结直肠进展期腺瘤和结直肠癌风险评估代谢标志物及其应用的制作方法

1.本发明涉及检测技术领域，尤其涉及一种结直肠进展期腺瘤、结直肠癌风险评估代谢标志物及其应用。


背景技术：

2.结直肠癌(colorectal cancer,crc)又称大肠癌，是消化系统常见的恶性肿瘤。
3.结直肠癌的形成一般会经历正常粘膜增生、进展期腺瘤(恶性)、腺癌(恶性)的发展过程，一般需要5-10年的时间。因此，早期筛查、诊断和治疗是降低结直肠癌死亡率最有效的手段。尤其是，如果能够在息肉腺瘤(恶性)阶段就进行干预，就能有效防止结直肠癌的发生。
4.进展期腺瘤(aa)是一种癌前病变，是指大小≥1cm或者具有≥25％的任何大小的绒毛状组分或高度发育异常，随时间推移，很容易发展为结直肠癌。若能够在结直肠癌发生的早期阶段，寻找到具有一定预警作用的肿瘤生物标志物，对结直肠癌和进展期腺瘤(恶性肿瘤)进行诊断，对于提高患者的治疗效果，改善患者预后有着重要的意义。


技术实现要素：

5.基于此，有必要提供一种结直肠进展期腺瘤、结直肠癌风险评估代谢标志物组合及其应用，该代谢标志物组合可在制备用于评估结直肠进展期腺瘤和结直肠癌风险的诊断试剂(盒)中进行应用。
6.本发明采用如下技术方案：
7.本发明提供一组用于评估结直肠进展期腺瘤和结直肠癌风险的代谢标志物组合，该代谢标志物组合为以下代谢标志物中的任意一种以及两种以上的组合：十六碳二酸、3β-熊脱氧胆酸、1-十四酰-2-羟基卵磷脂、2-氮己环酮、3-羟基丁酸、2-羟基癸酸、马尿酸、dl-2-氨基辛酸、12-羟基二十碳四烯酸、熊去氧胆酸、去氧胆酸、胆酸、甘氨石胆酸、20羧基花生四烯酸、胡椒碱、1-甲基黄嘌呤、1,7-二甲基黄嘌呤、s-(5'-腺苷)-l-高半胱氨酸、7-甲基黄嘌呤、可可碱、假尿苷、反式-3-羟基可替宁、异丙酚葡糖苷酸、对乙酰氨基酚、2-羟基马尿酸、3-羟基马尿酸、3-(3-羟基苯基)丙酸、3-吲哚丙酸、鹅去氧胆酸、苯基乙酰谷氨酰胺、3-磺基可可醇、5-甲基糠醛、4,6-二氨基-2-羟基-5-嘧啶磺酸、2,4-二羟基苯甲酸、(2e，4e，8e)-十四烷-2,4,8-三烯酸、3-酮-4-氨基苯甲酸酯，环(异亮氨酸脯氨酰)、n-十六烷基二乙醇胺、(五十)-苏伯尔肉碱、4-羟基马尿酸、2-[2-[3-(2-羧乙基)-1h-吲哚-2-基]乙基]-1h-吲哚-3-羧酸、2-甲基三癸二酸、六酰基谷氨酰胺、n-乙酰-l-丝氨酸-l-亮氨酸、n-乙酰基甘氨酰丙氨酸、溶血磷脂酰胆碱(20:2)、对甲酚葡糖苷酸、7-去氧胆酸。优选地，代谢物组合至少包含任意三个、任意四个、任意五个、任意六个、任意七个、任意八个、任意九个、任意十个及以上的代谢物。
[0008]
在其中一些实施例中，用于对结直肠癌患者和健康人进行风险评估的代谢标志物组合至少选自：
[0009]
a组分：选自十六碳二酸、3β-熊脱氧胆酸、1-十四酰-2-羟基卵磷脂、2-氮己环酮中的至少一种或者多种；以及
[0010]
b组分：选自3-羟基丁酸、2-羟基癸酸、马尿酸、dl-2-氨基辛酸中的至少一种。优选上述8种代谢标志物的组合，整体的检测效果更精准。
[0011]
在其中一些实施例中，所述代谢标志物至少选自1-十四酰-2-羟基卵磷脂、马尿酸、2-羟基癸酸、dl-2-氨基辛酸、3β-熊脱氧胆酸、2-氮己环酮、胆酸、s-(5'-腺苷)-l-高半胱氨酸、十六碳二酸、胡椒碱和反式-3-羟基可替宁中的至少一种(优选五种及以上的组合)，用于对结直肠癌患者和非结直肠进展期肿瘤进行风险评估。
[0012]
在其中一些实施例中，所述代谢标志物选自1-十四酰-2-羟基卵磷脂、马尿酸、dl-2-氨基辛酸、去氧胆酸、12-羟基二十碳四烯酸、7-甲基黄嘌呤、s-(5'-腺苷)-l-高半胱氨酸和胡椒碱中的多种组合(优选四种及以上的组合)，用于对结直肠进展期腺瘤患者和非结直肠进展期肿瘤进行风险评估。
[0013]
在其中一些实施例中，所述代谢标志物至少选自1-十四酰-2-羟基卵磷脂、马尿酸、dl-2-氨基辛酸、去氧胆酸、鹅去氧胆酸、12-羟基二十碳四烯酸、7-甲基黄嘌呤、胆酸、s-(5'-腺苷)-l-高半胱氨酸、胡椒碱和1-甲基黄嘌呤中的多种组合(优选五种及以上的组合)，用于对结直肠进展期腺瘤患者和健康人进行风险评估。
[0014]
在其中一些实施例中，所述代谢标志物至少选自1-十四酰-2-羟基卵磷脂、马尿酸、2-羟基癸酸、熊去氧胆酸、dl-2-氨基辛酸、3β-熊脱氧胆酸、3-羟基丁酸、12-羟基二十碳四烯酸、20羧基花生四烯酸、2-氮己环酮、甘氨石胆酸、7-甲基黄嘌呤、s-(5'-腺苷)-l-高半胱氨酸、十六碳二酸、胡椒碱、1-甲基黄嘌呤和反式-3-羟基可替宁中的多种组合(优选五种及以上的组合)，用于对结直肠进展期肿瘤患者和非结直肠进展期肿瘤进行风险评估。
[0015]
在其中一些实施例中，所述代谢标志物至少选自1-十四酰-2-羟基卵磷脂、马尿酸、熊去氧胆酸、dl-2-氨基辛酸、3-羟基丁酸、12-羟基二十碳四烯酸、7-甲基黄嘌呤、胆酸、s-(5'-腺苷)-l-高半胱氨酸、十六碳二酸和反式-3-羟基可替宁中的多种组合(优选五种及以上的组合)，用于对结直肠进展期肿瘤患者和健康人进行风险评估。
[0016]
本发明目的提供一种含有上述适合于结直肠进展期腺瘤、结直肠癌风险评估的代谢标志物的试剂产品，包括所述代谢标志物的标准品，提取富集所述代谢标志物的溶剂，可用于结直肠进展期腺瘤和结直肠癌的风险评估。本发明提供的试剂盒可以用于诊断结直肠癌患者，还可以用于诊断结直肠进展期腺瘤，提高诊断便利性，对结直肠癌进行早诊早治。
[0017]
本发明的有益效果：
[0018]
本发明开发了新的代谢标志物组合，能对结直肠进展期腺瘤、结直肠癌患者进行有效评估和诊断。roc曲线评价方法中，单个代谢物roc曲线下的面积auc值均在0.7以上。任意代谢物组合的性能明显优于单个代谢物，roc曲线下的面积auc值训练集为0.726～0.996，验证集为0.668～0.978。
具体实施方式
[0019]
本发明通过大量试验，筛选提供一组用于评估结直肠进展期腺瘤和结直肠癌风险的代谢标志物组合，该代谢标志物组合为以下代谢标志物中的任意一种以及两种以上的组合：十六碳二酸、3β-熊脱氧胆酸、1-十四酰-2-羟基卵磷脂、2-氮己环酮、3-羟基丁酸、2-羟
基癸酸、马尿酸、dl-2-氨基辛酸、12-羟基二十碳四烯酸、熊去氧胆酸、去氧胆酸、胆酸、甘氨石胆酸、20羧基花生四烯酸、胡椒碱、1-甲基黄嘌呤、1,7-二甲基黄嘌呤、s-(5'-腺苷)-l-高半胱氨酸、7-甲基黄嘌呤、可可碱、假尿苷、反式-3-羟基可替宁、异丙酚葡糖苷酸、对乙酰氨基酚、2-羟基马尿酸、3-羟基马尿酸、3-(3-羟基苯基)丙酸、3-吲哚丙酸、鹅去氧胆酸、苯基乙酰谷氨酰胺、3-磺基可可醇、5-甲基糠醛、4,6-二氨基-2-羟基-5-嘧啶磺酸、2,4-二羟基苯甲酸、(2e，4e，8e)-十四烷-2,4,8-三烯酸、3-酮-4-氨基苯甲酸酯、环(异亮氨酸脯氨酰)、n-十六烷基二乙醇胺、(五十)-苏伯尔肉碱、4-羟基马尿酸、2-[2-[3-(2-羧乙基)-1h-吲哚-2-基]乙基]-1h-吲哚-3-羧酸、2-甲基三癸二酸、六酰基谷氨酰胺、n-乙酰-l-丝氨酸-l-亮氨酸、n-乙酰基甘氨酰丙氨酸、溶血磷脂酰胆碱(20:2)、对甲酚葡糖苷酸以及7-去氧胆酸。
[0020]
下面结合具体实施例对本发明作进一步的详细说明，以使本领域的技术人员更加清楚地理解本发明。以下各实施例，仅用于说明本发明，但不止用来限制本发明的范围。基于本发明中的具体实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的情况下，所获得的其他所有实施例，都属于本发明的保护范围。在本发明实施例中，若无特殊说明，所有原料组分均为本领域技术人员熟知的市售产品；在本发明实施例中，若未具体指明，所用的技术手段均为本领域技术人员所熟知的常规手段。
[0021]
实施例1筛选结直肠进展期腺瘤和结直肠癌差异代谢标志物
[0022]
参照专利文献cn114924073a公开《结直肠进展期肿瘤诊断标志物组合及其应用》中实施例2的方法步骤，本实施例提供一种结直肠进展期腺瘤和结直肠癌差异代谢标志物的筛选方法，区别在于步骤s1中采集样品的不同：
[0023]
本试验研究在取得患者同意后，从3个独立的临床医学中心共收集了789例健康人、390例非进展期腺瘤患者、193例进展期腺瘤患者、452例结直肠癌患者的外周静脉血血浆。结直肠进展期肿瘤组包括结直肠进展期腺瘤患者和结直肠癌患者；非结直肠癌组包括健康人和非进展期腺瘤患者。
[0024]
将收集的发现集所有样本通过lc-ms/ms进行代谢物全谱分析测试，通过wilcoxon秩和检验所提供的任意两组间p值(p＜0.05)的筛选标准，从发现集样本中共得到48种初步差异性离子对。
[0025]
根据上述鉴定方法，鉴定出48种血浆差异代谢标志物，见表1：
[0026]
表1 48种差异血浆代谢标志物
[0027]
[0028][0029]
实施例2构建血浆靶向代谢组结直肠癌诊断模型
[0030]
参照专利文献cn114924073a公开《结直肠进展期肿瘤诊断标志物组合及其应用》中实施例3的方法步骤，本实施例的试验步骤区别在于：
[0031]
s1，采集样品
[0032]
本研究在取得患者同意后，从3个独立的临床医学中心共收集了1981例血浆样本，分别作为训练集和验证集。其中训练集包括341例健康人，108例非进展期腺瘤患者，110例进展期腺瘤患者和383例结直肠癌患者的外周静脉血血浆。验证集包括417例健康人，100例
非进展期腺瘤患者，209例进展期腺瘤患者和313例结直肠癌患者的外周静脉血血浆。其中健康人来源于体检后无肠道疾病的人群；疾病组均经过结直肠镜检查确诊。所有样本均无其它任何恶性肿瘤病史，无其他全身性重大疾病，无长期用药的慢性病史。各组样本间的年龄和性别均相匹配，非结直肠癌组包括健康人和非进展期腺瘤患者，结直肠进展期肿瘤组包括进展期腺瘤患者和结直肠癌患者。采血时间均为清晨空腹状态。所有血浆样本离心后置于-80℃冰箱内保存，研究时取出血浆样本解冻后进行后续分析。
[0033]
s2，样品代谢检测分析
[0034]
本步骤所采用的实验试剂见下表2：
[0035]
表2试验试剂
[0036]
[0037][0038]
本试验发现集单个代谢标志物变化倍数结果见表3：
[0039]
表3结直肠癌vs健康人代谢物变化倍数
[0040]
[0041][0042]
利用逻辑回归模型对上述筛查得到的48个初步差异代谢物进行分析，发现表4中所示的30个代谢物，即：3-羟基丁酸、十六碳二酸、2-羟基癸酸、3β-熊脱氧胆酸、1-十四酰-2-羟基卵磷脂、2-氮己环酮、马尿酸、dl-2-氨基辛酸、熊去氧胆酸、去氧胆酸、甘氨石胆酸、20羧基花生四烯酸、胡椒碱、1-甲基黄嘌呤、7-甲基黄嘌呤、假尿苷、反式-3-羟基可替宁、12-羟基二十碳四烯酸、鹅去氧胆酸、胆酸、1,7-二甲基黄嘌呤、s-(5'-腺苷)-l-高半胱氨酸、可可碱、异丙酚葡糖苷酸、对乙酰氨基酚、2-羟基马尿酸、3-羟基马尿酸、3-(3-羟基苯基)丙酸、3-吲哚丙酸、苯基乙酰谷氨酰胺作为结直肠进展期腺瘤及结直肠癌标记物的作用尤为重要。
[0043]
训练集中这30个差异代谢物单个用于诊断区分结直肠癌和健康人的能力较强，roc曲线下面积(auc)均大于0.7，具有临床诊断意义；这30个差异代谢物联合用于诊断时，auc进一步提高，30个联合起来诊断区分结直肠癌和健康人的auc达0.996。验证集中这30个差异代谢物单个用于诊断区分结直肠癌和健康人的roc曲线下面积(auc)均大于0.65，30个代谢物联合起来诊断区分结直肠癌和健康人的auc达0.978。训练集中单个代谢标志物用于结直肠癌诊断的结果见表4：
[0044]
表4诊断区分结直肠癌和健康人单个代谢物的auc值
[0045]
[0046][0047]
实施例3：使用2个血浆代谢标志物进行结直肠癌诊断模型的构建
[0048]
本实施例与实施例2的研究对象、检测分析方法相同，仅在步骤(6)二元逻辑回归建模时使用上述任意2个血浆代谢标志物。
[0049]
经构建模型统计分析：任意2个差异代谢物单个用于诊断区分结直肠癌和健康人的能力较强，roc曲线下面积(auc)均大于0.7，具有临床诊断意义。其中，部分统计结果示例如下：
[0050]
1-十四酰-2-羟基卵磷脂和2-羟基马尿酸联合起来诊断结直肠癌训练集的auc为0.911，验证集的auc为0.900。
[0051]
去氧胆酸和鹅去氧胆酸联合起来诊断结直肠癌训练集的auc为0.791，验证集的auc为0.782。
[0052]
1-甲基黄嘌呤和反式-3-羟基可替宁联合起来诊断结直肠癌训练集的auc为0.726，验证集的auc为0.668。
[0053]
实施例4：使用5个血浆代谢标志物进行结直肠癌诊断模型的构建
[0054]
本实施例与实施例2的研究对象、检测分析方法相同，仅在步骤(6)二元逻辑回归建模时使用上述任意5个血浆代谢标志物。
[0055]
经构建模型统计分析：任意5个差异代谢物单个用于诊断区分结直肠癌和健康人的能力较强，roc曲线下面积(auc)均大于0.7，具有临床诊断意义。其中，部分统计结果示例如下：
[0056]
1-十四酰-2-羟基卵磷脂、2-羟基马尿酸、马尿酸、3-(3-羟基苯基)丙酸和对乙酰氨基酚联合用于诊断结直肠癌训练集的auc为0.938，验证集的auc为0.917。
[0057]
3β-熊脱氧胆酸、3-羟基丁酸、去氧胆酸、鹅去氧胆酸和12-羟基二十碳四烯酸联合用于诊断结直肠癌训练集的auc为0.808，验证集的auc为0.810。
[0058]
可可碱、假尿苷、胡椒碱、1-甲基黄嘌呤和反式-3-羟基可替宁联合用于诊断结直肠癌训练集的auc为0.748，验证集的auc为0.705。
[0059]
实施例5：使用8个血浆代谢标志物进行结直肠癌诊断模型的构建
[0060]
本实施例与实施例2的研究对象、检测分析方法相同，仅在步骤(6)二元逻辑回归建模时使用上述任意8个血浆代谢标志物。
[0061]
经构建模型统计分析：任意8个差异代谢物单个用于诊断区分结直肠癌和健康人的能力较强，roc曲线下面积(auc)均大于0.7，具有临床诊断意义。其中，部分统计结果示例如下：
[0062]
1-十四酰-2-羟基卵磷脂、2-羟基马尿酸、马尿酸、3-(3-羟基苯基)丙酸、对乙酰氨基酚、异丙酚葡糖苷酸、3-羟基马尿酸和苯基乙酰谷氨酰胺联合用于诊断结直肠癌训练集的auc为0.945，验证集的auc为0.933。
[0063]
dl-2-氨基辛酸、3β-熊脱氧胆酸、3-羟基丁酸、去氧胆酸、鹅去氧胆酸、12-羟基二十碳四烯酸、1,7-二甲基黄嘌呤、20羧基花生四烯酸、联合用于诊断结直肠癌训练集的auc为0.821，验证集的auc为0.818。
[0064]
胆酸、s-(5'-腺苷)-l-高半胱氨酸、十六碳二酸、可可碱、假尿苷、胡椒碱、1-甲基黄嘌呤、反式-3-羟基可替宁、联合用于诊断结直肠癌训练集的auc为0.761，验证集的auc为0.726。
[0065]
实施例6：使用12个血浆代谢标志物进行结直肠癌诊断模型的构建
[0066]
本实施例与实施例2的研究对象、检测分析方法相同，仅在步骤(6)二元逻辑回归建模时使用上述任意12个血浆代谢标志物。
[0067]
经构建模型统计分析：任意12个差异代谢物单个用于诊断区分结直肠癌和健康人的能力较强，roc曲线下面积(auc)均大于0.7，具有临床诊断意义。其中，部分统计结果示例如下：
[0068]
1-十四酰-2-羟基卵磷脂、2-羟基马尿酸、马尿酸、3-(3-羟基苯基)丙酸、对乙酰氨基酚、异丙酚葡糖苷酸、3-羟基马尿酸、苯基乙酰谷氨酰胺、3-吲哚丙酸、2-羟基癸酸、熊去氧胆酸和dl-2-氨基辛酸联合用于诊断结直肠癌训练集的auc为0.951，验证集的auc为0.938。
[0069]
20羧基花生四烯酸、2-氮己环酮、甘氨石胆酸、7-甲基黄嘌呤、胆酸、s-(5'-腺苷)-l-高半胱氨酸、十六碳二酸、可可碱、假尿苷、胡椒碱、1-甲基黄嘌呤和反式-3-羟基可替宁
联合用于诊断结直肠癌训练集的auc为0.785，验证集的auc为0.754。
[0070]
实施例7：使用15个血浆代谢标志物进行结直肠癌诊断模型的构建
[0071]
本实施例与实施例2的研究对象、检测分析方法相同，仅在步骤(6)二元逻辑回归建模时使用上述任意15个血浆代谢标志物。
[0072]
经构建模型统计分析：任意15个差异代谢物单个用于诊断区分结直肠癌和健康人的能力较强，roc曲线下面积(auc)均大于0.7，具有临床诊断意义。其中，部分统计结果示例如下：
[0073]
1-十四酰-2-羟基卵磷脂、2-羟基马尿酸、马尿酸、3-(3-羟基苯基)丙酸、对乙酰氨基酚、异丙酚葡糖苷酸、3-羟基马尿酸、苯基乙酰谷氨酰胺、3-吲哚丙酸、2-羟基癸酸、熊去氧胆酸、dl-2-氨基辛酸、3β-熊脱氧胆酸、3-羟基丁酸和去氧胆酸联合用于诊断结直肠癌训练集的auc为0.972，验证集的auc为0.961。
[0074]
鹅去氧胆酸、12-羟基二十碳四烯酸、1,7-二甲基黄嘌呤、20羧基花生四烯酸、2-氮己环酮、甘氨石胆酸、7-甲基黄嘌呤、胆酸、s-(5'-腺苷)-l-高半胱氨酸、十六碳二酸、可可碱、假尿苷、胡椒碱、1-甲基黄嘌呤和反式-3-羟基可替宁联合用于诊断结直肠癌训练集的auc为0.798，验证集的auc为0.766。
[0075]
实施例8：使用20个血浆代谢标志物进行结直肠癌诊断模型的构建
[0076]
本实施例与实施例2的研究对象、检测分析方法相同，仅在步骤(6)二元逻辑回归建模时使用上述任意20个血浆代谢标志物。
[0077]
经构建模型统计分析：任意20个差异代谢物单个用于诊断区分结直肠癌和健康人的能力较强，roc曲线下面积(auc)均大于0.7，具有临床诊断意义。其中，部分统计结果示例如下：
[0078]
1-十四酰-2-羟基卵磷脂、2-羟基马尿酸、马尿酸、3-(3-羟基苯基)丙酸、对乙酰氨基酚、异丙酚葡糖苷酸、3-羟基马尿酸、苯基乙酰谷氨酰胺、3-吲哚丙酸、2-羟基癸酸、熊去氧胆酸、dl-2-氨基辛酸、3β-熊脱氧胆酸、3-羟基丁酸、去氧胆酸、鹅去氧胆酸、12-羟基二十碳四烯酸、1,7-二甲基黄嘌呤、20羧基花生四烯酸和2-氮己环酮联合起来诊断结直肠癌训练集的auc达0.983，验证集的auc为0.968。
[0079]
熊去氧胆酸、dl-2-氨基辛酸、3β-熊脱氧胆酸、3-羟基丁酸、去氧胆酸、鹅去氧胆酸、12-羟基二十碳四烯酸、1,7-二甲基黄嘌呤、20羧基花生四烯酸、2-氮己环酮、甘氨石胆酸、7-甲基黄嘌呤、胆酸、s-(5'-腺苷)-l-高半胱氨酸、十六碳二酸、可可碱、假尿苷、胡椒碱、1-甲基黄嘌呤和反式-3-羟基可替宁联合用于诊断结直肠癌训练集的auc为0.811，验证集的auc为0.786。
[0080]
实施例9：使用25个血浆代谢标志物进行结直肠癌诊断模型的构建
[0081]
本实施例与实施例2的研究对象、检测分析方法相同，仅在步骤(6)二元逻辑回归建模时使用上述任意25个血浆代谢标志物。
[0082]
经构建模型统计分析：任意25个差异代谢物单个用于诊断区分结直肠癌和健康人的能力较强，roc曲线下面积(auc)均大于0.7，具有临床诊断意义。其中，部分统计结果示例如下：
[0083]
1-十四酰-2-羟基卵磷脂、2-羟基马尿酸、马尿酸、3-(3-羟基苯基)丙酸、对乙酰氨基酚、异丙酚葡糖苷酸、3-羟基马尿酸、苯基乙酰谷氨酰胺、3-吲哚丙酸、2-羟基癸酸、熊去
氧胆酸、dl-2-氨基辛酸、3β-熊脱氧胆酸、3-羟基丁酸、去氧胆酸、鹅去氧胆酸、12-羟基二十碳四烯酸、1,7-二甲基黄嘌呤、20羧基花生四烯酸、2-氮己环酮、甘氨石胆酸、7-甲基黄嘌呤、胆酸、s-(5'-腺苷)-l-高半胱氨酸和十六碳二酸联合起来诊断结直肠癌训练集的auc达0.991，验证集的auc为0.977。
[0084]
异丙酚葡糖苷酸、3-羟基马尿酸、苯基乙酰谷氨酰胺、3-吲哚丙酸、2-羟基癸酸、熊去氧胆酸、dl-2-氨基辛酸、3β-熊脱氧胆酸、3-羟基丁酸、去氧胆酸、鹅去氧胆酸、12-羟基二十碳四烯酸、1,7-二甲基黄嘌呤、20羧基花生四烯酸、2-氮己环酮、甘氨石胆酸、7-甲基黄嘌呤、胆酸、s-(5'-腺苷)-l-高半胱氨酸、十六碳二酸、可可碱、假尿苷、胡椒碱、1-甲基黄嘌呤和反式-3-羟基可替宁联合起来诊断结直肠癌训练集的auc达0.878，验证集的auc为0.835。
[0085]
实施例10：血浆靶向代谢组针对性诊断区分结直肠癌和健康人诊断模型构建
[0086]
本实施例的样本来源于实施例2，训练集结直肠癌患者383例，健康人341例；验证集结直肠癌患者313例，健康人417例。代谢物检测和分析方法与实施例3相同，对以下30个代谢物进行定量检测，包括：3-羟基丁酸、十六碳二酸、2-羟基癸酸、3β-熊脱氧胆酸、1-十四酰-2-羟基卵磷脂、2-氮己环酮、马尿酸、dl-2-氨基辛酸、熊去氧胆酸、去氧胆酸、甘氨石胆酸、20羧基花生四烯酸、胡椒碱、1-甲基黄嘌呤、7-甲基黄嘌呤、假尿苷、反式-3-羟基可替宁、12-羟基二十碳四烯酸、鹅去氧胆酸、胆酸、1,7-二甲基黄嘌呤、s-(5'-腺苷)-l-高半胱氨酸、可可碱、异丙酚葡糖苷酸、对乙酰氨基酚、2-羟基马尿酸、3-羟基马尿酸、3-(3-羟基苯基)丙酸、3-吲哚丙酸、苯基乙酰谷氨酰胺。
[0087]
进一步优选代谢标志物组合为：1-十四酰-2-羟基卵磷脂、马尿酸、2-羟基癸酸、dl-2-氨基辛酸、3β-熊脱氧胆酸、3-羟基丁酸、2-氮己环酮和十六碳二酸。这些代谢物在结直肠癌患者体内发生显著变化，训练集具体变化结果见表5：
[0088]
表5结直肠癌患者vs健康人代谢物变化倍数
[0089]
中文名称差异倍数p value1-十四酰-2-羟基卵磷脂0.561.56e-49马尿酸0.261.25e-192-羟基癸酸0.571.49e-17dl-2-氨基辛酸0.558.86e-263β-熊脱氧胆酸0.322.42e-123-羟基丁酸2.651.31e-242-氮己环酮0.442.35e-11十六碳二酸2.004.26e-09
[0090]
这8个差异代谢物单个用于诊断区分结直肠癌患者和健康人的能力较强，并且各种代谢物组合用于诊断时，auc进一步提高，其诊断区分结直肠癌患者和健康人训练集的auc为0.720～0.988，验证集的auc为0.702～0.967。
[0091]
实施例11：血浆靶向代谢组针对性诊断区分结直肠癌和非进展期肿瘤患者诊断模型构建
[0092]
本实施例的样本来源于实施例2，训练集结直肠癌患者383例；非结直肠进展期肿瘤患者449例，包括341例健康人和108例非进展期腺瘤患者。验证集结直肠癌患者313例；非结直肠进展期肿瘤患者517例，包括417例健康人和100例非进展期腺瘤患者。代谢物检测和
分析方法与实施例3相同，对以下30个代谢物进行定量检测，包括：3-羟基丁酸、十六碳二酸、2-羟基癸酸、3β-熊脱氧胆酸、1-十四酰-2-羟基卵磷脂、2-氮己环酮、马尿酸、dl-2-氨基辛酸、熊去氧胆酸、去氧胆酸、甘氨石胆酸、20羧基花生四烯酸、胡椒碱、1-甲基黄嘌呤、7-甲基黄嘌呤、假尿苷、反式-3-羟基可替宁、12-羟基二十碳四烯酸、鹅去氧胆酸、胆酸、1,7-二甲基黄嘌呤、s-(5'-腺苷)-l-高半胱氨酸、可可碱、异丙酚葡糖苷酸、对乙酰氨基酚、2-羟基马尿酸、3-羟基马尿酸、3-(3-羟基苯基)丙酸、3-吲哚丙酸、苯基乙酰谷氨酰胺。
[0093]
进一步优选代谢标志物组合为：1-十四酰-2-羟基卵磷脂、马尿酸、2-羟基癸酸、dl-2-氨基辛酸、3β-熊脱氧胆酸、2-氮己环酮胆酸、s-(5'-腺苷)-l-高半胱氨酸、十六碳二酸、胡椒碱和反式-3-羟基可替宁。这些代谢物在结直肠癌患者体内发生显著变化，训练集中具体变化结果见表6：
[0094]
表6结直肠癌患者vs非进展期肿瘤组代谢物变化倍数
[0095]
中文名称差异倍数p value1-十四酰-2-羟基卵磷脂0.572.26e-56马尿酸0.272.61e-202-羟基癸酸0.533.30e-21dl-2-氨基辛酸0.542.37e-303β-熊脱氧胆酸0.322.94e-162-氮己环酮0.424.66e-15胆酸0.763.15e-02s-(5'-腺苷)-l-高半胱氨酸1.226.07e-06十六碳二酸2.089.60e-10胡椒碱0.272.47e-09反式-3-羟基可替宁0.462.65e-04
[0096]
这11个差异代谢物单个用于诊断区分结直肠癌患者和非进展期肿瘤组的能力较强，并且各种代谢物组合用于诊断时，auc进一步提高，其诊断区分结直肠癌患者和非进展期肿瘤组训练集的auc为0.718～0.982，验证集的auc为0.701～0.958。
[0097]
实施例12：血浆靶向代谢组针对性诊断区分进展期腺瘤患者和非结直肠进展期肿瘤患者诊断模型构建
[0098]
本实施例的样本来源于实施例2，训练集进展期腺瘤患者110例，非结直肠进展期肿瘤患者449例，包括341例健康人和108例非进展期腺瘤患者；验证集进展期腺瘤患者209例，非结直肠进展期肿瘤患者517例，包括417例健康人和100例非进展期腺瘤患者。代谢物检测和分析方法与实施例3相同，对以下30个代谢物进行定量检测，包括：3-羟基丁酸、十六碳二酸、2-羟基癸酸、3β-熊脱氧胆酸、1-十四酰-2-羟基卵磷脂、2-氮己环酮、马尿酸、dl-2-氨基辛酸、熊去氧胆酸、去氧胆酸、甘氨石胆酸、20羧基花生四烯酸、胡椒碱、1-甲基黄嘌呤、7-甲基黄嘌呤、假尿苷、反式-3-羟基可替宁、12-羟基二十碳四烯酸、鹅去氧胆酸、胆酸、1,7-二甲基黄嘌呤、s-(5'-腺苷)-l-高半胱氨酸、可可碱、异丙酚葡糖苷酸、对乙酰氨基酚、2-羟基马尿酸、3-羟基马尿酸、3-(3-羟基苯基)丙酸、3-吲哚丙酸、苯基乙酰谷氨酰胺。
[0099]
进一步优选代谢标志物：1-十四酰-2-羟基卵磷脂、马尿酸、dl-2-氨基辛酸、去氧胆酸、12-羟基二十碳四烯酸、7-甲基黄嘌呤、s-(5'-腺苷)-l-高半胱氨酸和胡椒碱。这些代
谢物在进展期腺瘤患者体内发生显著变化，训练集中具体变化结果见表7：
[0100]
表7进展期腺瘤患者vs非结直肠进展期肿瘤患者代谢物变化倍数
[0101][0102][0103]
这8个差异代谢物单个用于诊断区分进展期腺瘤患者和非结直肠进展期肿瘤的能力较强，并且各种代谢物组合用于诊断时，auc进一步提高，其诊断区分进展期腺瘤患者和非结直肠进展期肿瘤训练集的auc为0.701～0.852，验证集的auc为0.654～0.832。
[0104]
实施例13：血浆靶向代谢组诊断区分进展期腺瘤患者和健康人诊断模型构建
[0105]
本实施例的样本来源于实施例2，训练集进展期腺瘤患者110例，健康人341例；验证集进展期腺瘤患者209例，健康人417例。代谢物检测和分析方法与实施例3相同，对以下30个代谢物进行定量检测，包括：3-羟基丁酸、十六碳二酸、2-羟基癸酸、3β-熊脱氧胆酸、1-十四酰-2-羟基卵磷脂、2-氮己环酮、马尿酸、dl-2-氨基辛酸、熊去氧胆酸、去氧胆酸、甘氨石胆酸、20羧基花生四烯酸、胡椒碱、1-甲基黄嘌呤、7-甲基黄嘌呤、假尿苷、反式-3-羟基可替宁、12-羟基二十碳四烯酸、鹅去氧胆酸、胆酸、1,7-二甲基黄嘌呤、s-(5'-腺苷)-l-高半胱氨酸、可可碱、异丙酚葡糖苷酸、对乙酰氨基酚、2-羟基马尿酸、3-羟基马尿酸、3-(3-羟基苯基)丙酸、3-吲哚丙酸、苯基乙酰谷氨酰胺。
[0106]
进一步优选代谢标志物：1-十四酰-2-羟基卵磷脂、马尿酸、dl-2-氨基辛酸、去氧胆酸、鹅去氧胆酸、12-羟基二十碳四烯酸、7-甲基黄嘌呤、胆酸、s-(5'-腺苷)-l-高半胱氨酸、胡椒碱和1-甲基黄嘌呤。这些代谢物在进展期腺瘤患者体内发生显著变化，训练集中具体变化结果见表8：
[0107]
表8进展期腺瘤患者vs健康人代谢物变化倍数
[0108]
中文名称差异倍数p value1-十四酰-2-羟基卵磷脂0.874.06e-03马尿酸0.551.46e-05dl-2-氨基辛酸1.233.96e-02去氧胆酸1.372.84e-02鹅去氧胆酸1.931.52e-0212-羟基二十碳四烯酸0.673.13e-037-甲基黄嘌呤1.441.13e-02胆酸2.151.21e-02s-(5'-腺苷)-l-高半胱氨酸1.252.62e-06
胡椒碱1.967.68e-031-甲基黄嘌呤1.579.97e-03
[0109]
这11个差异代谢物单个用于诊断区分进展期腺瘤患者和健康人的能力较强，并且各种代谢物组合用于诊断时，auc进一步提高，其诊断区分进展期腺瘤患者和健康人训练集的auc为0.710～0.933，验证集的auc为0.698～0.915。
[0110]
实施例14：血浆靶向代谢组诊断区分结直肠进展期肿瘤患者和非结直肠进展期肿瘤患者诊断模型构建
[0111]
本实施例的样本来源于实施例2，训练集结直肠进展期肿瘤组患者493例，包括110例进展期腺瘤患者和383例结直肠癌患者；非结直肠进展期肿瘤患者449例，包括341例健康人和108例非进展期腺瘤患者。验证集结直肠进展期肿瘤组患者522例，包括209例进展期腺瘤患者和313例结直肠癌患者；非结直肠进展期肿瘤患者517例，包括417例健康人和100例非进展期腺瘤患者。代谢物检测和分析方法与实施例2相同，对以下30个代谢物进行定量检测，包括：3-羟基丁酸、十六碳二酸、2-羟基癸酸、3β-熊脱氧胆酸、1-十四酰-2-羟基卵磷脂、2-氮己环酮、马尿酸、dl-2-氨基辛酸、熊去氧胆酸、去氧胆酸、甘氨石胆酸、20羧基花生四烯酸、胡椒碱、1-甲基黄嘌呤、7-甲基黄嘌呤、假尿苷、反式-3-羟基可替宁、12-羟基二十碳四烯酸、鹅去氧胆酸、胆酸、1,7-二甲基黄嘌呤、s-(5'-腺苷)-l-高半胱氨酸、可可碱、异丙酚葡糖苷酸、对乙酰氨基酚、2-羟基马尿酸、3-羟基马尿酸、3-(3-羟基苯基)丙酸、3-吲哚丙酸、苯基乙酰谷氨酰胺。
[0112]
进一步优选代谢标志物：1-十四酰-2-羟基卵磷脂、马尿酸、2-羟基癸酸、熊去氧胆酸、dl-2-氨基辛酸、3β-熊脱氧胆酸、3-羟基丁酸、12-羟基二十碳四烯酸、20羧基花生四烯酸、2-氮己环酮、甘氨石胆酸、7-甲基黄嘌呤、s-(5'-腺苷)-l-高半胱氨酸、十六碳二酸、胡椒碱、1-甲基黄嘌呤和反式-3-羟基可替宁。这些代谢物在结直肠进展期肿瘤患者体内发生显著变化，训练集中具体变化结果见表9：
[0113]
表9结直肠进展期肿瘤vs非结直肠进展期肿瘤患者代谢物变化倍数
[0114]
中文名称差异倍数p value1-十四酰-2-羟基卵磷脂0.646.56e-41马尿酸0.333.32e-172-羟基癸酸0.621.87e-13熊去氧胆酸0.641.49e-03dl-2-氨基辛酸0.641.62e-203β-熊脱氧胆酸0.433.95e-113-羟基丁酸2.311.53e-2112-羟基二十碳四烯酸1.805.52e-0720羧基花生四烯酸1.571.59e-112-氮己环酮0.562.35e-09甘氨石胆酸0.652.58e-037-甲基黄嘌呤0.532.19e-04s-(5'-腺苷)-l-高半胱氨酸1.224.85e-08十六碳二酸1.826.25e-09
胡椒碱0.601.34e-021-甲基黄嘌呤0.571.83e-03反式-3-羟基可替宁0.585.54e-03
[0115]
这17个差异代谢物单个用于诊断区分结直肠进展期肿瘤患者和非结直肠进展期肿瘤患者的能力较强，并且各种代谢物组合用于诊断时，auc进一步提高，其诊断区分结直肠进展期肿瘤患者和非结直肠进展期肿瘤患者训练集的auc为0.703～0.927，验证集的auc为0.685～0.913。
[0116]
实施例15：血浆靶向代谢组诊断区分结直肠进展期肿瘤患者和健康人诊断模型构建
[0117]
本实施例的样本来源于实施例2，训练集结直肠进展期肿瘤组患者493例，包括110例进展期腺瘤患者和383例结直肠癌患者；健康人341例。验证集结直肠进展期肿瘤组患者522例，包括209例进展期腺瘤患者和313例结直肠癌患者；健康人417例。代谢物检测和分析方法与实施例3相同，对以下30个代谢物进行定量检测，包括：3-羟基丁酸、十六碳二酸、2-羟基癸酸、3β-熊脱氧胆酸、1-十四酰-2-羟基卵磷脂、2-氮己环酮、马尿酸、dl-2-氨基辛酸、熊去氧胆酸、去氧胆酸、甘氨石胆酸、20羧基花生四烯酸、胡椒碱、1-甲基黄嘌呤、7-甲基黄嘌呤、假尿苷、反式-3-羟基可替宁、12-羟基二十碳四烯酸、鹅去氧胆酸、胆酸、1,7-二甲基黄嘌呤、s-(5'-腺苷)-l-高半胱氨酸、可可碱、异丙酚葡糖苷酸、对乙酰氨基酚、2-羟基马尿酸、3-羟基马尿酸、3-(3-羟基苯基)丙酸、3-吲哚丙酸、苯基乙酰谷氨酰胺。
[0118]
进一步优选代谢标志物：1-十四酰-2-羟基卵磷脂、马尿酸、熊去氧胆酸、dl-2-氨基辛酸、3-羟基丁酸、12-羟基二十碳四烯酸、7-甲基黄嘌呤、胆酸、s-(5'-腺苷)-l-高半胱氨酸、十六碳二酸和反式-3-羟基可替宁。这些代谢物在结直肠癌患者体内发生显著变化，训练集中具体变化结果见表10：
[0119]
表10结直肠进展期肿瘤患者vs健康人代谢物变化倍数
[0120][0121][0122]
这11个差异代谢物单个用于诊断区分结直肠进展期肿瘤患者和健康人的能力较强，并且各种代谢物组合用于诊断时，auc进一步提高，其诊断区分结直肠进展期肿瘤患者
和健康人训练集的auc为0.722～0.938，验证集的auc为0.703～0.921。
[0123]
实施例16：使用组织样本构建结直肠癌诊断模型
[0124]
参照专利文献cn114924073a公开《结直肠进展期肿瘤诊断标志物组合及其应用》中实施例16的方法步骤，区别在于：
[0125]
研究对象：本研究在取得患者同意后，在相同条件下收集了25例结直肠癌患者肿瘤病灶区组织和25例癌旁正常组织当做健康人。
[0126]
对以下48个代谢物进行定量检测，包括：1-十四酰-2-羟基卵磷脂、2-羟基马尿酸、马尿酸、3-(3-羟基苯基)丙酸、对乙酰氨基酚、异丙酚葡糖苷酸、3-羟基马尿酸、苯基乙酰谷氨酰胺、3-吲哚丙酸、羟基癸酸、熊去氧胆酸、dl-2-氨基辛酸、3β-熊脱氧胆酸、3-羟基丁酸、去氧胆酸、鹅去氧胆酸、12-羟基二十碳四烯酸、1,7-二甲基黄嘌呤、20羧基花生四烯酸、2-氮己环酮、甘氨石胆酸、7-甲基黄嘌呤、胆酸、s-(5'-腺苷)-l-高半胱氨酸、十六碳二酸、可可碱、假尿苷、胡椒碱、1-甲基黄嘌呤、反式-3-羟基可替宁、3-磺基可可醇、5-甲基糠醛、4,6-二氨基-2-羟基-5-嘧啶磺酸、2,4-二羟基苯甲酸、(2e，4e，8e)-十四烷-2,4,8-三烯酸、3-酮-4-氨基苯甲酸酯、环(异亮氨酸脯氨酰)、n-十六烷基二乙醇胺、(五十)-苏伯尔肉碱、4-羟基马尿酸、2-[2-[3-(2-羧乙基)-1h-吲哚-2-基]乙基]-1h-吲哚-3-羧酸、2-甲基三癸二酸、六酰基谷氨酰胺、n-乙酰-l-丝氨酸-l-亮氨酸、n-乙酰基甘氨酰丙氨酸、溶血磷脂酰胆碱(20:2)、对甲酚葡糖苷酸、7-去氧胆酸。组织中单个代谢标志物用于结直肠癌诊断的结果见表11：
[0127]
表11组织中单个代谢标志物用于结直肠癌诊断的auc值
[0128]
[0129][0130]
这48个差异代谢物单个用于诊断区分结直肠癌患者的能力较强；且各种代谢物组合用于诊断时，auc进一步提高，其诊断区分结直肠癌患者的auc值为0.785～0.999。
[0131]
实施例17：使用粪便样本构建结直肠癌诊断模型
[0132]
参照专利文献cn114924073a公开《结直肠进展期肿瘤诊断标志物组合及其应用》中实施例17的方法步骤，区别在于：
[0133]
研究对象：本研究在取得患者同意后，在相同条件下收集110例结直肠癌患者和110例健康人粪便样本，-80℃冰箱中长期保存。
[0134]
对以下48个代谢物进行定量检测，包括：1-十四酰-2-羟基卵磷脂、2-羟基马尿酸、马尿酸、3-(3-羟基苯基)丙酸、对乙酰氨基酚、异丙酚葡糖苷酸、3-羟基马尿酸、苯基乙酰谷氨酰胺、3-吲哚丙酸、羟基癸酸、熊去氧胆酸、dl-2-氨基辛酸、3β-熊脱氧胆酸、3-羟基丁酸、去氧胆酸、鹅去氧胆酸、12-羟基二十碳四烯酸、1,7-二甲基黄嘌呤、20羧基花生四烯酸、2-氮己环酮、甘氨石胆酸、7-甲基黄嘌呤、胆酸、s-(5'-腺苷)-l-高半胱氨酸、十六碳二酸、可可碱、假尿苷、胡椒碱、1-甲基黄嘌呤、反式-3-羟基可替宁、3-磺基可可醇、5-甲基糠醛、4,6-二氨基-2-羟基-5-嘧啶磺酸、2,4-二羟基苯甲酸、(2e，4e，8e)-十四烷-2,4,8-三烯酸、3-酮-4-氨基苯甲酸酯、环(异亮氨酸脯氨酰)、n-十六烷基二乙醇胺、(五十)-苏伯尔肉碱、4-羟基马尿酸、2-[2-[3-(2-羧乙基)-1h-吲哚-2-基]乙基]-1h-吲哚-3-羧酸、2-甲基三癸二酸、六酰基谷氨酰胺、n-乙酰-l-丝氨酸-l-亮氨酸、n-乙酰基甘氨酰丙氨酸、溶血磷脂酰胆碱(20:2)、对甲酚葡糖苷酸、7-去氧胆酸。粪便中单个代谢标志物用于结直肠癌诊断的结果见表12：
[0135]
表12粪便中单个代谢标志物用于结直肠癌诊断的auc值
[0136]
[0137][0138]
这48个差异代谢物单个用于诊断区分结直肠癌患者的能力较强；且各种代谢物组合用于诊断时，auc进一步提高，其诊断区分结直肠癌的auc值为0.751～0.991。
[0139]
在实际应用中，可以按照本发明建模方法选取更多的样本进行建模，增加模型的准确度。
[0140]
实施例18检测试剂盒
[0141]
本实施例提供一种基于上述代谢标志物制备的检测试剂盒，该检测试剂盒包括如下成分：
[0142]
代谢标志物的标准品：六碳二酸、3β-熊脱氧胆酸、1-十四酰-2-羟基卵磷脂、2-氮己环酮、3-羟基丁酸、2-羟基癸酸、马尿酸、dl-2-氨基辛酸、12-羟基二十碳四烯酸、熊去氧胆酸、去氧胆酸、胆酸、甘氨石胆酸、20羧基花生四烯酸、胡椒碱、1-甲基黄嘌呤、1,7-二甲基黄嘌呤、s-(5'-腺苷)-l-高半胱氨酸、7-甲基黄嘌呤、可可碱、假尿苷、反式-3-羟基可替宁、异丙酚葡糖苷酸、对乙酰氨基酚、2-羟基马尿酸、3-羟基马尿酸、3-(3-羟基苯基)丙酸、3-吲哚丙酸、鹅去氧胆酸、苯基乙酰谷氨酰胺、3-磺基可可醇、5-甲基糠醛、4,6-二氨基-2-羟基-5-嘧啶磺酸、2,4-二羟基苯甲酸、(2e，4e，8e)-十四烷-2,4,8-三烯酸、3-酮-4-氨基苯甲酸酯、环(异亮氨酸脯氨酰)、n-十六烷基二乙醇胺、(五十)-苏伯尔肉碱、4-羟基马尿酸、2-[2-[3-(2-羧乙基)-1h-吲哚-2-基]乙基]-1h-吲哚-3-羧酸、2-甲基三癸二酸、六酰基谷氨酰胺、n-乙酰-l-丝氨酸-l-亮氨酸、n-乙酰基甘氨酰丙氨酸、溶血磷脂酰胆碱(20:2)、对甲酚葡糖苷酸以及7-去氧胆酸，各标准品分别封装或标准品混合溶液封装。
[0143]
血浆样本代谢物提取剂：100％纯甲醇和50％乙腈水溶液用于样品制备；50％乙腈水溶液可以用作溶解标准品的溶剂。
[0144]
内标物：[2h3]-l-肉碱-d3盐酸盐，4-氟-l-2-苯基甘氨酸，l-苯基丙氨酸，[2h5]-马尿酸，[2h5]-犬尿酸，[2h5]-苯氧基乙酸。
[0145]
当然，设计检测试剂盒时，并不需要完全包含上述48个标志物的标准品，可以仅使用其中几个，还可以使用其中几个或全部与其他标志物进行组合。这些标准品可以单独封装，也可以制成混合物封装。
[0146]
采用本实施例提供的检测试剂盒，能够拥有对结直肠癌进展期腺瘤和结直肠癌进行风险评估。
[0147]
在此有必要指出的是，以上实施例仅限于对本发明的技术方案做进一步的阐述和说明，并不是对本发明的技术方案的进一步的限制，本发明的方法仅为较佳的实施方案，并非用于限定本发明的保护范围。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

技术特征：
1.一种结直肠进展期腺瘤、结直肠癌风险评估代谢标志物组合，其特征在于，所述代谢标志物组合至少包括：a组分：选自十六碳二酸、3β-熊脱氧胆酸、1-十四酰-2-羟基卵磷脂、2-氮己环酮、3-磺基可可醇、5-甲基糠醛、4,6-二氨基-2-羟基-5-嘧啶磺酸、3-羟基马尿酸、2,4-二羟基苯甲酸,(2e，4e，8e)-十四烷-2,4,8-三烯酸、3-(3-羟基苯基)丙酸、3-酮-4-氨基苯甲酸酯、环(异亮氨酸脯氨酰)、n-十六烷基二乙醇胺、(五十)-苏伯尔肉碱、4-羟基马尿酸、异丙酚葡糖苷酸,2-[2-[3-(2-羧乙基)-1h-吲哚-2-基]乙基]-1h-吲哚-3-羧酸、2-甲基三癸二酸、六酰基谷氨酰胺、3-吲哚丙酸中的至少一种或者多种；以及b组分：选自3-羟基丁酸、2-羟基癸酸、马尿酸、dl-2-氨基辛酸、、2-羟基马尿酸、苯基乙酰谷氨酰胺中的至少一种。2.根据权利要求1所述的用于结直肠进展期腺瘤、结直肠癌风险评估的代谢标志物组合，其特征在于，所述代谢标志物组合至少选自：a组分：选自十六碳二酸、3β-熊脱氧胆酸、1-十四酰-2-羟基卵磷脂、2-氮己环酮的组合；以及b组分：选自3-羟基丁酸、2-羟基癸酸、马尿酸、dl-2-氨基辛酸中的至少一种。3.根据权利要求1或2所述结直肠进展期腺瘤、结直肠癌风险评估的代谢标志物组合，其特征在于，所述代谢标志物组合还包括c组分，所述c组分选自12-羟基二十碳四烯酸、熊去氧胆酸、去氧胆酸、胆酸、甘氨石胆酸、20羧基花生四烯酸、胡椒碱、1-甲基黄嘌呤、1,7-二甲基黄嘌呤、s-(5'-腺苷)-l-高半胱氨酸、7-甲基黄嘌呤、可可碱、假尿苷、反式-3-羟基可替宁、对乙酰氨基酚、鹅去氧胆酸、n-乙酰-l-丝氨酸-l-亮氨酸、n-乙酰基甘氨酰丙氨酸、溶血磷脂酰胆碱(20:2)、对甲酚葡糖苷酸、7-去氧胆酸中的至少一种。4.根据权利要求3所述结直肠进展期腺瘤、结直肠癌风险评估的代谢标志物组合，其特征在于，所述代谢标志物组合中的c组分选自熊去氧胆酸、去氧胆酸、甘氨石胆酸、20羧基花生四烯酸、胡椒碱、1-甲基黄嘌呤、7-甲基黄嘌呤、假尿苷、反式-3-羟基可替宁的至少一种；或者所述代谢标志物组合中的c组分选自12-羟基二十碳四烯酸、鹅去氧胆酸、胆酸、1,7-二甲基黄嘌呤、s-(5'-腺苷)-l-高半胱氨酸、可可碱中的至少一种。5.根据权利要求3所述结直肠进展期腺瘤、结直肠癌风险评估的代谢标志物组合，其特征在于，用于区分结直肠癌和非进展期肿瘤的代谢标志物组合为：a组分：选自1-十四酰-2-羟基卵磷脂、3β-熊脱氧胆酸、2-氮己环酮、十六碳二酸的组合；b组分：选自马尿酸、2-羟基癸酸、dl-2-氨基辛酸的组合；c组分：选自胆酸、s-(5'-腺苷)-l-高半胱氨酸、胡椒碱和反式-3-羟基可替宁中的至少一种。6.根据权利要求3所述结直肠进展期腺瘤、结直肠癌风险评估的代谢标志物组合，其特征在于，用于区分进展期腺瘤和非进展期肿瘤的代谢标志物组合至少选自：a组分：选自1-十四酰-2-羟基卵磷脂；b组分：选自马尿酸、dl-2-氨基辛酸的组合；以及c组分：选自12-羟基二十碳四烯酸、去氧胆酸、7-甲基黄嘌呤、s-(5'-腺苷)-l-高半胱
氨酸和胡椒碱中的至少一种。7.根据权利要求3所述的结直肠进展期腺瘤、结直肠癌风险评估的代谢标志物组合，其特征在于，用于区分进展期腺瘤和健康人的代谢标志物组合至少选自：a组分：选自1-十四酰-2-羟基卵磷脂；b组分：选自马尿酸、dl-2-氨基辛酸的组合；以及c组分：选自12-羟基二十碳四烯酸、去氧胆酸、鹅去氧胆酸、7-甲基黄嘌呤、胆酸、s-(5'-腺苷)-l-高半胱氨酸、胡椒碱和1-甲基黄嘌呤中的至少一种。8.根据权利要求3所述的结直肠进展期腺瘤、结直肠癌风险评估的代谢标志物组合，其特征在于，用于区分进展期肿瘤和非进展期肿瘤的代谢标志物至少选自：a组分：选自1-十四酰-2-羟基卵磷脂、十六碳二酸、3β-熊脱氧胆酸、2-氮己环酮的组合；b组分：选自马尿酸、2-羟基癸酸、dl-2-氨基辛酸、3-羟基丁酸的至少一种；以及c组分：选自12-羟基二十碳四烯酸、20羧基花生四烯酸、熊去氧胆酸、甘氨石胆酸、7-甲基黄嘌呤、s-(5'-腺苷)-l-高半胱氨酸、胡椒碱、1-甲基黄嘌呤和反式-3-羟基可替宁中的至少一种。9.根据权利要求3所述结直肠进展期腺瘤、结直肠癌风险评估的代谢标志物组合，其特征在于，用于区分进展期肿瘤和健康人的代谢标志物至少选自：a组分：选自1-十四酰-2-羟基卵磷脂、十六碳二酸中的至少一种；b组分：选自马尿酸、dl-2-氨基辛酸、3-羟基丁酸的组合；以及c组分：12-羟基二十碳四烯酸、熊去氧胆酸、7-甲基黄嘌呤、胆酸、s-(5'-腺苷)-l-高半胱氨酸和反式-3-羟基可替宁中的至少一种。10.一种试剂产品，其特征在于，包括权利要求1至9任一项所述的结直肠进展期腺瘤、结直肠癌风险评估的代谢标志物组合。

技术总结
本发明提供一种结直肠进展期腺瘤、结直肠癌风险评估代谢标志物组合及其应用。该代谢标志物组合选自十六碳二酸、3β-熊脱氧胆酸、1-十四酰-2-羟基卵磷脂、2-氮己环酮、3-羟基丁酸、2-羟基癸酸、马尿酸、DL-2-氨基辛酸等。本发明筛选的代谢标志物组合能够对结直肠癌风险进行有效评估，具有灵敏度和特异性高的特点，对进展期腺瘤和早期结直肠癌灵敏度也高，可用于结直肠癌的早期发现，有利于患者的早诊早治，提高临床治疗效果。提高临床治疗效果。


技术研发人员：唐堂 张明亮 张卫琴 彭浩文
受保护的技术使用者：武汉迈特维尔医学科技有限公司
技术研发日：2023.03.02
技术公布日：2023/7/19