn、co、ni、cr、mn中的一种或多种对fe氧化物的掺杂形成的磁性金属氧化物构建的磁性半导体sers生物探针具有更优异的sers增强效应，有利于提高检测灵敏性和准确性。
14.作为优选，所述磁性金属氧化物为zn
x
fe
3-x
o4，其中0＜x＜3。
15.作为优选，所述磁性金属氧化物的制备方法包括以下步骤：将锌盐、钴盐、镍盐、铬盐、锰盐中的一种或多种和铁盐的溶液与碱性无机物、长烷基链有机酸和极性有机溶剂形成的溶液混合，进行反应得到初始磁性颗粒，并进行转相，获得磁性金属氧化物纳米粒子。由此制备的磁性金属氧化物纳米粒子具有sers性能。
16.铁盐包括但不限于氯化铁、氯化亚铁、硫酸铁、硫酸亚铁、硫酸亚铁铵、硝酸铁、硝酸亚铁中的一种或多种；锌盐包括但不限于氯化锌、硫酸锌、硝酸锌中的一种或多种，钴盐包括但不限于氯化钴、硫酸钴、硝酸钴中的一种或多种，镍盐包括但不限于氯化镍、硫酸镍、硝酸镍中的一种或多种，铬盐包括但不限于氯化铬、硫酸铬、硝酸铬中的一种或多种，锰盐包括但不限于氯化锰、硫酸锰、硝酸锰中的一种或多种；碱性无机物包括但不限于氢氧化钡、氢氧化钾、氢氧化钙、氢氧化钠和氨水等；长烷基链有机酸包括但不限于油酸、十八酸、十六酸、十四酸、十二酸等；极性有机溶剂包括但不限于甲醇、乙醇、异丙醇等极性大的有机溶剂。
17.锌盐、钴盐、镍盐、铬盐、锰盐中的一种或多种和铁盐的溶液为锌盐、钴盐、镍盐、铬盐、锰盐中的一种或多种和铁盐溶于水中形成的溶液；锌盐、钴盐、镍盐、铬盐、锰盐中的一种或多种和铁盐的溶液中，铁盐的浓度为2～200mmol/l。
18.碱性无机物、长烷基链有机酸和极性有机溶剂形成的溶液为碱性无机物加入到长烷基链有机酸和极性有机溶剂中形成，每克碱性无机物加入到1～100ml长烷基链有机酸和1～100ml极性有机溶剂中。
19.作为优选，锌盐、钴盐、镍盐、铬盐、锰盐中的一种或多种和铁盐的溶液与碱性无机物、长烷基链有机酸和极性有机溶剂形成的溶液的体积比为1：10～10：1。
20.作为优选，将锌盐、钴盐、镍盐、铬盐、锰盐中的一种或多种和铁盐的溶液与碱性无机物、长烷基链有机酸和极性有机溶剂形成的溶液混合，进行反应，反应温度为100～500℃，反应时间为1～50h。
21.作为优选，反应时间为1、2、3、5、8、10h中的任意一个值或任意两个值之间的范围值。可选地，所述反应温度100、200、250、300、350、400、450、500℃中的任意一个值或任意两个值之间的范围值。
22.作为优选，转相包括以下步骤：将初始磁性颗粒和柠檬酸加入有机溶剂中，室温搅拌1～50h。可选地，搅拌时间为5、8、10、15、20h中的任意一个值或任意两个值之间的范围值。有机溶剂可列举为氯仿、n,n-二甲基甲酰胺、三氯甲烷、四氯化碳、甲酰胺、dmso、四氢呋喃、吡啶等。
23.通过转相反应，将纳米粒子从油相转成水相，提高纳米粒子在水中的分散性，提高纳米粒子的sers性能。
24.作为优选，所述贵金属sers生物探针由内到外依次包括贵金属材料、拉曼/荧光信号分子、生物大分子以及靶向抗体蛋白；所述磁性半导体sers生物探针由内到外依次包括磁性金属氧化物、拉曼/荧光信号分子、生物大分子以及靶向抗体蛋白。
25.作为优选，所述拉曼/荧光信号分子为同时具有荧光和拉曼性质的物质，包括但不限于ir783、ir780、3,3'-二乙基硫代三碳菁碘化物(dttc)、罗丹明、结晶紫、茜素红、耐尔蓝、亚甲基蓝中的一种或多种。
26.作为优选，所述生物大分子包括但不限于聚多巴胺、盐酸多巴胺、牛血清白蛋白、还原牛血清蛋白、聚乙二醇中的一种或多种，任何具有生物大分子特性的都可以是本发明的生物大分子。
27.作为优选，所述靶向抗体蛋白为靶向肿瘤标志物的蛋白和多肽，肿瘤标志物可列举为肿瘤细胞、蛋白标志物、外泌体、ctdna等，肿瘤可以列举为乳腺癌、肝癌、肺癌、食管癌等，上述蛋白和多肽可以列举为叶酸抗体蛋白、trop2抗体蛋白以及ge11多肽等，不限于上述蛋白和多肽，任何具有靶向肿瘤特性的都可以是本发明的靶向抗体蛋白。
28.贵金属sers生物探针和磁性半导体sers生物探针中的拉曼/荧光信号分子和生物大分子可以相同，也可以不相同；而两种探针中的靶向抗体蛋白则为同一种物质，如此，贵金属sers生物探针和磁性半导体sers生物探针可以靶向相同的肿瘤标志物。
29.本发明的另一个目的通过以下技术方案来实现：
30.所述多功能性复合生物探针的制备方法，包括以下步骤：将贵金属sers生物探针中的一种或多种与磁性半导体sers生物探针中的一种或多种以液体或固体方式混合，即得到多功能性复合生物探针。
31.本发明的另一个目的通过以下技术方案来实现：
32.所述多功能性复合生物探针在体外检测中的应用，包括以下步骤：贵金属sers生物探针中的一种或多种与磁性半导体sers生物探针中的一种或多种以液体或固体方式混合后加入到待测体系；或者贵金属sers生物探针中的一种或多种与磁性半导体sers生物探针中的一种或多种以液体或固体的方式先后加入到待测体系。
33.作为优选，所述应用还包括：将多功能性复合生物探针加入到待测体系后，多功能性复合生物探针与待测体系中的目标物结合，经过磁富集、分离，再通过拉曼光谱和/或荧光光谱检测，确定待测体系中目标物浓度。
34.拉曼光谱和/或荧光光谱检测中所使用的激发光波长为266～1064nm；优选地，激发光波长下限为266nm，上限选自325、488、514、532、633、647、785、1064nm中的任意一种；优选地，激发光波长选自266nm、325nm、488nm、514nm、532nm、633nm、647nm、785nm、1064nm中的任意一种。
35.本发明的另一个目的通过以下技术方案来实现：
36.一种体外检测器材，包括上述多功能性复合生物探针。所述体外检测器材可列举为传感器、检测器、光谱响应器等。
37.与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
38.(1)本发明的多功能性复合生物探针中，贵金属sers生物探针具有检测灵敏度高
的特性，磁性半导体sers生物探针具有磁富集特性，贵金属sers生物探针和磁性半导体sers生物探针靶向肿瘤细胞，通过磁场可实现纳米探针与肿瘤细胞的快速富集，有利于提高肿瘤细胞的检测灵敏性和准确性；
39.(2)贵金属sers生物探针与磁性半导体sers生物探针，都可以提供拉曼光谱信号和荧光光谱信号，通过双信号分子模式提高检测体系准确度；同时所述磁性半导体sers生物探针还具备提供磁共振造影成像的能力，因此，贵金属sers生物探针与磁性半导体sers生物探针复合使用，可以实现拉曼、荧光和核磁共振多模态应用；
40.(3)贵金属sers生物探针与磁性半导体sers生物探针靶向识别同一个肿瘤细胞，通过拉曼光谱和/或荧光光谱检测，待检细胞同时出现两个及两个以上拉曼和/或荧光信号，可确保肿瘤检测的准确率，并排除外周血样中的血细胞假阳性干扰；
41.(4)本发明提供的贵金属sers生物探针和磁性半导体sers生物探针以简单的混合方式加入待测体系进行反应，避免了通过复杂化学合成得到贵金属-半导体复合材料，具有工艺简单、设备简化、成本低且安全可行的特点；
42.(5)本发明通过最简单有效的方式，实现了贵金属sers生物探针和磁性半导体sers生物探针的功能叠加，提高了检测方法的灵敏度、准确度以及赋予检测方法磁富集特性；
43.(6)本发明磁性半导体sers生物探针中的磁性金属氧化物优选为zn、co、ni、cr、mn中的一种或多种与fe的氧化物材料，该磁性金属氧化物具有更好的sers增强效应。
附图说明
44.图1为实施例1制备的贵金属金纳米材料的tem图谱；
45.图2为实施例2制备的贵金属金纳米材料的tem图谱；
46.图3为实施例3制备的贵金属金纳米材料的tem图谱；
47.图4为实施例4制备的zn
0.2
fe
2.8
o4磁性纳米粒子的tem图谱；
48.图5为实施例5制备的zn
0.2
fe
2.8
o4磁性纳米粒子的tem图谱；
49.图6为实施例6制备的zn
0.2
fe
2.8
o4磁性纳米粒子的tem图谱；
50.图7为实施例1的金纳米粒子上4mba分子对应的表面增强拉曼光谱图和实施例5的zn
0.2
fe
2.8
o4磁性纳米粒子上结晶紫分子对应的表面增强拉曼光谱图；图8为实施例5的磁性纳米粒子表面修饰发光指示剂cck-8的荧光光谱图和实施例1的贵金属金纳米材料表面修饰发光指示剂cck-8的荧光光谱图；
[0051][0052]
图9为实施例5的磁性纳米粒子和对比例1的fe3o4磁性纳米粒子对亚甲基蓝分子的sers光谱图；
[0053]
图10为实施例8的zn
0.2
fe
2.8o4-茜素红-pda-trop2抗体蛋白纳米探针对肿瘤细胞的富集捕获图；
[0054]
图11为实施例7的au-ir783-rbsa-trop2抗体蛋白纳米探针和实施例8的zn
0.2
fe
2.8o4-茜素红-pda-trop2抗体蛋白纳米探针与mcf7乳腺癌细胞结合后的sers光谱图。
具体实施方式
[0055]
下面通过具体实施例和附图，对本发明的技术方案作进一步描述说明，应当理解的是，此处所描述的具体实施例仅用于帮助理解本发明，不用于本发明的具体限制。且本文中所使用的附图，仅仅是为了更好地说明本发明所公开内容，对保护范围并不具有限制作用。如果无特殊说明，本发明的实施例中所采用的原料均为本领域常用的原料，实施例中所采用的方法，均为本领域的常规方法。
[0056]
实施例1
[0057]
制备3nm贵金属金纳米材料
[0058]
2ml 5mm haucl4·
4h2o溶液加入7.85ml水中，室温搅拌均匀，逐滴加入0.15ml 0.1m谷胱甘肽继续搅拌10min，70℃避光水浴24h；然后静置4天，自然冷却后离心洗样，用水和乙醇各洗3遍，最后放入70℃烘箱中干燥12h，制备得到3nm金纳米材料，如图1所示。
[0059]
实施例2
[0060]
制备10nm贵金属金纳米材料
[0061]
1ml 50mm haucl4·
4h2o溶液和49ml水加入圆底烧瓶中，搅拌加热至沸腾，快速加入10ml 1％柠檬酸钠水溶液，继续加热沸腾10min，停止加热冷却至室温；然后静置4天，自然冷却后离心洗样，用水和乙醇各洗3遍，最后放入70℃烘箱中干燥12h，制备得到10nm金纳米材料，如图2所示。
[0062]
实施例3
[0063]
制备40nm贵金属金纳米材料
[0064]
1ml 50mm haucl4·
4h2o溶液和49ml水加入圆底烧瓶中，搅拌加热至沸腾，快速加入2ml 1％柠檬酸钠水溶液，继续加热沸腾10min，停止加热冷却至室温；然后静置4天，自然冷却后离心洗样，用水和乙醇各洗3遍，最后放入70℃烘箱中干燥12h，制备得到40nm金纳米材料，如图3所示。
[0065]
实施例4
[0066]
制备4nm zn
0.2
fe
2.8
o4磁性纳米粒子
[0067]
把1.73mmol六水硫酸亚铁铵和0.534mmol七水合硫酸锌加入20ml超纯水中，配置成溶液。把1g氢氧化钠加入到油酸(10ml)和乙醇(10ml)的混合液中，搅拌至完全溶解后，再加入20ml硫酸亚铁铵和硫酸锌溶液，待混合液颜色变为棕红色后，将其转移至50ml反应釜中，230℃加热8h。待反应釜冷却后取出，乙醇离心洗涤三次，并分散在20ml环己烷中制得所需油溶性磁性纳米粒子。而后将2g柠檬酸和20ml油溶性磁性纳米粒子加入30ml氯仿/dmf(v/v:1/1)的混合溶液中，搅拌12h，乙醇离心洗涤三次，并分散在20ml水中制得所需水溶性磁性纳米粒子，静置4天，自然冷却后离心洗样，用水和乙醇各洗3遍，最后放入70℃烘箱中干燥12h，制备得到4nm zn
0.2
fe
2.8
o4磁性纳米粒子，如图4所示。
[0068]
实施例5
[0069]
制备7nm zn
0.2
fe
2.8
o4磁性纳米粒子
[0070]
把1.73mmol六水硫酸亚铁铵和0.534mmol七水合硫酸锌加入20ml超纯水中，配置成溶液。把1g氢氧化钠加入到油酸(10ml)和乙醇(10ml)的混合液中，搅拌至完全溶解后，再加入20ml硫酸亚铁铵和硫酸锌溶液，待混合液颜色变为棕红色后，将其转移至50ml反应釜中，230℃加热16h。待反应釜冷却后取出，乙醇离心洗涤三次，并分散在20ml环己烷中制得
所需油溶性磁性纳米粒子。而后将2g柠檬酸和20ml油溶性磁性纳米粒子加入30ml氯仿/dmf(v/v:1/1)的混合溶液中，搅拌12h，乙醇离心洗涤三次，并分散在20ml水中制得所需水溶性磁性纳米粒子，静置4天，自然冷却后离心洗样，用水和乙醇各洗3遍，最后放入70℃烘箱中干燥12h，制备得到7nm zn
0.2
fe
2.8
o4磁性纳米粒子，如图5所示。
[0071]
实施例6
[0072]
制备10nm zn
0.2
fe
2.8
o4磁性纳米粒子
[0073]
把1.73mmol六水硫酸亚铁铵和0.534mmol七水合硫酸锌加入20ml超纯水中，配置成溶液。把1g氢氧化钠加入到油酸(10ml)和乙醇(10ml)的混合液中，搅拌至完全溶解后，再加入20ml硫酸亚铁铵和硫酸锌溶液，待混合液颜色变为棕红色后，将其转移至50ml反应釜中，230℃加热24h。待反应釜冷却后取出，乙醇离心洗涤三次，并分散在20ml环己烷中制得所需油溶性磁性纳米粒子。而后将2g柠檬酸和20ml油溶性磁性纳米粒子加入30ml氯仿/dmf(v/v:1/1)的混合溶液中，搅拌12h，乙醇离心洗涤三次，并分散在20ml水中制得所需水溶性磁性纳米粒子，静置4天，自然冷却后离心洗样，用水和乙醇各洗3遍，最后放入70℃烘箱中干燥12h，制备得到10nm zn
0.2
fe
2.8
o4磁性纳米粒子，如图6所示。
[0074]
将实施例1的贵金属金纳米材料和实施例5的磁性纳米粒子作为sers基底在633nm激发波长作用下，分别进行不同浓度对羧基苯硫酚(4mba)、结晶紫分子(cv)的sers光谱检测，结果如图7所示，实施例1的贵金属金纳米材料对低浓度的4mba分子具有优异的sers检测成像性能，实施例5的磁性纳米粒子对低浓度的结晶紫分子具有优异的sers检测成像性能。
[0075]
分别在实施例1的贵金属金纳米材料和实施例5的磁性纳米粒子表面修饰发光指示剂cck-8表征，可以得到材料的荧光发光图，图8中(a)为实施例5的磁性纳米粒子表面修饰发光指示剂cck-8的荧光光谱图，图8中(b)为实施例1的贵金属金纳米材料表面修饰发光指示剂cck-8的荧光光谱图。
[0076]
对比例1
[0077]
fe3o4磁性纳米粒子的制备
[0078]
把2mmol六水硫酸亚铁铵加入20ml超纯水中，配置成溶液。把1g氢氧化钠加入到10ml油酸和10ml乙醇的混合液中，搅拌至完全溶解后，再加入20ml硫酸亚铁铵溶液，待混合液颜色变为棕红色后，将其转移至50ml反应釜中，230℃加热16h。待反应釜冷却后取出，乙醇离心洗涤三次，并分散在20ml环己烷中制得所需油溶性磁性纳米粒子。而后将2g柠檬酸和20ml油溶性磁性纳米粒子加入30ml氯仿/dmf(v/v:1/1)的混合溶液中，搅拌12h，乙醇离心洗涤三次，并分散在20ml水中制得所需水溶性磁性纳米粒子，静置4天，自然冷却后离心洗样，用水和乙醇各洗3遍，最后放入70℃烘箱中干燥12h，制备得到fe3o4磁性纳米粒子。
[0079]
比较实施例5的磁性纳米粒子和对比例1的fe3o4磁性纳米粒子的sers检测成像能力，作为sers基底在532nm激发波长作用下，分别对浓度为1
×
10-5
mol/l的亚甲基蓝分子进行sers光谱检测，生成sers光谱图，如图9所示，可以看出，经过zn掺杂后的纳米粒子具有更好的sers增强效应，可能是因为zn掺杂后会提供更多的轨道能级，有利于材料与分子的电荷转移效应，从而提升sers效应。基于zn
0.2
fe
2.8
o4磁性纳米粒子形成的磁性半导体sers生物探针和贵金属sers生物探针一起应用于体外检测，具有更高的检测灵敏度和更好的准确度。
pda纳米粒子，倒掉上清，然后加入4ml tris-hcl溶液(10mm，ph＝8.5)，之后加入40μg trop2抗体蛋白，室温下搅拌12h，pbs清洗3遍，最终分散于4ml pbs溶液中，得到zn
0.2
fe
2.8o4-茜素红-pda-40μg trop2抗体蛋白溶液。
[0100]
将实施例8的zn
0.2
fe
2.8o4-茜素红-pda-40μg trop2抗体蛋白纳米探针与肿瘤细胞共孵育，结合循环肿瘤细胞检测设备仪器的磁富集模块进行磁富集，富集效果如图10所示，肿瘤细胞与zn
0.2
fe
2.8
o4纳米探针具有优异的结合性，经过磁富集后，肿瘤细胞得到富集，滤出废液中无肿瘤细胞，表明zn
0.2
fe
2.8
o4纳米探针具有对肿瘤细胞良好的富集捕获能力。
[0101]
将实施例7的au-ir783-rbsa-trop2抗体蛋白纳米探针单独与mcf7乳腺癌细胞共孵育，然后进行sers光谱检测，sers光谱图如图11所示；实施例8的zn
0.2
fe
2.8o4-茜素红-pda-trop2抗体蛋白纳米探针单独与mcf7乳腺癌细胞共孵育，然后进行sers光谱检测，sers光谱图如图11所示；将实施例7的au-ir783-rbsa-trop2抗体蛋白纳米探针和实施例8的zn
0.2
fe
2.8o4-茜素红-pda-trop2抗体蛋白纳米探针一起与mcf7乳腺癌细胞共孵育，磁富集、分离，然后进行sers光谱检测，sers光谱图如图11所示。
[0102]
从图11中可以看出，只采用单一探针检测癌细胞，sers信号峰少，且不稳定，均一性差；而采用au-ir783-rbsa-trop2抗体蛋白纳米探针和实施例8的zn
0.2
fe
2.8o4-茜素红-pda-trop2抗体蛋白纳米探针共同检测癌细胞，sers信号峰多，且信号稳定，有利于提高检测灵敏度和准确度。
[0103]
本发明的各方面、实施例、特征应视为在所有方面为说明性的且不限制本发明，本发明的范围仅由权利要求书界定。在不背离所主张的本发明的精神及范围的情况下，所属领域的技术人员将明了其它实施例、修改及使用。
[0104]
在本发明的制备方法中，各步骤的次序并不限于所列举的次序，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，对各步骤的先后变化也在本发明的保护范围之内。此外，可同时进行两个或两个以上步骤或动作。
[0105]
最后应说明的是，本文中所描述的具体实施例仅仅是对本发明作举例说明，而并非对本发明的实施方式进行限定。本发明所属技术领域的技术人员可以对所描述的具体实施例做各种各样的修改或补充或采用类似的方式替代，这里无需也无法对所有的实施方式予以全例。而这些属于本发明的实质精神所引申出的显而易见的变化或变动仍属于本发明的保护范围，把它们解释成任何一种附加的限制都是与本发明精神相违背的。

技术特征：
1.一种多功能性复合生物探针，其特征在于，包括贵金属sers生物探针中的一种或多种以及磁性半导体sers生物探针中的一种或多种。2.根据权利要求1所述的一种多功能性复合生物探针，其特征在于，所述贵金属sers生物探针的粒径为0.1nm～10000nm，所述磁性半导体sers生物探针的粒径为0.1nm～10000nm。3.根据权利要求1所述的一种多功能性复合生物探针，其特征在于，所述贵金属sers生物探针包括具有sers性能的贵金属材料，所述贵金属材料包括金、银、钯、铜和包含金、银、钯或铜的复合材料中的一种或多种；所述磁性半导体sers生物探针包括具有sers性能的磁性金属氧化物，所述磁性金属氧化物包括fe、zn、co、ni、cr、mn中的一种或多种对应的氧化物材料中的一种或多种。4.根据权利要求3所述的一种多功能性复合生物探针，其特征在于，所述磁性金属氧化物为zn、co、ni、cr、mn中的一种或多种与fe的氧化物材料。5.根据权利要求3或4所述的一种多功能性复合生物探针，其特征在于，所述磁性金属氧化物为zn
x
fe
3-x
o4，其中0＜x＜3。6.根据权利要求1所述的一种多功能性复合生物探针，其特征在于，所述贵金属sers生物探针由内到外依次包括贵金属材料、拉曼/荧光信号分子、生物大分子以及靶向抗体蛋白；所述磁性半导体sers生物探针由内到外依次包括磁性金属氧化物、拉曼/荧光信号分子、生物大分子以及靶向抗体蛋白。7.如权利要求1所述的一种多功能性复合生物探针的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将贵金属sers生物探针中的一种或多种与磁性半导体sers生物探针中的一种或多种以液体或固体方式混合，即得到多功能性复合生物探针。8.如权利要求1所述的一种多功能性复合生物探针在体外检测中的应用，其特征在于，包括以下步骤：贵金属sers生物探针中的一种或多种与磁性半导体sers生物探针中的一种或多种以液体或固体方式混合后加入到待测体系；或者贵金属sers生物探针中的一种或多种与磁性半导体sers生物探针中的一种或多种以液体或固体的方式先后加入到待测体系。9.根据权利要求8所述的一种多功能性复合生物探针在体外检测中的应用，其特征在于，还包括以下步骤：将多功能性复合生物探针加入待测体系后，多功能性复合生物探针与待测体系中的目标物结合，经过磁富集、分离，再通过拉曼光谱和/或荧光光谱检测，确定待测体系中目标物浓度。10.一种体外检测器材，其特征在于，包括权利要求1所述的一种多功能性复合生物探针。

技术总结
本发明属于生命科学技术领域，涉及一种多功能性复合生物探针及其制备方法和应用。所述多功能性复合生物探针，包括贵金属SERS生物探针中的一种或多种以及磁性半导体SERS生物探针中的一种或多种。本发明通过最简单有效的方式，实现了贵金属SERS生物探针和磁性半导体SERS生物探针的功能叠加，提高了检测方法的灵敏度、准确度以及赋予检测方法磁富集特性。准确度以及赋予检测方法磁富集特性。准确度以及赋予检测方法磁富集特性。


技术研发人员：吴爱国 林杰 张定虎 邵国良 武小侠
受保护的技术使用者：浙江省肿瘤医院 宁波慈溪生物医学工程研究所
技术研发日：2022.12.13
技术公布日：2023/7/19