一种单通道的犬细小CPV病毒量子点检测芯片的制作方法

一种单通道的犬细小cpv病毒量子点检测芯片
技术领域
1.本实用新型涉及动物病毒检测装置技术领域，特别涉及一种单通道的犬细小cpv病毒量子点检测芯片。


背景技术：

2.犬细小病毒(cpv)是一种单链dna病毒，可以感染任何年龄的未接种疫苗的狗。现有的检测方式，是采样之后带到实验室中进行检测，不能及时进行检测，给检测人员带来了不便。


技术实现要素：

3.本实用新型的目的旨在至少解决所述技术缺陷之一。
4.为此，本实用新型的一个目的在于提出一种单通道的犬细小cpv病毒量子点检测芯片，以解决背景技术中所提到的问题，克服现有技术中存在的不足。
5.为了实现上述目的，本实用新型提供一种单通道的犬细小cpv病毒量子点检测芯片，其特征在于，包括芯片载体和顶盖，顶盖扣在芯片载体上，顶盖包括采样口，芯片载体内部设有液面爬行槽，采样口与液面爬行槽连通，液面爬行槽的下方设有反应槽，反应槽的下方设有蛇形微通道，蛇形微通道的下方设有检测通道，检测通道下方设有u型吸水弯槽。
6.优选的是，液面爬行槽上刻有多条微型曲线沟槽。
7.在上述任一方案中优选的是，反应槽内含标记红色荧光量子点的的鼠源抗犬细小cpv抗体结合共聚物，检测通道设有t线通道反应处和c线通道反应处，t线通道反应处下方设有c线通道反应处，t线微通道反应处包埋有配对鼠源抗犬细小cpv抗体，c线微通道反应处包埋有抗鼠源igg抗体。
8.在上述任一方案中优选的是，顶盖还包括观察窗。
9.在上述任一方案中优选的是，芯片载体采用聚二甲基硅氧烷材料制成。
10.在上述任一方案中优选的是，芯片载体为长方体，芯片载体的长度为75.5mm，芯片载体的宽度为25.5mm，芯片载体的厚度为1.5mm。
11.与现有技术相比，本实用新型所具有的优点和有益效果为：
12.1、本实用新型的一种单通道的犬细小cpv病毒量子点检测芯片，样本从采样口进入后，利用液面爬行槽表面内刻的沟槽，促使液体样本流动并穿过液面爬行槽，液体流动更加的均匀，检测方便快捷，可进行当场取样并及时检测，能够及时检测出结果，检测方便快捷，节省了更多的人力物力成本。
13.2、本实用新型的一种单通道的犬细小cpv病毒量子点检测芯片检测效率高，污染小，体积小，方便携带使用。
14.本实用新型附加的方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本实用新型的实践了解到。
附图说明
15.本实用新型的上述和/或附加的方面和优点从结合下面附图对实施例的描述中将变得明显和容易理解，其中：
16.图1为根据本实用新型实施例的一种单通道的犬细小cpv病毒量子点检测芯片的芯片载体结构示意图。
17.图2为根据本实用新型实施例的一种单通道的犬细小cpv病毒量子点检测芯片的顶盖结构示意图。
18.图3a至图3d为根据本实用新型实施例的一种单通道的犬细小cpv病毒量子点检测的检测结果示意图。
19.其中：1-芯片载体；2-采样口；3-液面爬行槽；4-反应槽；5-蛇形微通道；6-检测通道；7-u型吸水弯槽；8-t线通道反应处；9-c线通道反应处；10-观察窗。
具体实施方式
20.下面详细描述本实用新型的实施例，所述实施例的示例在附图中示出，其中自始至终相同或类似的标号表示相同或类似的元件或具有相同或类似功能的元件。下面通过参考附图描述的实施例是示例性的，旨在用于解释本实用新型，而不能理解为对本实用新型的限制。
21.在本实用新型中，除非另有明确的规定和限定，术语“安装”、“相连”、“连接”、“固定”等术语应做广义理解，例如，可以是固定连接，也可以是可拆卸连接，或一体地连接；可以是机械连接，也可以是电连接；可以是直接相连，也可以通过中间媒介间接相连，可以是两个元件内部的连通。对于本领域的普通技术人员而言，可以根据具体情况理解上述术语在本实用新型中的具体含义。
22.如图1和图2所示，本实用新型实施例的一种单通道的犬细小cpv病毒量子点检测芯片包括芯片载体1和顶盖，顶盖扣在芯片载体1上，顶盖包括采样口2，芯片载体1内部设有液面爬行槽3，采样口2与液面爬行槽3连通，液面爬行槽3的下方设有反应槽4，反应槽4的下方设有蛇形微通道5，蛇形微通道5的下方设有检测通道6，检测通道6下方设有u型吸水弯槽7。
23.液面爬行槽3与反应槽4连通，反应槽4为三角形反应槽4，反应槽4含标记红色量子点的鼠源抗犬细小cpv病毒抗体结合共聚物。蛇形微通道5的前端与反应槽4连接，蛇形微通道5后端与检测通道6相连接，液体通过蛇形通道流入到检测通道6；检测通道6表面经小分子壳聚糖表面处理后，在顶盖表面标有t字母平行处，将配对鼠源抗犬细小cpv病毒抗体附着上，并形成长条形，在顶盖表面标有c字母平行处，将包被用抗鼠源igg抗体附着上，并形成长条形。微通道下部与吸水弯槽相连，吸水弯槽成u型，表面经明胶处理，附着一层明胶。红色量子点即在532nm激发波长照射下，显示明显的红色荧光。顶盖扣在芯片主体上，边缘对其，挤压粘和后可形成完整检测芯片。
24.将样本液体通过采样口2置入到液面爬行槽3中，然后利用液面爬行槽3中内嵌的微型曲线沟槽制造的液体虹吸现象和液体本身自带表面张力的驱动下，样本液体按照一定的速度穿过液面爬行槽3中的沟槽，然后进入到反应槽4中与标记红色量子点的抗体混合。样本液体与标记红色荧光量子点的抗体混合体，再通过蛇形微通道5，进入到检测通道6中，
最终流入到吸水弯曲槽中回收。
25.本发明采用新的红色量子点和抗原或者抗体进行缩合反应，形成不可逆的整体，实现了对目标蛋白的标记，并制备出犬细小cpv病毒检测芯片。
26.采用的是水溶性zns红色量子点(粒径范围2-10nm)，表面羟基功能团，通过缩合反应可以与目标蛋白合成为一体，最终形成代用红色荧光的蛋白。
27.本实用新型实施例的一种单通道的犬细小cpv病毒量子点检测芯片，样本液体从采样口2进入后，利用芯片液面爬行槽3表面内刻的沟槽与顶盖形成了虹吸以及表面张力作用，促使液体样本自吸流动并穿过液面爬行槽3，进入到反应槽4中，与反应槽4内标记红色量子点的鼠源抗犬细小cpv病毒抗体结合并形成共聚物，然后进入到蛇形通道，并利用蛇形微通道5，有效的形成液面压力差和稳定的液体流速，提高虹吸效果促使其自驱流动，液体样本在随后形成稳定的流速穿过设有包被配对鼠源抗犬细小cpv病毒抗体的检测通道6，利用夹心方法测量样本中权细小cpv病毒的含量，然后进入到吸水弯曲槽，通过其内部含有的明胶吸取样本液体，同时出现一定的虹吸效果，产生了相应的吸收力，包装样本液体最终全部进入到吸水弯曲槽，完成检测。
28.进一步的，液面爬行槽3上刻有多条微型曲线沟槽。便于液体按照稳定的速率流动。液面爬行槽3内刻多条左右对称的微型曲线沟槽，中上部份为长梯形凹陷形状，底部与三角形反应槽4相连。
29.具体的，检测通道6内设有t线通道反应处8和c线通道反应处9，t线通道反应处8下方设有c线通道反应处9，t线微通道反应处8包埋有配对鼠源抗犬细小cpv抗体，c线微通道反应处9包埋有抗鼠源igg抗体。
30.进一步的，还包括顶盖，顶盖扣在芯片载体1上，顶盖包括采样口2、观察窗10和盖片。
31.具体的，芯片载体1采用聚二甲基硅氧烷材料制成。
32.可选的，芯片载体1为长方体，芯片载体1的长度为75.5mm，芯片载体1的宽度为25.5mm，芯片载体1的厚度为1.5mm。
33.荧光标记点的制备
34.1.量子点浓度为10μm
35.2.待标记蛋白用tris-盐酸缓冲液(0.1m，ph7.4)稀释至2mg/ml
36.3.取一定量的量子点加入到反应器中，开始搅拌，依次加入计算好用量的edc水溶液(10mg/ml)、nhs水溶液(10mg/ml，调节ph至7.8左右)，搅拌0.5h。
37.4.按比例加入待标记蛋白(犬细小cpv病毒检测用标记抗体，鼠抗体)，搅拌4h。
38.5.反应结束，用0.22μm针头式滤器将样品过滤，测浓度。于4℃保存。
39.芯片制备流程：
40.1.将含有已经标记好的犬细小cpv病毒抗体和量子点聚合物的溶液按一定比例均匀喷涂到三角形反应槽上。
41.2.将配对犬细小cpv病毒抗体按一定比例涂在检测通道中标记字母t的相应位置上，即t线通道反应处，成长条状。
42.3.将抗鼠源igg抗体按一定比例涂在检测通道标记字母c的相应位置上，即c线微通道反应处，成长条状。
43.4.将25％明胶使用液均匀喷涂到u型吸水弯槽。
44.5.处理好后，将芯片烘干24小时(温度为40度)。
45.6.再将盖片与芯片载体进行粘和并压紧，4度放置3小时后，胶水凝固，及可进行测试。
46.本实用新型的工作原理为：芯片载体前端设有液面爬行槽；液面爬行槽为长梯形凹陷形状，液面爬行槽内刻微型曲线沟槽。液面爬行槽与反应槽相连，反应槽呈三角形，包含有鼠源抗犬细小cpv病毒和量子点聚合物。反应槽下部链接蛇形微通道，蛇形微通道另一端与检测通道相连。检测通道t线通道反应处包埋有配对鼠源抗犬细小cpv抗体，c线微通道反应处包埋有抗鼠源igg抗体。检测通道底部与u型吸水弯槽相连。芯片载体的边缘与盖片边缘对齐，涂胶水，粘和，压实后，4度放置3小时晾干后，最终形成完整的单通道的犬细小cpv病毒快速荧光检测芯片。使用时，将芯片载体水平放好，把需要检测的样品(20-50ul)通过微量移液器通过采样口注入到液面爬行槽中，样本液体本身，在芯片引起的虹吸和表面张力的引导下，向前流动并进入到反应槽中，与犬细小cpv病毒抗体和量子点聚合物结合，反应后，迅速流入到蛇形微通道里，然后通过蛇形微通道进入到检测通道中，最后通过检测通道进入到u型吸水弯槽中，利用u型吸水弯槽中的铺设的明胶将样本最终吸附干净。然后可通相关的荧光定量检测仪器进行观察红色荧光值并定量检测。
47.犬细小cpv病毒检测：将待测样本通过采样口滴入到液面爬行槽内，样本穿液面爬行槽内的微型曲线沟槽，进入到反应槽中与标记好的抗体混合，形成犬细小cpv病毒抗体和量子点聚合物。然后再通过蛇形微通道进入到检测通道中，与被包被在t线通道反应处的犬细小cpv病毒检测线处的配对犬细小cpv病毒抗体进行夹心反应，如果样本中含有犬细小cpv病毒，则t线通道反应处上形成标记抗体结合抗原及配对抗体(夹心法)的荧光复合物，因有红色荧光量子点在此沉积，通过观察窗可见t线通道反应处显示红色荧光。如果样本中不含有犬细小cpv病毒，t线通道反应处无法显示红色荧光。样本流出检测通道并最终被u型吸水弯槽6完全吸附回收。
48.结果判断：
49.如图3a所示：在荧光灯照射下t线通道反应处和c线通道反应处显示有条带，证明阳检测结果，样本中含有犬细小cpv病毒。注明：可通过荧光检测仪，对t线通道反应处荧光显色强弱情况进行观察，从而对样本中犬细小cpv病毒含量进行定量分析。
50.如图3b所示：在荧光灯照射下t线通道反应处未显示条带，c线通道反应处显示有条带，为阴性结果，样本不含有犬细小cpv病毒
51.如图3c和图3d所示：c线通道反应处未显示条带，均视为无效结果，需重新检测。
52.本实用新型实施例的一种单通道的犬细小cpv病毒量子点检测芯片携带方便，检测效率高，检测快捷，节省更多的人力物力，设有u型吸水弯槽对检测后的样品液体进行回收，使用更加的安全。
53.在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本实用新型的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不一定指的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任何的一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。
54.本领域技术人员不难理解，本实用新型包括上述说明书的实用新型内容和具体实施方式部分以及附图所示出的各部分的任意组合，限于篇幅并为使说明书简明而没有将这些组合构成的各方案一一描述。凡在本实用新型的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本实用新型的保护范围之内。
55.尽管上面已经示出和描述了本实用新型的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例性的，不能理解为对本实用新型的限制，本领域的普通技术人员在不脱离本实用新型的原理和宗旨的情况下在本实用新型的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。本实用新型的范围由所附权利要求及其等同限定。

技术特征：
1.一种单通道的犬细小cpv病毒量子点检测芯片，其特征在于，包括芯片载体和顶盖，所述顶盖扣在所述芯片载体上，所述顶盖包括采样口，所述芯片载体内部设有液面爬行槽，所述采样口与所述液面爬行槽连通，所述液面爬行槽的下方设有反应槽，所述反应槽的下方设有蛇形微通道，所述蛇形微通道的下方设有检测通道，所述检测通道下方设有u型吸水弯槽。2.如权利要求1所述的一种单通道的犬细小cpv病毒量子点检测芯片，其特征在于，所述液面爬行槽上刻有多条微型曲线沟槽。3.如权利要求1所述的一种单通道的犬细小cpv病毒量子点检测芯片，其特征在于，所述反应槽内含标记红色荧光量子点的鼠源抗犬细小cpv抗体结合共聚物，所述检测通道设有t线通道反应处和c线通道反应处，所述t线通道反应处下方设有所述c线通道反应处，所述t线通道反应处包埋有配对鼠源抗犬细小cpv抗体，所述c线通道反应处包埋有抗鼠源igg抗体。4.如权利要求1所述的一种单通道的犬细小cpv病毒量子点检测芯片，其特征在于，所述顶盖还包括观察窗。5.如权利要求1所述的一种单通道的犬细小cpv病毒量子点检测芯片，其特征在于，所述芯片载体采用聚二甲基硅氧烷材料制成。6.如权利要求1所述的一种单通道的犬细小cpv病毒量子点检测芯片，其特征在于，所述芯片载体为长方体，所述芯片载体的长度为75.5mm，所述芯片载体的宽度为25.5mm，所述芯片载体的厚度为1.5mm。

技术总结
本实用新型提出了一种单通道的犬细小CPV病毒量子点检测芯片，其特征在于，包括芯片载体和顶盖，顶盖扣在芯片载体上，顶盖包括采样口，芯片载体内部设有液面爬行槽，采样口与液面爬行槽连通，液面爬行槽的下方设有反应槽，反应槽的下方设有蛇形微通道，蛇形微通道的下方设有检测通道，检测通道下方设有U型吸水弯槽。本实用新型样本从采样口进入后，利用液面爬行槽表面内刻的沟槽，促使液体样本流动并穿过液面爬行槽，液体流动更加的均匀，检测方便快捷，可进行当场取样并及时检测，能够及时检测出结果，检测效率高，检测方便快捷，节省了更多的人力物力成本。多的人力物力成本。多的人力物力成本。


技术研发人员：赵钢 李子洋 王明杰 张悦
受保护的技术使用者：苏州世纪坐标生物科技有限公司
技术研发日：2022.10.24
技术公布日：2023/7/23