一种利于内皮化的可吸收血管支架覆膜及其制备方法

1.本发明属于生物医药材料和血管支架覆膜制备技术领域，具体涉及一种利于内皮化的可吸收血管支架覆膜及其制备方法。


背景技术：

2.心脑血管疾病的发病率、患病率和死亡率呈逐年升高的趋势，并且呈现年轻化的趋势。动脉粥样硬化是导致心脑血管疾病的主要原因，动脉粥样硬化是由于内膜受激如脂质或糖质集聚等导致动脉壁增厚变硬和狭窄，最终恶化为包括冠心病、脑梗死和外周血管疾病在内的闭塞性动脉疾病。目前，临床上越来越多采用覆膜支架来达到治疗血管阻塞的目的，但是术后中、远期仍易发生支架移位、内漏、血栓和再狭窄等并发症，导致较高比例介入不理想，需要进行术后再干预，严重甚至会导致死亡，这些都是亟待解决的临床问题。
3.目前，商用覆膜支架覆膜材料主要是涤纶和聚四氟乙烯，这两种合成材料虽具有优异的力学性能，但存在顺应性差、生物惰性以及不降解等缺陷。并且，上述两种合成材料植入体内后难以实现内皮化，可能会诱发血栓继发、再狭窄及并发症。此外，由于上述两种合成材料本身难以降解，需要通过长期服药来抑制免疫排异反应，这对发病率越来越高的中青年人群而言是一种巨大的临床挑战，其需要通过再次或多次手术来解决商用覆膜支架覆膜材料带来的缺陷。
4.这是诱发术后血栓继发、再狭窄及并发症的根本原因。并且这对于发病率越来越高的中青年人群而言面临巨大的临床挑战，需要再次或多次手术。因此，针对现有临床应用瓶颈和日益年轻化的发病现象，有必要研发一种可吸收的血管支架覆膜以解决上述问题。


技术实现要素：

5.针对现有技术中存在不足，本发明提供了一种利于内皮化的可吸收血管支架覆膜及其制备方法；所述利于内皮化的可吸收血管支架覆膜基于改性丝素蛋白和家蚕生丝制备得到，所述利于内皮化的可吸收血管支架覆膜内表面具有模仿血管基底膜的纳米拓扑结构和类基质成分，外表面具有的微观拓扑结构；所述利于内皮化的可吸收血管支架覆膜具有良好的力学性能和优异的促内皮细胞活性，能够用于生产快速形成新生内皮层，维持血流稳定，抑制血栓和炎症形成的血管支架。
6.本发明首先提供了一种利于内皮化的可吸收血管支架覆膜，所述可吸收血管支架覆膜以处理后的家蚕生丝编织的管状织物为芯层，改性丝素纳米纤维为内层和外层；所述可吸收血管支架覆膜内表面具有模仿血管基底膜的纳米拓扑结构和类基质成分，外表面具有的微观拓扑结构。
7.本发明还提供了上述利于内皮化的可吸收血管支架覆膜的制备方法，具体包括如下步骤：
8.(1)将丝素蛋白水溶液与亲水的柔性的交联剂混合，得到改性丝素蛋白溶液；然后以改性丝素蛋白为电纺液，通过静电纺丝在辅助棒上纺制丝素纳米纤维，形成可吸收血管
支架覆膜的内层；
9.(2)将家蚕生丝处理后的丝线通过编织技术在利于内皮化的可吸收血管支架覆膜的内层的基础上编织30～150
°
编织角、1～20根/cm轴向编织密度的管状织物；所述丝线为基于家蚕生丝采用并合、加捻、脱胶工序处理得到的脱胶后丝线和/或对脱胶后的丝线采用
60
coγ射线辐照处理得到的辐照后丝线；
10.(3)将得到的管状织物以旋转-浸渍的方式置于改性丝素蛋白溶液中10～60秒，然后取出并置于20～50℃环境下旋转10～30分钟，其记为一次，将上述步骤重复数次，形成可吸收血管支架覆膜的芯层；
11.(4)将步骤(1)中改性丝素蛋白溶液为电纺液，通过静电纺丝在可吸收血管支架覆膜的芯层表面电纺丝素纳米纤维，形成可吸收血管支架覆膜，将所述可吸收血管支架覆膜浸泡于无菌去离子水中洗涤，去除未反应的交联剂和丝素分子，得到所述利于内皮化的可吸收血管支架覆膜。
12.优选地，步骤(1)中，所述丝素蛋白水溶液的获得方法为：将家蚕生丝采用沸水、碳酸钠、碳酸氢钠或生物酶中的任意一种进行脱胶，得到脱胶后的丝素纤维；将脱胶后的丝素纤维完全溶解于溴化锂溶液中得到丝素溶解液，然后将丝素溶解液灌注于透析袋内采用去离子水透析，过滤，蒸发得到丝素蛋白水溶液。
13.其中，所述溴化锂溶液的浓度为9.3m；所述透析袋为半透膜，截留分子量为3～50kda；所述透析时间为3天；得到的丝素蛋白水溶液浓度为10～200mg/ml。
14.优选地，步骤(1)中，所述丝素蛋白水溶液与交联剂的质量比为1.0:(0.3～1.0)；所述改性丝素蛋白溶液中丝素蛋白浓度为20～180mg/ml。
15.优选地，步骤(1)中，所述交联剂为聚乙二醇二缩水甘油醚。
16.优选地，步骤(2)中，所述辅助棒优选为不锈钢棒。
17.优选地，步骤(1)中，所述辅助棒的旋转速度为100～3000rpm，所述辅助棒直径为1～30mm，所述丝素纳米纤维的平均直径为100～5000nm，所述丝素纳米纤维的平均孔隙率为35～90％，所述丝素纳米纤维的平均取向度为30～90％。
18.优选地，步骤(2)中，所述脱胶后丝线的获得方法为：
19.将纤度为20/22d的家蚕生丝以2～10股的进行并合，然后以s/z向的捻向加捻，加捻捻度为100～2000捻/米，然后采用沸水、碳酸钠、碳酸氢钠或生物酶中的任意一种进行脱胶，得到脱胶后丝线；
20.所述辐照后丝线的获得方法为：
21.将脱胶后丝线采用
60
coγ射线辐照处理得到辐照后丝线，所述
60
coγ射线辐照剂量为25～300kgy。
22.优选地，步骤(2)中，所述丝线为脱胶后丝线和辐照后丝线以6:0～0:6的根数比均匀排列。
23.优选地，步骤(3)中，所述旋转-浸渍的旋转速度为10～100rpm，旋转方向为沿辅助棒圆周方向，浸渍的面积占辅助棒侧面积的10～90％；
24.所述数次为2～10次。
25.优选地，步骤(4)中，所述洗涤为：将血管支架覆膜浸泡于4～37℃无菌去离子水中1～3天。
26.与现有技术相比，本发明的有益效果在于：
27.本发明所采用的丝素蛋白是来源于动物的天然蛋白，由20种氨基酸组成，具有与细胞外基质相同的成分。丝素蛋白构建的人工血管能够支持血管细胞的粘附、生长和增殖，植入体内后能够诱导内皮化，保持血流通畅，并且能够原位诱导血管组织的再生，在血管组织工程材料方面受到极大的关注，基于良好的血液相容性，可以用于利于内皮化的可吸收血管支架覆膜的制备。
28.本发明中制备的利于内皮化的可吸收血管支架覆膜具有超薄均匀的厚度、优异的促内皮化功能、可吸收性以及覆膜的稳固性，其可以从根本上解决临床上应用的涤纶或聚四氟乙烯血管支架无法内皮化、不降解和术后仍易产生血栓以及滑移的难题。本发明所述利于内皮化的可吸收血管支架覆膜内表面具有模仿血管基底膜的纳米拓扑结构和类基质成分，能够诱导内皮(祖)细胞归巢和增殖，并且丝素蛋白具有生物可吸收的性能，植入后多级(丝素蛋白电纺丝、自组装膜层、辐照丝线、未辐照丝线)梯度降解吸收的同时快速形成新生内皮组织，有效抑制血栓和炎症的形成，维持血液凝血平衡，保持血管的长期通畅。所述可吸收血管支架覆膜外表面具有的微观拓扑结构利于覆膜与血管内壁的紧密贴合不滑移，其内表面具有的微观拓扑结构还利于维持血流稳定，避免血流湍流的形成。
29.本发明所述利于内皮化的可吸收血管支架覆膜中，丝素蛋白大分子链具有丰富的表面电荷特性和化学反应位点、以及通过同轴静电纺技术负载各种生物活性因子，如抗炎/抗凝药物，生长因子等，随着覆膜的梯度降解而缓释，进一步指导细胞行为，促进内皮组织再生。
30.本发明所述利于内皮化的可吸收血管支架覆膜植入后多级(丝素蛋白电纺丝、自组装膜层、辐照丝线、未辐照丝线)梯度降解可以满足不同年龄、体质、症状等特征的个性化人群的需求，调控内皮化和血流稳态，彻底解决适合于不同人群术后的血栓继发和再狭窄的发生。
具体实施方式
31.下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明，但本发明的保护范围并不限于此。以下实施例中，所述辅助棒选用不锈钢棒进行说明，但是辅助棒可为任意材质。在以下的实施例中，未详细描述的各种过程和方法均是本领域中公知的常规方法。所用试剂的来源、商品名以及有必要列出其组成成分者，均在首次出现时表明，其后所用相同试剂无特殊说明，均与首次表明的来源相同；所涉及的试剂、材料等无特殊说明，均为商业用途获。
32.实施例1：
33.(1)将家蚕生丝按1:50g/ml的浴比置于质量百分比为0.1％的碳酸钠水溶液中，在98～100℃温度下处理三次，每次30分钟，然后用去离子水充分清洗，置于60℃烘箱干燥12小时，得到脱胶后的丝素纤维。
34.称取脱胶后的丝素纤维按1:10g/ml的浴比在65
±
5℃水浴环境下完全溶解于9.3m的溴化锂溶液中，得到丝素溶解液。将丝素溶解液灌注于截留分子量为14kda的透析袋内，采用去离子水透析3天得到纯化后的丝素蛋白水溶液。将纯化后的丝素蛋白水溶液浓缩、调整至所需浓度。
35.将丝素蛋白水溶液与亲水的柔性的交联剂混合，得到改性丝素蛋白溶液，丝素蛋
白与交联剂质量比为1.0:0.5，所述交联剂为聚乙二醇二缩水甘油醚。
36.以丝素蛋白浓度为40mg/ml的改性丝素蛋白溶液作为电纺液，通过静电纺丝在旋转速度为200rpm的不锈钢棒(直径为10mm)上纺制丝素纳米纤维，形成可吸收血管支架覆膜的内层。
37.(2)将家蚕生丝采用并合、加捻、脱胶工序处理，得到脱胶后的加捻丝线。其中所述家蚕生丝纤度为20/22d，所述并合的股数为2股，所述加捻的捻向为s向，加捻捻度为500捻/米，所述脱胶工艺同步骤(1)，备用。
38.然后将脱胶后的加捻丝线采用
60
coγ射线辐照处理，所述
60
coγ射线辐照剂量为100kgy，得到辐照处理后的丝线，备用。
39.以上述脱胶后丝线和上述辐照处理后丝线的杂化组合作为编织管状织物的丝线原料，其中，所述杂化组合为脱胶后的丝线和辐照处理后的丝线以1:1的根数比均匀排列。将丝线采用编织技术在作为可吸收血管支架覆膜内层的外表面编织成120
°
编织角、4根/cm轴向编织密度的管状织物。
40.(3)将管状织物以旋转-浸渍的方式置于丝素蛋白浓度为60mg/ml的改性丝素蛋白溶液15秒，取出后置于35℃环境下保持上述旋转速度继续旋转15分钟，控制膜表面保持润湿，重复旋转复合改性丝素蛋白步骤6次，形成可吸收血管支架覆膜的芯层。其中，所述旋转-浸渍的旋转速度为60rpm，旋转方向为沿不锈钢棒圆周方向，浸渍的面积占不锈钢棒侧面积的50％。
41.(4)同步骤(1)中所述的方法在血管支架覆膜的芯层表面电纺丝素纳米纤维，构建血管支架覆膜的外层，将血管支架覆膜浸泡于37℃无菌去离子水中1天，去除未反应的交联剂和丝素分子，得到调控内皮细胞生长活性的利于内皮化的可吸收血管支架覆膜。
42.经检测，本发明的可吸收血管支架覆膜具有卓越的力学性能和促内皮细胞活性，丝素纳米纤维平均直径为150
±
50nm，孔隙率为80
±
10％，纤维取向度为25
±
10％。体内植入1个月后，本发明的可吸收血管支架覆膜内皮化程度相比对比例1中的可吸收血管支架覆膜增加了45％，失重率增加了37％。
43.实施例2：
44.(1)将家蚕生丝按1:50g/ml的浴比置于质量百分比为0.1％的碳酸钠水溶液中，在98～100℃温度下处理三次，每次30分钟，然后用去离子水充分清洗，置于60℃烘箱干燥12小时，得到脱胶后的丝素纤维。
45.称取脱胶后的丝素纤维按1:10g/ml的浴比在65
±
5℃水浴环境下完全溶解于9.3m的溴化锂溶液中，得到丝素溶解液。将丝素溶解液灌注于截留分子量为14kda的透析袋内，采用去离子水透析3天得到纯化后的丝素蛋白水溶液。将纯化后的丝素蛋白水溶液浓缩、调整至所需浓度。
46.将丝素蛋白水溶液与亲水的柔性的交联剂混合，得到改性丝素蛋白溶液，丝素蛋白与交联剂质量比为1.0:0.5，所述交联剂为聚乙二醇二缩水甘油醚。
47.以丝素蛋白浓度为160mg/ml的改性丝素蛋白溶液作为电纺液，通过静电纺丝在旋转速度为200rpm的不锈钢棒(直径为10mm)上纺制丝素纳米纤维，形成可吸收血管支架覆膜的内层。
48.(2)将家蚕生丝采用并合、加捻、脱胶工序处理，得到脱胶后的加捻丝线。其中所述
家蚕生丝纤度为20/22d，所述并合的股数为2股，所述加捻的捻向为s向，加捻捻度为500捻/米，所述脱胶工艺同步骤(1)，备用。
49.然后将脱胶后的加捻丝线采用
60
coγ射线辐照处理，所述
60
coγ射线辐照剂量为100kgy，得到辐照处理后的丝线，备用。
50.以上述脱胶后丝线和上述辐照处理后丝线的杂化组合作为编织管状织物的丝线原料，其中，所述杂化组合为脱胶后的丝线和辐照处理后的丝线以1:1的根数比均匀排列。将丝线采用编织技术在作为可吸收血管支架覆膜内层的外表面编织成120
°
编织角、4根/cm轴向编织密度的管状织物。
51.(3)将管状织物以旋转-浸渍的方式置于丝素蛋白浓度为60mg/ml的改性丝素蛋白溶液15秒，取出后置于35℃环境下保持上述旋转速度继续旋转15分钟，控制膜表面保持润湿，重复旋转复合改性丝素蛋白步骤6次，形成可吸收血管支架覆膜的芯层。其中，所述旋转-浸渍的旋转速度为60rpm，旋转方向为沿不锈钢棒圆周方向，浸渍的面积占不锈钢棒侧面积的50％。
52.(4)同步骤(1)中所述的方法在血管支架覆膜的芯层表面电纺丝素纳米纤维，构建血管支架覆膜的外层，将血管支架覆膜浸泡于37℃无菌去离子水中1天，去除未反应的交联剂和丝素分子，得到调控内皮细胞生长活性的利于内皮化的可吸收血管支架覆膜。
53.经检测，本发明的可吸收血管支架覆膜具有卓越的力学性能和促内皮细胞活性，丝素纳米纤维平均直径为700
±
100nm，孔隙率为55
±
10％，纤维取向度为25
±
10％。体内植入1个月后，本发明的可吸收血管支架覆膜内皮化程度相比对比例1中的可吸收血管支架覆膜增加了58％。
54.实施例3：
55.(1)将家蚕生丝按1:50g/ml的浴比置于质量百分比为0.1％的碳酸钠水溶液中，在98～100℃温度下处理三次，每次30分钟，然后用去离子水充分清洗，置于60℃烘箱干燥12小时，得到脱胶后的丝素纤维。
56.称取脱胶后的丝素纤维按1:10g/ml的浴比在65
±
5℃水浴环境下完全溶解于9.3m的溴化锂溶液中，得到丝素溶解液。将丝素溶解液灌注于截留分子量为14kda的透析袋内，采用去离子水透析3天得到纯化后的丝素蛋白水溶液。将纯化后的丝素蛋白水溶液浓缩、调整至所需浓度。
57.将丝素蛋白水溶液与亲水的柔性的交联剂混合，得到改性丝素蛋白溶液，丝素蛋白与交联剂质量比为1.0:0.5，所述交联剂为聚乙二醇二缩水甘油醚。
58.以丝素蛋白浓度为160mg/ml的改性丝素蛋白溶液作为电纺液，通过静电纺丝在旋转速度为3000rpm的不锈钢棒(直径为10mm)上纺制丝素纳米纤维，形成可吸收血管支架覆膜的内层。
59.(2)将家蚕生丝采用并合、加捻、脱胶工序处理，得到脱胶后的加捻丝线。其中所述家蚕生丝纤度为20/22d，所述并合的股数为2股，所述加捻的捻向为s向，加捻捻度为500捻/米，所述脱胶工艺同步骤(1)，备用。
60.然后将脱胶后的加捻丝线采用
60
coγ射线辐照处理，所述
60
coγ射线辐照剂量为100kgy，得到辐照处理后的丝线，备用。
61.以上述脱胶后丝线和上述辐照处理后丝线的杂化组合作为编织管状织物的丝线
原料，其中，所述杂化组合为脱胶后的丝线和辐照处理后的丝线以1:1的根数比均匀排列。将丝线采用编织技术在作为可吸收血管支架覆膜内层的外表面编织成120
°
编织角、4根/cm轴向编织密度的管状织物。
62.(3)将管状织物以旋转-浸渍的方式置于丝素蛋白浓度为60mg/ml的改性丝素蛋白溶液15秒，取出后置于35℃环境下保持上述旋转速度继续旋转15分钟，控制膜表面保持润湿，重复旋转复合改性丝素蛋白步骤6次，形成可吸收血管支架覆膜的芯层。其中，所述旋转-浸渍的旋转速度为60rpm，旋转方向为沿不锈钢棒圆周方向，浸渍的面积占不锈钢棒侧面积的50％。
63.(4)同步骤(1)中所述的方法在血管支架覆膜的芯层表面电纺丝素纳米纤维，构建血管支架覆膜的外层，将血管支架覆膜浸泡于37℃无菌去离子水中1天，去除未反应的交联剂和丝素分子，得到调控内皮细胞生长活性的利于内皮化的可吸收血管支架覆膜。
64.经检测，本发明的可吸收血管支架覆膜具有卓越的力学性能和促内皮细胞活性，丝素纳米纤维平均直径为650
±
100nm，孔隙率为50
±
10％，纤维取向度为75
±
10％。体内植入1个月后，本发明的可吸收血管支架覆膜内皮化程度相比对比例1中的可吸收血管支架覆膜增加了43％。
65.实施例4：
66.(1)将家蚕生丝按1:50g/ml的浴比置于质量百分比为0.1％的碳酸钠水溶液中，在98～100℃温度下处理三次，每次30分钟，然后用去离子水充分清洗，置于60℃烘箱干燥12小时，得到脱胶后的丝素纤维。
67.称取脱胶后的丝素纤维按1:10g/ml的浴比在65
±
5℃水浴环境下完全溶解于9.3m的溴化锂溶液中，得到丝素溶解液。将丝素溶解液灌注于截留分子量为14kda的透析袋内，采用去离子水透析3天得到纯化后的丝素蛋白水溶液。将纯化后的丝素蛋白水溶液浓缩、调整至所需浓度。
68.将丝素蛋白水溶液与亲水的柔性的交联剂混合，得到改性丝素蛋白溶液，丝素蛋白与交联剂质量比为1.0:0.5，所述交联剂为聚乙二醇二缩水甘油醚。
69.以丝素蛋白浓度为160mg/ml的改性丝素蛋白溶液作为电纺液，通过静电纺丝在旋转速度为200rpm的不锈钢棒(直径为1～30mm)上纺制丝素纳米纤维，形成可吸收血管支架覆膜的内层。
70.(2)将家蚕生丝采用并合、加捻、脱胶工序处理，得到脱胶后的加捻丝线。其中所述家蚕生丝纤度为20/22d，所述并合的股数为2股，所述加捻的捻向为s向，加捻捻度为500捻/米，所述脱胶工艺同步骤(1)，备用。
71.然后将脱胶后的加捻丝线采用
60
coγ射线辐照处理，所述
60
coγ射线辐照剂量为100kgy，得到辐照处理后的丝线，备用。
72.以上述辐照处理后丝线为编织管状织物的丝线原料，将丝线采用编织技术在作为可吸收血管支架覆膜内层的外表面编织成120
°
编织角、4根/cm轴向编织密度的管状织物。
73.(3)将管状织物以旋转-浸渍的方式置于丝素蛋白浓度为60mg/ml的改性丝素蛋白溶液15秒，取出后置于35℃环境下保持上述旋转速度继续旋转15分钟，控制膜表面保持润湿，重复旋转复合改性丝素蛋白步骤6次，形成可吸收血管支架覆膜的芯层。其中，所述旋转-浸渍的旋转速度为60rpm，旋转方向为沿不锈钢棒圆周方向，浸渍的面积占不锈钢棒侧
面积的50％。
74.(4)同步骤(1)中所述的方法在血管支架覆膜的芯层表面电纺丝素纳米纤维，构建血管支架覆膜的外层，将血管支架覆膜浸泡于37℃无菌去离子水中1天，去除未反应的交联剂和丝素分子，得到调控内皮细胞生长活性的利于内皮化的可吸收血管支架覆膜。
75.经检测，本发明的可吸收血管支架覆膜具有卓越的力学性能和促内皮细胞活性，丝素纳米纤维平均直径为700
±
100nm，孔隙率为55
±
10％，纤维取向度为25
±
10％％。体内植入1个月后，本发明的可吸收血管支架覆膜降解速度明显加快，失重率相比对比例1增加了60％。对比例1：
76.(1)将家蚕生丝按1:50g/ml的浴比置于质量百分比为0.1％的碳酸钠水溶液中，在98～100℃温度下处理三次，每次30分钟，然后用去离子水充分清洗，置于60℃烘箱干燥12小时，得到脱胶后的丝素纤维。
77.称取脱胶后的丝素纤维按1:10g/ml的浴比在65
±
5℃水浴环境下完全溶解于9.3m的溴化锂溶液中，得到丝素溶解液。将丝素溶解液灌注于截留分子量为14kda的透析袋内，采用去离子水透析3天得到纯化后的丝素蛋白水溶液。将纯化后的丝素蛋白水溶液浓缩、调整至所需浓度。
78.将丝素蛋白水溶液与亲水的柔性的交联剂混合，得到改性丝素蛋白溶液，丝素蛋白与交联剂质量比为1.0:0.5，所述交联剂为聚乙二醇二缩水甘油醚。
79.(2)将家蚕生丝采用并合、加捻、脱胶工序处理，得到脱胶后的加捻丝线。其中所述家蚕生丝纤度为20/22d，所述并合的股数为2股，所述加捻的捻向为s向，加捻捻度为500捻/米，所述脱胶工艺同步骤(1)。将脱胶后丝线采用编织技术在作为可吸收血管支架覆膜内层的外表面编织成120
°
编织角、4根/cm轴向编织密度的管状织物。
80.(3)将管状织物以旋转-浸渍的方式置于丝素蛋白浓度为60mg/ml的改性丝素蛋白溶液15秒，取出后置于35℃环境下保持上述旋转速度继续旋转15分钟，控制膜表面保持润湿，重复旋转复合改性丝素蛋白步骤6次，形成可吸收血管支架覆膜的芯层。其中，所述旋转-浸渍的旋转速度为60rpm，旋转方向为沿不锈钢棒圆周方向，浸渍的面积占不锈钢棒侧面积的50％。进一步将所述血管支架覆膜浸泡于37℃无菌去离子水中1天，去除未反应的交联剂和丝素分子，得到可吸收血管支架覆膜。所述可吸收血管支架覆膜厚度偏差＜10μm。
81.(4)将上述的管状织物以静止-浸渍的方式置于丝素蛋白浓度为60mg/ml的改性丝素蛋白溶液15秒，浸渍的面积占不锈钢棒侧面积的100％，取出后置于35℃环境下静止-烘干或旋转-烘干15分钟，控制所述膜表面保持润湿，重复浸渍复合改性丝素蛋白步骤6次，形成血管支架覆膜。进一步将血管支架覆膜浸泡于37℃无菌去离子水中1天，去除未反应的交联剂和丝素分子，得到可吸收血管支架覆膜。所述可吸收血管支架覆膜厚度偏差分别》50μm(静止-烘干)和》20μm(旋转-烘干)。
82.综上，本发明所述利于内皮化的可吸收血管支架覆膜具有良好的力学性能和优异的促内皮细胞活性，能够用于生产快速形成新生内皮层，维持血流稳定，抑制血栓和炎症形成的血管支架。
83.所述实施例为本发明的优选的实施方式，但本发明并不限于上述实施方式，在不背离本发明的实质内容的情况下，本领域技术人员能够做出的任何显而易见的改进、替换或变型均属于本发明的保护范围。

技术特征：
1.一种利于内皮化的可吸收血管支架覆膜，其特征在于，所述可吸收血管支架覆膜以处理后的家蚕生丝编织的管状织物为芯层，改性丝素纳米纤维为内层和外层；所述可吸收血管支架覆膜内表面具有模仿血管基底膜的纳米拓扑结构和类基质成分，外表面具有的微观拓扑结构。2.权利要求1所述的利于内皮化的可吸收血管支架覆膜的制备方法，其特征在于，包括：(1)将丝素蛋白水溶液与亲水的柔性的交联剂混合，得到改性丝素蛋白溶液；然后以改性丝素蛋白为电纺液，通过静电纺丝在辅助上纺制丝素纳米纤维，形成可吸收血管支架覆膜的内层；(2)将家蚕生丝处理后的丝线通过编织技术在利于内皮化的可吸收血管支架覆膜的内层的基础上编织30～150
°
编织角、1～20根/cm轴向编织密度的管状织物；所述丝线为基于家蚕生丝采用并合、加捻、脱胶工序处理得到的脱胶后丝线和/或对脱胶后的丝线采用
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coγ射线辐照处理得到的辐照后丝线；(3)将得到的管状织物以旋转-浸渍的方式置于改性丝素蛋白溶液中10～60秒，然后取出并置于20～50℃环境下旋转10～30分钟，其记为一次操作步骤，将上述操作步骤重复数次，形成可吸收血管支架覆膜的芯层；(4)将步骤(1)中改性丝素蛋白溶液为电纺液，通过静电纺丝在可吸收血管支架覆膜的芯层表面电纺丝素纳米纤维，形成可吸收血管支架覆膜，将所述可吸收血管支架覆膜浸泡于无菌去离子水中洗涤，去除未反应的交联剂和丝素分子，得到所述利于内皮化的可吸收血管支架覆膜。3.根据权利要求2所述的利于内皮化的可吸收血管支架覆膜的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述丝素蛋白水溶液的获得方法为：将家蚕生丝采用沸水、碳酸钠、碳酸氢钠或生物酶中的任意一种进行脱胶，得到脱胶后的丝素纤维；将脱胶后的丝素纤维完全溶解于溴化锂溶液中得到丝素溶解液，然后将丝素溶解液灌注于透析袋内采用去离子水透析，过滤，蒸发得到丝素蛋白水溶液。4.根据权利要求2所述的利于内皮化的可吸收血管支架覆膜的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述丝素蛋白水溶液与交联剂的质量比为1.0:(0.3～1.0)；所述改性丝素蛋白溶液中丝素蛋白浓度为20～180mg/ml；所述交联剂为聚乙二醇二缩水甘油醚。5.根据权利要求2所述的利于内皮化的可吸收血管支架覆膜的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述辅助棒的旋转速度为100～3000rpm，所述辅助棒直径为1～30mm，所述丝素纳米纤维的平均直径为100～5000nm，所述丝素纳米纤维的平均孔隙率为35～90％，所述丝素纳米纤维的平均取向度为30～90％。6.根据权利要求2所述的利于内皮化的可吸收血管支架覆膜的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述脱胶后丝线的获得方法为：将纤度为20/22d的家蚕生丝以2～10股的进行并合，然后以s/z向的捻向加捻，加捻捻度为100～2000捻/米，然后采用沸水、碳酸钠、碳酸氢钠或生物酶中的任意一种进行脱胶，得到脱胶后丝线；所述辐照后丝线的获得方法为：
将脱胶后丝线采用
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coγ射线辐照处理得到辐照后丝线，所述
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coγ射线辐照剂量为25～300kgy。7.根据权利要求2所述的利于内皮化的可吸收血管支架覆膜的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述丝线为脱胶后丝线和辐照后丝线以6:0～0:6的根数比均匀排列。8.根据权利要求2所述的利于内皮化的可吸收血管支架覆膜的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，所述旋转-浸渍的旋转速度为10～100rpm，旋转方向为沿辅助棒圆周方向，浸渍的面积占辅助棒侧面积的10～90％。9.根据权利要求2所述的利于内皮化的可吸收血管支架覆膜的制备方法，其特征在于，所述操作步骤重复2～10次。10.根据权利要求2所述的利于内皮化的可吸收血管支架覆膜的制备方法，其特征在于，步骤(4)中，所述洗涤为：将血管支架覆膜浸泡于4～37℃无菌去离子水中1～3天。

技术总结
本发明提供了一种利于内皮化的可吸收血管支架覆膜及其制备方法，属于生物医药材料和血管支架覆膜制备技术领域；所述利于内皮化的可吸收血管支架覆膜基于改性丝素蛋白和家蚕生丝制备得到，所述利于内皮化的可吸收血管支架覆膜内表面具有模仿血管基底膜的纳米拓扑结构和类基质成分，外表面具有的微观拓扑结构；所述利于内皮化的可吸收血管支架覆膜具有良好的力学性能和优异的促内皮细胞活性，能够用于生产快速形成新生内皮层，维持血流稳定，抑制血栓和炎症形成的血管支架。抑制血栓和炎症形成的血管支架。


技术研发人员：王建南 俞杨销 裔洪根
受保护的技术使用者：苏州大学
技术研发日：2023.03.22
技术公布日：2023/7/20