一种大孔径可注射凝胶及其在创面愈合中的应用

1.本发明属于生物医药技术领域，尤其涉及一种大孔径可注射凝胶及其在创面愈合中的应用。


背景技术：

2.以糖尿病溃疡为代表的慢性创面是由多种病因引起，经规范化治疗，伤口仍然无法愈合，甚至没有愈合倾向的一种伤口。慢性创面的特点是发生机理复杂，复发率较高、费用大、致残率高，给病人和家属带来了沉重的负担。如何在皮肤严重受伤后，促进皮肤组织的再生，是当前促进慢性创面愈合研究的重点课题。
3.使用理想的敷料保护伤口免受继发性损伤和感染是伤口护理的首要步骤。水凝胶是一种亲水性高分子材料构成的三维交联聚合物网络，使伤口处于潮湿状态，提供非粘附的环境。该化合物具有较强的溶胀能力，能吸附并滞留大量水分，帮助伤口不断吸收渗出液，是理想的慢性创伤敷料。随着临床对创面修复的要求不断提高，逐渐产生了多种功能型水凝胶的需求，多种抗菌、抗氧化和带电性水凝胶应运而生。在多种功能型水凝胶发展过程中，促进愈合始终是水凝胶设计与构建过程中面临的重要挑战。


技术实现要素：

4.为解决上述问题，本发明提供了一种基于硫酸化透明质酸、支状聚乙烯亚胺、琥珀酰化的芦丁和多醛基化合物的水凝胶，其中，硫酸化透明质酸与支状聚乙烯亚胺进行酰胺缩合形成了纳米粒结构，将产物与琥珀酰化的芦丁进行交联，重新形成可溶性聚合物。该聚合物表面支状聚乙烯亚胺上的氨基与多醛基化合物中的醛基形成席夫碱结构，从而形成交联网络制备得到水凝胶，经实验验证，该水凝胶在促进创面愈合以及抗疤痕中均有优异的效果。
5.本发明的第一个目的是提供一种大孔径可注射凝胶，所述大孔径可注射凝胶中包括由硫酸化透明质酸、支状聚乙烯亚胺、琥珀酰化的芦丁和多醛基化合物形成的交联网络结构。
6.进一步地，所述交联网络结构中还包括离子，如钙离子等。
7.进一步地，所述多醛基化合物的选择包括但不限于醛基化多糖、戊二醛、丙三醛、多聚丙烯醛等。
8.进一步地，多糖包括但不限于透明质酸、海藻酸盐、葡聚糖、壳聚糖、硫酸乙酰肝素、褐藻聚糖等。
9.本发明的第二个目的是提供上述大孔径可注射凝胶的制备方法，包括以下步骤：
10.s1、将硫酸化透明质酸与支状聚乙烯亚胺进行交联形成硫酸化透明质酸-支链聚乙烯亚胺接枝聚合物，再与琥珀酰化的芦丁交联得到硫酸化透明质酸-支链聚乙烯亚胺-芦丁聚合物；
11.s2、将硫酸化透明质酸-支链聚乙烯亚胺-芦丁聚合物与多醛基化合物混合，反应
形成所述大孔径可注射凝胶。
12.进一步地，在步骤s1中，所述硫酸化透明质酸-支链聚乙烯亚胺接枝聚合物的结构如下所示：
13.其中，r、r
′
独立地选自so
3-或h，m为10-10000之间的整数，n为1-100000之间的整数。
14.进一步地，在步骤s1中，所述硫酸化透明质酸-支链聚乙烯亚胺-芦丁聚合物的结构如下所示：
15.其中，r、r
′
独立地选自so
3-或h，r3选自琥珀酰化的芦丁或h，m为10-10000之间的整数，n为1-100000之间的整数。
16.进一步地，所述琥珀酰化的芦丁结构如下所示：
[0017][0018]
进一步地，所述硫酸化透明质酸的分子量为1000-1000000。
[0019]
进一步地，所述支状聚乙烯亚胺的分子量为50-1000000。
[0020]
进一步地，在步骤s1中，硫酸化透明质酸、支状聚乙烯亚胺和琥珀酰化芦丁的质量比为1-100：1-100：1-100。
[0021]
进一步地，在步骤s2中，硫酸化透明质酸-支链聚乙烯亚胺-芦丁聚合物与多醛基化合物的摩尔比为1-100：1-100。
[0022]
进一步地，在步骤s2中，与多醛基化合物反应后，还包括将反应产物与离子溶液共孵育的步骤。
[0023]
本发明的第三个目的是提供上述大孔径可注射凝胶在制备组织工程材料中的应用。
[0024]
本发明的第四个目的是提供上述大孔径可注射凝胶在制备创面愈合产品中的应
用。
[0025]
本发明的第五个目的是提供上述大孔径可注射凝胶在制备抗炎产品中的应用。
[0026]
本发明的有益效果：
[0027]
本发明通过将琥珀酰化的芦丁连接到s-ha-pei上合成s-ha-pei-rutin结构，该化合物呈现出典型的两性高分子结构特征，将其与醛基化多糖共同孵育，可通过pei表面多余的氨基与醛基交联，形成亚氨基动态键，从而得到超大孔可注射水凝胶。该材料在体外显示出较高的生物相容性。同时，该材料具有强吸水性，吸水率至少高达1700％。创伤愈合实验结果显示，上述水凝胶在伤口愈合的初期，促进组织再生，显著加快慢性伤口的愈合速度，改善炎性细胞浸润情况。体内降解及安全性实验表明上述水凝胶对小鼠的肝肾功能没有影响，表明该水凝胶具有良好的安全性及生物相容性。综上，本发明制备的水凝胶可以为细胞生长提供支架，促进慢性伤口愈合，以及在抗炎方面发挥作用。
附图说明
[0028]
图1为水凝胶的红外光谱；
[0029]
图2为水凝胶的sem图像，(a)s-ha-p-r-a-ha；(b)s-ha-p-r-a-sa；
[0030]
(c)s-ha-p-r-a-sa’；(d)s-ha-p-r-a-sa-ca
2+
；(e)s-ha-p-r-a-sa
’‑
ca
2+
；
[0031]
图3为水凝胶的频率扫描动态流变谱图，(a)s-ha-p-r-a-ha；(b)s-ha-p-r-a-sa；(c)s-ha-p-r-a-sa’；(d)s-ha-p-r-a-sa-ca
2+
；(e)s-ha-p-r-a-sa
’‑
ca
2+
；
[0032]
图4为水凝胶的溶胀率；
[0033]
图5为不同水凝胶的溶血率；
[0034]
图6为nih-3t3细胞的增殖情况；
[0035]
图7为糖尿病小鼠完全切除伤口愈合的影响，(a、b)第0、3、5、8、10、16天糖尿病创伤口的图及伤口的面积；(c)第3、5、8、10天创面组织的h&e染色；(d)第3、5、8天伤口组织的马松三色法代表性染色图(*表示p《0.05,**表示p《0.01,***表示p《0.001)；
[0036]
图8为测定血清alt、ast、tp、crea-s作为肝肾功能指标，nc为正常对照组；
[0037]
图9为小鼠皮下植入凝胶12天后体内降解情况，(a)nc；(b)s-ha-p-r-a-ha；(c)s-ha-p-r-a-sa；(d)s-ha-p-r-a-sa’。
具体实施方式
[0038]
下面结合附图和具体实施例对本发明作进一步说明，以使本领域的技术人员可以更好地理解本发明并能予以实施，但所举实施例不作为对本发明的限定。
[0039]
实施例1水凝胶的制备
[0040]
(1)硫酸化透明质酸的制备
[0041]
①
树脂预处理
[0042]
将树脂置于50-60℃热水中浸泡，每15分钟左右换1次水，直到浸洗液无棕色、泡沫极少情况下，再加入5％盐酸溶液继续浸泡，4小时后湿法装柱，先将柱层容积为2倍的去离子水透过树脂层，再将3倍柱层容积为5％盐酸溶液按相同速度通过树脂层，用去离子水冲洗至ph 7.0左右，待用。
[0043]
②
tba-ha的合成
[0044]
取1g透明质酸溶解在100ml的去离子水中，将ha水溶液转移至树脂柱中，将流速调小(液体的速度成线不成股)，滴加到tba水溶液中，最终溶液ph不低于9。将ha-tba转移至8kda的透析袋中透析、冻干。待样品完全冻干成絮状后得到样品，将得到的絮状样品放置在干燥器中保存待用。
[0045][0046]
③
s-ha的合成
[0047]
精密称取1g tba-ha样品,加入200ml无水dmf充分溶解2-3h，冰浴且n2条件下加入溶有3g三氧化硫吡啶的40ml无水dmf溶液，反应1h后，加入10ml去离子水淬灭反应。将溶液用1m naoh调至ph为8.5-9，透析、冷冻干燥后得到样品并命名为s-ha。
[0048][0049]
(5)硫酸化透明质酸与pei(s-ha-pei)的反应
[0050]
取80mg pei溶液溶解于hepes缓冲液中，使其浓度为1mg/ml。精确称取160mg s-ha样品，向其中加入适量edc和nhs，于hepes缓冲液中反应0.5h。将2mg/ml的s-ha反应液加入1mg/ml的pei体系，透析、冻干，得到样品备用并命名为s-ha-pei。
[0051][0052]
(2)s-ha-pei-rutin的合成
[0053]
①
琥珀酰化芦丁(rutin)的合成
[0054]
精确称取2g芦丁和3g琥珀酸酐，溶于80ml的无水吡啶，在70℃下回流。反应完毕后，在60℃条件下旋蒸，除去无水吡啶。向产物中加入少量的无水乙醇，使其充分溶解，在冰浴条件下，向溶解液中加入无水乙醚(1：20)，使其沉淀。然后8000rpm，4℃下离心10min，除去上清液，再加无水乙醚洗涤2-3次，将沉淀在真空干燥中抽干，备用。
[0055]
[0056]
②
s-ha-pei-rutin
[0057]
取80mg琥珀酰化芦丁，edc、nhs于pbs缓冲溶液中，使其浓度为1mg/ml下反应2h,待到反应溶液变成透明的绿色。取200mg s-ha-pei放至pbs缓冲溶液中，使浓度为2mg/ml；将1mg/ml琥珀酰化的芦丁溶液滴加其中，透析。将透析后的样品在60℃条件下旋蒸至3ml，备用。
[0058][0059]
，r3＝rutin或h。
[0060]
(3)氧化透明质酸、氧化海藻酸钠的合成
[0061]
①
氧化透明质酸制备：取1g透明质酸钠溶解在100ml蒸馏水中，滴加高碘酸钠水溶液(0.5m，5ml)，室温下避光反应2h。随后加入1ml乙二醇淬灭反应，室温搅拌1h，透析、冻干得到氧化透明质酸并命名为a-ha。
[0062]
②
氧化海藻酸钠的制备：取1g海藻酸钠配成质量分数为1％的水溶液。加入1ml的0.25m、0.025m的高碘酸钠溶液避光氧化24h。加入0.2ml乙二醇终止氧化反应15min。透析、冻干备用并命名为a-sa(醛基取代度为0.5)、a-sa’(醛基取代度为0.05)。
[0063]
(4)水凝胶的制备
[0064]
取s-ha-pei-rutin浓缩液1ml分别与1ml的a-ha、a-sa、a-sa’快速混匀后，水凝胶即在一段时间内形成。所制备的水凝胶分别命名为s-ha-p-r-a-ha、s-ha-p-r-a-sa、s-ha-p-r-a-sa’。然后将水凝胶s-ha-p-r-a-sa、s-ha-p-r-a-sa’浸泡在cacl2水溶液(2ml，0.05％)中，于4℃下过夜放置，形成双交联的水凝胶，并将其分别命名为s-ha-p-r-a-sa-ca
2+
、s-ha-p-r-a-sa
’‑
ca
2+
。通过实验发现，不同多糖的醛基取代度均可以形成水凝胶。
[0065]
实施例2水凝胶的表征
[0066]
(1)傅里叶变换红外光谱
[0067]
如图1水凝胶的红外光谱所示，五组水凝胶的主峰没有显示出明显的差异。s-ha-p-r与醛基化的化合物通过酰胺键交联形成水凝胶。其中在1650cm-1
处观察到c＝o键的伸缩振动的特征吸收，在1260cm-1
处观察到c＝n的变形振动。
[0068]
(2)扫描电子显微镜
[0069]
将s-ha-p-r-a-ha、s-ha-p-r-a-sa、s-ha-p-r-a-sa’、s-ha-p-r-a-sa-ca
2+
、s-ha-p-r-a-sa
’‑
ca
2+
五组水凝胶制成直径为25mm，厚度为3mm的圆柱体，采用扫描电子显微镜观
察凝胶的微观结构。分别将水凝胶放入液氮内10min，脆断后冻干。将冻干后固体黏附在导电胶上，真空中喷金，以5kv加速电压观察。
[0070]
如图2所示是冻干后五组水凝胶的形貌，其中，(a)s-ha-p-r-a-ha；(b)s-ha-p-r-a-sa；(c)s-ha-p-r-a-sa’；(d)s-ha-p-r-a-sa-ca
2+
；(e)s-ha-p-r-a-sa
’‑
ca
2+
。通过对各组水凝胶的sem图像，可以清晰的观察到五组水凝胶呈现相似的多孔结构。不同组水凝胶之间的平均孔径存在差异。s-ha-p-r-a-ha的孔径在300μm左右，s-ha-p-r-a-sa与s-ha-p-r-a-sa’的孔径在400μm左右；而经过ca
2+
处理后的水凝胶s-ha-p-r-a-sa-ca
2+
、s-ha-p-r-a-sa
’‑
ca
2+
，其孔径在1mm左右。由于水凝胶的孔径与其吸水能力相关，孔径越大，吸水速度越快，吸水能力越强，在伤口吸附渗液的能力加强。
[0071]
(3)流变测试
[0072]
将s-ha-p-r-a-ha、s-ha-p-r-a-sa、s-ha-p-r-a-sa’、s-ha-p-r-a-sa-ca
2+
、s-ha-p-r-a-sa
’‑
ca
2+
五组水凝胶制成直径为40mm，厚度为2mm的圆柱体，使用流变仪，选用直径为40mm的样品台，在0.5
–
100rad/s的线性粘弹性区对水凝胶进行频率扫描测量(0.1
–
10hz)。所有样品的测试均在室温下进行。
[0073]
如图3所示，其中，(a)s-ha-p-r-a-ha；(b)s-ha-p-r-a-sa；(c)s-ha-p-r-a-sa’；(d)s-ha-p-r-a-sa-ca
2+
；(e)s-ha-p-r-a-sa
’‑
ca
2+
，继续检测了五组水凝胶的频率扫描动态流变谱图。结果表明，五组水凝胶的储能模量(g’)和损耗模量(g”)均与频率无关，表明水凝胶具有稳定的结构。在测试的频率范围内，所有样品均表现出粘弹性凝胶特性(g’》》g”)。此外，储存模量决定生物材料的机械特性，是影响水凝胶作为生物支架的关键性能。a的g’值为50，b和c组水凝胶的的g’值为150-180范围内，而d和e的g’值为300-400范围内。
[0074]
(4)溶胀性能测试
[0075]
分别将s-ha-p-r-a-ha、s-ha-p-r-a-sa、s-ha-p-r-a-sa’、s-ha-p-r-a-sa-ca
2+
、s-ha-p-r-a-sa
’‑
ca
2+
四组水凝胶冻干，浸入2ml pbs缓冲液中(ph 7.4)，静置，称重(w0)。在预设的时间间隔内，取出凝胶并用纸擦去凝胶表面的水，分别记录其随时间的质量变化(wt)，根据下面的公式计算溶胀率。
[0076]
溶胀率(％)＝w
t
/w0×
100％。
[0077]
如图4所示是五组水凝胶溶胀率随时间的变化图。冻干后的水凝胶体现了强大的吸水能力。吸水程度在100min内达到平衡。其中，s-ha-p-r-a-ha的溶胀率约为1700％，s-ha-p-r-a-sa与s-ha-o-r-a-sa-ca
2+
的溶胀率与s-ha-p-r-a-ha相近，约为1700％，而s-ha-p-r-a-sa’与s-ha-p-r-a-sa
’‑
ca
2+
的溶胀率约为2000％。因此，这五组水凝胶具有快速溶胀性能，可作为伤口敷料吸收组织渗出液。
[0078]
(5)溶血率(hemolysis rate，hr)计算
[0079]
首先，从小鼠体内取新鲜血液，眼球取血，加入到含有抗凝剂的离心管中，制备小鼠全血；取5ml小鼠全血，加入5ml生理盐水稀释后备用。将实验组(不同水凝胶，10ml生理盐水)、阴性对照组(10ml生理盐水)和阳性对照组(10ml蒸馏水)试管放入37℃水浴中孵育30min后取出，加入稀释后的小鼠全血(0.2ml)，再放入37℃水浴中继续保温1h，随后将各试管的溶液以2500rpm离心5min，测定上清在545nm处的吸光度值。根据公式4.1计算溶血率：
[0080]
其中dt是实验组的吸光度，dnc是阴性对照组的吸光度，dpc是阳性对照组的吸光度(n＝3)。
[0081]
溶血率％＝[(dt-dnc)/(dpc
–
dnc)]
×
100％。
[0082]
生物材料的基本性能要求是良好的相容性。溶血率低于5％可证明生物材料血液相容性良好，可以应用于生物医用材料。如图5所示为不同水凝胶的溶血率，可以看出，所有凝胶的溶血率都低于5％，表明所制备的水凝胶表现出良好的血液相容性，有望成为新型伤口敷料的候选材料。
[0083]
实施例3细胞毒性实验
[0084]
(1)实验细胞分组
[0085]
空白组：仅加入pbs；
[0086]
对照组：培养基培养细胞；
[0087]
给药组：含有样品的培养基培养细胞，根据样品浓度(0、50、100、200、400、800μg/ml)分组。
[0088]
(2)细胞毒性实验
[0089]
将nih-3t3细胞以6
×
103个/ml的密度接种于96孔板中(100μg/孔)，加入dmem培养基，培养24h，吸取上清。加入含有样品的培养基，每组设置5个复孔。在37℃下培养24h后，加入10μl cck-8，37℃避光培养40min，用酶标仪在波长450nm处测量吸光度。根据公式计算细胞存活率(cell viability):
[0090][0091]
其中，c450、csample、ccontrol分别是空白组、给药组、以及对照组在450nm处的吸光值。
[0092]
结果如图6所示，分别用含有0、50、100、200、400、800μg/ml样品培养基培养nih-3t3细胞。孵育24h后，与对照组相比，细胞的增殖效率均与空白组相当，浓度的不同仅仅只会造成轻微的吸收波动，但是没有显著影响。表明所制备的样品与细胞具有良好的生物相容性。
[0093]
(3)糖尿病诱导模型
[0094]
s-ha-p-r-a-sa’与s-ha-p-r-a-sa相比，只是产生了海藻酸醛基修饰程度的差异。但是海藻酸醛基化程度不同，没有导致明显的理化性质差异。因此，在生物活性测定阶段只选择s-ha-p-r-a-sa及其与ca
2+
交联的产物进一步测定。所有动物实验方案均通过江南大学实验动物管理与动物福利伦理委员会的批准，编号为jn.no20220615c0600830。将64只雄性小鼠适应性饲养7天后，连续4天腹腔注射链脲佐菌素(streptozocin，stz，70mg/kg)以制备糖尿病模型。在接下来的10天正常饮食喂养。在模型构建的第14天，选择血糖水平超过13.5mmol/l的小鼠。随机分成4组，分别模型组(nc)、s-ha-p-r-a-ha组、s-ha-p-r-a-sa组、s-ha-p-r-a-sa-ca
2+
组。首先将c57bl/6小鼠用avertin麻醉剂麻醉(240mg/kg)。将麻醉后的小鼠用3m胶带将小鼠固定，背部向上，脱毛，乙醇消毒，在背部正中剪出一个0.9cm
×
0.9cm大小的圆形伤口。将不同组凝胶切成直径为0.9cm、高为0.3cm的小圆柱体，植入皮下，将皮肤缝合起来。待小鼠苏醒后放回洁净区域正常饲养。在手术后的第3、5、8、10、16天时，每次取出所有小鼠测量其伤口的大小并拍照。为了进一步测定组织的动态再生过程，在上述的时间内，每次取出3只小鼠处死并取出伤口组织，用4％多聚甲醛固定。然后进行h&e染色，并进行马松三色染色分析，评价伤口组织再生情况。
[0095]
在stz诱导的糖尿病小鼠身上建立了一个完全切除的伤口，在伤口上植入不同组水凝胶，并在0、3、5、8、10、16天内观察伤口的愈合过程。如图7(a、b)所示，从小鼠伤口的图片上可以看出nc组小鼠伤口愈合速度过慢；而水凝胶组都在不同的程度上促进伤口愈合。其中，s-ha-p-r-a-ha组在前5天就出现了明显的伤口变小的情况，伤口面积由0.6cm2变为0.3cm2；到第10天时，伤口面积为0.1cm2，直到第16天时伤口面积仅为0.06cm2；同时在愈合的皮肤上，观察到毛囊生长的迹象。与nc组相比，s-ha-p-r-a-sa及s-ha-p-r-a-sa-ca
2+
两组也在一定程度上促进伤口的愈合。其愈合的速度始终比s-ha-p-r-a-ha慢。
[0096]
此外，对伤口的皮肤进行了h&e染色分析。如图7(c)结果显示：nc组伤口直到第8天才开始出现轻微收缩现象，s-ha-p-r-a-ha组在第3天就开始出现伤口收缩现象，s-ha-p-r-a-sa与s-ha-p-r-a-sa-ca
2+
均值在第5天开始出现伤口收缩现象。虽然三组水凝胶都能在一定程度上促进伤口的愈合，但是，它们在整个伤口愈合的过程中呈现出不同的效果。其中s-ha-p-r-a-ha组自始至终都没有明显的炎症细胞浸润，中性粒细胞的形成层较少，表明修复型的巨噬细胞增多，加强了中性粒细胞的吞噬。然而，s-ha-p-r-a-sa与s-ha-p-r-a-sa-ca
2+
两组在整个伤口愈合的过程中，始终有一定程度的炎症细胞浸润。其次，在nc组中伤口愈合的过程中，其愈合组织呈现无序的状态；而s-ha-p-r-a-ha组则从伤口愈合开始至结束过程中，伤口的胶原层与正常组织的形态接近，该组水凝胶可能促进伤口愈合，并无疤痕产生。因此，该水凝胶s-ha-p-r-a-ha可以作为早期伤口愈合的细胞支架，从而促进组织再生。
[0097]
(4)水凝胶的体内安全性
[0098]
将(3)手术后的小鼠正常饲养12天后，每组取3只进行猝死并取其全血。将全血放置于4℃，自然沉降4h。在4℃、4000rpm条件下离心10min。小心取上清放入新的ep管中，立刻测定alt、ast、crea-s、tp值。
[0099]
将水凝胶植入皮下后正常饲养12天，取血清对其肝肾功能进行检测。结果如图8所示，与正常对照组相比，alt、ast、tp、crea-s没有明显差异，显示在小鼠真皮层上植入凝胶后肝、肾功能无异常，没有受到干扰。因此得出结论，该类水凝胶具有的高度安全性和生物相容性。
[0100]
(5)水凝胶的体内降解
[0101]
将24只雄性小鼠适应性饲养7天后，按体质量随机分成4组，分别为模型组(nc)、s-ha-p-r-a-ha组、s-ha-p-r-a-sa组、s-ha-p-r-a-sa-ca
2+
组。手术同(3)小鼠在手术后第10天猝死。取出切口的皮肤组织，4％多聚甲醛溶液固定，进一步进行h&e染色。在光学显微镜下对切片进行分析，以观察材料在皮下的降解情况。
[0102]
将水凝胶植入小鼠真皮层，观察水凝胶的体内降解。如图9所示，s-ha-p-r-a-ha水凝胶在体内完全降解(图9b)，小鼠皮肤组织形态与正常组没有显著差别。而s-ha-p-r-a-sa和s-ha-p-r-a-sa’在14天内没有完全降解，但容许细胞进入残余的细胞支架内部；实验表明这些水凝胶具有较强的细胞相容性，可作为组织再生的支架，促进细胞的生长。
[0103]
对比例1
[0104]
将硫酸化透明质酸-支链聚乙烯亚胺和氧化透明质酸直接孵育，由于硫酸化透明质酸与支状聚乙烯亚胺进行酰胺缩合形成了纳米粒，而非水溶性结构，无法与氧化性多糖直接形成水凝胶。因此，琥珀酰化芦丁的修饰促进了硫酸化透明质酸-支链聚乙烯亚胺的溶解，并促进了硫酸化透明质酸-支链聚乙烯亚胺与醛基化多糖交联形成大分子网络，从而制
备得到水凝胶结构。
[0105]
以上所述实施例仅是为充分说明本发明而所举的较佳的实施例，本发明的保护范围不限于此。本技术领域的技术人员在本发明基础上所作的等同替代或变换，均在本发明的保护范围之内。本发明的保护范围以权利要求书为准。

技术特征：
1.一种大孔径可注射凝胶，其特征在于：所述大孔径可注射凝胶中包括由硫酸化透明质酸、支状聚乙烯亚胺、琥珀酰化的芦丁和多醛基化合物形成的交联网络结构。2.根据权利要求1所述的大孔径可注射凝胶，其特征在于：所述交联网络结构中还包括离子。3.根据权利要求1所述的大孔径可注射凝胶，其特征在于：所述多醛基化合物包括醛基化多糖、戊二醛、丙三醛、多聚丙烯醛中的一种或几种。4.权利要求1-3任一项所述的大孔径可注射凝胶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：s1、将硫酸化透明质酸与支状聚乙烯亚胺进行交联形成硫酸化透明质酸-支链聚乙烯亚胺接枝聚合物，再与琥珀酰化的芦丁交联得到硫酸化透明质酸-支链聚乙烯亚胺-芦丁聚合物；s2、将硫酸化透明质酸-支链聚乙烯亚胺-芦丁聚合物与多醛基化合物混合，反应形成所述大孔径可注射凝胶。5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，在步骤s1中，所述硫酸化透明质酸-支链聚乙烯亚胺接枝聚合物的结构如下所示：其中，r、r
′
独立地选自so
3-或h，m为10-10000之间的整数，n为1-100000之间的整数。6.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，在步骤s1中，所述硫酸化透明质酸-支链聚乙烯亚胺-芦丁聚合物的结构如下所示：其中，r、r
′
独立地选自so
3-或h，r3选自琥珀酰化的芦丁或h，m为10-10000之间的整数，n为1-100000之间的整数。7.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于：在步骤s2中，与多醛基化合物反应后，还包括将反应产物与离子溶液共孵育的步骤。8.权利要求1-3任一项所述的大孔径可注射凝胶在制备组织工程材料中的应用。9.权利要求1-3任一项所述的大孔径可注射凝胶在制备创面愈合产品中的应用。10.权利要求1-3任一项所述的大孔径可注射凝胶在制备抗炎产品中的应用。

技术总结
本发明公开了一种大孔径可注射凝胶及其在创面愈合中的应用，属于生物医药技术领域。本发明以S-HA-PEI为基础，将琥珀酰化的芦丁修饰在S-HA-PEI的侧链，与多醛基化合物交联，制备新型水凝胶。通过SEM观察发现，该产物具有超大孔径，溶胀率至少高达1700％，适用于在慢性伤口中吸收渗液。同时，该水凝胶不会出现溶血现象，具有良好的生物相容性，在作为细胞支架促进创伤组织修复中表现优异，在组织修复领域具有良好的应用前景。具有良好的应用前景。具有良好的应用前景。


技术研发人员：闫昳姝 任盼盼 杨晶 吴雨翔 宋莹
受保护的技术使用者：江南大学
技术研发日：2023.05.31
技术公布日：2023/8/5