一种制备去氧胆酸中间体和去氧胆酸的方法与流程

1.本发明属于药物化学领域，具体涉及一种制备去氧胆酸及其中间体的方法。


背景技术：

2.去氧胆酸(式i)是一种c-7上缺羟基的胆汁酸，是胆酸失去一个氧原子衍生而得的一种游离胆汁酸。去氧胆酸具有较强的表面活性，局部注射后能精准破坏脂肪细胞的细胞膜，使脂肪细胞破裂，被巨噬细胞吞噬，而皮肤和肌肉等组织细胞因为细胞膜表面含有大量蛋白质，则不会被裂解，从而使小范围局部皮下脂肪溶解减少。2015年，凯瑟拉(kythera)公司开发的脱氧胆酸注射液被美国食品药品监督管理局批准作为可用于注射溶脂的药物上市，商品名为kybella，用于改善成人中度至重度颏下脂肪的凸起或丰满(双下巴)。
[0003][0004]
目前去氧胆酸主要来源于动物躯体，虽然成本较低，但存在可能含有动物病原体和其他有害因子的危险。现有技术中已公开了化学合成方式制备去氧胆酸的方法。
[0005]
cn106083969a公开了一种去氧胆酸的全合成方法，如下方案1所示。该方法在合成中间体1.10的过程中使用三氧化铬作为氧化剂。该氧化剂具有高毒性、高污染性和致癌性。
[0006][0007]
方案1
[0008]
cn107011401公开了一种制备去氧胆酸的方法，合成路线如方案2所示。该方法在合成中间体2.24中采用过氧化叔丁醇(tbhp)和次氯酸钠的氧化体系，避免了三氧化铬的应用。在制备化合物2.24过程中使用了氯铬酸吡啶盐(pcc)；制备2.33过程中会生成副产物，收率较低。为了提高反应收率，需要用氯铬酸吡啶盐对副产物2.34进行进一步氧化得到2.33。
[0009][0010]
方案2
[0011]
cn106146593公开了一种制备去氧胆酸的方法，合成路线如方案3所示。在制备中间体3.4和3.5的过程中，同样需要使用氯铬酸吡啶盐作为氧化剂，提高副产物向目标中间体的转化，以提高这两个步骤的收率。
[0012][0013][0014]
方案3
[0015]
现有技术工艺中使用的三氧化铬、氯铬酸吡啶盐均为含金属铬类氧化剂。铬元素是最具毒性的污染物之一，具有致癌、致突变性，对人呼吸道有刺激和腐蚀作用，可引起鼻炎、结核病、支气管炎等病症，还可诱发肺癌和鼻咽癌等。工业含铬废气和废水的排放是人
为铬污染的主要来源，对此，我国先后发布《关于防治铬化合物生产建设中环境污染的若干规定》，《铬及其化合物工业污染物排放标准》、《关于加强含铬危险废物污染防治的通知》，并将含铬废物纳入《国家危险废物名录》，对铬污染物排放有严格的指标控制标准。
[0016]
企业在排放含铬废气和废水时需要经过复杂特殊的处理工序，例如，通常采用萃取洗涤的方式去除含铬成分，需耗费大量的水资源；或者通过化学沉淀法处理，产生的含铬固体废物会造成二次污染，需委托有危险固体废物处置资质的企业进行再处理，不仅利用价值低，运输和储存不方便，还需支付高昂的污泥处置费用。因此，不管从环境保护和生产成本方面考虑，有必要开发一种不使用含铬氧化剂的方法。


技术实现要素：

[0017]
本发明的目的是克服上述问题，提供一种甾体类衍生物的氧化方法，尤其适用于制备去氧胆酸中间体的方法，该方法不需要使用含铬氧化剂，对环境友好、生产成本低、收率高、适合工业化应用。
[0018]
本发明提供一种制备化合物n的方法，包括：化合物m经氧化反应得到化合物n，反应式如下：
[0019][0020]
其中：
[0021]
p为羟基保护基团，可选自苄基、对甲氧基苄基、苯甲酰基、乙酰基、甲酰基和苄氧羰基；优选地，p为苯甲酰基或乙酰基；
[0022]
甾体环中的表示单键或双键；优选地，在氧化反应中的单双键类型不发生改变；任选地，甾体环上具有或不具有取代基；
[0023]
r为烷基，优选为c1-c4烷基，例如甲基、乙基、丙基、丁基等。
[0024]
n表示亚甲基的个数，n为1-5的自然数，例如1、2、3、4、5；任选地，所述亚甲基上具有或不具有取代基，例如取代基可以是烷基，优选为c1-c4烷基；
[0025]
所述氧化反应的氧化剂选自碘苯二乙酸、2-碘酰基苯甲酸(ibx)和戴斯马丁试剂(dmp)。优选地，所述氧化剂为2-碘酰基苯甲酸(ibx)或戴斯马丁试剂(dmp)。
[0026]
在一些实施方案中，化合物m、n分别如下式m1、n1所示：
[0027][0028]
其中，结构式中p、r、的定义如上所述。
[0029]
在另一些实施方案中，化合物m、n分别如下式m2、n2所示：
[0030][0031]
其中，结构式中p、r、的定义同上。
[0032]
在另一些实施方案中，化合物m、n分别如下式m3、n3所示：
[0033][0034]
其中，结构式中p、的定义同上。
[0035]
在一些实施方案中，所述氧化反应的氧化剂与化合物m的摩尔比可以为(0.5-10):1，优选为(0.8-5):1，更优选为(1-3):1。
[0036]
在一些实施方案中，所述氧化反应的反应溶剂包括偶极非质子溶剂，例如二甲基亚砜(dmso)、二甲基甲酰胺(dmf)、n-甲基吡咯烷酮(nmp)、二甲基乙酰胺(dma)、乙腈等。
[0037]
在一种示范性实施方案中，提供了一种制备去氧胆酸中间体化合物ⅳ的方法，包括将化合物
ⅳ‑
a经氧化反应得到化合物ⅳ；
[0038]
反应式如下：
[0039][0040]
其中，p为羟基保护基团，例如p选自苄基、对甲氧基苄基、苯甲酰基、乙酰基、甲酰基和苄氧羰基；优选地，p为苯甲酰基或乙酰基；
[0041]
所述氧化反应的氧化剂选自2-碘酰基苯甲酸和戴斯马丁试剂。
[0042]
在一些实施方案中，化合物
ⅳ‑
a与氧化剂的摩尔比可以为(0.5-10):1，优选为(0.8-5):1，更优选为(1-3):1。
[0043]
在一些实施方案中，所述氧化反应的反应溶剂包括偶极非质子溶剂，例如二甲基亚砜(dmso)、二甲基甲酰胺(dmf)、n-甲基吡咯烷酮(nmp)、二甲基乙酰胺(dma)、乙腈等。
[0044]
在另一种示范性实施方案中，提供了一种去氧胆酸中间体化合物v的制备方法，包括将化合物v-b经氧化反应得到化合物v；
[0045]
反应式如下：
[0046][0047]
p为羟基保护基团，例如p选自苄基、对甲氧基苄基、苯甲酰基、乙酰基、甲酰基、苄氧羰基中的一种；更优选地，p为苯甲酰基或乙酰基；
[0048]
所述氧化反应的氧化剂选自2-碘酰基苯甲酸和戴斯马丁试剂。
[0049]
在一些实施方案中，氧化剂与化合物v-b的摩尔比可以为(0.5-10):1，优选为(0.8-5):1，更优选为(1-3):1。
[0050]
在一些实施方案中，所述氧化反应的反应溶剂包括偶极非质子溶剂，例如二甲基亚砜(dmso)、二甲基甲酰胺(dmf)、n-甲基吡咯烷酮(nmp)、二甲基乙酰胺(dma)、乙腈等。
[0051]
本发明进一步提供一种制备去氧胆酸的方法，包括以下步骤：
[0052]
1)化合物ⅱ经氢化反应，得到化合物ⅲ；
[0053]
2)化合物ⅲ经第一氧化反应，得到含有化合物ⅳ与化合物
ⅳ‑
a混合物；该混合物经第二氧化反应，得到化合物ⅳ；
[0054]
3)化合物ⅳ经第一氢化反应，得到含有化合物
ⅴ
、
ⅴ‑
a及
ⅴ‑
b的混合物；该混合物依次发生氧化反应、第二氢化反应，得到化合物
ⅴ
；
[0055]
4)化合物
ⅴ
经还原反应，得到化合物ⅵ；
[0056]
5)化合物ⅵ经脱保护和水解反应，得到去氧胆酸i或其盐；
[0057]
反应式如下：
[0058][0059]
其中，p为羟基保护基团；可选自苄基、对甲氧基苄基、乙酰基、苯甲酰基、甲酰基和苄氧羰基；优选地，p为苯甲酰基或乙酰基。
[0060]
在一些实施方案中，步骤1)中，氢化反应在pd/c或pto2催化剂存在下进行；优选pd/c催化剂。
[0061]
在一些实施方案中，步骤2)中，第一氧化反应在氧化剂和共氧化剂存在下进行。所述氧化剂优选为过氧化氢叔丁醇(tbhp)。所述共氧化剂选自次氯酸水溶液、pd/c、pd(ococf3)2、pd(oac)2和cui；优选为次氯酸水溶液或cui；更优选为cui。
[0062]
在一些实施方案中，步骤2)中，第二氧化反应使用的氧化剂选自2-碘酰基苯甲酸和戴斯马丁试剂。
[0063]
在一些实施方案中，步骤2)中，第二氧化反应使用的氧化剂与化合物
ⅳ‑
a的摩尔比可以为(0.8-5):1，例如(1-3):1，例如1:1、1.5:1、2:1等。
[0064]
在一些实施方案中，步骤2)中，第二氧化反应的反应溶剂包括偶极非质子溶剂，例如二甲基亚砜(dmso)、二甲基甲酰胺(dmf)、n-甲基吡咯烷酮(nmp)、二甲基乙酰胺(dma)、乙腈等。
[0065]
在一些实施方案中，步骤3)中，化合物ⅳ经第一氢化反应，得到含有化合物
ⅴ
、
ⅴ‑
a及
ⅴ‑
b的混合物；所述含化合物
ⅴ
、
ⅴ‑
a及
ⅴ‑
b的混合物经氧化反应，得到基本含化合物ⅳ和
ⅴ
的混合物；所述基本含化合物ⅳ和
ⅴ
的混合物经第二氢化反应，得到化合物
ⅴ
。
[0066]
在一些实施方案中，步骤3)中，第一氢化反应和第二氢化反应在pd/c或pto2催化剂存在下进行；优选pd/c催化剂。
[0067]
在一些实施方案中，步骤3)中，氧化反应使用的氧化剂选自2-碘酰基苯甲酸和戴斯马丁试剂。
[0068]
在一些实施方案中，步骤3)中，氧化反应的反应溶剂包括偶极非质子溶剂，例如二甲基亚砜(dmso)、二甲基甲酰胺(dmf)、n-甲基吡咯烷酮(nmp)、二甲基乙酰胺(dma)、乙腈等。
[0069]
在一些实施方案中，步骤3)中，氧化剂与化合物
ⅴ‑
a及
ⅴ‑
b均发生氧化反应。氧化剂与化合物
ⅴ‑
a及
ⅴ‑
b总和的摩尔比为(0.5-10):1，优选地为(0.8-5):1，例如(1-3):1。
[0070]
在一些实施方案中，步骤4)中，还原反应使用的还原剂为三叔丁氧基氢化铝锂(lial(otbu)3)。
[0071]
在一些实施方案中，步骤5)中，脱保护和水解反应可按照已知的方法进行。例如脱保护和水解条件包含使化合物ⅵ与碱土金属氢氧化物、碱土金属醇盐或其混合物反应。在某些实施方案中，水解条件包括酸处理以获得去氧胆酸。在某些实施方案中，省略酸处理已获得相应的盐。碱土金属氢氧化物可以为氢氧化锂(lioh)或氢氧化钠(naoh)。
[0072]
本发明的方法尝试采用新的氧化剂(例如ibx和dmp)高效完成了氧化反应，避免使用含铬氧化剂对环境和人造成的危害，也无需花费大量成本处理含铬废液，显著降低了生产成本。该方法可用于制备去氧胆酸的中间体化合物ⅳ和中间体化合物
ⅴ
，环境友好、后处理方便、成本低、收率高、适合工业化生产。
具体实施方式
[0073]
下面通过实施例对本发明进行详细说明。应该理解的是，实施例中的方法仅是举例说明目的，不构成对本发明的任何限制。如无特别说明，实施例中所用的材料为市售可得。如无特别说明，所用的实验方法均为常规方法。实施例中通过hplc监测反应的完成情况，采用面积归一化法检测得到化合物的质量百分比。如无特别说明，实施例中所使用溶液的百分比均为所含溶质的质量百分比。
[0074]
本发明中的甾体结构骨架编号遵循一般规定：
[0075][0076]
除非另有说明，否则骨架仅表示碳原子的位置。如未特别标明，载体结构骨架上的取代基团可包括r构型、s构型，或其混合物。
[0077]
本发明中的“pd/c”催化剂是指pd荷载于c上的一类催化剂，可用于催化氢化反应。“pd/c”催化剂可以不含水或含有一定量的水。各种规格的pd/c催化剂(例如5％pd、10％pd)等均可用于本发明。催化剂用量可按照常规方法添加。
[0078]
本发明中，“羟基保护基p”是指有机合成领域熟知的适合用于阻止羟基副反应的保护基。例如，许多保护基团阐述于t.w.格林(t.w.greene)和g.m.伍茨(g.m.wuts)，有机合成中的保护基团(protecting groupsin organic synthesis)，第3版，威利出版社(wiley)，纽约，1999和其中所引用参考文献中。代表性的羟基保护基包括但不限于：烷基(如甲基、乙基和叔丁基)；酰基(如甲酰基、乙酰基、苯甲酰基)；芳基甲基(如苄基bn、对甲氧基苄基pmb、9-芴基甲基fm、二苯基甲基dpm；甲硅烷基(如三甲基甲硅烷基tms、叔丁基二甲基甲硅烷基tbs)等。优选地，羟基保护基为乙酰基或苯甲酰基。
[0079]
本发明的“烷基”表示饱和单价烃基，优选c1-c4烷基，例如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基等。
[0080]
本发明中去氧胆酸的中间体化合物ⅳ可以通过化合物ii或化合物ⅲ作为起始物料制备。化合物ii、化合物ⅲ的制备方法已公开，例如参见专利申请cn106146593a、cn101711254a、cn107011401a、cn102512035a、cn103906517a或cn114805463a等。作为示范例，以下实施例中的化合物iia参照cn106146593a的方法制备。化合物ⅱb参照cn101711254a的方法制备。
[0081]
实施例1：化合物ⅲa的合成
[0082][0083]
向反应釜中加入化合物ⅱa(50g，0.1mol)，四氢呋喃(500ml，10v)，和10％pd/c(50％wet，2.5g，5％wt)后，依次进行氮气置换和氢气置换，在温度25
±
10℃，氢气压力1.2mpa条件下反应24小时，经hplc监测确定反应完成(化合物ⅱa《1％)。将反应釜进行氮气置换后，反应液过滤，滤液减压除去溶剂，加入乙腈(150ml，3v)加热溶清，降温至-5
±
5℃，搅拌6小时，过滤，用预冷至-15
±
5℃的乙腈(25ml，0.5v)洗涤，得到化合物ⅲa 47.2g，收率94.0％，hplc纯度99.5％。
[0084]1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.03(m,2h),7.51(t,j＝7.4hz,1h),7.42(m,2h),5.36(m,
1h),4.97(m,1h),3.67(s,3h),2.34-2.32(m,1h),2.23-2.21(m,1h),2.15-1.54(m,13h),1.54-1.06(m,10h),1.10(s,3h),0.94(d,j＝6.4hz,3h),0.59(s,3h).
13
cnmr(400mhz,dmso)δ174.2(1c,c
24
),165.6(1c,c
26
),140.2(1c,c9),133.7(1c,c
30
),130.5(1c,c
27
),129.5(2c,c
28
,c
32
),129.1(2c,c
29
,c
31
),119.5(1c,c
11
),75.2(1c,c3),55.9(1c,c
17
),53.2(1c,c
14
),51.7(1c,c
25
),41.9,41.5,40.9,38.7,36.4,35.2,35.1,33.9,31.0,30.8,29.8,28.2,28.0,27.0,26.7,25.3(1c,c
21
),18.2(1c,c
19
),12.0(1c,c
18
).质谱(es(+))测得本品的[m+nh4]
+
峰的质荷比为510.6.
[0085]
实施例2：化合物ⅲa的合成
[0086]
向反应釜中加入化合物ⅱa(50g，0.1mol)，四氢呋喃(500ml，10v)，和10％pd/c(50％wet.，2.5g，5％wt)后，将装置密封好，先后进行氮气置换和氢气置换，在温度30
±
10℃，氢气压力1.3mpa下反应16小时。经hplc监测确定反应完成(化合物ⅱa《1％)。将反应釜进行氮气置换后，反应液过滤，滤液减压除去溶剂，再加入乙腈(150ml，3v)加热溶清，降温至-5
±
5℃，搅拌5小时，过滤，用预冷至-15
±
5℃的乙腈(25ml，0.5v)洗涤，得到化合物ⅲa 47.8g，收率95.2％，hplc纯度99.3％。
[0087]
实施例3化合物ⅲa的合成
[0088]
向反应釜中加入化合物ⅱa(1.0kg，2.0mol)，四氢呋喃(5l，5v)和10％pd/c(50％wet，120g，12％wt)，依次进行氮气置换和氢气置换，然后在25
±
10℃，氢气压力1.0mpa条件下反应24小时。经hplc监测确定反应完成(化合物ⅱa《1％)。将反应釜进行氮气置换后，反应液过滤，滤液减压除去溶剂，加入乙腈(2l，2v)，继续减压蒸馏除去溶剂，随后加入乙腈(12l，12v)加热溶清，降温至-5
±
5℃，搅拌5小时，过滤，用预冷至-15
±
5℃的乙腈(500ml，0.5v)洗涤，得到化合物ⅲa963.6g，收率96.0％，hplc纯度99.4％。
[0089]
实施例4：化合物ⅲa的合成
[0090]
向反应釜中加入化合物ⅱa(1.0kg，2.0mol)，四氢呋喃(10l，10v)和10％pd/c(50％wet，120g，5％wt)后，依次进行氮气置换和氢气置换，在25
±
10℃，氢气压力1.2mpa条件下反应24小时，经hplc监测确定反应完成(化合物ⅱa《1％)。将反应釜进行氮气置换后，反应液过滤，滤液减压除去溶剂，加入乙腈(2l，2v)后，继续减压蒸馏除去溶剂，随后加入乙腈(12l，12v)加热溶清，得到化合物ⅲa的溶液，可直接用于下步反应，收率接近100％。
[0091]
实施例5：化合物ⅳa的合成
[0092][0093]
步骤1：
[0094]
在50
±
5℃，向化合物ⅲa(1.0kg，2.0mol)依次加入碘化亚铜(309g，1.6mol)、70％ tbhp水溶液(783g，6.1mol)，搅拌反应24小时，hplc监测确定反应完成(化合物ⅲa《2％)。将反应液温度降至20
±
5℃，加入乙酸乙酯(5.0l，5v)，滴加饱和亚硫酸钠溶液(5.0l，5v)，搅拌，过滤，滤液加入饱和氯化钠溶液(3.0l，3v)搅拌，分液，有机相减压浓缩，得到油状物，即化合物ⅳa和ⅳa-a的混合物878g，hplc显示化合物的百分数比例为：ⅲa/ⅳa/ⅳa-a＝1.6/59.4/32.1。化合物ⅳa的产率约50.7％。
[0095]
步骤2：
[0096]
取步骤1所得的产物(20.0g，其中含ⅳa-a约6.4g，12.6mmol)，加入二氯甲烷(200ml，10v)，在25
±
5℃加入戴斯马汀试剂(dmp，21.4g，50.5mmol，基于ⅳa-a的4.0eq)反应15小时，通过hplc监测确定反应完成(化合物ⅳa-a《2％，ⅲa/ⅳa/ⅳa-a的百分数比例为1.6/93.9/0.3)。反应液中加入8.4％碳酸氢钠溶液(140g)洗涤，分液，水相用二氯甲烷(50ml，2.5v)萃取，所得有机相用20％亚硫酸钠溶液(200g)洗涤，过滤后分液，有机相用20％氯化钠溶液(150g)洗涤，有机相浓缩除去溶剂，加入甲醇(200ml，10v)加热至60℃搅拌0.5小时，降至室温搅拌2小时，过滤，滤饼用甲醇(20ml，1v)洗涤，40℃真空干燥，得到化合物ⅳa17.1g，hplc纯度97.3％。两步合计收率为73.1％。化合物ⅳa-a向化合物ⅳa的转化率为81.7％。
[0097]1h-nmr(400m,dmso-d6)δ:7.93-7.95(d,2h),7.62-7.64(t,1h),7.48-7.52(t,3h),5.64(s,1h),4.93(s,1h),3.58(s,3h),2.41-2.49(m,1h),2.34-2.36(m,1h),2.22-2.26(m,1h),2.10-2.13(m,2h),1.86-1.88(m,2h),1.64-1.75(m,6h),1.32-1.55(m,7h),1.20(s,3h),1.24-1.26(m,2h),0.91-0.93(d,3h),0.86(s,3h).m.p.＝124.6-126.4℃.
[0098][0099]
实施例6：化合物ⅳa的合成
[0100]
步骤1：同实施例5。
[0101]
步骤2：取实施例5中步骤1所得的产物(20.0g，其中含ⅳa-a约6.4g，12.6mmol)，加入二氯甲烷(200ml，10v)，在25
±
5℃加入戴斯马汀试剂(dmp，10.7g，25.2mmol，2.0eq)，反应13小时，hplc监测确定反应完成(化合物ⅳa-a《2％，ⅲa/ⅳa/ⅳa-a的百分数比例为1.5/93.6/0.2)。反应液加入8.4％碳酸氢钠溶液(140g)搅拌洗涤，分液，水相用二氯甲烷(50ml，2.5v)萃取，所得有机相用20％亚硫酸钠溶液(200g)洗涤，过滤后分液，有机相用20％氯化钠溶液(150g)洗涤，有机相浓缩除去溶剂，加入甲醇(200ml，10v)加热至60℃搅拌0.5小时，降至室温搅拌2小时，过滤，用甲醇(20ml，1v)润洗固体，抽干，45
±
5℃真空干燥，得到化合物ⅳa17.2g，hplc纯度97.2％。两步合计收率为73.5％。化合物ⅳa-a向化合物ⅳa的转化率为83.3％。
[0102]
实施例7：化合物ⅳa的合成
[0103]
步骤1：同实施例5。
[0104]
步骤2：取实施例5中步骤1的产物(20.0g，其中含ⅳa-a约6.4g，12.6mmol)，加入乙腈(140ml，7v)，2-碘酰基苯甲酸(ibx，5.29g，18.9mmol，1.5eq)，70℃反应18小时，hplc监测确定反应完成(化合物ⅳa-a《2％，ⅲa/ⅳa/ⅳa-a的百分数比例为1.2/92.5/1.9)。反应液降至室温，加入乙酸乙酯(100ml，5v)，过滤，滤饼用乙酸乙酯(100ml，5v)润洗，滤液加入8.4％碳酸氢钠溶液(140g)搅拌洗涤，分液；水相用乙酸乙酯(50ml，2.5v)萃取，有机相用20％亚硫酸钠溶液(200g)搅拌洗涤，过滤，分液，水相用乙酸乙酯(50ml，2.5v)萃取，有机相用20％氯化钠溶液(150g)搅拌洗涤，有机相浓缩除去溶剂，加入甲醇(200ml，10v)加热至65℃搅拌1小时，降温至20℃搅拌2小时，过滤，用甲醇(20ml，1v)润洗固体，抽干，45
±
5℃真空干燥，得化合物ⅳa16.9g，hplc纯度98.2％。两步合计收率为72.2％。
[0105]
实施例8：化合物ⅳa的合成
[0106]
步骤1：同实施例5。
[0107]
步骤2：取实施例5中步骤1所得的产物(20.0g，其中含ⅳa-a约6.4g，12.6mmol)，加入乙腈(140ml，7v)，2-碘酰基苯甲酸(ibx，10.6g，37.8mmol，3.0eq)，80℃反应18小时，hplc监测确定反应完成(化合物ⅳa-a《2％，ⅲa/ⅳa/ⅳa-a的百分数比例为1.2/92.5/1.9)。反应液降至室温，加入乙酸乙酯(100ml，5v)，过滤，滤饼用乙酸乙酯(100ml，5v)润洗；滤液加入8.4％碳酸氢钠溶液(140g)搅拌洗涤，分液；水相用乙酸乙酯(50ml，2.5v)萃取，有机相用20％亚硫酸钠溶液(200g)搅拌洗涤，过滤，分液，水相用乙酸乙酯(50ml，2.5v)萃取；有机相用20％氯化钠溶液(150g)搅拌洗涤，有机相浓缩除去溶剂，加入甲醇(200ml，10v)加热至60℃搅拌1小时，降至室温搅拌2小时，过滤，用甲醇(20ml，1v)润洗固体，抽干，45
±
5℃真空干燥，得化合物ⅳa 16.7g，hplc纯度98.5％。两步合计收率为71.4％。
[0108]
实施例9：化合物ⅳa的合成
[0109]
步骤1：同实施例5。
[0110]
步骤2：取实施例5中步骤1所得的产物(20.0g，其中含ⅳa-a约6.4g，12.6mmol)，加入n，n-二甲基甲酰胺(100ml，5v)，2-碘酰基苯甲酸(ibx，7.1g，25.4mmol，2.0eq)，室温(约25
±
5℃)反应4小时，hplc监测确定反应完成(化合物ⅳa-a《2％，ⅲa/ⅳa/ⅳa-a的百分数比例为1.6/94.2/0.1)。反应液加入乙酸乙酯(200ml，10v)，水(200ml，10v)，搅拌，用滤膜过滤，得到的滤液，分液得到有机相i，滤饼用乙酸乙酯(40ml，2v)润洗，用润洗的乙酸乙酯与水相混合搅拌、分液，得到有机相ii，合并有机相。使用8.4％碳酸氢钠溶液(130g)搅拌洗涤，分液；有机相使用20％亚硫酸钠溶液(140g)搅拌洗涤，分液；有机相用20％氯化钠溶液(140g)洗涤，浓缩除去溶剂，加入甲醇(200ml，10v)加热至55℃搅拌1小时，降至室温搅拌3小时，过滤，用甲醇(20ml，1v)润洗固体，抽干，45
±
5℃真空干燥，得化合物ⅳa17.4g，hplc纯度98.4％。两步合计收率为74.5％。
[0111]
实施例10：化合物ⅳa的合成
[0112]
步骤1：同实施例5。
[0113]
步骤2：取实施例5中步骤1所得的产物(20.0g，其中含ⅳa-a约6.4g，12.6mmol)，加入二甲亚砜(100ml，5v)，2-碘酰基苯甲酸(ibx，5.3g，18.9mmol，1.5eq)，室温反应4小时，hplc监测确定反应完成(化合物ⅳa-a《2％，ⅲa/ⅳa/ⅳa-a的百分数比例为1.6/94.3/0.0)。反应液加入乙酸乙酯(200ml，10v)，水(200ml，10v)搅拌，用滤膜过滤，得到的滤液，分液得到有机相i，滤饼用乙酸乙酯(40ml，2v)润洗，用润洗的乙酸乙酯与水相混合搅拌、分液，得到有机相ii，合并有机相。使用8.4％碳酸氢钠溶液(130g)搅拌洗涤，分液；有机相使用20％亚硫酸钠溶液(140g)搅拌洗涤，分液；有机相用20％氯化钠溶液(140g)搅拌洗涤，然后有机相浓缩除去溶剂，加入甲醇(200ml，10v)加热至60
±
5℃搅拌0.5小时，降温至20
±
5℃搅拌2小时，过滤，用甲醇(20ml，1v)润洗固体，抽干，45
±
5℃真空干燥，得化合物ⅳa17.5g，hplc纯度98.1％。两步合计收率74.8％。
[0114]
实施例11：化合物ⅳa的合成
[0115]
步骤1：同实施例5。
[0116]
步骤2：取实施例5中步骤1所得的产物(20.0g，其中含ⅳa-a约6.4g，12.6mmol)，加入n，n-二甲基甲酰胺(50ml，2.5v)和乙腈(50ml，2.5v)，在60℃下加入2-碘酰基苯甲酸(ibx，4.23g，15.1mmol，1.2eq)，然后于70℃反应12小时，hplc监测确定反应完成(化合物ⅳa-a《2％，ⅲa/ⅳa/ⅳa-a的百分数比例为1.3/94.4/0.1)。反应液加入乙酸乙酯(200ml，
10v)，水(200ml，10v)搅拌，用滤膜过滤，得到的滤液，分液得到有机相i，滤饼用乙酸乙酯(40ml，2v)润洗，用润洗的乙酸乙酯与水相混合搅拌、分液，得到有机相ii，合并有机相。使用8.4％碳酸氢钠溶液(130g)搅拌洗涤，分液；有机相使用20％亚硫酸钠溶液(140g)搅拌洗涤，分液；有机相再用20％氯化钠溶液(140g)搅拌洗涤，有机相浓缩除去溶剂，加入甲醇(200ml，10v)加热至60
±
5℃搅拌0.5小时，降温至20
±
5℃搅拌2小时，过滤，用甲醇(20ml，1v)润洗固体，抽干，45
±
5℃真空干燥，得化合物ⅳa 17.2g，hplc纯度98.6％。两步合计收率73.5％。
[0117]
对照例1：化合物ⅳa的合成
[0118]
步骤1：同实施例5。
[0119]
步骤2：取实施例5中的产物(20.0g，其中含ⅳa-a约6.4g，12.6mmol)，加入二氯甲烷(200ml，10v),20％naclo水溶液(12.28g，含naclo 33.0mmol，基于ⅳa-a的2.6eq)，kbr(0.30g，2.54mmol，基于ⅳa-a的0.2eq)，tempo(0.04g，0.254mmol，基于ⅳa-a的0.02eq)，20℃反应20小时，hplc监测显示化合物ⅳa-a不反应。
[0120]
对照例2：化合物ⅳa的合成
[0121]
步骤1：同实施例5。
[0122]
步骤2：取实施例5中的产物(20.0g，其中含ⅳa-a约6.4g，12.6mmol)，加入二氯甲烷(200ml，10v),20％ naclo水溶液(140.5g，含naclo 377mmol，基于ⅳa-a的30eq)，kbr(0.30g，2.54mmol，基于ⅳa-a的0.2eq)，tempo(0.04g，0.254mmol，0.02倍当量，基于ⅳa-a的当量)，30℃反应20小时，hplc监测显示化合物ⅳa-a不反应。说明naclo不适合作为该反应的氧化剂。
[0123]
对照例3：化合物ⅳa的合成
[0124]
步骤1：同实施例5。
[0125]
步骤2：取实施例5中的产物(20.0g，其中含ⅳa-a约6.4g，12.6mmol)，加入二氯甲烷(200ml，10v)，碘苯二乙酸(pida，6.1g，18.94mmol，基于ⅳa-a的1.5eq)，30℃反应18小时，hplc监测显示化合物ⅳa-a不反应。
[0126]
对照例4：化合物ⅳa的合成
[0127]
步骤1：同实施例5。
[0128]
步骤2：取实施例5中的产物(20.0g，其中含ⅳa-a约6.4g，12.6mmol)，加入乙腈(200ml，10v)，控制体系温度50℃，加入碘苯二乙酸(pida，6.1g，18.94mmol，基于ⅳa-a的1.5eq)，80℃反应24小时，hplc监测显示ⅳa-a的含量为20％，没有达到反应终点；延长反应至62小时，hplc监测显示化合物ⅲa/ⅳa/ⅳa-a的百分数比例为：1.5/73.5/18.6。ⅳa-a几乎未发生反应。
[0129]
对照例5：化合物ⅳa的合成
[0130]
步骤1：同实施例5。
[0131]
步骤2：取实施例5中的产物(20.0g，其中含ⅳa-a约6.4g，12.6mmol)，加入二氯甲烷(200ml，10v)，碘苯二乙酸(pida，8.2g，25.4mmol，基于ⅳa-a的2.0eq)，tempo(0.4g，2.54mmol，基于ⅳa-a 0.2eq)，30℃反应18小时，hplc监测显示化合物ⅳa-a不反应。说明碘苯二乙酸不适合作为该反应的氧化剂。
[0132]
对照例6：化合物ⅳa的合成
[0133]
步骤1：同实施例5。
[0134]
步骤2：取实施例5中步骤1所得的产物(20.0g，其中含ⅳa-a约6.4g，12.6mmol)，加入二氯甲烷(200ml，10v)，在25
±
5℃加入戴斯马汀试剂(dmp，3.5g，8.2mmol，0.65eq)，反应6小时，hplc监测反应液中化合物ⅲa/ⅳa/ⅳa-a的百分数比例为1.6/76.5/18.6。可能是因为氧化剂当量不足，反应物没有完全转化。
[0135]
实施例12：化合物va的合成
[0136][0137]
在反应釜中加入化合物ⅳa(500g，987mmol)，四氢呋喃(5.0l，10v)的溶液，和10％pd/c(干，125g，25％wt)，先后进行氮气置换和氢气置换，保持体系压力在1.2mpa，将反应体系加热至55℃，搅拌24小时，hplc监测确定反应完成(化合物ⅳa≤3％，化合物ⅳa/va/(烯醇式化合物va-a+羟基化合物va-b)的百分数比例为0.015/0.71/0.23。
[0138]
将反应液过滤，滤液减压除去溶剂，加入n,n-二甲基甲酰胺(2.5l，5v)，加入2-碘酰基苯甲酸(ibx，160.3g，572.5mmol，基于va-a与va-b总量的约2.0eq)，25℃反应4小时，hplc监测确定反应完成(va-a和va-b均《1.0％)。向反应液加入乙酸乙酯(5.0l，10v)，水(5.0l，10v)搅拌，用滤膜过滤，得到的滤液，分液得到有机相i，滤饼用乙酸乙酯(40ml，2v)润洗，用润洗的乙酸乙酯与水相混合搅拌、分液，得到有机相ii，合并有机相。使用8.4％碳酸氢钠溶液(3.25kg)搅拌洗涤，分液；有机相用20％亚硫酸钠溶液(3.5kg)搅拌洗涤，分液；有机相再用20％氯化钠溶液(3.5kg)搅拌洗涤，有机相浓缩除去溶剂，尽量浓缩干。用四氢呋喃(5.0l，10v)溶解，得到溶液。
[0139]
将溶液加入反应釜中，加入之前回收的pd/c，保持体系氢气压力1.2mpa，温度55
±
10℃下，反应24小时，hplc监测确定反应完成(化合物ⅳa≤1.0％)。反应体液过滤除去pd/c，滤液减压除去溶剂，加入二氯甲烷(1.5l，3v)和甲醇(5l，10v)，减压除去二氯甲烷，保持体系为7-8v，直至二氯甲烷小于等于3％，过程有白色固体析出，降温析晶，保持体系温度在约0
±
5℃搅拌2小时，过滤，滤饼用冷甲醇(0.5l，1v)洗涤，50℃鼓风干燥，得到化合物va427g，收率85.1％，hplc纯度：96.2％，主要杂质为va-a约含3.0％，该杂质并不影响产品质量。
[0140]
化合物va数据：1h-nmr(400m,dmso-d6)δ:7.95-7.96(d,2h),7.62-7.66(m,1h),7.49-7.52(t,2h),4.84-4.89(m,1h),3.57(s,3h),2.44-2.54(m,1h),2.30-2.37(m,1h),2.17-2.25(m,1h),1.58-1.92(m,13h),1.22-1.49(m,8h),1.05-1.17(m,2h),1.02(s,3h),0.97(s,3h),0.75-0.77(m,3h).m.p.＝123.2-125.2℃.
[0141]
实施例13：化合物va的合成
[0142]
在反应釜中加入化合物ⅳa(50g，99mmol)，四氢呋喃(500ml，10v)的溶液，和10％pd/c(干，7.5g，15％wt)，先后进行氮气置换和氢气置换，保持体系压力在1.0mpa，在55
±
10℃搅拌24小时，hplc监测确定反应完成(化合物ⅳa≤3％。化合物va占70％，烯醇式化合物(va-a)和羟基化合物(va-b)占24％，化合物ⅳa占1.5％)。
[0143]
将反应液过滤，滤液减压除去溶剂，加入n,n-二甲基甲酰胺(2.5l，5v)，在25
±
5℃加入2-碘酰基苯甲酸(ibx，25.0g，89.1mmol，基于va-a与va-b总量的约3.0eq)，然后在20-30℃反应4小时，hplc监测确定反应完成(va-a和va-b均《1.0％)。向反应液加入乙酸乙酯(500ml，10v)，水(500ml，10v)，搅拌，用滤膜过滤，得到的滤液，分液得到有机相i，滤饼用乙酸乙酯(40ml，2v)润洗，用润洗的乙酸乙酯与水相混合搅拌、分液，得到有机相ii，合并有机相。使用8.4％碳酸氢钠溶液(325g)搅拌洗涤，分液；有机相用20％亚硫酸钠溶液(350g)搅拌洗涤，分液；有机相再用20％氯化钠溶液(350g)搅拌洗涤，有机相浓缩除去溶剂，尽量浓缩干。用四氢呋喃(500ml，10v)溶解，得到溶液。
[0144]
将溶液加入反应釜中，加入之前回收的pd/c，保持体系氢气压力1.0mpa，温度55
±
10℃下，反应24小时，hplc监测确定反应完成(化合物ⅳa≤1.0％)。反应体系用滤膜过滤除去pd/c，滤液减压除去溶剂，加入二氯甲烷(150ml，3v)和甲醇(500ml，10v)。减压除去二氯甲烷，保持体系7-8v，直至二氯甲烷小于等于3％，过程有白色固体析出，降温析晶，保持体系温度在-5-0℃下搅拌2小时，停止搅拌，过滤，滤饼用冷甲醇(50ml，1v)洗涤，抽干，50℃鼓风干燥，得到化合物va42.8g，收率85.3％，hplc：96.4％，主要杂质为va-a约含2.9％。
[0145]
实施例14：化合物ⅵa的合成
[0146][0147]
氮气保护下，将化合物va(200g，393mmol)溶于四氢呋喃(1.2l，6v)，在0
±
5℃滴加1mol/l三叔丁氧基氢化铝锂四氢呋喃溶液(393ml，393mmol)，滴加完毕，在该温度下继续搅拌24小时。hplc监测确定反应完成(化合物va《3％)，反应液滴加到2mol/l盐酸(600ml)中，控温在20℃以内，搅拌分液，有机相用饱和氯化钠(200ml，1v)、分液得到有机相i和水相i，水相i用四氢呋喃(400ml，2v)萃取分液得到有机相ii，有机相合并加入正庚烷(400ml，2v)，再用饱和氯化钠(400ml，2v)洗涤，分液得到有机相，然后减压除去部分溶剂，剩约1400ml(7v)体积时，如有水分液除去水，加入正庚烷(2.0l，10v)搅拌，有机相继续减压蒸馏除去四氢呋喃后(通过蒸出的液体密度与正庚烷一致来判断)，同时保证体系体积在2000ml(10v)左右溶液，在15
±
10℃下搅拌2小时，过滤，滤饼用正庚烷200ml(1v)洗涤，干燥，得化合物ⅵa172.6g，收率86.0％。
[0148]
实施例15：去氧胆酸(dca)的合成
[0149][0150]
将化合物ⅳa(102.1g，200mmol)在四氢呋喃(715ml，7v)中搅拌溶解，室温下滴加4mol/l氢氧化钠溶液(200ml，800mmol)，然后在60
±
5℃搅拌反应36小时。hplc监测反应完成后用7％的盐酸调节ph至9-10，减压除去有机溶剂，向体系加水至2042ml(20v)，乙酸乙酯洗涤(200ml*2)，用约7％盐酸调节ph至1-2，在70
±
10℃搅拌2小时，降温至20
±
10℃，过滤，
滤饼用水(510ml，5v)洗涤2-3次，干燥得到固体，在20
±
5℃将固体溶于甲基叔丁基醚(1020ml，10v)，搅拌约12小时，过滤，滤饼用甲基叔丁基醚(408ml，4v)洗涤，干燥，得到去氧胆酸72.2g，收率92.0％。
[0151]
实施例16：化合物ⅲb的合成
[0152][0153]
向反应釜中加入化合物ⅱb(50g，116.7mmol)、四氢呋喃(500ml，10v)和10％pd/c(50％wet，2.5g，5％wt)，依次进行氮气置换和氢气置换，然后在20
±
5℃，氢气压力1.5mpa下反应24小时，hplc监测显示反应完成。反应釜进行氮气置换后，将反应液过滤，滤饼用四氢呋喃(50ml，1v)洗涤，收集滤液减压除去溶剂，得到白色固体化合物ⅲb
[0154]
48.2g，收率96.0％。
[0155]
实施例17：化合物ⅳb的合成
[0156][0157]
步骤1：
[0158]
向反应釜中加入化合物ⅲb(43.1g，100mmol)和乙腈(430ml，10v)，在45-50℃下依次加入碘化亚铜(11.4g，60mmol)、70％tbhp水溶液(51.5g，400mmol)，搅拌反应8小时，hplc监测反应完成(化合物ⅲb《2％)。将反应体系温度降至20
±
5℃，随后加入乙酸乙酯(5.0l，5v)，饱和亚硫酸钠溶液(215ml，5v)，搅拌，过滤，滤液加入饱和氯化钠溶液(129ml，3v)搅拌，分液，有机相减压去除溶剂，得到油状物质ⅳb和ⅳb-a的混合物36.6g，hplc显示化合物百分数比例：ⅲb/ⅳb/ⅳb-a＝1.2/69.5/23.6。
[0159]
步骤2：
[0160]
取步骤1的混合物(18.3g，约含ⅳb-a 4.3g,9.7mmol)加入反应器中，加入n,n-二甲基甲酰胺(91.5ml，5v)，在20
±
10℃加入2-碘酰基苯甲酸(5.4g，约19.4mmol，基于ⅳb-a的2.0eq)，然后在20
±
10℃反应4小时。hplc监测确定反应完成(ⅳb-a《2％，ⅲb/ⅳb/ⅳb-a的百分比为1.1/95.1/0.0)。向反应液加入乙酸乙酯(183ml，10v)，水(183ml，10v)，搅拌，用滤膜过滤，得到的滤液，分液得到有机相i，滤饼用乙酸乙酯(36.6ml，2v)润洗，用润洗的乙酸乙酯与水相混合搅拌、分液，得到有机相ii，合并有机相。使用8.4％碳酸氢钠溶液(70g)搅拌洗涤，分液；有机相使用20％亚硫酸钠溶液(75g)搅拌洗涤，分液；有机相再用20％氯化钠溶液(75g)搅拌洗涤，有机相浓缩除去溶剂，加入甲醇(137.2ml，7.5v)加热至60
±
5℃搅拌溶解，滴加纯水(45.7ml，2.5v)，降温至10
±
5℃搅拌2小时，过滤，用30％v/v甲醇水溶液(18.3ml，1v)润洗固体，抽干，45
±
5℃真空干燥，得化合物
[0161]ⅳb 17.9g，两步总收率约80.6％。
[0162]
实施例18：化合物ⅳb的合成
[0163]
步骤1：同实施例17。
[0164]
步骤2：
[0165]
取实施例17中步骤1的产物(18.3g，约含ⅳb-a 4.3g,9.7mmol)加入到反应瓶中，加入乙腈(183ml，10v)，在50
±
10℃加入2-碘酰基苯甲酸(8.1g，29.0mmol，约3.0eq)，75
±
5℃反应24小时，hplc监测显示ⅲb/ⅳb/ⅳb-a的百分数比例为1.0/94.1/0.9，达到反应终点(
[0166]ⅳb-a《2％)。加入乙酸乙酯(183ml，10v)，水(183ml，10v)搅拌，用滤膜过滤，得到的滤液，分液得到有机相i，滤饼用乙酸乙酯(36.6ml，2v)润洗，用润洗的乙酸乙酯与水相混合搅拌、分液，得到有机相ii，合并有机相。使用8.4％碳酸氢钠溶液(70g)搅拌洗涤，分液；有机相使用20％亚硫酸钠溶液(75g)搅拌洗涤，分液；有机相再用20％氯化钠溶液(75g)搅拌洗涤，有机相浓缩除去溶剂，加入甲醇(137.2ml，7.5v)加热至60
±
5℃搅拌溶解，滴加纯水(45.7ml，2.5v)，降温至10
±
5℃搅拌2小时，过滤，用30％v/v甲醇水溶液(18.3ml，1v)润洗固体，抽干，45
±
5℃真空干燥，得化合物ⅳb 17.7g，两步总收率约79.7％。
[0167]
实施例19：化合物vb的合成
[0168][0169]
在反应釜中加入化合物ⅳb(25.0g，56.2mmol)的四氢呋喃(250ml，10v)溶液，和10％pb/c(干，5.0g，20％wt)，先后进行氮气置换和氢气置换，在压力1.3mpa、温度55
±
10℃条件下搅拌24小时，hplc监测确定反应完成(化合物ⅳb≤3％，化合物ⅳb/化合物vb/烯醇式化合物vb-a/羟基化合物vb-b的百分数比例为0.02/0.69/0.22/0.05)。
[0170]
将反应液过滤，滤液减压除去溶剂后(含vb-a和vb-b分别为12.6mmol和2.8mmol，共计约15.4mmol)，加入n,n-二甲基甲酰胺(125ml，5v)，在25
±
5℃加入2-碘酰基苯甲酸(12.9g，约46.2mmol，基于vb-a和vb-b总和的3.0eq)反应4小时，hplc监测确定反应完成(vb-a和vb-b分别《1.0％)。加入乙酸乙酯(250ml，10v)，水(250ml，10v)过滤，搅拌，用滤膜过滤，得到的滤液，分液，滤饼用乙酸乙酯(50ml，2v)润洗，用润洗液与水相混合搅拌、萃取、分液，合并有机相。使用8.4％碳酸氢钠溶液(160g)搅拌洗涤，分液；有机相使用20％亚硫酸钠溶液(165g)搅拌洗涤，分液；有机相再用20％氯化钠溶液(165g)搅拌洗涤，有机相浓缩除去溶剂，尽量浓缩干。用四氢呋喃(250ml，10v)溶解，得到溶液。
[0171]
将溶液加入反应釜中，加入10％/c(干，2.5g，10％wt)，在55
±
10℃，氢气压力1.3mpa下反应24小时，hplc监测反应完成(化合物ⅳb≤1.0％)。将反应液过滤除去pd/c，滤液减压除去溶剂，加入甲醇(150ml，6v)，加热溶清，滴加纯水(75ml，3v)，降温析晶，在15
±
5℃搅拌2-4小时，过滤，滤饼用50％v/v甲醇水溶液(25ml，1v)洗涤，抽干，50℃鼓风干燥，得到化合物vb 19.1g，收率76.4％。
[0172]
实施例20：化合物ⅵb的合成
[0173][0174]
氮气保护下，将化合物vb(20g，44.8mmol)溶于四氢呋喃(160ml，8v)，在0
±
5℃滴加1mol/l三叔丁氧基氢化铝锂四氢呋喃溶液(67.2ml，67.2mmol，1.5eq)，滴加完毕，在该温度下继续搅拌24小时。hplc监测确定反应完成(化合物vb《3％)，反应液冷却，在不高于10℃的温度下，滴加2mol/l盐酸溶液(70ml)，分液，有机相依次用饱和氯化钠(20ml，1v)、2mol/l盐酸溶液(20ml，1v)搅拌洗涤，分液，有机相用饱和氯化钠(40ml，2v)洗涤，然后减压除去部分溶剂，剩约40ml体积时，加入正庚烷(200ml，10v)搅拌，分液，有机相继续减压蒸馏除去四氢呋喃(通过蒸出的液体密度与正庚烷一致来确定)，且体系体积在100ml左右，在10-25℃下搅拌2小时，过滤，滤饼用少量正庚烷洗涤，干燥，得化合物ⅵb 15.8g，收率78.6％。
[0175]
实施例21：去氧胆酸的合成
[0176][0177]
将化合物ⅵb(15.0g，33.5mmol)在四氢呋喃(150ml，10v)中搅拌溶解，室温下滴加4mol/l氢氧化钠溶液(33.5ml，134.0mmol)，在60
±
5℃搅拌反应24小时。hplc监测反应完成后，减压除去四氢呋喃，向残余物中加水(120ml，8v)，在10-15℃滴加1mol/l盐酸调节ph至9-10，减压除去有机溶剂，残余物冷却后用乙酸乙酯洗涤(30ml*2)，用1mol/l盐酸调节ph至1-2，搅拌2小时，过滤，滤饼用水(75ml，5v)洗涤，鼓风干燥，得去氧胆酸固体(12.2g，84.0％)。

技术特征：
1.一种制备化合物n的方法，包括：化合物m经氧化反应得到化合物n，反应式如下：其中：p为羟基保护基团；r为烷基；甾体环中的表示单键或双键；甾体环上具有或不具有取代基；n表示亚甲基的个数，n为1-5的自然数；所述亚甲基上具有或不具有取代基；所述氧化反应的氧化剂选自碘苯二乙酸、2-碘酰基苯甲酸和戴斯马丁试剂。2.如权利要求1所述的方法，其中化合物m、n分别如下式m1、n1所示：其中，结构式中p、r、的定义同权利要求1。3.如权利要求1所述的方法，其中化合物m、n分别如下式m2、n2所示：其中，结构式中p、的定义同权利要求1。4.如权利要求1-3任一项所述的方法，其中氧化反应的氧化剂与化合物m的摩尔比可以为(0.5-10):1，优选(0.8-5):1。5.如权利要求4所述的方法，其中氧化反应的氧化剂与化合物m的摩尔比为(1-3):1。6.如权利要求1-3任一项所述的方法，其中氧化反应的反应溶剂包括偶极非质子溶剂。7.如权利要求1-3任一项所述的方法，其中氧化反应的反应溶剂选自二甲基亚砜、二甲基甲酰胺、n-甲基吡咯烷酮、二甲基乙酰胺和乙腈。8.一种制备去氧胆酸中间体化合物ⅳ的方法，包括将化合物
ⅳ‑
a经氧化反应得到化合物ⅳ；反应式如下：
其中，p为羟基保护基团；所述氧化反应的氧化剂选自2-碘酰基苯甲酸和戴斯马丁试剂。9.一种去氧胆酸中间体化合物v的制备方法，包括将化合物v-b经氧化反应得到化合物v；反应式如下：其中，p为羟基保护基团；所述氧化反应的氧化剂选自2-碘酰基苯甲酸和戴斯马丁试剂。10.一种制备去氧胆酸的方法，包括以下步骤：1)化合物ⅱ经氢化反应，得到化合物ⅲ；2)化合物ⅲ经第一氧化反应，得到含有化合物ⅳ与化合物
ⅳ‑
a混合物；该混合物经第二氧化反应，得到化合物ⅳ；3)化合物ⅳ经第一氢化反应，得到含有化合物v、v-a及v-b的混合物；该混合物依次发生氧化反应、第二氢化反应，得到化合物v；4)化合物
ⅴ
经还原反应，得到化合物ⅵ；5)化合物ⅵ经脱保护和水解反应，得到去氧胆酸i或其盐；反应式如下：其中：p选自苄基、对甲氧基苄基、乙酰基、苯甲酰基、甲酰基、苄氧羰基中的一种；优选
地，p为苯甲酰基或乙酰基；所述方法包括以下一个或多个特征：步骤1)中，氢化反应在pd/c或pto2催化剂存在下进行；步骤2)中，第一氧化反应在氧化剂和共氧化剂存在下进行；所述氧化剂为过氧化氢叔丁醇；所述共氧化剂选自次氯酸水溶液、pd/c、pd(ococf3)2、pd(oac)2和cui中的一种；步骤2)中，第二氧化反应使用的氧化剂选自2-碘酰基苯甲酸和戴斯马丁氧化剂；步骤3)中，第一氢化反应和第二氢化反应在pd/c或pto2催化剂存在下进行；氧化反应的氧化剂选自戴斯马丁氧化剂和2-碘酰基苯甲酸；步骤4)中，还原反应在还原剂三叔丁氧基氢化铝锂存在下进行；步骤5)中，反应条件包括碱金属氢氧化物、碱金属烷醇盐或其混合物。

技术总结
本发明提供了一种制备化合物N的方法，包括：化合物M经氧化反应得到化合物N，反应式如下所示。其中：P为羟基保护基团；R为烷基；甾体环中的表示单键或双键；甾体环上具有或不具有取代基；n表示亚甲基的个数，n为1-5的自然数；所述亚甲基上具有或不具有取代基；所述氧化反应的氧化剂选自碘苯二乙酸、2-碘酰基苯甲酸和戴斯马丁试剂。该方法可用于制备去氧胆酸的关键中间体，不使用含铬氧化试剂，环境友好、生产成本低、收率好、适合工业化应用。适合工业化应用。适合工业化应用。


技术研发人员：林成刚 周春燕 张翠霞 吴刚 赵欣 姜伟化 孙小燕 刘飞
受保护的技术使用者：南京迈诺威医药科技有限公司
技术研发日：2023.03.30
技术公布日：2023/7/21