一种阿瑞匹坦胶囊中相关物质的检测方法与流程

1.本发明属于药物检测技术领域，具体涉及一种阿瑞匹坦胶囊中相关物质的检测方法。


背景技术：

2.阿瑞匹坦胶囊是人p物质神经激肽1(nk1)受体的选择性高亲和力拮抗剂。对其他现有治疗化疗引起恶心呕吐(cinv)和术后恶心呕吐(ponv)的药物的作用靶点5-羟色胺受体3(5-ht3)、多巴胺受体和糖皮质激素受体的亲和力低或无亲和力。阿瑞匹坦胶囊与其他止吐药物联合给药，适用于预防高度致吐性抗肿瘤化疗的初次和重复治疗过程中出现的急性和迟发性恶心和呕吐。
3.阿瑞匹坦在水中几乎不溶，难溶于乙腈，属于bcsⅳ类。根据美国药典(usp)各论项下，可以用十八烷基硅烷键合硅胶柱对有关物质进行检测，紫外吸收仅在210nm波长附近存在末端吸收。
4.参考美国药典阿瑞匹坦胶囊(usp《aprepitant capsules》)，完全重现有关物质的检测方法，发现usp《aprepitant capsules》中，经尼龙滤膜过滤的供试品溶液易产生浸出物，使有关物质增加，且无法达到饱和，从而影响检测结果。
5.因此，亟需研发一种检测阿瑞匹坦胶囊中有关物质的新方法。


技术实现要素：

6.本发明旨在至少解决上述现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明提出一种阿瑞匹坦胶囊中相关物质的检测方法，通过改进供试品溶液的制备方法，以有效防止浸出物的产生，可更真实的反应供试品溶液中有关物质的情况，提高检测的稳定性和准确性。
7.为解决上述技术问题，本发明提供了一种阿瑞匹坦胶囊中相关物质的检测方法，包括以下步骤：
8.(1)取有关物质，加入稀释剂，得对照品溶液；
9.(2)取阿瑞匹坦胶囊的内容物，加入所述对照品溶液和稀释剂，超声并间歇振摇，冷却至室温；继续加入所述稀释剂，摇匀、离心，取上清液，得供试品溶液；
10.(3)采用高效液相色谱法对所述供试品溶液进行检测。
11.作为上述方案的进一步改进，步骤(2)中，所述离心的转速为8000-10000转/分钟；优选的，所述离心的转速为10000转/分钟。
12.作为上述方案的进一步改进，步骤(2)中，所述离心的时间为10-30分钟；优选的，所述离心的时间为20分钟。
13.作为上述方案的进一步改进，步骤(1)中，所述对照品溶液的浓度为1.1-1.3μg/ml；优选的，所述对照品溶液的浓度为1.2μg/ml。
14.作为上述方案的进一步改进，步骤(2)中，所述阿瑞匹坦胶囊的内容物与所述对照品溶液的质量体积比为310-350mg：1ml；优选的，所述阿瑞匹坦胶囊的内容物与所述对照品
溶液的质量体积比为328mg：1ml。
15.作为上述方案的进一步改进，步骤(2)中，所述供试品溶液中阿瑞匹坦的浓度为0.5-0.7mg/ml；优选的，所述供试品溶液中阿瑞匹坦的浓度为0.6mg/ml。
16.作为上述方案的进一步改进，步骤(1)和(2)中，所述稀释剂为体积比为0.95-1.05：1的磷酸溶液和乙腈；优选的，所述稀释剂为体积比为1：1的磷酸溶液和乙腈。
17.进一步的，所述磷酸溶液的体积浓度为0.1％，其制备方法为：精密量取磷酸1ml，加水至1000ml，搅拌均匀，即得。
18.作为上述方案的进一步改进，步骤(1)中，所述有关物质包括脱氟阿瑞匹坦，所述脱氟阿瑞匹坦为杂质wi-0283(cas号：170729-76-7)，其结构式如下：
[0019][0020]
作为上述方案的进一步改进，步骤(2)中，所述超声并间歇振摇的时间为5-15分钟；优选的，所述超声并间歇振摇的时间为10分钟。
[0021]
作为上述方案的进一步改进，步骤(3)中，所述高效液相色谱法的色谱条件为：
[0022]
色谱柱：以十八烷基键合硅胶为填料；
[0023]
柱温：35-45℃；
[0024]
流动相a：体积比为95：5的磷酸溶液和乙腈；
[0025]
流动相b：体积比为5：95的磷酸溶液和乙腈；
[0026]
波长：208-212nm；
[0027]
流速：0.8-1.2ml/min；
[0028]
洗脱程序：线性梯度洗脱。
[0029]
优选的，所述高效液相色谱法的色谱条件为：
[0030]
色谱柱：十八烷基键合硅胶色谱柱waters，xterra rp184.6mm
×
150mm，3.5μm；
[0031]
柱温：45℃；
[0032]
流动相a：体积比为95∶5的0.1％的磷酸溶液和乙腈；
[0033]
流动相b：体积比为5∶95的0.1％的磷酸溶液和乙腈；
[0034]
波长：210nm；
[0035]
流速：1.0ml/min。
[0036]
作为上述方案的进一步改进，所述线性梯度洗脱的程序如下：
[0037]
时间(min)流动相a(％)流动相b(％)0-206040
20-25584225-33356533-35356535-456040。
[0038]
本发明的上述技术方案相对于现有技术，至少具有如下技术效果或优点：
[0039]
本发明采用高效液相色谱法对供试品溶液进行检测，并在供试品溶液的制备的过程中采用离心操作替代usp《aprepitant capsules》中的过滤操作，可有效防止浸出物的产生，从而真实的反应供试品溶液中有关物质的情况，使检测结果更加准确、可靠。同时，本发明的检测方法具有专属性强，信噪比大，线性良好，且准确度、进样精密度、重复性和稳定性俱佳的特点。
附图说明
[0040]
图1为专属性试验色谱图；
[0041]
图2为阿瑞匹坦线性关系图；
[0042]
图3为wi-0283线性关系图。
具体实施方式
[0043]
下面结合实施例对本发明进行具体描述，以便于所属技术领域的人员对本发明的理解。有必要在此特别指出的是，实施例只是用于对本发明做进一步说明，不能理解为对本发明保护范围的限制，所属领域技术熟练人员，根据上述发明内容对本发明作出的非本质性的改进和调整，应仍属于本发明的保护范围。同时下述所提及的原料未详细说明的，均为市售产品；未详细提及的工艺步骤或制备方法均为本领域技术人员所知晓的工艺步骤或制备方法。
[0044]
实施例1：阿瑞匹坦胶囊中相关物质的检测方法
[0045]
一种阿瑞匹坦胶囊中相关物质的检测方法，包括以下步骤：
[0046]
(1)将体积比为50：50的0.1％磷酸溶液-乙腈作为稀释剂；
[0047]
(2)称取杂质wi-0283，加入稀释剂溶解，得浓度为1.2μg/ml的对照品溶液；
[0048]
(3)取20粒阿瑞匹坦胶囊的内容物(相当于含阿瑞匹坦约120mg)，混匀，置于200ml容量瓶中，加入对照品溶液1ml；然后加入稀释剂150ml，超声并间歇振摇10分钟，冷却至室温；继续加入稀释剂至刻度，摇匀；取适量溶液，在10000转/分钟转速下离心20分钟，取上清液，得供试品溶液；
[0049]
(4)采用高效液相色谱法对供试品溶液进行检测，色谱条件如下：
[0050]
色谱柱：十八烷基键合硅胶色谱柱waters，xterra rp184.6mm
×
150mm，3.5μm；
[0051]
柱温：45℃；
[0052]
流动相a：体积比为95∶5的0.1％的磷酸溶液和乙腈；
[0053]
流动相b：体积比为5∶95的0.1％的磷酸溶液和乙腈；
[0054]
波长：210nm；
[0055]
流速：1.0ml/min；
[0056]
进样量：10μl；
[0057]
线性梯度洗脱程序如下：
[0058]
时间(min)流动相a(％)流动相b(％)0-20604020-25584225-33356533-35356535-456040。
[0059]
实施例2：专属性试验
[0060]
制备测试溶液：
[0061]
(1)溶剂：将实施例1的稀释剂作为溶剂，即为空白溶液。
[0062]
(2)空白辅料溶液：称取空白辅料208mg(空白辅料的组分为：蔗糖、羟丙甲纤维素、丸芯、十二烷基硫酸钠)，置于200ml量瓶中，加入溶剂150ml，超声并间歇振摇10分钟后取出，冷却至室温；继续加入溶剂稀释至刻度，摇匀；取适量溶液，在10000转/分钟转速下离心20分钟，取上清液，即得。
[0063]
(3)系统适用性溶液：称取阿瑞匹坦对照品30mg，置于50ml容量瓶中，加入溶剂30ml，超声溶解后，加入wi-0283对照品溶液1ml；继续加入溶剂至刻度，摇匀，即得。
[0064]
(4)杂质wi-0283定位溶液：称取wi-0283杂质对照品22.5mg，置于50ml量瓶中，加入溶剂20ml，超声溶解后，加溶剂稀释至刻度，摇匀；再量取1ml溶液，置于50ml量瓶中，加溶剂稀释至刻度，摇匀，即得。
[0065]
采用高效液相色谱法对上述溶液进行检测，色谱条件与实施例1相同，检测图谱如图1所示。由图1可知，空白溶液、空白辅料对杂质wi-0283和阿瑞匹坦均无干扰，且杂质wi-0283和阿瑞匹坦色谱峰间有良好的分离度，说明本发明的检测方法具有良好的专属性。
[0066]
实施例3：定量限与检测限试验
[0067]
1.定量限试验
[0068]
制备测试溶液：
[0069]
(1)溶剂：将实施例1的稀释剂作为溶剂。
[0070]
(2)定量限溶液：分别取杂质wi-0283对照品和阿瑞匹坦对照品各适量，加溶剂溶解并稀释制成每1ml含杂质wi-02830.2μg，阿瑞匹坦0.3μg的溶液。
[0071]
采用高效液相色谱法对定量限溶液进行检测，色谱条件与实施例1相同，连续进样6针，记录图谱，检测结果如表1所示。
[0072]
表1：定量限试验结果
[0073][0074][0075]
由表1可知：阿瑞匹坦定量限浓度为0.3063μg/ml，相当于供试品浓度水平的0.0510％，信噪比均大于10，连续进样6针所得的相对峰面积(rsd)为6.2％(＜10.0％)；杂质wi-0283定量限浓度为0.2228μg/ml，相当于供试品浓度水平的0.0371％，信噪比结果均大于10，连续进样6针所得的峰面积的rsd为8.2％(＜10.0％)。
[0076]
2.检测限试验
[0077]
制备测试溶液：
[0078]
(1)溶剂：将实施例1的稀释剂作为溶剂；
[0079]
(2)检测限溶液：分别取杂质wi-0283对照品和阿瑞匹坦对照品各适量，加溶剂溶解并稀释制成每1ml含杂质wi-0283 0.1μg，阿瑞匹坦0.15μg的溶液。
[0080]
采用高效液相色谱法对检测限溶液进行检测，色谱条件与实施例1相同，连续进样3针，记录图谱，检测结果如表2所示。
[0081]
表2：检测限试验结果
[0082][0083]
由表2可知：阿瑞匹坦检测限浓度为0.1531μg/ml，相当于供试品浓度水平的0.0255％，信噪比结果均大于3；杂质wi-0283检测限浓度为0.1114μg/ml，相当于供试品浓度水平的0.0186％，信噪比结果均大于3。
[0084]
实施例4：线性试验
[0085]
制备测试溶液：
[0086]
(1)溶剂：将实施例1的稀释剂作为溶剂；
[0087]
(2)线性贮备溶液：分别取杂质wi-0283对照品和阿瑞匹坦对照品各适量，加溶剂使溶解并稀释制成每1ml含阿瑞匹坦10μg、含杂质wi-02837.5μg的溶液。
[0088]
(3)线性溶液：
[0089]
线性溶液1：量取线性贮备溶液3ml，置于100ml容量瓶中，加溶剂定量稀释至刻度，摇匀，即得。
[0090]
线性溶液2：量取线性贮备溶液3ml，置于50ml容量瓶中，加溶剂定量稀释至刻度，摇匀，即得。
[0091]
线性溶液3：量取线性贮备溶液3ml，置于25ml容量瓶中，加溶剂定量稀释至刻度，摇匀，即得。
[0092]
线性溶液4：量取线性贮备溶液3ml，置于20ml容量瓶中，加溶剂定量稀释至刻度，摇匀，即得。
[0093]
线性溶液5：量取线性贮备溶液3ml，置于50ml容量瓶中，加溶剂定量稀释至刻度，摇匀，即得。
[0094]
采用高效液相色谱法对上述溶液进行检测，色谱条件与实施例1相同，记录图谱，检测结果如表3-4及图2-3所示。
[0095]
表3：阿瑞匹坦线性试验结果
[0096][0097]
表4：wi-0283线性试验结果
[0098][0099][0100]
由表3-4及图2-3可知：阿瑞匹坦在0.3063-1.8376μg/ml(0.05-0.31％)浓度范围内，浓度与峰面积呈良好的线性关系，相关系数为0.9989(＞0.990)，y轴截距与杂质限度100％浓度对应的峰面积比值为0.16％(＜10.0％)；杂质wi-0283在0.2228-1.3368μg/ml(0.04-0.22％)浓度范围内，浓度与峰面积呈良好的线性关系，相关系数为0.9979(＞0.990)，y轴截距与杂质限度100％浓度对应的峰面积比值为0.98％(＜10.0％)，说明本发明的检测方法的线性良好。
[0101]
实施例5：准确度试验
[0102]
浓度点设置：以限度浓度(对照品浓度/供试品浓度＝0.2％)为100％，按照25％、100％、150％三个浓度点对杂质wi-0283的准确度进行试验。
[0103]
制备测试溶液：
[0104]
(1)溶剂：将实施例1的稀释剂作为溶剂；
[0105]
(2)杂质wi-0283对照品贮备液：
[0106]
杂质wi-0283准确度贮备液ⅰ：取杂质wi-0283对照品22.5mg，置于500ml容量瓶，加入溶剂300ml，超声至完全溶解，用溶剂稀释至刻度，摇匀，即得。
[0107]
杂质wi-0283准确度贮备液ⅱ：取杂质wi-0283对照品36mg，置于200ml容量瓶，加入溶剂150ml，超声至完全溶解，用溶剂稀释至刻度，摇匀，即得。
[0108]
杂质wi-0283准确度贮备液ⅲ：取杂质wi-0283对照品27mg，置于100ml容量瓶，加入溶剂60ml，超声至完全溶解，用溶剂稀释至刻度，摇匀，即得。
[0109]
(3)阿瑞匹坦对照品溶液：称取阿瑞匹坦对照品适量，加入溶剂溶解并稀释使成每1ml含阿瑞匹坦1.2μg的溶液，相同的方法配制2份。
[0110]
(4)供试品溶液：按实施例1相同的方法制备供试品溶液6份。
[0111]
(5)准确度溶液：
[0112]
25％水平准确度溶液：取20粒阿瑞匹坦胶囊的内容物(相当于含阿瑞匹坦约120mg)，混匀，置于200ml容量瓶中，加入杂质wi-0283准确度贮备液ⅰ1ml，再加入溶剂
150ml，超声并间歇振摇10分钟，冷却至室温，继续加入溶剂至刻度，摇匀，取适量溶液，在10000转/分钟转速下离心20分钟，取上清液，即得，相同的方法配制3份。
[0113]
100％水平准确度溶液：取20粒阿瑞匹坦胶囊的内容物(相当于含阿瑞匹坦约120mg)，混匀，置于200ml容量瓶中，加入杂质wi-0283准确度贮备液ⅱ1ml，再加入溶剂150ml，超声并间歇振摇10分钟，冷却至室温，继续加入溶剂至刻度，摇匀，取适量溶液，在10000转/分钟转速下离心20分钟，取上清液，即得，相同的方法配制3份。
[0114]
150％水平准确度溶液：取20粒阿瑞匹坦胶囊的内容物(相当于含阿瑞匹坦约120mg)，混匀，置于200ml容量瓶中，加入杂质wi-0283准确度贮备液ⅲ1ml，再加入溶剂150ml，超声并间歇振摇10分钟，冷却至室温，继续加入溶剂至刻度，摇匀，取适量溶液，在10000转/分钟转速下离心20分钟，取上清液，即得，相同的方法配制3份。
[0115]
采用高效液相色谱法对上述溶液进行检测，色谱条件与实施例1相同，记录图谱，检测结果如表5所示，表中：n/a：表示不适用；n/d表示未检出。
[0116]
按照下列公式计算回收率：
[0117]
回收率(％)＝(x
1-x2)/m
×
100％
[0118]
公式中：x1为供试品中杂质wi-0283测得量(μg)；
[0119]
x2为供试品中杂质wi-0283原有量(μg)；
[0120]
m为杂质wi-0283加入量(μg)。
[0121]
表5：杂质wi-0283准确度试验结果
[0122][0123]
由表5可知，25％水平浓度准确度溶液回收率单值在99-114％(在80-120％之间)，其他准确度浓度水平的回收率101-105％(在90-110％之间)，平均回收率(n＝9)为104％，3个水平共9份样品的回收率rsd值为4.3％(＜10％)，说明本发明检测方法的准确度良好。
[0124]
实施例6：进样精密度试验
[0125]
制备测试溶液：
[0126]
(1)溶剂：将实施例1的稀释剂作为溶剂；
[0127]
(2)阿瑞匹坦对照品溶液：称取阿瑞匹坦对照品适量，加入溶剂溶解并稀释制成每1ml含阿瑞匹坦1.2μg的溶液，相同的方法配制2份，分别为对照品溶液1(std1)和对比照品
溶液2(std2)。
[0128]
采用高效液相色谱法对上述溶液进行检测，色谱条件与实施例1相同，记录图谱，其中：对照品溶液1连续进样5针，对照品溶液2连续进样2针，检测结果如表6所示。
[0129]
表6：阿瑞匹坦进样精密度试验结果
[0130][0131]
由表6可知，对照品溶液1连续进样5针，阿瑞匹坦色谱峰峰面积rsd值为2.4％(＜5.0％)。对照品溶液2与对照品溶液1的校正因子(f)回收率为101.1％(在90-110％之间)，说明本发明的检测方法的精密度良好。
[0132]
实施例7：重复性试验
[0133]
制备测试溶液：
[0134]
(1)溶剂：将实施例1的稀释剂作为溶剂；
[0135]
(2)阿瑞匹坦对照品溶液：称取阿瑞匹坦对照品适量，加入溶剂溶解并稀释制成每1ml含阿瑞匹坦1.2μg的溶液，相同的方法配制2份，分别为对照品溶液1和对比照品溶液2。
[0136]
(3)杂质wi-0283对照品贮备液：取杂质wi-0283对照品36mg，置于200ml容量瓶，加入溶剂150ml，超声至完全溶解，用溶剂稀释至刻度，摇匀，即得。
[0137]
(4)供试品溶液：按实施例1相同的方法制备供试品溶液6份。
[0138]
采用高效液相色谱法对上述溶液进行检测，色谱条件与实施例1相同，记录图谱，检测结果如表7所示。
[0139]
采用阿瑞匹坦外标法计算杂质含量，计算公式如下：
[0140][0141][0142][0143]
总杂(％)＝各单杂之和
[0144]
公式中：f为校正因子；为杂质平均校正因子；
[0145]ms
为阿瑞匹坦对照品称样量，mg；
[0146]
p为阿瑞匹坦对照品含量，％；
[0147]as
为对照品溶液色谱图中阿瑞匹坦峰峰面积；
[0148]vs
为阿瑞匹坦对照品溶液稀释体积，ml；
[0149]
a为供试品溶液色谱图中杂质峰峰面积；
[0150]
v为供试品溶液稀释体积，ml；
[0151]
l为标示量，mg；n为阿瑞匹坦胶囊的粒数，20；
[0152]
m为胶囊内容物总重，mg；m为供试品称样量，mg。
[0153]
表7：重复性试验结果
[0154][0155][0156]
由表7可知：6份供试品溶液中，杂质wi-0283和最大其他单杂极差均为0(＜0.05％)；总杂含量极差为0(＜0.10％)。符合可接受标准，表明本发明的检测方法的重复性良好。
[0157]
实施例8：待测溶液稳定性试验
[0158]
制备测试溶液：
[0159]
(1)溶剂：将实施例1的稀释剂作为溶剂；
[0160]
(2)阿瑞匹坦对照品溶液：称取阿瑞匹坦对照品适量，加入溶剂溶解并稀释制成每1ml含阿瑞匹坦1.2μg的溶液，相同的方法配制2份。
[0161]
(3)杂质wi-0283对照品贮备液：取杂质wi-0283对照品36mg，置于200ml容量瓶，加入溶剂150ml，超声至完全溶解，用溶剂稀释至刻度，摇匀，即得。
[0162]
(4)待测溶液：按实施例1相同的方法制备的供试品溶液作为待测溶液，相同的方法配制3份。
[0163]
采用高效液相色谱法对上述溶液进行检测，色谱条件与实施例1相同，分别取稳定的待测溶液，室温条件下，于0天、6天和7天进样，记录图谱，按外标法计算溶液中杂质含量，检测结果如表8所示。
[0164]
表8：待测溶液稳定性试验结果
[0165][0166]
由表8可知，室温放置7天，供试品溶液的杂质wi-0283含量与0天相比，绝对差值为0.01％(＜0.05％)；最大其他单杂含量与0天的含量的绝对差均为0.03％(＜0.05％)，总杂含量与0天绝对差值为0.05％(＜0.1％)，表明供试品溶液在室温下放置7天内稳定。
[0167]
实施例9：离心参数试验
[0168]
制备测试溶液：
[0169]
(1)溶剂：将实施例1的稀释剂作为溶剂；
[0170]
(2)阿瑞匹坦对照品溶液：称取阿瑞匹坦对照品适量，加入溶剂溶解并稀释使成每1ml含阿瑞匹坦1.2μg的溶液，相同的方法配制2份。
[0171]
(3)待测溶液：将参照实施例1相同的方法制备的供试品溶液作为待测溶液，通过改变供试品溶液的离心时间分别为15分钟、20分钟和30分钟，得3份待测溶液。
[0172]
采用高效液相色谱法对上述3份待测溶液进行检测，色谱条件与实施例1相同，记录图谱，检测结果如表9所示。
[0173]
表9：离心参数试验结果
[0174][0175]
由表9可知，离心15分钟、20分钟和30分钟的供试品溶液，对检测结果无影响。
[0176]
对比例1：usp《aprepitant capsules》的检测方法
[0177]
按照usp《aprepitant capsules》的检测方法，检测阿瑞匹坦胶囊中有关物质的含量，其检测步骤如下：
[0178]
(1)将体积比为50：50的0.1％磷酸溶液-乙腈作为稀释剂；
[0179]
(2)称取杂质wi-0283，加入稀释剂溶解，得浓度为1.2μg/ml的对照品溶液；
[0180]
(3)取20粒阿瑞匹坦胶囊的内容物(相当于含阿瑞匹坦约120mg)，混匀，置于200ml容量瓶中，加入对照品溶液1ml；然后加入稀释剂150ml，超声并间歇振摇10分钟，冷却至室温；继续加入稀释剂至刻度，摇匀；过滤(尼龙，0.45μm)，得供试品溶液；
[0181]
(4)将供试品溶液分别弃去0ml、1ml、2ml、3ml、4ml、5ml、6ml和7ml，取续滤液作为供试品溶液，采用高效液相色谱法对供试品溶液进行检测，记录图谱，色谱条件如下：
[0182]
色谱柱：十八烷基键合硅胶色谱柱waters，xterra rp184.6mm
×
150mm，3.5μm；
[0183]
柱温：35℃；
[0184]
流动相a：体积比为95：5的0.1％的磷酸溶液和乙腈；
[0185]
流动相b：体积比为5：95的0.1％的磷酸溶液和乙腈；
[0186]
波长：210nm；
[0187]
流速：1.0ml/min；
[0188]
进样量：10μl；
[0189]
线性梯度洗脱程序如下：
[0190]
时间(min)流动相a(％)流动相b(％)0-20604020-25584225-333565。
[0191]
按照上述usp《aprepitant capsules》的检测方法所测得的杂质含量如表10所示。
[0192]
表10：实施例1和对比例1的检测结果对比
[0193]
样品杂质wi-0283(％)最大未知杂质单杂(％)总杂(％)杂质个数实施例10.24未检出0.241弃去0ml0.281.252.866绝对差值(％)0.041.252.62/弃去1ml0.290.160.603绝对差值(％)0.050.160.36/弃去2ml0.250.070.353绝对差值(％)0.010.070.09/弃去3ml0.250.050.302绝对差值(％)0.010.050.06/弃去4ml0.250.120.413绝对差值(％)0.010.120.17/弃去5ml0.250.040.292绝对差值(％)0.010.040.05/弃去6ml0.300.140.483绝对差值(％)0.060.140.24/弃去7ml0.240.160.412绝对差值(％)00.160.17/
[0194]
由表10可知，将对比例1的过滤供试品溶液与本发明的离心供试品溶液进行比较，各单杂含量的绝对差值≤0.05％，总杂含量绝对差值≤0.10％。对比例1弃去初滤液0ml、1ml、2ml、3ml、4ml、5ml、6ml、7ml后的供试品溶液与本发明离心后的供试品溶液检测结果相比，杂质检出量均有差别，随着弃去初滤液体积增加，杂质个数与杂质量均大于离心制备的供试品溶液检测结果。因此，样品制备采用离心方式，转速10000转/min，离心时间不少于10分钟。考虑到稀释剂中含有乙腈，离心管的材质为塑料材质，乙腈长时间浸泡会有浸出物产
生，因此离心的时间应不大于30分钟。
[0195]
对于本发明所属技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下还可以做出若干简单推演或替换，而不必经过创造性的劳动。因此，本领域技术人员根据本发明的揭示，对本发明做出的简单改进都应该在本发明的保护范围之内。上述实施例为本发明的优选实施例，凡与本发明类似的工艺及所作的等效变化，均应属于本发明的保护范畴。

技术特征：
1.一种阿瑞匹坦胶囊中相关物质的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)取有关物质，加入稀释剂，得对照品溶液；(2)取阿瑞匹坦胶囊的内容物，加入所述对照品溶液和稀释剂，超声并间歇振摇，冷却至室温；继续加入所述稀释剂，摇匀、离心，取上清液，得供试品溶液；(3)采用高效液相色谱法对所述供试品溶液进行检测。2.根据权利要求1所述的阿瑞匹坦胶囊中相关物质的检测方法，其特征在于，步骤(2)中，所述离心的转速为8000-10000转/分钟。3.根据权利要求2所述的阿瑞匹坦胶囊中相关物质的检测方法，其特征在于，步骤(2)中，所述离心的时间为10-30分钟。4.根据权利要求1所述的阿瑞匹坦胶囊中相关物质的检测方法，其特征在于，步骤(1)中，所述对照品溶液的浓度为1.1-1.3μg/ml。5.根据权利要求1或4所述的阿瑞匹坦胶囊中相关物质的检测方法，其特征在于，步骤(2)中，所述阿瑞匹坦胶囊的内容物与所述对照品溶液的质量体积比为310-350mg：1ml；所述供试品溶液中阿瑞匹坦的浓度为0.5-0.7mg/ml。6.根据权利要求1所述的阿瑞匹坦胶囊中相关物质的检测方法，其特征在于，步骤(1)和(2)中，所述稀释剂为体积比为0.95-1.05：1的磷酸溶液和乙腈；所述磷酸溶液的体积浓度为0.1％。7.根据权利要求1所述的阿瑞匹坦胶囊中相关物质的检测方法，其特征在于，步骤(1)中，所述有关物质包括脱氟阿瑞匹坦。8.根据权利要求1所述的阿瑞匹坦胶囊中相关物质的检测方法，其特征在于，步骤(2)中，所述超声并间歇振摇的时间为5-15分钟。9.根据权利要求1所述的阿瑞匹坦胶囊中相关物质的检测方法，其特征在于，步骤(3)中，所述高效液相色谱法的色谱条件为：色谱柱：以十八烷基键合硅胶为填料；柱温：35-45℃；流动相a：体积比为95：5的磷酸溶液和乙腈；流动相b：体积比为5：95的磷酸溶液和乙腈；波长：208-212nm；流速：0.8-1.2ml/min；洗脱程序：线性梯度洗脱。10.根据权利要求9所述的阿瑞匹坦胶囊中相关物质的检测方法，其特征在于，所述线性梯度洗脱的程序如下：时间(min)流动相a(％)流动相b(％)0-20604020-25584225-33356533-35356535-456040。

技术总结
本发明属于药物检测技术领域，具体公开了一种阿瑞匹坦胶囊中相关物质的检测方法，包括以下步骤：取有关物质，加入稀释剂，得对照品溶液；取阿瑞匹坦胶囊的内容物，加入对照品溶液和稀释剂，超声并间歇振摇，冷却至室温；继续加入稀释剂，摇匀、离心，取上清液，得供试品溶液；采用高效液相色谱法对供试品溶液进行检测。本发明采用高效液相色谱法对供试品溶液进行检测，并在供试品溶液的制备的过程中采用离心操作替代过滤操作，有效防止了浸出物的产生，从而真实的反应供试品溶液中有关物质的情况，使检测结果更加准确、可靠。同时，本发明的检测方法具有专属性强，信噪比大，线性良好，且准确度、进样精密度、重复性和稳定性俱佳的特点。重复性和稳定性俱佳的特点。重复性和稳定性俱佳的特点。


技术研发人员：邹平 齐宜广 王辉 乔畅
受保护的技术使用者：江苏慧聚药业股份有限公司广州分公司
技术研发日：2023.05.29
技术公布日：2023/8/14