一种拟粉红锁掷孢酵母菌及其应用

一种拟粉红锁掷孢酵母菌及其应用
发明领域
1.本发明涉微生物和植物保护领域，具体涉及一种拟粉红锁掷孢酵母菌(sporidiobolus pararoseus)及其在防治植物根结线虫中的应用。


背景技术：

2.根结线虫病是农作物中重要的土传病害，是由根结线虫侵染农作物的根系引发的病害。根结线虫主要侵染作物的须根，期幼虫通常在根尖后部侵入，侵入后在根内向根尖移动，刺激细胞形成永久性的取食位点，这些取食位点细胞的细胞核分裂，但细胞壁并不分裂，形成多核的巨型细胞，巨型细胞大小约为正常细胞大小的100倍。一旦巨型细胞形成，线虫便开始发育，体型由线型转化为香肠型。一般在侵入14天，j2线虫变为j3线虫，再4-6天后由j3变为j4线虫，随后转化为梨形的成虫。根结线虫为孤雌生殖为主，只有在一般在不利环境中时才形成雄虫，雄虫一般不取食。孤雌生殖相对于两性生殖通常具有更短的繁殖周期和更大的繁殖量，有利于线虫的生殖及生存。
3.根结线虫为世界性分布的植物寄生性线虫，危害的典型症状为侵染根系后，在根系上形成大小不等的根结。根结线虫侵染后影响根系对水分和养分的吸收和向上运输，在地上部的症状主要表现为生长缓慢、萎蔫、叶片黄化，器官畸形等。与农业生产直接相关的表现为产量及质量的降低，从而造成大量的经济损失。在我国根结线虫为主要的土传病原物之一，可侵染寄主植物超过3000种，分属于114个科，尤其以葫芦科、茄科及十字花科为主。我国根结线虫最早的报道为1932年涂治报道中国南方番茄发生根结线虫病，且危害严重。世界范围内，植物寄生性线虫每年造成的损失估计为1570亿美元(abad 2008)。根结线虫病在设施和露地环境下均有发生，特别是在温室条件下，重茬连作是的病害连续发生，一般减产30％～70％，根结线虫病已成为设施蔬菜生产中的严重障碍。
4.防控根结线虫危害的策略为首先选用抗病品种，培育健康苗；其次为夏季高温闷棚、日光消毒、冬季土壤翻耕并冷冻处理；再者与葱蒜类及大田作物轮作；最后选用杀线虫剂或生物制剂防治。其中生物防治是一个研究重点，具有绿色安全的特点，与农业病虫害的绿色防控紧密相关，生物防治越来越受到重视。在研究中，针对根结线虫分离到的生防菌涉及到真菌、细菌等多种微生物。在细菌中，针对芽孢杆菌的研究较多，枯草芽孢杆菌、坚强芽孢杆菌、穿刺芽孢杆菌等生防菌用于防控根结线虫病被相继报道。在真菌中绿色木霉、钩状木霉、哈茨木霉等多种木霉菌也相继被报道，同时其他一些丝状真菌如淡紫拟青霉、轮枝菌、匹克尼亚菌等也被应用于根结线虫病的防控。在研究中关于酵母菌的研究较少，酵母菌为单细胞的真菌，具有容易培养及保存，在土壤中存活时间长，同时可以产生丰富的次生代谢产物，在生防菌开发方面具有很好的潜力。


技术实现要素：

5.本发明人从果园根际土壤中分离鉴定到一株拟粉红锁掷孢酵母菌，并针对根结线虫病的防治作用进行了研究，为在农业生产中应用于防控根结线虫病奠定了基础。
6.因此，本发明的目的在于提供一种用于防治根结线虫病的拟粉红锁掷孢酵母菌菌株sp-s06。本发明的拟粉红锁掷孢酵母菌来自于果园根际土壤，而且对根结线虫具有良好的作用效果。通过试验证明，分离到的拟粉红锁掷孢酵母菌菌株在室内及田间对根结线虫均具有较好的趋避作用、致死活性及防治效果，这对于防治根结线虫病的危害，保障蔬菜产业的可持续发展具有重要意义。
7.该菌株已于2022年10月11日保藏于布达佩斯条约微生物国际保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称cgmcc)。地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编：100101。保藏号是cgmccno.25890，分类命名：为拟粉红锁掷孢酵母菌(sporidiobolus pararoseus)，经检测，存活。
8.该菌株在摇床内震荡培养，采用培养液及其上清液处理分别根结线虫二龄幼虫，检测其对根结线虫的致死作用，证实该菌培养液在12h内对线虫的致死率达到100％。采用培养皿内对峙法检测菌株对线虫的趋避性，证实该菌株发酵液及上清液可以显著驱避根结线虫；在室内盆栽中，对根结线虫的防控效果达到75.5％。在田间将该菌发酵液进行土壤浇灌，然后定植黄瓜幼苗，进行防控根结线虫，证实该菌对根结线虫病在田间的防效达50.8％。在田间菌株对黄瓜植株的促生长作用达到17.2％。
9.由此，本发明第二方面是提供所述拟粉红锁掷孢酵母菌菌株sp-s06在防控作物如蔬菜根结线虫中的应用。
10.进一步，本发明第三方面提供利用所述的拟粉红锁掷孢酵母菌菌株sp-s06防治根结线虫的方法，其是将所述桔假丝酵母菌进行发酵培养后，将发酵液接种到土壤苗穴中，然后在苗穴中定植植物苗，进行正常管理栽培。
11.优选地，所述发酵培养是将所述拟粉红锁掷孢酵母菌菌株sp-s06接种于液体培养基中在25-32℃，150-200rpm条件下发酵培养2-4天。
12.更优选地，所述液体培养基为nydb培养基：10g/l酵母粉，20g/l胰蛋白胨，20g/l葡萄糖，ph：7.0～7.2，121℃，20min进行灭菌。
13.进一步优选地，培养条件为在28℃，180rpm条件下发酵培养3天。
14.具体实施方式中，所述植物苗是黄瓜苗，同时也适用于黄瓜、甜瓜、西瓜、番茄及辣椒等蔬菜作物。
15.本发明第四方面是提供防治根结线虫的生防制剂，其采用所述的拟粉红锁掷孢酵母菌菌株sp-s06发酵培养得到的发酵液或浓缩液制备得到。
16.本发明的有益效果在于，拟粉红锁掷孢酵母菌菌株sp-s06发酵液对根结线虫二龄幼虫的致死率达到100％，在盆栽实验中的防治效果达到75.5％，在田间防效达到50.8％，促进植株生长17.2％，而且该菌株的发酵液显著趋避根结线虫幼虫的作用，防治效果高且稳定，在农业生产中较大应用前景。同时，拟粉红锁掷孢酵母菌菌株sp-s06为从根际土壤中分离到的酵母菌，对农作物安全无害，在农业应用中具有安全性特点。本发明首次筛选到拟粉红锁掷孢酵母菌并应用于根结线虫的防控，在生防中具有较大的应用价值。
附图说明
17.图1拟粉红锁掷孢酵母菌sp-s06菌株形态。
18.图2线虫趋化性试验示意图。
具体实施方式
19.以下结合具体的实施范例对本发明的技术方案进行进一步的描述。首先将拟粉红锁掷孢酵母菌sp-s06菌株进行分离纯化培养，然后进行发酵培养，对发酵液及上清液的杀线虫活性及对线虫的驱避活性进行测试，同时，在盆栽及田间条件下，将拟粉红锁掷孢酵母菌sp-s06菌株发酵培养液接种到黄瓜上用于防治根结线虫。
20.实施例1：拟粉红锁掷孢酵母菌sp-s06菌株分离、纯化及鉴定
21.从廊坊市伊指挥营村果园中苹果根际均匀取土壤样品，共3份，各取200g，混合均匀；从中取50g加入1000ml蒸馏水中，搅拌均匀，静置3min，取1ml上清液，用灭菌水稀释100倍，然后取稀释后的液体50μl涂布在乳酸pda平板(马铃薯200g，葡萄糖20g，乳酸5ml，琼脂粉15g/1l，定容至1l，ph＝5.0)。配制时，将马铃薯去皮，称取200g，切块，煮沸15min，采用纱布过滤掉薯块及残渣，取过滤液加入葡萄糖20g，琼脂15g，乳酸5ml，经过121℃，20min高温高压灭菌，然后在培养皿中铺制成平板，用于分离纯化酵母菌。其中采用乳酸培养基是为了保持培养基的酸性ph值5-6，酵母可以在酸性培养基上正常生长，而其他微生物在这个酸性范围内不能生长，乳酸的作用就是抑制其他杂菌，有利于酵母的分离纯化。土壤稀释液涂抹均匀后倒置于28℃恒温培养箱中培养2d，待平板上长出菌落后，进行单菌落纯化，挑取单菌落在乳酸pda培养基平板划线分离纯化，获得单菌落，用于分类鉴定。每个平板上大约可以长出大约30个单菌落，由1开始随机编号(sp-s01)，然后按照编号单菌落扩繁鉴定，获得第六个单菌落菌株sp-s06菌株。根据《真菌鉴定手册》对菌株进行形态学测定。
22.参见图1，获得sp-s06菌株在乳酸pda培养基平板上，30℃培养，菌株生长迅速，3天时菌落直径约为1.5-2.0mm，菌落橘红色，品红色，奶酪状至粘液状，表面隆起，光滑或皱褶，反光或不反光，边缘光滑或刻蚀状。细胞椭圆形，单边芽殖，有菌醭，菌环和沉淀形成；掷孢子肾形。sp-s06菌株具有耐酸性，在ph5-6的条件下生长正常。依照《真菌鉴定手册》对sp-s06菌株形态进行测定，确定该菌株为拟粉红锁掷孢酵母菌(sporidiobolus pararoseus)。
23.进一步采用分子生物学鉴定。用灭菌的牙签挑取单菌落，在pcr专用管中轻轻在底部一点，将菌体粘在管底部，作为pcr模板，进行菌体pcr扩增。采用真菌鉴定通用引物nl1(正向引物)和nl4(反向引物)进行26srrna序列d1/d2区段扩增。pcr扩增反应体系为50μl，含有25μl extaq酶，1μl正向引物，1μl反向引物，3μldna模板，无菌水20μl。扩增条件：94℃5min，94℃30s，50℃30s，72℃1min，30个循环；72℃10min终止扩增。扩增产物经1％琼脂糖凝胶电泳分离鉴定，pcr产物直接进行双向测序，并在ncbi网站进行blast对比。
24.用引物nl1(5
’‑
gcatatcaataagcggaggaaaag-3’)、nl4(5
’‑
ggtccgtgtttcaagacgg-3’)进行酵母菌26srdna的d1/d2区序列扩增，pcr产物经1％琼脂糖凝胶电泳。经测序分析菌株扩增的26srdna序列长为618bp(seq id no：1所示)。将菌株的26srdna序列进行blast分析后，结果显示，sp-s06菌株与拟粉红锁掷孢酵母菌(sporidiobolus pararoseus)相似度达到了100％。鉴定菌株为拟粉红锁掷孢酵母菌(sporidiobolus pararoseus)。对该菌株进行了保藏。
25.实施例2：拟粉红锁掷孢酵母菌sp-s06菌株对线虫趋、避作用影响
26.试验用培养基及其配方：
27.nyda培养基：10g/l酵母粉，20g/l胰蛋白胨，20g/l葡萄糖，固体培养基添加琼脂15-20g/l琼脂，ph：7.0～7.2，分装到三角瓶中进行灭菌，121℃，20min。
28.nydb培养基：10g/l酵母粉，20g/l胰蛋白胨，20g/l葡萄糖，ph：7.0～7.2，分装到三角瓶中进行灭菌，121℃，20min。
29.(1)sp-s06菌株发酵液的制备
30.将拟粉红锁掷孢酵母sp-s06菌株，在nyda培养基平板上进行划线纯化及活化，在28℃下培养3天，用接种环刮取活化的菌落，接种到含有100mlnydb液体培养基的250ml三角瓶中，在28℃中震荡(180rpm)培养3天，当其发酵液吸光值od
600
达到1.0时，将发酵液用于试验。同时将部分发酵液在10000rpm下离心3min，使得菌体沉淀，取上部上清液用于试验，分别由于对根结线虫(meloidogyne spp.)二龄幼虫的趋避性分析。
31.(2)制备试验用根结线虫
32.根结线虫采自中国农业科学院蔬菜花卉研究所温室。将根结线虫病发生严重的辣椒的根系取出，用水轻轻冲洗，从根系表面小心取下卵块，放在0.5％的次氯酸钠中消毒3min，再用无菌水冲洗3次，将卵块表面残余的试剂冲洗掉干净，将消毒后的卵块放在含有少量无菌水的培养皿中，在25℃条件下孵化24h-48h，收集孵化的根结线虫二龄幼虫，用于测试试验。
33.(3)试验方法
34.采用培养皿(9cm)进行根结线虫趋化性分析，培养皿从左到右分为6个部分(1-6)，从上到下分也为6个部分，一共有6
×
6个小格(图2)。用0.5％的水琼脂制作平板。将20μl发酵液添加至培养皿左边缘中心处(b位置)，在培养皿中心处(a位置)加入大约100条根结线虫二龄幼虫(20μl)，在25℃下观察线虫的移动情况。研究中，线虫由中心位置向菌液位置(1-3部分)移动确定为具有吸引作用，由中心向远离菌液方向移动(4-6部分)确定为具有排斥(驱避)作用。在12h时，统计每个培养皿中两个部分的线虫数量，以及仍然停留在线虫接种位点的线虫数量，进行比较分析。每个处理10个培养皿，试验独立重复3次。试验同时设置20μl sp-s06菌株上清液处理，以及20μl无菌水作为对照。
35.结果显示，在12h时二龄幼虫对发酵液及上清液处理均表现出强烈的排斥现象(表1)，在菌液及上清液处理中，线虫趋向于远离发酵液及上清液，在排斥区的线虫数量大于吸引区的数量。在发酵液处理中吸引区及排斥区的线虫分别为17.2条及80.5条，上清液处理中具有相似的情况，吸引区及排斥区的线虫分别为22.1条及79.4条。在清水对照中，在吸引区及排斥区的线虫数量差异不大，分别为49.5及51.0条(表1)。
36.表1线虫趋避作用分析(单位：条)
37.处理吸引区线虫中间接种点线虫排斥区线虫发酵液17.24.780.5上清液22.15.479.4清水对照49.55.351.0
38.实施例3：拟粉红锁掷孢酵母sp-s06菌株的杀线虫作用分析
39.(1)sp-s06菌株发酵液的制备
40.将sp-s06菌株，在nyda培养基平板上进行划线纯化及活化，在28℃下培养3天，用接种环刮取活化的菌落，接种到含有100mlnydb液体培养基的250ml三角瓶中，在28℃中震荡(180rpm)培养3天，当其发酵液吸光值od
600
达到1.0时，将发酵液及采用无菌水配置的其10倍、100倍稀释液用于试验，同时将部分发酵液在10000rpm下离心3min，使得菌体沉淀，取
上部上清液及采用无菌水配置的10倍、100倍稀释液用于试验，分别处理根结线虫(meloidogyne spp.)二龄幼虫，测定sp-s06菌株发酵液对根结线虫的致死作用。
41.(2)制备试验用根结线虫
42.南方根结线虫采自中国农业科学院蔬菜花卉研究所温室。将根结线虫病发生严重的辣椒的根系取出，用水轻轻冲洗，从根系表面小心取下卵块，放在0.5％的次氯酸钠中消毒3min，再用无菌水冲洗3次，将卵块表面残余的试剂冲洗掉干净，将消毒后的卵块放在含有少量无菌水的培养皿中，在25℃条件下孵化24h-48h，收集孵化的根结线虫二龄幼虫，用于测试试验。
43.(3)试验方法
44.在无菌的24孔细胞培养板上，每个孔内分别加入发酵液1ml，然后加入10μl线虫悬浮液，约含100条线虫，每个处理做10个孔(样本)，重复3次。以同样方法进行10倍稀释发酵液、100倍稀释发酵液处理，以及上清液、10倍上清液、100倍上清液处理，同时以无菌水作为对照，放在室温下24h，观察根结线虫的死亡情况，计算校正死亡率，即为杀线虫效果。校正死亡率计算公式如下：
45.校正死亡率(％)＝100
×
(处理线虫死亡率—对照线虫死亡)/(1—对照线虫死亡率)。(4)试验结果：
46.通过上述试验，测定发酵液及上清液处理24h对根结线虫的致死效果，结果表明不同发酵液倍数对线虫的作用效果不同，发酵液原液及10倍稀释液对根结线虫的校正死亡率均为100％，发酵液稀释100倍后防治效果降低，但效果仍然达到55.3％(表2)。sp-s06菌株发酵液的上清液杀线虫效果与发酵液的效果相近，在上清液及10倍稀释液中根结线虫的校正死亡率均为100％，100倍稀释上清液中杀线虫效果为65.6％(表3)。试验说明sp-s06菌株发酵液具有良好的防治根结线虫效果。
47.表2不同浓度的sp-s06菌株发酵液杀线虫效果
48.线虫死亡率原液(％)10倍液(％)100倍液(％)清水对照(％)重复110010057.11.3重复210010056.31.5重复310010054.51.7校正死亡率100％100％55.3％-49.表3不同浓度的上清液杀线虫效果
50.线虫死亡率原液(％)10倍液(％)100倍液(％)清水对照(％)重复110010067.32.1重复210010066.41.8重复310010065.21.7校正死亡率100％100％65.6％-51.实施例4：拟粉红锁掷孢酵母sp-s06菌株盆栽防治根结线虫病效果
52.(1)试验方法
53.将拟粉红锁掷孢酵母sp-s06菌株接种到含有100mlnydb液体培养基的250ml三角瓶中，在28℃中震荡(180rpm)培养3天，当其发酵液吸光值od
600
＝1.0时用于防控试验。黄瓜选用品种为“中农16”，将种子消毒催芽后，在苗盘中育苗，当黄瓜苗长到1片真叶展开时用
于试验。将1片真叶期的黄瓜苗移栽到苗钵中(直径10cm，高10cm)，种植基质为消毒后的草炭蛭石(v/v＝2:1)，定植后7天，当第二片真叶出现时进行接种处理。接种时在黄瓜幼苗根际土壤中接种15ml sp-s06菌株发酵培养液，1天后再接种根结线虫二龄幼虫，每株接种500条。根结线虫二龄幼虫的制备同实施例2。在室温下正常管理，并在5周后检测根结数量，计算sp-s06菌株对根结线虫的防治效果。试验同时设置清水对照及药剂处理，药剂处理为10％噻唑膦颗粒剂(日本，石原)，用量为按照每亩2kg用量换算，每个苗钵用量约为0.03g/钵，使用时在苗子根际基质表面轻轻划浅沟或是扎浅的小孔，将颗粒剂均匀洒施在基质里面，然后轻轻覆盖基质。施药后进行正常的管理。每个处理10株黄瓜苗，重复3次，并以清水模拟处理作为对照。盆栽防治效果计算公式如下：
54.防治效果(％)＝(1-处理根结数/对照根结数)
×
100。
55.(2)试验结果
56.在接种根结线虫35天后，将黄瓜苗根部的土壤轻轻冲洗掉，检测根系上的根结数量，分析防治效果(表4)。通过试验可以看出，在拟粉红锁掷孢酵母sp-s06菌株处理后黄瓜根系上的根结数量显著降低，其根结数量平均为23.8个/株，在对照处理中根结数量平均为97.0个/株，sp-s06菌株对根结线虫的防治效果达到了75.5％。在噻唑膦处理中防治效果达到了93.5％。说明拟粉红锁掷孢酵母sp-s06菌株可以有效的防治黄瓜根结线虫，虽然在防治效果上低于化学药剂噻唑膦，但是在防治根结线虫病中具有应用潜力及价值。
57.表4不同处理根结数量及防治效果
58.处理效果重复1重复2重复3平均防治效果％清水对照100.395.595.297.0-噻唑膦6.46.95.76.393.5％sp-s0622.823.625.023.875.5％
59.实施例5：拟粉红锁掷孢酵母菌sp-s06菌株田间防治根结线虫病效果
60.(1)试验方法
61.将sp-s06菌种接种到含有500mlnydb液体培养基的1000ml三角瓶中，在28℃中震荡(180rpm)培养3天，共培养大约10l拟粉红锁掷孢酵母菌发酵液，当od＝1.5时发酵液用于防控试验。试验地点为河北廊坊市伊指挥营蔬菜所基地温室内，该地区温室根结线虫发生严重，适合田间防效评价。试验黄瓜采用品种为“中农16”，在黄瓜苗2片真叶完全展开时进行田间试验。试验时，每个小区一个畦，畦宽1.1米，长6米，采用双行种植，株距40cm，行距50cm，每个畦大约种植30棵苗。试验重复3个小区(畦)，三个小区随机分布。同时在两个不同的温室内进行试验。
62.在移栽前，在种植苗子的指定位置挖深15cm的穴孔，将sp-s06菌株的发酵液50ml用清水稀释10倍后浇入苗穴内，待菌液全部渗透进入土壤，没有积液后，将黄瓜苗定植到苗穴内。试验同时设置清水对照处理，以及化学农药处理。化学农药处理中采用10％噻唑膦颗粒剂(福气多，日本石原)，用量按照说明标准(2kg/亩)试验。苗子移栽后进行正常的生产管理，45天后，检测根结线虫发生情况，统计分析病情级别、病情指数，计算防治效果。同时测定地上部的株高，比较分析菌株对黄瓜株高的促生长作用。
63.病情级别、病情指数及防效的计算如下(表5)：
64.表5单株根结严重度病情分级
[0065][0066][0067]
病情指数(di)按下列公式(1)计算：
[0068]
di＝(∑(s
×
n)/(n
×
s))
×
100
………………
(1)
[0069]
式中：
[0070]
∑—各病情级别数值与各病情级别植株数乘积的总和；s—各病情级别数值；n—各病情级别病株数；n—调查总株数；s—最高病情级别数值。
[0071]
防治效果计算公式：
[0072]
防治效果(％)＝(1-处理病情指数/对照病情指数)
×
100
………
(2)
[0073]
促生长效果计算公式：
[0074]
促生长率(％)＝(处理株高/对照株高-1)
×
100
………
(3)
[0075]
(2)试验结果
[0076]
通过试验可以看出，在拟粉红锁掷孢酵母菌sp-s06菌株处理后，黄瓜的根结线虫病发生程度显著降低，根系上的根结数量减少(表6)。在清水对照中病情指数为70.4，在sp-s06菌株处理的病情指数为34.7，sp-s06菌株对根结线虫的防治效果达到了50.8％。噻唑膦药剂处理的病情指数为26.0，平均防效为63.1％，结果说明拟粉红锁掷孢酵母菌sp-s06菌株虽然与化学农药噻唑膦药剂具有一些差距，但是该菌株作为生防菌可以有效的防治黄瓜根结线虫病，具绿色防治的优势。在农业生产中防治根结线虫病具有重要应用潜力。
[0077]
同时，通过对株高的检测(表6)，结果显示在拟粉红锁掷孢酵母菌sp-s06菌株具有促进生长的作用，在处理后菌株处理的黄瓜植株平均株高208.2cm，而清水对照的株高为177.6cm，促生率达到17.2％，而噻唑膦药剂处理的平均株高为196.5cm，促生率为10.6％。结果说明拟粉红锁掷孢酵母菌sp-s06菌株在促生长方面显著高于噻唑膦药剂处理，促进生长效果显著。
[0078]
表6不同处理病情指数及防治效果
[0079]
[0080]

技术特征：
1.一种拟粉红锁掷孢酵母菌(sporidiobolus pararoseus)，其特征在于，其保藏编号为cgmcc no.25890。2.如权利要求1所述的拟粉红锁掷孢酵母菌在根结线虫防治中的应用。3.利用如权利要求1所述的拟粉红锁掷孢酵母菌防治根结线虫的方法，其特征在于，将所述拟粉红锁掷孢酵母菌进行发酵培养后，将发酵液接种到土壤苗穴中，然后在苗穴中定植植物苗，进行正常管理栽培。4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述发酵培养是将所述拟粉红锁掷孢酵母菌接种于液体培养基中在25-32℃，150-200rpm条件下发酵培养2-4天。5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述液体培养基为nydb培养基：10g/l酵母粉，20g/l胰蛋白胨，20g/l葡萄糖，ph：7.0～7.2，121℃，20 min进行灭菌。6.如权利要求4所述的方法，其特征在于，培养条件为在28℃，180rpm条件下发酵培养3天。7.如权利要求4至6所述的方法，其特征在于，所述植物苗是蔬菜苗。8.如权利要求7所述的方法，其特征在于，所述蔬菜苗是黄瓜、甜瓜、西瓜、番茄、辣椒苗。9.防治根结线虫的生防制剂，其特征在于，采用如权利要求1所述的拟粉红锁掷孢酵母菌发酵培养得到的发酵液或浓缩液制备得到。

技术总结
本发明涉微生物和植物保护领域，具体涉及一种拟粉红锁掷孢酵母菌(Sporidiobolus pararoseus)及其在防治植物根结线虫中的应用。该菌株分离自果园土壤，易于在土壤中存活，且通过室内和田间防治试验表明其对于根结线虫具有良好的防效。因此，本发明为防控根结线虫的危害提供了有效的生防菌菌株，有助于根结线虫的绿色防控，具有较大的应用价值。具有较大的应用价值。


技术研发人员：茆振川 赵建龙 凌键 黄开伟 陈梦飞 刘锐 李彦 杨宇红
受保护的技术使用者：中国农业科学院蔬菜花卉研究所
技术研发日：2023.02.16
技术公布日：2023/10/8