一种人参中有机氯农药残留量的快速检测方法与流程

1.本发明属于化学检测领域，尤其涉及一种人参中有机氯农药残留量的快速检测方法。


背景技术：

2.人参是五加科人参属多年生宿根草本植物，含有皂苷类、糖类、氨基酸、矿物质、黄酮类等多种功能成分，是我国地道药材中应用最广泛的代表，具有改善微循环、抗抑郁、治疗关节炎、治疗免疫疾病、调节血糖、抗肿瘤、降血脂、抗衰老等多种生理功能，可以大补元气、补脾益肺、生津养血、安神益智。
3.但是，人参的生长周期较长，一般从播种到成熟收获需要至少6-8年，同时人参对生产条件的要求较高，特别是参根完全没有机械保护组织，故在其整个生产过程中极易遭受各种病原生物的侵袭，有些病害发生频繁，极易造成流行。为了保证人参的产量和品质，在人参的种植过程中，通常采用化学药剂防治病虫害，其中有机氯类化学药剂的使用最为广泛，导致人参中检出频率最高的农药种类为有机氯类。但是，有机氯农药毒性大、不易降解，可长期存在，在浓度很低时也存在引起神经毒性、生殖毒性以及致畸、致癌和致突变等危害，因此有机氯农药给人类及环境造成的影响不容忽视。
4.目前人参中有机氯农药残留量的检测采用的是《中国药典》2020版一部“人参”的方法，但是该方法的有机氯农药残留的前处理操作过程繁琐，效率低、稳定性差，而样品前处理的结果将直接影响最终定性和定量，造成结果偏差；且药典中使用的二氯甲烷容易污染ecd检测器，导致仪器的大范围系统误差，甚至仪器的报废，故而建立简单高效、快速、准确的测定方法对于人参及其制剂的质量控制具有重要意义。
5.文献【朱萱萱，茅咏雯，等.气相色谱法测定人参中残留有机氯农药的含量[j].中国药学杂志，1997，32(8)：484-486.】公开了一种气相色谱法测定人参中残留有机氯农药的含量，其包括以下过程：提取：精密称取上述供试品约5g，以丙酮-水(5∶30)30ml振荡30min，200r/min，提取3次；合并提取液，离心分离5min，300r/min，沉淀弃去；上清液于40℃以下减压浓缩至无丙酮味；残留液加100g/l氯化钠100ml，振荡后加正己烷50ml提取2次；收集上层正己烷提取液，加蒸馏水50ml洗净残留的氯化钠，于分液漏斗中，弃去水层；正己烷提取液加无水硫酸钠8g，脱水过滤，正己烷提取液在40℃以下减压浓缩至5ml；纯化：上述浓缩液5ml缓缓加入事先装有florisil的分离柱中，以正己烷-乙醚(17∶3)混合液300ml洗脱流速5ml/min，流出液于40℃以下减压浓缩至5ml，移至量瓶中，以正己烷加至刻度，供gc用。但是该文献的前处理过程步骤多且复杂，不仅容易操作失误，易引入误差，且采用的florisil分离柱价格昂贵，普适性不好，对于常规检测而言成本太高，不适宜常规的大规模检测。


技术实现要素：

[0006]
本发明的目的是提供一种人参中有机氯农药残留量的快速检测方法，以解决现有技术存在的前处理过程步骤多且复杂、仪器普适性不好、检测时间过长等问题。
[0007]
为了实现上述目的，本发明的技术方案如下：
[0008]
本发明的一种人参中有机氯农药残留量的快速检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
[0009]
(1)将人参样品粉碎、过筛，精密称量人参粉末作为试样；将试样与石油醚混合均匀，在超声辅助下提取，离心获取上清液；
[0010]
(2)在所述上清液中加入浓硫酸进行磺化反应；将反应液离心分离，获取上清液，转移至进样瓶，得到待测液；
[0011]
(3)将待测液进行气相色谱检测，采用外标法进行计算，即可得到人参中有机氯农药残留量。
[0012]
优选地，所述步骤(1)中，所述人参样品粉碎后过二号筛，精密称量人参粉末1.5～2.5g作为试样。
[0013]
优选地，所述步骤(1)中，所述试样与石油醚的比例为1g试样：(4～10)ml石油醚；超声工作频率为40～60khz，超声温度不高于于30℃，超声辅助提取时间20～50min。
[0014]
优选地，所述步骤(2)中，所述上清液与浓硫酸的体积比为1：(0.2～0.5)，优选体积比为1:0.3。
[0015]
优选地，所述步骤(2)中，所述磺化反应的温度应低于30℃，超声工作频率为40～60khz，反应时间为5～10min。
[0016]
优选地，所述步骤(3)中，气相色谱的检测条件为：色谱柱为db-5ms或者等效柱，检测器为电子捕获检测器(ecd)，进样口温度260℃，检测器温度300℃，不分流进样，程序升温：初始温度60℃，保持1～3min，以每分钟15～25℃升至180℃，再以每分钟3～8℃升至255℃；优选地，初始温度60℃，保持2min，以每分钟20℃升至180℃，再以每分钟5℃升至255℃。
[0017]
本发明采用外标法进行定量，外标曲线的制备方法为：精密量取有机氯农药配制成混合对照品系列溶液，每1ml正己烷中有机氯农药的含量分别含lng、2ng、5ng、10ng、20ng、50ng、100ng。
[0018]
与药典方法和现有技术相比，本发明利用超声波辅助有机溶剂对人参中的有机氯农药充分提取，然后采用浓硫酸净化，通过气相色谱仪进行检测，具有以下优点：样品前处理提取方法简单，处理速度快，提取准确高效，可操作性强，重复性好，避免了目标化合物的损失；由于不采用卤代烃溶剂，避免了操作不规范引起ecd检测器的污染，引入的误差小，最低检测限低至0.005mg/kg，回收率在91.18％～107.60％之间，rsd＜5％，对于人参中的有机氯农药具有高回收率和高稳定性。
具体实施方式
[0019]
下面结合具体实施例对本发明进行阐述，然而本发明的保护范围并非仅仅局限于以下实施例。在阅读了本发明讲授的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本技术所附权利要求书所限定的范围。
[0020]
实施例1
[0021]
仪器：sk8210lhc超声波清洗器(上海科导超声仪器有限公司)；agilent7890a气相色谱仪(ecd检测器，美国agilent公司)；centrifuge 5804高速离心机(德国eppendorf公司)；ms104s电子天平(瑞士mettler toleo公司)。
[0022]
试剂(除特别注明外，本实验所用试剂均为分析纯)：有机氯农药混标(德国dr.e标准品)；石油醚30～60℃(国药集团化学试剂有限公司)；硫酸(国药集团化学试剂有限公司)。
[0023]
1、对照品溶液的制备：精密量取有机氯农药混标1ml(每1ml含各农药对照品1μg)，置于10ml的容量瓶中，加正己烷至刻度，摇匀，得到储备液；再用正己烷进行稀释，配制成含1ng、2ng、5ng、10ng、20ng、50ng、100ng有机氯农药混标的溶液。
[0024]
2、采用《中华人民共和国药典》(2020年版)一部的方法制备样品：将人参样品粉碎，过二号筛，精密称定约5g；置于具塞锥形瓶中，加水30ml振摇10min；先用50ml丙酮超声提取30min，放冷后用丙酮补足减失的重量；再加氯化钠约8g，精密加二氯甲烷25ml超声处理15min，用二氯甲烷补足减失的重量，振摇使氯化钠充分溶解；离心使有机相分层，放置30min，取15ml减压浓缩至约1ml，加正己烷约5ml，加入硫酸溶液磺化，取上清液转移至进样小瓶，等待gc检测。
[0025]
3、本发明的人参中有机氯农药残留量的快速检测方法，过程如下：
[0026]
(1)将人参样品粉碎、过二号筛，精密称量人参粉末2g作为试样；将试样与10ml石油醚混合均匀，在超声辅助提取30min(超声功率500w，超声频率53khz，超声温度20℃)；将提取液以4000r/min的速度离心2min，获取上清液；
[0027]
(2)取5ml上清液，向其中加入1.5ml浓硫酸，在20℃下进行超声磺化反应10min(超声功率500w，超声频率53khz，超声温度20℃)；将反应液以4000r/min的速度离心2min，获取上清液，转移至进样瓶，得到待测液；
[0028]
(3)将待测液进行气相色谱检测，色谱条件为色谱柱db-5ms，检测器为电子捕获检测器(ecd)，进样口温度260℃，检测器温度300℃，不分流进样，程序升温：初始温度60℃，保持2min，以每分钟20℃升至180℃，再以每分钟5℃升至255℃；采用外标法进行计算，进样3次取平均值，即可得到人参中有机氯农药残留量。
[0029]
(4)样品回收率：取阴性人参样品对其进行加标回收试验，加标质量浓度分别为0.02mg/l、0.04mg/l、0.1mg/l，经前处理后采用气相色谱仪进行分析检测，计算样品中有机氯农药的加标回收率。
[0030]
表1方法回收率
[0031][0032]
由表1可知，实施例的样品前处理提取方法简单，处理速度快，提取准确高效，加标回收率在91.18％～107.60％，rsd均小于5％，且显著优于对比例，满足《中国药典》要求，可用于人参样品中有机氯农残的检测。

技术特征：
1.一种人参中有机氯农药残留量的快速检测方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）将人参样品粉碎、过筛，精密称量人参粉末作为试样；将试样与石油醚混合均匀，在超声辅助下提取，离心获取上清液；（2）在所述上清液中加入浓硫酸进行磺化反应；将反应液离心分离，获取上清液，转移至进样瓶，得到待测液；（3）将待测液进行气相色谱检测，采用外标法进行计算，即可得到人参中有机氯农药残留量。2.根据权利要求1所述的人参中有机氯农药残留量的快速检测方法，其特征在于，所述人参样品粉碎后过二号筛，精密称量人参粉末1.5～2.5g作为试样。3.根据权利要求1所述的人参中有机氯农药残留量的快速检测方法，其特征在于，所述步骤（1）中，所述试样与石油醚的比例为1g试样：（4～10）ml石油醚；超声工作频率为40～60 khz，超声温度不高于于30℃，超声辅助提取时间20～50min。4.根据权利要求1所述的人参中有机氯农药残留量的快速检测方法，其特征在于，所述步骤（2）中，所述上清液与浓硫酸的体积比为1：（0.2～0.5）。5.根据权利要求1所述的人参中有机氯农药残留量的快速检测方法，其特征在于，所述步骤（2）中，所述磺化反应的温度应低于30℃，超声工作频率为40～60 khz，反应时间为5～10min。6.根据权利要求1所述的人参中有机氯农药残留量的快速检测方法，其特征在于，所述步骤（3）中，气相色谱的检测条件为：色谱柱为db-5ms或者等效柱，检测器为电子捕获检测器，进样口温度260℃，检测器温度300℃，不分流进样，程序升温：初始温度60℃，保持1～3min，以每分钟15～25℃升至180℃，再以每分钟3～8℃升至255℃。

技术总结
本发明公开了一种人参中有机氯农药残留量的快速检测方法，包括以下步骤：（1）将人参样品粉碎、过筛，精密称量人参粉末作为试样；将试样与石油醚混合均匀，在超声辅助下提取，离心获取上清液；（2）在上清液中加入浓硫酸进行磺化反应；将反应液离心分离，获取上清液，转移至进样瓶，得到待测液；（3）将待测液进行气相色谱检测，采用外标法进行计算，即可得到人参中有机氯农药残留量。本发明多次加标回收实验结果表明，有机氯农药的平均回收率在91.18%～107.60%之间，RSD＜5%，该方法回收率高，重复性好，前处理简单、方便、快速，有效降低了实验成本，有助于提高检测效率和准确性，具有较强的应用价值。应用价值。


技术研发人员：付昕媛 周耀斌 聂磊 傅颖 王丁林 徐微 顾平欢 杨莹 薛丽芝 杨丹 宁啸骏 翁史昱
受保护的技术使用者：上海市医药学校 上海德华国药制品有限公司 上海食品科技学校
技术研发日：2023.05.04
技术公布日：2023/7/22