具有改性脂肪酸酯分布的聚山梨醇酯混合物的制作方法

具有改性脂肪酸酯分布的聚山梨醇酯混合物1.相关申请的交叉引用2.本技术要求2020年9月24日提交的美国临时专利申请第63/082,606号和2020年9月24日申请的美国临时专利申请第63/082,611号以及2021年3月31日申请的美国临时专利申请第63/168,567号的优先权，这些临时申请各自借此以全文引用的方式并入。
技术领域：
：3.本公开提供具有特定脂肪酸酯浓度的聚山梨醇酯20组合物。在一些实施例中，这些组合物可用于药物制剂中例如以提高稳定性。
背景技术：
：：4.聚山梨醇酯20(ps20)为用于蛋白质制剂的非离子表面活性剂，例如以减轻界面应力。ps20为异质混合物，其中主要成分为聚氧乙烯(poe)山梨醇单月桂酸酯。结构含有与四个分支聚氧乙烯链连接的亲水性山梨醇环，其中一个链具有疏水性月桂酸酯键。两亲性允许ps20与液-气和液-固界面相互作用，从而保护蛋白质治疗剂免于运输或施用期间可能会发生的搅拌诱发的聚集。ps20的脂肪酸酯区为疏水性的并且其在水溶液中的溶解度低于山梨醇环或poe链在水溶液中的溶解度。5.ps20组合物具有基于poe链长和核心糖结构而变化的脂肪酸酯分布。此外，ps20的四个poe链中的每一个均可经脂肪酸酯化，从而产生呈混合物形式的ps20的单酯和高级酯(hoe)(二酯、三酯和至多四酯)形式。ps20的脂肪酸酯规格由各种药典设定，如下表a中所示。6.表a.示例性聚山梨醇酯20的脂肪酸酯含量[0007][0008][0009]ps20可在生物制药药物产品中水解降解，从而导致可见颗粒和亚可见颗粒的出现。酶(例如脂肪酶、酯酶等)在酯键处裂解ps20，从而导致游离脂肪酸(ffa)和游离头基或多元醇形成。ffa在水溶液中的溶解度差，并且可能会导致在药物产品制造和储存中更频繁或更早地形成可见颗粒或亚可见颗粒，伴随对长期蛋白质稳定性和药物产品的保质期有重大影响。技术实现要素：[0010]本公开提供具有特定脂肪酸酯分布的ps20制剂。在一些实施例中，本文中的聚山梨醇酯制剂可能不太容易通过降解形成颗粒而产生游离脂肪酸。本公开还涉及包含聚山梨醇酯的制剂。在一些实施例中，这些制剂可有助于延长药物制剂的保质期和/或减少由经降解和过期制剂造成的浪费。[0011]额外目的和优点将部分地在以下描述中阐述，并且部分地将从该描述中显而易见，或可通过实践习得。这些目的和优点将通过所附权利要求书中特别指出的要素和组合来实现和获得。应理解，前述一般描述和以下详细描述均仅为示例性和说明性的，并且不限制权利要求书。[0012]本发明尤其提供具有特定脂肪酸酯分布的ps20组合物以及含有这些ps20组合物的药物制剂，这些组合物可能不太容易通过降解形成颗粒而产生游离脂肪酸。本文中的公开内容包括例如以下实施例：[0013]实施例1为一种包含脂肪酸酯的聚山梨醇酯20组合物，其包含1％或更少的己酸酯、大于2.3％且小于或等于10％的辛酸酯、大于2.8％且小于或等于10％的癸酸酯、大于52.1％且小于或等于60％的月桂酸酯、大于或等于14％且小于18.3％的肉豆蔻酸酯、大于或等于7％且小于11.9％的棕榈酸酯以及小于6.4％的硬脂酸酯。[0014]实施例2为根据实施例1的组合物，其包含大于2.5％或大于3.5％或大于4％或大于或等于4.6％且小于或等于10％的辛酸酯。[0015]实施例3为根据实施例1或2的组合物，其包含大于3％或大于3.5％或大于4％或大于或等于4.4％且小于或等于10％的癸酸酯。[0016]实施例4为根据前述实施例中任一项的组合物，其包含大于53％、大于55％、大于57％、大于或等于58％且小于或等于60％的月桂酸酯。[0017]实施例5为根据前述实施例中任一项的组合物，其包含大于或等于14％且小于18％或小于17％或小于16.5％或小于或等于16.1％的肉豆蔻酸酯。[0018]实施例6为根据前述实施例中任一项的组合物，其包含大于或等于7％且小于11％或小于10％或小于9.5％或小于或等于8.9％的棕榈酸酯。[0019]实施例7为根据前述实施例中任一项的组合物，其包含小于6％或小于5％或小于1％的硬脂酸酯。[0020]实施例8为根据前述实施例中任一项的组合物，其包含不可检测的硬脂酸酯。[0021]实施例9为根据前述实施例中任一项的组合物，其包含1％或更少的己酸酯、约4.6％的辛酸酯、约4.4％的癸酸酯、约58％的月桂酸酯、约16.1％的肉豆蔻酸酯、约8.9％的棕榈酸酯且不包含可检测的硬脂酸酯。[0022]实施例10为根据前述实施例中任一项的组合物，其包含1％或更少的己酸酯、4.2％至5.1％的辛酸酯、4.0％至4.8％的癸酸酯、52％至60％的月桂酸酯、14.5％至17.7％的肉豆蔻酸酯、8.0％至9.8％的棕榈酸酯且不包含可检测的硬脂酸酯。[0023]实施例11为根据前述实施例中任一项的组合物，其包含1％或更少的己酸酯、4.4％至4.8％的辛酸酯、4.2％至4.6％的癸酸酯、55％至60％的月桂酸酯、15.3％至16.9％的肉豆蔻酸酯、8.5％至9.3％的棕榈酸酯且不包含可检测的硬脂酸酯。[0024]实施例12为根据前述实施例中任一项的组合物，其包含1％或更少的己酸酯、4.5％至4.7％的辛酸酯、4.3％至4.5％的癸酸酯、56.8％至59.1％的月桂酸酯、15.8％至16.4％的肉豆蔻酸酯、8.7％至9.1％的棕榈酸酯且不包含可检测的硬脂酸酯。[0025]实施例13为一种药物制剂，其包含药物和药用赋形剂，其中该药用赋形剂包含：[0026]包含脂肪酸酯的聚山梨醇酯20组合物，其中该聚山梨醇酯20组合物的这些脂肪酸酯包含：1％或更少的己酸酯、大于2.3％且小于或等于10％的辛酸酯、大于2.8％且小于或等于10％的癸酸酯、大于52.1％且小于或等于60％的月桂酸酯、大于或等于14％且小于18.3％的肉豆蔻酸酯、大于或等于7％且小于11.9％的棕榈酸酯以及小于6.4％的硬脂酸酯。[0027]实施例14为根据实施例13的药物制剂，其中该聚山梨醇酯20组合物占该制剂的0.01％至0.2％(w/v)。[0028]实施例15为根据实施例13或14的药物制剂，其中该药物是蛋白质、抗体、抗体片段、酶或肽。[0029]实施例16为根据实施例15的药物制剂，其中该药物是蛋白质。[0030]实施例17为根据实施例15的药物制剂，其中该药物是抗体。[0031]实施例18为根据实施例13至17中任一项的药物制剂，其中药物的浓度是0.1％至30％(w/v)。[0032]实施例19为根据实施例18的药物制剂，其中该药物的浓度是5％至20％(w/v)。[0033]实施例20为根据实施例13至19中任一项的药物制剂，其中该聚山梨醇酯20组合物占该制剂的0.01％至0.12％、0.01％至0.08％、0.03％至0.1％或0.04％至0.07％(w/v)。[0034]实施例21为根据实施例13至20中任一项的药物制剂，其中该聚山梨醇酯20组合物占该制剂的约0.01％、0.02％、0.03％、0.04％、0.05％、0.06％、0.07％、0.08％、0.09％、0.10％、0.11％或0.12％(w/v)。[0035]实施例22为根据实施例13至21中任一项的药物制剂，其中该聚山梨醇酯20组合物占该制剂的约0.06％(w/v)。[0036]实施例23为根据实施例13至22中任一项的药物制剂，其中ph是4至8、或5至7.5、或6.5至7.5、或6.8至7.2。[0037]实施例24为根据实施例13至23中任一项的药物制剂，其中该药用赋形剂进一步包含水、醇、糖、缓冲剂、表面活性剂、稳定剂或其组合。[0038]实施例25为根据实施例13至24中任一项的药物制剂，其中该聚山梨醇酯20组合物的这些脂肪酸酯包含大于2.5％或大于3.5％或大于4％或大于或等于4.6％且小于或等于10％的辛酸酯。[0039]实施例26为根据实施例13至25中任一项的药物制剂，其中该聚山梨醇酯20组合物的这些脂肪酸酯包含大于3％或大于3.5％或大于4％或大于或等于4.4％且小于或等于10％的癸酸酯。[0040]实施例27为根据实施例13至26中任一项的药物制剂，其中该聚山梨醇酯20组合物的这些脂肪酸酯包含大于53％、大于55％、大于57％、大于或等于58％且小于或等于60％的月桂酸酯。[0041]实施例28为根据实施例13至27中任一项的药物制剂，其中该聚山梨醇酯20组合物的这些脂肪酸酯包含大于或等于14％且小于18％或小于17％或小于16.5％或小于或等于16.1％的肉豆蔻酸酯。[0042]实施例29为根据实施例13至28中任一项的药物制剂，其中该聚山梨醇酯20组合物的这些脂肪酸酯包含大于或等于7％且小于11％或小于10％或小于9.5％或小于或等于8.9％的棕榈酸酯。[0043]实施例30为根据实施例13至29中任一项的药物制剂，其中该聚山梨醇酯20组合物的这些脂肪酸酯包含小于6％或小于5％或小于1％的硬脂酸酯。[0044]实施例31为根据实施例13至30中任一项的药物制剂，其中该聚山梨醇酯20组合物的这些脂肪酸酯包含不可检测的硬脂酸酯。[0045]实施例32为根据实施例13至31中任一项的药物制剂，其中该聚山梨醇酯20组合物的这些脂肪酸酯包含1％或更少的己酸酯、约4.6％的辛酸酯、约4.4％的癸酸酯、约58％的月桂酸酯、约16.1％的肉豆蔻酸酯、约8.9％的棕榈酸酯且不包含可检测的硬脂酸酯。[0046]实施例33为一种包含脂肪酸酯的聚山梨醇酯20组合物，其包含1.0％或更少的己酸酯、大于或等于2.6％且小于或等于6.6％的辛酸酯、大于或等于2.4％且小于或等于6.4％的癸酸酯、大于或等于55.0％且小于或等于60.0％的月桂酸酯、大于或等于14.1％且小于或等于18.1％的肉豆蔻酸酯、大于或等于7.0％且小于或等于10.9％的棕榈酸酯以及小于或等于2.0％的硬脂酸酯。[0047]实施例34为根据实施例33的组合物，其包含大于或等于3％、或大于或等于3.5％、或大于或等于4％、或大于或等于4.6％且小于或等于6.6％的辛酸酯。[0048]实施例35为根据实施例33或34的组合物，其包含大于或等于2.6％、或大于或等于3％、或大于或等于3.5％、或大于或等于4％、或大于或等于4.4％且小于或等于6.4％的癸酸酯。[0049]实施例36为根据实施例33至35中任一项的组合物，其包含大于或等于56％、大于或等于57％、大于或等于58％且小于或等于60％的月桂酸酯。[0050]实施例37为根据实施例33至36中任一项的组合物，其包含大于或等于14.1％且小于或等于18％、或小于或等于17％、或小于或等于16％、或小于或等于15％的肉豆蔻酸酯。[0051]实施例38为根据实施例33至37中任一项的组合物，其包含大于或等于7％且小于10.9％、或小于或等于10％、或小于或等于9％、或小于或等于8％的棕榈酸酯。[0052]实施例39为根据实施例33至38中任一项的组合物，其包含小于或等于2％或小于或等于1.5％或小于或等于1％的硬脂酸酯。[0053]实施例40为根据实施例33至39中任一项的组合物，其包含不可检测的硬脂酸酯。[0054]实施例41为根据实施例33的组合物，其包含1％或更少的己酸酯、约4.6％的辛酸酯、约4.8％的癸酸酯、约57.0％的月桂酸酯、约16.2％的肉豆蔻酸酯、约9.4％的棕榈酸酯且不包含可检测的硬脂酸酯。[0055]实施例42为根据实施例33的组合物，其包含1％或更少的己酸酯、3.7％至5.2％的辛酸酯、3.7％至5.2％的癸酸酯、56.3％至57.2％的月桂酸酯、15.9％至16.9％的肉豆蔻酸酯、8.8％至9.7％的棕榈酸酯且不包含可检测的硬脂酸酯。[0056]实施例43为根据实施例33的组合物，其包含1％或更少的己酸酯、3.5％至5.5％的辛酸酯、3.5％至5.5％的癸酸酯、55％至58％的月桂酸酯、15％至17.5％的肉豆蔻酸酯、8.5％至10％的棕榈酸酯以及约0.1％或更少的硬脂酸酯。[0057]实施例44为根据实施例33至43中任一项的组合物，其进一步包含大于或等于5.8％且小于或等于9.8％的油酸酯以及小于或等于2.0％的亚油酸酯。[0058]实施例45为一种药物制剂，其包含药物和药用赋形剂，其中该药用赋形剂包含：[0059]包含脂肪酸酯的聚山梨醇酯20组合物，其中该聚山梨醇酯20组合物的这些脂肪酸酯包含：1.0％或更少的己酸酯、大于或等于2.6％且小于或等于6.6％的辛酸酯、大于或等于2.4％且小于或等于6.4％的癸酸酯、大于或等于55.0％且小于或等于60.0％的月桂酸酯、大于或等于14.1％且小于或等于18.1％的肉豆蔻酸酯、大于或等于7.0％且小于或等于10.9％的棕榈酸酯以及小于或等于2.0％的硬脂酸酯。[0060]实施例46为根据实施例45的药物制剂，其中该聚山梨醇酯20组合物占该制剂的0.01％至0.2％(w/v)。[0061]实施例47为根据实施例45或46的药物制剂，其中该药物是蛋白质、抗体、抗体片段、酶或肽。[0062]实施例48为根据实施例47的药物制剂，其中该药物是蛋白质。[0063]实施例49为根据实施例47的药物制剂，其中该药物是抗体。[0064]实施例50为根据实施例45至49中任一项的药物制剂，其中药物的浓度是0.1％至30％(w/v)。[0065]实施例51为根据实施例50的药物制剂，其中该药物的浓度是5％至20％(w/v)。[0066]实施例52为根据实施例45至51中任一项的药物制剂，其中该聚山梨醇酯20组合物占该制剂的0.01％至0.12％、0.01％至0.08％、0.03％至0.1％或0.04％至0.07％(w/v)。[0067]实施例53为根据实施例45至52中任一项的药物制剂，其中该聚山梨醇酯20组合物占该制剂的约0.01％、0.02％、0.03％、0.04％、0.05％、0.06％、0.07％、0.08％、0.09％、0.10％、0.11％或0.12％(w/v)。[0068]实施例54为根据实施例45至53中任一项的药物制剂，其中该聚山梨醇酯20组合物占该制剂的约0.06％(w/v)。[0069]实施例55为根据实施例45至54中任一项的药物制剂，其中ph是4至8、或5至7.5、或6.5至7.5、或6.8至7.2。[0070]实施例56为根据实施例45至55中任一项的药物制剂，其中该药用赋形剂进一步包含水、醇、糖、缓冲剂、表面活性剂、稳定剂或其组合。[0071]实施例57为根据实施例45至56中任一项的药物制剂，其中该聚山梨醇酯20组合物的这些脂肪酸酯包含大于或等于3％、或大于或等于3.5％、或大于或等于4％、或大于或等于4.6％且小于或等于6.6％的辛酸酯。[0072]实施例58为根据实施例45至57中任一项的药物制剂，其中该聚山梨醇酯20组合物的这些脂肪酸酯包含大于或等于2.6％、或大于或等于3％、或大于或等于3.5％、或大于或等于4％、或大于或等于4.4％且小于或等于6.4％的癸酸酯。[0073]实施例59为根据实施例45至58中任一项的药物制剂，其中该聚山梨醇酯20组合物的这些脂肪酸酯包含大于或等于56％、大于或等于57％、大于或等于58％且小于或等于60％的月桂酸酯。[0074]实施例60为根据实施例45至59中任一项的药物制剂，其中该聚山梨醇酯20组合物的这些脂肪酸酯包含大于或等于14.1％且小于或等于18％、或小于或等于17％、或小于或等于16％、或小于或等于15％的肉豆蔻酸酯。[0075]实施例61为根据实施例45至60中任一项的药物制剂，其中该聚山梨醇酯20组合物的这些脂肪酸酯包含大于或等于7％且小于10.9％、或小于或等于10％、或小于或等于9％、或小于或等于8％的棕榈酸酯。[0076]实施例62为根据实施例45至61中任一项的药物制剂，其中该聚山梨醇酯20组合物的这些脂肪酸酯包含小于或等于2％或小于或等于1.5％或小于或等于1％的硬脂酸酯。[0077]实施例63为根据实施例45至62中任一项的药物制剂，其中该聚山梨醇酯20组合物的这些脂肪酸酯包含不可检测的硬脂酸酯。[0078]实施例64为根据实施例45至63中任一项的药物制剂，其中该聚山梨醇酯20组合物的这些脂肪酸酯包含1％或更少的己酸酯、约4.6％的辛酸酯、约4.8％的癸酸酯、约57.0％的月桂酸酯、约16.2％的肉豆蔻酸酯、约9.4％的棕榈酸酯且不包含可检测的硬脂酸酯。[0079]实施例65为根据实施例45至63中任一项的药物制剂，其中该聚山梨醇酯20组合物的这些脂肪酸酯包含1％或更少的己酸酯、3.7％至5.2％的辛酸酯、3.7％至5.2％的癸酸酯、56.3％至57.2％的月桂酸酯、15.9％至17.0％的肉豆蔻酸酯、8.8％至9.8％的棕榈酸酯且不包含可检测的硬脂酸酯。[0080]实施例66为根据实施例45至63中任一项的药物制剂，其中该聚山梨醇酯20组合物的这些脂肪酸酯包含1％或更少的己酸酯、3.5％至5.5％的辛酸酯、3.5％至5.5％的癸酸酯、55％至58％的月桂酸酯、15％至17.5％的肉豆蔻酸酯、8.5％至10％的棕榈酸酯以及约0.1％或更少的硬脂酸酯。[0081]实施例67为根据实施例45至66中任一项的药物制剂，其中该聚山梨醇酯20组合物的这些脂肪酸酯进一步包含大于或等于5.8％且小于或等于9.8％的油酸酯以及小于或等于2.0％的亚油酸酯。[0082]实施例68为根据实施例45至67中任一项的制剂，该制剂当与包含经受相同储存条件的标准聚山梨醇酯20组合物的制剂相比时，包含更少的由脂肪酸酯降解产生的游离脂肪酸颗粒。[0083]实施例69为根据实施例45至68中任一项的制剂，其进一步包含高级酯降解药物产品，其中与在包含另外具有相同含量且在相同条件下储存的标准聚山梨醇酯20组合物的hoe降解药物产品制剂中相比，在观测到游离脂肪酸颗粒形成之前，多至超过10％的脂肪酸酯可降解为游离脂肪酸。[0084]实施例70为根据实施例45至69中任一项的制剂，其中通过游离脂肪酸的金属成核作用所产生的游离脂肪酸颗粒数量少于通过包含另外地含量和储存条件相同的标准聚山梨醇酯20组合物的制剂中的游离脂肪酸的金属成核作用所产生游离脂肪酸颗粒数量。[0085]实施例71为根据实施例33至70中任一项的组合物或制剂，其中游离脂肪酸是通过这些脂肪酸酯的水解降解和/或氧化降解而产生。[0086]实施例72为根据实施例33至70中任一项的组合物或制剂，其中脂肪酸酯的降解导致相对于包含标准聚山梨醇酯20组合物的组合物或制剂中的游离脂肪酸颗粒形成而言延迟的游离脂肪酸颗粒形成。[0087]实施例73为根据实施例72的组合物或制剂，其中这些游离脂肪酸颗粒是可见的。[0088]实施例74为根据实施例72的组合物或制剂，其中这些游离脂肪酸颗粒是亚可见的。[0089]额外目的和优点将部分地在以下描述中阐述，并且部分地将从该描述中显而易见，或可通过实践习得。这些目的和优点将通过所附权利要求书中特别指出的要素和组合来实现和获得。[0090]应理解，前述一般描述和以下详细描述均仅为示例性和说明性的，并且不限制权利要求书。并入本说明书中且构成本说明书的一部分的附图示出几个实施例，且与本说明一起用于阐释本文所描述的某些原理。附图说明[0091]图1示出改性hpps20的脂肪酸酯(fae)规格(在虚线矩形区域中)，这些规格显示为usp规格范围(在开放矩形区域中)的子集。改性hpps20的fae目标水平以带点圆圈显示，且hpps20对照批次的fae含量以开放圆圈显示。[0092]图2示出通过反相uhplc测量的纯ps20的酯分布。单酯在5分钟与15分钟之间提早洗脱，而较高级(二和三)酯(hoe)在15分钟与20分钟之间洗脱。[0093]图3a示出如通过反相ms测量的改性hpps20批次1-3并且hpps20对照批次的1％(w/v)ps20中的未结合游离脂肪酸浓度(μg/ml)。[0094]图3b示出如通过icp-ms测量的改性hpps20批次1-3并且hpps20对照批次的10％(w/v)ps20中的金属al、cr、fe和ni(ppb)的痕量金属分析结果。在10％ps20溶液中测量痕量金属。al、cr、fe和ni含量高于1ppb定量极限(loq)，而如铜的其他金属含量低于loq。[0095]图4a-4d示出经非固定化酶南极假丝酵母脂肪酶b(candidaantarcticalipaseb，calb)和洋葱假单胞菌脂肪酶(pseudomonascepacialipase，pcl)降解的改性hpps20批次1和hpps20对照批次的ps20的利用反相uhplc的酯分布。图4a示出calb对改性hpps20批次1的影响。图4b示出pcl对改性hpps20批次1的影响。图4c示出calb对hpps20对照的影响。图4d示出pcl对hpps20对照的影响。单酯在5分钟与15分钟之间提早洗脱，而高级(二和三)酯在15分钟与20分钟之间洗脱。calb优先降解单酯，而pcl主要靶向ps20的高级酯。[0096]图5a-5b示出在含有酶的组氨酸乙酸盐缓冲液中非固定化酶对ps20的降解。ps20浓度(％w/v)由混合模式hplcelsd测定，而亚可见(≥2μm)颗粒计数由光阻法测定。图5a示出经calb降解的改性hpps20和hpps20。图5b示出经pcl降解的改性hpps20。[0097]图6示出实时5℃稳定性研究，该研究比较mab-b、c和d的快速降解药物产品制剂中的改性hpps20和hpps20的ffa颗粒形成。随时间推移的ps20浓度由混合模式hplcelsd测量。通过反相ms测量硬脂酸、棕榈酸和肉豆蔻酸生成。通过流动成像显微术执行亚可见(≥2μm)颗粒测量。每周执行目视检查和强化目视检查。可见颗粒的存在由箭头表示。vp＝利用黑白背景下目视检查的可见颗粒；evi＝增强目视检查。[0098]图7a-7f示出使用mab-b、c和d的快速降解dp制剂降解改性hpps20批次1的ps20和hpps20对照批次上的ps20的实时5℃稳定性研究开始(t0)和结束(12周)时的酯分布的反相uhplc测量结果。图7a示出mab-b对改性hpps20批次1的影响；图7b示出mab-c对改性hpps20批次1的影响；图7c示出mab-d对改性hpps20批次1的影响；图7d示出mab-b对hpps20对照批次的影响；图7e示出mab-c对hpps20对照批次的影响；图7f示出mab-d对hpps20对照批次的影响。单酯在12分钟与22分钟之间提早洗脱，而高级酯(二酯和三酯)在22分钟与30分钟之间洗脱。[0099]图8a-8c示出在14周时测量的实时5℃稳定性研究的mab-b组中识别为游离脂肪酸的可见颗粒和亚可见浆料。图8a示出mab-b改性hpps20批次1的颗粒图像，并且图8b示出mab-b改性hpps20的颗粒图像。图8c示出使用ft-ir光谱法的经过滤颗粒的归一化吸收光谱(任意单位)。mab-c和mab-d获得类似结果(数据未显示)。[0100]图9示出在比较改性hpps20与hpps20之间的ffa颗粒形成的5℃药物产品稳定性研究的14周时间点测量的颗粒(不溶性部分)中的游离脂肪酸(ffa)分布。将样品过滤、重悬并且通过反相ms进行分析。在三种制剂中，mab-d的ffa颗粒最晚出现。因此，在14周时，与mab-b和c制剂相比，mab-d制剂中的颗粒的ffa分布最能代表颗粒出现时的初始ffa分布。一式两份执行ffa测量，且范围由误差线表示。具体实施方式[0101]a.定义[0102]除非另有定义，否则结合本公开使用的科学和技术术语应具有本领域普通技术人员通常理解的含义。此外，除非上下文另有要求，否则单数术语应包括复数且复数术语应包括单数。[0103]在本技术中，除非另有说明，否则所用的“或”是指“和/或”。在多项从属权利要求的上下文中，所用的“或”仅以替代形式重新提及多于一个前述独立或从属权利要求。同样，除非另有具体说明，否则诸如“要素”或“组分”等术语涵盖包含一个单元的要素和组分以及包含多于一个子单元的要素和组分两种情况。[0104]如本文所述，除非另有指示，否则任何浓度范围、百分比范围、比率范围或整数范围应理解为包括于所引述范围及(在适当时)其分数部分(诸如整数的十分之一和百分之一)内的任何整数值。[0105]单位、前缀、和符号是以其国际单位制(systèmeinternationaldeunite，si)接受的形式来表示。数值范围包括定义该范围的数字。考虑到有效数字和与测量相关的误差，测量值应理解为近似的。[0106]除非另有规定，否则如本文所用的制剂中的ps20百分比(“％”)为重量与体积(“w/v”)百分比。且除非另有特别说明，否则ps20组合物内的个别脂肪酸百分比(“％”)为如使用用于测量ps20组合物中的脂肪酸组成的usp/ep方法所测定的气相色谱中的峰面积百分比。[0107]如本文所用的“聚山梨醇酯20”或“ps20”指在添加月桂酸之前通过山梨醇乙氧化形成的聚山梨醇酯型非离子表面活性剂。聚山梨醇酯20(ps20)可用于例如防止药物制剂或其他类型的制剂中的生物医药聚集。ps20为不同脂肪酸酯的结构可变的混合物或分布，其中这些脂肪酸酯中的每一个可为单酯或高级酯hoe。“标准ps20组合物”为符合药典标准(参见例如上表a)但不符合例如如在本文图1中所提供的本文所公开的规格的聚山梨醇酯20批次。hpps20为标准ps20的一实例。[0108]如本文所用的“脂肪酸酯”指由脂肪酸与醇的组合产生的一类酯，其中脂肪酸为具有长脂族链的饱和或不饱和羧酸。脂肪酸可具备具有偶数个，例如4至28个碳原子的非分支链。[0109]如本文所用的“游离脂肪酸”或“ffa”指脂肪酸酯的长脂族链部分。ffa例如通过脂肪酸酯降解产生。游离脂肪酸可保持溶解或可聚集以形成聚集体或颗粒。[0110]也称为己酸的如本文所用的“己酸”指具有化学式ch3(ch2)4cooh的衍生自己烷的羧酸。这种酸的碳链长度为六(c6)。癸酸的盐和酯称为“己酸盐/酯”。[0111]也称为辛酸的如本文所用的“辛酸”指具有结构式ch3(ch2)6cooh的饱和脂肪酸和羧酸。这种酸的碳链长度为八(c8)。癸酸的盐和酯称为“辛酸盐/酯”。[0112]也称为癸酸的如本文所用的“癸酸”指具有式ch3(ch2)8cooh的饱和脂肪酸。这种酸的碳链长度为十(c10)。癸酸的盐和酯称为“癸酸盐/酯”。[0113]也称为十二酸的如本文所用的“月桂酸”指具有式ch3(ch2)10cooh的饱和脂肪酸。这种酸的碳链长度为十二(c12)。月桂酸的盐和酯称为“月桂酸盐/酯”。[0114]如本文所用的“肉豆蔻酸”指具有分子式ch3(ch2)12cooh的饱和脂肪酸。这种酸的碳链长度为十四(c14)。其盐和酯通常称为“肉豆蔻酸盐/酯”或“十四酸盐/酯”。[0115]也称为十六酸的如本文所用的“棕榈酸”指具有化学式ch3(ch2)14cooh的饱和脂肪酸。这种酸的碳链长度为十六(c16)。癸酸的盐和酯称为“棕榈酸盐/酯”。[0116]也称为十八酸的如本文所用的“硬脂酸”指具有化学式ch3(ch2)16cooh的饱和脂肪酸。这种酸的碳链长度为十八(c18)。硬脂酸的盐和酯称为“硬脂酸盐/酯”。[0117]如本文所用的“油酸”指具有化学式ch3(ch2)7ch＝ch(ch2)7cooh的脂肪酸。这种酸的碳链长度为十八个碳原子一个不饱和点(c18:1)。硬脂酸的盐和酯称为“油酸盐/酯”。[0118]如本文所用的“亚油酸”指具有化学式cooh(ch2)7ch＝chch2ch＝ch(ch2)4ch3的饱和脂肪酸。这种酸的碳链长度为十八个碳原子和两个不饱和点(c18:2)。硬脂酸的盐和酯称为“亚油酸盐/酯”。[0119]如本文所用的“高级酯”指聚山梨醇酯20的聚氧乙烯链的二酯、三酯和至多四酯形式，此与具有一个的“单酯”形式相反。聚山梨醇酯20的四个聚氧乙烯链中的每一个均可经脂肪酸酯化，从而产生呈混合物形式的单酯和高级酯。高级酯(hoe)聚山梨醇酯20种类可具有脂肪酸酯的任何组合，并且不限于每个分子仅一种类型的脂肪酸酯。各山梨醇环可经约20摩尔当量乙氧基化。另外，聚山梨醇酯20首基可为山梨醇或异山梨醇环，后者产生仅两个可经脂肪酸酯化的聚氧乙烯链。ps20组合物的hoe含量可使用聚山梨酸酯分布分析来定量。(参见例如图2)。[0120]如本文所用的“高级酯降解药物产品”或“hoe降解药物产品”指在超高效反相液相色谱分析中如使用聚山梨醇酯分布分析所识别，使ps20中的hoe峰面积相对于单酯峰面积而言随时间推移减小的任何药物产品。(参见例如图2和图7a-f)[0121]如本文所用的“聚集体”和“聚集”是指聚在一起或收集成一团或整体，例如如在游离脂肪酸链的聚集中。所聚集的游离脂肪酸链在本文中也可称为颗粒或ffa颗粒。聚集体可为自聚集的或由于其他因素而聚集，这些因素例如为聚集剂、沉淀剂、搅拌或使游离脂肪酸链聚在一起的其他手段和方法的存在。“易于聚集”的化合物为已经观测到与其他分子一起聚集，尤其在搅拌时与其他分子一起聚集的化合物。聚集可诸如当溶液中的先前澄清的制剂变得混浊或含有沉淀物时目视观测到，或通过诸如按尺寸分离分子的尺寸排阻色谱法(sec)的方法观测到。聚集可产生亚可见ffa颗粒，这些颗粒可使用光阻法或流动成像显微术来定量。[0122]如本文所用的“药物”指用于药物制剂中的任何种类的活性成分。药物可为，例如包含诸如抗体、抗体片段、酶或肽的蛋白质。[0123]术语“蛋白质”指任何长度的氨基酸的聚合物。聚合物可以是直链或支链的，它可以包含经修饰的氨基酸，并且它可以被非氨基酸中断。该术语还涵盖经天然方式或通过干预修饰的氨基酸聚合物；干预例如为二硫键形成、糖基化、脂化、乙酰化、磷酸化或诸如与标记组分的结合的任何其他操作或修饰。定义内还包括例如含有一或多种氨基酸类似物(包括例如非天然氨基酸等)的蛋白质以及本领域已知的其他修饰。[0124]如本文所用的术语“抗体”包括单克隆抗体(包括具有免疫球蛋白fc区的全长抗体)、具有多表位特异性的抗体组合物、多特异性抗体(例如双特异性抗体、双体抗体和单链分子)以及抗体结合片段(例如fab、f(ab')2和fv)。术语“抗体”包括“抗体片段”和“抗原结合片段”。“抗体片段”或“抗原结合片段”包含完整抗体的一部分，该部分包括完整抗体的抗原结合部分和/或可变区并且与抗原特异性结合。抗体片段的实例包括fab、fab'、f(ab')2和fv片段；双体抗体；线性抗体(参见美国专利第5,641,870号，实例2；zapata等人，proteineng.8(10):1057-1062[1995])；单链抗体分子和由抗体片段形成的多特异性抗体。[0125]如本文所用的“酶”指催化化学反应的任何蛋白质。酶的催化功能构成其活性或酶活性。酶通常根据例如肽键水解的其所实施的催化功能的类型进行分类。[0126]“制剂”指除了其他成分之外，诸如蛋白质、缓冲剂、稳定剂等的可包含ps20的成分混合物。在一些情况下，制剂为诸如水溶液的液体溶液，而在其他情况下，其可能经冻干。术语“药物制剂”或“治疗性制剂”或“治疗性制备物”或类似术语指包含至少一种活性成分和至少一种额外组分或赋形剂物质的制备物或组合物，并且其形式使得准许活性成分的生物活性在哺乳动物个体中有效，并且其“适用于治疗用途”或“适用于药物用途”，这意味着整个制剂对哺乳动物个体不具有不可接受的毒性并且不包含有对施用制剂的哺乳动物个体具有不可接受的毒性或其浓度使其对个体具有不可接受的毒性的组分。[0127]如本文所用的“稳定”制剂为在储存时保持其物理和/或化学稳定性的制剂。可在所选温度下在所选时间段内测量稳定性。储存期间例如可见和/或亚可见颗粒制剂的颗粒形成程度或聚集程度或降解产物形成程度或这些因素的任何组合可例如用作稳定性的指标。[0128]增加含药物制剂的“稳定性”可涉及减少(与非改性含药物制剂相比)或防止该制剂中形成聚集体；或减少或防止该制剂中形成可见和/或亚可见颗粒；或减少或防止该制剂的组分的降解产物，以使得其他组分可继续起作用以便维持药物稳定性。[0129]术语“稳定剂”指稳定诸如蛋白质和抗体的大型带电生物分子的试剂。在一些情况下，表面活性剂或张力剂可充当稳定剂。[0130]如本文所用的“表面活性剂”指表面活性剂，优选非离子表面活性剂。本文的表面活性剂的实例包括聚山梨醇酯(例如聚山梨醇酯20和聚山梨醇酯80)；泊洛沙姆(例如泊洛沙姆188)；triton；十二烷基硫酸钠(sds；月桂基硫酸钠；辛基糖苷钠；月桂基、肉豆蔻基、亚油基或硬脂酰磺基甜菜碱；月桂基、肉豆蔻基、亚油基或硬脂酰肌氨酸；亚油基、肉豆蔻基或十六烷基甜菜碱；月桂酰氨基丙基、椰油酰胺丙基、亚油酰胺丙基、肉豆蔻基丙基、棕榈酰氨基丙基或异硬脂酰胺丙基甜菜碱(例如，月桂酰胺丙基)；肉豆蔻基胺丙基、棕榈酰丙基或异硬脂酰胺丙基-二甲基胺；甲基椰油酰基钠或甲基油基-牛磺酸二钠；和monaquat.tm.系列(monaindustries公司,paterson,n.j.)；聚乙二醇、聚丙二醇以及乙烯与丙二醇的共聚物诸如pluronics或pf68)；等等。[0131]术语“张力剂”指用于调节或维持溶液相对浓度的试剂。张力剂的实例包括多元糖醇，诸如三元或更多元糖醇，例如甘油、赤藓糖醇、阿拉伯糖醇、木糖醇、山梨醇和甘露醇。[0132]如本文所用的“缓冲剂”指通过酸-碱共轭成分的作用来抵抗ph变化的溶液。[0133]“无菌”制剂是无菌的或不包含或基本上不包含所有活的微生物及其孢子。[0134]b.ps20组合物[0135]在不希望受任何特定理论束缚的情况下，在ps20中具有较高浓度的肉豆蔻酸酯(c14)、棕榈酸酯(c16)和硬脂酸酯(c18:0)的长链脂肪酸酯的ps20组合物可更容易形成可见颗粒和亚可见颗粒。脂肪酸酯降解导致游离脂肪酸(ffa)形成。因此，包含较少长链脂肪酸酯的ps20组合物可不太容易形成可见ffa颗粒和亚可见ffa颗粒。[0136]在一些实施例中，本文提供的ps20组合物包含较低浓度的硬脂酸酯、棕榈酸酯和肉豆蔻酸酯，同时保持在usp/ep/jp规格内。在一些实施例中，硬脂酸酯水平可自市售制剂中的～5％-6％降低至～0％。在一些实施例中，富集一定浓度的短链脂肪酸酯(即碳链长度为c6、c8、c10和c12的脂肪酸酯)，而最少化或稀释长链脂肪酸酯(即碳链长度为c14、c16和c18的脂肪酸酯)。[0137]本文提供包含1％或更少的己酸酯、大于2.3％且小于或等于10％的辛酸酯、大于2.8％且小于或等于10％的癸酸酯、大于52.1％且小于或等于60％的月桂酸酯、大于或等于14％且小于18.3％的肉豆蔻酸酯、大于或等于7％且小于11.9％的棕榈酸酯以及小于6.4％的硬脂酸酯的聚山梨醇酯20组合物。[0138]在一些实施例中，该组合物包含大于2.5％或大于3.5％或大于4％或大于或等于4.6％且小于或等于10％的辛酸酯。[0139]在一些实施例中，该组合物包含大于3％或大于3.5％或大于4％或大于或等于4.4％且小于或等于10％的癸酸酯。[0140]在一些实施例中，该组合物包含大于53％、大于55％、大于57％、大于或等于58％且小于或等于60％的月桂酸酯。[0141]在一些实施例中，该组合物包含大于或等于14％且小于18％或小于17％或小于16.5％或小于或等于16.1％的肉豆蔻酸酯。[0142]在一些实施例中，该组合物包含大于或等于7％且小于11％或小于10％或小于9.5％或小于或等于8.9％的棕榈酸酯。[0143]在一些实施例中，该组合物包含小于6％或小于5％或小于1％的硬脂酸酯。[0144]在一些实施例中，该组合物包含不可检测的硬脂酸酯。[0145]在一些实施例中，本文提供包含脂肪酸酯的聚山梨醇酯20组合物，其包含1.0％或更少的己酸酯、大于或等于2.6％且小于或等于6.6％的辛酸酯、大于或等于2.4％且小于或等于6.4％的癸酸酯、大于或等于55.0％且小于或等于60.0％的月桂酸酯、大于或等于14.1％且小于或等于18.1％的肉豆蔻酸酯、大于或等于7.0％且小于或等于10.9％的棕榈酸酯以及小于或等于2.0％的硬脂酸酯。[0146]在一些实施例中，该组合物包含大于或等于3％、或大于或等于3.5％、或大于或等于4％、或大于或等于4.6％且小于或等于6.6％的辛酸酯。[0147]在一些实施例中，该组合物包含大于或等于2.6％、或大于或等于3％、或大于或等于3.5％、或大于或等于4％、或大于或等于4.4％且小于或等于6.4％的癸酸酯。[0148]在一些实施例中，该组合物包含大于或等于56％、大于或等于57％、大于或等于58％且小于或等于60％的月桂酸酯。[0149]在一些实施例中，该组合物包含大于或等于14.1％且小于或等于18％、或小于或等于17％、或小于或等于16％且小于或等于15％的肉豆蔻酸酯。[0150]在一些实施例中，该组合物包含大于或等于7％且小于10.9％、或小于或等于10％、或小于或等于9％、或小于或等于8％的棕榈酸酯。[0151]在一些实施例中，该组合物包含小于或等于2％或小于或等于1.5％或小于或等于1％的硬脂酸酯。在一些实施例中，该组合物包含不可检测的硬脂酸酯。如权利要求1的组合物，其包含1％或更少的己酸酯、约4.6％的辛酸酯、约4.8％的癸酸酯、约57.0％的月桂酸酯、约16.2％的肉豆蔻酸酯、约9.4％的棕榈酸酯且不包含可检测的硬脂酸酯。[0152]在一些实施例中，该组合物包含1％或更少的己酸酯、3.7％至5.2％的辛酸酯、3.7％至5.2％的癸酸酯、56.3％至57.2％的月桂酸酯、15.9％至17.0％的肉豆蔻酸酯、8.8％至9.8％的棕榈酸酯且不包含可检测的硬脂酸酯。[0153]在一些实施例中，该组合物包含1％或更少的己酸酯、3.5％至5.5％的辛酸酯、3.5％至5.5％的癸酸酯、55％至58％的月桂酸酯、15％至17.5％的肉豆蔻酸酯、8.5％至10％的棕榈酸酯以及约0.1％或更少的硬脂酸酯。[0154]在一些实施例中，该组合物进一步包含另外的大于或等于5.8％且小于或等于9.8％的油酸酯以及小于或等于2.0％的亚油酸酯。[0155]在一些实施例中，该组合物包含1％或更少的己酸酯、约4.6％的辛酸酯、约4.4％的癸酸酯、约58％的月桂酸酯、约16.1％的肉豆蔻酸酯、约8.9％的棕榈酸酯且不包含可检测的硬脂酸酯。[0156]在一些实施例中，该组合物包含1％或更少的己酸酯、4.2％至5.1％的辛酸酯、4.0％至4.8％的癸酸酯、52％至60％的月桂酸酯、14.5％至17.7％的肉豆蔻酸酯、8.0％至9.8％的棕榈酸酯且不包含可检测的硬脂酸酯。[0157]在一些实施例中，该组合物包含1％或更少的己酸酯、4.4％至4.8％的辛酸酯、4.2％至4.6％的癸酸酯、55％至60％的月桂酸酯、15.3％至16.9％的肉豆蔻酸酯、8.5％至9.3％的棕榈酸酯且不包含可检测的硬脂酸酯。[0158]在一些实施例中，该组合物包含1％或更少的己酸酯、4.5％至4.7％的辛酸酯、4.3％至4.5％的癸酸酯、56.8％至59.1％的月桂酸酯、15.8％至16.4％的肉豆蔻酸酯、8.7％至9.1％的棕榈酸酯且不包含可检测的硬脂酸酯。[0159]c.制剂[0160]本文还提供包含至少一种药物和至少一种药用赋形剂的药物制剂，其中药用赋形剂包含有包含如上所述的脂肪酸酯的聚山梨醇酯20组合物。因此，在一些制剂中，该制剂包含聚山梨醇酯20组合物，其中聚山梨醇酯20组合物的脂肪酸酯包含1％或更少的己酸酯、大于2.3％且小于或等于10％的辛酸酯、大于2.8％且小于或等于10％的癸酸酯、大于52.1％且小于或等于60％的月桂酸酯、大于或等于14％且小于18.3％的肉豆蔻酸酯、大于或等于7％且小于11.9％的棕榈酸酯以及小于6.4％的硬脂酸酯。在其他制剂中，该制剂包含有包含脂肪酸酯的聚山梨醇酯20组合物，其中聚山梨醇酯20组合物的脂肪酸酯包含：1.0％或更少的己酸酯、大于或等于2.6％且小于或等于6.6％的辛酸酯、大于或等于2.4％且小于或等于6.4％的癸酸酯、大于或等于55.0％且小于或等于60.0％的月桂酸酯、大于或等于14.1％且小于或等于18.1％的肉豆蔻酸酯、大于或等于7.0％且小于或等于10.9％的棕榈酸酯以及小于或等于2.0％的硬脂酸酯。[0161]在一些实施例中，包括一或多种额外药用赋形剂。在其他实施例中，制剂基本上由至少一种药物和聚山梨醇酯20组合物组成。[0162]在一些实施例中，至少一种药物包含诸如抗体、抗体片段、酶或肽的蛋白质。[0163]在药物制剂的一些实施例中，药物的浓度为制剂的0.1％至30％(w/v)，诸如1％至30％、5％至30％、5％至25％、5％至20％、5％至10％、10％至30％、10％至25％、10％至20％或15％至25％(w/v)。[0164]在本文的药物制剂中，总表面活性剂浓度可为0.001％至1％、0.001％至0.5％、0.005％至0.2％、0.01％至0.1％或0.02％至0.06％或0.03％至0.05％。在一些实施例中，总表面活性剂浓度为制剂的0.01％至1％(w/v)，诸如0.01％至0.5％、0.01％至0.25％、0.01％至0.12％或0.01％至0.2％(w/v)。在本文的药物制剂中，聚山梨醇酯20浓度可为0.001％至1％、0.005％至0.2％、0.01％至0.1％或0.02％至0.06％或0.03％至0.05％。在一些实施例中，聚山梨醇酯20组合物为制剂的0.01％至1％(w/v)，诸如0.01％至0.5％、0.01％至0.25％、0.01％至0.12％或0.01％至0.2％(w/v)。[0165]在药物制剂的一些实施例中，聚山梨醇酯20组合物占制剂的0.01％至0.2％、0.01％至0.12％、0.01％至0.08％、0.03％至0.1％或0.04％至0.07％(w/v)。[0166]在药物制剂的一些实施例中，聚山梨醇酯20组合物占该制剂的约0.01％、0.02％、0.03％、0.04％、0.05％、0.06％、0.07％、0.08％、0.09％、0.10％、0.11％或0.12％(w/v)。[0167]在药物制剂的一些实施例中，聚山梨醇酯20组合物是制剂的约0.06％(w/v)。[0168]在药物制剂的一些实施例中，ph为4至8、或5至7.5、或6.5至7.5、或6.8至7.2。[0169]在一些实施例中，药物制剂中的聚山梨醇酯20组合物包含大于2.5％或大于3.5％或大于4％或大于或等于4.6％且小于或等于10％的辛酸酯。[0170]在一些实施例中，药物制剂中的聚山梨醇酯20组合物包含大于或等于3％、或大于或等于3.5％、或大于或等于4％、或大于或等于4.6％且小于或等于6.6％的辛酸酯。[0171]在一些实施例中，药物制剂中的聚山梨醇酯20组合物包含大于3％或大于3.5％或大于4％或大于或等于4.4％且小于或等于10％的癸酸酯。[0172]在一些实施例中，药物制剂中的聚山梨醇酯20组合物包含大于或等于2.6％、或大于或等于3％、或大于或等于3.5％、或大于或等于4％、或大于或等于4.4％且小于或等于6.4％的癸酸酯。[0173]在一些实施例中，药物制剂中的聚山梨醇酯20组合物包含大于53％、大于55％、大于57％、大于或等于58％且小于或等于60％的月桂酸酯。[0174]在一些实施例中，药物制剂中的聚山梨醇酯20组合物包含大于或等于56％、大于或等于57％、大于或等于58％且小于或等于60％的月桂酸酯。[0175]在一些实施例中，药物制剂中的聚山梨醇酯20组合物包含大于或等于14％且小于18％或小于17％或小于16.5％或小于或等于16.1％的肉豆蔻酸酯。[0176]在一些实施例中，药物制剂中的聚山梨醇酯20组合物包含大于或等于14.1％且小于或等于18％、或小于或等于17％、或小于或等于16％、或小于或等于15％的肉豆蔻酸酯。[0177]在一些实施例中，药物制剂中的聚山梨醇酯20组合物包含大于或等于7％且小于11％或小于10％或小于9.5％或小于或等于8.9％的棕榈酸酯。[0178]在一些实施例中，药物制剂中的聚山梨醇酯20组合物包含大于或等于7％且小于10.9％、或小于或等于10％、或小于或等于9％、或小于或等于8％的棕榈酸酯。[0179]在一些实施例中，药物制剂中的聚山梨醇酯20组合物包含小于6％或小于5％或小于1％的硬脂酸酯。在一些实施例中，药物制剂中的聚山梨醇酯20组合物包含小于或等于2％、或小于或等于1.5％、或小于或等于1％的硬脂酸酯。在一些实施例中，药物制剂中的聚山梨醇酯20组合物包含不可检测的硬脂酸酯。[0180]在一些实施例中，药物制剂中的聚山梨醇酯20组合物包含1％或更少的己酸酯、约4.6％的辛酸酯、约4.4％的癸酸酯、约58％的月桂酸酯、约16.1％的肉豆蔻酸酯、约8.9％的棕榈酸酯且不包含可检测的硬脂酸酯。[0181]在一些实施例中，药物制剂中的聚山梨醇酯20组合物包含1％或更少的己酸酯、约4.6％的辛酸酯、约4.8％的癸酸酯、约57.0％的月桂酸酯、约16.2％的肉豆蔻酸酯、约9.4％的棕榈酸酯且不包含可检测的硬脂酸酯。[0182]在一些实施例中，药物制剂中的聚山梨醇酯20组合物包含1％或更少的己酸酯、3.7％至5.2％的辛酸酯、3.7％至5.2％的癸酸酯、56.3％至57.2％的月桂酸酯、15.9％至17.0％的肉豆蔻酸酯、8.8％至9.8％的棕榈酸酯且不包含可检测的硬脂酸酯。[0183]在一些实施例中，药物制剂中的聚山梨醇酯20组合物包含1％或更少的己酸酯、3.5％至5.5％的辛酸酯、3.5％至5.5％的癸酸酯、55％至58％的月桂酸酯、15％至17.5％的肉豆蔻酸酯、8.5％至10％的棕榈酸酯以及约0.1％或更少的硬脂酸酯。[0184]在一些实施例中，药物制剂中的聚山梨醇酯20组合物进一步包含大于或等于5.8％且小于或等于9.8％的油酸酯以及小于或等于2.0％的亚油酸酯。[0185]在药物制剂的一些实施例中，药用赋形剂进一步包含水、醇、糖、缓冲剂、表面活性剂、稳定剂或其组合。在一些实施例中，包含本文所公开的ps20组合物的水性制剂可进一步包含一或多种选自稳定剂、缓冲剂、表面活性剂和张力剂的赋形剂。本发明的水性制剂可在ph缓冲溶液中制备。可用于本文所公开的制剂中的缓冲剂可具有在约ph4.5至约9.0范围内的ph。在某些实施例中，ph在约ph4.5至约7.0范围内，在约ph4.5至约6.5范围内，在约ph4.5至约6.0范围内，在约ph4.5至约5.5范围内，在约ph4.5至约5.0范围内，在约ph5.0至约7.0范围内，在约ph5.5至约7.0范围内，在约ph5.7至约6.8范围内，在约ph5.8至约6.5范围内，在约ph5.9至约6.5范围内，在约ph6.0至约6.5范围内，或在约ph6.2至约6.5范围内。在某些实施例中，液体制剂具有在约4.7至约5.2范围内、在约5.0至约6.0范围内或在约5.2至约5.8范围内的ph。[0186]可将ph控制在此范围内的缓冲剂的实例包括有机酸和无机酸以及其盐。例如，乙酸盐(例如组氨酸乙酸盐、精氨酸乙酸盐、乙酸钠)、琥珀酸盐(例如组氨酸琥珀酸盐、精氨酸琥珀酸盐、琥珀酸钠)、葡萄糖酸盐、磷酸盐、富马酸盐、草酸盐、乳酸盐、柠檬酸盐及其组合。取决于例如缓冲液和制剂的期望等渗性，缓冲液浓度可为约1mm至约600mm。[0187]可任选地将额外表面活性剂添加至药物制剂中。示例性的额外表面活性剂包括诸如泊洛沙姆(例如泊洛沙姆188等)的非离子表面活性剂。例如，可添加的表面活性剂的总量使得其可减少所调配药物的聚集和/或最小化制剂中的微粒形成和/或减少吸附。[0188]考虑到其他成分的相对量，张力剂可以在0.1重量％至25重量％之间或在1重量％至5重量％之间的任何量存在。示例性张力剂包括多元糖醇，诸如三元或更多元糖醇，诸如甘油、赤藓糖醇、阿拉伯糖醇、木糖醇、山梨醇和甘露醇。[0189]在一些实施例中，制剂为用于体内施用的药物制剂。在一些实施例中，制剂为无菌的。在一些实施例中，制剂经冷冻干燥。在一些实施例中，制剂以液体、溶液形式储存。在一些实施例中，制剂以浓缩形式储存并且在使用前经稀释。例如，可经由无菌过滤膜过滤使制剂无菌。本文中的治疗性制剂通常置于具有无菌进入口的容器中，例如，具有可被皮下注射针刺穿的塞子的静脉内溶液袋或小瓶。[0190]d.制备和测试ps20组合物和含有ps20的制剂的方法[0191]已发现市售ps20的某些组合物在储存期(例如t《400天)提早降解，从而在一些情况下在包含ps20的制剂中产生非所需的可见颗粒和亚可见颗粒。[0192]可使用此项技术中已知的方法制备具有一定浓度的本文所述的硬脂酸酯、棕榈酸酯和肉豆蔻酸酯且在usp/ep/jp规格内的聚山梨醇酯20组合物。[0193]测定脂肪酸酯分布的方法可例如在europeanpharmacopeia10.0rev01/2017:0426:polysorbate20第3589-3590页中找到。例如，该文件描述用于测定ps20中的脂肪酸组成的方法(2.4.22,methodc)。方法也可在usp的interimrevisionannouncement(官方2014年9月1日)polysorbate20部分中找到，参考fatsandfixedoils(401),fattyacidcomposition。[0194]用于测定游离脂肪酸浓度的方法可例如在tomlinsona,等人molecularpharmaceutics.中找到。2015；12(11):3805-15)。[0195]含有ps20的组合物的稳定性可使用已知方法来测量，这些已知方法包括例如使用市售颗粒计数器对可见颗粒和亚可见颗粒进行可视化和/或成像。例如，聚集可通过尺寸排阻色谱法来评估。且可进行经数小时的诸如搅拌的测试，接着为尺寸排阻色谱法或目视检查。例如，在一些实施例中，可使用在100rpm下持续数小时，例如持续24小时的搅拌来确定制剂中的聚集体或微粒的程度。[0196]在一些情况下，可分析本文提供的组合物的可见颗粒和亚可见颗粒的存在。在一个实施例中，可通过将样品置于玻璃小瓶中并且在廷德尔光(tyndalllight)存在的情况下旋转样品来观测可见颗粒。在一个实施例中，使用高精度(hiac)颗粒计数器来分析亚可见颗粒。在一些实施例中，hiac仪器可配置为10ml/min流速、0.1ml皮重体积和0.4ml样品体积。在特定实施例中，可使用4轮0.4mlsip来分析样品，其中丢弃第一轮各样品以防止归因于样品留存的测量误差。2、5、10、15和25微米的过滤器尺寸可用于分析。[0197]在一些实施例中，可通过测定例如脂肪酸酯分布、酸值、羟值、皂化值、水含量百分比来分析ps20组合物。随后，可将这些值与相关美国药典和/或欧洲药典和/或日本药典规格进行比较。可执行浅梯度分析以测定单酯、二酯和三酯含量。通过脂肪酸质谱法测定ps20组合物中的游离脂肪酸(ffa)含量。可通过电感耦合等离子体质谱(icp-ms)来测试金属离子含量。诸如铝和钙的金属离子可导致游离脂肪酸成核并且增加ps20的氧化电位。[0198]也可对ps20批次执行以下功能和稳定性研究。[0199]小瓶搅拌测试可显示ps20在小瓶中暴露于搅拌压力时保护蛋白质的能力。在一种方法中，缓冲溶液中的测试蛋白质用作易于在空气水界面处聚集的搅拌敏感分子。添加愈来愈高的浓度，诸如0.02％至0.08％的ps20组合物。在室温下以70rpm的转速在摇臂振荡器上搅拌样品24小时。在此时间期间将静态对照置于仪器旁边。通过尺寸排阻超高效液相色谱(se-uhplc)分析各样品以检查搅拌样品和对照样品中的蛋白质聚集和颗粒形成。[0200]也可执行小规模iv袋搅拌测试。此测试的目的在于模拟在自小瓶中移除药物产品并且在输注前稀释于iv袋中之后保护产品所需的ps20浓度。在此测试中，将测试蛋白质稀释于具有各种浓度的ps20的盐水中且例如在回旋振荡器上在180rpm下在5℃下搅拌2小时，并且将静态对照在5℃下冷藏2小时。在盐水中搅拌后分析与小瓶搅拌测试相同的指标(亚可见/可见颗粒形成和聚集)。可测定低于观测到的聚集和/或颗粒的ps20浓度，以在iv袋中的界面保护方面建立可比性或改进。例如，可使用se-uhplc如上所述评估聚集。[0201]也可测试ps20材料的氧化倾向。可例如在40℃下测试用0.2％w/vps20调配的组氨酸乙酸盐安慰剂1个月。预期此测试中的ps20降解的主要机制为氧化性的。在40℃应力温度下加速安慰剂制剂中的ps20氧化降解，这是因为不存在用于淬灭过氧化物的蛋白质。可向测试物中添加10mm甲硫氨酸臂以确保平台稳定剂减少ps20氧化降解。在混合模式蒸发光散射检测器(elsd)中测定的ps20损失用作氧化降解的量度。[0202]例如在已知为降解ps20的试剂存在的情况下在5℃下持续3个月的稳定性测试也可用于理解含有ps20的制剂的ps20降解、ffa生成和颗粒形成倾向。可添加已显示为降解ps20并且预期会在5℃下3个月内使ffa颗粒形成的分子。ffa浓缩和聚集以及颗粒形成可在测试期间诸如每周一次通过上述技术来评估，持续12周。可执行基于酶的ps20降解测试以评估ps20组合物形成ffa颗粒和相关颗粒的倾向。例如，南极假丝酵母脂肪酶b(candidaantarcticalipaseb，calb)特定地降解单酯，而洋葱假单胞菌脂肪酶(pseudomonascepacialipase，pcl)特定地降解高级酯。[0203]可通过将这些酶中的每一个分别添加至ps20组合物中且分析随时间推移的ps20浓度和亚可见颗粒形成来监测ffa颗粒形成。[0204]calb和pcl的酶工作溶液可例如通过以下来制备：将游离酶分别以约0.01u/ml和12.5u/ml溶解至20mm组氨酸乙酸盐缓冲液中，以确保颗粒形成在～3小时内发生。随后，将10％ps20添加至这些酶溶液中达到0.1％w/v的最终浓度。将溶液分到多个填充体积为10ml的15cc小瓶中。在零时测量利用混合模式elsd的ps20浓度及利用hiac的亚可见颗粒，并且此后每30分钟测量一次，总共持续180分钟。[0205]在任何上述分析中，可例如将根据本文揭示内容的ps20组合物与满足更广泛的药典标准(参见例如上表a)但不满足本文所揭示的规格的ps20组合物(“标准ps20”)进行比较。改性hpps20为根据本公开的ps20组合物的实例。hpps20为标准ps20的一实例。[0206]在一些实施例中，在本文所公开的ps20组合物或含有ps20组合物的制剂中，脂肪酸酯的降解导致相对于另外具有相同含量和储存条件但包含标准聚山梨醇酯20组合物的组合物或制剂中的游离脂肪酸颗粒形成而言延迟的游离脂肪酸颗粒形成。[0207]在一些实施例中，提供包含ps20的制剂，其中该制剂当与包含标准聚山梨醇酯20组合物但另外具有相同含量并且经受相同储存条件的制剂相比时，包含较少的由脂肪酸酯降解产生的游离脂肪酸颗粒。[0208]在一些实施例中，本文所公开的制剂进一步包含高级酯(hoe)降解药物产品。在包含hoe降解药物产品的一些实施例中，当使用所要求的ps20组合物时，与在包含另外具有相同含量并且处于相同储存条件下的标准聚山梨醇酯20组合物的hoe降解药物产品制剂中相比，在观测到游离脂肪酸颗粒形成之前，至多大于10％酯化脂肪酸可降解为游离脂肪酸。如使用聚山梨酸酯分布分析所识别，hoe降解药物产品为使ps20中的hoe峰面积随时间推移减小的药物产品。[0209]在一些实施例中，在本文所公开的ps20组合物或含有ps20组合物的制剂中，通过游离脂肪酸的金属成核作用所产生的颗粒数量少于通过标准聚山梨醇酯20组合物或包含另外地含量和储存条件相同的标准聚山梨醇酯20组合物的制剂中的游离脂肪酸的金属成核作用所产生的颗粒数量。[0210]在一些实施例中，本文所公开的ps20组合物或含有ps20组合物的制剂具有少于通过标准聚山梨醇酯20组合物或包含另外地含量和储存条件相同的标准聚山梨醇酯20组合物的制剂中的游离脂肪酸的金属成核作用所产生的颗粒数量的通过游离脂肪酸的金属成核作用所产生的颗粒。[0211]e.试剂盒[0212]在本发明的另一实施例中，提供用于减少聚山梨醇酯降解的试剂盒。在一些实施例中，提供包含本文提供的任何ps20组合物的试剂盒。在一个实施例中，这些试剂盒包含至少一种本文提供的ps20组合物、药物及至少一种药用赋形剂以及用于制备如本文所提供的药用制剂的说明书。[0213]f.模型[0214]ps20的四个poe链中的每一个均可经脂肪酸酯化，从而产生呈混合物形式的ps20的单酯和高级酯(hoe)(二酯、三酯和至多四酯)形式。高级酯(hoe)ps20物质可具有脂肪酸酯的任何组合；其不限于每个分子仅一种类型的脂肪酸酯。各山梨醇环经约20摩尔当量乙氧化。另外，ps20头基可为山梨醇酐或异山梨醇环，后者产生仅两个可经脂肪酸酯化的poe链14,30,31。[0215]在不希望受任何特定理论束缚的情况下，具有较低浓度的高级酯的ps20组合物可更容易形成可见颗粒和亚可见颗粒。脂肪酸酯降解导致游离脂肪酸(ffa)形成。高级酯可促进ffa溶解于包含ps20的制剂中。[0216]在一个方面，本公开还提供可用于例如预测包含聚山梨醇酯20(ps20)的组合物中的游离脂肪酸颗粒形成的方法。这种方法包括例如：[0217]a.确定组合物的ph；[0218]b.确定组合物中的ps20浓度；及[0219]c.确定高级酯对ps20的总峰面积分数；以及[0220]d.使用以下等式计算组合物中的游离脂肪酸酯的溶解度[0221][0222]其中β1为非离子化脂肪酸的溶解度，β2为以实验方式确定的pka，[ps20]为组合物中的ps20浓度，并且hoe为高级酯对ps20的总峰面积分数。[0223]参考以下实例将更全面地理解本发明，但不应将这些实例解释为限制本发明的范围。应理解，本文所描述的示例和实施例仅用于说明目的，且本领域技术人员将提出根据其的各种修改或变化并且这些修改或变化将包括在本技术的精神和范围内以及所附权利要求书的范围内。[0224]实例[0225]实例1.ps20组合物的表征和测试。[0226]以下实验比较两种类型的ps20组合物对游离脂肪酸形成的敏感性：一批hpps20，即符合标准药典规格的标准ps20；以及三批改性hpps20，即满足如本文所述的一组较窄规格的ps20组合物。参见表1和图1。实验包括测试包含ps20组合物的制剂的游离脂肪酸(ffa)颗粒和相关ffa颗粒形成。[0227]a.材料和方法[0228]试剂和材料[0229]单克隆抗体(mab)a、b、c和d为自基因泰克公司(genentechinc.)(southsanfrancisco,ca)获得的cho衍生的单克隆抗体。mab-b和c属于igg1亚类，而mab-d属于igg4亚类。通过包括蛋白质a亲和层析和离子交换层析的一系列层析步骤纯化mab。除非另有规定，否则在低离子强度组氨酸盐酸盐缓冲液中调配30mg/mlmab-a和b，而在不具有表面活性剂或其他赋形剂的高离子强度精氨酸琥珀酸盐缓冲液中分别调配150和180mg/mlmab-c和d。mab制剂的ph范围为5.5-6.0。自croda(edison,nj)购买高纯度tweentm20(hpps20)和改性高纯度tweentm20(改性hpps20)。自ajinomoto(raleigh,nc)获得l-组氨酸、l-精氨酸和组氨酸盐酸盐。自jtbaker(phillipsburg,nj)购买乙酸钠、氯化钠和冰醋酸。自santacruzbiotechnology(dallas,tx)购买丹磺酰基-l-甲硫氨酸环己基铵盐。自sigmaaldrich(st.louis,mo)购买米黑毛霉脂肪酶(mucormieheilipase，mml)、南极假丝酵母脂肪酶(cal)、洋葱假单胞菌脂肪酶(pcl)和南极假丝酵母脂肪酶b(calb)以及l-甲硫氨酸、六水合氯化铝和戊二醛。自resindions.r.l.(binasco,italy)获得relizymetmha403/m珠粒。使用来自elga(woodridge,il)系统的超纯水来制备水溶液。自schottag(mainz,germany)购买稳定性研究中使用的不同尺寸的硼硅酸盐玻璃小瓶，并且自westpharmaceuticalservices(lionville,pennsylvania)购买对应尺寸的daikyod777-1瓶塞。自thermofisherscientific(waltham,ma)购买不同尺寸的聚对苯二甲酸乙二酯共聚酯(petg)螺旋塞小瓶。[0230]b.检定[0231]聚山梨醇酯20浓度[0232]通过配备有经hewitt等人(1)描述的方法调适的蒸发光散射检测器(elsd)的混合模式高效液相色谱法(hplc)定量ps20。所使用的仪器参数、柱、梯度及流动相与我们先前工作(2)中描述的仪器参数、色谱柱、梯度和流动相相同。[0233]聚山梨醇酯20酯分布[0234]使用与li等人(3)使用的二维液相色谱法(2dlc)系统设置类似的2dlc系统设置评估含有蛋白质的样品中的ps20酯分布。将agilent1290infinity2dlc系统与在35psi氮气压力下操作的coronaultra电晕超荷电气溶胶检测器(cad)耦合。使用混合模式方法(第一维度)偶联反相方法(第二维度)移除蛋白质以研究ps20酯的组成。在500μl不锈钢环中捕获自混合模式色谱柱洗脱的ps20酯，且随后将其送至第二维度以进一步分离酯亚种。第一维度使用oasismax色谱柱(20mm×2.1mm，30μm)并且第二维度使用acquitybehc18色谱柱(150mm×2.1mm，1.7μm)。用于第一维度的流动相a和b分别为2％乙酸水溶液和2％乙酸/乙腈。用于第一维度的梯度如下：0-1min，2％b；1-1.1min，2-20％b；1.1-5min，20％b；5-5.1min，20-90％b；5.1-9min，90％b；9-9.1min，90-2％b；9.1-13min，2％b。用于第二维度的流动相a和b分别为水和80/20(v/v)乙腈/异丙醇。用于第二维度的梯度如下：0-2.4min，5.0％b；2.4-2.5min，5-45％b；2.5-20min，45-100％b；20-25min，100％b；25-25.1min，100-5％b；25.1-30min，5％b。[0235]通过反相色谱法使用配备有thermocoronaultracad的一维watersacquity超高效液相色谱(uhplc)h级系统评估ps20酯在不包含蛋白质的样品中的分布。色谱柱、梯度和流动相与用于上述2dlccad方法的第二维度的色谱柱、梯度和流动相相同。[0236]游离脂肪酸定量[0237]总(可溶性+不溶性部分)游离脂肪酸[0238]如honemann等人(5)所描述，使用与质量检测器偶联的反相层析法检测dp以及ps20原料中的总ffa。简而言之，将含有1μg/ml溶解于80:20丙酮:甲醇中的标记ffa内标物的200μl沉淀溶液添加至50μl样品中。将样品在室温下培育1小时，接着在25℃下以15,000xg离心两轮达15分钟。将100μl上清液等分至液相色谱质谱(lc-ms)小瓶中。当分析具有或不具有蛋白质的样品中的ffa水平时，使用相同程序。在watersacquityh级uhplc偶联watersqdatm质谱仪上进行分析。色谱柱、流动相、梯度和ms仪器设置基于honemann等人(5)所描述的色谱柱、流动相、梯度和ms仪器设置。将各ffa的单同位素峰和同位素峰相加并与其各自的内标物进行比较以进行定量。对月桂酸、肉豆蔻酸、棕榈酸和硬脂酸进行定量。[0239]不溶性部分中的游离脂肪酸[0240]为了分析在dp中观测到的颗粒的ffa分布，通过过滤分离颗粒，使其重悬并通过反相质谱法对其进行分析。利用10mm内径(id)玻璃漏斗在孔径为0.8μm的镀金聚碳酸酯过滤器上进行过滤。将2.0ml冰冷样品添加至漏斗中并施加400托适度真空压力。在取样前将样品涡旋以确保均匀性。将分离至各过滤器上的颗粒立即重悬于500μl甲醇中以进行分析。各dp还包括制剂缓冲液对照。在重复地过滤的情况下测试各样品和对照。随后，使用“总ffa”定量部分中描述的相同梯度和lc-ms条件对样品进行纯分析，但根据月桂酸、肉豆蔻酸、棕榈酸和硬脂酸的外部标准曲线对样品进行定量。从对应dp样品的ffa水平减去缓冲液对照的ffa水平。[0241]目视检查[0242]根据usp《790》(8)和ph.eur.2.9.20(9)在检查点使用在2000与3750勒克斯之间的白色荧光灯针对黑色背景和白色背景进行目视检查。轻轻旋转小瓶且针对各背景检查约5秒。当两个独立分析师观测到可见颗粒时，记录了正面结果。[0243]强化的目视检查[0244]使用table-top型号apk-51执行具有增加光强度和放大率的强化目视检查。旋转小瓶，接着使用高分辨率相机在10×高分辨率和底部led灯下进行目视检查。当两个独立分析师观测到颗粒时，记录了正面结果。ps20对照批次与各改性hpps20批次一起进行降解和分析以解决日常变化。[0258]药物产品中的ps20降解[0259]分别外加低离子强度mab-b制剂与改性hpps20批次1、2和3以及hpps20对照批次达到0.02％w/v最终浓度。外加高离子强度mab-c和mab-d制剂与仅改性hpps20批次1以及hpps20对照批次达到0.02％w/v最终浓度。将10mm甲硫氨酸作为抗氧化剂添加至所有制剂中以将ps20氧化降解减至最少。将5ml体积的各制剂填充至6cc玻璃小瓶中并在5℃下稳定置放12周。通过在黑白背景下进行目视检查并在经增加光强度和10×放大率下进行强化目视检查来每周重复监测各制剂的五个专用小瓶中可见颗粒的存在。还通过流动成像显微术每周监测亚可见颗粒。在可见颗粒和亚可见颗粒测量之前，将样品平衡至周围温度。在5℃下14周后，对各制剂执行通过ft-ir进行的颗粒识别以及通过lc-ms进行的不溶性部分的ffa浓度测量。每周取出各制剂的额外材料并将其在-70℃下冷冻。将冷冻等分试样解冻，并且对于所有条件和时间点，通过混合模式hplcelsd测试ps20浓度，通过反相uhplccad测试ps20酯分布，以及通过lc-ms测量总(不溶性部分和可溶性部分)ffa浓度。[0260]游离脂肪酸的金属成核[0261]基于graf等人(10)所描述的程序将毛霉米黑脂肪酶(mml)和南极假丝酵母脂肪酶(cal)固定在relizymetmha403/m珠粒上。使用各酶将改性hpps20批次1-3和hpps20对照批次的储备溶液(5％w/v在水中)部分降解10％(通过混合模式elsd确认)。将经部分降解的ps20储备溶液分别外加至含有0-250ppb铝(al)的ph5.5低离子强度组氨酸乙酸盐缓冲液中达到0.04％w/v标称ps20浓度(0.036％w/v未经降解ps20和0.004％w/v经降解ps20)。将小瓶储存在5℃下并通过在黑白背景下进行目视检查来评估可见颗粒形成，并且使用光阻法评估亚可见颗粒形成，持续至多21天。在目视检查之前，使小瓶平衡至周围温度至少4小时。对于亚可见颗粒，使用冷样品溶液进行测量以捕获颗粒计数的早期变化。包括含有未经降解ps20的样品作为对照。[0262]d.结果和论述[0263]为了评估分析和功能可比性，在并排研究中评估三批改性hpps20和一批hpps20(对照)。通过在存在和不存在外部金属成核因子的情况下执行ps20水解降解研究和金属成核研究来比较聚山梨醇酯相对于彼此的ffa颗粒水平。[0264]与hpps20相比，三批改性hpps20的硬脂酸酯、棕榈酸酯和肉豆蔻酸酯含量较低，如表1中所示。例如，与3批改性hpps20的0-0.1、8.8-9.7车15.9-16.9的硬脂酸酯、棕榈酸酯和肉豆蔻酸酯含量相比，hpps20对照批次的硬脂酸酯、棕榈酸酯和肉豆蔻酸酯水平相对较高，分别为6％、12％和18％。[0265]表1:脂肪酸酯分布和规格[0266][0267][0268]aunitedstatespharmacopeialconvention.unitedstatespharmacopeiaandnationalformulary.rockville,md:unitedstatespharmacopeialconvention；2018。[0269]bcouncilofeurope.europeanpharmacopoeia.第9.3版strasbourg,france:europeanmedicinesagency；2017。[0270]cchinesepharmacopoeiacommission.chinesepharmacopoeia.第11版beijing,china:chinamedicalsciencepress；2020。[0271]d改性hpps20规格属于hpps20药典规格[0272]dom＝制造日期[0273]改性hpps20批次1dom＝07/08/2020；改性hpps20批次2dom07/15/2020；改性hpps20批次3dom06/19/2020；hpps20对照批次dom03/14/2020[0274]高级酯分数[0275]高级酯(hoe)分数为ps20的可能会影响酶促降解速率、ffa溶解能力和表面活性的属性。dp制剂中存在的水解酶可能对ps20的单酯和hoe具有不同的特异性；某些会优先降解单酯，如在zhang等人(4)使用的dp中一样，而其他可能会靶向hoe，如在li等人(3)使用的dp中一样。取决于所观测到的降解特异性而定，hoe分数变化可能会影响dp的ps20降解速率。例如，由于经水解酶裂解的受质的起始含量较高，因此hoe分数增加可使hoe降解dp中的ps20降解速率增加。除了降解速率之外，hoe分数直接影响ps20的ffa溶解能力(2)。ps20的hoe比等量单酯更好地溶解ffa。改性hpps20批次1、2和3的hoe峰面积分数在hpps20的4％以内。例如，doshi等人(11)使用的hpps20批次的hoe峰面积分数为42％，而fish等人(12)使用的批次的hoe峰面积分数为36％。先前发布的ffa溶解度模型预测，《5％的hoe峰面积分数差异使得ffa溶解度变化可忽略不计(《3％)(2)。后续实验用于确保hoe峰面积分数的微小差异不会对材料特性具有显著影响。[0276]ps20原料中的游离脂肪酸水平[0277]已知hpps20原料含有少量残留未结合ffa，在ps20合成期间未结合ffa不经历酯化反应生成聚氧乙烯(poe)链。比较改性hpps20与hpps20之间的残留ffa水平至关重要，这是因为其可能会影响各级别的整体ffa颗粒敏感性。与1％w/vhpps20相比，1％w/v改性hpps20中的硬脂酸、肉豆蔻酸和棕榈酸含量较低，而月桂酸对应地较高(图3a)。相对于hpps20而言，用于合成改性hpps20的ffa掺合物也具有较低含量的长链ffa和较高水平的短链ffa。对于改性hpps20和hpps20，原料的总体ffa贡献相对于各ffa的水溶性限值而言较低。例如，先前公布的ffa溶解度模型预测0.02％w/vph5.5ps20制剂中的～1μg/ml棕榈酸溶解度(2)。基于这些结果，对于两种聚山梨醇酯，ps20原料在同一制剂中将贡献～0.1μg/ml棕榈酸。[0278]ps20原料的痕量金属含量[0279]如铝(al3+)的痕量金属离子可与ffa相互作用以形成ffa金属复合物，这些复合物可在低于未络合ffa的溶解度限值的情况下从水性制剂中沉淀出来(13)。两种聚山梨醇酯在10％w/vps20中的al含量为《60ppb(图3b)，这在ps20浓度为0.02-0.06％w/v的典型dp制剂中换算为《0.4ppbal。先前已显示ffa的金属诱导的成核发生在大于10ppbal3+的水平下(13)。因此，在改性hpps20和hpps20原料中观测到的痕量al视为可忽略不计的，并且不太可能影响任一ps20级别的ffa金属成核倾向。已知如铁(fe3+)、铜(cu2+)、铬(cr3+)和镍(ni2+)的痕量过渡金属离子催化聚山梨醇酯的自氧化(14、15、16、17)。在10％w/v改性hpps20与hpps20之间观测到fe、ni和cr的一些差异，但没有明显趋势(图3b)。例如，改性hpps20批次3中的fe含量最高，接着为hpps20对照批次并且随后为改性hpps20批次1和2。为了理解这些差异的显著性，在40℃安慰剂稳定性研究及甲硫氨酸替代物(丹磺酰基-甲硫氨酸)氧化研究(数据未显示)中将改性hpps20的氧化倾向与hpps20的氧化倾向进行比较。氧化研究的结果表明，改性hpps20和hpps20具有类似的氧化降解敏感性，此指示所观测到的痕量fe、ni和cr含量差异似乎不会影响氧化敏感性。[0280]酶促ps20降解和ffa颗粒形成[0281]为了评估在不存在外部成核因子的情况下在溶液中形成ffa颗粒的风险方面改性hpps20与hpps20的比较，进行两组实验，其中ps20经非固定化酶水解或在药物产品(dp)制剂中经水解，伴随快速ps20降解。此外，还使用经预降解的ps20进行在存在金属成核因子的情况下评估ffa颗粒风险的实验；在此研究中，改性hpps20和hpps20均经固定化酶降解。[0282]使用非固定化酶降解ps20[0283]使用市售非固定化羧酸酯水解酶南极假丝酵母脂肪酶b(calb)和聚(ε-己内酯)(pcl)来人工水解改性hpps20和hpps20。随后，监测经水解样品中的ps20降解和亚可见颗粒。在此研究中未监测可见颗粒，这是因为先前已在使用hpps20的类似研究设置中显示其在亚可见颗粒出现同时或之后出现(18、11)。calb和pcl对ps20降解具有不同特异性，这种情况使其能够用作有效模型系统来比较不同聚山梨醇酯之间的ffa颗粒形成。calb优先降解单酯，而pcl靶向改性hpps20和hpps20中的高级酯(hoe)(图4)(11、19)。[0284]calb以类似速率降解三批次改性hpps20和hpps20对照批次(图5a)。当经calb降解时，改性hpps20和hpps20样品显示在～40％降解后在亚可见(≥2μm)颗粒中》1000个颗粒/毫升的突然增加。在pcl研究中，所有三批次改性hpps20的降解速度均略快于hpps20(图5b)。值得注意的是，由于酶对某些fae链长度的特异性不同，因此预期改性hpps20与hpps20之间的降解速率会有微小差异(21,21)。由于改性hpps20的fae规格为适用于hpps20的usp/ep/chp规格的子集，因此不同批次的hpps20之间已经存在类似的降解速率易变性(表1和图1)。[0285]尽管降解速度略快，但与hpps20相比，改性hpps20中的亚可见(≥2μm)颗粒出现延迟。与其中在～30％降解后亚可见(≥2μm)颗粒较早增加的hpps20不同，所有三批改性hpps20在～40％降解后均显示亚可见(≥2μm)颗粒中》1000个颗粒/毫升的突然增加。对于calb和pcl研究，对于≥5、10和25μm亚可见颗粒(数据未显示)，观测到与≥2μm粒度相同的趋势。[0286]在pcl研究但非calb研究中，与hpps20相比，改性hpps20的亚可见颗粒出现延迟指示hoe中的硬脂酸酯含量相对于单酯而言可能较高。与hpps20对照批次的6％的硬脂酸酯含量相比，改性hpps20的硬脂酸酯含量极低，接近0％(表1)。因此，当靶向hoe时，硬脂酸可能为hpps20与改性hpps20相比ffa颗粒提早出现的根本原因。然而，当靶向单酯时，棕榈酸可能为两种聚山梨醇酯的颗粒出现的根本原因。改性hpps20与hpps20之间的棕榈酸酯差异为《3％。[0287]如前所表明，由于单酯相对于hoe而言的ffa溶解能力减弱，因此hoe降解dp形成ffa颗粒的风险显著高于单酯降解dp(2)。pcl研究的结果显示，预期用改性hpps20代替hpps20会通过在ffa颗粒出现之前允许至少10％额外降解而在hoe降解dp方面具有显著的效益。与更高颗粒倾向性的批次hpps20(例如在受允许药典规格的高端处具有一定浓度的硬脂酸酯、棕榈酸酯和肉豆蔻酸酯的批次)相比，改性hpps20所提供的优势可能大于我们研究中使用的物质。[0288]药物产品中的ps20降解[0289]使用单克隆抗体(mab)药物产品(dp)制剂批次(mab-a、mab-b、mab-c和mab-d)比较改性hpps20与hpps20之间的ffa颗粒形成，伴随在5℃下ps20的快速降解。对于所研究的mab，改性hpps20与hpps20之间的降解速率类似。在5℃下12周后，mab-b制剂中的两种聚山梨醇酯经降解约60％，mab-c制剂中的两种聚山梨醇酯经降解50％，并且mab-d制剂中的两种聚山梨醇酯经降解30％(图6)。mab和两种聚山梨醇酯的降解模式类似；单酯和hoe均为目标(图7)。在所有三种mab制剂中，与改性hpps20相比，hpps20中的硬脂酸、棕榈酸和肉豆蔻酸的生成速度更快。在mab-a制剂中，两种聚山梨醇酯均在4周时间点出现可见颗粒(通过目视检查和强化目视检查)和亚可见(≥2μm)颗粒。在mab-b研究中对于改性hpps20批次2和3(数据未显示)观测到与批次1相同的趋势。对于mab-c和d，在相应的hpps20制剂后两周，通过强化目视检查在改性hpps20制剂中观测到颗粒(图6)。通过目视检查，两种聚山梨醇酯在同一时间点出现可见颗粒；对于mab-c为11周并且对于mab-d为12周。亚可见(≥2μm)颗粒也具有类似出现，但在mab-c和d制剂中，hpps20的计数与改性hpps20相比较高。对于≥5、10和25μm亚可见颗粒(数据未显示)观测到与所有制剂中的≥2μm粒度相同的趋势。此外，三种mab和两种聚山梨醇酯中的亚可见颗粒形态类似；特征ffa片状和针形颗粒，如前所述(20)。在14周时在0.8μm金聚碳酸酯过滤器上过滤mab-b、c和d制剂中的颗粒。尝试分离颗粒产生具有几个离散颗粒的浆料，所有离散颗粒均由ft-ir光谱法识别为ffa(图8a-c)。[0290]总体而言，5℃dp稳定性研究的结果表明，与hpps20级别相比，改性hpps20级别的ffa颗粒略有延迟。所有3种mab制剂的降解模式均靶向单酯和hoe。与calb研究类似，此研究中假设，棕榈酸为两种聚山梨醇酯的颗粒出现的根本原因。通过在14周时测量三种mab制剂的颗粒中的ffa水平来证实此假设。在三种制剂中，mab-d的ffa颗粒最晚出现。因此，在14周时，与mab-b和c制剂不同，mab-d制剂中的颗粒的ffa分布最能代表颗粒出现时的初始ffa分布。对于改性hpps20和hpps20，相对于硬脂酸、肉豆蔻酸或月桂酸而言，mab-d制剂中的颗粒含有最高比例的棕榈酸(图9)，这指示棕榈酸首先沉淀。对于两种聚山梨醇酯，相对于其他长链ffa而言，mab-b和c制剂中的颗粒(不溶性部分)含有最高比例的肉豆蔻酸。先前在老化ffa颗粒中观测到高肉豆蔻酸水平(20)，这是因为ps20继续降解，但在提早出现颗粒中不降解。因此，mab-b和c制剂的颗粒中的高肉豆蔻酸酯含量进一步指示其已老化并且不代表提早出现颗粒。有趣的是，硬脂酸存在于改性hpps20mab-b制剂的颗粒中，但其含量低于hpps20制剂中的含量。这表明虽然coa显示0％的硬脂酸酯含量，但改性hpps20中仍可能存在一些硬脂酸酯。然而，如通过mab-d制剂中的颗粒的ffa分布所证明，硬脂酸不太可能为改性hpps20中的颗粒的触发因子。[0291]与标准ps20相比，改性hpps20中在水解降解时形成ffa颗粒的倾向较低。当ps20降解模式专门靶向hoe时，效益更加明显。在hoe降解dp中用改性hpps20代替hpps20可允许在ffa颗粒出现之前额外降解至少10％。此外，与标准ps20相比，改性hpps20在降解时表现出较低的成核和形成ffa金属盐的倾向。与更高颗粒倾向性的批次hpps20(在硬脂酸酯、棕榈酸酯和肉豆蔻酸酯的高端处制造)相比，改性hpps20所提供的优势可能甚至大于我们研究中使用的物质。总体而言，数据显示ps20中的长链fae的存在使其更容易在降解时形成ffa颗粒。更严格地控制ps20原料中的fae水平可通过减少ffa颗粒形成的出现并且提高一致性来增强其他减少ps20降解的努力。[0292]游离脂肪酸的金属成核[0293]在诸如从dp玻璃小瓶中浸出的naalo2和cacl2的外部成核因子存在的情况下，ffa溶解度会降低(13)。带负电ffa可与诸如al3+的多价阳离子相互作用且形成不溶性ffa复合物，这些复合物以远低于未复合ffa的水溶性限值的浓度在水溶液中沉淀(13)。预期ffa链长度增加会加速可见ffa金属盐出现，这表明与hpps20相比，改性hpps20的ffa金属成核风险可较低(13)。通过将10％经降解ps20外加至含有0-250ppbal3+的缓冲水溶液中来比较改性hpps20与hpps20形成金属ffa复合物的倾向。使用固定化酶靶向hoe的mml以及降解单酯和hoe的cal降解改性hpps20和hpps20(10)。加标溶液中的标称ps20浓度为0.04％w/v。随后，将样品置于5℃下并监测可见颗粒和亚可见颗粒形成。[0294]对于cal研究，随着hpps20的al3+水平增加，观测到可见颗粒的较早出现(表2)。与hpps20相比，在所有al3+含量下，三批次改性hpps20显示可见颗粒出现延迟，且每个容器的颗粒较少。此外，对于改性hpps20，仅在含有100ppbal3+的样品中观测到可见颗粒，但在50或250ppbal3+样品中未观测到可见颗粒。这些结果指示，诸如肉豆蔻酸、棕榈酸和硬脂酸的长链ffa在于hpps20中观测到的ffa的早期成核中起作用。与hpps20相比，在10％酶促降解后，预期改性hpps20具有较低水平的长链ffa。因此，在改性hpps20中50ppbal3+可能不足以生成足够的完全络合的ffa以聚结并触发颗粒生长至可见尺寸。相比之下，250ppbal3+样品可能具有太多成核位点，且因此部分络合(1:1或2:1的ffa:al比率)的ffa数量相对较多，与完全复合的3:1ffa:al盐相比，部分复合的ffa不太可能聚结成可见颗粒。[0295]表2:ps20中的可见颗粒经酶cal预降解且外掺入al3+[0296][0297]/＝0-4个可见颗粒，xx＝4-7个颗粒，xxx＝》7个颗粒/容器(20ml)。结果经报道为3个容器中的平均颗粒数。[0298]对于mml研究，与cal研究类似，随着hpps20的al3+水平增加，观测到可见颗粒较早出现(表3)。在含有50和100ppbal3+的样品中，改性hpps20的批次1和2具有与hpps20类似的颗粒出现。在改性hpps20批次1和2的250ppbal3+组中未观测到可见颗粒，这可能归因于过多成核位点和部分络合。改性hpps20批次3在不包含al的对照中含有可见颗粒，ft-ir将此识别为蛋白质污染。因此，将此样品子集排除在研究之外。[0299]表3:ps20中的可见颗粒经酶mml预降解且外掺入al3+[0300][0301]/＝0-4个可见颗粒，xx＝4-7个颗粒，xxx＝》7个颗粒/容器(20ml)。结果经报道为3个容器中的平均颗粒数。结果经报道为3个容器中的平均颗粒数。经mml降解的改性hpps20批次3在不包含al3+的对照批次中含有可见颗粒，ft-ir将此确认为蛋白质污染，且因此其不包括在内。[0302]在mml研究中，hpps20与改性hpps20之间在50和100ppbal3+时类似地出现可见颗粒，这可能归因于相对于cal而言经mml降解10％的ps20溶液中的ffa浓度较高。与降解单酯和hoe两者的cal不同，mml主要降解hoe(二酯和三酯)。因此，mml可能会生成化学计量更高量的ffa/微克经降解ps20。hpps20和改性hpps20的mml样品中的ffa浓度可能太高而无法解决其在50和100ppbal3+时成核倾向之间的差异。[0303]对于两种酶，与改性hpps20相比，在5℃下21天后含有250ppbal3+的hpps20样品中利用光阻法的累积亚可见(≥2μm)颗粒计数较高(表2和3)。在两种聚山梨醇酯之间50和100ppbal3+样品具有类似的亚可见颗粒计数。这些结果提供与hpps20相比改性hpps20中的ffa金属盐颗粒延迟出现的支持证据。然而，考虑到所有样品的亚可见(≥2μm)颗粒计数《1000个颗粒/毫升，在聚山梨醇酯之间观测到的差异视为不显著的。总体而言，结果表明，与hpps20相比，改性hpps20中ps20降解时的ffa金属成核及后续可见颗粒形成的风险降低。[0304]功能表征[0305]如上例中所示，改性hpps20级别减少降解时的ffa颗粒形成。另外，与hpps20相比，改性hpps20级别不显示明显功能性损失。例如，改性hpps20和hpps20的氧化倾向在ps20氧化降解和甲硫氨酸氧化方面相当。10mm甲硫氨酸浓度能够减少两种ps20级别的氧化降解。另外，小瓶和i.v.袋中的搅拌研究显示，与hpps20相比，含有更低含量和更好的长链fae对照的改性hpps20级别在保护mab免受气液界面应力方面展现出等效功能性。[0306]结论[0307]与hpps20相比，改性hpps20形成ffa颗粒的倾向较低，这可能归因于更易溶解的ffa组合物。当ps20降解模式专门靶向hoe时，效益更加明显。在包含hoe降解药物产品的制phosphatidylcholinehydrolysiscatalyzedbylipoproteinlipase.effectofapolipoproteinc-ii.journalofbiologicalchemistry.1983；258(23):14178-80。实例2.改进对生物医药药物产品中的游离脂肪酸颗粒形成的预测：在聚山梨醇酯20降解期间并入酯分布[0331]ps20中的脂肪酸酯可形成游离脂肪酸(ffa)，进而可导致在含有ps20的制剂中形成可见颗粒或亚可见颗粒。高级酯可促进ffa溶解于包含ps20的制剂中。ps20的降解产物可包括由hoe降解产生的单酯；例如，如果脂肪酸酯中的一者经裂解，则二酯降解可产生单酯。因此，与起始原料相比，ps20降解可改变降解后残留在溶液中的ps20的酯分布。[0332]本公开还提供例如用于包含ps20的制剂的模型，该模型考虑了ph和ps20浓度以及ps20酯分布及其对ffa溶解度的影响。该模型预测，将制剂的ph增加至高于特定ffa的pka以指数方式提高其溶解度，这是因为ffa的离子化形式比非离子化形式显著地更易溶解。该模型还预测ffa溶解度随着ps20浓度增加而提高。该模型还并入变化酯分布的贡献，其中酶促降解作为准确性提高的额外因素。[0333]为了创建模型，首先，在恒定ps20浓度下在不同制剂ph下测量ffa溶解度。以上关系适用于用以通过实验方式测定月桂酸、肉豆蔻酸和棕榈酸中的各自的pka以及非离子化ffa的溶解度的henderson-hasselbalch等式的修改形式。当ffa接近且超过相应ffa的pka时，ffa溶解度随ph增加而提高。ph依赖性归因于在较高ph溶液中离子化ffa(比非离子化部分显著地更易溶解)的分数较高。其次，在恒定ph下在不同ps20浓度下测量ffa溶解度。该数据适应根据经验得出的函数。最后，将ffa溶解度描述为ph和ps20浓度的函数的各个等式合并成一个半经验关系，该关系概述于等式1中：[0334][0335]其中β1为非离子化脂肪酸的溶解度且β2为以实验方式测定的pka。月桂酸、肉豆蔻酸和棕榈酸的β1和β2的值列于表4中。[0336]表4：ffa溶解度模型的“ph项”中的月桂酸、肉豆蔻酸和棕榈酸的常数(等式1)[0337][0338]为了进一步更新模型，我们通过将ps20分级成单酯和hoe且将其以不同质量比混合来生成“模拟物降解”ps20(mdps20)。mdps20跨越一定范围的hoe质量分数％以仿真经水解降解的ps20的潜在酯分布。测量在mdps20溶液的不同浓度下的ffa溶解度以生成更准确的ffa溶解度和后续颗粒风险的模型。其次，在对溶解度模型的更新中，除了总ps20含量之外，等式1的“ps20项”经修改以包括ps20酯分布作为影响ffa溶解度的第三变量。经发现，随着ps20浓度降低，ffa溶解度也降低。合并等式1的ph项与等式2允许估算在ph、ps20浓度和hoe峰面积分数的任何组合下的ffa溶解度。等式2如下：[0339]月桂酸溶解度＝289.5*[ps20]-12.7*hoe+([ps20]-0.04)*((hoe-0.5)*306.8)-4.1(eq.2)[0340]其中hoe为高级酯对ps20的总峰面积分数。[0341]为了桥联等式1与2，首先使用等式2计算因子r。r由等式3a定义为在所需ps20浓度和hoe峰面积分数下的ffa溶解度(分子)与在0.04％(w/v)ps20和0.41hoe峰面积分数下的ffa溶解度(分母)的比。等式3a和3b如下：[0342][0343]其简化为：[0344][0345]预期r与ph无关并且可乘以等式1的ph项以生成等式4描述的精炼模型的ffa溶解度的最终表达式。等式4如下：[0346][0347]其中β1为非离子化脂肪酸的溶解度，且β2为以实验方式测定的pka，且hoe为高级酯对ps20的总峰面积分数。[0348]这种呈现于等式4中的半经验关系可用于基于给定制剂缓冲液ph、ps20浓度和hoe峰面积分数来预测在5℃下的月桂酸、肉豆蔻酸和棕榈酸在给定制剂缓冲液中的溶解度。该模型的一个假设在于作为ps20浓度和hoe峰面积分数的函数的肉豆蔻酸和棕榈酸的溶解度以与月桂酸相同的方式变化。我们先前通过比较在不同ph和ps20浓度下的测量ffa溶解度和预测ffa溶解度来验证此假设，并且预期在新模型中同样适用36。[0349]最终模型有助于解释具有类似ph和ps20降解速率的制剂可能视针对ps20的单一形式或hoe的降解的特异性而具有极为不同的颗粒形成倾向的原因。还表明，降解hoe的制剂，尤其以低ph调配的制剂，由于水解ps20降解而处于最高的ffa颗粒形成风险下。[0350]为了将模型用作在保质期内生物医药药物产品中的颗粒预测工具，建议在5℃稳定性时间点进行以下测量：1)制剂ph、2)总ps20浓度(使用混合模式hplcelsd)和3)hoe峰productleadingtofreefattyacidparticles.jpharmsci.2016；105(5):1657-66。[0363]34.kranzw,wuchnerk,corradinie,bergerm,hawea.factorsinfluencingpolysorbate'ssensitivityagainstenzymatichydrolysisandoxidativedegradation.jpharmsci.2019；108(6):2022-32。[0364]35.labrenzsr.esterhydrolysisofpolysorbate80inmabdrugproduct:evidenceinsupportofthehypothesizedriskaftertheobservationofvisibleparticulateinmabformulations.jpharmsci.2014；103(8):2268-77。[0365]36.doshin,demeuleb,yadavs.understandingparticleformation:solubilityoffreefattyacidsaspolysorbate20degradationbyproductsintherapeuticmonoclonalantibodyformulations.molpharm.2015；12(11):3792-804。[0366]37.tomlinsona,demeulebl,linb,yadavs.polysorbate20degradationinbiopharmaceuticalformulations:quantificationoffreefattyacids,characterizationofparticulates,andinsightsintothedegradationmechanism.molecularpharmaceutics.2015；12(11):3805-15。[0367]38.saggum,liuj,patela.identificationofsubvisibleparticlesinbiopharmaceuticalformulationsusingramanspectroscopyprovidesinsightintopolysorbate20degradationpathway.pharmres.2015；32(9):2877-88。[0368]39.hallt,sandefursl,fryecc,tuleytl,huangl.polysorbates20and80degradationbygroupxvlysosomalphospholipasea2isomerx1inmonoclonalantibodyformulations.journalofpharmaceuticalsciences.2016；105(5):1633-42。[0369]40.britorm,vazwl.determinationofthecriticalmicelleconcentrationofsurfactantsusingthefluorescentproben-phenyl-1-naphthylamine.analyticalbiochemistry.1986；152(2):250-5。[0370]41.hewittd,zhangt,kaoyh.quantitationofpolysorbate20inproteinsolutionsusingmixed-modechromatographyandevaporativelightscatteringdetection.jchromatogra.2008；1215(1-2):156-60。[0371]42.lapelosam,patapofftw,zarragaie.molecularsimulationsofmicellaraggregationofpolysorbate20esterfractionsandtheirinteractionwithn-phenyl-1-naphthylaminedye.biophyschem.2016；213:17-24。[0372]43.nayemj,zhangz,tomlinsona,zarragaie,wagnernj,liuy.micellarmorphologyofpolysorbate20and80andtheiresterfractionsinsolutionviasmallangleneutronscattering.journalofpharmaceuticalsciences.2019。当前第1页12当前第1页12
技术特征：
1.一种包含脂肪酸酯的聚山梨醇酯20组合物，其包含1.0％或更少的己酸酯、大于或等于2.6％且小于或等于6.6％的辛酸酯、大于或等于2.4％且小于或等于6.4％的癸酸酯、大于或等于55.0％且小于或等于60.0％的月桂酸酯、大于或等于14.1％且小于或等于18.1％的肉豆蔻酸酯、大于或等于7.0％且小于或等于10.9％的棕榈酸酯以及小于或等于2.0％的硬脂酸酯。2.根据权利要求1所述的组合物，其包含大于或等于3％、或大于或等于3.5％、或大于或等于4％、或大于或等于4.6％且小于或等于6.6％的辛酸酯。3.根据权利要求1或2所述的组合物，其包含大于或等于2.6％、或大于或等于3％、或大于或等于3.5％、或大于或等于4％、或大于或等于4.4％且小于或等于6.4％的癸酸酯。4.根据权利要求1至3中任一项所述的组合物，其包含大于或等于56％、大于或等于57％、大于或等于58％且小于或等于60％的月桂酸酯。5.根据权利要求1至4中任一项所述的组合物，其包含大于或等于14.1％且小于或等于18％、或小于或等于17％、或小于或等于16％、或小于或等于15％的肉豆蔻酸酯。6.根据权利要求1至5中任一项所述的组合物，其包含大于或等于7％且小于10.9％、或小于或等于10％、或小于或等于9％、或小于或等于8％的棕榈酸酯。7.根据权利要求1至6中任一项所述的组合物，其包含小于或等于2％、或小于或等于1.5％、或小于或等于1％的硬脂酸酯。8.根据权利要求1至7中任一项所述的组合物，其不包含可检测的硬脂酸酯。9.根据权利要求1所述的组合物，其包含1％或更少的己酸酯、约4.6％的辛酸酯、约4.8％的癸酸酯、约57.0％的月桂酸酯、约16.2％的肉豆蔻酸酯、约9.4％的棕榈酸酯且不包含可检测的硬脂酸酯。10.根据权利要求1所述的组合物，其包含1％或更少的己酸酯、3.7％至5.2％的辛酸酯、3.7％至5.2％的癸酸酯、56.3％至57.2％的月桂酸酯、15.9％至16.9％的肉豆蔻酸酯、8.8％至9.7％的棕榈酸酯且不包含可检测的硬脂酸酯。11.根据权利要求1所述的组合物，其包含1％或更少的己酸酯、3.5％至5.5％的辛酸酯、3.5％至5.5％的癸酸酯、55％至58％的月桂酸酯、15％至17.5％的肉豆蔻酸酯、8.5％至10％的棕榈酸酯以及约0.1％或更少的硬脂酸酯。12.根据权利要求1至11中任一项所述的组合物，其进一步包含大于或等于5.8％且小于或等于9.8％的油酸酯以及小于或等于2.0％的亚油酸酯。13.一种药物制剂，其包含药物和药用赋形剂，其中所述药用赋形剂包含：包含脂肪酸酯的聚山梨醇酯20组合物，其中所述聚山梨醇酯20组合物的所述脂肪酸酯包含：1.0％或更少的己酸酯、大于或等于2.6％且小于或等于6.6％的辛酸酯、大于或等于2.4％且小于或等于6.4％的癸酸酯、大于或等于55.0％且小于或等于60.0％的月桂酸酯、大于或等于14.1％且小于或等于18.1％的肉豆蔻酸酯、大于或等于7.0％且小于或等于10.9％的棕榈酸酯以及小于或等于2.0％的硬脂酸酯。14.根据权利要求13所述的药物制剂，其中所述聚山梨醇酯20组合物占所述制剂的0.01％至0.12％(w/v)。15.根据权利要求13或14所述的药物制剂，其中所述药物是蛋白质、抗体、抗体片段、酶或肽。
16.根据权利要求15所述的药物制剂，其中所述药物是蛋白质。17.根据权利要求15所述的药物制剂，其中所述药物是抗体。18.根据权利要求13至17中任一项所述的药物制剂，其中药物的浓度是1％至30％(w/v)。19.根据权利要求18所述的药物制剂，其中所述药物的浓度是5％至20％(w/v)。20.根据权利要求13至19中任一项所述的药物制剂，其中所述聚山梨醇酯20组合物是所述制剂的0.01％至0.08％、或0.03％至0.1％、0.04％至0.07％(w/v)。21.根据权利要求13至20中任一项所述的药物制剂，其中所述聚山梨醇酯20组合物是所述制剂的约0.01％、0.02％、0.03％、0.04％、0.05％、0.06％、0.07％、0.08％、0.09％、0.10％、0.11％或0.12％(w/v)。22.根据权利要求13至21中任一项所述的药物制剂，其中所述聚山梨醇酯20组合物占所述制剂的约0.06％(w/v)。23.根据权利要求13至22中任一项所述的药物制剂，其中ph是4至8、或5至7.5、或6.5至7.5、或6.8至7.2。24.根据权利要求13至23中任一项所述的药物制剂，其中所述药用赋形剂进一步包含水、醇、糖、缓冲剂、表面活性剂、稳定剂或其组合。25.根据权利要求13至24中任一项所述的药物制剂，其中所述聚山梨醇酯20组合物的所述脂肪酸酯包含大于或等于3％、或大于或等于3.5％、或大于或等于4％、或大于或等于4.6％且小于或等于6.6％的辛酸酯。26.根据权利要求13至25中任一项所述的药物制剂，其中所述聚山梨醇酯20组合物的所述脂肪酸酯包含大于或等于2.6％、或大于或等于3％、或大于或等于3.5％、或大于或等于4％、或大于或等于4.4％且小于或等于6.4％的癸酸酯。27.根据权利要求13至26中任一项所述的药物制剂，其中所述聚山梨醇酯20组合物的所述脂肪酸酯包含大于或等于56％、大于或等于57％、大于或等于58％且小于或等于60％的月桂酸酯。28.根据权利要求13至27中任一项所述的药物制剂，其中所述聚山梨醇酯20组合物的所述脂肪酸酯包含大于或等于14.1％且小于或等于18％、或小于或等于17％、或小于或等于16％、或小于或等于15％的肉豆蔻酸酯。29.根据权利要求13至28中任一项所述的药物制剂，其中所述聚山梨醇酯20组合物的所述脂肪酸酯包含大于或等于7％且小于10.9％、或小于或等于10％、或小于或等于9％、或小于或等于8％的棕榈酸酯。30.根据权利要求13至29中任一项所述的药物制剂，其中所述聚山梨醇酯20组合物的所述脂肪酸酯包含小于或等于2％或小于或等于1.5％或小于或等于1％的硬脂酸酯。31.根据权利要求13至30中任一项所述的药物制剂，其中所述聚山梨醇酯20组合物的所述脂肪酸酯不包含可检测的硬脂酸酯。32.根据权利要求13至31中任一项所述的药物制剂，其中所述聚山梨醇酯20组合物的所述脂肪酸酯包含1％或更少的己酸酯、约4.6％的辛酸酯、约4.8％的癸酸酯、约57.0％的月桂酸酯、约16.2％的肉豆蔻酸酯、约9.4％的棕榈酸酯且不包含可检测的硬脂酸酯。33.根据权利要求13至31中任一项所述的药物制剂，其中所述聚山梨醇酯20组合物的
所述脂肪酸酯包含1％或更少的己酸酯、3.7％至5.2％的辛酸酯、3.7％至5.2％的癸酸酯、56.3％至57.2％的月桂酸酯、15.9％至17.0％的肉豆蔻酸酯、8.8％至9.8％的棕榈酸酯且不包含可检测的硬脂酸酯。34.根据权利要求13至31中任一项所述的药物制剂，其中所述聚山梨醇酯20组合物的所述脂肪酸酯包含1％或更少的己酸酯、3.5％至5.5％的辛酸酯、3.5％至5.5％的癸酸酯、55％至58％的月桂酸酯、15％至17.5％的肉豆蔻酸酯、8.5％至10％的棕榈酸酯以及约0.1％或更少的硬脂酸酯。35.根据权利要求13至34中任一项所述的药物制剂，其中所述聚山梨醇酯20组合物的所述脂肪酸酯进一步包含大于或等于5.8％且小于或等于9.8％的油酸酯以及小于或等于2.0％的亚油酸酯。36.根据权利要求13至35中任一项所述的制剂，当与包含经受相同储存条件的标准聚山梨醇酯20组合物的制剂相比时，所述制剂包含更少的由脂肪酸酯降解产生的游离脂肪酸颗粒。37.根据权利要求13至36中任一项所述的制剂，其进一步包含较高级酯降解药物产品，其中与在包含另外具有相同内容物且在相同条件下储存的标准聚山梨醇酯20组合物的hoe降解药物产品制剂中相比，在观测到游离脂肪酸颗粒形成之前，多至超过10％的脂肪酸酯可降解为游离脂肪酸。38.根据权利要求13至37中任一项所述的制剂，其中通过游离脂肪酸的金属成核作用所产生的游离脂肪酸颗粒数量少于通过包含另外地含量和储存条件相同的标准聚山梨醇酯20组合物的制剂中的游离脂肪酸的金属成核作用所产生的游离脂肪酸颗粒数量。39.根据权利要求1至38中任一项所述的组合物或制剂，其中游离脂肪酸通过所述脂肪酸酯的水解降解和/或氧化降解而产生。40.根据权利要求1至38中任一项所述的组合物或制剂，其中脂肪酸酯的降解导致相对于包含标准聚山梨醇酯20组合物的组合物或制剂中的游离脂肪酸颗粒形成而言延迟的游离脂肪酸颗粒形成。41.根据权利要求40所述的组合物或制剂，其中所述游离脂肪酸颗粒是可见的。42.根据权利要求40所述的组合物或制剂，其中所述游离脂肪酸颗粒是亚可见的。

技术总结
本公开提供具有特定脂肪酸酯浓度的聚山梨醇酯20组合物。在一些实施例中，它们可用于药物制剂中例如以提高稳定性。药物制剂中例如以提高稳定性。药物制剂中例如以提高稳定性。


技术研发人员：S
受保护的技术使用者：基因泰克公司
技术研发日：2021.09.23
技术公布日：2023/8/4