一种喹唑啉衍生物及其制备方法、药物组合物和应用与流程

1.本发明属于化药领域，具体涉及一种喹唑啉衍生物及其制备方法、药物组合物和应用。


背景技术：

2.肿瘤是威胁人类健康的最主要疾病之一。研究表明，肿瘤的发生与发展不仅与基因突变和缺失有关，也与表观遗传调控的失衡有关。表观遗传修饰是指在dna序列不发生改变的情况下，基因表达发生的可遗传的改变，主要包括dna甲基化、组蛋白修饰、染色质重塑和非编码rna的调控作用等。
3.dna甲基化是最早发现的，也是最重要的表观遗传修饰之一，参与调控基因表达，在多种生物学过程中发挥重要作用，如基因组稳定性、x染色体失活、基因印迹等。dna甲基化是在dna甲基转移酶（dnmts）的催化下，以s-腺苷甲硫氨酸（sam）为甲基供体，将甲基基团转移到胞嘧啶和鸟嘌呤二核苷酸（cpg）中的胞嘧啶5位碳原子上。dnmts主要包括dnmt1、dnmt2、dnmt3a、dnmt3b和dnmt3l五个成员。其中dnmt1含量最丰富，因其在dna复制时位于dna复制叉并对半甲基化的dna双链具高亲和性，故长久以来，dnmt1被认为是维持型dna甲基转移酶。此外，大量证据表明，dnmt1在dna从头甲基化中同样起到非常重要的作用。dnmt1还具有调节细胞周期和调控肿瘤抑制基因表达的能力，且在肿瘤的形成、进展、转移及不良预后等方面与dnmt1表达水平有一定的相关性。
4.越来越多的实体肿瘤研究已将dnmt1确定为靶点，异常的dna超甲基化也与白血病发生相关，急性髓性白血病（aml）、急性淋巴细胞白血病（all）和骨髓增生异常综合征（mds）均发现dnmt1过度表达。因此，靶向dnmt1是一种很有前途的aml和mds的治疗方法。
5.美国食品和药物管理局（fda）目前已批准核苷类抑制剂阿扎胞苷和地西他滨治疗用于治疗mds和aml。但是核苷类抑制剂的高毒性、不稳定性等缺点限制了它们的临床应用；而非核苷类抑制剂大多数存在活性弱、选择性差等问题，目前没有一款非核苷类小分子进入临床研究阶段。因此，发现高活性、低毒性和确定选择性的dnmt1抑制剂不仅有助于dnmt1的功能研究，还对抗肿瘤药物研发具有重要意义。


技术实现要素：

6.本发明的目的是解决现有技术的不足，提供一种喹唑啉衍生物及其制备方法、药物组合物和应用，具体采用以下的技术方案：根据本发明的第一方面，提供了一种喹唑啉衍生物，其结构如式i所示的：式i；或其在药学上可接受的盐，其中r1、r2分别独立选自h、烷烃、环烷烃、取代环烷烃、芳基、取代芳基、烷基酰胺、芳基酰胺、环状、取代环状结构中的任意一种；r3选自芳基、取代芳基、杂芳基、取代杂芳基、环状非芳基、取代环状非芳基、芳香
乙炔基、取代芳香乙炔基、杂芳香乙炔基、取代杂芳基乙炔基中的任意一种。
7.优选地，其结构如式ii、式iii或式iv所示：式ii，式iii，式iv；其中，r4选自以下1-12中的任意一种：172839410511612；其中，r5选自以下结构13-23中的任意一种：1319142015211622172318；其中，r6、r7分别独立选自以下结构24-40中的任意一种：2433253426352736
2837293830393140；32。
8.更为优选地，一种喹唑啉衍生物，其结构如式v所示：式v。
9.如式v所示的喹唑啉衍生物具有高效选择性抑制dnmt1蛋白酶活的效果，且对两个白血病细胞（kasumi-1和skno-1）有增殖抑制作用，且可以抑制体内mv-4-11细胞的增殖进而抑制肿瘤生长，并且可以有效缓解脾肿大，对白血病有一定治疗作用，因此可以用于制备治疗白血病、骨髓异常综合征的药物。
10.根据本发明的第二方面，权利要求1所述的喹唑啉衍生物的合成方法，包括以下步骤：；先将原料a和胺类化合物反应生成产物b；再将产物b和硼酸类化合物或硼酸酯类化合物在钯催化条件下，生成产物c；或将产物b和炔基类化合物在钯催化条件下，生成产物d。
11.本发明中的合成路线为先将原料a和不同原料胺在碱溶液和溶剂条件下，室温反应生成产物b，碱溶液为tea、dipea、dabco、dbu、四甲基乙二胺中的任意一种，而溶剂为dcm、dmf、dmso、thf、dioxane、toluene中的任意一种。
12.再分为两条路径，路径一为产物b和不同原料硼酸或硼酸酯在碱溶液和钯催化剂存在下，在溶剂中高温条件下生成产物c，碱溶液为k3po4、k2co3、cs2co3、ko
t
bu、na2co3中的任意一种；钯催化剂为pd2(dba)3、pd(oac)2、pd(pph3)4、pd(pph3)2cl2、pd(dppf)cl2中的任意一种；溶剂为自dioxane、h2o、thf、dmf、toluene中的至少一种。
13.路径二为产物b和不同原料炔在碱溶液和钯催化剂存在下，在溶剂中高温条件下
生成产物d，碱溶液为tea、dipea、dabco、dbu、四甲基乙二胺中的任意一种；钯催化剂为pd2(dba)3、pd(oac)2、pd(pph3)4、pd(pph3)2cl2、pd(dppf)cl2中的任意一种；溶剂为dioxane、h2o、thf、dmf、toluene中的至少一种。
14.根据本发明的第三方面，还提供了上述喹唑啉衍生物或其药学上可接受的盐在制备dna甲基转移酶1抑制剂中的应用。
15.优选地，dna甲基转移酶1抑制剂可用于制备治疗具有dna甲基转移酶1异常的相关疾病的药物。更为优选地，相关疾病包括白血病、骨髓异常综合征。
16.根据本发明的第四方面，还提供了一种药物组合物，以上述喹唑啉衍生物或其药学上可接受的盐为主要活性成分。
17.优选地，药物组合物包含赋形剂中的至少一种。药物组合物的剂型为药学上可接受的任一剂型。更为优选地，赋形剂为阿拉伯胶、糖浆、羊毛脂、淀粉中的至少一种。该赋形剂性质稳定，与主药无配伍禁忌，不产生副作用，不影响疗效，在常温下不易变形、干裂、霉变、虫蛀、对人体无害、无生理作用，不与主药产生化学或物理作用，不影响主药的含量测定。
18.根据本发明的第五方面，还提供了一种药物组合物在制备治疗白血病和/或骨髓异常综合征药物的应用。
19.本发明的有益效果为：本发明获得了一种新型喹唑啉衍生物，制备过程简单易行，通过分路径的方式得到多种喹唑啉衍生物，可应用于制备dna甲基转移酶1抑制剂中，并可组成药物组合物，对多种肿瘤细胞增殖均有一定抑制作用，适合用于治疗白血病、骨髓异常综合征药物的开发。
附图说明
20.图1所示为喹唑啉衍生物17（式v）的治疗肿瘤效果图。其中，（a）连续给药17天后小鼠体重变化；（b）肿瘤体积变化；（c）连续给药17天后小鼠肿瘤解剖图；（d）瘤重分布图；（e）脾脏解剖图；（f）脾脏重量变化分布图。
具体实施方式
21.以下将结合实施例和附图对本发明的构思及产生的技术效果进行清楚、完整的描述，以充分地理解本发明的目的、方案和效果。需要说明的是，在不冲突的情况下，本技术中的实施例及实施例中的特征可以相互组合。
22.实施例1一种喹唑啉衍生物（记为化合物1）、化合物（1-1），其结构如下所示：化合物1，化合物（1-1）。
23.具体制备方法为：1）化合物（1-1）的制备：将4-甲基苄胺（280 mg，2.32 mmol，1.5 eq）溶于3 ml四氢呋喃（thf）中，加6滴三乙胺（tea）室温搅拌10分钟，随后将原料2，4-二氯-6，7-二甲氧基喹
唑啉（400 mg，1.54 mmol，1.0 eq）溶于5 ml thf，滴加如上述体系，室温搅拌4 h。tlc监测反应（pe:ea = 1:1）。反应完毕后，浓缩反应液，用硅胶柱色谱层析法（pe:ea = 3:1至2:1）纯化，得到化合物1-1（白色固体，440 mg，83％）。
24.化合物（1-1）的核磁测试结果为：1h nmr (400 mhz, cdcl3)δ 7.27 (d,j= 7.2 hz, 2h), 7.11 (d,j= 6.0 hz, 2h), 7.03 (s,2h), 6.43 (s, 1h), 4.78 (s, 2h), 3.89 (s, 3h), 3.86 (s, 3h), 2.32 (s, 3h).
13
cnmr (100 mhz, cdcl3) δ 159.8, 156.2, 155.0, 149.1, 148.0, 137.7,134.7, 129.4, 128.5, 107., 106.9, 100.2, 56.3, 56.2, 45.6, 21.2. hrms (esi)calculated for c
18h19
cln3o
2+
[m+h]
+
:344.1460, found: 344.1462。
[0025]
2）化合物1的制备：向圆底烧瓶中依次加入化合物（1-1）（200 mg，0.58 mmol，1.0 eq）、化合物5-甲基呋喃硼酸醇酯（182mg，0.87 mmol，1.5 eq），无水碳酸钾（k2co3）（241 mg，1.75 mmol，3.0 eq），将反应装置用氩气置换三次，随后加入pdcl2(dppf)（43 mg，0.058 mmol，0.1 eq），继续将反应装置用氩气置换三次，最后注入脱气一小时的1，4-二氧六环:水 = 4:1的混合溶剂5 ml ,最后将反应体系置于80 ℃油浴锅中反应4 h。tlc监测反应（pe : ea = 1:1）。待反应完毕后，在抽滤漏斗中加入硅藻土，滤掉反应液中的不溶物，将反应液用饱和氯化钠溶液（10 ml）洗，乙酸乙酯（10 ml
ꢀ×ꢀ
3）萃取，将有机相浓缩，用硅胶柱色谱层析法（pe : ea = 2:1至1:1）纯化，得到化合物1（淡黄色固体，140 mg，62％）。
[0026]
化合物1的核磁测试结果为：1h nmr (400 mhz, cdcl3)δ 7.35 (s, 1h), 7.33 (s, 1h), 7.31 (s, 1h), 7.21 (d,j= 3.2 hz, 1h),7.17 (s, 1h), 7.15 (s, 1h), 6.90 (s, 1h), 6.14 (dd,j= 3.2, 1.2 hz,1h), 5.82 (s, 1h), 4.87 (d,j= 5.3 hz, 2h), 3.94 (s, 3h), 3.90 (s, 3h),2.42 (s, 3h), 2.35 (s, 3h).
13
c nmr (100 mhz, cdcl3) δ158.3, 154.9, 154.4, 153.1, 152.1, 148.6, 147.4, 137.5, 136.0, 129.5, 128.6,113.8, 108.4, 108.4, 107.3, 100.0, 56.3, 45.3, 21.3, 14.3. hrms (esi)calculated for c
23h24
n3o
3+
[m+h]
+
:390.1812, found:390.1813。
[0027]
实施例2一种喹唑啉衍生物（记为化合物2）、化合物（2-1），其结构如下所示：化合物2，化合物（2-1）。
[0028]
具体制备方法为：1）化合物（2-1）的制备：与化合物（1-1）的制备方法类似，不同的是所使用的原料之一为4-甲氧基苄胺，等摩尔代替化合物（1-1）的制备方法中的4-甲基苄胺。
[0029]
化合物（2-1）的核磁测试结果为：1h nmr (400 mhz, cdcl3)δ 7.32 (d,j= 8.7 hz, 2h), 7.09 (s, 1h), 6.86 (d,j= 6.5 hz,3h), 5.95 (s, 1h), 4.75 (d,j= 4.7 hz, 2h), 3.93 (s, 3h), 3.89 (s, 3h),3.78 (s, 1h).
13
c nmr (100 mhz, cdcl3) δ 159.7, 159.5,156.3, 155.1, 149.2, 148.2, 130.0, 129.8, 114.3, 107.3, 106.8, 99.9, 56.4,56.4, 55.4, 45.4. hrms (esi) calculated for c
18h19
cln3o
3+
[m+h]
+
: 360.1109, found: 360.1112。
[0030]
2）化合物2的制备：与化合物1的制备方法类似，不同的是所使用的原料之一为化合物（2-1），等摩尔代替化合物1的制备方法中的（1-1）。
[0031]
化合物2的核磁测试结果为：1h nmr (400 mhz, cdcl3)δ 7.40
ꢀ–ꢀ
7.35 (m, 2h), 7.31 (s, 1h), 7.21 (d,j= 3.2 hz, 1h), 6.89 (s,2h), 6.87 (t,j= 2.2 hz, 1h), 4.84 (d,j= 5.2 hz, 2h), 3.95 (s,3h), 3.90 (s, 3h), 3.80 (s, 3h), 2.43 (s, 3h).
13
c nmr (100 mhz,cdcl3) δ 159.3, 158.3, 154.9, 154.4, 153.1, 152.1, 148.6, 147.4,131.1, 129.9, 114.2, 113.8, 108.5, 108.4, 107.3, 100.1, 56.3, 55.4, 45.0, 14.3.hrms (esi) calculated for c
23h24
n3o
3+
[m+h]
+
: 406.1761, found: 406.1763。
[0032]
实施例3一种喹唑啉衍生物（记为化合物3）、化合物（3-1），其结构如下所示：化合物3，化合物（3-1）。
[0033]
具体制备方法为：1）化合物（3-1）的制备：与化合物（1-1）的制备方法类似，不同的是所使用的原料之一为4-三氟甲基苄胺，等摩尔代替化合物（1-2）的制备方法中的4-甲基苄胺。
[0034]
化合物（3-1）的核磁测试结果为：1h nmr (400 mhz, cdcl3)δ 7.55 (d,j= 8.0 hz, 2h), 7.48 (d,j= 8.0 hz, 2h), 7.07 (s,1h), 6.96 (s, 1h), 6.30 (d,j= 5.6 hz, 1h), 4.90 (t,j= 5.5 hz,2h), 3.92 (s, 3h), 3.90 (s, 3h).
13
c nmr (100 mhz, cdcl3)δ 159.8, 156.1, 155.3, 149.4, 148.3, 142.0, 130.3, 120.0, 128.7, 125.7 (q,j
f-c
= 3.5 hz), 56.4, 45.1.
19
f nmr (376 mhz, cdcl3) δ
ꢀ‑
62.53.hrms (esi) calculated for c
18h16
clf3n3o
3+
[m+h]
+
: 398.0878, found: 398.0879。
[0035]
2）化合物3的制备：与化合物1的制备方法类似，不同的是所使用的原料之一为化合物（3-1），等摩尔代替化合物1的制备方法中的（1-1）。
[0036]
化合物3的核磁测试结果为：1h nmr (400 mhz, cdcl3)δ 7.52 (m, 4h), 7.28 (s, 1h), 7.12 (s, 1h), 6.27 (t,j= 6.0 hz, 1h),6.12 (s, 1h), 4.95 (d,j= 5.5 hz, 2h), 3.90 (s, 3h), 3.88 (s, 3h), 2.37(s, 3h).
13
c nmr (100 mhz, cdcl3) δ 158.4, 155.0, 154.6,153.0, 151.9, 148.8, 147.4, 143.3, 128.5, 125.6, 113.9, 108.4, 108.2, 107.3,100.2, 56.3, 44.8, 14.2.
19
f nmr (376 mhz, cdcl3) δ-62.48. hrms (esi) calculated for c
23h21
f3n3o
3+
[m+h]
+
: 444.1530, found: 444.1532。
[0037]
实施例4一种喹唑啉衍生物（记为化合物4）、化合物（4-1），其结构如下所示：化合物4，化合物（4-1）具体制备方法为：
calculated for c
18h18
cl2n3o
2+
[m+h]
+
: 378.0771, found: 378.0773。
[0054]
2）化合物7的制备：与化合物1的制备方法类似，不同的是所使用的原料之一为化合物（7-1），等摩尔代替化合物1的制备方法中的（1-1）。
[0055]
化合物7的核磁测试结果为：1h nmr (400 mhz, cdcl3)δ 7.30 (s, 1h), 7.28 (s, 1h), 7.26 (s, 1h), 7.21
ꢀ–ꢀ
7.18 (m, 2h), 7.17 (s, 1h),5.64 (t,j= 5.6 hz, 1h), 3.94 (s, 3h), 3.92(d,j= 6.9 hz, 2h), 3.89 (s, 3h), 3.04 (t,j= 7.3 hz, 2h), 2.43(s, 3h).
13
c nmr (100 mhz, cdcl3) δ 158.4, 154.9, 154.5,153.1, 152.1, 148.6, 147.3, 138.0, 132.5, 130.4, 128.9, 113.7, 108.4, 108.4,107.4, 99.9, 56.3, 56.3, 42.6, 35.0, 14.3. (esi) calculated for c
23h23
cln3o
3+
[m+h]
+
: 424.1422, found: 424.1423。
[0056]
实施例8一种喹唑啉衍生物（记为化合物8）、化合物（8-1），其结构如下所示：化合物8，化合物（8-1）。
[0057]
具体制备方法为：1）化合物（8-1）的制备：与化合物（1-1）的制备方法类似，不同的是所使用的原料之一为4-氨基-1-甲基哌啶，等摩尔代替化合物（1-1）的制备方法中的4-甲基苄胺。
[0058]
化合物（8-1）的核磁测试结果为：1h nmr (400 mhz, dmso-d6) δ 8.00 (d,j= 7.6 hz, 1h), 7.65 (s, 1h), 7.05 (s, 1h), 4.20
ꢀ–ꢀ
3.99 (m, 1h), 3.89 (s, 3h),3.88 (s, 3h), 2.85 (d,j= 11.2 hz, 2h), 2.20 (s, 3h), δ 2.00 (t,j= 12.1 hz,2h), 1.89 (d,j= 12.1 hz, 2h).1.66 (qd,j= 12.1, 3.7hz, 2h).
13
c nmr (100 mhz, dmso-d6) δ 159.3,155.1, 154.4, 148.5, 147.3, 106.8, 106.5, 102.5, 56.3, 55.8, 54.6, 47.9, 45.9,31.2. hrms(esi) calculated for c
17h24
cln4o
2+
[m+h]
+
: 351.1582, found: 351.1583。
[0059]
2）化合物8的制备：与化合物1的制备方法类似，不同的是所使用的原料之一为化合物（8-1），等摩尔代替化合物1的制备方法中的（1-1）。
[0060]
化合物8的核磁测试结果为：1h nmr (400 mhz, cd3od)δ 7.55 (s, 1h), 7.18 (s, 1h), 7.17 (d,j= 3.3 hz, 1h), 6.22 (d,j= 3.3 hz, 1h), 4.51 (tt,j= 11.0, 4.0 hz, 1h), 3.95 (s, 6h), 3.45 (d,j= 9.6 hz, 2h), 3.04 (t,j= 13.8 hz, 2h), 2.78 (s, 3h), 2.43 (s, 3h),2.33 (d,j= 13.6 hz, 2h), 2.07
ꢀ–ꢀ
1.93 (m, 2h).
13
c nmr (100mhz,cd3od) δ 159.7, 156.2, 156.0, 153.5, 152.5, 150.2, 147.1, 115.1, 109.4,108.7, 106.9, 103.1, 56.9, 56.4, 55.1, 47.3, 44.4, 30.6, 13.9. (esi) calculatedfor c
21h27
n4o
3+
[m+h]
+
:383.2078, found: 383.3079。
[0061]
实施例9一种喹唑啉衍生物（记为化合物9）、化合物（9-1），其结构如下所示：
hrms(esi) calculated for c
16h22
cln4o
2+
[m+h]
+
: 437.1950, found: 437.1953。
[0069]
2）化合物10的制备：与化合物1的制备方法类似，所使用的原料之一为化合物（10-1），等摩尔代替化合物1的制备方法中的（1-1）。
[0070]
化合物10的核磁测试结果为：1h nmr (400 mhz, cdcl3) δ 7.31 (s, 1h), 7.14 (s, 1h), 6.95(s, 1h), 5.78 (t,j= 6.2 hz, 1h), 4.20
ꢀ–ꢀ
4.06 (m, 2h), 3.96 (s, 6h),3.62 (s, 2h), 2.72 (t,j= 12.6 hz, 2h), 2.43 (s, 3h), 1.95 (m, 1h),1.78 (d,j= 12.3 hz, 2h), 1.45 (s, 9h), 1.30
ꢀ–ꢀ
1.25 (m, 2h).
13
cnmr (100 mhz, cdcl3) δ 158.7, 155.0, 154.9, 154.4, 153.1, 152.2,148.6, 147.3, 113.6, 108.5, 108.3, 107.3, 100.0, 79.6, 56.4, 56.3, 46.8, 36.5,30.3, 28.6, 25.0, 14.3. (esi) calculated for c
26h35
n4o
5+
[m+h]
+
: 483.2602, found: 483.2601。
[0071]
实施例11三十种喹唑啉衍生物（分别记为化合物11-化合物40），其结构如下所示（其中，如化合物（24-1）等标记化合物为制备最终喹唑啉衍生物的中间产物）：化合物11化合物12化合物13化合物14化合物15化合物16化合物17化合物18
化合物19化合物20化合物21化合物22化合物23化合物24化合物（24-1）化合物25化合物（25-1）化合物26化合物（26-1）化合物27化合物28化合物（28-1）化合物29化合物30化合物（30-1）化合物31化合物（31-1）化合物32化合物（32-1）化合物33化合物（33-1）化合物34
9.5, 8.3 hz, 3h), 1.41 (s, 9h), 1.29 (dd,j= 6.8, 3.8 hz, 4h).
13
c nmr (100 mhz, cdcl3) δ 158.9, 156.1, 154.7, 154.2, 152.6,152.0, 148.5, 146.6, 113.2, 108.1, 107.8, 107.6, 102.2, 79.2, 57.4, 57.0, 56.2,52.9, 45.7, 40.2, 33.3, 29.8, 28.4, 27.2, 26.4, 26.1, 23.9, 14.2. (esi)calculated for c
32h48
n5o
5+
[m+h]
+
:582.3650, found: 582.3652。
[0076]
（3）化合物13具体制备方法为：与化合物1的制备方法类似，所使用的原料之一为化合物（9-1），等摩尔代替化合物1的制备方法中的（1-1）。反应另一原料为5-甲基噻酚-2-硼酸，等摩尔代替化合物1的制备方法中的5-甲基呋喃硼酸频哪醇酯。
[0077]
化合物13的核磁测试结果为：1h nmr (400 mhz, cdcl3)δ 7.77 (d,j= 3.6 hz, 1h), 7.19 (s, 1h), 6.92 (s, 1h), 6.77 (d,j= 3.6 hz, 1h), 5.70 (t,j= 5.6 hz, 1h), 3.97 (s, 6h), 3.64 (t,j= 6.1 hz, 2h), 2.91 (d,j= 11.0 hz, 2h), 2.53 (s, 3h), 2.29 (s, 3h),1.97 (t,j= 11.5 hz, 2h), 1.83 (d,j= 11.9 hz, 3h), 1.47 (q,j= 13.4 hz, 2h).
13
c nmr (100 mhz, cdcl3) δ 158.6, 156.5,154.4, 148.4, 147.6, 143.4, 143.0, 127.7, 126.4, 108.0, 107.1, 100.0, 56.4,56.3, 55.7, 46.8, 46.4, 35.5, 30.3, 15.9. (esi) calculated for c
22h29
n4o2s
+
[m+h]
+
: 413.2006, found: 413.2002。
[0078]
（4）化合物14具体制备方法为：与化合物1的制备方法类似，所使用的原料之一为化合物（9-1），等摩尔代替化合物1的制备方法中的（1-1）。反应另一原料为2-氟-4-醛基苯基-3-甲基-硼酸频那醇酯，等摩尔代替化合物1的制备方法中的5-甲基呋喃硼酸频哪醇酯。
[0079]
化合物14的核磁测试结果为：1h nmr (400 mhz, dmso-d6)δ 8.38 (s, 1h), 7.81 (t,j= 6.6 hz, 1h), 7.77 (s, 1h), 7.35 (t,j= 6.7 hz, 1h), 7.18
ꢀ–ꢀ
7.12 (m, 2h), 3.92 (s, 3h), 3.91 (s, 3h), 3.51 (d,j= 6.3 hz, 2h), 3.38 (d,j= 12.1 hz, 2h), 2.88 (m, 2h), 2.68 (s, 3h),2.31 (d,j= 2.2 hz, 3h), 2.07
ꢀ–ꢀ
1.96 (m, 1h), 1.90 (d,j= 17.3hz, 2h), 1.58 (q,j= 13.4 hz, 2h).
13
c nmr (100 mhz, dmsod6) δ 158.7, 157.1, 154.0, 148.6, 132.0, 130.1, 129.1, 125.1,124.6, 123.4, 120.5, 115.2, 106.9, 102.3, 56.2, 55.7, 53.2, 45.2, 42.5, 32.9,27.2, 14.5.
19
f nmr (376 mhz, dmsod6) δ
ꢀ‑
118.4.(esi) calculated for c
24h30
fn4o
2+
[m+h]
+
: 425.2347, found: 425.2349。
[0080]
（5）化合物15具体制备方法为：与化合物1的制备方法类似，所使用的原料之一为化合物（9-1），等摩尔代替化合物1的制备方法中的（1-1）。反应另一原料为1-甲基-1h-吡唑-5-硼酸频哪醇酯，等摩尔代替化合物1的制备方法中的5-甲基呋喃硼酸频哪醇酯。
[0081]
化合物15的核磁测试结果为：1h nmr (400 mhz, dmso-d6)δ 8.45
ꢀ–ꢀ
8.39 (m, 1h).δ 7.75 (s, 1h), 7.45 (d,j= 1.9 hz, 1h), 7.13 (s,1h), 6.93 (d,j= 1.9 hz, 1h), 4.34 (s, 3h), 3.91 (s, 6h), 3.51 (d,j= 6.4 hz, 2h), 3.16 (d,j= 4.1 hz, 2h), 2.87 (t,j= 16.2 hz,2h), 2.66 (s, 3h), 2.03 (m, 1h), 1.94
ꢀ–ꢀ
1.85 (m, 2h), 1.59 (q,j= 12.4hz, 2h).
13
c nmr (100 mhz, dmsod6) δ 158.5,154.0, 152.6, 148.5, 146.2, 141.5, 137.2, 108.3, 107.2, 107.0, 102.4, 56.2,55.7, 53.0, 48.6, 45.2, 42.5, 32.4, 27.1. (esi) calculated for c
21h29
n6o
2+
[m+h]
+
: 397.2347, found: 397.2349。
27.7.(esi)calculatedforc
27h33
n4o
4+
[m+h]
+
:477.2496,found:477.2494。
[0096]
（13）化合物23具体制备方法为：与化合物20的制备方法类似，所使用的原料之一为化合物对2-噻吩乙炔，等摩尔代替化合物20的制备方法中的苯乙炔。
[0097]
化合物23的核磁测试结果为：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.62(s,1h),7.46
–
7.39(m,2h),7.32(d,j=5.2hz,1h),7.18(s,1h),7.01(t,j=4.5hz,1h),4.07(s,3h),3.96(s,3h),3.63(t,j=6.2hz,2h),3.39(d,j=10.2hz,2h),2.71(m,2h),2.67(s,3h),2.23(m,1h),2.12(d,j=13.2hz,2h),1.92(q,j=11.8hz,2h).
13
cnmr(100mhz,cdcl3)δ159.0,154.7,149.7,147.6,146.7,134.0,128.6,127.3,122.5,108.4,107.4,101.9,93.8,90.9,57.3,56.3,54.9,44.3,32.8,29.8,27.8.(esi)calculatedforc
23h27
n4o2s
+
[m+h]
+
:423.1849,found:423.1848。
[0098]
（14）化合物24具体制备方法为：1）化合物（24-1）的制备：将化合物2-氯-4-氨基-6,7-二甲氧基喹唑啉（300mg，1.25mmol，1.5eq）、1-甲基哌啶-4-甲酸（267mg，1.88mmol，1.5eq）、dmap（305mg，2.5mmol，2.0eq）、edci（479mg，2.5mmol，2.0eq）溶于dmf（4ml）中，室温反应12h。dcm:meoh=8:1监测，反应结束后，ea萃取三次（10ml
×
3），饱和食盐水反萃三次（10ml
×
3），中性氧化铝dcm:meoh=100:1柱层析分离得到化合物24-1（白色固体，180mg，55％）。
[0099]
化合物（24-1）的核磁测试结果为：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.30(s,1h),7.15(s,1h),3.99(s,3h),3.97(s,3h),3.18(t,j=9.4hz,1h),3.07(d,j=12.6hz,2h),2.41(s,3h),2.29(t,j=11.8hz,2h),2.10(d,j=14.3hz,2h),1.99(q,j=11.2,9.3hz,2h).
13
cnmr(100mhz,cdcl3)δ176.4,157.0,156.2,153.9,151.4,150.1,110.6,106.4,102.4,56.5,56.4,55.0,46.4,42.8,28.7.hrms(esi)calculatedforc
17h22
cln4o
3+
[m+h]
+
:365.1375,found:365.1373。
[0100]
2）化合物24的制备：向圆底烧瓶中依次加入化合物（24-1）（92mg，0.25mmol，1.0eq），化合物1-环戊烯硼酸频哪醇酯（194mg，1.0mmol，4.0eq），无水碳酸钾（k2co3）（138mg，1.0mmol，4.0eq），将反应装置用氩气置换三次，随后加入pdcl2(dppf)（19mg，0.025mmol，0.1eq），继续将反应装置用氩气置换三次，最后注入脱气一小时的1，4-二氧六环:水=4:1的混合溶剂5ml,最后将反应体系置于80℃油浴锅中反应4h。tlc（dcm:meoh=6:1）监测反应。待反应完毕后，在抽滤漏斗中加入硅藻土，滤掉反应液中的不溶物，将反应液用饱和氯化钠溶液（10ml）洗，乙酸乙酯（10ml
×
3）萃取，将有机相浓缩，用硅胶柱色谱层析法（dcm:meoh=25:1至10:1）纯化，得到化合物24（白色固体，86mg，53.3%）。
[0101]
化合物24的核磁测试结果为：1hnmr(400mhz,cd3od)δ7.26(s,1h),7.23(s,1h),6.92(s,1h),3.99(s,3h),3.95(s,3h),3.47(d,j=11.3hz,2h),3.22(s,1h),2.97(s,2h),2.87(d,j=6.1hz,2h),2.79(s,3h),2.61(t,j=9.3hz,2h),2.25(d,j=14.1hz,2h),2.09(q,j=9.1,7.5hz,4h).
13
cnmr(100mhz,cd3od)δ176.1,159.1,157.7,155.9,151.3,150.9,145.0,137.6,112.6,107.3,105.7,103.5,56.7,54.7,44.1,40.5,34.5,33.4,27.6,24.4.
135.5, 110.1, 107.8, 103.1,56.2, 56.0, 51.8, 49.4, 41.4, 33.5, 32.4, 28.1, 23.7. hrms (esi) calculated forc
22h28
n3o
4+
[m+h]
+
:398.2074,found: 398.2072。
[0110]
（17）化合物27具体制备方法为：化合物26（100 mg，0.25 mmol，1.0 eq），溶于thf: meoh : h2o= 3 : 1 : 1中，加入一水氢氧化锂（30mg，1.26mmol，5.0eq），室温反应4h。dcm:meoh = 8 : 1监测，反应完毕，浓缩反应液，加入1nhcl/dioxane酸化，再次减压浓缩，乙醚打浆得到化合物27（白色固体，88 mg，91.1%）。
[0111]
化合物27的核磁测试结果为：1h nmr (400 mhz, dmso-d6)δ 7.16 (s, 1h), 7.08 (s, 1h), 6.84 (t,j= 2.3 hz, 1h), 4.05 (dd,j= 13.4, 3.7 hz, 2h), 3.92 (s, 3h), 3.90 (s, 3h), 3.18
ꢀ–ꢀ
3.08 (m, 2h), 2.79
ꢀ–ꢀ
2.73(m, 2h), 2.62
ꢀ–ꢀ
2.51 (m, 3h), 1.98 (p,j= 7.3 hz, 4h), 1.80 (tt,j= 11.2, 6.1 hz, 2h).
13
c nmr (100 mhz, dmso-d6) δ176.1, 163.3, 156.7, 154.2, 148.9, 148.0, 144.7, 134.6, 109.3, 107.6, 103.5,56.0, 55.7, 49.0, 40.6, 33.1, 32.2, 27.9, 23.3. hrms (esi) calculated for c
21h24
n3o
4+
[m-h]
+
:382.1772, found: 382.1770。
[0112]
（18）化合物28具体制备方法为：1）化合物（28-1）的制备：与化合物（25-1）的制备方法类似，所使用的原料之一为4-叔丁氧羰基氨基哌啶，等摩尔代替化合物（25-1）的制备方法中的4-氨甲基四氢吡喃。
[0113]
化合物（28-1）的核磁测试结果为：1h nmr (400 mhz, cdcl3)δ 7.01 (s, 1h), 6.90 (s, 1h), 4.65 (d,j= 7.8 hz, 1h), 4.10 (d,j= 13.6 hz, 2h), 3.88 (s, 3h), 3.87 (s, 3h), 3.78
ꢀ–ꢀ
3.59 (m, 1h), 3.22
ꢀ–ꢀ
3.04(m, 2h), 2.04 (d,j= 8.9 hz, 2h), 1.63
ꢀ–ꢀ
1.48 (m, 2h), 1.36 (s, 9h).
13
cnmr (100 mhz, cdcl3) δ 164.8, 155.1, 155.0, 154.8, 150.5, 148.2,109.1, 106.8, 103.2, 79.4, 56.2, 55.9, 48.6, 32.3, 28.3. hrms (esi) calculatedfor c
20h28
cln4o
4+
[m+h]
+
:423.1794,found: 423.1793。
[0114]
2）化合物28的制备：具体制备方法为：与化合物24的制备方法类似，所使用的原料之一为化合物（28-1），等摩尔代替化合物24的制备方法中的（24-1）。
[0115]
化合物28的核磁测试结果为：1h nmr (400 mhz, cdcl3)δ 7.25 (d,j= 6.5 hz, 1h), 7.02 (s, 1h), 6.95 (s, 1h), 4.56 (s, 1h),4.08 (d,j= 13.2 hz, 2h), 3.97 (s, 3h), 3.93 (s, 3h), 3.72 (m,j= 9.4 hz, 1h), 3.17 (t,j= 12.2 hz, 2h), 2.86 (t,j= 7.9 hz,2h), 2.55 (t,j= 7.5 hz, 2h), 2.03 (dt,j= 15.3, 10.0 hz, 4h),1.60 (q,j= 12.0 hz, 2h), 1.42 (s, 9h).
13
c nmr (100 mhz,cdcl3) δ 163.7, 157.8, 155.2, 154.4, 149.4, 148.1, 144.6, 136.0,109.8, 107.7, 103.4, 79.6, 56.3, 56.0, 48.8, 48.2, 33.6, 32.5, 32.5, 28.5,23.8. hrms (esi) calculated for c
25h35
n4o
4+
[m+h]
+
:455.2653, found: 455.2650。
[0116]
（19）化合物29具体制备方法为：化合物28（100 mg，0.22 mmol，1.0 eq）加入2.2 ml 4 n hcl/dioxane水解2 h，得到化合物29盐酸盐（白色固体，80 mg，46.6%）。
[0117]
化合物29的核磁测试结果为：1h nmr (400 mhz, d2o)δ 7.25 (q,j= 1.7 hz, 1h), 7.08 (s, 1h), 7.01 (s, 1h), 4.81 (s, 1h),3.97 (s, 4h), 3.95 (s, 4h), 3.67 (dd,j= 9.3, 5.0 hz, 1h), 3.62
ꢀ–ꢀ
3.50(m, 2h), 2.83
ꢀ–ꢀ
2.74 (m, 1h), 2.73
ꢀ–ꢀ
2.66 (m, 2h), 2.27
ꢀ–ꢀ
2.20 (m, 4h), 2.11(p,j= 7.7 hz, 3h), 1.74 (qd,j= 12.3, 3.9 hz, 3h).
13
cnmr (100 mhz, d2o) δ 164.6, 155.8, 151.4, 147.9, 146.0, 137.5,
149.8, 145.3, 137.0, 110.8, 107.3, 104.8, 57.4,56.5, 49.6, 34.3, 33.3, 32.0, 30.8, 28.8, 24.6, 5.5. hrms (esi) calculated forc
23h31
n4o
2+
[m+h]
+
:395.2442,found: 395.2443。
[0125]
（22）化合物32具体制备方法为：1）化合物（32-1）的制备：化合物29（114 mg，0.25 mmol，1.0 eq），溶于2 ml meoh 于64 ℃下反应3 h，后将三乙酰氧基硼氰化钠溶于1 ml meoh中，所得溶液滴加至上述反应体系，继续反应6 h。dcm : meoh = 9 : 1监测反应，反应结束用dcm（10 ml
ꢀ×ꢀ
3）和水萃取，有机相干燥浓缩，硅胶色谱柱层析（dcm : meoh = 20 : 1）得到化合物32-1（白色固体，65 mg，59.6%）。
[0126]
2）化合物32的制备：与化合物24的制备方法类似，所使用的原料之一为化合物（32-1），等摩尔代替化合物24的制备方法中的（24-1）。
[0127]
化合物32的核磁测试结果为：1h nmr (400 mhz, cd3od)δ 7.48
ꢀ–ꢀ
7.33 (m, 5h), 7.24 (s, 1h), 7.15 (s, 1h), 6.93 (p,j= 2.3 hz, 1h),4.32 (d,j= 12.2 hz, 2h), 4.08 (s, 2h), 3.97 (s, 3h), 3.95 (s, 3h),3.26
ꢀ–ꢀ
3.12 (m, 3h), 2.86 (td,j= 7.7, 2.2 hz, 2h), 2.64
ꢀ–ꢀ
2.54 (m,2h), 2.19 (d,j= 8.9 hz, 2h), 2.06 (p,j= 7.6 hz, 2h), 1.80(qd,j= 12.2, 3.9 hz, 2h).
13
c nmr (100 mhz, cd3od)δ 164.7, 158.9, 156.3, 150.3, 149.8, 145.3, 136.9, 136.5, 130.3, 130.0, 129.5,110.8, 107.5, 104.8, 56.5, 56.4, 50.3, 49.2, 34.3, 33.3, 31.1, 24.6. hrms (esi)calculated for c
27h33
n4o
2+
[m+h]
+
:445.2598,found: 445.2599。
[0128]
（23）化合物33具体制备方法为：1）化合物（33-1）的制备：与化合物（25-1）的制备方法类似，所使用的原料之一为4-二甲氨基哌啶，等摩尔代替化合物（25-1）的制备方法中的4-氨甲基四氢吡喃。
[0129]
化合物（33-1）的核磁测试结果为：1h nmr (400 mhz, dmso-d6)δ 7.15 (s, 1h), 7.11 (s, 1h), 4.25 (d,j= 12.9 hz, 2h), 3.91 (s, 3h),3.90 (s, 3h), 3.20
ꢀ–ꢀ
3.09 (m, 2h), 2.27 (s, 6h), 2.16 (s, 1h), 1.92 (d,j= 9.1 hz, 2h), 1.66
ꢀ–ꢀ
1.53 (m, 2h).
13
c nmr (100 mhz, dmso-d6)δ 163.9, 154.8, 153.8, 150.0, 147.9, 108.4, 106.6, 104.0, 61.4, 56.0, 55.7,48.3, 41.3, 27.8. hrms (esi) calculated for c
17h24
cln4o
2+
[m+h]
+
:351.1582, found: 351.1583。
[0130]
2）化合物33的制备：与化合物24的制备方法类似，所使用的原料之一为化合物（33-1），等摩尔代替化合物24的制备方法中的（24-1）。
[0131]
化合物33的核磁测试结果为：1h nmr (400 mhz, cdcl3)δ 7.25 (s, 1h), 7.06 (s, 1h), 6.94 (t,j= 2.2 hz, 1h), 4.29
ꢀ–ꢀ
4.21 (m,2h), 4.00 (s, 3h), 3.97 (s, 3h), 3.12
ꢀ–ꢀ
3.02 (m, 2h), 2.89 (tq,j= 6.8,2.1 hz, 2h), 2.80
ꢀ–ꢀ
2.70 (m, 1h), 2.59 (tt,j= 7.5, 2.5 hz, 2h), 2.51(s, 6h), 2.12 (d,j= 10.2 hz, 2h), 2.06 (q,j= 8.6, 8.1 hz,2h), 1.84 (qd,j= 12.1, 3.8 hz, 2h).
13
c nmr (100 mhz, cdcl3)δ 163.6, 158.0, 154.5, 149.7, 148.3, 144.8, 135.8, 110.0, 107.9, 103.2, 63.2,56.4, 56.2, 49.1, 41.0, 33.6, 32.5, 27.7, 23.8. hrms (esi) calculated for c
22h31
n4o
2+
[m+h]
+
:383.2442, found: 383.2444。
[0132]
（24）化合物34具体制备方法为：
1）化合物（34-1）的制备：与化合物（25-1）的制备方法类似，所使用的原料之一为4-二乙氨基哌啶，等摩尔代替化合物（25-1）的制备方法中的4-氨甲基四氢吡喃。
[0133]
化合物（34-1）的核磁测试结果为：1h nmr (400 mhz, cdcl3)δ 7.13 (s, 1h), 7.03 (s, 1h), 4.32 (d,j= 10.9 hz, 2h), 3.97 (s, 3h),3.95 (s, 3h), 3.08 (t,j= 11.6 hz, 2h), 2.82 (tt,j= 11.3, 3.7hz, 1h), 2.62 (q,j= 7.1 hz, 4h), 1.95 (d,j= 12.0 hz, 2h),1.71 (qd,j= 12.4, 3.8 hz, 2h), 1.06 (t,j= 7.1 hz, 6h).
13
c nmr (100 mhz, cdcl3) δ 165.0, 155.2, 155.1, 150.7, 148.3,109.4, 107.1, 103.7, 58.1, 56.4, 56.2, 49.7, 43.5, 28.9, 13.5. hrms (esi)calculated for c
19h28
cln4o
2+
[m+h]
+
:379.1895,found: 379.1893。
[0134]
2）化合物34的制备：与化合物24的制备方法类似，所使用的原料之一为化合物（34-1），等摩尔代替化合物24的制备方法中的（24-1）。
[0135]
化合物34的核磁测试结果为：1h nmr (400 mhz, cdcl3)δ 7.24 (s, 1h), 7.05 (s, 1h), 6.94 (s, 1h), 4.27 (d,j= 12.9 hz, 2h),4.00 (s, 3h), 3.97 (s, 3h), 3.27
ꢀ–ꢀ
3.15 (m, 1h), 3.07 (t,j= 12.6 hz,2h), 2.99
ꢀ–ꢀ
2.86 (m, 6h), 2.58 (t,j= 8.7 hz, 2h), 2.16 (d,j=8.8 hz, 2h), 2.05 (p,j= 7.4 hz, 2h), 1.97 (d,j= 11.9 hz, 2h),1.33 (t,j= 7.1 hz, 6h).
13
c nmr (100 mhz, cdcl3)δ 163.4, 157.9, 154.4, 149.6, 148.3, 144.7, 135.6, 109.9, 107.8, 103.0, 59.3,56.3, 56.1, 49.2, 44.0, 33.5, 32.4, 27.2, 23.7, 11.4. hrms (esi) calculated forc
24h35
n4o
2+
[m+h]
+
:411.2755,found: 411.2752。
[0136]
（25）化合物35具体制备方法为：1）化合物（35-1）的制备：与化合物（25-1）的制备方法类似，所使用的原料之一为4-(1-吡咯烷)哌啶，等摩尔代替化合物（25-1）的制备方法中的4-氨甲基四氢吡喃。
[0137]
化合物（35-1）的核磁测试结果为：1h nmr (400 mhz, cdcl3)δ 7.14 (s, 1h), 7.03 (s, 1h), 4.21 (d,j= 13.3 hz, 2h), 3.97 (s, 3h),3.93 (s, 3h), 3.18
ꢀ–ꢀ
3.10 (m, 2h), 2.63 (d,j= 5.9 hz, 4h), 2.31 (tt,j= 9.6, 3.8 hz, 1h), 2.09 (d,j= 12.9 hz, 2h), 1.81 (d,j= 3.6hz, 4h), 1.79
ꢀ–ꢀ
1.69 (m, 2h).
13
c nmr (100 mhz, cdcl3) δ165.3, 155.2, 155.2, 150.7, 148.5, 109.6, 107.1, 103.5, 61.8, 56.4, 56.1, 51.7,48.8, 31.7, 23.3. hrms (esi) calculated for c
19h26
cln4o
2+
[m+h]
+
:377.1739, found: 377.1741。
[0138]
2）化合物35的制备：与化合物24的制备方法类似，所使用的原料之一为化合物（35-1），等摩尔代替化合物24的制备方法中的（24-1）。
[0139]
化合物35的核磁测试结果为：1h nmr (400 mhz, dmso-d6)δ 7.16 (s, 1h), 7.09 (s, 1h), 6.84 (t,j= 2.3 hz, 1h), 4.08 (d,j= 12.9 hz, 2h), 3.92 (s, 3h), 3.89 (s, 3h), 3.39-3.28 (m, 2h), 3.09 (t,j= 22.6 hz, 2h), 2.78 (t,j= 6.9 hz, 2h), 2.72-2.57 (m, 2h), 2.58
ꢀ–ꢀ
2.51(m, 3h), 1.99 (q,j= 8.4, 7.7 hz, 4h), 1.78
ꢀ–ꢀ
1.70 (m, 4h), 1.69-1.61(m, 2h).
13
c nmr (100 mhz, dmso-d6) δ 163.3,157.1, 154.5, 149.2, 148.2, 145.0, 134.9, 109.6, 107.9, 103.9, 61.6, 56.3,56.0, 51.2, 48.4, 39.9, 33.4, 32.5, 30.6, 23.6, 23.3. hrms (esi) calculated forc
24h33
n4o
2+
[m+h]
+
:409.2598,found: 409.2596。
(esi) calculated for c
24h33
n4o
3+
[m+h]
+
:425.2547, found: 425.2546。
[0148]
（28）化合物38具体制备方法为：1）化合物（38-1）的制备：与化合物（25-1）的制备方法类似，所使用的原料之一为1-(1-甲基-4-哌啶基)哌嗪，等摩尔代替化合物（25-1）的制备方法中的4-氨甲基四氢吡喃。
[0149]
化合物（38-1）的核磁测试结果为：1h nmr (400 mhz, cdcl3)δ 7.08 (s, 1h), 6.98 (s, 1h), 3.92 (s, 3h), 3.90 (s, 3h), 3.72 (t,j=4.8 hz, 4h), 2.87 (d,j= 11.5 hz, 2h), 2.68 (t,j= 4.8 hz, 4h),2.28 (dd,j= 11.4, 3.8 hz, 1h), 2.22 (s, 3h), 1.91 (t,j= 22.4hz, 2h), 1.77 (d,j= 12.5 hz, 2h), 1.67
ꢀ–
1.50 (m, 2h).
13
c nmr (100 mhz, cdcl3) δ 164.5, 155.0,155.0, 150.8, 148.2, 109.0, 107.0, 103.6, 61.5, 56.3, 56.1, 55.3, 49.9, 49.0,46.1, 28.1. hrms (esi) calculated for c
20h29
cln5o
2+
[m+h]
+
:406.2004, found: 406.2001。
[0150]
2）化合物38制备：与化合物24的制备方法类似，所使用的原料之一为化合物（38-1），等摩尔代替化合物24的制备方法中的（24-1）。
[0151]
化合物38的核磁测试结果为：1h nmr (400 mhz, cd3od)δ 7.21 (s, 1h), 7.10 (s, 1h), 6.91 (s, 1h), 3.96 (s, 3h), 3.93 (s, 3h), 3.67(t,j= 4.8 hz, 4h), 2.95 (d,j= 11.5 hz, 2h), 2.85 (t,j= 8.4 hz, 1h), 2.81
ꢀ–ꢀ
2.75 (m, 4h), 2.74 (m, 1h), 2.58 (t,j= 8.1 hz,2h), 2.27 (s, 3h), 2.05 (t,j= 11.4 hz, 4h), 1.94 (t,j= 12.3hz, 2h), 1.62 (td,j= 12.1, 3.7 hz, 2h).
13
c nmr (100 mhz,cd3od) δ 164.7, 159.0, 156.2, 150.3, 149.7, 145.4, 136.8, 110.8,107.6, 104.7, 62.6, 56.5, 56.5, 56.0, 50.6, 50.3, 46.0, 34.3, 33.3, 28.9, 24.6.hrms (esi) calculated for c
25h36
n5o
2+
[m+h]
+
:425.2547, found: 425.2546。
[0152]
（29）化合物39具体制备方法为：1）化合物（39-1）的制备：与化合物（25-1）的制备方法类似，所使用的原料之一为n,n,n'-三甲基乙二胺，等摩尔代替化合物（25-1）的制备方法中的4-氨甲基四氢吡喃。
[0153]
化合物（39-1）的核磁测试结果为：1h nmr (400 mhz, cdcl3)δ 7.45 (s, 1h), 7.13 (s, 1h), 3.97 (s, 3h), 3.96 (s, 3h), 3.79 (t,j=6.8 hz, 2h), 3.34 (s, 3h), 2.72 (t,j= 6.8 hz, 2h), 2.30 (s, 6h).
13
cnmr (100 mhz, cdcl3) δ 163.7, 155.1, 154.7, 151.0, 147.8, 108.7,107.2, 104.8, 57.0, 56.4, 56.3, 52.2, 46.2, 39.9. hrms (esi) calculated for c
15h22
cln4o
2+
[m+h]
+
:325.1426, found: 325.1423。
[0154]
2）化合物39制备：与化合物24的制备方法类似，所使用的原料之一为化合物（39-1），等摩尔代替化合物24的制备方法中的（24-1）。
[0155]
化合物39的核磁测试结果为：1h nmr (400 mhz, cdcl3)δ 7.38 (s, 1h), 7.30 (s, 1h), 6.95 (s, 1h), 4.00 (s, 3h), 3.98 (s, 3h), 3.86(t,j= 7.0 hz, 2h), 3.34 (s, 3h), 2.90 (q,j= 6.8, 6.4 hz, 8h),2.59 (ddt,j= 7.7, 5.2, 2.3 hz, 2h), 2.44 (s, 6h), 2.05 (p,j=7.5 hz, 2h).
13
c nmr (100 mhz, cdcl3) δ 162.6, 157.3,154.2, 149.6, 147.6, 144.5, 135.7, 109.2, 107.6, 104.5, 56.4, 56.3, 50.7, 45.6,40.6, 33.7, 32.6, 29.8, 23.8. hrms (esi) calculated for c
20h29
n4o
2+
[m+h]
+
:357.3775, found: 357.4776。
[0156]
（30）化合物40具体制备方法为：
1）化合物（40-1）的制备：与化合物（25-1）的制备方法类似，所使用的原料之一为n,n-二甲基-1,3-二氨基丙烷，等摩尔代替化合物（25-1）的制备方法中的4-氨甲基四氢吡喃。
[0157]
化合物（40-1）的核磁测试结果为：1h nmr (400 mhz, cdcl3) δ 9.01 (s, 1h), 7.09 (s, 1h), 6.80 (s, 1h), 3.96 (s, 3h), 3.95 (s, 3h), 3.75
–ꢀ
3.70 (m, 2h), 2.62 (t,j= 10.8 hz, 2h), 2.38 (s, 6h), 1.84 (p,j= 5.6 hz, 2h).
13
c nmr (100 mhz, cdcl3) δ 160.2, 156.8,154.6, 148.8, 147.6, 107.4, 107.3, 100.3, 60.3, 56.3, 56.0, 45.8, 43.3, 24.1.hrms (esi) calculated for c
15h22
cln4o
2+
[m+h]
+
: 325.1426, found: 325.1424。
[0158]
2）化合物40制备：与化合物24的制备方法类似，所使用的原料之一为化合物（40-1），等摩尔代替化合物24的制备方法中的（24-1）。
[0159]
化合物40的核磁测试结果为：1h nmr (400 mhz, cdcl3)δ 8.12 (s, 1h), 7.17 (s, 1h), 6.91 (s, 1h), 6.88 (s, 1h), 3.95 (s, 5h), 3.93(s, 6h), 3.75 (q,j= 5.5 hz, 2h), 2.89 (t,j= 6.2 hz, 2h), 2.56(t,j= 5.9 hz, 4h), 2.34 (s, 6h), 2.03 (p,j= 7.5 hz, 2h), 1.85(p,j= 5.6 hz, 2h).
13
c nmr (100 mhz, cdcl3) δ159.2, 158.4, 153.8, 148.2, 147.0, 145.3, 134.9, 108.0, 107.6, 100.3, 59.9,56.2, 55.9, 45.7, 42.1, 33.5, 32.6, 25.0, 23.8. hrms (esi) calculated for c
20h29
n4o
2+
[m+h]
+
:357.3775, found: 357.4777。
[0160]
实施例12本实施例使用cck-8法，对上述实施例1-40的喹唑啉衍生物进行体外细胞抗增殖活性检测，以阿扎胞苷（5-aza）作为阳性对照。
[0161]
为了直观的比较喹唑啉衍生物的细胞增殖抑制差异，将ic
50
分为四类： 2 μm《ic
50
《10 μm (+)，500 nm《ic
50
《2 μm (++)，100 nm《ic
50
《500 nm(+++)，ic
50
《100nm (++++)。检测结果见下表1：表1 细胞抗增殖测试结果
喹唑啉衍生物kasumi-1ic50（μm）skno-1ic50（μm）喹唑啉衍生物kasumi-1ic50（μm）skno-1ic50（μm）5-aza+++++21+++++1++++22++++2++++23+++++3++++24+++4++25+++5++26++++6++++27++7++28++++8++29+++++++9+++++++30+++10++31++++++11++32+++++12+++++33+++++++13++++++34+++++14++35+++15++36+++16++37++++
17++++++++38++++++18+++++++39++19++++++40+++20+++++
使用基于生物发光的mtase-glo
™ꢀ
assay检测系统对上述实施例1-40的喹唑啉衍生物进行酶活检测。
[0162]
通过监测反应产物s-腺苷高半胱氨酸（sah）的形成，进而监测多种甲基转移酶（dnmt1、dnmt3a、dnmt3b）活性。用平板读数发光计测量荧光值，绘制喹唑啉衍生物的抑制曲线并利用非线性拟合公式来得到喹唑啉衍生物的ic
50
（半数抑制浓度）。为了较为直观比较喹唑啉衍生物酶活差异，将ic
50
分为四类：1 μm《ic
50
《10 μm (+)，500 nm《ic
50
《1μm(++)，100 nm《ic
50
《500 nm (+++)，ic
50
《100 nm (++++)。检测结果见下表2：表2 酶活测试结果喹唑啉衍生物dnmt1ic50dnmt3aic50dnmt3bic501+++2++++3++++4++++5+++++6++++7++++++8++++++9++++++10++++11++++12+++++13+++++++++14+++++++15++++++++16+++17++++++18+++++++++19+++++20+++++21++++++22++++++++23++++++24++++25+++++26+++++++27+++++++
28+++29+++++++30++++++++31++++++32+++++++33+++++++34++++++++35+++++++36+++++++++37++++++++38++++39++++40+++++++如上表1、表2，结果表明，本发明的喹唑啉衍生物1-40具有高效选择性抑制dnmt1蛋白酶活的效果，且对两个白血病细胞（kasumi-1和skno-1）由一定增殖抑制作用，其中喹唑啉衍生物17活性最佳，并进行后续测试评价。
[0163]
实施例13本实施对喹唑啉衍生物17的体内抗肿瘤活性进行了检测。
[0164]
通过构建小鼠mv-4-11细胞移植瘤模型，每只鼠皮下注射1
×
106个细胞，待肿瘤体积长到50-100 mm3左右时，随机分成3组，分别为control组、5-aza组、17组，每组5只老鼠。5-aza组每日腹腔注射3 mg/kg，17组每日腹腔注射40 mg/kg，空白对照组每日腹腔注射同等剂量生理盐水。连续给药17天，并每天测量肿瘤体积以及小鼠体重。给药结束后，用安乐死的方法处死小鼠，测量肿瘤、脾的重量与体积。
[0165]
结果表明，由图1（a）可以看出，17组和对照组小鼠体重相差不大，在正常范围内波动，说明喹唑啉衍生物毒性低。图1（b）及解剖图1（c）、（d）可以看出给药后小鼠肿瘤生长明显被抑制，且17组的肿瘤抑制效果优于5-aza组。此外，脾属于造血器官，白血病患者白细胞异常升高时，肝、脾、淋巴结会肿大，由图1（e）、（f）可以看出，经喹唑啉衍生物17治疗后，小鼠脾脏体积缩小，重量减轻，且效果优于5-aza组，这些结果说明喹唑啉衍生物17可以抑制体内mv-4-11细胞的增殖进而抑制小鼠肿瘤生长，并且可以有效缓解脾肿大，对aml有一定治疗作用。
[0166]
以上所述，只是本发明的较佳实施例而已，本发明并不局限于上述实施方式，只要其以相同的手段达到本发明的技术效果，都应属于本发明的保护范围。在本发明的保护范围内其技术方案和/或实施方式可以有各种不同的修改和变化。

技术特征：
1.一种喹唑啉衍生物，其特征在于，其结构如式i所示：式i；或其在药学上可接受的盐，其中，r1、r2分别独立选自h、烷烃、环烷烃、取代环烷烃、芳基、取代芳基、烷基酰胺、芳基酰胺、环状、取代环状结构中的任意一种；r3选自芳基、取代芳基、杂芳基、取代杂芳基、环状非芳基、取代环状非芳基、芳香乙炔基、取代芳香乙炔基、杂芳香乙炔基、取代杂芳基乙炔基中的任意一种。2.根据权利要求1所述的喹唑啉衍生物，其特征在于，其结构如式ii、式iii或式iv所示：式ii，式iii，式iv；其中，r4选自以下结构1-12中的任意一种：172839410511612；其中，r5选自以下结构13-23中的任意一种：13191420152116221723
18；其中，r6、r7分别独立选自以下结构24-40中的任意一种：24332534263527362837293830393140；32。3.根据权利要求2所述的喹唑啉衍生物，其特征在于，其结构如式v所示：式v。4.一种权利要求1-3任一项所述的喹唑啉衍生物的合成方法，其特征在于，包括以下步骤：；先将原料a和胺类化合物反应生成产物b；再将产物b和硼酸类化合物或硼酸酯类化合物在钯催化条件下，生成产物c；或将产物b和炔基类化合物在钯催化条件下，生成产物d。5.权利要求1-3任一项所述的喹唑啉衍生物或其药学上可接受的盐在制备dna甲基转移酶1抑制剂中的应用。6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述dna甲基转移酶1抑制剂可用于制备治
疗具有dna甲基转移酶1异常的相关疾病的药物。7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述相关疾病包括白血病、骨髓异常综合征。8.一种药物组合物，其特征在于，包括权利要求1-3任一项所述的喹唑啉衍生物或其药学上可接受的盐。9.根据权利要求8所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包含赋形剂中的至少一种。10.根据权利要求9所述的药物组合物，其特征在于，所述赋形剂为阿拉伯胶、糖浆、羊毛脂、淀粉中的至少一种。

技术总结
本发明属于化药领域，公开了一种喹唑啉衍生物及其制备方法、药物组合物和应用。本发明获得了一种新型喹唑啉衍生物，如式I所示。该制备过程简单易行，通过分路径的方式得到多种喹唑啉衍生物，可应用于制备DNA甲基转移酶1抑制剂中，并可组成药物组合物，对多种肿瘤细胞增殖均有一定抑制作用，适合用于治疗白血病、骨髓异常综合征药物的开发。式I。式I。式I。


技术研发人员：李金岭 杨光 李金波 魏明明 赵芮 张坤
受保护的技术使用者：河北康泰药业有限公司
技术研发日：2023.04.07
技术公布日：2023/7/22