SCD1抑制剂MK-8245在制备用于治疗体外受精引起的子代脂代谢紊乱的药物中的用途

scd1抑制剂mk-8245在制备用于治疗体外受精引起的子代脂代谢紊乱的药物中的用途
技术领域
1.本发明属于生物医药领域，涉及scd1抑制剂，具体来说是scd1抑制剂mk-8245在制备用于治疗体外受精引起的子代脂代谢紊乱的药物中的用途。


背景技术：

2.目前全球约有8％-12％的适龄夫妇患有不孕不育症，体外受精-胚胎移植术(in vitro fertilization-embryo transfer，ft-ivf)为不孕不育患者带来了生育的希望。从ft-ivf技术问世以来的40年间，通过辅助生殖技术(assisted reproductive technology，art)诊治不孕不育的人数逐年增加，目前已有超过800万的试管婴儿诞生。尽管art已成功解决了不孕不育症患者的生理需求，但近年来，ft-ivf子代的近期和远期健康风险引起了生殖医学界的关注。由于ft-ivf是一种人工干预的非自然受孕过程，近年来的研究表明ivf子代随着年龄的增长，许多成年发病的疾病开始显现，例如肥胖以及代谢性疾病的风险显著性增加。
3.硬脂酰辅酶a去饱和酶(scd1)是一种单不饱和脂肪酸合成的限速酶，是脂肪酸合成所必须的，为机体生命活动提供基础保障的同时，也参与调节不同器官的代谢活动。scd1只具有一项功能，将长链饱和脂肪转变为长链单不饱和脂肪，从而引起生物体的肥胖。
4.mk-8245是苯氧基哌啶异恶唑衍生物，其结构式如下所示：
5.已经作为有效的靶向肝脏scd选择性抑制剂广泛应用于基础研究中。但对于体外受精引起的肥胖以及代谢性疾病的治疗作用目前尚未见报道。
6.已有越来越多的研究结果证明ft-ivf的子代代谢性疾病例如2型糖尿病以及心血管疾病的风险可能增加。然而到目前为止，在ft-ivf引起的肥胖及代谢疾病相关领域还没有一种疗效明确、副作用小的治疗药物。


技术实现要素：

7.针对现有技术中的上述技术问题，本发明提供了scd1抑制剂mk-8245在制备用于治疗体外受精引起的子代脂代谢紊乱的药物中的用途，所述的这种scd1抑制剂在制备用于治疗体外受精引起的子代脂代谢紊乱的药物中的用途要解决现有技术中的药物对于ft-ivf子代随着年龄的增长，代谢性疾病开始显现不能有效治疗的技术问题。
8.本发明提供了scd1抑制剂mk-8245在制备用于治疗体外受精引起的子代脂代谢紊乱的药物中的用途，所述的scd1抑制剂为：
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进一步的，所述的脂代谢紊乱为肥胖疾病或者代谢综合征。
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本发明和已有技术相比，其技术效果是积极和明显的。本发明通过ft-ivf成年小鼠脂代谢紊乱模型，给与mk-8245处理，明确了mk-8245对于ft-ivf小鼠脂代谢紊乱的改善作用。与对照组ft-ivf小鼠相比，mk-8245可以降低ft-ivf小鼠体重，脂肪比重，空腹血糖，血清和肝脏中的甘油三脂和胆固醇含量，肝脏及脂肪组织的重量以及肝脏中脂滴的数量和大小，并改善胰岛素抵抗和葡萄糖不耐受的表型。本发明找到了用于治疗ft-ivf引起的肥胖以及代谢性疾病发生或延缓其进展的药物。本研究将为人类临床前期试验提供理论依据，以实现在ft-ivf子代中消除代谢性疾病风险的目标。
附图说明
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图1为两组小鼠大体形态照片及小鼠体内脂肪分部核磁共振图。
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图2为根据每周的体重记录计算的体重增加比结果。
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图3为两组小鼠体内脂肪及肌肉比例检测。
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图4为小鼠代谢情况监测结果。
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图5为小鼠血清中胰岛素，葡萄糖耐受及胰岛素抵抗检测结果。
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图6分别为血清中甘油三酯和总胆固醇，以及肝脏中甘油三酯和总胆固醇检测结果。
[0018]
图7为两组小鼠肝脏大体，he，oil o red，及bodipy染色照片
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图8为肝脏组织重量称量值及于小鼠体重比值结果。
[0020]
图9为肝脏中脂滴大小及脂滴数量统计结果。
[0021]
图10为两组小鼠各部分脂肪组织大体和he染色照片。
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图11为各部分脂肪组织重量称量值以及部分脂肪组织于小鼠体重比值结果。
[0023]
图12为小鼠肝脏中脂代谢相关重要基因的real time-qpcr检测结果。
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图13为小鼠肝脏中scd1蛋白的western blotting检测结果。
具体实施方式
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以下是本发明的具体实施例，所述的实施例是用来描述本发明，而不是限制本发明。
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实施例1
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一、试剂及实验方法
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1.实验动物：
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由赛业公司制备的成年ft-ivf模型小鼠随机分为两组，(1)溶剂对照组(vehicle，n＝5)，(2)另外一组灌胃mk8245(20mg/kg)作为模型组(mk-8245，n＝5)。整个试验期间喂食标准颗粒饲料并称量饲料消耗量，自由饮水，每日于7:00-19:00用灯光照明。所有动物实验
方案均按照上海交通大学医学院附属仁济医院的伦理委员会规定进行。小鼠给药4周，每天连续记录小鼠的体重。每周测量小鼠空腹血糖，胰岛素，胆固醇，甘油三酯。4周之后，首先对小鼠进行连续48h代谢情况测定，体内脂肪分部mri检测，随后对小鼠进行体重，肝脏重，小鼠腹腔内脂肪重量，皮下脂肪重量，血清及肝脏中葡萄糖，tc，tg测定，同时取肝脏，内脏脂肪，皮下脂肪及棕色脂肪组织固定进行he，oil o red以及bodipy染色。
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2.药物与试剂
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scd1及b-actin抗体购自于abcam公司。甘油三脂(tg)测定试剂盒、胆固醇(tc)检测试剂盒购自于南京建成生物公司。mk8245购于selleck。oct包埋剂品牌为(美国sakura)。
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3.仪器
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常温高速离心机(德国eppendorf公司)；abi7500实时荧光定量pcr仪(thermo fisher公司)，自动凝胶图像分析仪，血糖检测仪(美国强生公司)，光学显微镜(leica)
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4.指标测定
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4.1空腹血糖检测：小鼠禁食12h，剪鼠尾取血，弃第一滴血，统一用第二滴用于血糖仪检测血糖。
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4.2血清tg，tc检测：小鼠处死前12h禁食不禁水，小鼠腹腔注射水合氯醛麻醉后摘除眼球取血，1600g/min离心15min，取上清液按照试剂盒操作说明书测定tg、tc含量。
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4.3肝脏及脂肪组织重量：小鼠眼球取血后立即打开腹腔，分离肝脏，内脏脂肪，皮下脂肪，棕色脂肪组织，用滤纸吸干组织液后，用电子天平分别称重，并计算体脂比。
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4.4肝脏及脂肪组织细胞形态学观察：小鼠肝脏及脂肪组织用4％多聚甲醛固定24h送于公司做石蜡切片及he，oil o red染色。小鼠肝脏用oct包埋剂包埋后切片，bodipy染色观察肝脏中脂滴情况。
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二、实验结果
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1.体重变化
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图1为两组小鼠大体形态照片及小鼠体内脂肪分部核磁共振图。可见mk-8245处理组小鼠体型明显小于对照组，体内脂肪含量明显少于对照组小鼠。
[0042]
图2为根据每周的体重记录计算的体重增加比结果，可见从灌胃第12天开始，mk-8245组小鼠体重增加显著低于对照组(vehicle)。
[0043]
2.小鼠体内脂肪及肌肉比重
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图3为两组小鼠体内脂肪及肌肉比例检测，可见于对照组相比，mk-8245处理组小鼠体内脂肪含量显著降低，肌肉含量有明显性增多。
[0045]
3.小鼠代谢情况
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图4为小鼠代谢情况监测结果，可见相对于对照组，mk-8245处理组小鼠的二氧化碳呼出量和呼吸商明显高于对照组，可见其代谢情况相较于ft-ivf对照组有明显升高。
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4.血清检测指标变化
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图5为小鼠血清中胰岛素，葡萄糖耐受及胰岛素抵抗检测结果，可见相对于对照组，mk-8245组小鼠血清胰岛素变化，葡萄糖耐受以及胰岛素抵抗均有明显改善。
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5.血清及肝脏中tc，tg检测指标变化
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图6分别为血清中甘油三酯和总胆固醇，以及肝脏中甘油三酯和总胆固醇检测结果，可见血清及肝脏中的甘油三酯和胆固醇浓度均显著低于对照组。
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6.肝脏组织重量，细胞形态学观察及脂滴检测
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图7为两组小鼠肝脏大体，he，oil o red，及bodipy染色照片，
[0053]
图8为肝脏组织重量称量值及于小鼠体重比值结果，图9为肝脏中脂滴大小及脂滴数量统计结果，可见在mk-8245处理的小鼠中，肝脏组织重量以及占小鼠体重的比值均显著低于对照组；mk-8245处理降低了肝脏中脂肪空泡面积，肝脏中肥大细胞比例以及炎症细胞的浸润；并降低了肝脏中脂滴数量以及脂滴面积，显著性减少ft-ivf小鼠肝脏脂肪沉积。
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7.各部分脂肪组织重量，细胞形态学观察
[0055]
图10为两组小鼠各部分脂肪组织大体和he染色照片，图11为各部分脂肪组织重量称量值以及部分脂肪组织于小鼠体重比值结果，可见在mk-8245处理的小鼠中，各部分脂肪组织重量以及占小鼠体重的比值均显著低于对照组。
[0056]
8.小鼠肝脏中脂代谢相关基因变化检测
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图12为小鼠肝脏中脂代谢相关重要基因的real time-qpcr检测结果，可见，mk-8245处理可以显著性降低ft-ivf小鼠肝脏中参与脂质积累的基因表达，从而降低脂质的生成。
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9.小鼠肝脏中scd1蛋白水平变化检测
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图13为小鼠肝脏中scd1蛋白的western blotting检测结果，可见，mk-8245处理可以显著性降低ft-ivf小鼠肝脏中scd1蛋白水平表达量。

技术特征：
1.scd1抑制剂mk-8245在制备用于治疗体外受精引起的子代脂代谢紊乱的药物中的用途，所述的scd1抑制剂mk-8245的结构式为：2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的脂代谢紊乱为肥胖疾病或者代谢综合征。

技术总结
本发明提供了SCD1抑制剂MK-8245在制备用于治疗体外受精引起的子代脂代谢紊乱的药物中的用途，所述的SCD1抑制剂MK-8245的结构式为：进一步的，所述的脂代谢紊乱为肥胖疾病或者代谢综合征。本发明找到了用于治疗FT-IVF引起的肥胖以及代谢性疾病发生或延缓其进展的药物。本研究将为人类临床前期试验提供理论依据，以实现在FT-IVF子代中消除代谢性疾病风险的目标。IVF子代中消除代谢性疾病风险的目标。IVF子代中消除代谢性疾病风险的目标。


技术研发人员：卜军 陆熙园 李旭霞 袁安彩
受保护的技术使用者：上海交通大学医学院附属仁济医院
技术研发日：2023.05.05
技术公布日：2023/7/25